李会强-食物过敏的实验诊断
食品中的致敏物质如何判断食物中的过敏原
食品中的致敏物质如何判断食物中的过敏原食物过敏是一种常见的免疫反应，当人体暴露于某些特定食物中的过敏原时，免疫系统会产生过度反应，导致过敏症状的发生。
因此，准确判断食物中的过敏原对于过敏患者的诊断和预防具有重要意义。
本文将介绍一些常见的判断食物中过敏原的方法。
1. 就诊医院进行过敏测试有一些特定的过敏测试可以帮助确定食物中的过敏原。
常见的过敏测试包括皮肤刺激试验和血清特异IgE检测。
皮肤刺激试验通过在皮肤表面施加过敏原来观察反应程度，用来确定个体对某种食物的敏感程度。
血清特异IgE检测则通过检测血液中特异性IgE抗体的水平来确定过敏原。
就诊医院进行过敏测试能够提供准确的过敏原信息。
2. 进行食物排除法食物排除法是通过逐步排除潜在过敏食物来确定过敏原的方法。
在这个过程中，需要将可能引发过敏症状的食物从饮食中剔除，并观察症状的变化。
如果在某个食物被移除后，过敏症状减轻或消失，那么这个食物很有可能是过敏原。
3. 记录食物过敏症状当出现食物过敏症状时，及时记录下来可以帮助确定食物中的过敏原。
在记录时，需要详细描述发生过敏反应的时间、症状的种类和持续时间等信息。
这些记录可以帮助医生或过敏专家进行分析，找出可能的过敏原。
4. 使用食物过敏测试工具现在市面上有一些专门用于测试食物过敏的工具，例如食物过敏测试盒。
这些测试工具可以通过检测食物中的特异性抗体来确定食物过敏原。
但需要注意的是，这些测试工具的准确性和可靠性有待考证，最好在专业医师指导下进行使用。
5. 了解食品标签食品标签上会列出成分，对于某些常见的食物过敏原，如花生、坚果、鸡蛋、牛奶等，其成分在食品标签中应该能够清楚地显示出来。
因此，仔细阅读食品标签可以帮助过敏患者了解食物中是否含有潜在过敏原。
总结起来，判断食物中的过敏原需要借助专业过敏测试、排除法、记录过敏症状、食物过敏测试工具以及食品标签等方法。
通过对过敏原进行准确判断，过敏患者可以采取相应的预防措施，避免不必要的过敏反应。
过敏原特异性IgE抗体实验室检测及其临床应用
ＤＯＩ：１０．１３６０２／ｊ．ｃｎｋｉ．ｊｃｌｓ．２０２０．１１．０１·专家论坛·过敏原特异性ＩｇＥ抗体实验室检测及其临床应用 基金项目：国家自然科学基金面上项目（８１７７２２５９）。
作者简介：李会强，１９６５年生，男，教授，硕士、博士研究生导师，从事标记免疫分析方法学和食物过敏实验诊断领域研究。
Ｅ ｍａｉｌ：ｌｉ ｈｕｉｑｉａｎｇ１９６５＠１６３．ｃｏｍ。
李会强（天津医科大学医学检验学院，天津３００２０３）摘要：过敏原特异性ＩｇＥ（ｓＩｇＥ）抗体检测对过敏性疾病的诊断和治疗具有重要价值。
从待检抗体角度分析，ｓＩｇＥ抗体检测分为ｓＩｇＥ抗体物质含量检测和ｓＩｇＥ抗体病理活性检测，前者采用免疫化学（血清学）方法，后者采用细胞生物学方法。
血清学检测为临床实验室常用方法，涉及斑点－酶免疫吸附试验（Ｄｏｔ ＥＬＩＳＡ）、ＥＬＩＳＡ和荧光酶免疫分析（ＦＥＩＡ）等标记免疫技术。
从已知抗原角度分析，ｓＩｇＥ抗体检测分为混合组分诊断（ＭＲＤ）和单一组分诊断（ＣＲＤ）。
ＣＲＤ可获得ｓＩｇＥ抗体谱结果，为临床提供更丰富的诊断信息。
无论采用何种标记免疫技术，ｓＩｇＥ抗体实验室检测已从定性分析发展到定量分析，且分析灵敏度不断提升，这将逐渐满足临床诊断的需求，提高过敏性疾病的诊断和治疗水平。
关键词：特异性ＩｇＥ抗体；血清学检测；细胞学检测；混合组分诊断；单一组分诊断中图分类号：Ｒ４４６．６ 文献标志码：Ａ 近年来，过敏性疾病发生率不断提升，已成为严重影响人类健康的公共卫生问题［１］。
