3-1杂质的来源与杂质检查方法
杂质检查(节)
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第一节 概述
一、杂质检查的意义 中药制剂的杂质一般是
指无医疗作用且能影响制剂 质量的或对人体产生危害作
用的物质。
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《中国药典》2005年版 对杂质检查作出重大修订, 收载了原子吸收分光光度法、 电感耦合等离子体质谱法等 先进技术,对重金属、砷盐 等危害人体健康的杂质进行 检测；增加了有机磷类农药、 除虫菊酯类农药残留量的检 查项目。使杂质检查的整体 水平和质量得到显著的提高。
从广义来说，制剂中的致病菌、热原等亦属杂质范畴，
应根据药品标准对它们进行检查。 11
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档 四、杂质检查的方法
〈一〉杂质的限量检查 杂质限量是指药品中所含杂质的最大 允许量,通常用百分之几（%）或百万分
杂质 之几(限 mg/量 k杂 g、p质 p样 m 最 )表品示大 。量允1许0% 0量
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三、应用实例 (一)阿胶的总灰分测定 取阿胶5片,粉碎过二号筛,混合均匀后, 取供试品1.0g,将其炽灼至恒重的坩锅中 ，称定质量（准确至0.01g）,缓缓炽热,注 意避免燃烧,至完全炭化时逐渐升高温度至 500～600℃，使完全灰化并至恒重，继 续炽灼30min，称定灰分质量。计算供试 品重总灰分含量，不得超过1.0％。
V=L*S/C=2.5×10-5 × 1.0/1.0×10-5=2.5（
ml）
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例3注射用双黄连（冻干）中砷盐限量检查 取本品0.4g，加2%硝酸镁乙醇溶液3ml，点燃，燃尽后，先用 小火炽灼使炭化，再在500～600℃炽灼使完全灰化，放冷，加 盐酸5ml与水21ml使溶解，依法检查（中国药典2005版附录Ⅸ F）。 如果标准砷溶液（1µ gAs/ml）取用量为2ml，杂质限量的计算如下：
第三章 药物的杂质检查
四、杂质的限量及检查方法
（一）、杂质限量 药物中所含杂质的最大允许量，叫做杂质限量。通常 用百分之几或百万分之几（ppm）来表示。
（二）、杂质的限量检查方法
1、对照法 2、灵敏度法 3、比较法
1、对照法 不需要知道杂质的准确含量 计算公式：知道杂
杂质限量 = 杂质的最大允许量÷供试品的量×100% = 标准液浓度×体积÷供试品的量×100%
阿托品水解生成莨菪醇和莨菪酸； 麻醉乙醚氧化为醛和有毒的过氧化物。
三、杂质的分类
按来源分为一般杂质和特殊杂质； 按性质分为信号杂质和有害杂质。
来源
一般杂质是指在自然界中分布较广泛，在多种药物的 生产和贮藏过程中容易引入的杂质。
特殊杂质是指在个别药物的生产和贮藏过程中容易引 入的杂质。
性质
信号杂质一般无害，但其含量的多少可以反映出药物 的纯度水平，氯化物、 硫酸盐等就属于信号杂质。 有害杂质对人体有害，如重金属、砷盐、氰化物等， 在药品标准中必须严格控制。
(2) 供试品有微量Fe3+:
在弱酸性溶液中氧化硫化氢析出硫，产生混 浊影响比色，可加Vc或盐酸羟胺使Fe3+氧化 成Fe2+离子再检查。
第二法：炽灼残渣法
适用于含芳环、杂环以及不溶于水、 稀酸、乙醇及碱的有机药物。
1. 原理 对照法
500～600℃炽灼后的残渣，经处理后，依一法检查。
2. 操作方法
例如：硫酸阿托品中莨菪碱的检查： 本品溶液(50mg/ml)α＜- 0.4
（五）对光吸收性质的差异
1. 紫外分光光度法：
苯丙醇中苯丙酮的检查： 可利用供试液的吸收度比来控制杂质; 纯品苯丙醇A247nm/A258nm= 0.59;
99.5% 时A247nm/A258nm= 0.79; 因此规定供试品A247nm/A258nm ＜ 0.79; 即所含苯丙酮＜0.5%.
