沾化冬枣过氧化氢酶(CAT)活性的研究
抗氧化酶(SOD、POD、CAT)活性测定方法

抗氧化酶(SOD、POD、CAT)活性测定方法一、超氧化物歧化酶(SOD)活性测定(氮蓝四唑光化还原法)1、试剂的配制(1)0.05mol/L磷酸缓冲液(PBS,pH7.8):A母液:0.2mol/L磷酸氢二钠溶液: 取Na2HPO4·12H2O(分子量358.14)71.7g;B母液:0.2mol/L磷酸二氢钠溶液:取NaH2PO4·2H2O(分子量156.01)31.2g。
分别用蒸馏水定容到1000ml。
0.05mol/L PBS(pH7.8)的配制:分别取A母液(Na2HPO4) 228.75ml,B母液(NaH2PO4) 21.25ml,用蒸馏水定容至1000ml。
加入10gPVP(聚乙烯吡咯烷酮)参考文献:李合生主编:植物生理生化实验原理和技术.高等教育出版社,2000:267~268。
(2)130mmol/L甲硫氨酸溶液:取1.399g Met用磷酸缓冲液(pH7.8)定容至100ml。
网上说定容到100ML我也不懂。
拜托(3)100μmol/L EDTA-Na2溶液:取0.03721g EDTA-Na2用磷酸缓冲液定容至1000ml;(4)100μM核黄素溶液:取0.0075g核黄素用蒸馏水定容至100ml,避光保存,随用随配,并稀释10倍(5)750μmol/L氮蓝四唑(NBT)溶液:称取0.06133g NBT用磷酸缓冲液定容至100ml 避光保存;酶液制备:取一定部位的植物叶片(视需要定,去叶脉)0.5g于预冷的研钵中,加2ml 磷酸缓冲液在冰浴下研磨成浆,加缓冲液使终体积为10ml。
取5ml于10000r/min下离心10min,上清液即为SOD粗提液。
提取酶液时如何保存;如果没有测完的需要放在4℃的冰箱里。
2、酶活性测定2.显色反应取试管(要求透明度好)5支,3支为样品测定管,1支为对照管,另外1支作为空白,按表39-1加入各溶液。
混匀后将空白管置暗处,其它各管于4000lx日光灯下反应20min(要求各管受光情况一致,反应室的温度高时时间可适当缩短,温度低时时间可适当延长)。
沾化冬枣过氧化氢酶(CAT)活性的研究

沾化冬枣过氧化氢酶(CAT)活性的研究
陈印平
【期刊名称】《滨州学院学报》
【年(卷),期】2007(023)003
【摘要】通过对沾化县3个样地冬枣过氧化氢酶(CAT)活性的研究发现,同株冬枣中部CAT活性高,冬枣研究所的冬枣酶活性较高,表明冬枣研究所的冬枣比马武与古城的更能适应不良环境,冬枣叶CAT活性比果实的高,分别高22.4%、38.8%、28.6%.
