生物制药工艺处理学考试2013-12(A卷)

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生物制药工艺学习题(含复习资料

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生物制药工艺学习题集(含答案)第一章生物药物概述一、填空:1、我国药物的三大药源指的是化学药物、生物药物、中药2、现代生物药物已形成四大类型,包括基因重组多肽和蛋白质、基因药物、天然生化药物、合成与部分合成的生物药物3、请写出下列药物英文的中文全称:()干扰素、()白介素、()集落刺激因子、()促红细胞生成素、()表皮生长因子、()神经生长因子、()重组人生长激素、()胰岛素、()人绒毛膜促性腺激素、促黄体生成素、超氧化物歧化酶、组织纤溶酶原激活物4、常用的β-内酰胺类抗生素有青霉素、头孢菌素;氨基糖苷类抗生素有链霉素;大环内酯类抗生素有红霉素;四环类抗生素有土霉素;多肽类抗生素有杆菌肽;多烯类抗生素有两性霉B;蒽环类抗生素有阿霉素5、嵌合抗体是指用人源抗体恒定区替换鼠源抗体恒定区,保留抗体可变区;人源化抗体是指抗体可变区中仅(决定簇互补区)为鼠源,其(骨架区)及恒定区均来自人源。

6、基因工程技术中常用的基因载体有质粒、噬菌体()、黏粒()、病毒载体等。

二、选择题:1、以下能用重组技术生产的药物为(B)A、维生素B、生长素C、肝素D、链霉素2、下面哪一种药物属于多糖类生物药物(C)A、洛伐他汀B、干扰素C、肝素D、细胞色素C3、能用于防治血栓的酶类药物有(D)A、 B、胰岛素 C、天冬酰胺酶 D、尿激酶4、环孢菌素是微生物产生的(A)A、免疫抑制剂B、酶类药物C、酶抑制剂D、大环内酯类抗生素5、下列属于多肽激素类生物药物的是(D)A、 B、四氢叶酸 C、透明质酸 D、降钙素6、蛋白质工程技术改造的速效胰岛素机理是(D)A. 将猪胰岛素B30位改造为丙氨酸,使之和人胰岛素序列一致B. 将A21位替换成甘氨酸,B链末端增加两个精氨酸,使之在4溶液中可溶C. 将B29位赖氨酸用长链脂肪酸修饰,改变其皮下扩散和吸收速度D. 将人胰岛素B28位与B29位氨基酸互换,使之不易形成六聚体三、名词解释:1、药物 ():用于预防、治疗或诊断疾病或调节机体生理功能、促进机体康复保健的物质,有4大类:预防药、治疗药、诊断药和康复保健药2、生物药物():是以生物体、生物组织或其成份为原料(包括组织、细胞、细胞器、细胞成分、代谢、排泄物)综合应用生物学、物理化学与现代药学的原理与方法加工制成的药物3、基因药物():是以基因物质(或及其衍生物)作为治疗的物质基础,包括基因治疗用的重组目的片段、重组疫苗、反义药物和核酶等4、反义药物:是以人工合成的十至几十个反义寡核苷酸序列,它能与模板或互补形成稳定的双链结构,抑制靶基因的转录和翻译,从而达到抗肿瘤和抗病毒作用5、生物制品():是应用普通的或以基因工程、细胞工程、蛋白质工程、发酵工程等生物技术获得的微生物、细胞及各种动物和人源的组织和液体等生物材料制备的,用于人类疾病预防、治疗和诊断的药品6、干涉(,):是指在生物体细胞内,引起同源的特异性降解,因而抑制相应基因表达的过程7、( ) :是一种小分子(~21-25核苷酸),由(Ⅲ家族中对双链具有特异性的酶)加工而成。

生物制药工艺学考试2014-12+(A卷) (1)

生物制药工艺学考试2014-12+(A卷) (1)

