幽门螺旋杆菌染色液(MGG法)使用说明
迈格林华染色液(May-Grunwald Stain)
迈格林华染色液(May-Grunwald Stain)
简介：
May-Grunwald-Giemsa Stain 经常用于组织切片、血液和细胞涂片、细菌、染色体 显带、原生动物寄生虫等染色，尤其适用于胃幽门螺杆菌染色。胃幽门 螺杆菌(Helicobacter Pyloric)又称胃幽门弯曲菌(Campylobacter Pyloric)。幽门螺旋杆菌染色方法主要由亚甲 蓝法、硝酸银法、迈格林华-姬姆萨法(May-Grunwald-Giemsa，MGG 法)、碱性品红法 等。硝酸银法对比清楚，染片可以长期保存，但操作较为麻烦耗时。其他方法较为简便、 但染片容易褪色。切片经 Leagene May-Grunwald 染色后，胃幽门螺旋杆菌呈蓝色，胶 原纤维呈红色，红细胞呈绿色，胃黏膜上皮呈淡蓝色，细胞核呈深蓝色。
组成：
名称
编号
DM0130 2×100ml
Storage
试剂(A)：M ay-Grunwald Stain
100ml RT 避光
试剂(B)：M G 磷酸盐缓冲液
100ml RT
取 A、B 等量混合，即为 May-Grunwald 工作液，不宜预先配制。
使用说明 书
1份
操作步骤(仅供参考)：
1、 组织固定于 10%福尔马林，常规脱水包埋。 2、 切片厚 4µm，常规脱蜡至水。 3、 蒸馏水洗 1 次。 4、 把切片周围水分抹干，滴入 May-Grunwald Stain 工作液数滴染，倾去染液。 5、 无水乙醇 快速洗 去余液 ，稍烤 干。 6、 二甲苯透明，中性树胶封固。
染色结果：
胃幽门螺旋杆菌，细胞核，胃黏膜上皮 蓝色
胶原纤维
红色红Biblioteka 胞绿色注意事项：1、 Leagene May-Grunwald 工作液须于临用前配置，不易保存。 2、 最后的无水乙醇要速洗，否则容易脱色。
胃幽门螺杆菌快速检测试剂盒使用说明书
胃幽门螺杆菌快速检测试剂盒使用说明书【产品名称】胃幽门螺杆菌快速检测试剂盒【包装规格】48 人份/盒,60 人份/盒。
【预期用途】适用于采用胃镜，取胃粘膜的新鲜活检组织，检测胃幽门螺杆菌的感染。
【检验原理】胃幽门螺杆菌（Helicobacter pylori ，HP）是导致慢性胃炎和消化性溃疡的重要致病因素，检测该菌再施予针对治疗已成为临床需要。
本试剂盒依据胃幽门螺杆菌分泌大量高活性尿素酶的特性，尿素酶分解尿素而产生氨，使pH值升高，致使指示剂变色，根据颜色变化即可快速判定检测结果，为HP所致疾病的正确诊断和有效治疗提供可靠的4-30 121、做胃镜时，取病人病灶的胃粘膜，由于幽门螺杆菌寄居部位的差异，为提高检出率，建议对每个病人多部位胃粘膜取样。
2、由于尿素酶具有活性，胃镜活检粘膜取样后必须立即检测，陈旧或经处理的样本不能使用。
3、取样本时，尽可能避免酸碱类物质、重金属盐类的污染。
【检验方法】使用前依当日需检测例数取去底物微孔药条，每孔加入反应液贰滴（100ul ），待药膜完全溶解后，用牙签或洁净镊子将新鲜活检胃粘膜置入药液内，在10℃～30℃条件下孵育5分钟后观察结果。
【参考范围】采用目测法。
衬白纸在自然光线下或40W日光灯下观察各孔内胃粘膜组织边缘药液颜色变化。
1、阴性：粘膜样品孔颜色无显色反应。
2、阳性：粘膜样品孔颜色呈红色～紫红色。
【检验结果的解释】1、环境和样本陈旧可造成酸碱性物质、重金属盐类污染，酸性物质可造成假阴性，重金属盐类使尿素酶失活可造成假阴性，碱性物质可造成假阳性。
2、菌种变异造成不分泌尿素酶，分泌尿素酶失活可造成假阴性。
【检验方法的局限性】1、检验方法为定性测定，检验结果宜受样本取样、反应温度和孵育时间的影响，因此规范操作可最大限度保证结果的准确性。
2、检测产物为活性尿素酶，因此菌种变异、尿素酶失活可造成漏诊。
【产品性能指标】1、最底检出限：试剂盒在10℃～30℃ 时，对 1.7U/mg 的尿素酶最底检出限应≤78.125mg/L。
GN-ID 鉴定条使用说明书
