血小板功能检测及其临床应用
流式细胞术检测血小板功能及其临床应用
由于血小板的活化程度可由血小板 酶作外源激动剂时 ,为防止血小板聚集
膜糖蛋白表达水平的高低来判断 ,近年 并形成纤维蛋白凝块 ,可在全血标本中
来 ,文献报道利用流式细胞术 ,特别是全 加 入 四 肽 化 合 物 Gly2Pro2Arg2Pro
血法流式细胞术 ,检测血小板膜糖蛋白 ( GPRP) [3] 。固定这一步若不干扰单抗
它仅在血小板活化时才因构象变化而显 活化血小板检测的一些代表性单抗 。
21 血小板缺陷性疾病 :全血法流式
露出来 。因此 ,使用这个表位的荧光单 抗 ,我们能更精确地在更早阶段检测到
三 、诊断学意义及临床应用
细胞术提供了一个简单 、迅速的方法来
利用全血法流式细胞术检测上述血 诊断血小板膜糖蛋白缺陷性疾病 ,如巨
号 。探测器收集每个细胞的荧光讯号和 的百分率 。阳性血小板百分率法与荧光
光散射 ,然后传入计算机进行分析 。 传统的流式细胞术检测血小板膜糖
蛋白的表达 ,常用的样本是经洗涤的血 小板或富含血小板的血浆 。由于血小板 极易活化激惹 , 样本经离心 、洗涤等步 骤 ,容易人为地导致体外血小板激活 ,影 响临床诊断价值 。为此 ,Shatti 等[2] 引入 了全血法流式细胞术 。该技术能使用全 血样本测定循环中血小板的活化状态以 及血小板对激活剂的功能应答 。
抽血抗凝 →稀释 →生物素化的检测
板相关疾病的诊断中 ,检测血小板功能 用单克隆抗体 (单抗) →激动剂或缓冲液
的方法常常是有争议的 。这通常是由于 →固定 (1 %多聚甲醛) →FITC 标记的鉴
方法本身的原因造成的[1] ,譬如 ,静脉阻 别用单抗 →PE2卵白素 →稀释 。
滞 、抗凝剂选择 、离心 ,甚至标本处理不
流式细胞术(Flow Cytometry,FCM)检测血小板功能及其临床应用
流式细胞术（Flow Cytometry，FCM）检测血小板功能及其临床应用血小板功能的检测包括测定血小板粘附、聚集和活化的能力。
然而，在血小板相关疾病的诊断中，检测血小板功能的方法常常是有争议的。
这通常是由于方法本身的原因造成的［1］，譬如，静脉阻滞、抗凝剂选择、离心，甚至标本处理不当等因素，都可导致医源性血小板激活，影响临床诊断的价值。
这就要求建立一种灵敏、精确、快速、简便，最好可用于临床常规检测血小板功能测定方法。
关键词：血小板临床应用流式细胞术血小板功能的检测包括测定血小板粘附、聚集和活化的能力。
然而，在血小板相关疾病的诊断中，检测血小板功能的方法常常是有争议的。
这通常是由于方法本身的原因造成的［1］，譬如，静脉阻滞、抗凝剂选择、离心，甚至标本处理不当等因素，都可导致医源性血小板激活，影响临床诊断的价值。
这就要求建立一种灵敏、精确、快速、简便，最好可用于临床常规检测血小板功能测定方法。
由于血小板的活化程度可由血小板膜糖蛋白表达水平的高低来判断，近年来，文献报道利用流式细胞术，特别是全血法流式细胞术，检测血小板膜糖蛋白的表达［2］。
该技术能灵敏、特异地检测血液中活化血小板，并评价其功能。
现就全血法流式细胞术检测血小板功能的方法及临床应用现状和潜力进行综述。
一、全血法流式细胞术1.方法学：流式细胞仪能快速测定大量个体细胞的特性。
样品中欲分析的细胞预先进行荧光标记，然后由压缩氮经硅管送达标本室，再以5 000～10 000个细胞/秒的速率逐个射入光敏感区。
在适当波长的激发光作用下，被特殊染色的细胞发射出一定量的荧光脉冲讯号。
探测器收集每个细胞的荧光讯号和光散射，然后传入计算机进行分析。
传统的流式细胞术检测血小板膜糖蛋白的表达，常用的样本是经洗涤的血小板或富含血小板的血浆。
由于血小板极易活化激惹，样本经离心、洗涤等步骤，容易人为地导致体外血小板激活，影响临床诊断价值。
为此，Shatti等［2］引入了全血法流式细胞术。
