20味中药提取物对鸭疫里默氏杆菌体外抑菌效果的研究
中药提取组合物(胶囊)对念珠菌及曲霉的体外抗菌实验
中药提取组合物(胶囊)对念珠菌及曲霉的体外抗菌实验【摘要】目的探讨中药提取组合物(桂皮油、藿香油)胶囊对致病性念珠菌、曲霉的体外抗菌活性。
方法应用试管药基法，测定中药提取组合物胶囊对念珠菌(白念、热带、克柔氏)曲霉(烟曲、黄曲)的最小抑菌浓度(MIC)。
结果中药提取组合物MIC范围为白念珠菌(桂皮油0.06～0.52 mg/ml、藿香油0.03～0.26 mg/ml)、热带念珠菌(桂皮油0.13～1.03 mg/ml、藿香油0.06～0.52 mg/ml)、克柔氏念珠菌(桂皮油0.13～0.52 mg/ml、藿香油0.06～0.26 mg/ml)、烟曲霉(桂皮油0.13～0.52 mg/ml、藿香油0.06～0.26 mg/ml)、黄曲霉(桂皮油0.26～0.52 mg/ml、藿香油0.13～0.26 mg/ml)。
结论中药提取组合物胶囊对致病性念珠菌(白念、热带、克柔氏)曲霉(烟曲、黄曲)体外均有很强的抗菌活性，为开发中药治疗侵袭性真菌病提供理论依据。
【关键词】桂皮油; 藿香油; 念珠菌; 曲霉; 体外抗菌实验近年来，原发性或继发性深部真菌感染发病率迅速上升，尤其是一些严重性消耗性疾病如恶性肿瘤、血液病、肺部感染、实体器官移植等是其死亡的主要因素之一。
由于现今临床使用的药物多系化学合成如氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑、卡泊芬净、两性霉素等，虽然治疗深部真菌感染发挥着重要的作用，但长期使用这类药物，副作用较大，价格昂贵，因此，寻找和开发抗致病性深部真菌的中药制剂，是祖国医药研究的方向。
为此，对中药提取组合物胶囊进行体外抗真菌活性实验，为治疗深部真菌感染提供理论基础。
1 材料1.1 药物来源香桂胶囊由河北医科大学制药厂研制，批号0801-03，其内含物由中药提取物(桂皮油、藿香油)组成。
氟康唑胶囊由德国辉瑞制药有限公司提供，批号7073402。
1.2 菌种临床分离株来自河北医科大学第二医院皮肤科真菌室，均为致病性深部真菌(痰标本直接镜检可见大量菌丝及芽生孢子，培养有念珠菌生长，经鉴定为白念珠菌、热带念珠菌、克柔氏念珠菌。
中药防治鸭疫里默氏杆菌病的研究进展
菌 效果 。 中生等 口 验结 果表 明， 夏 试 芒果 叶提 取物 对Ｒ Ａ对 良好 的抑 菌 效果 。臧莹 安 等 Ｅ 道 ， 所 ｓ ］ 报 在
用的 ２ ２种 中药 中， 芩 、 银花 、 连 、 黄对 Ｒ 黄 金 黄 大 Ａ
高度敏 感 ， 有很 好 的抑制 作用 。张 先福等 ＿ 中药 ９ 用
惊 ”而 治惊之法 ：疗惊 必先 豁痰 ， ， “ 豁痰 必 先祛 风 ，
祛 风必 Байду номын сангаас解 热 ” 故本 病 治疗 原则 为“ 热解 毒 ， ， 清 熄
风 止惊 ， 豁痰 开 窍 ” ＿ ｌ。 ４
目前 ， 鸭 疫里 默 氏杆 菌 病 主 要 是应 用 抗 生 对 素 进 行 预 防和 治 疗 ， １一内 酰胺 类 、 基 糖 苷 如 ３ 氨 类、 四环 素 类等 抗 生 素 。但 是 目前 由于 大量 使 用
响 ， 养 鸭业 带来 严重 的经 济损 失 。 给
