结核病患者T细胞亚群检测临床意义分析

ＤＰＴ 和 ＤＮＴ 是 Ｔ 细 胞 在 胸 腺 内 发 育 的 早 期 阶 段［６］。 早 期 的胸腺细胞位于胸腺皮质，表达 ＣＤ２和 ＣＤ３、不表达 ＣＤ４和 ＣＤ８（即 ＤＮＴ），向胸腺皮质 深 层 迁 移 时 发 生 ＴＣＲαβ基 因 重 排 与表达，逐渐发育成为 ＤＰＴ；ＤＰＴ 再通过阳性选择和自 身 免 疫 阴性选择，最终发育为能识别外 来 抗 原 的 成 熟 Ｔ 细 胞 亚 群，如 Ｔ４ 细胞（辅助性 Ｔ 细胞）和 Ｔ８ 细胞（杀伤 性 Ｔ 细 胞）。 正 常 状 态下，Ｔ４ 和 Ｔ８ 细胞相互诱导、相 互 制 约，形 成 Ｔ 细 胞 网 络，以 调 节 免 疫 功 能 和 维 持 免 疫 稳 态 ，任 一 细 胞 亚 群 的 异 常 都 可 导 致 免 疫 功 能 紊 乱 。 ［７－８］ 研 究 表 明 ，ＤＮＴ 具 有 免 疫 抑 制 功 能 ，通 过 清除同种同源性 Ｔ８ 细胞和产生白细胞介素（ＩＬ）－４和ＩＬ－１０等
与健康对照 组 比 较，结 核 病 患 者 ＤＮＴ、ＤＰＴ 百 分 含 量 降 低，总 Ｔ 细胞、Ｔ４ 细 胞、Ｔ８ 细 胞、ＤＮＴ、ＤＰＴ 绝 对 含 量 均 降 低 （Ｐ＜０．０５）。见表１。与呼吸系 统 对 照 组 比 较，结 核 病 组 仅 Ｔ８ 细 胞 百 分 含 量 升 高 （Ｐ＜０．０５）。
测定抗体 ＣＤ４－ＦＩＴＣ／ＣＤ８－ＰＥ／ＣＤ３－ＰＣ５、标 本 预 处 理 试 剂、鞘 液等。
１．３ 方法 以 ＥＤＴＡ－Ｋ２ 抗 凝 管 采 集 患 者 晨 起 空 腹 静 脉 血 ２～３ｍＬ，立 即 送 检。 采 用 双 平 台 法 三 色 流 式 细 胞 术 、ＳＳＣ／ ＦＳＣ 设门 淋 巴 细 胞 ，分 析 总 Ｔ 细 胞 （ＣＤ３＋ ）Ｔ４ 细 胞 （ＣＤ３＋ ＣＤ４＋ＣＤ８－ ）、Ｔ８ 细 胞（ＣＤ３＋ＣＤ４－ ＣＤ８＋ ）、ＤＮＴ 及 ＤＰＴ 百 分 含量和绝对含 量，计 算 Ｔ４／Ｔ８ 细 胞 比 值 。 具 体 检 测 方 法 见 参 考 文 献 ［５］。
摘 要：目的 探讨结核病患者外周血 Ｔ 细胞亚群检测 的 临 床 意 义。方 法 采 用 流 式 细 胞 术 检 测 １９６ 例 健 康 者、８４ 例 结 核
病患者及１００例呼吸系统非结核杆菌感染患者外周血 Ｔ 细胞亚群、ＣＤ３＋ＣＤ４－ＣＤ８－ 双阴性细胞（ＤＮＴ）和 ＣＤ３＋ＣＤ４＋ＣＤ８＋ 双阳
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国际检验医学杂志２０１２年１０月第３３卷第１９期 Ｉｎｔ Ｊ Ｌａｂ Ｍｅｄ，Ｏｃｔｏｂｅｒ ２０１２，Ｖｏｌ．３３，Ｎｏ．１９
·临床检验研究论著·
结核病患者 Ｔ 细胞亚群检测临床意义分析
栗群英１，吴丽娟１△ ，陈 莉１，杨 利１，２ （１．成都军区总医院检验科，四川成都 ６１００８３；２．成都医学院检验系２００７级，四川成都 ６１００８３）
表１ Ｔ 淋巴细胞亚群测定结果
Ｔ细胞亚群
总 Ｔ细胞（％） Ｔ４ 细胞（％） Ｔ８ 细胞（％） ＤＮＴ（％） ＤＰＴ（％） Ｔ４／Ｔ８
结核病组 （ｎ＝８４） ６６．２９±１２．０７ ３４．７５±１１．０３ ２５．７０±１０．１１ ５．９６±４．９４ ０．１８±０．２４ １．５８±０．８２
△ 通讯作者，Ｅ－ｍａｉｌ：ｗｕｌｉｊｕａｎ１６３８＠１２６．ｃｏｍ。
国际检验医学杂志２０１２年１０月第３３卷第１９期 Ｉｎｔ Ｊ Ｌａｂ Ｍｅｄ，Ｏｃｔｏｂｅｒ ２０１２，Ｖｏｌ．３３，Ｎｏ．１９
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续表１ Ｔ 淋巴细胞亚群测定结果
