大蒜根尖染色体观察实验.
霉素小瓶中,加入卡诺氏固定液固定3个小时,然后放入4°C冰箱内保存,以
备使用。
(6取出部分经过固定的根尖先用酒精和清水洗涤,加入1mol/L HCL覆
盖根尖,放入60摄氏度水浴锅内水浴加热7~10分钟,取出用清水洗涤3次, 每次5分钟。
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4、实验步骤
(1将大蒜剥皮后放进垫了滤纸的培养基中,加入清水,放进25°C恒温
培养箱中2~3天,催化大蒜生根。
(2选择根长0.5~1cm且不定根生长情况差不多的大蒜分为10组。(3在大蒜生 根之后,先选取一些根尖放进卡诺式固定液中固定3个小时,
5、体验开放式实验教学,培养生物实验意识,提高学习的主动性、获取实验 知识的能力和撰写实验报告水平。
实验方案
1、 实验仪器
显微镜、载玻片、盖玻片、试管、烧杯、小塑料管、滤纸、刀片、解剖针、滤
纸等2、 实验药品
新鲜、健康的洋葱鳞茎一个;0.02%秋水仙素、1mol/L HCl、醋酸洋红染液、 卡诺氏固定液,碱性品红、乙酸,乙醇等。3、 实验原理(1洋葱的根尖
用Schiff氏试剂染色,镜检,观察染色体是否能染上色以及染色效果。若染色 效果不行,则重新配制Schiff氏试剂,直至染色效果良好,然后将其贮存于4C冰
箱中准备使用。
(4将分好组的大蒜分别用清水、50mg/L Gr6+、1 00mg/L Gr6+、150mg/L
Gr6+、30mg/L1 ,2,4-三氯苯、40mg/L1,2,4-三氯苯、50mg/L1,2,4-三氯苯、 浓度分别为50mg/L Gr6+和30mg/L1,2,4-三氯苯的混合液、100mg/L Gr6+和40mg/L1,2,4-三氯苯的混合液、150mg/L Gr6+和50mg/L1,2,4-三氯苯的混合液培养24小时。清水组为对照组。
表一植物有丝分裂各时期特点
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洋葱根尖的整体结构如右图,其中只有分生区的初生分生组织由于细胞始终处 于持久而强烈的有丝分裂之中而作为我们的观察对象,其余部分在制片时都应当尽 量剔除来保证观察效果。(2多倍体的诱导
多倍体的诱导使用秋水仙素,秋水仙素可以阻止微管蛋白的聚合,从而使有丝 分裂中期纺锤体不能正常形成,但是姐妹染色单体照常想成,只是没有被拉向两 级,于是染色体数目加倍。
各步骤的作用:固定液可以迅速杀死细胞,保持细胞形态在有丝分裂相。解离 可以破坏细胞的胞间层(果胶),使细胞之间的联系变松散,有利于压片和染色。 漂洗可以洗去过量的盐酸,防止解离过度
破坏细胞结构或影响染色效果(盐酸是酸性,而醋酸洋红是碱性染料)。(3
有丝分裂
完整的有丝分裂相包括G1期(合成前期)、S期(合成期)、G2期(合成后 期)和M期(分裂期),其中G1期、S期和G2期合称间期,细胞完成DNA的 复制以及有丝分裂的准备,而M期又可以分为前期、中期、后期和末期,为了形 态观察的方便,本实验采用后一种分法。如表一。
(7取出解离后的根尖,放在载玻片上,用刀片切下根尖乳白色的分生区
部分,滴加1滴Schiff氏试剂染色10分钟,然后盖上盖玻片,吸干染液,并 用镊子钝的一端在盖玻片上轻轻敲击,将细胞打散。(8将制备好的根尖放在显微 镜下观察,统计微核数目、以及有丝分裂间