药 对 鸭 疫 里 默 氏杆 菌 病 进 行 防治 已 引起 兽 医 工 作 者 的 注 意 ， 且 进 行 了一 些 研 究 ， 面 就 其 研 并 下 究进 展 做 一简 要 论述 。
１ 中兽 医对 鸭 疫 里 默 氏杆 菌 病 的认 识
药 性 的中 兽 药产 品势 在 必行 。近 些 年 来 ， 用 中 利
霉素 对 鸭疫里 默 氏杆菌 病 的防 治效 果 。结果 表 明
收稿 日期 ： ０ ２ ０ — ３ ２ １— ８ ０
黄连 汤 观察对 Ｒ Ａ的抑 菌 效果和 形 态学 变化 ， 据 数 显 示可 以抑 制细 菌生 长 ，形态 学显 示黄 连汤 可 以 使Ｒ Ａ菌体长 度变 长 ， 细胞 壁变 薄 ， 内颜色 变 浅 ， 菌 皱 褶减 少 ， 理 不 均 匀 ， 体干 瘪 、 叠 、 曲， 纹 菌 折 弯 最
浅谈鸭疫里默氏杆菌病及其防控措施
摘要：鸭疫里默氏杆菌病又称鸭传染性浆膜炎，由鸭疫里默氏杆菌引起，是一种急性、慢性细菌性传染病。
各日龄阶段鸭均能感染，2～3周龄鸭感染后死亡率最高。
鸭场一旦发病，细菌可长期存在，很难根除，给养鸭业造成了严重的经济损失。
文章综述了鸭疫里默氏杆菌的病原、流行病学、临床症状、病理变化、诊断及防控措施，以期为鸭疫里默氏杆菌病的防控提供参考。
关键词：鸭疫里默氏杆菌病；鸭疫里默氏杆菌；防控措施浅谈鸭疫里默氏杆菌病及其防控措施吴忆春1，于新友2，苗立中2（1.滨州职业学院生物工程学院山东滨州256603；2.山东省滨州畜牧兽医研究院山东滨州256600）收稿日期：2023-08-30基金项目：滨州市农社领域科技创新政策引导计划项目（2022KPTY024）；山东省家禽产业技术体系项目（SDAIT-11-16）。
作者简介：吴忆春（1976—），女，安徽枞阳人，教授，研究方向：微生物学和生物制品学。
doi:10.3969/j.issn.1008-4754.2024.04.027鸭疫里默氏杆菌病又称鸭传染性浆膜炎、新鸭病，由鸭疫里默氏杆菌引起，是一种急性、慢性细菌性传染病[1]。
以眼、鼻有大量分泌物，咳嗽、呼吸困难，腹泻及神经症状为主要临床表现，是当前鸭场最重要的疾病之一[2]。
各日龄阶段鸭均能感染，2~3周龄鸭感染后死亡率最高[3]。
容易同多种疾病发生混合感染，死亡率增加。
1982年我国学者首次从北京鸭体内分离到细菌[4]，证实该病的存在，随后福建、广东、湖南、浙江等省份均有相关报道。
鸭场感染发病后很难根除，随着我国禁抗、限抗政策的实行，该病发病率有不断增加趋势，细菌血清型众多，各型间交叉保护性差，疫苗预防效果有限，细菌耐药性增加，发病后，很难选择有效药物治疗，药物的滥用同时也严重威胁我国食品安全。
本文从病原学、流行病学、临床症状、病理变化、诊断及防控措施等方面进行阐述，以期为该病的防控提供参考。
1病原鸭疫里默氏杆菌是为革兰氏阴性细菌，宽约0.3~0.5μm ，长约0.7~6.5μm 。
25种中草药对普通变形杆菌的体外抑菌试验
水产科技情报 ２０１９，４６（６）
３２９
