腺病毒和反转录病毒载体及其在基因治疗中的应用进展-文献综述
重组腺病毒载体在基因治疗中的应用研究
重组腺病毒载体在基因治疗中的应用研究腺病毒（Adenovirus）是一种非常常见的病毒，它可以引起呼吸道感染、结膜炎等疾病。
而腺病毒载体则是将腺病毒改造成为可以携带外来基因并且将其传递到宿主细胞中的一种工具。
重组腺病毒载体（recombinant adenovirus vector）则是将腺病毒载体进行基因工程改造，以使其更加适合在基因治疗中使用。
基因治疗是一种利用人工合成或修饰的DNA或RNA，以矫正人体内RNA或蛋白质的缺陷或突变，来实现治疗目标的方法。
而腺病毒重组载体作为一种新型的基因治疗工具，不仅可以向宿主细胞传递被携带的外来基因，还可以被认为具有良好的特异性、高效性以及安全性。
那么，究竟如何对腺病毒进行改造呢？首先，需要将腺病毒的自然基因组从载体中删除，从而保证它不会再次导致感染。
然后，需要在其基因组中加入携带有目标基因的DNA，以使其能够有效传递基因到宿主细胞中。
此外，为了提高载体的稳定性、特异性以及亲和力，还可以在其表面进行修饰。
比如，将适当的配体加入载体表面，使其更容易与宿主细胞进行特异性结合。
而为了提高载体的免疫原性，还可以对载体进行进一步的改造以减少其在免疫系统中的识别度。
在基因治疗中，重组腺病毒载体具有多种优点。
例如，其在宿主细胞中产生过程稳定、表达效率高，可以长期保持稳定，并且为基因的体内传递提供了更为安全的一种方式。
此外，重组腺病毒载体还具有较高的转染效率，可以对多种细胞进行有效传递，且在传递过程中对细胞无明显不良影响。
同时，由于重组腺病毒是一种广泛存在于自然环境中的病毒，因此人体免疫系统对其也具有高度的抗体免疫反应，可以使其在体内被很好地清除。
然而，重组腺病毒载体在基因治疗中还存在着一些问题需要解决。
例如，由于重组载体通常与腺病毒自身存在交叉反应，因此将其用作基因治疗工具时，可能会导致一定程度的免疫性抑制。
此外，重组载体的安全性也需要进一步加强，以确保其在大量应用中不会产生潜在的副作用。
腺病毒与基因传递载体的构建与应用
腺病毒与基因传递载体的构建与应用腺病毒（Adenovirus）是一种以双链DNA为基础的病毒，主要感染哺乳动物，包括人类。
由于具有较高的感染率和传播速度，在临床治疗和基因治疗等领域，被用作基因载体。
这篇文章将会介绍腺病毒作为基因传递载体的构建和应用。
一、腺病毒作为基因传递载体的构建腺病毒是一个十分复杂的病毒，其基因组由约36 kb的双链DNA组成。
它的基因组被分为两个方向，一个方向编码早期基因（E1A、E1B、E2、E3和E4），另一个方向编码晚期基因（L1-L5）。
早期基因编码的转录产物参与了病毒DNA的复制和转录，晚期基因主要编码病毒颗粒结构和组装所需的蛋白质。
基于这个理论框架，可以利用腺病毒基因组进行基因传递。
首先，必须构建一个适当的腺病毒载体（Adenoviral vector），其基本构造是一个缺少大部分基因组的腺病毒。
在此基础上，将感兴趣的DNA片段插入到腺病毒基因组里。
这需要掌握两种方法：重组技术和确认策略。
以重组技术为例，首先要得到一个带有感兴趣DNA片段的载体核酸。
这个DNA完整地包含了带有专门的重组序列的保护酶切位点，使其能够在目标腺病毒基因组上的互补位点诱导重组。
在这个操作后，形成了一个新的腺病毒基因组，其中包括感兴趣的DNA片段。
然后，改造后的基因组可以转染到腺病毒感染容器中，进行繁殖和扩增。
这一步骤可以提高已经构建的腺病毒载体的数量。
其次，需要构建一种辅助病毒（Adenoviral helper）来帮助前述的重组病毒形成成熟的病毒颗粒。
在这个方法中，辅助病毒中没有任何有价值的基因，因此它不能复制自己。
相反，它确保引入的重组病毒可以在感染容器中成功地产生新的病毒颗粒。
通过这样的步骤，可以构建出一种有效的载体，并用于下一步的实验设计。
二、腺病毒作为基因传递载体的应用腺病毒作为基因传递载体可以应用于基因治疗、疫苗研究、基因注入和细胞治疗等领域。
下面分别介绍一下相关应用的基本技术。
腺病毒载体的研究进展
腺病毒载体的研究进展
腺病毒载体的研究进展
目的由于腺病毒载体转导目的基因具有高效率、低致病性、高滴度以及在体内不整合入宿主细胞染色体等优点,已被认为是最有效的转基因载体之一,并广泛应用于人类基因治疗.但是腺病毒载体还存在一些不足,如果有一定的免疫原性和毒性等,尚有待进一步解决.随着腺病毒载体研究的进展,新的载体系统必将在基因治疗中发挥更重要的作用.本文对腺病毒载体的研究进展作一综述.