中国药科大学 生物制药工艺学 期末试卷A卷2014-2015学年第一学期专业班级学号姓名题号一二三四总分得分核分人:得分评卷人一、填空题(每空0.5分,共30分)1、实习时,老师给出以下螺旋藻多糖提取工艺:将螺旋藻粉在90℃热水中搅拌4h,目的是,然后离心过滤,收集滤液,将滤液浓缩,在此可使用浓缩方法,浓缩液加入3倍体积乙醇,加入乙醇的目的是,过滤后取可获多糖粗品。

2、某菌种拟保存10年以上时间,可采用方法保存。

对于动物细胞,可采用方法保存。

使用斜面保存菌种时,应放于℃的冰箱内。

3、嵌合抗体是指用替换,保留;人源化抗体是指抗体可变区中仅为鼠源,其及恒定区均来自人源。

4、常用的破乳化方法有、、、等。

5、选择性变性沉淀主要包括、和。

6、常用的吸附剂有、和等。

第1页(共8页)7、葡聚糖凝胶的孔径大小取决于 ,其越小,凝胶孔径越 ;而琼脂糖凝胶的孔径却依赖于 。

8、在采用多缓冲阴离子交换剂作固定相的离子交换聚焦色谱过程中,当柱中某位点之pH值下降到蛋白质组分 值以下时,它因带电荷而 ,如果柱中有两种蛋白组分,pI值较大者会超过另一组分,移动至柱下部pH较 的位点进行 。

9、亲和层析洗脱方法有 , , 。

10、亲和力大小除由亲和对本身的 决定外,还受许多因素的影响,其中包括亲和吸附剂 、 、 、 、 等。

10、实验用超滤器的类型有 , , , 等。

11、利用产氨短杆菌发酵法生产肌苷酸,第一步是用诱变育种的方法筛选缺乏酶的缺陷型菌株,在发酵培养基中提供亚适量的;另外,改变细胞膜对5′-IMP的透性,选育不敏感的变异株。

12、目前临床使用的胰岛素主要三类生产方法,第一类是以 为原料提取胰岛素;第二类是酶促半合成胰岛素;第三类是采用 生产人胰岛素。

13、四环素制备工艺中,在发酵液中加入草酸的目的是 、 和 。

14、重组药物制备过程中,目的基因的获得可用 、 、 和 方法。

15、生物制品主要包括 、 和 、 、 和其他。

生物制药工艺学试题及答案

生物制药工艺学试题及答案

重庆三峡学院2014至2015学年度第2期生物制药工艺学试题(A)试题使用对象:生命科学与工程学院2012级生物技术专业(本科)一、名词解释(本题共4小题,每小题3分,共12分)1.差异毒力2.干扰素3.GMP4.接种量二、单项选择题(本题共10小题,每小题2分,共20分)1、能用于防治血栓的酶类药物有()A、SODB、胰岛素C、L-天冬酰胺酶D、尿激酶2、环孢菌素是微生物产生的()A、免疫抑制剂B、酶类药物C、酶抑制剂D、大环内酯类抗生素3、如果想要从生物材料中提取辅酶Q10,应该选取下面哪一种动物脏器()A、胰脏B、肝脏C、小肠D、心脏4、目前分离的1000多种抗生素,约2/3产自()A、真菌B、放线菌C、细菌D、病毒5、由于目的蛋白质和杂蛋白分子量差别较大,拟根据分子量大小分离纯化并获得目的蛋白质,可采用()A、SDS凝胶电泳B、盐析法C、凝胶过滤D、吸附层析6、能够用沙土管保存的菌种是()A、大肠杆菌B、酵母菌C、青霉菌D、乳酸杆菌7、当向蛋白质纯溶液中加入中性盐时,蛋白质溶解度()A.增大B.减小C.先增大,后减小D.先减小,后增大8、盐析常数Ks是生物大分子的特征常数,它与下列哪种因素关系密切。