ｄｉ）、青 皮 （ＣｉｔｒｕｓｒｅｔｉｃｕｌａｔｅＢｌａｎｃｏ）、黄 芩 （Ｓｃｕｔｅ－ ｌｌａｒｉａｂａｉｃａｌｅｎｓｉｓＧｅｏｒｇｉ）、乌 梅 （Ｐｒｕｎｕｓｍｕｍｅ）、石 榴皮 （Ｐｅｒｉｃａｒｐｉｕｍ ｇｒａｎａｔｉ）、半 枝 莲 （Ｓｃｕｌｅｌｌａｒｉａ ｂａｒｂａｔａ）、覆 盆 子 （Ｒｕｂｕｓｉｄａｅｕｓ）、冬 青 （Ｉｌｅｘ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓＳｉｍｓ）、杞子（Ｆｒｕｃｔｕｓｌｙｃｉｉ）、丹参（Ｄａｎｓｈ ｅｎｒｏｏｔ）、重 楼 （Ｒｈｉｚｏｍａｐａｒｉｄｉｓ）、苏 木 （Ｌｉｇｎｕｍ ｓａｐｐａｎ）、菊 花 ［Ｄｅｎｄｒａｎｔｈｅｍａｍｏｒｉｆｏｌｉｕｍ（Ｒａｍａｔ） Ｔｚｖｅｌ］、香附 （ＣｙｐｅｒｕｓｒｏｔｕｎｄｕｓＬ．）、艾叶 （Ｆｏｌｉｕｍ ａｒｔｅｍｉｓｉａｅＡｒｇｙｉ）、紫苏叶（Ｐｅｒｉｌｌａｆｒｕｔｅｓｃｅｎｓ）、天葵 子（Ｓｅｍｉａｑｕｉｌｅｇｉａａｄｏｘｏｉｄｅｓ）、杜仲（Ｃｏｒｔｅｘｅｕｃｏｍｎ ｎａ）、红 藤 （Ｓａｒｇｅｎｔｇｌｏｒｙｖｉｎｅｓｔｅｍ）、金 樱 子 （Ｒｏｓｅ ｌａｅｖｉｇａｔａＭｉｃｈｘ）、苍 术 （Ｒｈｉｚｏｍａａｔｒａｃｔｙｌｏｄｉｓ）、鸡 血 藤 （Ｓｐａｔｈｏｌｏｂｕｓｓｕｂｅｒｅｃｔｕｓ）、红 花 （Ｃａｒｔｈａｍｕｓ ｔｉｎｃｔｏｒｉｕｓＬ．），均购于佛山市国丹堂药店。营养肉 汤、营 养 琼 脂 等 购 于 广 东 环 凯 微 生 物 科 技 有 限 公司。 １．２ 试验方法 １．２．１ 药液制备
３２８ ｄｏｉ：１０．１６４４６／ｊ．ｃｎｋｉ．１００１－１９９４．２０１９．０６．００７
水产科技情报 ２０１９，４６（６）
陈言峰１，２ 杨映１，２ 于辉１，２ 关婉婷２ 李焯莹２ 刘枫２ （１佛山科学技术学院广东省动物分子设计与精准育种重点实验室，广东佛山 ５２８２３１；
21种中药提取物体外抗菌活性研究
21种中药提取物体外抗菌活性研究
李金鸽;胡丞丞;付培蕾;冯爽;李珂;李文渊
【期刊名称】《工业微生物》
【年(卷),期】2024(54)1
【摘要】测试21种中药乙醇提取物对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌和大肠杆菌的体外抑菌效果。
通过乙醇回流法制备中药乙醇提取物,采用二倍
梯度稀释法测定21种中药提取物的抗菌活性。
在21种中药乙醇提取物中,铜绿假单胞菌和大肠杆菌没有展现出明显的抑菌活性,然而金银花、红景天、大黄等13种乙醇提取物对金黄色葡萄球菌都表现出了明显的抑菌活性,MIC的范围为
0.84~14.92 mg/mL,其中金银花的抑菌效果最好,其MIC为0.84 mg/mL;金银花、桔梗、秦皮等8种乙醇提取物对枯草芽孢杆菌表现出了明显的抑菌活性,MIC的范
围为3.54~17.96 mg/mL,其中秦皮的抑菌效果最好,其MIC为3.54 mg/m L。
在21种中药乙醇提取物中,金银花、红景天、大黄、桔梗、秦皮的抗菌效果最好,且这些药物对革兰氏阳性菌的抑菌效果比革兰氏阴性菌好。
【总页数】4页(P63-66)
【作者】李金鸽;胡丞丞;付培蕾;冯爽;李珂;李文渊
【作者单位】郑州工业应用技术学院药学与化学工程学院;郑州工业应用技术学院
河南省水环境与健康工程技术研究中心
【正文语种】中文
【中图分类】R28
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5.50种中药提取物体外抗菌活性研究
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鸭疫里默氏杆菌病诊断与防治