Ｔ细胞亚群
总 Ｔ细胞（×１０９／Ｌ） Ｔ４ 细胞（×１０９／Ｌ） Ｔ８ 细胞（×１０９／Ｌ） ＤＮＴ（×１０９／Ｌ） ＤＰＴ（×１０９／Ｌ）
（１．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｃｈｅｎｇｄｕ Ｍｉｌｉｔａｒｙ Ｇｅｎｅｒａｌ Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｃｈｅｎｇｄｕ，Ｓｉｃｈｕａｎ６１００８３，Ｃｈｉｎａ； ２．Ｇｒａｄｅ２００７，Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｃｈｅｎｇｄｕ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｃｈｅｎｇｄｕ，Ｓｉｃｈｕａｎ６１００８３）
关键词：结核； Ｔ 细胞亚群； 流式细胞术
ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３－４１３０．２０１２．１９．０２１
文 献 标 识 码 ：Ａ
文 章 编 号 ：１６７３－４１３０（２０１２）１９－２３４６－０２
Ｃｌｉｎｉｃａｌ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ ｏｆ Ｔ－ｃｅｌｌ ｓｕｂｓｅｔｓ ｉｎ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｂｌｏｏｄ ｏｆ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ Ｌｉ Ｑｕｎｙｉｎｇ１，Ｗｕ Ｌｉｊｕａｎ１△ ，Ｃｈｅｎ Ｌｉ１，Ｙａｎｇ Ｌｉ１，２
１．４ 统计 学 处 理 采 用 ＳＰＳＳ１３．０ 软 件 进 行 数 据 统 计 学 处 理，计量资料以 ｘ±ｓ表 示，验 证 资 料 符 合 正 态 分 布，组 间 比 较 百分含量采用方差分 析，绝 对 含 量 采 用ｔ检 验，显 著 性 检 验 水 准为 α＝０．０５。 ２ 结 果
结核病组 （ｎ＝８４） ０．７５±０．４０ ０．４０±０．２４ ０．２９±０．２０ ０．０６±０．０６ ０．００±０．００
健康对照组 （ｎ＝１９４）
１．８７±０．７０＊ １．０１±０．９１＊ ０．７４±０．３１＊ ０．６６±０．２１＊ ０．０２±０．０１＊
呼吸系统对照组 （ｎ＝１００）
０．８０±０．５０ ０．４５±０．２８ ０．２９±０．２４ ０．０６±０．０８ ０．００±０．０１
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ； Ｔ－ｃｅｌｌ ｓｕｂｓｅｔ； ｆｌｏｗ ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ
结核病是由结核分枝杆 菌 （简 称 结 核 杆 菌 ）引 起 的 传 染 性 疾病，发病率及患者患者病死率均较高［１］。结核杆菌侵入机 体 后，主要在宿主机体细胞内寄居、繁殖，引起以细胞免疫为主 的 免疫应答。肺结核的 发 生、发 展 和 转 归 与 感 染 结 核 杆 菌 数 量、 毒力及宿主细胞免疫功能均密切相关。机体细胞免疫功能主 要以 Ｔ 细胞为 主。 正 常 生 理 情 况 下，Ｔ 细 胞 及 其 亚 群 含 量 及 分布相对稳定，并处于平衡状态，一旦失衡，可造成机体免疫 功 能紊乱。结 核 病 患 者 外 周 血 多 存 在 Ｔ 细 胞 亚 群 的 异 常 改 变［２－４］，但 对 ＣＤ３＋ＣＤ４－ ＣＤ８－ 双 阴 性 Ｔ 细 胞 （ＤＮＴ）和 ＣＤ３＋ ＣＤ４＋ＣＤ８＋ 双阳性 Ｔ 细胞（ＤＰＴ）的 研 究 尚 无 相 关 报 道 。 