()A.盐浓度B.盐种类C.溶质浓度D介质pH9、下列属于无机吸附剂的是:()A.白陶土B.活性炭C.淀粉D.纤维素10、活性炭在下列哪种溶剂中吸附能力最强?()A.水B.甲醇C.乙醇D.三氯甲烷三、简答题(本题共6小题,每小题9分,共54分)1、简述生物药物的特点?2、简述抗生素生物合成基因的方法?3、医用抗生素应具备哪些要求?4、简述糖类药物的生理活性?5、多糖的提取方法?6、影响青霉素发酵产率的因素及发酵过程控制?四、填空题(本题共7空,每小题2分,共14分)重庆三峡学院2014 至2015 学年度第 2 期生物制药工艺学课程期末考查A 卷参考答案一、名词解释1.差异毒力:药物对病原菌和宿主组织的毒力差异。

制药工艺学试题试卷答案真题

制药工艺学试题试卷答案真题

制药工艺学试卷一、A型题 (每题1分,共20分)1.萃取操作时要注意控制水提取液的浓度,使其相对浓度在( )之间,浓度过大容易导致萃取不完全,过小则溶剂消耗太大,影响操作。

A.1~2B.1.1~1.2C.1.2~1.3D.1.3~1.42.外源蛋白表达时,在较高温度下表达包涵体的菌种,()下有利于表达可溶性蛋白。

A.适宜温度B.较高温度C.其它选项都不是D.较低温度3.胰岛素由( )个氨基酸残基组成,分为A,B两个肽链。

A.49B.50C.51D.524.阿糖胞苷的给药方式为()。

A.注射给药B.口服给药C.舌下含服D.喷雾吸入5.复方新诺明的成分甲氧苄啶与磺胺甲噁唑的配比( )。

A.1:3B.1:7C.1:1D.1:56.下列选项中,哪一个是工业生产中常用的溶剂,能与水以任意比例互溶,并且可以通过调节自身的浓度,选择性浸提药材中的某些有效成分?( )A.丙酮B.乙醇C.二氯甲烷D.氯仿7.( )是指彼此相同数值重复测量的相近度。

A.准确度C.特意度D.敏感度8.辅酶Q10粗制品可以用( )梯度洗脱除杂质。

A.乙醇-乙醚B.石油醚-乙醚C.氯仿-乙醇D.醋酸-乙酯9.以羊脑为原料提取卵磷脂的过程中,分别用( )倍体积的丙酮浸渍3次。

A.2.5,3,1.5B.3.5,2.5,1.5C.3,2.5,1.5D.3,2,110.下列属于酸性氨基酸的是( )。

A.赖氨酸B.苏氨酸C.谷氨酸D.精氨酸11.下列哪种催化剂适合用于氧化反应?( )A.铂B.钯C.二氧化锰D.镍12.可用于治疗脑及神经疾病的是( )。

A.5-羟色氨酸B.苏氨酸C.谷氨酸D.精氨酸13.胰酶在水溶液pH值大于6.0是不稳定的,通过加()可增加其稳定性。

A.镁离子B.铁离子C.钙离子D.锌离子14.研究、筛选适宜的中间体并确定高效、优质的工艺路线,采用合理的工艺原理,实现规模化生产过程最优化的一门学科是( )。

A.制药工程设计B.制药原理与设备D.制药工艺学15.制药工业对环境的污染主要来自( )生产。

(完整版)生物制药工艺学习题(含答案,推荐文档

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6、基因工程技术中常用的基因载体有质粒、噬菌体(phage)、黏粒(cosmid)、病毒载体 等。
二、选择题:
1、以下能用重组 DNA 技术生产的药物为 A、维生素 B、生长素 C、肝素
2、下面哪一种药物属于多糖类生物药物
D、链霉素
(B) (C