药物的杂质检查总结
热重曲线的纵坐标为质量(m)，横坐标 为温度(T)或时间(t)。
特点：准确测量物质的质量变化及变化速 度、样品用量少、速度快
本法适用于药物结晶水的测定和贵重 药物或在空气中极易氧化药物的干燥失重 分析。（例：硫酸铜脱去结晶水，教材 P113~114。）
有关物质：指药物中可能存在的原料、中 间体、副产物、异构体、聚合体和降解产 物等与药物结构相似或相关的一类物质的 总称。
按理化性质 有机杂质
无机杂质 残留溶剂
按其来源
工艺杂质（中间体、 副产物，未完全反 应的原料及试剂）
降解产物
从反应物及试剂混 入的杂质
药物的纯度与化学试剂的纯度
药物的纯度考虑杂质的生理作用，药 品只有两个等级：合格或不合格。
• （一）有机杂质的化学名称作为项目名称 • （二）杂质检查项目的确定 • （三）杂质限度的确定（不是越低越好） • （四）杂质检查方法的选择与验证
2、杂质的检测方法
• 1、化学方法 • 2、色谱法
– 薄层色谱：P106~P107，示例3-8、10、12、13 – HPLC：P108~P110，示例3-16、18等
L V c 100% S
Lppm
V S
c
106
例 色氨酸；教材P101，例3-1~3-4
供试品溶液体积 50ml 标准NaCl浓度 1ml相当于10mg的氯
计算色氨酸中氯的限量
L V c 100% 5 105 100% 0.02%
S
0.25
1-4、杂质研究规范 （教材P102，自学）
（一）原理 对照法
药物：Cl AgNO3 HNO3 AgCl白色浑浊
杂质检查方法的方法学验证各项指标分析
杂质检查方法的方法学验证各项指标分析姓名：王芳药物分析中药品检验基本程序包括：鉴别、检查、含量测定、写实验报告等步骤检查项下包括反映药品安全性有效性的试验方法和限度、均一性、纯度等制备工艺要 求等内容。
药物的杂质是指药物中存在的无治疗作用或者影响药物的稳定性、 疗效,甚至对 人体的健康有害的物质。
杂质的来源可由生产和贮藏过程中引入：①生产过程中主要是由 于所用原料不纯或者原料反应过程中反应未完全 ，以及反应的中间产物、 反应的副产物等 造成药品原料中杂质的存在；或者是由原料生产过程中反应的溶媒、催化剂等溶剂的残留 所造成的药物的杂质。
②贮藏过程引入主要是受温度、 湿度、日光、空气等外界条件的影响或者受微生物的作用产生的杂质。
在药物的研究、 生产、贮存和临床应用等方面，必 须保持药物的纯度，降低药物的杂质，这样才能保证药物的有效性和安全性。
原料药和制剂主要是对药物中的微量杂质进行纯度检查，以判断药物纯度是否符合杂 质限量的规定要求，而生物制品的杂质检查除包括一般杂质检查，特殊杂质检查外还应对 其进行安全性检查。
杂质定量、定性检查方法主要是根据药物和特殊杂质在理化性质上的 差异来进行的，可以采用容量分析法，光谱法分析法，色谱分析法等，各种检测方法所需 的方法学验证的指标包括准确度，精密度，专属性，线性，范围，检测线、定量线，耐用 性八项指标，但采用不同方法所需的指标不尽相同，杂质限量检查一般需要验证专属性， 检测线，耐用性。
而杂质定量分析方法除检测限外其它指标一般都需验证 ⑷。
不同实验应该根据不同实验目的对对各项指标进行验证，下面就杂质种类及近年来检 测杂质最常用的检测方法进行分析：1、 特殊杂质特殊杂质是指在药物制备和贮存过程中 ， 或合成过程中产生的副产物等，多指有机杂质, 性的对映体。
HPLC 法测定萘普生缓释片有关物质的含量： 该缓释片主药是萘普生，特殊杂质为(6—甲氧基—2—萘乙酮)，方法采用高效液相色谱法(HPLC)法；色谱柱：以十八烷基硅烷键 合硅胶为学号: 由于药物性质不稳定而产生的降解产物 也包括残留溶剂和手性化合物中无特殊毒相；检测波长为240nm;流速：/min; 进样量：10卩I .填充剂；以/L的磷酸二氢钾一甲醇-乙腈(40: 25: 35) 磷酸调节PH至为流动1.1.1 系统适应性：首先针对高效液相色谱法应进行系统适应性指标（理论塔板数、分离度、重复性、拖尾因子）验证，该实验得出萘普生主峰与已知杂质峰（6-甲氧基-2-萘乙酮）分离良好，萘普生主峰理论半数大于5000,符合规定。