出物附着，与胸腹壁粘连严重。 脾脏肿大为原来的一到两倍，脾脏表 面也存在大量纤维素性渗出物附着。有 6 只病死鸭一侧或两侧跗关 节肿大，切开肿大关节，流出大量粘稠的乳白色渗出液。 有 6 只病死 鸭腹腔积液，颜色呈现橙黄色，并且存在絮状沉淀物。
四、实验室诊断 无菌环境下，采集上述病死鸭病变组织，将病料接种到血清 培养基中，37 度恒温培养 48 小时， 在培养基上生长出细小针尖， 大小无所菌落。 将分离得到的致病菌接种到还有 5%兔血液培养 基上纯化培养 48 小时，生长出灰白色大小 1cm 左右的菌落，菌落 周围不存在溶血环。 挑取致病菌，制成涂片用革兰氏染色镜检，发 现短杆状。 革兰氏阴性染色，单个或成对存在的疫里默氏杆菌。 五、诊断 结合发病经过、临床症状、病理学变化和实验室诊断结果， 最终确诊为鸭疫里默氏杆菌病。 六、防治 确诊之后， 要及时采取针对性措施进行治疗， 以降低死亡 率。鸭疫里默氏杆菌病治疗主要选择抗生素进行针对性治疗。但 由于该种致病菌很容易产生耐药性， 并且不同血清型以及同血 清型的不同菌株对同一种抗生素的耐药性存在较大差异性，而 药敏试验在临床治疗上又得不到普遍应用， 所以在治疗过程中 经常出现盲目用药、治疗效果差、甚至治疗失败的现象。 鸭疫里 默氏杆菌病治疗过程中，结合多年实践经验，使用庆大霉素、卡 那霉素、磺胺-5 甲基嘧啶、头孢类药物、喹诺酮类药物轮换交替 治疗，能够取得很好的治疗效果。 可以使用 5%的氟苯尼考粉剂 进行拌料治疗，按照饲料总量 2%的比例拌料，连续使用五天。个 别病程严重的患病鸭可以使用氟苯尼考注射液， 按照体重每公 斤使用 25mg，肌肉注射，连续使用两天，能够取得很好的治疗效 果。 同时也可以使用先锋霉素，按照体重每公斤使用 25mg 肌肉 注射，也能取得很好的治疗效果。 最近几年通过采用中西药联合 治疗， 也收到了比较满意的效果。 在使用抗生素对症治疗的同 时，可以使用黄连 15g，青木香 15g，白头翁 20g，蒲公英 30g，鱼 腥草 15g 水煎后，将药液和饲料混合后，让患病鸭自由采食，连 续使用五天。 对于病症较为严重的患病鸭，可以直接灌服药液。 七、体会 在做好治疗工作的同时，还要采取措施，做好预防工作。 鸭 舍及运动场可以使用 10%的生石灰水进行全面消毒， 要及时清 理鸭舍，粪便堆积发酵。 保证鸭舍正常通风换气，避免有毒有害 气体堆积，同时要控制好鸭群饲养密度，避免因为饲养密度过大 而导致疫病发生。 同时还要实行全进全出饲养管理制度，按照不 同批次、不同日龄对鸭群进行合理分群。 鸭子出售之后，要及时 对饲养用具、场地、棚舍、水池进行全面消毒，间隔一周后再次消 毒后才能进入新雏鸭。 预防鸭疫里默氏杆菌病，最有效的手段是 接种疫苗。 可以在雏鸭 8 日龄皮下注射鸭疫里默氏杆菌灭活疫 苗 1ml，21 日龄后再强化免疫一次。 或者在雏鸭 4 日龄皮下注射 鸭疫里默氏杆菌和大肠杆菌二联灭活疫苗，每只鸭注射 1ml，能 够很好预防该种疾病发生。 （作者单位：350714 福建省福州市永泰县丹云畜牧兽医站）
18味中药提取物体外抗鸭瘟病毒活性的研究