过敏性疾病主要指由免疫球蛋白Ｅ（ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎＥ，ＩｇＥ）介导，组织中肥大细胞和外周血中嗜碱性粒细胞参与，通过释放生物活性介质引起局部或全身症状的Ⅰ型超敏反应所致疾病。
过敏性疾病的诊断包括询问病史、体外诊断和体内试验，其中体外诊断发挥重要的作用，而过敏原检测是重要的体外诊断项目之一［２］。
过敏原检测并不是真正检测过敏原（抗原），而是通过检测过敏原特异性ＩｇＥ（ｓｐｅｃｉｆｉｃＩｇＥ，ｓＩｇＥ）抗体间接推断待检者是否对相应物质过敏（确定过敏原）。
诊断食物过敏金标准
诊断食物过敏金标准
诊断食物过敏的金标准是食物激发试验，包括开放式激发试验、单盲激发试验和双盲激发试验。
这种试验通过让患者食入可能引起过敏反应的可疑食物，观察机体的反应，如出现口腔黏膜水肿、皮疹、腹痛、腹泻等过敏反应，便可确定致敏食物。
其中，双盲激发试验是诊断食物过敏的“金标准”，医生和患者都不知道测试的食物是什么，这样可以最大限度地排除患者和医生的主观判断。
在进行食物激发试验之前，应先由专业的过敏免疫科或儿科医生，结合病史、症状、体征等情况判断可能的过敏原。
在既往病史无法判断过敏原的情况下，再进行过敏原IgE检测。
请注意，食物激发试验必须在医生的指导和监督下进行，以确保患者的安全和试验的准确性。
同时，对于怀疑心因性的患者，应先给予安慰剂，如果服安慰剂出现症状，每种引发反应的食物均需要至少检测两次予以核实。
以上内容仅供参考，建议咨询专业医生获取准确信息。
食品过敏原的检测与分析
食品过敏原的检测与分析双击自动滚屏时间：2010-4-26 来源：热带医学杂志作者：浏览：159次【字体：大中小】食品过敏现已成为一个新兴的公众性健康问题，特别是在发达国家，调查显示全世界范围内有１％～２％的成年人对食品过敏，而低于三岁的儿童中有８％以上对食品过敏。
产生的临床症状包括皮肤反应（荨麻疹、血管性水肿、湿疹），呼吸症状（哮喘、鼻炎），肠胃症状（呕吐、腹泻、肠胃痉挛），系统反应（心血管症状包括过敏性休克）等。
在过去的几十年中，食品过敏的发病率和流行情况日益增加，给临床变态反应学和食品工业造成了巨大的压力。
加上现在人们生活习惯的改变，饮食面的快速拓宽，特别是转基因食品的大量涌现，过敏症状亦趋于多样化、复杂化和严重化。
因此，对食品过敏原的检测与分析就是一个极其重要的问题。
一般来说，食品过敏原为分子量介于10000～70000之间的蛋白或糖蛋白，占食品总蛋白的极小一部分，分别属于不同的蛋白家族。
但是微量的食品过敏原蛋白即可引起严重的过敏反应。
系统全面、精确可靠的食品过敏原检测和分析技术体系正在形成，本文对这一研究领域的研究进展进行了详细的综述性分析。
１.利用人血清特异性lgＥ检测食品过敏原过敏原与lgＥ结合是过敏原体现其生物活性的中心环节，因此食品过敏原检测过程中特异性lgＥ的血清学检测必不可少。
对于能够引起５０％病人产生过敏反应的主要食品过敏原必须测定特异性lgＥ与食品过敏原结合的能力，包括引发过敏反应的频率，热稳定性和水解稳定性等。
但是这种方法不能解决食品过敏原的交叉致敏问题，因为它是用单个过敏病人的血清进行检测的。
１．１RAST抑制实验和EAST抑制实验自从lgＥ成功纯化及抗lgＥ的制备后，放射过敏原吸附实验（radio allergosorbent test RAST）得以设计应用。