【总页数】3页(P51-53)
【作者】陈印平
【作者单位】滨州学院,黄河三角洲生态环境研究中心,山东滨州,256603
【正文语种】中文
【中图分类】Q946
【相关文献】
1.低温条件下柞蚕血淋巴过氧化氢酶(CAT)活性的变化 [J], 夏润玺;李健男;曹慧颖;岳冬梅
2.柞蚕血液过氧化氢酶(CAT)活性的研究 [J], 李健男;夏润玺;刘勤;曹慧颖
3.脱氧核糖核酸(DNA)对过氧化氢酶(CAT)活性的影响研究 [J], 刘润芝;印大中
4.重金属污染对黄瓜种子过氧化氢酶(CAT)活性的影响 [J], 于锡宏;陈友;马凤鸣
5.低浓度阿特拉津对鲫鱼过氧化氢酶(CAT)活性的影响 [J], 陈家长;孟顺龙;胡庚东;瞿建宏;吴伟
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cat过氧化氢酶

CAT 过氧化氢酶简介:过氧化物酶是由微生物或植物所产生的一类氧化还原酶,是以过氧化氢为电子受体催化底物氧化的酶。
它们能催化很多反应,主要存在于细胞的过氧化物酶体中,以铁卟啉为辅基,可催化过氧化氢氧化酚类和胺化合物,具有消除过氧化氢和酚类、胺类毒性的双重作用。
其最早由J. Rhodin于1954年在鼠肾小管上皮细胞中发现。
本文章主要介绍一些外界因素对CAT的酶活性影响,下面分别介绍一下从几篇论文中找到的信息。
一:硅对水稻叶片抗氧化酶活性的影响:以感白叶枯病的水稻品种日本晴(Oryza sativa L.cv .Nipponbare)为材料, 研究了硅对接种白叶枯病菌后的水稻病情指数、叶片丙二醛(MDA)和过氧化氢(H2O2)含量以及超氧化物岐化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、脂氧合酶(LOX)、过氧化物酶(POD)和抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性的影响。
结果表明, 施硅能显著降低水稻白叶枯病的病情指数, 防治效果达62.86%。
接种白叶枯病菌后48 h 内, 施硅处理的水稻植株, 叶片中丙二醛(MDA)和过氧化氢(H2O2)含量显著升高;显著提高感病植株叶片中脂氧合酶(LOX)和超氧化物歧化酶(SOD)活性; 降低过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)和抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性;促进过氧化氢(H2O2)在植物体内积累, 加强膜脂过氧化作用。
因此, 硅可通过参与植株体内代谢, 调节抗氧化系统酶活性。
二,紫外光对几种水生植物过氧化氢酶(CAT)活性的影响通过测定被照射植物分解过氧化氢后放出氧气的体积,确定植物过氧化氢酶(CAT)的活性。
结果表明,满江红,浮萍和水花生3种植物受过量紫外光不同时间照射,CAT活性都明显升高。
但活性峰值因植物不同而异,即满江红的CAT峰值出现在被照射72h后;浮萍的CAT峰值出现在被照射24h后;水花生则出现在被照射8h后。
撤除过紫外光照射后,3种植物的CAT活性逐渐降低。
过氧化氢酶活性测定实验报告

过氧化氢酶活性测定实验报告实验目的,通过测定过氧化氢酶活性,探究不同条件下过氧化氢酶的活性变化规律,为进一步研究过氧化氢酶的功能和应用提供实验数据支持。
实验原理,过氧化氢酶是一种重要的酶类,在生物体内起着重要的氧化还原作用。
本实验采用比色法测定过氧化氢酶活性,其原理是过氧化氢酶催化过氧化氢分解成水和氧气,过氧化氢酶活性与生成的氧气量成正比。
实验材料与方法,实验中所需材料包括过氧化氢酶、过氧化氢、磷酸盐缓冲液、吡啶甲酸钠盐等。
首先,按照一定比例将过氧化氢酶和过氧化氢混合,然后加入磷酸盐缓冲液和吡啶甲酸钠盐,使混合液在一定温度下进行反应。
接着,通过比色法测定生成的氧气量,进而计算出过氧化氢酶的活性。
实验结果与分析,在不同温度、pH值、底物浓度等条件下,测得过氧化氢酶的活性数据。
通过对比分析不同条件下的活性数据,发现过氧化氢酶在不同条件下呈现出不同的活性变化规律。
