大蒜根尖微核试验
微核
遗传学实验小论文题目：染发剂对大蒜根尖产生微核的浓度研究班级：10生本班学号：2010061107姓名：郑兴艳指导老师：高坚强日期：2012-10-20染发剂对大蒜根尖产生微核的浓度研究摘要：大蒜根尖细胞微核技术是一种以染色体损伤及纺锤丝毒性等为测试终点的植物体细胞检测方法,因具有材料方便,培养简单、技术容易掌握、准确、快速、有明显剂量-效应等优点。
测定大蒜根尖细胞中出现的微核率,以此分析染发剂的诱变性,从而判断其对遗传物质是否有毒性效应。
我们用不同浓度的染发剂处理大蒜根尖细胞，统计微核千分率（微核细胞率）。
对统计结果进行单因素分析得：染发剂对大蒜染色体是有显著影响的。
关键词：染发剂;大蒜根尖;微核;正文:微核是真核细胞中的一种异常结构，是由落后染色体形成的核形小块，游离于主核外，大小是主核的1/3以下[1]，它的折光率及细胞化学反应性质与主核一样，也具有合成DNA的能力[2]，已经证实，微核率的大小是和用药剂量或辐射累积效应呈正相关，所以微核测可用于化学物质的遗传毒性研究[3]。
随着人们生活水平的不断提高，美发护发已普遍为广大公众所接受，目前作为美发的主要产品之一的染发剂使用相当普及，使用范围几乎包括男女老少，主要以青年以上各年龄段为消费主体。
为了了解其潜在的危害性并评价其安全性，我们按1999年卫生部卫生法制与监督司制定的《化妆品卫生规范》的要求进行[4]。
选用了市场上常见的染发剂，以大蒜为材料，探索染发剂对大蒜根尖细胞微核的诱变效应。
微核的形成机理据陈宝伟的研究分析[8]，微核的形成主要有三种方式：一是化学毒性物质导致，包括染色体断裂剂和非整倍体剂。
前者可诱发染色体发生断裂的遗传毒性物质，后者可以使染色体和纺锤体联结发生障碍或纺锤体功能受损；二是核体出芽，即间期的细胞核向外形成瘤状突起，形成芽体最后脱离主核形成微核；三是放射线导致，放射线可以引起DNA损伤，产生错误修复的双链断裂，导致微核出现。
微核实验-毒理学-洋葱根尖染色体观察
微核试验摘要：利用大蒜根尖细胞微核染色与计数技术测定不同浓度6价铬和1.2,4-三氯苯以及它们的不同浓度混合液对大蒜根尖分生区细胞微核率和细胞分裂各期的影响。
以蒸馏水为对照组，设置的实验组为3组不同浓度的6价铬和三氯苯以及它们的混合液。
用孚尔根染液法对不同试剂及各浓度的处理的根尖进行染色。
在显微镜下观察各试剂各浓度处理下的微核率以及不同分裂期细胞的比例。
关键字：孚尔根染色法、微核、微核率、分裂期细胞Abstract:Use of garlic root tip cell micronucleus dyeing and counting technology . Different concentrations of chromium 6 and 1,2, 4 - t hree hlorobenzene as well as their different concentration mixture to garlic root tip meristematic cells in the areas of micronucleus rate and the influence of each stage of cell division.With distilled water as control group, the group set up for the three groups of different concentrations of chromium 6 and 3 chlorobenzene and their efu's root dye solution for different reagent and the concentration of the treatment of root tip for dyeing. Under the microscope to observe the reagent concentration under the treatment of micronucleus rate and different proportion of split phase cellsKey Words：Fu's root staining method、micronucleus、Micronucleus rate、Split phase cells一、研究的目的与意义：1：知道微核产生的原理。
