透析袋原理、分子量的选择、使用方法步骤
透析袋用法

透析袋使用前处理方法透析袋的使用方法透析原理透析是指溶质从半透膜的一侧透过膜至另一侧的过程,任何天然的(如腹膜)或人造的半透膜,只要该膜含有使一定大小的溶质通过的孔径,那么这些溶质就可以通过弥散和对流从膜的一侧移动到膜的另一侧。
透析的动力是扩散压,扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。
透析的速度反比于膜的厚度,正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度,还正比于膜的面积和温度,通常是4℃透析,升高温度可加快透析速度。
人体内的毒物包括代谢产物,药物,外源性毒物,只要其原子量或分子量大小合适,就能够通过透析清除体外。
其基本原理是弥散和对流。
弥散就是半透膜两侧液体各自所含溶质浓度梯度及它所形成的不同渗透浓度,溶质从浓度高的一侧通过半透膜向浓度低的一侧移动。
对流也称超滤,是指溶质和溶剂因透析膜两侧的静水压和渗透压梯度的不同而跨膜转运的过程。
自ThomasGraham1861年发明透析方法至今已有一百多年。
透析已成为生物化学实验室最简便最常用的分离纯化技术之一。
在生物大分子的制备过程中,除盐、除少量有机溶剂、除去生物小分子杂质和浓缩样品等都要用到透析的技术。
透析只需要使用专用的半透膜即可完成。
通常是将半透膜制成袋状,将生物大分子样品溶液置入袋内,将此透析袋浸入水或缓冲液中,样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内,而盐和小分子物质不断扩散透析到袋外,直到袋内外两边的浓度达到平衡为止。
保留在透析袋内未透析出的样品溶液称为“保留液”,袋(膜)外的溶液称为“渗出液”或“透析液”。
透析膜可用动物膜和玻璃纸等,但用的最多的还是用纤维素制成的透析膜,目前常用的是美国Union Carbide(联合碳化物公司)和美国光谱医学公司生产的各种尺寸的透析管,截留分子量MwCO(即留在透析袋内的生物大分子的最小分子量,缩写为MwCO)通常为1万左右。
透析袋的使用方法使用前处理:1. 把透析袋剪成适当长度(10-20cm)的小段。
透析袋使用说明

透析袋使用说明自Thomas Graham1861年发明透析方法至今已有一百多年。
透析已成为生物化学实验室最简便最常用的分离纯化技术之一。
在生物大分子的制备过程中,除盐、除少量有机溶剂、除去生物小分子杂质和浓缩样品等都要用到透析的技术。
1技术指标MWCO(截留分子量),单位:Diatoms。
透析时,小于MWCO的分子在透析膜二边溶液浓度差产生的扩散压作用下渗过透析膜,其速度与浓度梯度、膜面积及温度成正比。
欲快速透析可采用直径较小的透析袋以增加膜面积。
常用温度:4℃,升温、更换袋外透析液或用磁力搅拌器,均能提高透析速度。
2使用须知某些化学物质会破坏透析袋微孔且不可逆转。
计有:烃、卤化烃、醇、酮、酯、胺、丙酮、甲基乙基酮、二氧杂环乙烷、环已烷等。
酸(甲酸、乙酸、稀强酸如5%HCI),10%苯酚,30%双氧水。
甲醇、乙醇:浓度小于5%时,透析功能在,而MWCO变化。
2.1前处理为防干裂,出厂时都用10%的甘油处理过,并含有极微量的硫化物、重金属和一些具有紫外吸收的杂质,它们对蛋白质和其它生物活性物质有害,用前必须除去。
2.1.1方法一将透析袋剪成适当长度(10-20cm)的小段。
在NaHCO3-EDTA处理液中煮沸10min后用蒸馏水彻底清洗干净,然后在EDTA处理液煮沸10min。
冷却后,置于30%乙醇中,放于4℃冰箱,必须确保透析袋始终浸没在溶液内。
使用前戴手套取用透析袋并用蒸馏水将透析袋内外清洗干净。
[1]2.2.2方法二将透析袋剪成适当长度(10-20cm)的小段,沸水煮5至10分钟,再用蒸馏[1]乙二胺四乙酸二钠(EDTA)0.2mol/L储备液称取7.4448g乙二胺四乙酸二钠,少量蒸馏水溶解,转至100mL容量瓶中,摇匀并定容。