药物的杂质检查总结
第三章 药物的杂质检查杂质（forin 、impurities ）是指：1. 有毒副作用的物质2. 本身无毒副作用，但影响药物的稳定性和疗效的物质3. 本身无毒副作用，也不影响药物的稳定性和疗效，但影响药物的科学管理的物质药物中杂质的来源1. 生产过程中引入（1）原料、反应中间体及副产物（2）试剂、溶剂、催化剂类（3）生产中所用金属器皿、装置以及其他不耐酸、碱的金属工具所带来的杂质2. 贮藏过程中产生水解、氧化、分解、异构化、晶形转变、聚合、潮解和发霉等易发生水解反应的结构：酯、内酯、酰胺、卤代烃、苷类等药物中的杂质按来源分为1. 一般杂质（general impurities ）如氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐、酸、碱、水分、易炭化物、炽灼残渣等。
一般杂质的检查方法收载在中国药典的附录中。
2. 特殊杂质（special impurities ）：指某一个或某一类药物的生产或贮藏过程中引入的杂质，如阿司匹林中的游离水杨酸、异烟肼中的游离肼、甾体激素中的有关物质。
特殊杂质检查方法收载在中国药典正文各药品的质量标准中。
杂质限量：指药物中允许杂质存在的最大量，通常用百分之几或百万分之几来表示药物的杂质检查法1. 对照法限量检查法 （Limit Test ）特点：不需知道杂质的准确含量2. 灵敏度法系指在供试品溶液中加入试剂，在一定反应条件下，不得有正反应出现。
特点：不需对照物质3. 比较法含量测定法：测定杂质的绝对含量，如测定吸光度、pH 值等。
特点：准确测定杂质的量，不需对照品杂质限量的计算供试品量允许杂质存在的最大量杂质限量一般杂质检查规则《药品检验操作标准》规定：1. 遵循平行操作原则（1）仪器的配对性：如纳氏比色管应配对，刻度线高低相差不超过 2mm ，砷盐检查时导气管长度及孔的大小要一致（2）对照品与供试品同步操作2. 正确的比色、比浊方法3. 检查结果不符合规定或在限度边缘时应对供试管和对照管各复查二份氯化物检查法（一）原理 对照法检查方法 药典附录除另有规定外，取各药品项下规定量的供试品，加水溶解使成25ml （溶液如显碱性，可滴加硝酸使成中性），再加稀硝酸10m1；溶液如不澄清，应滤过；置50ml 纳氏比色管中，加水使成约40m1，摇匀，即得供试溶液。
药物分析第三章
凡药典未规定检查的杂质，一般不需要 检
查，但遇特殊情况如检验某药物时发现性 状
和反应不正常，应根据需要进一步追踪、 检
查。若药厂在生产上改变了原料或方法， 也
应根据实际情况检查其他可能引入的杂质。
三、药物的杂质检查方法
杂质的限量 是指药物中所含杂质的最大 允
许量称为杂质限量。 通常用百分之几 （%） 或百万分之几
药物纯度 从用药安全、有效和药物稳定性的影响
考虑。 比如：BaSO4 （可溶性钡盐检项）
药物的纯度考虑杂质的生理作用，药品 只有两个等级：合格或不合格。
化学试剂有很多等级，如基准试剂、优 级纯（GR）、分析纯（AR）、化学纯 （CP）、色谱纯、光谱纯等。
二、药物杂质的来源
1. 生产过程中引入
（1）原料、反应中间体及副产物
注意：药典中各药物品种项下规定的杂质 检查项目，是指正常生产和贮存中可能产 生并需控制的杂质。药典中未规定检查的 杂质，一般有以下几种情况：
—在正常生产和贮藏过程中不可能引入 ；
—含量甚微或临床限量允许较宽，对人 体和药物质量无不良影响；
—有些药物中可能含有某些杂质，对其 认识尚不够，有待积累资料，也可暂缓订 入检查项下。
AgNO31ml
(避免AgCl分解)
品
H2O
标 准
稀HNO310ml
AgNO31ml
溶 液
H2O
（3）注意事项 1.标准氯化钠溶液应为临用前配制，浓度
为 10ug/ml的Cl-，氯化物浓度以50ml中含 50μg～80μg的Cl-（相当于标准氯化钠溶