A、洛伐他汀 B、干扰素 C、肝素
D、细胞色素 C
3、能用于防治血栓的酶类药物有
四、问答题 1、 基因重组药物与基因药物有什么区别? 1. 答:基因重组药物是指应用重组 DNA 技术(包括基因工程技术和蛋白质工程技术)制
2
造的重组多肽、蛋白质类药物和疫苗、单克隆抗体与细胞因子等,药物的化学成分属 于多肽或蛋白质;基因药物是以基因物质(RNA 或 DNA 及其衍生物)作为治疗的物 质基础,包括基因治疗用的重组目的 DNA 片段、重组疫苗、反义药物和核酶等,药物 的化学成分为核酸或其衍生物。 2、 生物药物有那些作用特点? 2.答:1)药理学特性有:药理活性高;治疗针对性强;毒副作用较少,营养价值高; 生理副作用常有发生等。2)理化特性有:生物材料中的有效物质含量低,杂质种类多 且含量相对较高;生物活性物质组成结构复杂,稳定性差;生物材料易染菌,腐败; 生物药物制剂有特殊要求。 3.基因工程药物主要有哪几类?试举例说明。 3. 答:基因工程药物是指应用基因工程或蛋白质工程技术制造的重组活性多肽、蛋白质及 其修饰物,包括:1)重组细胞因子类:如干扰素(IFN)、白介素(IL)和肿瘤坏死因子 (TNF);2)重组生长因子类:如表皮生长因子(EGF)、神经生长因子(NGF),以及促 进造血系统的生长因子:如促红细胞生成素(EPO)、集落刺激因子等(CSF);3)重组多 肽与蛋白质类激素:如重组人胰岛素(rhInsulin)、重组人生长激素等(rhGH);4)心血 管病治疗剂及酶制剂:如水蛭素、tPA(组织纤溶酶原激活物)、天冬酰胺酶、超氧化物歧 化酶(SOD)等。5)重组疫苗及单抗制品:如重组乙肝表面抗原疫苗(酵母)、肿瘤疫苗 等

生物制药工艺生物技术考核试卷

生物制药工艺生物技术考核试卷
5.高效液相色谱法(HPLC)可以用于生物制药产品的含量测定和纯度分析。()
6.动物实验是研究生物制药药效学的唯一方法。()
7. CRISPR-Cas9技术可以用于所有类型的细胞进行基因编辑。()
8.生物制药产品在储存过程中,温度对其稳定性影响最大。()
9.逆转录酶PCR技术主要用于DNA的克隆和表达。()
A.荧光定量PCR
B.色谱技术
C.电泳技术
D.显微镜检查
9.基因工程疫苗的生产可以采用以下哪些生物技术?()
A.重组DNA技术
B.亲和层析技术
C.冷冻干燥技术
D.热处理技术ห้องสมุดไป่ตู้
10.下列哪些生物技术用于细胞培养的监测?()
A.流式细胞术
B.显微镜检查
C.色谱技术
D.电泳技术
11.研究生物制药的药代动力学可以采用以下哪些技术?()
10.生物制药工艺中,所有的生物技术都可以在不同程度上应用于药物研发的各个阶段。()
五、主观题(本题共4小题,每题10分,共40分)
1.请简述生物技术在生物制药中的应用,并举例说明。
2.描述蛋白质纯化的主要步骤及其原理,并讨论在生物制药过程中蛋白质纯化的重要性。
3.以单克隆抗体的制备为例,说明杂交瘤技术的原理及其在生物制药中的应用。
C.连接酶
D. DNA聚合酶
3.生物制药工艺中,蛋白质的分离纯化技术包括哪些?()
A.电泳技术
B.色谱技术
C.亲和层析技术
D.西格玛测试
4.下列哪些生物技术可以用于生产单克隆抗体?()
A.重组DNA技术
B.亲和层析技术
C.杂交瘤技术
D.蛋白质结晶技术
5.生物制药生产中,常用的细胞系有哪些?()