瘟病毒 的体 外抑 制率 分别 为 ７ ６ ． ５ Ｏ 、 ４ ８ ． ９ １ ， 虎杖 醇提 物 的半数 有效 质量 浓度 （ ５ ０ ｉ ｎ ｈ ｉ ｂ ｉ ｔ ｏ ｒ ｙ ｃ ｏ ｎ ｃ ｅ ｎ ｔ ｒ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ，
浙 江 大 学 学报 （ 农业与生命科学版） ３ ９ （ １ ） ： １ ０ ５ ～１ １ ０ ， ２ ０ １ ３
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20种水产养殖常用中草药体外抑菌试验研究
20种水产养殖常用中草药体外抑菌试验研究作者：周冬仁罗毅志等来源：《现代农业科技》2013年第03期摘要采用试管倍比稀释法，选择大黄、黄芪、黄芩等20种中草药对淡水养殖常见2种主要致病菌进行体外抑菌试验，测定其最低抑菌浓度（MIC）。
试验结果表明，大黄、黄芩、穿心莲、连翘、贯众的抑菌效果最好，从而为研制水产用的中草药方剂提供理论依据。
关键词中草药；水产养殖；抑菌试验；最低抑菌浓度中图分类号 S948 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2013）03-0303-01我国水产养殖模式大部分属于高密度养殖，高密度养殖有较高的投资回报，但是容易大规模暴发病害，在实际生产中为了防治病害，大量使用化学药品及抗菌药物，进而给水产品质量带来隐患。
目前，利用我国传统中草药防治水产病害、减少抗生素使用量及提高免疫力成为兽医药理学研究热点之一[1-3]。
课题组根据2010年出版的兽药国家标准汇编中中药部分的内容结合实际应用，挑选出大黄、鱼腥草、黄芪等多种中草药进行抑菌效果测定，为增加抗菌中草药种类和制剂研发提供科学依据[4]。
1 材料与方法1.1 试验材料1.1.1 供试菌株。
试验菌株共有3株，分别为：标准株嗜水气单胞菌嗜水亚种菌株（购于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号：cgmcc1.0927）；嗜水气单胞菌（从湖州地区患病甲鱼中分离得到）；爱德华氏菌。
后2组菌株由浙江省淡水水产研究所实验室分离鉴定[5]。
1.1.2 供试药物。
供试大黄、黄芪、黄芩、甘草、穿心莲、金银花、虎杖、大青叶、鱼腥草、板蓝根、柴胡、川楝子、黄柏、地锦草、五倍子、茵陈、连翘、陈皮、贯众、苦参，购于湖州开心人大药房。
1.1.3 培养基。
营养肉汤培养基购于杭州天和生物制剂公司，121 ℃灭菌15 min备用。
1.2 试验方法1.2.1 药液提取。
水提法，取各种单味中药50 g，粉碎后加超纯水300 mL，温室浸泡过夜，煎30 min，纱布过滤药液，重复3次，最后将过滤液蒸馏浓缩至药液内含原药1 g/mL。
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20味中药提取物对鸭疫里默氏杆菌体外抑菌效果的研究蔡红;李莉;殷中琼;李曼;代如意;康帅;彭练慈;曲径;胡涛【摘要】试验旨在筛选得到对鸭疫里默氏杆菌有良好体外抑菌效果的中药.采用超声波处理、乙醇回流、水浴加热等方法提取杜仲等中药的有效部位,用二倍试管稀释法分别测定其提取物对鸭疫里默氏杆菌的最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)和最小杀菌浓度(minimal bactericidal concentration,MBC),并通过棋盘法测定中药提取物对鸭疫里默氏杆菌的联合抑菌效果.