之后改进的酶标记过敏原吸附实验（enzyme linked allergosorbent assays,EAST）及荧光和化学发光标记的检测技术也均已建立。
临床分析食物过敏的检测方法与过敏原分析
临床分析食物过敏的检测方法与过敏原分析食物过敏是一种常见的免疫系统反应，当人体对某种特定食物产生过敏反应时，会引发一系列不适症状。
为了正确诊断和管理食物过敏，临床上采用一系列的检测方法和过敏原分析技术。
本文将对食物过敏的检测方法和过敏原分析进行详细介绍。
一、临床检测方法1. 特定IgE抗体检测特定IgE抗体检测是目前最常用的食物过敏检测方法之一。
该方法通过检测血液中特定食物的IgE抗体水平来判断是否存在过敏反应。
它具有简单、快速、准确的特点，可以同时检测多种食物过敏原。
常见的特定IgE抗体检测方法包括酶联免疫吸附法（ELISA）和免疫荧光法。
2. 皮肤测试皮肤测试是一种常用的食物过敏筛查方法。
它通过在患者皮肤上施加一小剂食物过敏原，观察皮肤的反应来判断是否存在过敏反应。
皮肤测试包括皮肤划痕试验和皮肤内反应试验。
它相对便宜、快速，但结果可能受到多种因素的干扰，需要由经验丰富的医生进行解读。
3. 挑战试验挑战试验是一种直接性的食物过敏测试方法，通过给患者逐渐增加含有可疑食物过敏原的食物量来观察是否出现过敏反应。
挑战试验对于确诊食物过敏以及评估过敏程度非常有价值，但需要在医疗机构中进行，并由专业医生监护。
二、过敏原分析技术1. 多肽筛选法多肽筛选法是一种基于食物蛋白质结构的过敏原分析技术。
它通过将食物样品中的蛋白质分解为多肽，然后检测这些多肽与过敏原特异性IgE抗体之间的结合能力。
多肽筛选法可以准确识别食物中的多个过敏原，并确定其过敏原性。
2. 质谱分析质谱分析是一种高灵敏度的过敏原分析技术。
它可以通过测量食物样品中的蛋白质质谱图谱来鉴定过敏原。
质谱分析不仅可以识别食物过敏原的蛋白质序列和结构，还可以确定过敏原的含量和特征肽段。
3. DNA技术DNA技术是一种新颖且快速的过敏原分析方法。
它通过检测食物样品中的过敏原蛋白编码基因序列来鉴定过敏原。
DNA技术可以准确识别不同食物过敏原的基因型，并区分不同种类的食物。
食物过敏的常见症状和诊断方法
食物过敏的常见症状和诊断方法什么是食物过敏？食物过敏是一种免疫系统异常反应，即免疫系统对某些食物中的蛋白质产生异常的反应。
在食用特定食物后，免疫系统会错误地将其识别为有害物质，进而释放大量的化学物质来抵抗，导致一系列的症状。
食物过敏的常见症状食物过敏症状的严重程度因人而异，从轻微的不适到严重的过敏反应都有可能。
1.肠胃不适：最常见的症状之一是胃肠道不适，包括腹痛、胀气、恶心、呕吐和腹泻等。
这些症状通常在食用含有食物过敏源的食物后数分钟到数小时内出现。
2.皮肤反应：食物过敏还可能导致皮肤反应，如荨麻疹（食物过敏性皮炎）、皮疹和瘙痒等。
这些症状通常在食用过敏源后不久就会出现。
3.呼吸道问题：一些人可能会出现呼吸道问题，如打喷嚏、鼻塞、流鼻涕、喉咙肿胀和气喘等。
在某些情况下，这些症状可能会严重到威胁生命。
4.循环系统反应：严重的食物过敏可能导致循环系统反应，如低血压和过敏性休克。
这是一种罕见但严重的症状，可能需要立即治疗。
食物过敏的诊断方法正确诊断食物过敏是非常重要的，可以帮助避免潜在的风险，并确保饮食健康和安全。
1.寻求医疗专业意见：如果怀疑自己或他人有食物过敏，应该寻求医疗专业人员的意见。
他们会根据个人的症状和病史来制定诊断计划。
2.进行过敏原测试：一种常见的诊断方法是进行皮肤刺激测试，也称为过敏原测试。
这种测试通过在皮肤表面施加含有潜在过敏源的液体来检测过敏反应。