在温度较低时,过氧化氢酶活性较低;在酸性环境下,过氧化氢酶活性受到抑制;随着底物浓度的增加,过氧化氢酶活性呈现出逐渐增加的趋势。
结论与讨论,通过本实验,我们得出了过氧化氢酶活性与温度、pH值、底物浓度等因素之间的关系。
这些结果对于深入研究过氧化氢酶的功能机制,以及在生物医学、生物工程等领域的应用具有一定的指导意义。
同时,我们也发现过氧化氢酶在不同条件下表现出不同的活性变化规律,这为进一步探究过氧化氢酶的调控机制提供了重要的实验数据支持。
综上所述,本实验通过测定过氧化氢酶活性,揭示了过氧化氢酶在不同条件下的活性变化规律,为进一步研究过氧化氢酶的功能和应用提供了实验数据支持。
希望本实验结果能够为相关领域的研究工作提供一定的参考价值。
滨州市沾化冬枣核中活性多糖的提取

滨州市沾化冬枣核中活性多糖的提取作者:朱华刘香红赵娜王滕方菁菁来源:《绿色科技》2016年第20期摘要:利用沾化冬枣核为试验材料,进行了冬枣核多糖的提取分离研究。
通过单因素试验确定冬枣核中多糖的含量,进一步通过正交试验确定了多糖的较优提取条件。
结果表明:各因素对枣核多糖提取效果的影响程度从高到低依次为浸提温度>浸提时间>料液比。
综合考虑提取效果与生产成本,对提取条件进行优化,确定了适宜的提取条件:料液比1∶20、浸提温度90 ℃、浸提时间4 h。
以期为冬枣的综合加工利用、为从废弃植物材料中提取生物活性成分提供参考。
关键词:冬枣核;活性物质;提取中图分类号:TS255.4文献标识码:A 文章编号:1674-9944(2016)20-0117-031 引言沾化冬枣(Zyzyhpus jujuha dates)是鼠李科枣属的植物,是一种晚熟、鲜食、优质枣类种质资源[1]。
冬枣富含19种人体所需的氨基酸和多种维生素,有很高的食疗价值和多种保健功效[2]。
目前,多糖广泛分布于自然界中,有研究显示具有免疫调节、抗肿瘤、抗衰老、降血糖等多种功效[3]。
常见的多糖的提取方法有浸提法、超声提取法、微波法、超高压等方法[4],而浸提法又是一种最常见的提取方法。
超声提取法[5,6]和微波提取法[7,8]是近年来发展起来的提取方法,具有选择性高、能耗低、效率高等优点,已被广泛应用于多糖的提取。
对沾化冬枣的开发利用研究主要集中在冬枣果肉果皮中活性物质的提取,但是对冬枣核活性物质的提取没有进行深入探讨。
冬枣采后不仅可以鲜食,而且可以用于加工各种饮料,营养保健品。
但加工过程中枣核往往被废弃掉,因此,对冬枣核中活性物质提取的探究,将有助于枣核的开发利用。
2 材料与方法2.1 材料的来源从市场上采购滨州沾化冬枣,取出枣核,烘干至恒重后用微型试样粉碎机粉粹,过筛,置于棕色瓶中并低温保存,备用。
2.2 实验仪器与药品试剂2.2.1 实验仪器所用实验仪器如表1所示。
过氧化氢酶活性的测定

A 空 10 5 白
B 反 10 应
55 - 1
分 钟
5
51
医学课件ppt
3
5 VA(空白)
=
VB(反应
35
液)
=
8
五、实验结果与计算:
1、被分解的H2O2量(mg) = (空白滴定值-样品滴定值)×Na2S2O3摩尔浓度×17
2、CAT活性(mg.g-1.min-1)= 被分解的H2O2量(mg)×(总体积÷测定取液量) 样品重(g)×时间(min)
H2O2(余)+2KI+H2SO4----→I2+K2SO4+2H2O
I2 +2Na2S2O3 --→2NaI+Na2S4O6(连二硫酸钠)
用硫代硫酸钠分别滴定空白液(可求出总的H2O2量)和反应
液(可求出未分解的H2O2量),再根据二者滴定值之差求出分
解的H2O2量。
医学课件ppt
5
三、实验材料、仪器和试剂:
医学课件ppt
6
四、实验步骤:
1、酶液提取:
称取0.5g三叶草,加少量石英砂,CaCO3,2ml水,研成匀浆, 移入50ml容量瓶,冲洗研钵数次,定容,静置,过滤。
2、酶促反应:
(1)取锥形瓶2个,编号A,B,各加入10ml酶液,之后立即向A瓶 中加入1.8mol/L H2SO45ml,终止酶活性,作空白滴定。
医学课件ppt
9
六、思考题:
1、本实验中影响CAT活性测定的因素有哪些?