期、前期、中期、后期、末期细胞数目并计算有丝分裂指数以及微核率。每组 浓度细胞计数400个
大蒜根尖染色体实验报告
实验目的与实验要求
1、掌握洋葱培养的方法,掌握利用秋水仙素诱导植物多倍体的方法。2、 掌
握洋葱根尖制片的方法,复习染色、压片的基本操作。
3、通过对于有丝分裂相的观察,统计洋葱染色体数目,加深对于细胞有丝分 裂过程的理解。
4、对比进行多倍体诱导前后的洋葱根尖,理解四倍体与二倍体的区别,认识 微察情况
图1前期
图2后期
图3末期
图4核崩解
图5微核
图6双核
2、数据记录情况
表2试验结果统计
分组
组别
细胞总数
50mg/L Cr6+
50mg/L Cr6++秋水仙素
大蒜根尖细胞多倍体观察与制片
大蒜根尖细胞多倍体观察与制片一.实验目的1.通过实验掌握人工诱导多倍体植物的方法和技术,观察多倍体的特点2.利用染色体分析的方法对多倍体细胞做出准确判断。
二.实验原理物种的基本特征之一:生物体的细胞核中都有相对稳定的染色体数目,这些染色体组成染色体组,或称基因组。
三.实验步骤1.取材:取大蒜(洋葱,蚕豆,小麦等)发根至0.5-1cm然后转入盛有0.15%秋水仙素水溶液的培养皿中继续培养24小时,待观察到根部有膨大时取出固定,与在水中培养的材料做对照2.固定:在卡诺固定液中固定24小时,移至70%乙醇中保存或备用3.解离:植物的分生组织如根尖、茎尖等需要经过处理以便除去细胞之间的果胶层并使细胞壁软化,经解离的组织才能使压片步骤顺利进行。
解离常用酸解法和酶解法。
①酸解法:固定后的材料用清水洗漆后用1MHCl在60°C水浴中恒温处理5-10min.在酸解过程中一定要掌握好温度和时间,若解离不够,则压片不是分散。
若解离太过,在下一步处理材料的由于材料过软而易丢失。
然后水洗3次。
②酶解法:用10-20g/L的果胶酶,或与10-50g/L的纤维素酶混合使用4.染色:切取根尖分生组织区,用改良苯酚品红染色15min5.压片:将染色后的材料盖上盖玻片,在盖玻片上盖上两层吸水纸,用一个双面刀片,插到盖片与载片之间的一角,用左手食指压紧盖片,防止滑动,用右手持解剖针,用针柄轻敲盖片,使材料均匀分散开。
然后将刀片轻轻撤出,再用针柄重敲盖片,使细胞分散压平。
一张制片好的细胞染色体制片至少符合如下条件:①在一张制片中应有较多的中期分裂相。
②染色体分散而不重叠。
③染色体不断裂、扭曲、有溢痕,随体清晰④染色体着色较深而细胞质不着色或着色很浅,背景清晰无过多杂质。
选择中期分裂相好的细胞观察,通过观察和计数中期染色体数目,确定细胞类型。
五.实验结果六.结果分析所制的片子好多细胞未破裂,有的染色体溢出,应该是压片不好所致,这样就导致所观察的染色体条数不对。
《观察植物细胞有丝分裂》实验报告
《观察植物细胞有丝分裂》实验报告组员:肖石连、周小燕、汪小康、邹苗执笔人:汪小康一、实验原理1.观察部位:植物体的根尖、茎尖等分生区的细胞。
2.分裂过程:高等植物细胞有丝分裂分为间期和分裂期的前期、中期、后期和末期,不同时期细胞染色体的行为变化有各自的特点.。
3.观察过程:先用低倍镜找到根尖生长点的细胞(正方形、排列紧密、有的正在分裂),再用高倍镜辨别各时期的染色体(染色质)变化,并判断该细胞处于有丝分裂的哪个时期。
4.染色过程:细胞核内的染色体容易被碱性染料(龙胆紫或醋酸洋红等)着色。
二、实验器材大蒜、显微镜、载玻片、盖玻片、培养皿、刀片、镊子、烧杯等15%的盐酸、95%的酒精、龙胆紫溶液等三、实验步骤1.前期培养:取大蒜若干放在装满清水的100ML烧杯上,让它的底部接触瓶内水面,把烧杯放在温暖地方培养。