生物制药考试试题及答案

生物制药考试试题及答案

生物制药考试试题及答案一、单项选择题(每题2分,共20分)1. 生物制药中常用的细胞培养技术是:A. 静态培养B. 动态培养C. 悬浮培养D. 混合培养答案:C2. 下列哪项不是生物制药中常用的生物反应器类型?A. 搅拌式反应器B. 填充床反应器C. 流化床反应器D. 离心式反应器答案:D3. 重组DNA技术中,用于将目的基因导入宿主细胞的方法是:A. 电穿孔法B. 化学转化法C. 转导法D. 共轭法答案:A4. 单克隆抗体制备过程中,杂交瘤细胞的筛选通常不包括以下哪项?A. 特异性筛选B. 克隆性筛选C. 稳定性筛选D. 产量筛选答案:D5. 生物制药中,用于提高蛋白质稳定性的常见策略不包括:A. 添加稳定剂B. 改变pH值C. 降低温度D. 增加盐浓度答案:D6. 下列哪项不是生物制药中常用的分离纯化技术?A. 色谱法B. 离心法C. 沉淀法D. 热处理法答案:D7. 在生物制药过程中,用于检测蛋白质活性的常用方法不包括:A. ELISAB. Western blotC. 酶联免疫吸附测定D. 免疫沉淀答案:D8. 生物制药中,用于提高蛋白质产量的策略不包括:A. 优化培养条件B. 基因工程改造C. 使用廉价培养基D. 增加细胞密度答案:C9. 下列哪项不是生物制药中常用的质量控制方法?A. 微生物检测B. 内毒素检测C. 热原检测D. 放射性检测答案:D10. 生物制药中,用于评估蛋白质纯度的常用技术不包括:A. SDS-PAGEB. HPLCC. 质谱法D. 流式细胞术答案:D二、多项选择题(每题3分,共15分)1. 生物制药中,下列哪些因素会影响细胞培养的效果?A. 培养基成分B. 温度C. pH值D. 光照答案:ABC2. 在生物制药过程中,下列哪些因素会影响蛋白质的稳定性?A. 蛋白质本身的结构B. 储存条件C. 蛋白质的修饰D. 蛋白质的浓度答案:ABCD3. 生物制药中,下列哪些技术可用于蛋白质的定量分析?A. BCA法B. Bradford法C. Lowry法D. 紫外吸收法答案:ABCD4. 下列哪些因素会影响单克隆抗体的制备?A. 融合细胞的选择B. 筛选方法C. 培养条件D. 抗体的纯化答案:ABCD5. 生物制药中,下列哪些方法可用于蛋白质的纯化?A. 离子交换色谱B. 亲和色谱C. 凝胶过滤色谱D. 离心分离答案:ABC三、简答题(每题5分,共20分)1. 简述生物制药中细胞培养的基本原理。

生物制药工艺学考试2013-12+(A卷) (1)

生物制药工艺学考试2013-12+(A卷) (1)

中国药科大学 生物制药工艺学 期末试卷A卷2013-2014学年第一学期专业班级学号姓名题号一二三四总分得分核分人:得分评卷人一、填空题(每空0.5分,共30分)1、细胞破碎包括哪三大类方法、和。

2、萃取因素也称萃取比,其定义为被萃取溶质进入的总量与该溶质在中总量之比。

3、晶体的质量主要是指晶体的大小、形状和纯度,其中影响晶体大小的主要因素有 , , , 。

4、大孔网状聚合物吸附剂是在树脂聚合时加入 致孔剂,待网格骨架固化和链结构单元形成后,用溶剂萃取或蒸馏水洗将致孔剂去掉,形成不受外界环境条件影响的 ,其孔径远大于2~4nm,可达 ,故称“大孔”。

5、在作分级分离时,为了提高分辨率,多采用比样品体积大倍的柱体积,的柱比,较吸液量、较粒的凝胶固定相。

6、写出下列离子交换剂类型:732 ,724 ,717 ,CM-C ,DEAE-C ,PBE94 。

7、请写出下列药物英文的中文全称:IFN(Interferon)、第1页(共8页)IL(Interleukin) 、 CSF(Colony Stimulating Factor)、rhGH(Recombinant Human Growth Hormone)、Ins(Insulin)。