HK-MID革兰氏阴性杆菌生化鉴定系统(HK-MID-64GN-ID A)(HK-MID-65GN-ID B)使用说明书广东环凯微生物科技有限公司广东省微生物研究所HK-MID-GN鉴定条使用流程快速浏览：GN A GN A+B GN A+B 氧化酶阴性阴性阳性接种物挑取1个菌落至3ml盐水挑取1个菌落至5ml盐水挑取1个菌落至5ml盐水（若为放线杆菌属或巴斯德氏菌属，则在菌悬液中加入无菌马血清1滴/ml）接种量每个反应管加3-4滴菌悬液（约100微升）每个反应管加3-4滴菌悬液（约100微升）每个反应管加3-4滴菌悬液（约100微升）矿物油覆盖管1－赖氨酸管2－鸟氨酸管3－硫化氢管1、2、3；管20－阿拉伯糖管24－精氨酸管1、2、3；管24－精氨酸培养时间18-24小时18-24小时48小时培养温度35-37℃35-37℃35-37℃（若为荧光假单胞菌，则为25℃）初读结果添加配套试剂管8（吲哚）：加2滴Kovac试剂，2分钟内记录结果；管10（VP）：加一滴VPⅠ和1滴VPⅡ，15-30分钟后记录结果；管12（TDA）：加1滴TDA试剂，立刻记录结果同GN A；明胶在24小时记录结果；管24（精氨酸）：黄色－阴性，绿/蓝色－阳性同GN A明胶在48小时记录结果，管24（精氨酸）：黄－阴性，蓝色－阳性记录最后结果，并在MID软件上读取结果注：在反应小管上部有黑色圈，表示培养前需用矿物油覆盖；有绿色圈，表示培养后需要添加配套试剂。
产品介绍：GN-ID鉴定系统包括两种独立的鉴定条，即GN A和GN B，GN A是用来鉴定氧化酶阴性、硝酸盐阳性、发酵葡萄糖的大多数肠杆菌科细菌，而GN B需要与GN A共同使用，而非单独使用，GN A+B主要用来鉴定非苛养革兰氏阴性杆菌（包括氧化酶阴性和阳性菌），共包括28个属（参照名录表）。
原理：GN A和GN B鉴定条均分别由12个含干燥培养基的小管组成。
这些测定管用细菌悬浮液接种，培养一定时间后，通过代谢作用产生颜色的变化，或是加入配套试剂后变色，从而来判定结果。
幽门螺旋杆菌Warthin Starry 银染试剂盒
对苯二酚溶液
5 ml（HQ-OT-5）
注意：
为了更好的实验效果，请遵守如下操作建议： 请使用蒸馏水或去高纯度去离子水，水中切勿含有任何铝氯离子； 请用洁净的玻璃器皿； 染色过程中请勿使切片与金属物体（剪刀、镊子等）接触；
组织切片准备： 固定组织样本（4 % 中性甲醛、10 %中性甲醛），水冲洗后用递增浓度
8
冷却至室温
9
重要步骤：在浸泡阶段的最后 12min
准备显影液，50℃加热 10min 含明胶
的容器，随后滴加 4 滴硝酸银溶液，
WS 溶液。立刻搅拌混匀，加入 7 滴对
苯二酚溶液，继续搅拌混匀
10
切片竖直插入含有显影液的染色缸， 5-10 min
50℃孵育。切片染成黄棕色后停止染
色。
11
温水充分冲洗
（BioClear ）透明化，对应使用BioGnost二甲苯基质的封片剂（BioMount，
BioMount High，BioMount M，BioMount DPX，BioMount C，或普通 BioMount）；
如果是由二甲苯替代物（BioClear New ）透明化，使用BioMount New 封片。 使用VitroGnost 盖玻片覆盖。
注意事项： 染色时间非标准化、固定化，需要根据临床和实验经验来调控。 染色强度根据染色时间而定，实际染色操作需根据具体实验需求确定。 50 ℃孵育过程可使用微波炉控温。但由于微波炉不同的输出功率，对实验
结果易产生偏差，建议使用标准流程操作。
染色结果：
黑色 – 幽门螺旋杆菌
棕红色 – 背景颜色
2 min
12
70 %乙醇脱水
2 组，每组 30 s
幽门螺旋杆菌金标法
幽门螺旋杆菌金标法一、幽门螺旋杆菌简介幽门螺旋杆菌（Helicobacter pylori，HP）是一种革兰氏阴性菌，属于螺旋菌科。
它存在于人类胃黏膜表面，并与慢性胃炎、消化性溃疡、胃癌等多种胃部疾病有着密切的关系。
二、金标法原理金标法是一种常用的HP检测方法，也被称为尿素酶快速测定法（urease rapid test）。
其原理是基于HP细菌特有的尿素酶，该酶可以将尿素分解为二氧化碳和氨。
金标试剂中含有一种指示剂，当尿素被分解后产生的氨使指示剂变色，从而可以判断样本中是否存在HP 细菌。
三、金标法操作步骤1. 准备样本：取得患者的胃黏膜组织或呼出空气样本。
2. 打开试剂盒：将试剂盒从密封袋中取出，打开包装。
3. 取样：使用采样棒或吸管等工具取得样本。