EDTA处理液(1mmol/L pH8.0)取2.5mL EDTA储备液,加蒸馏水并用1mol/LNaOH调节pH为8.0,定容至500mL。
NaHCO3-EDTA处理液称取4.0g碳酸氢钠至200mLEDTA处理液中,配制成(2%)NaHCO3-(pH值8.01mmol/L)EDTA处理液。
透析袋原理、分子量的选择、使用方法步骤

透析袋原理、分子量的选择、使用方法步骤透析袋原理自1861年发明透析方法至今已有一百多年。
透析已成为生物化学实验室最简便最常用的分离纯化技术之一。
在生物大分子的制备过程中,除盐、除少量有机溶剂、除去生物小分子杂质和浓缩样品等都要用到透析的技术。
通常是将半透膜制成袋状,将生物大分子样品溶液置入袋内,将此透析袋浸入水或缓冲液中,样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内。
分子量的选择透析是一个简单的扩散过程,溶质中小分子物质从高浓度溶液通过半透性膜扩散到低浓度溶液中,直至渗透压达到平衡。
由于多孔膜的选择性,使得溶质中小分子物质可以通过,而较大物质则被截留,从而分离出不同大小分子量的物质,依据分子量大小截留,可高效用于分离工艺,改变或控制透析的条件,可在多种透析应用中得到预期效果,通过截留分子量(MWCO)可使目标分子得到分离。
所以透析袋分子量的选择就决定了实验的成败。
这篇文章就详细介绍了如何选择合适的透析袋。
透析膜的材质透析膜可用动物膜和玻璃纸等,但用的最多的还是用纤维素制成的透析膜,主要有再生纤维素(RC)、纤维素酯(CE)、聚偏二氟乙烯(PVDF)。
但随着生物技术发展,对透析袋处理样品更多更严格的要求,根据生产工艺有可以分为标准膜和生物技术级膜。
生物技术纤维素酯(CE)膜生物学惰性和超纯的生物技术CE膜,用于带电荷分子的分离及大分子纯化。
生物技术CE膜对条件及溶剂要求较高。
一般而言,CE膜能够抗弱的或稀的酸碱溶液和轻微乙醇,MWCO只有轻微改变。
**直接与有机溶剂接触会破坏CE膜。
生物技术CE膜能在pH2-9与4-37℃下使用。
即用透析装置中也可使用CE膜。
生物技术再生纤维素(RC)膜生物技术RC膜通过再生过程制得,物理抗性与化学相容性得到改良,具有与生物技术CE膜一样高纯度与均一的MWCO。
RC膜能够与高浓度的弱酸碱、低浓度的强酸碱、大多数醇类及一些温和的或低浓度有机溶剂共用,**直接与强极性或有机溶剂接触会破坏RC膜。
透析袋的使用方法

透析袋在使用前如何处理透析已成为生物化学实验室最简便最常用的分离纯化技术之一。
在生物大分子的制备过程中,除盐、除少量有机溶剂、除去生物小分子杂质和浓缩样品等都要用到透析的技术。
透析只需要使用专用的半透膜即可完成。
通常是将半透膜制成袋状,将生物大分子样品溶液置入袋,将此透析袋浸入水或缓冲液中,样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋,而盐和小分子物质不断扩散透析到袋外,直到袋外两边的浓度达到平衡为止。
保留在透析袋未透析出的样品溶液称为“保留液”,袋(膜)外的溶液称为“渗出液”或“透析液”。
透析的动力是扩散压,扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。
透析的速度反比于膜的厚度,正比于欲透析的小分子溶质在膜外两边的浓度梯度,还正比于膜的面积和温度,通常是4℃透析,升高温度可加快透析速度。
透析膜可用动物膜和玻璃纸等,但用的最多的还是用纤维素(再生纤维素RC、纤维素酯CE、PVDF等)制成的透析膜,目前常用的是美国美国光谱医学公司(spectrum,欧韦达仪器科技是中华区特约总经销)和美国Union Carbide (联合碳化物公司,欧韦达仪器科技是华东区特约经销商)生产的各种尺寸的透析管,截留分子量MwCO(即留在透析袋的生物大分子的最小分子量,缩写为MwCO)大概有100、500、1000、2000、3500、8000、10000、15000、20000、25000、50000、100000、250000、500000、1000000等种类,单位为道尔顿(D)。