应用大蒜根尖微核技术进行有毒污染物环境监测
中图分类号 ： ５ ６ Ｘ ０
文献标识码 ： Ａ
Ｖ ｏＩ ．２３。 ｏ Ｎ ．３
Ｓ ｅｐ． ２０ ０６
应 用大蒜根尖微核技术进行有毒污染 物环境监测
袁 家辉
（ 阳市颍泉 区环境监理监测站 ， 阜 安徽 阜阳 ２ ６０ ） ３０ ０ 摘 要 ： 本文 对不同浓 度的有毒污染物 Ｃ ”、 、Ａ 、 一 发大蒜根尖微核效应的研究． ｒ Ｈｇ Ｃ Ｆ 诱 试验结果表 明微核率 随
文章编号 ：０ ４４２ （０ ６ ０—０ ６０ １０ —３ ９ ２０ ）３０ ５— ３
１ 前言
壤、 水中 ． 据报导 ， 在含 Ｆ到 几个 或 十 几个 Ｐ ｍ 浓 人 ’ Ｐ
度 的环境 里生 活 、 存就会 出现慢性 氟 中毒 现 象． 生 若 大 蒜是 一 种 分 布 较 广 的植 物 ， 验 取 材极 为 容 通 过饮 水 和 呼吸摄 取 大 量 的氟 ， 会 出现斑 釉齿 和 试 就 易 ， 吸收 环境 中 的致突 变物 ， 它 诱发 其 细胞 染色体 发 骨硬 化病 等氟 中毒症 状［． ４ ］ 生损 伤 断裂 、 出现微 核 ［． 文用 大蒜 微核 技 术对 微 １本 ］ 依据 国家地表 水 中含 Ｆ 限值 １０ｍｇ Ｌ 设 计在 一 ． ／ ． 量 的 Ｃ 抖、 ｒ 、 抖 、 一 有 毒 有 害 污 染 进行 监 限 值浓 度 的 上下 两个 量 级 之 间 的三 个 实验 组 ， 大 ｄ Ｃ ¨ Ｈｇ Ｆ 等 对 测． 根据 《 地表 水 环境 质量 标准 》 Ｇ ３ — ０ ） （ Ｂ ３８ ８２０ ２ 中 蒜 根 尖 诱 发 微 核 效 应 实 验 ． 别 配 制 含 Ｆ １． 分 一：０ ０
大蒜根尖染色体观察实验
大蒜根尖染色体实验报告一、实验目的与实验要求1、掌握洋葱培养的方法，掌握利用秋水仙素诱导植物多倍体的方法。
2、掌握洋葱根尖制片的方法，复习染色、压片的基本操作。
3、通过对于有丝分裂相的观察，统计洋葱染色体数目，加深对于细胞有丝分裂过程的理解。
4、对比进行多倍体诱导前后的洋葱根尖，理解四倍体与二倍体的区别，认识微核和植物细胞分裂期的各形态特征。
5、体验开放式实验教学，培养生物实验意识，提高学习的主动性、获取实验知识的能力和撰写实验报告水平。
二、实验方案1、实验仪器显微镜、载玻片、盖玻片、试管、烧杯、小塑料管、滤纸、刀片、解剖针、滤纸等2、实验药品新鲜、健康的洋葱鳞茎一个；0.02%秋水仙素、1mol/L HCl、醋酸洋红染液、卡诺氏固定液，碱性品红、乙酸，乙醇等。
3、实验原理(1)洋葱的根尖洋葱根尖的整体结构如右图，其中只有分生区的初生分生组织由于细胞始终处于持久而强烈的有丝分裂之中而作为我们的观察对象，其余部分在制片时都应当尽量剔除来保证观察效果。
(2)多倍体的诱导多倍体的诱导使用秋水仙素，秋水仙素可以阻止微管蛋白的聚合，从而使有丝分裂中期纺锤体不能正常形成，但是姐妹染色单体照常想成，只是没有被拉向两级，于是染色体数目加倍。
各步骤的作用：固定液可以迅速杀死细胞，保持细胞形态在有丝分裂相。
解离可以破坏细胞的胞间层（果胶），使细胞之间的联系变松散，有利于压片和染色。
漂洗可以洗去过量的盐酸，防止解离过度破坏细胞结构或影响染色效果（盐酸是酸性，而醋酸洋红是碱性染料）。
(3)有丝分裂完整的有丝分裂相包括G1期（合成前期）、S期（合成期）、G2期（合成后期）和M期（分裂期），其中G1期、S期和G2期合称间期，细胞完成DNA的复制以及有丝分裂的准备，而M期又可以分为前期、中期、后期和末期，为了形态观察的方便，本实验采用后一种分法。