本 文 回顾性分析结核病患者外周血 Ｔ 细胞亚群、ＤＮＴ 和 ＤＰＴ 检测 结果及相应 的 临 床 资 料，探 讨 结 核 杆 菌 感 染 时 机 体 外 周 血 Ｔ 细胞亚群，尤其是 ＤＮＴ 及 ＤＰＴ 的 变 化 特 点 及 临 床 意 义，以 期 为临床提供更加有效的实验诊断指标和临床干预指标。 １ 资 料 与 方 法 １．１ 一般资料 ２０１１年５月 至 ２０１２ 年 １ 月 于 成 都 军 区 总 院 住院治疗的结核病 患 者 ８４ 例 （结 核 病 组 ），男 ５７ 例、女 ２７ 例， 年龄１８～８２岁，平均３９．３岁；均确诊为结核杆菌感染，排 除 自 身免疫性疾病、艾滋病、梅毒、恶性肿瘤、糖尿病、肝炎及其他 感 染性疾病。呼吸系统非结 核 杆 菌 感 染 组 （呼 吸 系 统 对 照 组 ）为 同 期 患 者 １００ 例 ，男 ７５ 例 、女 ２５ 例 ，年 龄 １８～９６ 岁 ，平 均 ６２．２ 岁，包括肺炎３３例、支气管炎１６例、慢性阻塞性肺病 ４５ 例、支 气管扩张６例。健 康 对 照 组 为 同 期 体 检 健 康 者 １９４ 例，男 ９６ 例 、女 ９８ 例 ，年 龄 １９～６２ 岁 ，平 均 ３７．４ 岁 。 １．２ 仪器 与 试 剂 美 国 Ｂｅｃｋｍａｎ－Ｃｏｕｌｔｅｒ ＸＬ４－ＭＣＬ 型 流 式 细胞仪及配 套 同 型 对 照 抗 体 ＩｇＧ１－ＦＩＴＣ／ＩｇＧ１－ＰＥ／ＩｇＧ１－ＰＣ５、
性细胞（ＤＰＴ）百分含量和绝对含量，并进行比较分析。结果 与 健 康 者 相 比，结 核 病 患 者 ＤＮＴ、ＤＰＴ 百 分 含 量 减 少 （Ｐ＜０．０５），
总 Ｔ 细胞、Ｔ４ 细胞、Ｔ８ 细胞、ＤＮＴ、ＤＰＴ 绝对含量均减少（Ｐ＜０．０５）。结 论 Ｔ 细 胞 亚 群，尤 其 是 ＤＮＴ 和 ＤＰＴ 可 作 为 判 断 结 核 患 者 免 疫 状 态 、指 导 用 药 和 疗 效 观 察 的 指 标 。
＊ ：与结核病组比较，Ｐ＜０．０５。
３ 讨 论 结 核 杆 菌 侵 入 机 体 后 ，先 被 单 核 巨 噬 细 胞 吞 噬 并 被 加 工 处
理，之后 Ｔ８ 细胞经 单 核 巨 噬 细 胞 递 呈 的 抗 原 刺 激 而 激 活 、增 殖，产生细胞因子激活 巨 噬 细 胞 使 之 抑 制 细 胞 内 结 核 菌 生 长 。 Ｔ８ 细胞能抑制各种免疫细胞 的 功 能，被 认 为 是 抑 制 性 Ｔ 淋 巴 细 胞 ，但 可 通 过 穿 孔 素 等 细 胞 毒 性 分 子 介 导 而 发 挥 毒 性 杀 伤 作 用以溶解靶细胞。Ｔ４／Ｔ８ 比 值 被 可 很 好 地 反 映 宿 主 免 疫 调 节 平 衡 。 ［４－６］ 本 研 究 结 果 显 示 ，结 核 病 患 者 较 健 康 人 外 周 血 总 Ｔ 细胞、Ｔ４ 细胞、Ｔ８ 细胞 比 例 均 无 统 计 学 差 异 （Ｐ＞０．０５），但 其 绝 对 含 量 均 有 所 下 降 ，与 既 往 文 献 报 道 不 一 致［２－３］，可 能 与 结 核 病患者结核分期、病 程 不 同 有 关；ＤＮＴ、ＤＰＴ 百 分 含 量 和 绝 对 含量均减少（Ｐ＜０．０５），但 Ｔ４／Ｔ８ 比值无明显改变（Ｐ＞０．０５）。 上述结果提示结核病患者 Ｔ 细胞免疫功能均不同程度降低， 可能与 Ｔ细胞各亚群生成减少直接相关。结核病患者与呼吸 系统非结核杆菌感染患者相比，只 有 Ｔ８ 细 胞 亚 群 百 分 含 量 升 高（Ｐ＜０．０５），其 他 均 无 统 计 学 差 异 （Ｐ＞０．０５），进 一 步 提 示 Ｔ８ 细胞亚群在清除结核杆菌感染靶细胞中的重要作用。