商品透析袋制成管状,其扁平宽度为8 mm~77 mm不等。
为防干裂,出厂时都用10%的甘油处理过,并含有极微量的硫化物、重金属和一些具有紫外吸收的杂质,它们对蛋白质和其它生物活性物质有害,用前必须除去。
透析膜可用动物膜和玻璃纸等,但用的最多的还是用纤维素制成的透析膜,目前常用的是美国Union Carbide (联合碳化物公司)和美国光谱医学公司生产的各种尺寸的透析管,截留分子量MwCO(即留在透析袋的生物大分子的最小分子量)通常为1万左右。
透析袋使用说明及注意事项

用到透析的技术。
透析只需要使用专用的半透膜即可完成。
通常是将半透膜制成袋状,将生物大分子样品溶液置入袋内,将此透析袋浸入水或缓冲液中,样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内,而盐和小分子物质不断扩散透析到袋外,直到袋内外两边的浓度达到平衡为止。
保留在透析袋内未透析出的样品溶液称为“保留液”,袋(膜)外的溶液称为“渗出液”或“透析液”。
透析的动力是扩散压,扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。
透析的速度反比于膜的厚度,正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度,还正比于膜的面积和温度,通常是4℃透析,升高温度可加快透析速度。
纤维素酯CE、PVDF等)制成的透析膜,目前常用的是美国美国光谱医学公司(spectr um,上海欧韦达仪器科技有限公司是中华区特约总经销)和美国Uni on Carbid e (联合碳化物公司,上海欧韦达仪器科技有限公司是华东区特约经销商)最小分子量,缩写为MwC O)大概有100、500、1000、2000、3500、8000、10000、15000、20000、25000、50000、100000、250000、500000、1000000等种类,单位为道尔顿(D)。
商品透析袋制成管状,其扁平宽度为8 mm~77 mm不等。
为防干裂,出厂的杂质,它们对蛋白质和其它生物活性物质有害,用前必须除去。
1.将透析管剪成适当长度(10-20cm)的小段,即成透析袋。
10mi n。
3.将透析袋用蒸馏水彻底漂洗。
4.将透析袋置1mmol/LEDTA(PH=8)中煮沸10m in。
5.透析袋冷却后存放于4度,应确保透析袋始终浸没在液体中。
注:从此步起用透析袋时一定要戴手套操作。
6.在使用之前要用蒸馏水将透析袋里外加以清洗。
透析袋原理

透析袋原理
透析袋是一种常用于生物化学实验室中的实验工具,它通过半透膜的特性,实现了对生物分子的分离和纯化。
透析袋原理是基于半透膜对不同分子大小和性质的选择性透过性,从而实现对混合物中目标分子的分离和富集。
在生物化学实验中,透析袋的原理被广泛应用于蛋白质纯化、离子浓度调节等领域。
透析袋的半透膜是其实现分离的关键。
半透膜是一种特殊的薄膜,它具有对溶质分子的选择性透过性。
当混合物与半透膜接触时,溶质分子将根据其大小和性质被选择性地透过或阻挡。
这种选择性透过性使得透析袋能够实现对混合物中不同分子的有效分离。
在透析袋中,混合物被置于半透膜的内部,然后将透析袋悬浮在适当的缓冲液中。
由于半透膜的存在,混合物中的小分子溶质可以通过半透膜,而大分子溶质则被阻挡在透析袋内部。
这样,经过一段时间的透析,我们可以得到缓冲液中富集了小分子溶质的溶液,而透析袋内部则富集了大分子溶质。
透析袋原理的应用不仅局限于生物化学实验室,它在生物医药领域也有着重要的应用。
例如,在蛋白质纯化过程中,透析袋可以帮助实现对目标蛋白的纯化和富集,从而为后续的实验和研究提供了可靠的样品。
此外,在生物药物制剂中,透析袋也常被用于调节药物的离子浓度,以确保药物的稳定性和安全性。