在过敏原测试中，医生会在患者的前臂或背部划上一小道浅切口，并将不同过敏源液滴在划过的地方。
如果出现红肿、瘙痒或水疱等反应，就表明该物质是患者的过敏源。
3.食物排除法试验：另一种常用的诊断方法是食物排除法试验。
这种方法通过在饮食中排除可能的过敏食物，然后观察症状是否改善来确定过敏食物。
通常需要在医生的指导下进行，以确保营养均衡。
4.进行血液测试：血液测试也是诊断食物过敏的一种方法。
这种测试可以测量特定食物抗体的水平，以确定是否存在过敏反应。
检验科常见食物过敏原检测方法
检验科常见食物过敏原检测方法导言：食物过敏是一种常见的免疫反应，常表现为皮肤瘙痒、呼吸道症状、胃肠道不适等。
对于食物过敏患者来说，了解引起过敏反应的食物成分是极为重要的。
因此，检验科发展了多种食物过敏原检测方法，以帮助医生和患者寻找合适的治疗和饮食方案。
本文将介绍检验科常见的食物过敏原检测方法。
1. 皮肤划痕试验皮肤划痕试验是一种简单而常用的初筛方法，通过在皮肤上涂抹或划痕食物过敏原提取物，然后观察皮肤的反应，来初步判断是否存在过敏反应。
根据患者的症状和过敏史，医生可以选择特定的食物过敏原进行皮肤划痕试验。
2. 血清特异IgE抗体检测血清特异IgE抗体检测是通过检测血液样本中的特异性IgE抗体水平来确定食物过敏原。
这种方法可以检测多种食物过敏原，常用的有免疫荧光法、酶联免疫吸附试验（ELISA）和放射免疫测定法等。
这些方法的原理是将患者血液中的IgE抗体与特定的过敏原抗原结合，然后通过荧光物质、酶标记或放射性同位素来测定抗体的结合情况。
3. 小鼠试验小鼠试验是一种常见的动物模型实验方法，用于评估食物过敏原的致敏性和过敏原性。
该方法通过给小鼠注射一定量的食物过敏原，观察小鼠是否产生免疫反应，如血液中特异性IgE抗体的产生，肥胖细胞的脱颗粒等。
小鼠试验可以评估食物过敏原的潜在危害程度，但由于动物与人体之间的差异，结果仅供参考。
4. 细胞学测定细胞学测定是一种通过培养人体外周血单个核细胞，然后加入特定的食物过敏原刺激，观察细胞的变化来判断食物过敏原的致敏性。
这种方法可以评估细胞因子的产生和相关细胞表面标记物的表达情况，从而确定食物过敏原引起的免疫反应。
5. 声音波诊断技术近年来，声音波诊断技术逐渐应用于食物过敏检测领域。
该技术通过将声音波传递到食物样本中，通过分析回音的频谱和振动模式，来识别食物中存在的过敏原。
这种非侵入性的方法具有快速、简便的特点，但目前仍处于研究阶段，需要更多的临床验证。
结论：食物过敏原检测对于了解食物过敏患者的过敏源具有重要意义。
食物过敏的诊断与治疗方法
食物过敏的诊断与治疗方法食物过敏是一种人体对某些食物成分产生过敏反应的疾病，其症状包括皮肤瘙痒、呕吐、腹泻、腹痛、呼吸困难等。
对于那些患有食物过敏的人来说，正确的诊断和治疗是至关重要的。
本文将探讨食物过敏的诊断方法和常用的治疗方法。
一、食物过敏的诊断方法食物过敏的诊断是通过医生的询问和一系列实验室检查来确定的。
下面介绍几种常见的诊断方法：1. 皮肤划痕试验：该试验通过将可能引起过敏的食物成分施加在皮肤上，并使用细小的针头刺破皮肤来观察是否产生红斑或痒痛等过敏反应。
这个方法是最常用的食物过敏诊断方法之一。
2. 血清特异IgE抗体检测：这是一种通过检测血液中特定食物过敏原的特异性IgE抗体水平来判断过敏程度的方法。
通过这种检测方法，医生可以确定哪些食物可能导致过敏反应。
3. 患者记录：患者可以记录下日常摄入的食物及其相关症状，医生可以通过分析这些记录来判断是否存在食物过敏，并找出触发过敏反应的食物成分。