4. 滴加样本：将采集的样本滴在试剂盒上。
5. 等待反应：等待约10分钟，观察试剂盒上的指示剂是否变色。
6. 判断结果：根据指示剂颜色变化判断样本中是否存在HP细菌。
四、金标法优缺点1. 优点：（1）操作简便，快速方便；（2）对患者无创伤，不需要进行胃镜检查；（3）准确率较高，可作为初步筛查方法。
2. 缺点：（1）金标法只能检测到HP的存在与否，不能确定感染程度；（2）可能会出现假阴性或假阳性结果；（3）金标试剂需要保存在低温下，否则易失效。
五、金标法应用范围金标法适用于初步筛查HP感染患者，特别是对于不能进行胃镜检查的患者。
同时，该方法也可以用于评估治疗效果和复发情况。
六、注意事项1. 采样前应告知患者相关注意事项，并征得其同意。
2. 采集样本时要避免污染和误差。
3. 操作过程中要遵守严格的消毒规范。
4. 金标试剂要保存在低温下，不要暴露在阳光下和高温环境中。
七、总结金标法是一种简便快速的HP检测方法，可以作为初步筛查方法。
但该方法也存在一定的局限性，如不能确定感染程度和可能出现假阴性或假阳性结果等。
因此，在使用该方法时需要注意操作规范，同时结合其他检测手段进行综合分析和诊断。
人幽门螺旋杆菌IgM(HP IgM)说明书定性
人幽门螺旋杆菌IgM(HP IgM)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。
96T使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中幽门螺旋杆菌IgM(HP IgM)表达。
实验原理本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人幽门螺旋杆菌IgM(HP IgM)表达。
用纯化的抗原包被微孔板，制成固相抗原，可与样品中幽门螺旋杆菌IgM(HP IgM)相结合，经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与HRP标记的抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），与CUTOFF值相比较，从而判定标本中幽门螺旋杆菌IgM(HP IgM)的存在与否。
试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8阳性对照0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9阴性对照0.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤1.编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）2.加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50µl。
然后在待测样品孔先加样品稀释液40µl，然后再加待测样品10µl。
加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
幽门螺杆菌说明书A3版
B.质量控制 1.推荐使用已上市的对照血清进行质量控制。进行 质量控制的频率可依据各实验室标准质量控制程 序进行。认定了结果符合预期之后即可采用本试 剂盒对患者样本进行试验。外部对照血清与预期 不符时，不要使用本试剂盒。此时请重新进行试 验，或者联系生产商技术服务部门。 2.试验操作无误并且设备工作正常时，对照位（C） 处始终会清楚出现一条有色对照线。对照位（C） 处的有色线属于内部阳性对照线，用于确认操作 正确无误。没有出现对照线时，需采用新的试剂 盒进行检测。如问题依然存在，则请联系生产商 技术服务部门。 3.试验操作无误并且测试板条工作正常时，结果窗 口应背景清晰，试验结果准确无误。清晰的结果 窗口背景，为内部阴性对照，用于确认操作正确 无误。
采用凝集法作为参照时，BioSign® H. pylori WB
检测结果的总符合率为 93.2%。
表 3. BioSign® H. pylori WB试验结果与酶联免疫
法检测结果对比
BioSign® H. pylori WB
酶联免疫法