总的来说,透析袋原理是基于半透膜的选择性透过性,通过将混合物置于透析袋中,利用溶质分子的大小和性质差异,实现对混合物中目标分子的分离和富集。
透析袋原理在生物化学实验和生物医药领域有着广泛的应用,为科研和生产提供了重要的技术支持。
希望通过对透析袋原理的深入理解,能够更好地应用于实验和生产实践中,推动生物化学领域的发展和进步。
透析袋处理及透析操作

透析袋处理及透析操作透析只需要使用专用的半透膜即可完成。
通常是将半透膜制成袋状,将生物大分子样品溶液置入袋内,将此透析袋浸入水或缓冲液中,样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内,而盐和小分子物质不断扩散透析到袋外,直到袋内外两边的浓度达到平衡为止。
保留在透析袋内未透析出的样品溶液称为"保留液",袋(膜)外的溶液称为"渗出液"或"透析液"。
透析的动力是扩散压,扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。
透析的速度反比于膜的厚度,正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度,还正比于膜的面积和温度,通常是4℃透析,升高温度可加快透析速度。
透析膜可用动物膜和玻璃纸等,但用的最多的还是用纤维素制成的透析膜,目前常用的是美国Union Carbide (联合碳化物公司)和美国光谱医学公司生产的各种尺寸的透析管,截留分子量MwCO(即留在透析袋内的生物大分子的最小分子量,缩写为MwCO)通常为1万左右。
商品透析袋制成管状,其扁平宽度为23 mm~50 mm不等。
为防干裂,出厂时都用10%的甘油处理过,并含有极微量的硫化物(0.1%)、重金属和一些具有紫外吸收的杂质,它们对蛋白质和其它生物活性物质有害,用前必须除去。
透析袋的处理:可先用50%乙醇煮沸1小时,再依次用50%乙醇、0.01 mol/L碳酸氢钠和0.001 mol/L EDTA溶液洗涤,最后用蒸馏水冲洗即可使用。
实验证明,50%乙醇处理对除去具有紫外吸收的杂质特别有效。
(也可先在大体积的2%(W/V)碳酸氢钠和1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将透析袋煮沸10分钟,用蒸馏水彻底清洗后,再放在1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将之煮沸10分钟。
)使用后的透析袋洗净后可存于4℃蒸馏水中,确保透析袋始终浸没在溶液内。
若长时间不用,可加少量NaN2,以防长菌。
从此时起取用透析袋必须戴手套。
透析袋说明

透析袋使用说明产品介绍一、高精度、即用型透析袋,使用前无需处理(生物级,去除了硫化物和重金属离子,保存于防腐液中)即用型透析袋的制造过程没有重金属污染及硫化物,无需预处理,只需用去离子水清洗即可使用,满足对截留分子量精确性和膜纯度的应用。
优点:1. 韧性膜材料,不易破损2. 杂质含量极少,可无需预处理,只需用去离子水清洗即可使用3. 孔径标准均一4. 对溶质的吸附性小5. 可选分子量范围广 100-3000006. 多种扁平宽度可选7. 特有生物技术膜,不含硫化物及金属杂质二、普通干型透析袋(美国联合碳化,甘油涂层,使用前需处理)技术参数:1. PH 稳定范围 : 5-92. 污染物水平: 硫化物<0.3%; 重金属<50ppm3. 化学兼容性: 与很多盐兼容,比如 CaCl2, (NH4)2SO4;还可与分子生物学及酶学中常用的水溶剂、有机溶剂兼容,比如异丙醇、乙醇和丙酮。
4. 温度抵抗性:可煮沸,可高压灭菌。
5. 蛋白吸附:每克透析袋吸附蛋白量小于 1ng。
干型透析袋使用前处理方法:1. 把透析袋剪成适当长度(10-20cm)的小段。
2. 在大体积的 2%(W/V)碳酸氢钠和 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将透析袋煮沸 10 分钟。