结果表明,杜仲等中药提取物对鸭疫里默氏杆菌的MIC值范围为15.60～250.00 mg/mL,其中杜仲、大黄、板蓝根、佛手、秦皮和大青叶的MIC值均为15.60 mg/mL,而金银花、姜黄、黄芩、黄芪和紫草MIC值均大于125.00 mg/mL;通过联合抑菌研究,结果发现杜仲和秦皮联合具有相加作用,白头翁、杜仲和秦皮联合均表现无关作用,秦皮与大黄联合表现相加作用,白头翁与大黄联合表现颉颃作用.提示,杜仲、大黄、板蓝根、佛手、秦皮和大青叶对鸭疫里默氏杆菌的体外抑菌作用较好,而金银花、姜黄、黄芩、黄芪和紫草对鸭疫里默氏杆菌的体外抑菌作用较差,杜仲、秦皮和白头翁可组成一个具有抑制鸭疫里默氏杆菌作用的中药组方.【期刊名称】《中国畜牧兽医》【年(卷),期】2013(040)008【总页数】5页(P101-105)【关键词】中药;鸭疫里默氏杆菌;体外抑菌【作者】蔡红;李莉;殷中琼;李曼;代如意;康帅;彭练慈;曲径;胡涛【作者单位】四川农业大学动物医学院,四川雅安 625014;四川农业大学动物医学院,四川雅安 625014;四川农业大学动物医学院,四川雅安 625014;四川农业大学动物医学院,四川雅安 625014;四川农业大学动物医学院,四川雅安 625014;四川农业大学动物医学院,四川雅安 625014;四川农业大学动物医学院,四川雅安 625014;四川农业大学动物医学院,四川雅安 625014;四川农业大学动物医学院,四川雅安625014【正文语种】中文【中图分类】S853.73鸭疫里默氏杆菌病是由鸭疫里默氏杆菌（Riemerell a anatipestfer，RA）引起的接触性、传染性疾病，又称为鸭传染性浆膜炎、鸭败血症等，多见于1～8周龄的雏鸭，呈急性或慢性败血症，临床上主要表现为眼和鼻分泌物增多、喘气、咳嗽、下痢、头颈震颤或歪斜等症状，易引起雏鸭的大批发病和死亡，雏鸭发病死亡率可达40%（郑铁锁等，2012）。
鸭疫里默氏杆菌病一年四季均可发生，并能发生与其他细菌混合感染。
鸭疫里默氏杆菌对氟苯尼考及头孢类药物很敏感，对盐酸环丙沙星及庆大霉素次之，对四环素及复方新诺明不敏感（孙静等，2011）。
在现代化鸭养殖生产中，持续使用这些抗生素类药物极易诱导细菌产生抗药性，使养殖中抗菌成本增加，并引起鸭消化道菌群失调，产品药物残留，进入人体后产生药物蓄积、中毒等问题。
目前，新抗生素的产生不及耐药菌株形成的速度，研制一个新的抗生素所花费的时间和成本较大，寻找并研制新型抗菌药是最为理想的解决途径。
中药在现代预防和控制细菌性感染疾病方面发挥了积极作用，某些中药的抑菌活性高，且不易诱导细菌产生耐药性，因此，研究和开发抗菌中药对解决耐药菌株的产生和抗生素短缺问题具有重要意义。
本研究拟选择杜仲等20余味中药作为研究对象，根据其有效成分的脂溶性，以水或乙醇对其有效部位进行提取，通过测定其最小抑菌浓度（minimal inhibitory concentration，MIC）和最小杀菌浓度（mini mal bactericidal concentration，MBC）评价中药对鸭疫里默氏杆菌的体外抑菌活性，从而筛选得到具有较好抗菌活性的中药，并通过体外联合抑菌试验确定较好的中药组方。