各类血小板功能检测的临床意义
显微镜计数法
通过人工显微镜观察血液样本，计数血小板数 量。
其他方法
如流式细胞术、电镜技术等，用于特殊情况下或进一步研究。
血小板计数检测的临床意义
诊断出血性疾病
血小板计数是诊断出血性疾病的 重要指标，如特发性血小板减少 性紫癜、血栓性疾病等。
监测抗凝治疗
对于接受抗凝治疗的患者，定期 检测血小板计数有助于评估治疗 效果和调整治疗方案。
通过检测血小板表面的活化标记物， 了解血小板活性状态。
血小板功能检测的临床应用
诊断血栓性疾病
通过对血小板功能的检测，有助于诊 断血栓性疾病，如动脉粥样硬化、心 肌梗死、脑卒中等。
评估心血管疾病风险
通过检测血小板功能，可以评估个体 发生心血管疾病的风险，为预防和治 疗提供依据。监测抗血小板药物治疗效果来自血小板活化检测的临床意义
诊断血栓性疾病
01
血小板活化是血栓形成的关键步骤，通过检测血小板活化程度
有助于诊断血栓性疾病，如心肌梗死、脑梗死等。
评估抗血小板治疗效果
02
对于接受抗血小板治疗的患者，检测血小板活化程度有助于评
估治疗效果，指导治疗方案调整。
预测心血管事件风险
03
血小板活化程度与心血管事件风险密切相关，通过检测血小板
活化程度有助于预测患者发生心血管事件的风险。
血小板活化检测的注意事项
01
02
03
标本采集和处理
采集血液标本时应避免过 度挤压和抗凝剂不足，防 止血小板活化和聚集。
检测方法选择
不同检测方法对血小板活 化的敏感性和特异性存在 差异，应根据具体情况选 择合适的检测方法。
结果解读
结合患者临床表现和其他 检查结果综合分析血小板 活化检测结果，避免误诊 和漏诊。
血小板聚集功能检测在缺血性脑血管病防治中的应用研究
血小板聚集功能检测在缺血性脑血管病防治中的应用研究【摘要】目的：研究分析血小板聚集功能检测在缺血性脑血管病防治中的临床应用效果。
方法：120例缺血性脑血管病患者,随机分为对照组和观察组,每组60例。
对照组患者进行常规检测,观察组患者在对照组的基础上进行血小板聚集功能检测花生四烯酸(AA)诱导,二磷酸腺苷(ADP)诱导,比较两组患者的临床效果、血小板聚集率、并发症发生情况。
结果：观察组疾病治疗有效率高于对照组，p<0.05，观察组检测后的血小板聚集率降低。
结论：血小板聚集功能检测在缺血性脑血管病防治中的临床应用效果显著,可有效减少并发症,提高患者的生存率,具有较高的推广应用价值。
【关键词】血小板聚集功能检测；缺血性脑血管；实际应用缺血性脑血管病(ICVD)的致病因素较多，且机制较为复杂。
该病的进展一般需要经历血管壁病变、血液成分变化和血流动力学改变三阶段[1]。
而这三阶段多与动脉粥样硬化、高血压等老年疾病有紧密联系，因而该病多发于中老年群体，而我国已逐步迈入老龄化社会，老年人口不断增加，且饮食结构也不断变化，缺血性脑卒中致残率、病死率均很高，目前治疗方法包括抗凝、溶栓、降纤和抗血小板聚集等相关手段[2]。
该病由于病情发展迅速，具有较高致死率和致残率等特点，且患者即使存活也会留有神经系统功能损伤，对患者的身体健康与生命安全造成严重危害。
目前的治疗方式主要分为内科及外科治疗,内科治疗又分为三个阶段的治疗,超早期、急性期和慢性期治疗,外科治疗主要是指介入性血管内局部溶栓治疗和手术治疗,介入性血管内局部溶栓治疗,可恢复缺血组织的供血,最大程度的恢复缺血组织的活性,抑制脑梗死区域继续扩大,患者的神经功能恢复可能性很高,但必须是在超早期(发病时间在3~6 h内)治疗阶段[3]。
因此,缺血性脑血管病的早期防治非常重要,对于不可逆性急性缺血性脑血管病,若能及早诊断并接受治疗,将会极大的提高患者的治愈率及生存率,对于广大患者而言具有重大现实意义。
流式细胞术在血小板检测中的应用于方法介绍
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Flow Cytometry