3. 用蒸馏水彻底清洗透析袋。
4. 放在 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将之煮沸 10 分钟。
5. 冷却后,存放于 4 度,必须确保透析袋始终浸没在溶液内。
从此时起取用透析袋是必须戴手套。
6. 用前在透析袋内装满水然后排出,将之清洗干净。
实验要求不高的可以用简易处理方法:在沸水中煮 10min 即可使用。
透析袋的应用:去除盐类、表面活性剂和溶剂样品溶液的缓冲液置换和 PH 值的调节浓缩蛋白质、多肽和抗体 DNA 电洗脱电泳前稀释蛋白的制备小分子污染物清除结合研究组织培养的提取纯化透析袋的选择1.正确选择合适的截留分子量截留分子量的选择是以预留在膜内的大分子的分子量和将要被除去的小分子污染物的分子量为基础的。
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透析袋原理、分子量的选择、使用方法步骤透析袋原理自1861年发明透析方法至今已有一百多年。
透析已成为生物化学实验室最简便最常用的分离纯化技术之一。
在生物大分子的制备过程中,除盐、除少量有机溶剂、除去生物小分子杂质和浓缩样品等都要用到透析的技术。
通常是将半透膜制成袋状,将生物大分子样品溶液置入袋内,将此透析袋浸入水或缓冲液中,样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内。
分子量的选择透析是一个简单的扩散过程,溶质中小分子物质从高浓度溶液通过半透性膜扩散到低浓度溶液中,直至渗透压达到平衡。
由于多孔膜的选择性,使得溶质中小分子物质可以通过,而较大物质则被截留,从而分离出不同大小分子量的物质,依据分子量大小截留,可高效用于分离工艺,改变或控制透析的条件,可在多种透析应用中得到预期效果,通过截留分子量(MWCO)可使目标分子得到分离。
所以透析袋分子量的选择就决定了实验的成败。
这篇文章就详细介绍了如何选择合适的透析袋。
透析膜的材质透析膜可用动物膜和玻璃纸等,但用的最多的还是用纤维素制成的透析膜,主要有再生纤维素(RC)、纤维素酯(CE)、聚偏二氟乙烯(PVDF)。
但随着生物技术发展,对透析袋处理样品更多更严格的要求,根据生产工艺有可以分为标准膜和生物技术级膜。
生物技术纤维素酯(CE)膜生物学惰性和超纯的生物技术CE膜,用于带电荷分子的分离及大分子纯化。
生物技术CE膜对条件及溶剂要求较高。
一般而言,CE膜能够抗弱的或稀的酸碱溶液和轻微乙醇,MWCO只有轻微改变。
**直接与有机溶剂接触会破坏CE膜。
生物技术CE膜能在pH2-9与4-37℃下使用。
即用透析装置中也可使用CE膜。
生物技术再生纤维素(RC)膜生物技术RC膜通过再生过程制得,物理抗性与化学相容性得到改良,具有与生物技术CE膜一样高纯度与均一的MWCO。
RC膜能够与高浓度的弱酸碱、低浓度的强酸碱、大多数醇类及一些温和的或低浓度有机溶剂共用,**直接与强极性或有机溶剂接触会破坏RC膜。
生物技术RC膜能在pH2-12与4-60℃条件下使用。
生物技术聚偏二氟乙烯(PVDF)膜疏水、惰性及无电抗性,生物技术PVDF膜是实验室透析的革命性进步,能够耐极端高温(130℃)及溶剂条件。
只有生物技术PVDF膜能够经受与大多数的酸碱(包括硝酸)和大多数的有机溶剂(包括DMF)直接接触,**PVDF膜还具有独特的高温高压蒸汽灭菌的能力,可热封进行样品分装。
透析膜的选择1. 选择合适的分子截留量(MWCO):由于透析膜由海绵状横向耦合的聚合物材料构成,截留性能间接的由孔径等级即截留分子量(MWCO)表示,截留率90%的溶质分子大小可更精确的表示膜的MWCO。
然而,溶质的渗透性亦取决于分子形状、水合度、离子电荷与极性,推荐选择膜的MWCO为欲截留物质分子量的一半,两倍于透过物质的分子大小。
2. 选择合适的形状:根据需要,最大程度的方便操作及样品回收。
3. 选择合适的膜:成功进行透析分离的关键是在适当的条件下选用最合适的膜。