如表一。
表一植物有丝分裂各时期特点4、实验步骤(1)将大蒜剥皮后放进垫了滤纸的培养基中，加入清水，放进25℃恒温培养箱中2~3天，催化大蒜生根。
遗传学实验——微核
本科生课程论文遗传学实验报告论文石河子大学生命科学学院二零一二年实验名称 紫外线对大蒜根尖分生区细胞核的影响组长 张礼春 学 号 2010506076组员 朱秉坚 学号 2010506089谭志刚 2010506044杨新 2010506062所在院系 生命科学学院专业班级 2010级生科(1)班指导教师 李桂芳日期 2012年11月28日紫外线对大蒜根尖分生区细胞核的影响摘要：以大蒜根尖分生区为材料，研究了紫外线对大蒜根尖分生区正在有丝分裂细胞的致畸效应。
结果表明，紫外线可使细胞核发生结构变异，在分裂间期出现微核、多核现象，分别在紫外线照射0min、15 min、25min、45min和65min 时观察各种畸变类型，且畸变率随着照射时间的加长而增高。
关键词：微核；紫外线；大蒜；畸变引言：细胞核畸变指细胞核形状大小以及核中染色体结构或数目的改变，在显微镜下可以观察和识别。
物理因素和化学因素都能诱发细胞核发生畸变，其中诱发细胞核最明显的畸变是细胞核呈微核和多核[1]。
微核（Micronucleus, 简称MCN），也叫卫星核，是真核类生物细胞中的一种异常结构，是在细胞有丝分裂间期细胞中的一种表现形式。
微核往往是各种理化因子，如辐射、化学药剂对分裂细胞作用而产生的，微核常应运于测试辐射损伤、辐射防护、化学诱变剂、新药试验、食品添加剂的安全评价，以及染色体遗传疾病和癌症前期诊断等各个方面[2]，所以对于研究微核具有极其重要的价值意义。
大蒜是研究微核的很好材料，大蒜在室温下3~5 天即可生根，根尖生长速度一致且生根较多[3]。
因此，在本研究中使用紫外线作为诱变剂，观察其在不同剂量的诱变剂下对大蒜根尖分生区细胞核的影响。
1 材料和方法选取个体较大，健壮无病虫害的大蒜，剥去老皮，放置于培养皿中，加蒸馏水浸没基部，每天换水2 次，室温下培养培养4天，直到根尖长到1.0cm~2.0cm 左右。
在上午11~12 时左右时，将大蒜及其根尖向上置于超净工作台上，用普通灭菌台中紫外灯进行照射，分别照射0min、15 min、25min、45min和65min。
大蒜根尖培养微核--洗发水
2.洗发水组实验数据视野1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 总数 微核率25 1 2 1 0 1 4 1 1 1 0 12 12‰ 50 1 2 2 2 1 1 4 1 2 4 20 20‰ 100 3 6 4 7 5 6 6 6 9 11 6363‰ 200 2 2 3 3 1 1 3 1 1 3 2020‰ 4002 1 1 0 4 13 0 2 2 16 16‰ 800 1 2 0 1 3 1 1 3 2 1 15 15‰对照 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 11‰浓度（g/L ）10×40 10×4010×40 10×40结果分析：1.由以上表格中的实验数据表明，在洗发水浓度为0~100g/L 时，大蒜根尖细胞产生微核的数量随洗发水浓度的升高而增加；当浓度到达100g/L时，微核数目相对较多；当浓度大于100g/L时，大蒜根尖细胞所产生的微核数有所降低。
由此可见，大蒜根尖细胞产生微核的数目对诱导剂（洗发水）具有最适浓度，其范围在50~200g/L之间。
2.由空白组和实验组相比较可知，正常情况下，大蒜根尖细胞产生的微核数几乎为0，而在一定浓度的诱导剂（洗发水）作用下，可导致其产生不同数目的微核。
观察实验最后三组数据易知，在洗发水浓度分别为200g/L、400g/L、800g/L时，其产生的微核数大致相等。
故可推断在这段浓度范围内，其对大蒜根尖细胞的影响效力大致相同。