June 2000
血小板的活化、荧光染色与流式细胞仪分析
前言 血小板活化试验，对于血小板功能、心血管疾病的研究，有重要意义。使用流式细 胞仪进行多参数分析，可以特异灵敏地检测血小板表面标记，了解血小板的活化状态和 反应性，并同时获得更多关于血小板的信息。在疾病监测、抗血小板治疗病人的筛选及 治疗监测、预测并发症等方面有良好的应用前景。 使用推荐的三色流式分析方法检测血小板活化的优点是： 检测血小板的反应性。 了解血小板活化进程。血小板先发生膜糖蛋白变化，然后是胞浆内颗粒释放到 血小板外。 同时检测多种血小板表面标志。 高度灵敏。 直接检测血小板的多种标志。 使用全血，标本量少。 操作简便快捷，将血小板人工激活减至最低。
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Flow Cytometry
June 2000
附：BDIS 血小板活化试剂
BD 抗体： CD PAC-1 CD62P CD61 Isotype 1 CaliBRITE 3 Ig Subclass IgM IgG1 IgG1 Form FITC PE PerCP PE Unlabeled,FITC,PE,PerCP Catalog No. 340507 348107 340506 340013 340486 Tests 50 100 50 25g 25
流式细胞仪检测全血中血小板功能状态 全血中血小板更接近生理状态 操作简便，减少由于操作造成的血小板状态改变（如血小板活化试验） 同时检测血小板的多个标志物，结合 FSC 和 SSC，评估多个参数，进行定量分析 多采用血小板特异抗体 CD41 或 CD61 画门，找出血小板，避免杂质碎片的干扰 检测血小板亚群灵敏度高 用血量少 无放射性污染
冠心病患者介入治疗前后的血小板功能、血流变学指标检测及其临床意义
冠心病患者介入治疗前后的血小板功能、血流变学指标检测及其临床意义陈智阳厦门大学附属第一医院思明分院检验科，福建厦门 361000[摘要] 目的探究冠心病患者介入治疗（PCI）前后的血小板功能、血流变学指标检测及其临床意义。
方法 回顾性分析2019年1月至2020年9月于厦门大学附属第一医院思明分院进行介入治疗的200例冠心病患者，根据术后24 h的血管造影效果分为有效组（n=103）与无效组（n=97）。
比较两组冠心病患者行经皮冠状动脉介入手术（PCI）前后的血小板功能指标、血流变学指标变化。
结果 冠心病患者表现为血小板功能和血液流变性异常。
治疗前，两组患者的血小板功能指标（血小板集聚率、P选择素、糖蛋白Ⅱb/Ⅲa）和血流变学指标（全血高切黏度、全血低切黏度、血浆黏度）差异无统计学意义（P＞0.05）。
治疗后，两组患者的血小板功能指标（血小板集聚率、P选择素、糖蛋白Ⅱb/Ⅲa）和血流变学指标（全血高切黏度、全血低切黏度、血浆黏度）均较治疗前显著降低，且有效组低于无效组，差异有统计学意义（P＜0.05）。
结论 冠心病患者介入治疗前后的血小板功能、血液流变学指标检测可反映介入治疗的临床疗效，同时可为术后患者的预后提供参考依据。
[关键词] 冠心病；血小板功能；血流变学指标；冠状动脉造影[中图分类号] R541.4 [文献标识码] A [文章编号] 2095-0616（2021）05-0226-04 Detection and clinical significance of platelet function and hemorheological indexes in patients with coronary heart disease before and after percutaneous coronary interventionCHEN ZhiyangDepartment of Clinical