1 材料与方法1.1 材料1.1.1 中药杜仲、大黄、板蓝根、佛手、栀子、白头翁、何首乌、荆芥、金银花、姜黄、黄柏、黄芩、黄芪、连翘、秦皮、紫草、青蒿、大青叶、苦参和夏枯草均购于成都市荷花池中药材市场。
1.1.2 菌种与培养基鸭疫里默氏杆菌由四川农业大学动物医学院微生物实验室惠赠；鲜血琼脂平板、大豆胰酶肉汤和营养琼脂平板均按照日常规格配制。
1.1.3 仪器和试剂中草药粉碎机购自天津市泰斯特仪器有限公司；手提式高压灭菌器Y WQ.SG41.280购自海益恒试验仪器有限公司；电热恒温培养箱PYX－DHS－40X－50购自上海跃进医疗器械厂；SW－CJ－IB型超净工作台购自苏州净化设备有限公司；恒温水浴锅购自巩义市英峪高科仪器厂；旋转蒸发仪R502B购自上海亚荣生化仪器厂；SHB－循环水多用真空泵购自郑州杜甫仪器厂；BS－210S电子天平购自北京赛多利斯天平有限公司；HS－120D超声波清洗机购自上海新芝生物技术研究所；微量进样器、二甲亚砜、无水乙醇、石油醚、丙酮、乙醚、T 型涂布棒、90 mm玻璃培养皿。
1.2 方法1.2.1 中药提取物的制备将20味中药按照金波等（2005）方法提取，最后将提取物浓缩得到提取物浸膏，编号后置于4℃中保存。
1.2.2 菌悬液的制备将鸭疫里默氏杆菌接种于鲜血琼脂平板上，置于烛缸中，37℃培养24 h。
细菌培养后，接种于无菌大豆胰酶肉汤中，涂板计数，制备所需浓度菌液。
取灭菌试管，用无菌生理盐水将已知浓度的菌液作倍比稀释，使菌液浓度达到108 CFU/mL，备用。
1.2.3 体外抑菌试验1.2.3.1 最小抑菌浓度的测定以杜仲抗鸭疫里默氏杆菌为例，取杜仲提取物浸膏2 g，加2 mL二甲亚砜溶解；取灭菌试管12支，编号，每管先加入灭菌大豆胰酶肉汤1 mL，然后于第1管中加入制备好的杜仲提取物浸膏二甲亚砜溶液1 mL，混匀后取出1 mL放入第2管，依此类推至第9管，弃掉1 mL，第10管不加药物，作为阳性对照；第11管加杜仲提取物浸膏溶液1 mL，混匀后取出1 mL弃去，不加细菌，作为阴性对照；第12管加二甲亚砜1 mL，混匀后取出1 mL弃去，不加细菌，作为空白对照。
取制备好的细菌稀释液0.1 mL，分别加入上述1～10管中混匀，第11和12管加灭菌生理盐水0.1 mL，使得第1～9管药物浓度分别为500.00、250.00、125.00、62.50、31.25、15.60、7.80、3.90、1.95 mg/mL。
各管置于恒温培养箱中37℃培养24 h，观察结果。
阳性对照细菌生长，呈均匀浑浊状，阴性对照管和空白对照管无细菌生长，呈澄清、透明状时，试验成立，观察其他各管情况。
如试管内液体澄清、透明，则无菌生长。
以无菌生长的最低稀释度即为MIC。
1.2.3.2 最小杀菌浓度的测定观察药物MIC以上未见细菌生长的各管培养物，分别各取0.1 mL移种至不含药的营养琼脂平皿上，轻轻推开药液，置37℃培养过夜，观察有无细菌生长。
按一般规定，平皿培养基中，计数少于5个菌落者则作为该药的MBC。
1.2.3.3 结果判定参考刘忠义等（1996）介绍的判断标准，MIC＜7.80 mg/mL，为高度敏感，7.80 mg/mL＜MIC＜250.00 mg/mL，为中度敏感，MIC＞250.00 mg/mL，为不敏感。