2.解离:实验前一天,取大蒜根尖,使用卡诺氏固定液(乙醇:冰醋酸=3:1)进行24H固定,之后用蒸馏水冲洗,放入70%酒精中,在4℃冰箱中保存。
待到实验时即可进行解离处理。
取经过和未经过固定液处理的根尖各1-3个,剪根尖2CM,放入盛有15%盐酸和95%酒精1:1混合液的培养皿中并盖好(以防盐酸挥发),解离3~5min,此时根尖变得酥软透明。
3.漂洗:用镊子夹住伸长区一端,从培养皿中取出根尖,放到盛有清水的培养皿中漂洗2~3min,可用镊子或玻棒轻轻搅动。
4.染色:用镊子夹住伸长区一端,从培养皿中取出根尖,放到干净的载玻片中央,用刀片切去根尖大概0.5mm,紧贴刚刚切的位置切下针尖大小的根尖,此处即为根尖分生区。
利用准备好的染液进行染色,时间为3~5min。
5.压片:将被染上色的根尖盖上盖玻片(防止气泡产生),然后在盖玻片上放一层吸水纸,水平放在实验台上,用拇指稍用力对其按压,使根尖细胞呈云雾状散开,此时再把盖玻片周围染液吸拭干净即可。
6.观察:先用低倍镜观察,找到分生区细胞(体积小、排列紧密、整齐、近似正方形,有的细胞正在分裂)。
大蒜核型分析
实验二植物染色体组型分析一、实验目的1. 学习并掌握根尖处理、染色、压片及制片观察的方法。
2. 观察有丝分裂各时期染色体的形态变化,了解有丝分裂全过程。
3.观察分析植物细胞有丝分裂中期染色体的长短、臂比和随体等形态特征;学习染色体组型分析的方法。
二、实验原理植物根尖的分生细胞的有丝分裂,每天都有分裂高峰时间,此时把根尖固定,经过染色和压片,再置放在显微镜下观察,可以看到大量处于有丝分裂各时期的细胞和染色体。
各种生物染色体的形态、结构和数目都是相对稳定的。
每一细胞内特定的染色体组成叫染色体组型。
染色体组型分析就是研究一个物种细胞核内染色体的数目及各种染色体的形态特征,如对染色体的长度、着丝点位置、臂比、随体有无等观测,从而描述和阐明该生物的染色体组成,为细胞遗传学、分类学和进化遗传学等研究提供实验依据。
染色体组型分析大都采用植物根尖等分生组织的有丝分裂中期细胞,染色体制片要求分裂相为染色体分散,互不重叠,能清楚显示着丝点位置。
然后通过显微摄影,测量放大照片上的每个染色体的长度和其它形态特征,依次配对排列,编号,并对各对染色体的形态特征作出描述。
三、实验材料1.材料:大蒜2.用具:载玻片,盖玻片,50ml烧杯,温度计,恒温水浴锅,试剂瓶,镊子,解剖针,吸水纸,剪刀,绘图,纸胶水等。
3.药品:Carnoy固定液,无水酒精,70%酒精,1mol/L HCL解离液,苯酚品红染液四、方法与步骤(一)植物有丝分裂1、材料处理1)、大蒜发根将大蒜鳞茎置于盛有清水的小烧杯口上发根,待根长到1.5-2.0 cm左右时备用(在此过程注意换水)。
2)、根尖预处理在分裂高峰期前(大蒜根尖分裂高峰期为早上八点以及下午两点左右),剪下根尖,置于盛有少量蒸馏水的烧杯并放入冰箱(0—4 ℃)中预处理24h。
预处理的作用,主要是阻碍纺锤丝的形成,使染色体缩短,改变细胞质的粘度,在压片时,有利于染色体的分散。
2、材料固定经过预处理的根尖,再放到Carnoy液中固定24h以内。
大蒜根尖诱导多倍体观察实验报告
大蒜根尖染色体观察实验报告高熹168615140001实验目的:1、了解利用秋水仙素诱导植物多倍体的方法。