Laboratory, Siming Branch, the First Affiliated Hospital of Xiamen University, Fujian, Xiamen 361000, China[Abstract] Objective To investigate the detection and clinical significance of platelet function and hemorheological indexes in patients with coronary heart disease (CHD) before and after percutaneous coronary intervention (PCI). Methods A total of 200 patients with CHD who underwent PCI admitted to Siming Branch of the First Affiliated Hospital of Xiamen University from January 2019 to September 2020 were retrospectively analyzed, and they were divided into the effective group (n=103) and the ineffective group (n=97) according to the angiographic effects 24 hours after operation. The changes of platelet function and hemorheological indexes before and after PCI treatment were compared between the two groups of patients with CHD. Results Patients with CHD were featured by abnormal platelet function and hemorheology. Before treatment, there was no statistically significant difference in platelet function indexes (platelet aggregation rate, soluble P-selectin, glycoprotein Ⅱb/Ⅲa) and hemorheological indexes (whole blood high shear viscosity, whole blood low shear viscosity and plasma viscosity) between the two groups of patients (P＞0.05). After treatment, platelet function indexes (platelet aggregation rate, soluble P-selectin, glycoproteinⅡb/Ⅲa) and hemorheological indexes (whole blood high shear viscosity, whole blood low shear viscosity and plasma viscosity) of the two groups of patients were significantly lower than those before treatment, and effective group was lower than that in the ineffective group, with