医学课件ppt
10
记录两次消耗Na2S2O3的体积医VA学(课空件白p)p,t VB(反应液)。
7
酶活性测定
管 号
酶 液
过氧化氢酶(CAT)具有哪些特异功能

过氧化氢酶(CAT)具有哪些特异功能过氧化氢酶(CAT),顾名思义是可以催化过氧化氢分解成氧和水的酶。
然而,你要是认为它只能催化过氧化氢分解那就大错特错了,人家还有特异功能呢。
接下来让德晟小编给大家详细说说这种神奇的酶。
首先,作为一种物质,过氧化氢酶是在1811年被过氧化氢(H2O2)的发现者泰纳尔(Louis Jacques Thénard)首次发现。
1900年,Oscar Loew将这种能够降解过氧化氢的酶命名为“catalase”,即过氧化氢酶,并发现这种酶存在于许多植物和动物中。
1937年,詹姆斯·B·萨姆纳将来自牛肝中的过氧化氢酶结晶,并在次年获得了该酶的分子量。
1969年,牛的过氧化氢酶的氨基酸序列得以解出。
而后1981年,其三维结构得以解析。
几乎所有的生物机体都存在过氧化氢酶。
其普遍存在于能呼吸的生物体内,主要存在于植物的叶绿体、线粒体、内质网、动物的肝和红细胞中,其酶促活性为机体提供了抗氧化防御机理。
CAT是红血素酶,不同的来源有不同的结构。
在不同的组织中其活性水平高低不同。
过氧化氢在肝脏中分解速度比在脑或心脏等器官快,就是因为肝中的CAT含量水平高。
CAT存在于细胞的过氧化物酶体内。
过氧化氢酶是过氧化物酶体的标志酶, 约占过氧化物酶体酶总量的40%。
过氧化氢酶存在于所有已知的动物的各个组织中,特别在肝脏中以高浓度存在。
过氧化氢酶在食品工业中被用于除去用于制造奶酪的牛奶中的过氧化氢。
过氧化氢酶也被用于食品包装,防止食物被氧化。
在纺织工业中,过氧化氢酶被用于除去纺织物上的过氧化氢,以保证成品是不含过氧化物的。
它还被用在隐形眼镜的清洁上:眼镜在含有过氧化氢的清洁剂中浸泡后,使用前再用过氧化氢酶除去残留的过氧化氢。
过氧化氢酶在美容业中的使用:一些面部护理中加入了该酶和过氧化氢,目的是增加表皮上层的细胞氧量。
过氧化氢酶在实验室中还常常被用作了解酶对反应速率影响的工具。
cat 过氧化氢酶

cat 过氧化氢酶简介:过氧化物酶是由微生物或植物所产生的一类氧化还原酶,是以过氧化氢为电子受体催化底物氧化的酶。
它们能催化很多反应,主要存在于细胞的过氧化物酶体中,以铁卟啉为辅基,可催化过氧化氢氧化酚类和胺化合物,具有消除过氧化氢和酚类、胺类毒性的双重作用。
其最早由J. Rhodin于1954年在鼠肾小管上皮细胞中发现。
本文章主要介绍一些外界因素对CAT的酶活性影响,下面分别介绍一下从几篇论文中找到的信息。
一:硅对水稻叶片抗氧化酶活性的影响:以感白叶枯病的水稻品种日本晴(Oryza sativa L.cv .Nipponbare)为材料 ,研究了硅对接种白叶枯病菌后的水稻病情指数、叶片丙二醛(MDA)和过氧化氢(H2O2)含量以及超氧化物岐化酶(SOD)、过氧化氢酶。
(CAT)、脂氧合酶(LOX)、过氧化物酶(POD)和抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性的影响。
结果表明,施硅能显著降低水稻白叶枯病的病情指数,防治效果达62.86%。
接种白叶枯病菌后48h内,施硅处理的水稻植株,叶片中丙二醛。