2、掌握大蒜根尖制片的方法。
3、通过对玻片的观察,统计染色体数目。
4、对比不同的大蒜根尖染色体数目,理解二倍体和四倍体的区别。
实验背景:在自然条件下,机械损伤,射线辐射,温度骤变,及其它一些化学因素刺激,都可以使植物材料的染色体加倍,形成多倍体种群。
近几十年来,随着人们对多倍体诱导机制研究的深入,由人工模拟自然条件来诱导多倍体植物获得了长足进展,形成了不少由价值的人工多倍体种群。
实验原理:用秋水仙素溶液处理植物的种子或幼苗,是常用的人工诱导多倍体的有效方法。
秋水仙素是从百合科秋水仙属的一个种,秋水仙的种子及器官中提取出来的一种生物碱,其分子式为C22H25NO6,秋水仙素可以阻止微管蛋白的聚合,从而使有丝分裂中期纺锤体不能正常形成,但是姐妹染色单体照常想成,只是没有被拉向两级,于是染色体数目加倍。
当药剂的作用消除后,由于多倍体细胞继续分裂,便得到多倍体组织,以后则产生新的多倍体植株。
实验器材:刀片,镊子,双目显微镜,载玻片,盖玻片,烧杯,滤纸。
实验材料:经秋水仙素处理过的大蒜根。
(秋水仙素溶液配制取秋水仙素1g(先用少量95%乙醇助溶),溶于250~500ml蒸馏水中,配成浓度为0.2~0.4%的溶液,冰箱中保存。
将大蒜架在盛水的烧杯中进行水培。
待根尖长到1cm时,将大蒜盛在0.4%秋水仙素溶液的瓶盖或小烧杯上,避光处理24小时,然后再水培24小时加倍后根尖很肥大。
)实验试剂:1mol/L的HCl溶液,改良苯酚品红溶液。
实验步骤:1、取2-4根大蒜根放入烧杯中,加入1mol/L的HCl浸没,60℃水域水解5min。
2、弃掉HCl,自来水冲洗大蒜根三次,冲洗干净表面的HCl。
3、在载玻片上切下2-3mm的根尖,用纸吸去多余的水分,在载玻片上用刀片切碎根尖,滴加1滴改良苯酚品红溶液,染色15min。
多倍体鉴定实验报告
一、实验目的1. 掌握化学诱导植物多倍体的原理和方法。
2. 学习利用秋水仙素诱导植物多倍体的一般方法及多倍体诱导在植物育种上的意义。
3. 学习利用细胞学方法观察鉴定多倍体的特点及诱导染色体加倍后的细胞学表现。
4. 利用染色体分析的方法对多倍体的细胞做出准确判断。
二、实验原理生物体的细胞核中都有相对稳定的染色体数目,这是物种的基本特征之一。
多倍体是指细胞中具有3个或3个以上的染色体组的生物体。
在植物育种上,利用多倍体可以改良作物的经济性状,同时还可以利用多倍体克服远缘杂交过程中的障碍。
秋水仙素是一种常用的化学诱导剂,可以抑制细胞有丝分裂过程中纺锤体的形成,使子染色体不能移向两极,从而诱导植物产生多倍体。
在适宜浓度的秋水仙素作用下,细胞经一定时期后仍可恢复正常,继续分裂,只是染色体数目加倍成为多倍性细胞。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:大蒜根尖分生组织区2. 试剂:0.2%秋水仙素溶液、卡诺氏液、改良苯酚品红染液、盐酸酒精溶液3. 仪器:显微镜、载玻片、盖玻片、吸管、滴管、酒精灯、烧杯、剪刀、镊子、培养皿四、实验步骤1. 将大蒜根尖分生组织区剪取约0.5cm,放入装有0.2%秋水仙素溶液的培养皿中,处理48小时。
2. 将处理后的根尖用蒸馏水清洗3次,放入装有卡诺氏液的培养皿中固定30分钟。
3. 将固定后的根尖用蒸馏水清洗3次,放入装有盐酸酒精溶液的培养皿中解离10分钟。
4. 将解离后的根尖用蒸馏水清洗3次,放入装有改良苯酚品红染液的培养皿中染色10分钟。