statistically significant differences (P＜0.05). Conclusion The detection of platelet function and hemorheology indexes in patients before and after interventional therapy can reflect the clinical efficacy of PCI and provide reference for the prognosis of postoperative patients.[Key words] Coronary heart disease; Platelet function; Hemorheological indexes; Coronary angiography冠心病是临床常见的心血管疾病之一，由于冠状动脉粥样硬化狭窄或心肌微循环障碍，继而导致心肌缺血缺氧、灌注不足及血栓形成，临床表现为胸闷、心悸、心绞痛，甚至心肌梗死及心功能受损[1]。
血小板聚集功能检测及临床应用
阻抗法的不足之处
光学聚集仪耗时,对小聚集物的形成不敏 感,，操作相对烦琐。 阻抗法与比浊法的结果无法换算。 尚缺乏大量应用的经验。
目前血小板聚集功能的检测已经从传统的 手工法发展到全自动仪器的检测,从单一的 比浊法发展到阻抗法,剪切法,流式细胞术法、 模拟体内初期止血（PFA-100）等等, 从单 一的测定血小板聚集功能发展到能同时检 测血小板释放ATP和血小板内Ca2+的含 量，血小板释放颗粒及活化功能的测定， AA代谢产物测定，血小板内环腺苷酸 ( cAMP)和环鸟苷酸 ( cGMP)测定，血小板 活化的新标志物等等。
质量控制 室内质控：用已知正常人的混合PRP标本 建立典型的血小板聚集模式。这些模式的 正常值用来同结果显著异常的标本进行比 较就可以表明血小板机能障碍。最好每次 试验前做一混合PRP作为当日正常对照。
血小板聚集试验的应用
三大功能: 一、抗血小板药物的监测 二、血小板功能异常的诊断 三、血栓性疾病的监测
注意事项
时间 应在采血后3小时内完成。 温度 采血后标本应在15-30°C 的室温放置。切忌放 入冰箱。 血浆的pH 采血后血液中的CO2不断逸出，使pH上升。 6.5-8.5的标本可获得最佳效果。所以一般在实验前半 小时开盖为宜。 饮食 最好空腹，禁饮牛奶、豆浆和脂肪性食品。 诱导剂 ADP在保存中会分解，配制后最好分装，在20°C以下的冰箱中保存。肾上腺素更容易分解，应 以黑纸包裹避光。 生物参考区间 各实验室应对试剂说明书提供的生物 参考区间进行验证。
Sonoclot凝血及血小板功能分析仪的原理及应用
Sonoclot凝血及血小板功能分析仪的原理及应用Sonoclot凝血及血小板功能分析仪是一种广泛应用于临床医学领域的仪器，主要用于评估患者的凝血功能和血小板功能。
它通过测量形成血凝块的时间和强度，以及血小板在凝血过程中的聚集状态，为医生提供了重要的诊断和治疗依据。
本文将介绍Sonoclot凝血及血小板功能分析仪的工作原理，并探讨其在临床应用中的意义。
Sonoclot凝血及血小板功能分析仪采用了声纳技术（Sonoclot技术），其原理基于血液在凝血过程中的变化。
当血液开始凝固时，凝血酶会激活凝血级联反应，引发纤维蛋白原转变为纤维蛋白，形成一个稳定的血凝块。
Sonoclot仪器通过测量血凝块形成的弹性来评估凝血功能。
具体来说，仪器会将血液样本放置在一个含有铝离子的杯子中，并在样本中引入钙离子激活凝血级联反应。
同时，仪器还会通过探头向样本中传递声纳波，以测量血凝块的变形。
Sonoclot凝血及血小板功能分析仪还可以评估血小板功能。
在凝血过程中，血小板在血管受损处聚集形成血小板血栓，从而帮助止血。
Sonoclot仪器可以通过测量血小板在凝血过程中的聚集状态来评估血小板功能。