(MDA)和过氧化氢(H2O2)含量显著升高;显著提高感病植株叶片中脂氧合酶(LOX)和超氧化物歧化酶(SOD)活性;降低过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)和抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性;促进过氧化氢(H2O2)在植物体内积累,加强膜脂过氧化作用。
因此,硅可通过参与植株体内代谢,调节抗氧化系统酶活性。
二,紫外光对几种水生植物过氧化氢酶(CAT)活性的影响通过测定被照射植物分解过氧化氢后放出氧气的体积,确定植物过氧化氢酶(CAT)的活性。
结果表明,满江红,浮萍和水花生3种植物受过量紫外光不同时间照射,CAT活性都明显升高。
但活性峰值因植物不同而异,即满江红的CAT峰值出现在被照射72h后;浮萍的CAT峰值出现在被照射24h后;水花生则出现在被照射8h后。
撤除过紫外光照射后,3种植物的CAT活性逐渐降低。
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( 滨州 学 院 黄 河三 角洲 生态 环境研 究 中心 , 山东 滨 州 2 6 0 ) 5 6 3
摘 要 : 过 对 沾 化 县 3个 样 地 冬 枣过 氧 化 氢 酶 ( AT) 通 C 活性 的研 究 发 现 , 同株 冬 枣 中部
CA 活性 高 , T 冬枣研 究所 的冬 枣酶 活性较 高 , 明冬 枣研 究所 的冬 枣 比马武 与 古城 的 更 能适 应 表
表 2 三样 地 冬 枣 植 株 上 、 、 各 层 叶 与 果 实 C 中 下 AT活 性
G 一 城 , 一 枣 研 究 所 , 一 武 古 Y 冬 M 与
3 讨
论
由相关 分析 知 , 马武 叶和果 的 C AT 活性 与 土壤 p 值 呈 显著 正 相 关 ( 一 1 0 , H r . 0 P< 0 0 ) 冬 枣 研 究 .1 , 所 的叶也 与土壤 p 呈 正相关 ( 一0 9 9 P%0 0 ) 表 明植 物 的酶活 性与 土壤 的酸碱性 有 一定相 关性 , H r .9 , .5, 从 3个样地 的土壤 p H值 来看 , 土壤 均 呈碱性 ( 见表 1 . ) 冬枣 对 土 壤条 件 要 求 不高 , 酸性 、 性 和 中性 土壤 在 碱 都可 生长. 肥 沃深厚 的微碱 性或 中性 土壤 生长最 好. 在 多盐 的环境 能 够增 强 冬枣 碳 水 化合 物 、 白质 等 物 蛋
内过 氧化 氢酶往 往发 生变 化. 目前 , 关 冬 枣 的研 究 集 中在 品种 特 性 介 绍_。、 有 】 冬枣 栽 培 管 理_ 、 藏保 。 4 贮 鲜 施肥 等方 面 ]而有 关 冬枣 酶活性 的研 究未 见报 道. 书及 , 对沾 化 冬 枣过 氧 化 氢酶 进行 研 究有 助 于 了解
2 2 不 同 地 点 过 氧 化 氢 酶 活 性 .
由表 2可 以看 出 , 地上 、 下 3个 部位 的 叶和枣 比较 来 看 , 枣 研 究所 的酶 活性 相 对较 高 、 城 的 样 中、 冬 古 次之 , 马武 的酶活 最低 , 差异 并不 显著 ( >0 0 ) 说 明冬 枣研究 所 的冬 枣较 能 适应 环 境 的变化 , 不 良 但 P . 5. 对 生态 因子 的耐受力 强.