液 5.0ml～8.0ml）
2.硝酸加入避免杂质干扰检查，（除去 CO2+3、
SO2-4、C2O4-2、PO3-4的干扰），加速氯 化银
通则2301 杂质检查法 中华人民共和国药典2015年版四部
2301 杂质检查法
药材和饮片中混存的杂质系指下列各类物质：
1 .来源与规定相同，但其性状或药用部位与规定不符；
2 .来源与规定不同的物质；
3 .无机杂质，如砂石、泥块、尘土等。
检査方法1.取适量的供试品，摊开，用肉眼或借助放大镜(5~10倍）观察，将杂质拣出；如其中有可以筛分的杂质，则通过适当的筛，将杂质分出。
2.将各类杂质分别称重，计算其在供试品中的含量（％)。
【附注】1.药材或饮片中混存的杂质如与正品相似，难以从外观鉴别时，可称取适量，进行显微、化学或物理鉴别试验，证明其为杂质后，计人杂质重量中。
2.个体大的药材或饮片，必要时可破开，检查有无虫蛀、霉烂或变质情况。
3.杂质检査所用的供试品量，除另有规定外，按药材和饮片取样法称取。
药物分析 药物的杂质限量及检查方法
9
（一）
化 学 方 法
1 杂质与一定试剂反应产生沉淀
盐酸肼屈嗪中游离肼的检查.
2 杂质与一定试剂反应产生颜色
氯硝柳胺中2-氯-4-硝基苯胺和5-氯水杨酸的 检查
3 杂质与一定试剂反应产生气体
盐酸乙基吗啡中胺盐检查.
4 滴定法
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（二）
比较法：取供试品一定量依法检查，测定特定的杂质 参数，与规定的限量相比，不得更大。
三、杂质的限量(Limit Test)
杂质限量计算法如下：
杂质限量(%) 杂质最大允许量 100％ 供试品量
标准溶液的浓度 标准溶液的体积 100％ 供试品量
CV
L(%)
100%
S
注意单位统一！
四、杂质的常用检查法
按毒性分类 毒性杂质和信号杂质
按理化性质 有机杂质、无机杂质、残留
分类
溶剂
三、杂质的限量(Limit Test)
药物中所含杂质的最大允许量。
通常用百分之几或百万分之几 (parts per million, ppm )
杂质 限量 控制
限量检查
对照法 灵敏度法 比较法
定量测定杂质含量
注意平行原则
三、杂质的限量(Limit Test)
（二）
色 谱 方 法
3.气相色谱法(GC) ——用于药物中挥发性杂质的检查,
如药物中残留溶剂、农药残留量等.
检查方法:同高效液相色谱法. 标准溶液加入法
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（二）
色 谱 方 法
4.毛细管电泳法 —
20
（三）
光 谱 方 法
1. 可见-紫外分光光度法 2. 红外分光光度法 3. 原子吸收分光光度法
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（二）杂质检查方法
杂质的限量检查可分为以下3种方法：
1.对照法 对照法是将供试品溶液与待检杂质对照溶液，在相同条件 下处理后，比较反应结果，从而判断供试品中所含杂质 是否超过限量。
颜色 浑浊 色斑
比色 比浊 比较色斑
（二）杂质检查方法
1.对照法
。通常用
2.杂质限量是指药物中所含杂质的
或
来表示
、 、
3.杂质限量的检查方法主要有 和 三种
一、杂质来源
1.生产中引入 原料，中间体，副产物； 试剂，溶剂，催化剂； 器皿，装置，管道； 制剂过程中产生；
2.贮存中引入
保管不当；贮藏时间过长； 温度、湿度、光、空气； 微生物作用；
（二）杂质的分类
分类方法 杂质种类 代表成分 金属离子、水
重金属、砷盐 一般无害，反应纯度 广泛，易引入 依据药物性质引入
C V 100 106 1 L 100% 100% 0.02% 25 S 2 100
肾上腺素中肾上腺酮的检查 取本品 0.20g，置 100ml 量瓶中，加盐酸溶液 (9→2000) 溶解，并稀释至刻度，摇匀，在 310nm处测定吸光度， 不得超过0.05，E为453，求酮体的限量。