在仪器中的探头会向样本中传递声纳波，同时感测血小板聚集所产生的声纳信号。
Sonoclot凝血及血小板功能分析仪在临床应用中具有广泛的意义。
首先，它可以帮助医生评估患者的凝血功能，以便及时采取措施进行干预。
例如，在手术前检测患者的凝血功能，可以预测手术过程中可能发生的出血风险，从而采取相应的处理措施。
其次，Sonoclot仪器可以用于监测患者接受抗凝治疗过程中的凝血功能。
抗凝治疗常用于心血管疾病、血栓疾病等病症的治疗，但过量使用会导致出血风险，而不足则可能引起血栓形成。
Sonoclot仪器可以帮助医生确保患者在接受抗凝治疗时保持适当的凝血状态。
此外，Sonoclot仪器在评估血小板功能方面也具有重要意义。
血小板功能异常可能会导致出血或血栓形成等病理现象，因此准确评估血小板功能对于诊断和治疗这些疾病都至关重要。
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血小板功能检测及其临床应用【关键词】血小板; 功能检测; 临床应用血小板检测方法可归纳为出血、血栓和药物监测3大类。
虽则有些方法能应用于多种检测目的，但为特殊目的而创建的方法亦有重要价值。
故在检测时应合理地运用。
1 出血性疾病监测中的应用血小板的基本功能是黏附、聚集、分泌、促凝血、血块回缩。
通过这些功能维持着正常人体的初期止血作用。
由于这些功能异常而导致的出血疾病包括遗传性和获得性两类，在有些疾病同时会有血小板功能异常和数量减少。
1.1 遗传性血小板功能异常疾病①黏附受体蛋白异常：GPIb Ⅴ Ⅸ(BSS,血小板型vWD,Bolin Jamieson 综合征)、GPⅡb/Ⅲa(血小板无力症)、GPⅠa/Ⅱa、GPⅥ、GPⅣ。
②可溶性激动剂受体异常:TXA2受体,P2Y12受体、α2 肾上腺素能受体。
③血小板颗粒异常:δ 颗粒(δ 贮存池缺陷、Hermansky Pudlak综合征等)、α 颗粒(灰色血小板综合征，Quebec血小板病等)。
④信号传递途径异常:TXA2途径异常、Ca离子流动异常、Gαq缺陷、GSα高反应、PLC pleckstrin磷酰化缺陷。
⑤膜磷脂异常:Scott综合征、Stormorken综合征。
⑥其他异常:原发性释放异常、Montreal综合征、Ehlers Danlos综合征、May Hegglin综合征等1.2 遗传性血小板数量减少疾病①体积减小：Wiskott Aldrich综合征、性联血小板减少症。
②体积正常：家族性血小板病、先天性无巨核细胞性血小板减少症。
③体积增大：巨大血小板综合征、血小板型vWD、May Haegglin异常、灰色血小板综合征、Montreal血小板综合征。
1.3 获得性血小板功能异常这种异常十分常见，可由下列不同原因引起：①药物、食物和维生素;②慢性肾衰;③体外循环;④骨髓增生异常疾病;⑤抗血小板抗体等。
血小板功能缺陷检测的方法包括：①血细胞分析仪在测定血小板数量及外形大小中应用;②血小板功能:出血时间(血小板功能分析仪，(FPA 100R)、黏附性测定、聚集功能测定、释放功能测定(致密颗粒：5 HT、ADP、ATP、δ 颗粒缺陷 Hermansky Pudlak 综合征、Chediak Hygashi 综合征(荧光法)、α 颗粒：TF4、β TG(α 颗粒缺陷 灰色血小板综合征、Quebec 血小板病、Jacobsen或Paris Trousseau 综合征)(ELISA法，试剂盒),PF3有效性; Ca2+释放与内流,、血栓烷形成、cAMP、GAMP;血块回缩;③膜受体分析采用流式细胞术和电泳术(黏附受体GPⅡb/Ⅲa、GPⅠb，激动剂受体P2Y12、GPⅥ);④基因分析采用分子生物技术;⑤其他(超微结构)。