5. 将染色后的根尖用蒸馏水清洗3次,制成临时装片。
6. 在显微镜下观察染色体的形态和数目,记录观察结果。
7. 将观察结果进行统计分析,判断多倍体诱导率。
五、实验结果与分析1. 实验结果在显微镜下观察,部分大蒜根尖细胞染色体数目加倍,形成多倍体细胞。
染色体数目加倍现象主要出现在有丝分裂中期。
2. 分析通过实验,我们成功利用秋水仙素诱导了大蒜根尖分生组织区的多倍体。
植物多倍体的诱发和鉴定
植物多倍体的诱发和鉴定一、实验目的通过实验,进一步了解人工诱导多倍体的原理,并初步掌握用秋水仙素诱发多倍体的一般方法及细胞学鉴定。
二、实验原理染色体是遗传物质的主要载体。
每一个物种都具有特定的形态特征。
各个物种细胞内染色体的数目都是相对恒定的,这是一个重要的生物学特征。
染色体数目和结构的改变,将会导致生物性状的改变。
遗传学中把二倍体生物配子中所具有的染色体成为一个染色体组,通常用n来表示。
而一个染色体组中包含的染色体数目成为染色体基数,用x表示。
同一个染色体组的各个染色体的形态、结构和连锁基因群都彼此不同,但它们构成一个完整而协调的体系。
细胞中染色体数目的变异类型有两类:整倍体变异和非整倍体变异。
整倍体变异指体细胞中染色体数目按染色体组的基数(x)成倍数增加或减少的现象。
具有两套染色体组的生物体成为二倍体,体细胞中含有三个或三个以上染色体组的整倍体为多倍体。
多倍体按其来源可以分为:同源多倍体和异源多倍体,同源多倍体是指具有三个或三个以上相同染色体组的细胞或个体:异源多倍体是体细胞中含有两个以上不同类型染色体组的多倍体。
自然界中的多倍体主要存在于植物中,动物中的多倍体很少。
多倍体可以在自然条件卞产生,也可以人工诱导形成。
人工诱导多倍体通常采用物理方法和化学方法。
物理方法有高温、低温、超声波、嫁接和切断等,化学方法是使用秋水仙素、异生长素、蔡骈乙烷来诱导多倍体。
在诱导多倍体的方法中,以应用化学药剂更为有效,其中以秋水仙素效果最好,使用广泛。
秋水仙素阻碍有丝分裂中细胞纺锤体的形成,这样细胞不能分离,产生染色体加倍的核。
本实验用适当浓度的秋水仙素处理洋葱或大蒜根尖,待根尖膨人后制片观察,可诱发多倍体。
三、实验材料大蒜根尖四、实验方法与步骤(一)根尖多倍体的诱发将人蒜去掉老根,置于盛水的培养皿上,25°C条件卞培养发根,待不定根长出1cm时取出洗净,把水晾干后移到0.1%秋水仙素溶液中,根尖朝下,使根部浸没在药液中,于10°C 培养箱中低温培养,直到根尖膨大为止。
大蒜根尖染色体观察实验
大蒜根尖染色体实验报告一、实验目的与实验要求1、掌握洋葱培养的方法,掌握利用秋水仙素诱导植物多倍体的方法。
2、掌握洋葱根尖制片的方法,复习染色、压片的基本操作。
3、通过对于有丝分裂相的观察,统计洋葱染色体数目,加深对于细胞有丝分裂过程的理解。
4、对比进行多倍体诱导前后的洋葱根尖,理解四倍体与二倍体的区别,认识微核和植物细胞分裂期的各形态特征。
5、体验开放式实验教学,培养生物实验意识,提高学习的主动性、获取实验知识的能力和撰写实验报告水平。
二、实验方案1、实验仪器显微镜、载玻片、盖玻片、试管、烧杯、小塑料管、滤纸、刀片、解剖针、滤纸等2、实验药品新鲜、健康的洋葱鳞茎一个;0.02%秋水仙素、1mol/L HCl、醋酸洋红染液、卡诺氏固定液,碱性品红、乙酸,乙醇等。