阳性 阴性 合计
阳性 78 阴性 6
10 88 113 119
合计 84 123 207
表 1. BioSign® H. pylori WB试验结果与活组织检
查/组织学方法检测结果对比
活组织检查/组织学法
BioSign® H. pylori WB
阳性 阴性
阳性 阴性 71 14
3 115
合计 74 129
合计 85 118
203
采用活组织检查/组织学检查作为参照时，
BioSign® H. pylori WB 试 剂 盒 检 测 灵 敏 度 为
到 100%。
4.熟练性（内科实验室）研究
百度文库-幽门螺杆菌染色液说明书
广州市外显子生物技术有限公司
幽门螺杆菌染色液
产品说明：
幽门螺杆菌为短杆菌，两端微弯的一种革兰氏阴性杆菌，主要生存于胃黏膜上皮和胃腺体黏液屏障之间，与慢性胃炎、消化性溃疡和胃肿瘤有密切关系。
本染色液染色步骤简便，能清晰显示菌体，可大批浸染，为一种理想的HP染色液。
产品组成：
货号产品规格储存条件
S-1543 幽门螺杆菌染色液15ml RT -- 说明书1份
有效期：12 个月。
原包装未开封染色液的使用期限为 12 个月，在有效期内的已开封染色液建议在开封后 6 个月内使
用完，每次用后应及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。
实验步骤：
1.切片厚4-5微米，脱蜡至水。
2.幽门螺杆菌染色液染色1-2分钟。
3.水洗。
4.风干后，树胶封片，镜检。
结果判定：幽门螺杆菌蓝色，红细胞绿色，背景蓝色。
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幽门螺旋杆菌染色液(MGG法)使用说明
货号:G1930
有效期：24个月有效。
产品组成：
名称2×100ml Storage
试剂(A)A1:May-Grunwald Stain50ml RT避光
A2:MG磷酸盐缓冲液50ml RT
取A1、A2等量混合，即为May-Grunwald工作液，不宜预先配制。
试剂(B)B1:Giemsa Stain50ml RT避光
B2:Giemsa磷酸盐缓冲液50ml RT
取A1、A2等量混合，即为Giemsa工作液，不宜预先配制。
产品说明：
胃幽门螺杆菌(Helicobacter Pyloric，HP)又称胃幽门弯曲菌(Campylobacter Pyloric)。
现已证实这种细菌与慢性胃炎和消化性溃疡有密切关系。
胃幽门螺杆菌一般呈弧形、S形或
海鸥状，有时可见3～4个弯曲呈螺旋状，常呈鱼群状分布。
该菌多见于胃黏膜表面上皮与
黏膜层之间，并贴近表面上皮细胞，部分进入上皮细胞胞质内，胃小凹和黏膜浅层腺腔内亦
有此菌。
幽门螺旋杆菌染色主要有亚甲蓝法、硝酸银法、迈格林华-姬姆萨法
(May-Grunwald-Giemsa，MGG法)、碱性品红法等。
硝酸银法对比清楚，染片可以长期保存，
但操作较为麻烦、耗时。
其他方法较为简便，但染片容易褪色。
May-Grunwald-Giemsa染
色液主要由迈格林华染液和姬姆萨染液组成，染色后胃幽门螺旋杆菌呈蓝色，胶原纤维呈红
色，红细胞呈绿色，胃黏膜上皮呈淡蓝色，细胞核呈深蓝色。
HP多位于胃黏膜上皮表面的
黏液中，特别在胃小凹中数量较多。
自备材料：
1.10%福尔马林固定液
2.蒸馏水
3.系列乙醇
操作步骤(仅供参考)：
1、组织固定于10%福尔马林，常规脱水包埋。
2、切片厚4μm，常规脱蜡至水。
3、再用蒸馏水洗1次。
4、把切片周围水分抹干，滴入May-Grunwald工作液数滴染色10min，倾去染液。
5、Giemsa工作液滴染20min，倾去染液。
6、无水乙醇快速洗去余液，稍烤干。
7、二甲苯透明，中性树胶封固。
染色结果：
胃幽门螺旋杆菌蓝色
胶原纤维红色
红细胞绿色
胃黏膜上皮淡蓝色
细胞核深蓝色
注意事项：
1.幽门螺旋杆菌染色液(MGG法)中May-Grunwald工作液和Giemsa工作液须于临用前配置，不宜保存。
2.最后的无水乙醇要速洗，否则容易脱色。
3.胃幽门螺旋杆菌仅用Giemsa工作液染色也可以显示出来，也较清晰。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。