上述检测方法目前巳成为疾病诊断的基本手段，但随着对疾病的病理机制的深入研究以及包括血小板信息传递在疾病中的新的认识，许多蛋白分析技术巳逐渐成为研究方法中的一部分，但它们的应用可能仅限于研究目的而言，而不适合一般医院的临床检测应用。
血小板体积测定不仅能反映血小板生成及衰老，而且在鉴别遗传性血小板疾病中也是一项十分有用的指标。
在巨大血小板综合征中的巨大血小板在末梢血涂片可达80%，其直径达到20 μm以上。
最新也有报道非巨大血小板综合征而血小板体积明显增大数量减少病因不清的遗传性巨大血小板减少症。
体内出血时间结合血小板数曾是血小板数量与质量异常所致出血的筛选试验，但由于出血时间存在种种不足而被弃之不用。
血小板黏附性所测得的结果是血小板聚集和黏附的总和，不能独立反映黏附功能也被弁之。
PFA 100TM是一种模拟体内初期止血的测定仪，又名“外出血时间”，结果以血小板闭塞网眼停止血液流动的“闭合时间”表示。
故可以检测与血小板黏附、聚集、栓子形成的初期止血障碍相关的疾病，血栓性疾病、GPⅡb/Ⅲa拮抗剂等抗血小板药物监测、血小板贮存、血管性血友病及DDAVP治疗、肝肾功能疾病等。
与出血时间试验相比，在诊断vWD中的敏感性>90%。
由于此项检测所需费用较高，限制了其广泛应用。
血小板聚集性测定是被应用最广泛、发展和改进最多的一项测定。
至今为止，巳发展而成的血小板聚集仪包括有比浊法、阻抗法(全血血小板聚集仪)、光散射法和Verify Now分析仪(Ultegra快速血小板功能分析仪)。
在测定血小板聚集的仪器中，设计有可以同步测定血小板腺核苷酸释放和血小板胞浆Ca2+浓度的装置，具有多功能性。
比浊法最常用，诱导剂通常为ADP、胶原、花生四烯酸和瑞斯托酶素等4种。
但存在标本分离、制备、诱导剂种类与浓度选择、正常值设定等影响因素，缺乏各实验室之间的可比性。
在一项误差分析中，其总体的SD为3.7%～7.7%。
所以，对一份聚集率为64.81%±7.7%,其分布范围49%～80%，从个体化角度进行判断分析时，其意义较为有限。
在遗传性血小板功能性疾病中,由于聚集反应显著下降，这类误差不影响临床诊断，是一项十分有用的指标。
其他各项试验譬如颗粒释放产物、花生四稀酸代谢产物，血小板膜磷酯酰丝氨酸、Ca2+、膜糖蛋白、基因分析等项目在诊断疾病中仍被继续广泛应用，是诊断血小板功能疾病所必需的基本检测项目。
但由于遗传性血小板疾病在临床上颇为少见，一般医院很难具有独立地全面检测这类疾病的能力，许多试验仍未能广泛应用展开。
2 血栓性疾病监测中的应用在血栓性疾病中存在着血小板的短暂或持续活化。
活化的血小板其形态、功能或蛋白的结构变化，这些变化构成了活化标志物检测的基础。
目前用于血栓性疾病检测的方法有:2.1 血小板聚集是至今为止在检测血栓性疾病中仍能应用的一项试验，但其灵敏度不高。
譬如比浊法，它既不能检出低于5个血小板组成的聚集反应，也不能检测循环血小板聚集体。
鉴于这些需求，随后出现了一些新的方法，譬如Wu & Hoak报道的全血血小板聚集体检测法,血小板对ADP/AA聚集反应阈值和自发性血小板聚集体测定法, 检测血小板聚集反应中所形成大小不同的聚集体激光衍射法，或采用血小板计数仪测定聚集后的标本中剩余的血小板数等。
PA 200型聚集仪(Kowa,Japan)是通过光散射及一系列复杂镜片组建成的激光衍射仪，能检出PRP中由2至3个血小板组成的聚集体。
用此项检查，发现在急性冠状动脉综合症中存在<100个血小板组成的聚集体，现已应用于急性冠状动脉综合征、脑卒中和TTP等血小板高反应性疾病中。
但在遗传性的黏性血小板综合征中，患者血小板对ADP和/或肾上腺素诱导的血小板聚集反应增高，采用比浊法血小板聚集仪即可予以诊断。
血小板聚集虽然存在不灵敏的反映血栓形成，但最近人们发现，通过计算方法的改进成为可预示经皮冠脉介入治疗后患者心肌损伤的标志物。
2007年Marcucci等在367例PCI 后发生急性心梗患者的心肌损伤测定中进行了此项研究。