3、实验原理(1)洋葱的根尖洋葱根尖的整体结构如右图,其中只有分生区的初生分生组织由于细胞始终处于持久而强烈的有丝分裂之中而作为我们的观察对象,其余部分在制片时都应当尽量剔除来保证观察效果。
(2)多倍体的诱导多倍体的诱导使用秋水仙素,秋水仙素可以阻止微管蛋白的聚合,从而使有丝分裂中期纺锤体不能正常形成,但是姐妹染色单体照常想成,只是没有被拉向两级,于是染色体数目加倍。
各步骤的作用:固定液可以迅速杀死细胞,保持细胞形态在有丝分裂相。
解离可以破坏细胞的胞间层(果胶),使细胞之间的联系变松散,有利于压片和染色。
漂洗可以洗去过量的盐酸,防止解离过度破坏细胞结构或影响染色效果(盐酸是酸性,而醋酸洋红是碱性染料)。
(3)有丝分裂完整的有丝分裂相包括G1期(合成前期)、S期(合成期)、G2期(合成后期)和M期(分裂期),其中G1期、S期和G2期合称间期,细胞完成DNA的复制以及有丝分裂的准备,而M期又可以分为前期、中期、后期和末期,为了形态观察的方便,本实验采用后一种分法。
如表一。
表一植物有丝分裂各时期特点4、实验步骤(1)将大蒜剥皮后放进垫了滤纸的培养基中,加入清水,放进25℃恒温培养箱中2~3天,催化大蒜生根。
植物多倍体的诱导及细胞学鉴定
植物多倍体的诱导及细胞学鉴定实验时间:4月6日摘要一个物种细胞中染色体形态结构和数目的恒定性是这个种的重要特征。
我们把二倍体个体中能维持配子或配体正常功能的、最低数目的一套染色体称为染色体组或基因组。
当生物体内细胞染色体组数达到3组或3组以上者,称为多倍体。
多倍体在植物进化中有很重要的意义。
本实验利用大蒜作为试验材料,利用秋水仙素诱导,使生长出多倍体根尖。
然后通过制作大蒜根尖压片,观察染色体的数目,以鉴定大蒜根尖细胞是否为多陪细胞。
(本实验报告主要从多倍体的鉴定方面展开,而多倍体培育方面,将在下次报告中给出。
)1.引言生物体的细胞核中都有相对稳定的染色体数目,这是物种的基本特征之一。
遗传学中,将二倍体生物一个配子的染色体总和称为染色体组,也叫基因组,用n表示。
以下是几种常见模式生物的染色体组数目:玉米,2n=20;拟南芥,2n=10;果蝇,2n=8;小鼠,2n=40;水稻,2n=24。
又如,小麦染色体组可表示为2n=6x=42。
其中x表示每一个染色体组的染色体数,称为染色体基数,它是物种演化过程中的染色体倍数性的关系。
多倍体是指细胞中具有3个或3个以上染色体组的细胞或个体,而多倍体可以分为:同源多倍体(具有3个以上相同染色体组的细胞或个体,且染色体组来源于同一物种(AAA,AAAA))、异源多倍体(具有3个以上染色体组且染色体组来源于不同物种,通常由不相同的种杂交的杂种再经过染色体加倍而来(AABB,AABBDD))。
在自然界中许多植物都是多倍体,大约有30%~35%的被子植物,其中70%的禾本科植物属于多倍体,它们在植物进化中起了重要的作用,也是植物发生变异的重要途径之一。
多倍体植物,一般被认为是适应恶劣自然环境的结果,如我国西南部地区,温度变化激烈,紫外线辐射强,许多植物产生了多倍体类型。
在自然界中,大多是因为温度骤变,导致细胞分裂时染色体不分离,从而形成了多倍体。
植物多倍体有许多特性,其中一些特性也为农业经济发展提供了帮助。
观察根尖分生组织细胞有丝分裂
5.对洋葱根尖分生区细胞的正确描述是
A. 既小且方 B. 形态不规则
A
C. 细胞已经开始分化
D. 无间期细胞
6、在“观察根尖分生组织细胞的 有丝分裂”实验中,以下操作
B
和结论正确的是