选择时可参照下列:o 根据目的选择等级(生物技术或标准);o 根据溶液的化学特性选择膜材质(CE、RC或PVDF);o 根据使用方法选择产品类型(管状、一次性或片状);o 根据溶质分子量在不同种MWCO中选择;o 根据目的选择膜预处理方式;使用方法步骤下面分别介绍透析袋和透析膜使用方法和步骤方法一:透析袋使用前处理方法:1. 把透析袋剪成适当长度(10-20cm)的小段。
2. 在大体积的2%(W/V)碳酸氢钠和 10mmol/L EDTA(pH8.0)中将透析袋煮沸10分钟。
3. 用蒸馏水彻底清洗透析袋。
4. 放在 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将之煮沸10分钟。
5.冷却后,存放于4度,必须确保透析袋始终浸没在溶液内。
从此时起取用透析袋是必须戴手套。
6. 用前在透析袋内装满水然后排出,将之清洗干净。
透析膜使用前处理方法:1. 戴手套把透析膜剪成适当长度,浸在蒸馏水中 15 min 泡软。
2. 浸入 10 mM sodium bicarbonate 中,并加热至 80℃,一边搅拌至少 30min。
3. 换到 10 mM Na2ull;EDTA 中浸泡 30 min,以新鲜的 EDTA 同样方法处理三次。
4. 再用 80℃蒸馏水洗 30 min,然后换到 20% 酒精中,放在 4℃冰箱中保存。
透析的动力是扩散压,扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。
透析的速度反比于膜的厚度,正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度,还正比于膜的面积和温度,通常是4℃透析,升高温度可加快透析速度。
通常在试验前需要确定透析袋的截留分子量。
方法二:透析只需要使用专用的半透膜即可完成。
通常是将半透膜制成袋状,这种由半透膜制成的袋状容器即透析袋。
将生物大分子样品溶液置入袋内,将此透析袋浸入水或缓冲液中,样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内,而盐和小分子物质不断扩散透析到袋外,直到袋内外两边的浓度达到平衡为止。
保留在透析袋内未透析出的样品溶液称为“保留液”,袋(膜)外的溶液称为“渗出液”或“透析液”。
透析袋预处理:透析袋一般制成管状,其扁平宽度为16 mm~50 mm不等。
为防干裂,已用10%的甘油处理过,并含有极微量的硫化物、重金属和一些具有紫外吸收的杂质,它们对蛋白质和其它生物活性物质有害,用前必须除去。
可先用50%乙醇煮沸1小时,再依次用50%乙醇、0.01 mol/L碳酸氢钠和0.001 mol/L EDTA溶液洗涤,最后用蒸馏水冲洗即可使用。
新透析袋如不作如上的特殊处理,则可用沸水煮五至十分钟,再用蒸馏水洗净,即可使用。
使用时,一端用橡皮筋或线绳扎紧,也可以使用特制的透析袋夹夹紧,由另一端灌满水,用手指稍加压,检查不漏,方可装入待透析液,通常要留三分之一至一半的空间,以防透析过程中,透析的小分子量较大时,袋外的水和缓冲液过量进入袋内将袋涨破。
含盐量很高的蛋白质溶液透析过夜时,体积增加50%是正常的。
实验过程小技巧:检查透析效果可用1% BaCl2检查(NH4)2SO4,用1% AgNO3 检查NaCl、KCl等。
为了加快透析速度,除多次更换透析液外,还可使用磁子搅拌。
透析的容器要大一些,可以使用大烧杯、大量筒和塑料桶。
小量体积溶液的透析,可在袋内放一截两头烧园的玻璃棒或两端封口的玻璃管,以使透析袋沉入液面以下。
使用者也可以自行设计与制作各种简易的透析装置。
透析袋用后处理:使用后的透析袋洗净后可存于4℃蒸馏水中,若长时间不用,可加少量NaN2,以防长菌。
洗净凉干的透析袋弯折时易裂口,用时必须仔细检查,不漏时方可重复使用。
上海索桥生物科技有限公司备有大量现货透析袋,规格齐全,多种扁宽和截留分子量可供选择,同时还有各种规格的即用型透析袋,用于生化实验中生物大分子的制备过程中,可除去盐、少量有机溶剂、生物小分子杂质和浓缩样品等。