此项方法命名为残留血小板反应性(residual platelet reactivity,RPR)检测法。
它以血小板聚集率和PFA 100中测得的闭合时间为基础，以超出对照组血小板聚集率第90%者值或低于PFA 100中闭合时间203s(CT/EPI )作为临界值，计算RPR。
采用此法检测时所测得的RPR值与反映心肌梗死的指标CK MB和cTnl基本一致(P<0.0001)，是当前以血小板功能检测来反映心肌梗死的较好的方法。
2.2 网织血小板测定此系2008年Cesari 等描述的一项能反映ACS的有用指标。
其原理是血小板中残存的mRNA用噻唑橙黄荧光染料标记，在Sysmex XE 2100 血液分析仪中测定。
观察网织血小板百分率%(IPF)和反映mRNA总量的荧光强度%(H IPF )。
在ACS组中IPF和H IPF明显升高，表明ACS中血小板周转加快。
2.3 活化标志物分可溶性与非可溶性两类。
2.3.1 可溶性血小板活化标记物β TG、PF4、TXB2、5 HT，P 选择素、Ca2+。
血小板颗粒内容物的释放产物PF4和β TG曾作为血小板储藏池疾病和血小板活化标志物，但由于在操作过程中常可引起血小板体外活化，故二项指标已逐渐为其他指标所替代。
过去几年采用过的前列腺素代谢产物TXB2,在作为反映血小板活化方面也因存在体外活化的问题，而11 去氢 TXB2是相对稳定的终末产物，其结果更可靠。
P 选择素存在于血小板和内皮细胞。
血小板表面的P 选择素是活化过程中α颗粒膜上的P 选择素与血小板表面膜整合产物，在静息血小板表面上很少，是血小板活化的较特异的标志物。
但活化血小板表面的P 选择素与血液中白细胞相互作用后很快丢失，因此，这项指标在反映活化程度中的灵敏度也有所降低。
可溶性P 选择素虽则在几年前也被视为血小板活化标志物，但1997年Fijnheer通过在ITP、TTP等的观察中，证明可溶性P 选择在正常人中的主要来源是血小板，但在许多疾病状态时是来源于内皮细胞，其特异性不如血小板P 选择素。
在作为血小板活化标志物的选择上应选用血小板表面P 选择素。
作为细胞信使的某些成份如cAMP、Ca2+等在血小板基础研究中予以应用，其中血小板胞浆Ca2+浓度的测定随着它与某些临床疾病之间关联的发现，现已在血脂增高和降血脂治疗，以及动脉粥样硬化患者中检测应用。
常用方法是采用Fura 2的荧光法，也可采用带有钙离子浓度测定的血小板聚集仪。
2.3.2 非可溶性血小板活化标记物CD 62p、CD 63、LAMP 1、CD40L、GPⅡb/Ⅲa、磷脂酰丝氨酸,微粒,白细胞 单核细胞聚集体,微小血小板聚集体。
血小板膜糖蛋白Ⅰb、Ⅱb/Ⅲa、Ⅴ、Ⅰa等是参与血小板黏附和聚集功能的主要黏附蛋白，在一些遗传性血小板疾病中明显下降，而在血栓性疾病中也可见到某些糖蛋白表达增高。
采用相应的单抗可检测这些膜糖蛋白在膜表面表达量及血小板活化时的分子构型改变，作为血小板活化标志物。
CD 40L位于α颗粒，血小板活化时表达在血小板表面，参与血小板间，或与白细胞间黏附和聚集，与P 选择素相似，是活化的重要标志物。
表达在血小板表面的CD 40L断裂后流入在血液中，则为可溶性CD 40L(sCD 40L)。
在血小板表面及血液中的CD 40L是目前临床应用的两个活化标志物。
新近报道的血小板活化标志物包括血小板促凝活性、微粒和单核细胞 血小板聚集体检测等3项指标，在一些文献中已有应用报道，其敏感性可能优于现用的金标准P 选择素。
血小板促凝活性采用能与磷酯酰丝氨酸结合的Annexin V作标志物，通过流式细胞仪测定与Annexin V 联结的FITC荧光强度，可获得血小板表面参与凝血反应的磷酯酰丝氨酸的量。
血小板微粒是血小板活化时从血小板囊孢脱落或伪足断裂而存在血液中的颗粒,直径为0.1～1 μg。