按性质分类 影响药物稳定性
毒性杂质 信号杂质 按来源分类 一般杂质 特殊杂质
（二）杂质的分类
1.按来源可分为一般杂质和特殊杂质
（1）一般杂质 在自然界中分布较广泛，在多种药物的生产和贮藏过程中容 易引入的杂质 （2）特殊杂质 在药物的生产和贮藏过程中，根据药物的性质和生产工艺而 引入的杂质
（二）杂质的分类
2.按性质可分为信号杂质和有害杂质
（1）信号杂质 本身一般无害，但其含量的多少可以反映出药物的纯度水平 （2）有害杂质 对人体有毒害或影响药物的稳定性，如重金属、砷盐等，在 质量标准中应严格加以控制，以保证用药安全
二、杂质限量与杂质检查方法
（一）杂质限量 杂质限量是指药 Nhomakorabea中所含杂质的最大允许量
通常用百分之几或百万分之几来表示：如葡萄
A 1 0.05 1 1% 1.10 106 ( g / m l) E1cm 100 453 100
C酮体
C 6 1 . 10 10 酮体 L 100% 100% 0.055% 3 C 2.0 10 药物
点滴积累
1.药物中的杂质主要由 和 引入
第三章 药物杂质检查技术
药物杂质检查技术
1 2 3 杂质的来源与杂质检查方法 一般杂质的检查 特殊杂质的检查
学习目标
1.掌握一般杂质检查的原理、方法及杂质限量计算
2.熟悉特殊杂质的检查方法
3.了解药物杂质检查的意义及药物杂质的来源和分类
4.学会药物中常见一般杂质检查和特殊杂质检查的操作
第一节
杂质的来源与杂质检查方法
杂质的来源与杂质检查方法
药物的杂质：
是指药物中存在的无治疗作用或影响药物的稳定性
和疗效，甚至对人体健康有害的物质
杂质的概念 无治疗作用：Cl 、SO42影响药物的稳定性和疗效：水分（青霉素钠） 对人体健康有害的物质： 砷、重金属
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知识链接
一、杂质的来源
药用规格
安全性 有效性 稳定性 生理作用
试剂规格 适用范围 目的 稳定性等 化学纯CP 分析纯AR 优级纯GR 基准试剂 光谱纯试剂 色谱纯试剂
考虑因素
级别
合 格 不合格
一、杂质的来源
硫酸钡（BaSO4） 试剂或药用 试剂规格 药用规格 检查项目
氯化物、铁、灼烧失重等
酸溶性钡盐、重金属、砷盐等。
存在可溶性钡盐则导致医疗事故
一、杂质的来源及分类
（一）杂质的来源：主要有两方面的来源
一方面是由药物生产过程中引入
（一）杂质的来源
另一方面是在贮藏过程中引入
纯化水中氯化物的检查
50ml纯化水中加入硝酸5滴及硝酸银试液1ml， 要求不得发生浑浊
（二）杂质检查方法
3.比较法 比较法是指取供试品一定量依法检查，测
定与待检杂质含量相关的吸光度或旋光度等指标， 不得超过规定值，以此控制杂质的限量。 特点：准确测定杂质的量，不需对照品
硫酸阿托品中莨菪碱的检查 取本品，按干燥品计算，加水溶解并制成每1ml中含 50mg的溶液，依法测定，旋光度不得过-0.40°。
（三）杂质限量计算
允许杂质存在的最大量 杂质限量＝ 100% 供试品量
L C V 100 % S
L：杂质限量 V：标准溶液体积 S：供试品的量 C：标准溶液浓度
对乙酰氨基酚中硫酸盐的检查 取本品2.0g，加水100ml，加热溶解后，冷却、滤过， 取 滤 液 25ml ， 依 法 检 查 ， 与 标 准 硫 酸 钾 溶 液 1.0ml （100µ g/ ml SO4）制成的对照液比较，不得更浓。计 算硫酸盐的限量。
特点：需要对照品，不能准确测定杂质含量
注意：平行原则；正确比浊、比色；结果不合格应
比色或比浊 有色 白色沉淀或浑浊 白色衬底 黑色衬底
复检两份
结果判断：
＜
样品管 对照管
合格
（二）杂质检查方法
杂质的限量检查可分为以下3种方法： 2.灵敏度法 以检测条件下反应的灵敏度来控制杂质限量 本法的特点是不需要对照物质，而是以供试品 不出现阳性反应为限度。特点：不需对照物质