二、食物过敏的治疗方法食物过敏的治疗方法主要包括避免接触过敏食物和使用药物治疗等。
1. 避免过敏食物：一旦确定了导致过敏的食物，最好的治疗方法就是避免接触这些食物。
患者需要仔细阅读食品标签，并避免食用可能含有过敏食物成分的食品。
2. 替代饮食：对于那些有多种食物过敏的患者来说，他们需要通过制定替代饮食来满足身体对营养的需求。
专业的营养师可以制定合理的饮食方案，确保患者从其他食物中获取所需营养。
3. 药物治疗：在一些严重过敏症状的情况下，医生可能会建议患者使用抗组胺药物或肾上腺素（如紧急情况下使用的艾普妥®）来缓解症状。
但是需要注意的是，药物治疗只是一种临时的措施，并不能从根本上解决问题。
4. 免疫疗法：对于一些严重的食物过敏患者来说，免疫疗法可能是一个有效的治疗选择。
这种方法通过逐渐接触小剂量的过敏食物来训练患者的免疫系统，以期减轻过敏反应。
总结：食物过敏是一种常见的疾病，正确的诊断和治疗对于患者的健康至关重要。
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• Basophil Activation Tests, BAT
• 细胞表面（结合型）sIgE • 体内sIgE生物学活性检测
嗜硷性粒细胞激活试验（BAT）
• 临床标本 • 外周抗凝血（全血）
• 特定过敏原将外周血已致敏的嗜碱性粒细胞激活 • 细胞鉴定与活化状态
• 流式细胞仪（FCM）检测特定标志
• 血清sIgE抗体谱
• 针对每种蛋白特异性抗体（sIgE）
component-resolved diagnosis (CRD)
• Molecular diagnosis will help to increase the sensitivity of the testing and, on the other hand, provides a more-detailed patienttailored risk profile.
• 血清sIgE介导 • 嗜碱性粒细胞
• KU812（KU812F）
• 标准过敏原
血清sIgE生物活性检测
• 采用FCM技术
• 检测
• 特定过敏原激发 • 血清sIgE介导 • KU812细胞激活试验
血清sIgE生物活性检测
• 抗原表位谱
• 生物信息学 • 筛选技术
血清sIgE生物活性检测 • 血蓝蛋白表位分析
食物过敏的实验诊断
─ 血清sIgE检测的现在和未来
李会强 天津医科大学
与食物相关的超敏反应
➢ 食物过敏 ➢ Food Allergy
➢ IgE-Dependent Immune Responses
➢ 食物不耐受 ➢ Food Intolerance
食物过敏（Food Allergy）
• 临床诊断 SPT
血清tIgE水平
• 化学发光免疫分析（现状） • chemiluminescence immunoassay
• CLIA
• 优点
• 准确；快速
血清sIgE水平
• 放射过敏原吸附试验（经典）
• radioallegosorbent test，RAST
血清sIgE水平
• 荧光酶免疫分析
• immuno-CAP
敬请： 批评指正！
嗜硷性粒细胞激活试验（BAT）
• FCM
• anti-CD123 • anti-HLA-DR • anti-CD63 or CD203c
嗜硷性粒细胞激活试验（BAT）
• 激活状态
• CD63+
嗜硷性粒细胞激活试验（BAT） • 卵巢发展蛋白
• 蟹黄 • Eri s 2