冬 枣 叶 过氧化氢酶
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冬 枣 一 过氧化氢酶
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( ) 古 城 镇 CAT 活 性 a
( ) 马 武 镇 CAT 活 性 b
( ) 冬 枣 研 究 所 CAT 活 性 C
图 1 CAT 活 பைடு நூலகம்
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第2 3卷第 3期
Vol 2 No. _ 3, 3
滨州 学 院学 报
J u n lo n h u U nv r i o r a fBiz o ie s y t
2 0 年 6月 07
J n ,0 7 u .20
沾 化 冬 枣 过 氧 化 氢 酶 ( AT) 性 的 研 究 C 活
沾化 冬枣 品质优 良 , 皮薄脆 甜 , 细嫩 无 渣 , 我 国优 良的鲜 食 枣 品种 , 场 前景 广 阔. 抗 盐碱 、 是 市 其 耐瘠 薄 , 山东 滨海 盐碱 地上 栽种 的主要 经 济林树 种之 一. 是 过氧 化 氢酶 是植 物 体 内一 种很 重 要 的 酶 , 在 光 呼 它 吸 、 肪代 谢过 程 中起着 重要 的作用 , 多种逆 境 因子也 有 明显 的生态效 应 . 脂 对 当植物 遇 到不 良环境 时 , 其体
表 1 三 样 地 土 壤 p 值 H
G一 古 城 , Y一 冬 枣 研 究 所 , 一 马 武 . M
】 2 方 法 .
】 2 1 测 定 方 法 ..
C AT活 性测 定用 高锰 酸钾滴 定法 ] 土壤 p 值用 电位法 …] , H .
1 2 2 数 据 处 理 ..
数 据处 理采用 S S (2 0 统计软 件进 行相 关性 和单 因素方 差分 析 P S 1. )
城 的叶和果 实二者 差异不 显著 ( P>0 0 ) 研 究 所 和 马武 样 地 的冬 枣 叶显 著高 于果 实 ( % 0 0 ) 图 1 .5, P .5 见 .
冬 枣树 中部果 实 C AT活 性高 , 明中部果 实生 长最 旺盛 . 表
曼 量
●
; 45 .
4
一
.
一
收 稿 日期 : 0 7— 2 5 2 0 0 —0
基 金 项 目 : 州 学 院“ 年人 才 创新 工 程 ” 学 基 金 项 目 ( Z QI G20 0 ) 滨 青 科 B XY VL 0 5 9
作 者 简 介 : 印平 ( 9 8 ) 女 , 东 荷 泽 人 , 士 , 教 , 要 从 事 植 物 生 理 生 态 研 究 陈 1 7一 , 山 硕 助 主
不 良环境 , 枣叶 CA 活性 比果 实的 高, 冬 T 分别 高 2 . % 、8 8 、 8 6 . 2 4 3 . 2 .
关 键 词 : 枣 ; 氧 化 氢 酶 ; 活 性 冬 过 酶
中 图分类 号 : 4 Q 96
文献 标识 码 : A
文章 编号 :6 3 6 8 2 0 ) 3— 0 1 3 1 7 —2 1 (0 7 0 0 5 一O
冬枣 的生 理变 化 , 冬枣适 应 不 良环 境及 品质 的改 良提供 科学 依据 , 为 以便 更好 地发展 绿 色食 品产业.
1 材 料 与 方 法
11 材 . 料
在沾 化县冬 枣生 长及 产量 较好 的马武 、 古城 两镇 和 冬 枣研 究 所 3个 样 地 , 2 0 于 0 6年 1 O月 1 5日冬枣
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滨州 学 院学报
第 2 3卷
2 结 果
2 1 同 一 样 地 中叶 和 果 实 C . AT 活 性 比较
从 3个样 地可 以看 出 , 枣 叶 C 冬 AT活性 较果 实 , 分别 高 2 . 6 Y) 3 . ( 和 2 . ( , 2 4/( 、8 8/ M) 9 9 6 8 6 G) 而古
成熟 采摘期 取样 , 别选 3个样 地 中的 3棵树 龄在 4 分 ~5年 的枣树 , 采集树 冠 上 、 下 3 的冬 枣 、 枣 叶 中、 层 冬 和茎 , 回立 即放人 4℃ 冰箱保 鲜 , 备测 定过 氧化 氢酶 活性. 取 准 取样 地 0 1 m、0 Oc 和 2 ~3 m ~ 0c 1 ~2 m O 0c 的土 壤测定 其 p 值 ( H 土壤 的酸碱 性见 表 1 . )