讨论1.因为实验只设置了6个实验组，浓度梯度有限，所以未能准确找到影响大蒜根尖细胞产生微核的最适浓度。
可在50~200g/L浓度范围之间设置更小的浓度梯度继续实验，找出影响大蒜根尖细胞微核产生的最佳浓度。
2.由实验后三组数据可推测当洗发水浓度超过800g/L后，细胞产生微核的数目会降低至0。
因为当诱导剂（洗发水）浓度很大时，会导致大蒜根尖细胞死亡，此时细胞就不会产生微核。
可设置更高浓度的实验组进行实验验证。
大蒜实验报告观察根尖
一、实验目的1. 学习和掌握制作临时装片的技能。
2. 观察大蒜根尖细胞有丝分裂的过程，了解细胞分裂的各个阶段。
3. 熟悉显微镜的使用方法。
二、实验原理细胞有丝分裂是细胞生命周期中的一个重要过程，通过观察细胞有丝分裂，可以了解细胞分裂的各个阶段及其特点。
大蒜根尖细胞具有分裂能力，可以用来观察细胞有丝分裂过程。
三、实验材料1. 大蒜根尖2. 显微镜3. 龙胆紫溶液4. 盐酸酒精混合液5. 生理盐水6. 刮刀7. 玻片8. 载玻片9. 吸水纸四、实验步骤1. 准备根尖：将大蒜根尖用刮刀刮取2-3mm，放入盛有生理盐水的玻璃皿中。
2. 解离：将根尖放入盛有盐酸酒精混合液的玻璃皿中，室温下解离3-5分钟。
3. 漂洗：将解离后的根尖用生理盐水漂洗2-3次。
4. 染色：将漂洗后的根尖放入盛有龙胆紫溶液的玻璃皿中，染色3-5分钟。
5. 制片：将染色后的根尖用吸水纸吸去多余的水分，将根尖放在载玻片上，用刮刀轻轻刮取根尖细胞，制成临时装片。
6. 观察：将临时装片放在显微镜下，先用低倍镜观察，找到合适的细胞，再换用高倍镜观察细胞有丝分裂的各个阶段。
五、实验结果与分析1. 解离：盐酸酒精混合液可以杀死细胞，并使细胞散开，便于观察。
2. 漂洗：漂洗可以去除细胞中的杂质，提高观察效果。
3. 染色：龙胆紫溶液属于碱性染料，可以将染色体着色，便于观察。
4. 制片：临时装片的制作要均匀、薄，避免影响观察。
5. 观察：通过观察大蒜根尖细胞有丝分裂的各个阶段，可以了解到细胞分裂的过程，包括前期、中期、后期和末期。
（1）前期：细胞核开始缩小，染色体逐渐凝聚，成为染色体。
（2）中期：染色体排列在细胞中央，形成赤道板。
（3）后期：染色体分离，向细胞两极移动。
（4）末期：染色体到达细胞两极，细胞开始分裂。
六、实验结论通过观察大蒜根尖细胞有丝分裂，我们了解了细胞分裂的各个阶段及其特点。
实验结果表明，盐酸酒精混合液、漂洗、染色和制片等步骤对观察效果有重要影响。
毒理学大蒜根尖染色体观察.
微核试验一、研究的目的与意义：1：知道微核产生的原理。
2：学会识别微核以及计算微核率。
3：学用微核试验来评价药物、放射线、有毒物质等对人体细胞或体外培养细胞遗传学损伤。
4：了解不同化学试剂对细胞各个分裂期的影响。
由于大量新的化合物的合成，原子能应用，各种各样工业废物的排出，使人们很需要有一套高度灵敏，技术简单的测试系统来监视环境的变化。
真核测试系统能直接推测诱变物质对人类或其它高等生物的遗传危害。
利用微核实验这种遗传毒性试验方法可以检测检测染色体或者有丝分裂器损伤，计数细胞的微核率。
检测已存在或潜在的危害。
二、研究内容与技术路线2.1 研究内容：通过观察不同浓度的1,2,4-三氯苯和铬以及它们的交互作用对大蒜根尖细胞微核率以及不同分裂期细胞的比例的影响，来判断其遗传毒性。
2.2 技术路线：冷冻保存24h孚尔根染液配制三、实验方法3.1实验材料大蒜、甲醇、冰乙酸、碱性品红、偏重亚硫酸钠、比重1.18的浓盐酸、蒸馏水、酒精、重铬酸钾、氯苯、丙酮、显微镜、载玻片、盖玻片、定性滤纸、烧杯、100毫升容量瓶、200毫升容量瓶、镊子、刀片、纱布、青霉素小瓶、移液管、试管3.2试剂准备：1、1mol/LHCl：用10mL 移液管量取8.69mL 浓盐酸加入100mL 容量瓶，用在蒸馏水定容至100mL 。