Fig rEris 2和CO诱导体外嗜碱性粒细胞激活结果
• 询问病史 • 体内试验 • 体外试验
sIgE
实验诊断
• tIgE • sIgE
• McAb • PcAb
问题：蛋白含量与生物活性
血清sIgE检测的现状
免疫球蛋白E（IgE）的发现
• 花粉过敏患者
• 1819年， Dr. John Bostock
• 输血所致过敏性哮喘
• 1919年， Ramirz
血清sIgE检测的未来
免疫球蛋白E（IgE）的检测
• 存在问题 • 科学问题
• 过敏原的复杂性与血清sIgE的异质性 • 血清sIgE含量测定与致病活性测定
• 技术问题
• 现有方法不能满足临床需要（简单、快速、通量）
光激化学发光分析（LICA）
➢ 发光体系
➢ 发光微球（FG）
➢ 接受能量 ➢ 受体微球（A）
血清sIgE水平
• 荧光酶免疫分析 • 金标准 • 单种过敏原 • 随机组合 • 定量分析
血清sIgE水平
• 斑点酶联免疫吸附试验
• Dot-ELISA（膜条） • 多种过敏原联合测定 • 廉价（符合国情） • 组合模式（固定）
血清sIgE水平
• 酶联免疫吸附试验
• ELISA（捕获法）
免疫球蛋白E（IgE）的检测（2）
• 蛋清sIgE
• 四种过敏原 • 受体微球-卵类黏蛋白（Gal d 1） • 受体微球-卵白蛋白（Gal d 2） • 受体微球-卵转铁蛋白（Gal d 3） • 受体微球-卵溶菌酶（Gla d 4）
Fig B 血清蛋清sIgE检测模式
血清sIgE检测（蛋清）- LICA • 分析性能参数
血清稀释曲线
血清sIgE的异质性
• 梭子蟹
• 过敏原sIgE抗体异质性
血清sIgE抗体谱检测
• 过敏原组分sIgE抗体谱
• 精准sIgE检测 • 精准脱敏治疗
已知抗原： 天然总蛋白溶液 天然单一蛋白纯品 重组单一蛋白溶液
血清sIgE和细胞表面sIgE
细胞学方法~生物学活性
血清sIgE生物活性检测
• 嗜碱性粒细胞激活试验（BAT）
免疫球蛋白E（IgE）的检测（1）
• 血清（游离）IgE的检测 • 总IgE水平
• Total IgE，tIgE
• 特异性IgE水平
• Specific IgE，sIgE
牛奶sIgE抗体： 牛奶蛋白 某一蛋白 抗原表位
血清tIgE水平
• 放射免疫吸附试验（经典）
• radioimmnosorbent test，RIST
• 免疫球蛋白E（IgE）
Fig 免疫球蛋白E（IgE）分子结构
• 1967年， Iቤተ መጻሕፍቲ ባይዱhizaka（瑞典）和Bennich & Jonansson（美国）
免疫球蛋白E（IgE）的体内分布
• 结合型IgE抗体
• 与嗜碱性粒细胞或肥大细胞结合
• 游离型IgE抗体
• 未与嗜碱性粒细胞或肥大细胞结合
图：IgE与IgE受体结合
LICA
ELISA
血清sIgE的精准检测
• 分子诊断（CRD）
• The determination of specific IgE to different allergens is called molecular diagnosis or component-resolved diagnosis (CRD)
➢ 感光微球（GG）
➢ 提供能量 ➢ 供体微球（D）
血清tIgE检测
• 双抗夹心-LICA
• 免“洗涤” • 高 - 精密度
tIgE
Fig 血清tIgE定量分析原理
血清tIgE检测(LICA)
• 分析性能参数
• 批内精密度
• 5.3 – 5.8
• 批间精密度
• 5.3 – 9.0
血清sIgE检测