8、生物药物的分类:、、、。

9、在生化制药工艺中干燥的方法主要包括:、、。

10、疫苗制备时,可用 、和 方法扩增病毒。

11、各向异性膜分为两层,一层是,厚度为0.1~1μm,决定了膜的性质,另一层是,厚度约0.1mm,作用是。

12、制备型高效液相色谱的重要参数有、、、。

13、密度梯度离心常用的介质有、、。

14、用100μmol/L NADH使乳酸脱氢酶吸附在固定化丙酮酸类似物上,若NADH从洗脱液中去除,则脱氢酶被洗脱,这种洗脱方法称为。

15、生化药物的主要资源有 、 、 和 。

16、粘多糖是一类含有 和 的多糖。

17、铜绿假单胞菌(绿脓杆菌)脂质是 ,临床应用效果 ,原因是 。

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中国药科大学 生物制药工艺学 期末试卷A卷2013-2014学年第一学期专业班级学号姓名题号一二三四总分得分核分人:得分评卷人一、填空题(每空0.5分,共30分)1、细胞破碎包括哪三大类方法、和。

2、萃取因素也称萃取比,其定义为被萃取溶质进入的总量与该溶质在中总量之比。

3、晶体的质量主要是指晶体的大小、形状和纯度,其中影响晶体大小的主要因素有 , , , 。

4、大孔网状聚合物吸附剂是在树脂聚合时加入 致孔剂,待网格骨架固化和链结构单元形成后,用溶剂萃取或蒸馏水洗将致孔剂去掉,形成不受外界环境条件影响的 ,其孔径远大于2~4nm,可达 ,故称“大孔”。

5、在作分级分离时,为了提高分辨率,多采用比样品体积大倍的柱体积,的柱比,较吸液量、较粒的凝胶固定相。

6、写出下列离子交换剂类型:732 ,724 ,717 ,CM-C ,DEAE-C ,PBE94 。

7、请写出下列药物英文的中文全称:IFN(Interferon)、第1页(共8页)IL(Interleukin) 、 CSF(Colony Stimulating Factor)、rhGH(Recombinant Human Growth Hormone)、Ins(Insulin)。