2、50mg/L、100mg/L、：称取170mg 重铬酸钾，加水溶解，在200mL 容量瓶中定容，配制300mg/L的Gr 6+母液，然后稀释到50mg/L、100mg/L。
3、卡诺式固定液：将甲醇：冰乙酸按3:1比例混合配制5、Schiff 氏试剂：称取0.5g 碱性品红加入到100mL 煮沸的蒸馏水中，时时振荡，继续煮5min ，使碱性品红充分溶解。
冷却致50℃，用滤纸过滤，滤液中加入10ml1mol/LHCl，冷却致25℃，加入1.5g 偏重亚硫酸钠，充分振荡，塞紧瓶塞，在室温暗处静置至少24h ，用粗滤纸过滤于棕色瓶中，封瓶塞，外包黑纸。
11.30遗传—大蒜根尖诱导微核实验
姓名系年级学号科目遗传学实验题目大蒜根尖诱导微核实验组别周三诱变物质的微核检测技术摘要微核体检测是一种对环境中诱变物质进行评估的快速而简便的方法，被广泛应用于很多行业。
此次实验，利用自主选定的化学制剂培养大蒜根尖，后通过观察根尖中的微核体来检测此试剂的诱变能力，了解了微核检测的方法和意义，掌握了一项评价环境中常见物质诱变情况的技术。
1.引言微核是细胞在间期时，染色体发生断裂，在进入下一次分裂时，染色体片段不能随有丝分裂进入子细胞，而在细胞浆中形成直径小于主核的、与主核分开的微小核，主要由外界损害因素（生物、物理、化学因素）对细胞的作用形成的。
19世纪末，Howell与Jolly分别在猫和大鼠外周血中发现一种小体，命名为Howell-Jolly小体，并且发现这种小体也存在于恶性贫血患者外周血中。
这一小体便是今日被称之为微核的小体。
1959年，Evans等将蚕豆根端细胞暴露在电离辐射下，观察到辐射诱导微核形成效应，并据此间接推断微核来源于辐射诱导的染色体异常。
这篇文献便是以微核发生率反映染色体异常来评价遗传毒性的第一篇报道。
作者认为约60%染色体断片与微核形成直接相关。
1970，年Boiler和Sehmid以中国金黄地鼠为材料，观察了抗肿瘤药三亚胺给予后，骨髓与外周血细胞学的变化，并且提出用本来无核的外周血嗜多染红细胞中的微核发生率来作为微核试验的基本指标，并正式命名为微核实验。
70年代初，Matter和Schmid首先用啮齿类动物骨髓细胞微核率来测定疑似有诱变活力的化合物，建立了微核测定法。
此后至70年代中期，Sehmid以及Heddle研究小组的工作，全面奠定了微核实验的理论及应用基础。
近年来，由于大量新的化合物的合成，原子能的应用，各种各样工业废物的排出，日常生活中人类接触到的有潜在遗传毒性的物质越来越多，微核实验的重要性也就随之突显出来。
微核实验技术简单易行且灵敏，目前国内外不少部门已把微核测试用于辐射损伤、辐射防护、化学诱变剂、新药试验、食品添加剂的安全评价，以及染色体遗传疾病和癌症前期诊断等各个方面2.实验材料及方法2.1实验材料2.1.1试验材料大蒜。
硫酸铜对大蒜根尖细胞微核效应的实验
硫酸铜对大蒜根尖细胞微核效应的研究一、原理微核(micronuclei)简称MCN,是真核类生物细胞中的一种异常结构，往往是细胞经辐射或化学药物的作用而产生的。
在细胞间期，微核呈圆形或椭圆形，游离于主核之外，大小应有主核1/3以下。
微核的折光率及细胞化学反应性质和主核一样，也具合成DNA的能力。
一般认为微核是由有丝分裂后期丧失着丝粒的断片产生的，整条染色体或几条染色体也能形成微核。
二、步骤：1、大蒜幼根的培养：提前3~5天进行培养，将大蒜瓣剥去外边膜质枯皮，下端可见许多微微凸起的根原体，将蒜瓣架在烧杯（大小与蒜瓣适宜）口上，杯中盛满清水，使蒜瓣的下部浸入水中，置温暖处，注意每天换水，经3~5天后，即可长出1-2cm的嫩根。
2、处理根尖：每组选择6-8粒发芽良好的种子，用配制好的不同浓度的硫酸铜溶液（（（（1g/L、、、、5g/L、、、、10g/L））））染毒处理6小时后（使根尖完全浸入处理水样中，）取出后用蒸馏水冲洗（3次,每次2-3分钟），并移至蒸馏水中修复培养24小时（蒸馏水浸住根尖）。
，对照用自来水处理，处理时间24h。
3、恢复培养：处理后的根尖用自来水浸洗3次，每次2-3min，洗净后在水中恢复培养24h。