即用型透析袋,使用前只需用蒸馏水冲洗即可使用,生物技术级的透析袋基本不含硫化物和重金属离子。
方法三:产品介绍一、高精度、即用型透析袋,使用前无需处理(生物级,去除了硫化物和重金属离子,保存于防腐液中)即用型透析袋的制造过程没有重金属污染及硫化物,无需预处理,只需用去离子水清洗即可使用,满足对截留分子量精确性和膜纯度的应用。
优点:1. 韧性膜材料,不易破损2. 杂质含量极少,可无需预处理,只需用去离子水清洗即可使用3. 孔径标准均一4. 对溶质的吸附性小5. 可选分子量范围广 100-3000006. 多种扁平宽度可选7. 特有生物技术膜,不含硫化物及金属杂质二、普通干型透析袋(美国联合碳化,甘油涂层,使用前需处理)技术参数:1. PH 稳定范围 : 5-92. 污染物水平: 硫化物<0.3%; 重金属<50ppm3. 化学兼容性: 与很多盐兼容,比如 CaCl2, (NH4)2SO4;还可与分子生物学及酶学中常用的水溶剂、有机溶剂兼容,比如异丙醇、乙醇和丙酮。
4. 温度抵抗性:可煮沸,可高压灭菌。
5. 蛋白吸附:每克透析袋吸附蛋白量小于 1ng。
干型透析袋使用前处理方法:1. 把透析袋剪成适当长度(10-20cm)的小段。
2. 在大体积的 2%(W/V)碳酸氢钠和 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将透析袋煮沸 10 分钟。
3. 用蒸馏水彻底清洗透析袋。
4. 放在 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将之煮沸 10 分钟。
5. 冷却后,存放于 4 度,必须确保透析袋始终浸没在溶液内。
从此时起取用透析袋是必须戴手套。
6. 用前在透析袋内装满水然后排出,将之清洗干净。
实验要求不高的可以用简易处理方法:在沸水中煮 10min 即可使用。
透析袋的应用:去除盐类、表面活性剂和溶剂样品溶液的缓冲液置换和 PH 值的调节浓缩蛋白质、多肽和抗体 DNA 电洗脱电泳前稀释蛋白的制备小分子污染物清除结合研究组织培养的提取纯化透析袋的选择1.正确选择合适的截留分子量截留分子量的选择是以预留在膜内的大分子的分子量和将要被除去的小分子污染物的分子量为基础的。
为达到合理有效的分离,需分离的两种物质分子量的比率至少为 25.选择截留分子量的经验法则:选择截留分子量值约为要保留的大分子分子量的一半,以获得至少 90%的保留率。
2.正确选择扁平宽度透析袋扁平宽度的选择取决于样品体积和透析容量。
较小的透析管透析更快;较大的透析管因扩散距离较长透析较慢。
为易于使用,建议使用总长(包括闭合夹和顶部空间)为大约 10-15 厘米的透析袋。
3.透析袋的化学相容性化学相容性主要用作使用指导,不作为化学相容的保证。
温度,浓度,长时间曝光等因素的改变可能影响产品的使用。
建议您自设条件进行测试。
透析袋的使用下述透析程序是一个普遍的基础透析过程。
在开始透析之前应考虑到许多变数。
透析样品溶剂、膜的化学相容性、膜的截留分子量,透析溶剂、透析体积、温度等变量都会影响透析速率,因此,一些应用中下述透析过程可能需要适当的变化。
1.把适量的透析液(缓冲液)加入透析装置。
透析液的体积应为样品体积量的 100 倍。
(例如:在一升透析液中透析 10 毫升的样品)2.裁剪适当长度的透析管。
预留一段额外长度(约占总样品体积量的 20%)作为头部空间。
3.把透析管插入打开的透析夹,在约超出透析夹 3-5 毫米的位置再夹住。
不要折叠透析袋。
4.由透析管开口端将样品装入。
调整一下顶部空间的长度,夹紧透析夹。
5.把透析样品放在合适的透析缓冲液中。
6.透析要根据具体的应用需求。
通常情况下,允许过夜透析。
在持续透析的过程中,至少要进行 3 次全部更换透析液。
建议在(透析后)2-4 小时,6-8 小时和 10-14 小时(第 2 天早晨)更换透析液。