8、生物药物的分类:、、、。

9、在生化制药工艺中干燥的方法主要包括:、、。

10、疫苗制备时,可用 、和 方法扩增病毒。

11、各向异性膜分为两层,一层是,厚度为0.1~1μm,决定了膜的性质,另一层是,厚度约0.1mm,作用是。

12、制备型高效液相色谱的重要参数有、、、。

13、密度梯度离心常用的介质有、、。

14、用100μmol/L NADH使乳酸脱氢酶吸附在固定化丙酮酸类似物上,若NADH从洗脱液中去除,则脱氢酶被洗脱,这种洗脱方法称为。

15、生化药物的主要资源有 、 、 和 。

16、粘多糖是一类含有 和 的多糖。

17、铜绿假单胞菌(绿脓杆菌)脂质是 ,临床应用效果 ,原因是 。

从发现年代上看,该物质 于青霉素被发现。

第2页(共8页)得分评卷人二、单项选择题(每小题1分,共20分)(从A、B、C、D四个选项中选择一个正确答案填入空格中)1、蛋白质工程技术改造的速效胰岛素机理是-----------------------------( )A. 将人胰岛素B28位与B29位氨基酸互换,使之不易形成六聚体B. 将A21位替换成甘氨酸,B链末端增加两个精氨酸,使之在pH4溶液中可溶C. 将B29位赖氨酸用长链脂肪酸修饰,改变其皮下扩散和吸收速度D. 将猪胰岛素B30位改造为丙氨酸,使之和人胰岛素序列一致2、能用于防治血栓的酶类药物有------------------------------------()A、SODB、胰岛素C、L-天冬酰胺酶D、尿激酶3、以下可用于菌种纯化的方法有-------------------------------------()A、高温灭菌B、平板划线C、富集培养D、诱变处理4、 如果重组DNA药物以包涵体表达,其最大的缺点是------------------ ( )A. 无法工业化B. 易被胞内酶水解C.蛋白表达量低D. 需复性5、基因治疗中,哪一种载体介导的基因在细胞基因组中是随机整合的?----()A. 脂质体载体B. 哺乳动物染色体C. 逆转录病毒载体D. 腺病毒载体6、下列哪一个是腺病毒载体的使用特点? -----------------------------( )A. 位点特异性整合至基因组中B. 位点非特异性整合至基因组中C. 有可能导致恶性肿瘤D. 宿主范围广7、实验室中使用基因工程技术表达的胞内蛋白,可用以下哪种方法破壁------()A. 碱裂解法B.高压匀浆法C.超声波法D.干燥法8、盐析法与有机溶剂沉淀法比较,其优点是-----------------------------( )A.分辨率高B.变性作用小C.杂质易除D.沉淀易分离9、将配基与可溶性的载体偶联后形成载体-配基复合物,该复合物可选择性地与蛋白质结合,在一定条件下沉淀出来,此方法称为-----------------------------()A.亲和沉淀B.聚合物沉淀C.金属离子沉淀D.盐析沉淀10、“类似物容易吸附类似物”的原则, 一般非极性吸附剂适宜于从下列何种溶剂中吸附非极性物质。

---------------------------------------------- ( )A.极性溶剂B.非极性溶剂C.三氯甲烷D.溶剂11、在凝胶层析中Sepharose的基本骨架是-----------------------------( )A.琼脂糖B.半乳糖C.葡聚糖D.丙烯酰胺12、下列关于离子交换选择性的说法不正确的是------------------------------------()A.水合离子半径小更容易被吸附B.在稀溶液中树脂吸附高价离子的倾向很大第3页(共8页)C.有机溶剂存在时离子交换树脂倾向于吸附无机离子D.树脂交联度降低,交换选择性增加13、一般可以选用哪种细菌检查孔径为0.45 μm的滤膜 --------------------------()A.灵杆菌B.绿脓杆菌C.金黄色葡萄球菌D.大肠杆菌14、在微滤过程中,主要的推动力是 ----------------------------------------------------()A. 浓度差B. 压力差C. 电位差D. 气压差15下列转子中“壁效应”最强的是------------------------------------------------------()A.水平转子B.角度转子C.区带转子D.细胞洗脱转子16分离多糖时常用的检测器是------------------------------------------------------------()A.紫外检测器B.荧光检测器C.示差检测器D.质谱检测器17、下列哪个部分是制备型色谱配备而分析型色谱没有的-------------------------()A. 色谱柱B. 输液泵C. 检测池D. 电导检测器18、金属离子亲和层析中,不可以和固定化金属离子特异结合的基团是-------()A.Ser的羟基B. His的咪唑基C. Cys的巯基D. Trp的吲哚基19、蛋白类物质的分离纯化往往是多步骤的,下列哪类方法是在分离纯化的前期、中期和后期都常常会被选用的方法。

--------------------------------------------------()A. 离子交换法B. 凝胶过滤法C. pI沉淀法D. 盐析法相20、利用产氨短杆菌发酵法生产肌苷酸,第一步是用诱变育种的方法筛选缺乏下列哪一种酶的缺陷型菌株。