• A.剪取5cm根尖,用酒精和吡 罗红混合液解离染色
• B.右图是高倍显微镜下调解细 准焦螺旋看到的视野
的分布。 (2)人的 口腔上皮细胞可用于观察 线粒体及
DNA和RNA在细胞内的分布情况,而观察 细胞减 数分裂 时则选用动物的精巢细胞作为实验材料。
(3)观察叶绿体时常选用藓类的叶,因为 藓类 植物的叶片薄而小,常是一层细胞,叶绿体清楚,易
于观察和操作。
8、染色剂的使用
试剂 甲基绿 吡罗红或派 洛宁染液
被染成分 DNA
RNA
健那绿
线粒体
龙胆紫 醋酸洋红
染色体
呈现颜色 绿色
红色
蓝绿色 紫色 红色
9、小鼠常被用作研究人类遗传病的模式动物。请填充观察小 鼠细胞减分裂的实验步骤: 供选材料及试剂:小鼠的肾脏、睾丸、肝脏,苏丹Ⅲ染液、 醋酸洋红染液、詹纳斯绿B(健那绿)染液,解离固定液。 取材:用(__小__鼠__)__睾__丸__作实验材料 制片:①取少量组织低渗处理后,放在_解__离__固__定__液___溶液中 ,一定时间后轻轻漂洗。 ②将漂洗后的组织放在载玻片上,滴加适量__醋__酸__洋__红__染__液。 ③一定时间后加盖玻片,___压__片_______。
2、碱性染料(龙胆紫溶液或醋酸洋红液)能将染色 体(或染色质)染成深色。
3、盐酸使植物细胞之间的果胶质层松散,用盐酸处 理植物的根尖,可以使根尖细胞彼此容易分离。
大蒜根尖染色体观察实验.
大蒜根尖染色体实验报告一、实验目的与实验要求1、掌握洋葱培养的方法,掌握利用秋水仙素诱导植物多倍体的方法。
2、掌握洋葱根尖制片的方法,复习染色、压片的基本操作。
3、通过对于有丝分裂相的观察,统计洋葱染色体数目,加深对于细胞有丝分裂过程的理解。
4、对比进行多倍体诱导前后的洋葱根尖,理解四倍体与二倍体的区别,认识微核和植物细胞分裂期的各形态特征。
5、体验开放式实验教学,培养生物实验意识,提高学习的主动性、获取实验知识的能力和撰写实验报告水平。
二、实验方案1、实验仪器显微镜、载玻片、盖玻片、试管、烧杯、小塑料管、滤纸、刀片、解剖针、滤纸等 2、实验药品新鲜、健康的洋葱鳞茎一个;0.02%秋水仙素、1mol/L HCl、醋酸洋红染液、卡诺氏固定液,碱性品红、乙酸,乙醇等。
3、实验原理 (1 洋葱的根尖洋葱根尖的整体结构如右图,其中只有分生区的初生分生组织由于细胞始终处于持久而强烈的有丝分裂之中而作为我们的观察对象,其余部分在制片时都应当尽量剔除来保证观察效果。
(2 多倍体的诱导多倍体的诱导使用秋水仙素,秋水仙素可以阻止微管蛋白的聚合,从而使有丝分裂中期纺锤体不能正常形成,但是姐妹染色单体照常想成,只是没有被拉向两级,于是染色体数目加倍。
各步骤的作用:固定液可以迅速杀死细胞,保持细胞形态在有丝分裂相。
解离可以破坏细胞的胞间层(果胶),使细胞之间的联系变松散,有利于压片和染色。
漂洗可以洗去过量的盐酸,防止解离过度破坏细胞结构或影响染色效果(盐酸是酸性,而醋酸洋红是碱性染料)。
(3 有丝分裂完整的有丝分裂相包括G1期(合成前期)、S 期(合成期)、G2期(合成后期)和M 期(分裂期),其中G1期、S 期和G2期合称间期,细胞完成DNA 的复制以及有丝分裂的准备,而M 期又可以分为前期、中期、后期和末期,为了形态观察的方便,本实验采用后一种分法。
如表一。
表一植物有丝分裂各时期特点4、实验步骤(1 将大蒜剥皮后放进垫了滤纸的培养基中,加入清水,放进25℃恒温培养箱中2~3天,催化大蒜生根。