1.2.4 中药提取物对鸭疫里默氏杆菌体外联合抑菌试验通过以上单味中药材的体外抑菌活性结果，选择其中抑菌活性较强的中药，采用棋盘法进行体外联合抑菌试验，根据测得各药物单独对鸭疫里默氏杆菌的MIC，分别以其中2味药MIC的2和1倍，以及1/2、1/4和1/8倍分别进行联合，结果以联合抑菌指数（fractiona inhibitory concentration index，FICI）来判断两者的联合效应。
FICI为联合用药时，各药的MIC值分别除以单独用药时MIC值的商的和：FICI＝甲药联合时的MIC/甲药单测时MIC＋乙药联合时的 MIC/乙药单测时的 MIC。
FICI指数≤0.5，为协同作用；0.5＜FICI指数≤1，为相加（累加）作用；1＜FICI指数≤2，为无关作用；FICI指数＞2，为颉颃作用（洪秀华，2002）。
2 结果与分析2.1 20 味中药提取物对鸭疫里默氏杆菌的体外抑菌活性研究 20味中药提取物抗鸭疫里默氏杆菌的体外抑菌结果见表1。
由表1可知，杜仲等中药提取物对鸭疫里默氏杆菌的MIC范围为15.60～250.00 mg/mL，其中大黄、白头翁、板蓝根、佛手、杜仲、秦皮和大青叶抑菌效果好，MIC值均为15.60 mg/mL，栀子、何首乌、荆芥、黄柏、连翘、青蒿、苦参和夏枯草抑菌效果较好，MIC值均为31.25mg/mL，而金银花、姜黄、黄芩、黄芪和紫草的抑菌效果差，MIC值在125.00 mg/mL以上。
杜仲等中药提取物对鸭疫里默氏杆菌的MBC值范围为31.25～250.00 mg/mL，其中板蓝根、佛手、何首乌、杜仲、秦皮和大青叶杀菌效果好，MBC值均为31.25 mg/mL，大黄、栀子、白头翁、黄柏、连翘、青蒿、苦参和夏枯草杀菌效果次之，均为62.50 mg/mL，荆芥、金银花、姜黄、黄芩、黄芪和紫草杀菌效果差，均为250.00 mg/mL。
表1 20味中药提取物对鸭疫里默氏杆菌的体外抑菌活性结果（mg/mL）中药提取物 MIC MBC 中药提取物 MIC MBC大黄 15.60 62.50 黄柏 31.25 62.50板蓝根 15.60 31.25 黄芩 125.00 250.00佛手 15.60 31.25 黄芪 125.00 250.00栀子31.25 62.50 连翘 31.25 62.50白头翁 15.60 62.50 秦皮 15.60 31.25何首乌31.25 31.25 紫草 250.00 250.00杜仲 15.60 31.25 青蒿 31.25 62.50荆芥 31.25 250.00 大青叶 15.60 31.25金银花 125.00 250.00 苦参 31.25 62.50姜黄250.00 250.00 夏枯草 31.25 62.502.2 杜仲等4味中药提取物对鸭疫里默氏杆菌的体外联合抑菌活性研究通过以上的单味药体外抑菌结果分析，因此选择杜仲、大黄、白头翁和秦皮进行体外联合抑菌试验，结果见表2。
由表2可知，杜仲提取物（A）与秦皮提取物（B）对鸭疫里默氏杆菌的FICI值为0.75，秦皮提取物（B）与大黄提取物（D）对鸭疫里默氏杆菌的FICI值为1，杜仲提取物（A）与白头翁提取物（C）、秦皮提取物（B）与白头翁提取物（C）对鸭疫里默氏杆菌的FICI值均为2，杜仲提取物（A）与大黄提取物（D）、白头翁提取物（C）与大黄提取物（D）对鸭疫里默氏杆菌的FICI值均为2.5。