---------------------------------------------------------------()A. SAMP合成酶B. PRPP转酰胺酶C. SAMP裂解酶D.AMP脱氢酶得分评卷人三、名词解释(每小题2分,共16分)1、RNA干涉2、蛋白质工程药物第4页(共8页)3、HAT选择培养基4、自杀基因疗法5、全排阻:6、双水相萃取:7、类分离:8、截留分子量第5页(共8页)得分评卷人四、论述题(共34分)1、以下为利用蛋清制备溶菌酶的部分过程,请写出分离过程中吸附与洗脱的原理,为什么选用724树脂?(9分)蛋清准备:由4~5只新鲜鸡蛋中小心取出蛋清约80~100ml,充分打匀,用纱布滤去杂质,计量体积,用冰块预冷至0℃备用。

树脂吸附:将处理好的“724”树脂用布氏漏斗抽干,取湿树脂20g,在不断搅拌下加入预冷的蛋清中,再继续搅拌3h使充分吸附,静置过夜(0~5℃)。

洗涤:倾出上层蛋清,用蒸馏水清洗树脂二、三次,再用pH6.5的0.15 mol /L磷酸缓冲液40ml搅拌清洗两次,用布氏漏斗抽干.洗脱:将树脂移入烧杯,取10%硫酸铵溶液30~40ml分三次加入搅拌(15min)洗脱,抽干树脂,合并洗脱液,得含有溶菌酶的溶液,待后续纯化。

2、什么是亲和层析技术?亲和层析中选择配基时应注意什么?(8分)第6页(共8页)3、仔细阅读下文后回答下列问题。

(9分)步骤1.取新鲜羊血,5000r·min-1离心15min收集红血球.后加2倍体积0.9% NaCl溶液,5000r·min-1离心10min,重复3次,得洁净红血球.步骤2.取洁净红血球100mL,加等体积去离子水搅拌,4℃放置12h。

按体积的0.25倍缓慢加入预冷至4℃的95%乙醇,再按溶血体积的0.15倍缓慢加入预冷的氯仿,搅拌15min,静置2h,离心除去沉淀,得上清液.步骤3.将上述上清液加1.5倍体积的冷丙酮,搅拌均匀,静置20min,离心收集沉淀物,加适量去离子水,离心除去不溶性蛋白,收集上清液.步骤4.上清液于60 ℃热处理15min,离心除去沉淀,收集上清液.步骤5.将上清液置于透析袋中,在磷酸钾盐缓冲液中动态透析6~8h.步骤6. DEAE-SephadexA-50柱层析: 将透析液小心加入已用2.5mmol·L-1pH7.6磷酸盐缓冲液平衡好的DEAE-Sephadex A-50层析柱中,然后用pH7.6的2.5~50mmol·L-1磷酸钾盐缓冲液,以流速0.5mL·min-1进行梯度洗脱,收集具有SOD活性部分的洗脱液,浓缩后冷冻干燥得到淡蓝绿色产品即为SOD.(1)请说明在上文的“步骤1”的主要目的。

(1分)(2)请说明上文“步骤2”的目的和原理。

(2分)(3)请说明上文“步骤4”的目的和原理。

(2分)(4)请详细说明上文“步骤6”的原理。

(4分)第7页(共8页)4、在链霉素纯化实验中,某学生没有得到产品,以下是该学生的实验操作记录:离子交换法纯化链霉素实验记录:,搅拌溶1)取150ml发酵液放入干净的250ml烧杯,加入4.5g ZnSO4解,然后在70℃加热2min,迅速冷却后过滤,取滤液备用;2)用1mol/L NaOH将pH调到7.0,上1×14-Na型离子交换树脂,树脂饱和后用大量软水洗净树脂,然后用5%~7%低温硫酸洗脱;3)一次洗脱液用NaOH调pH7.0,上330树脂,树脂饱和后用大量软水洗净树脂,然后用8%低温硫酸洗脱;4)二次洗脱液用NaOH调pH7.0后,快速分别通过110和401树脂柱,得到精制液;5)精制液用活性炭脱水,35℃下减压浓缩蒸干。

结果:没有得到链霉素产品。

根据其实验记录,从工艺上判断存在错误的地方(不止一处),给出正确的方案,并简要说明纯化原理和注意事项。

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