4、固定：用甲醛：冰醋酸（3：1）固定液固定24h后弃去固定液，或换入70％酒精中保存。
5、酸解：弃去固定液，用清水漂洗2-3次，吸净水，加入6M盐酸，于室温解离10min，弃去盐酸，漂洗根尖2-3次，彻底洗净盐酸。
6、染色：截下1-2mm长的根尖，滴加石炭酸品红染液，染色10min，加盖玻片，压片观察。
三、理论补充1、微核是无着丝点的染色体断片，在有丝分裂后期不能向两极移动，所以游离于细胞质中，在间期细胞核形成时，即可在它附近看到一到几个很小的圆形结构，直径大约是细胞直径的1／20－1／5，这就是微核（micronucleus）。
微核是常用的遗传毒理学指标之一，指示染色体或纺锤体的损伤。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
大蒜根尖微核试验
摘要
微核简称(MCN)，是真核生物细胞中的一种异常结构，往往是细胞经辐射或化学药物的作用而产生。
本实验我们用生活中和实验室里的多种诱变剂来处理大蒜根尖细胞，通过压片镜检来观察统计大蒜分生区细胞内微核的数目，检测不同诱变剂的诱变强度。
前言
微核简称(MCN)，是真核生物细胞中的一种异常结构，往往是细胞经辐射或化学药物的作用而产生。
在细胞间期微核呈圆形或椭圆形，游离于主核之外、大小应在主核1／3以下。
微核的折光率及细胞化学反应性质和主核一样。
一般认为微核是由有丝分裂后期丧失着丝粒的断片产生的，但有些实验也证明整条的染色体或多条染色体也能形成微核。
这些断片或染色体在细胞分裂末期被两个子细胞核所排斥便形成了第三个核块。
已经证实微核率的大小是和用药的剂量或辐射累积效应呈正相关，这一点和染色体畸变的情况一样。
所以可用简易的间期微核计数来代替繁杂的中期畸变染色体计数。
由于大量新的化合物的合成，原子能应用，各种各样工业废物的排出，使人们很需要有一套高度灵敏，技术简单的测试系统来监视环境的变化。
只有真核的测试系统更能直接推测诱变物质对人类或其它高等生物的遗传危害，在这方面，微核测试是一种比较理想的方法。
且有研究显示以植物进行微核测试与以动物进行的一致率可达99%以上。
目前微核测试已经广泛应用于辐射损伤、辐射防护、化学诱变剂、新药试验、染色体遗传疾病及癌症前期诊断等各方面。
材料与方法
材料
1实验器具：显微镜、解剖针、盖玻片、载玻片、培养皿
2实验试剂：改良苯酚品红染液、浓盐酸、叠氮化钠、清水、2%迪彩防干枯洗发液、2%驱蚊剂、0.2%NaNO2、1%氧氟沙星
3实验材料：大蒜根尖
方法
1将大蒜浸水催根
将剥皮的大蒜放入培养皿中，倒入清水使大蒜根部没入水中，置于25℃下培养24小时，待初生根长出1-2cm左右，根毛发育良好，即可用来检测。
2处理
将培养皿中的清水倒出，将事先准备好的4种诱变剂及阴性（清水）、阳性（叠氮化钠）对照倒入培养皿中，注意标记准确，使各种诱变剂完全浸泡根尖。
大蒜根尖处理24h后，将诱变剂及阴性、阳性对照换成清水后恢复培养24h。
3固定根尖细胞
将恢复后的大蒜从根尖顶端切下1cm长的幼根放入离心管中，以卡纳氏固定液进行固定2-24h后，保存于70%乙醇溶液中。
4压片
将离心管中的液体倒出，加入足够的浓盐酸解离3-5min，再用蒸馏水洗涤3次（每次1-2min）。
从根尖处切下约0.5mm置于载玻片上，滴加苯酚品红染色15min后，盖上盖玻片，包两层滤纸，用镊子钝部按压至根尖散成云雾状。
5镜检
将装片放于显微镜下观察，记录经每种诱变剂处理的细胞中含有微核的细胞率及每个细胞微核的平均数目。
（至少观察100个细胞）
结果
讨论
由上表可知，阳性对照微核数最多，诱变能力最强。
另外选用的0.2%NaNO2微核数也较多，诱变力较高。
所以叠氮化钠和亚硝酸钠都是强的诱变剂。
其他实验材料与阴性对照清水一致，均未发现微核，表示这些材料没有诱变能力，较安全。
所以在以后的生活中要尽量避免接触叠氮化物和亚硝酸盐。
参考文献
植物微核实验
植物微核实验Ⅱ。