作者：范凌云谢庆军作者单位：范凌云(上海交通大学生命科学技术学院,上海200240;深圳市威尔德基因工程有限公司,深圳518054) 谢庆军(深圳市威尔德基因工程有限公司,深圳,518054)
刊名：中国生物制品学杂志ISTIC英文刊名：CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS 年，卷(期)：2008 21(2) 分类号：Q343.1 R394.8 关键词：腺病毒载体基因治疗。
腺病毒载体在基因治疗研究中的应用
腺病毒载体在基因治疗研究中的应用基因治疗是近年来发展非常迅速的一种新型疗法，其通过改变人体内某些基因的表达或功能，从而达到治疗疾病的目的。
而其中的一种常用方法就是利用腺病毒载体进行基因转导。
下面我们将深入探讨腺病毒载体在基因治疗研究中的应用。
一、腺病毒载体基础介绍首先，我们需要了解什么是腺病毒载体。
腺病毒是一种小型病毒，具有广泛的宿主范围和极高的转导效率，因此成为了基因治疗领域中最常用的载体之一。
腺病毒的基因组为一条线性双链DNA分子，它的大小约为30kb，可以携带大量外来基因负责转导。
同时，腺病毒中的大部分基因已被删减或失活，因此可以在病毒粒子内部容纳更多的外来基因。
二、腺病毒载体的优势相比于其他的基因治疗载体，腺病毒载体具有许多的优势。
首先，腺病毒对人体的免疫应答十分低。
因为腺病毒感染人类的过程通常都是无症状的，在人体内会迅速被淋巴系统清除，因此它不会引起人体免疫反应。
其次，腺病毒的转导效率非常高，因为它具有广泛的靶细胞类型和容易侵入细胞的特性。
最后，腺病毒的基因修饰能力也很高，可以很容易的携带大量的外来基因，在转导过程中基因也不会被分解或改变。
三、腺病毒载体在基因治疗中的应用现如今，腺病毒载体已广泛应用于临床试验和基础研究中。
以传统的疗法为例，在肝脏癌等疾病中常常需要利用手术切除病变组织，但手术切除对机体的侵害很大。
通过利用腺病毒载体送入基因，就可以避免这种创伤，缩短患者的恢复期。
此外，腺病毒载体还可以用于治疗和预防一些遗传疾病，例如囊性纤维化和色素性视网膜炎。
四、腺病毒载体的展望在未来，腺病毒载体极有可能成为基因治疗领域的重要发展方向之一。
随着科技的发展和基因治疗研究的深入，人们可以更加深入的了解腺病毒载体中的机制，并且对其进行更加精确的改造。
同时，人们也需要进行更加深入的实验和测试，以探究腺病毒载体在人体内的表现和转导效率。
这一系列的研究和测试，将为腺病毒载体在基因治疗中的应用提供更好的基础和保障。
基因治疗中的基因传递载体比较与选择建议
基因治疗中的基因传递载体比较与选择建议基因治疗是一种新兴的治疗方式，可以通过将特定的基因传递到患者体内，以修复或替代缺陷基因，从而治疗遗传性疾病。
在进行基因治疗时，选择合适的基因传递载体非常重要，因为它可以影响基因的有效性、安全性和稳定性。
在本文中，我们将比较常用的基因传递载体，并给出选择建议。
一、病毒载体病毒载体是最常用的基因传递工具之一。
它们具有高度传染性和高效的基因传递能力。
目前，常用的病毒载体主要包括腺病毒、逆转录病毒和腺相关病毒。
1. 腺病毒（Adenovirus）腺病毒被广泛用于基因治疗研究中。
它们能够传递大分子量的基因，并能够感染广泛的细胞类型。
腺病毒具有较高的转染效率和较短的表达时间，但由于免疫反应等问题，其基因传递效果较为有限。
2. 逆转录病毒（Retrovirus）逆转录病毒是一种RNA病毒，它能够将其RNA转录成DNA，并将其整合到靶细胞的基因组中。
逆转录病毒能够传递长期稳定的基因，并且可以针对特定细胞类型进行修饰，但其转染效率较低，并且由于整合位点的随机性，可能会导致不可预测的安全性问题。
3. 腺相关病毒（Adeno-associated virus，AAV）腺相关病毒是一种非致病的病毒，其在人体中广泛分布。
AAV具有良好的基因传递能力和安全性。
它能够传递较短的基因序列，并能够长期稳定地表达基因。
然而，由于AAV的包装能力有限，其传递能力受到一定的局限。
二、非病毒载体相比病毒载体，非病毒载体在基因传递中具有更好的安全性和更低的免疫反应。
然而，非病毒载体传递效率较低，需要优化。
1. 基因枪（Gene gun）基因枪是一种通过加速金属微粒来传递DNA或RNA的方法。
它能够有效传递基因到细胞中，并且不受基因大小的限制。
尽管基因枪具有卓越的穿透性和稳定性，但它的应用仍然受到技术要求和操作复杂性的限制。
2. 转染剂（Transfection reagents）转染剂是基因治疗中常用的非病毒载体。
腺病毒载体的构建与基因治疗的研究
腺病毒载体的构建与基因治疗的研究在现代医学中，基因治疗作为一种新型的治疗手段，已经逐渐受到人们的关注。
而腺病毒载体的构建是基因治疗研究中不可避免的部分。
本文将围绕腺病毒载体的构建和基因治疗的研究展开论述。
一、腺病毒及其载体的特点腺病毒(Adenovirus)是一类非常常见的病毒，其特点是具有两种形态：圆形和20面体。
腺病毒可以感染人类、猴子、猪、牛和小鼠等动物，可能引起感染后的发热、呼吸困难等症状。
然而，腺病毒毒株相对较多，结构和生命周期也非常适合于基因搭载和转导。
因此，腺病毒载体成为一种被广泛使用的基因治疗载体。
腺病毒载体的特点是将外源基因插入到其某些基因区域内，通过腺病毒本身的生命周期，将基因表达的信使RNA传递到细胞内，实现基因治疗。
二、腺病毒载体的构建针对腺病毒载体的构建，一般可分为以下几个关键步骤：1.选择腺病毒毒株目前，已经有大量的腺病毒毒株被发现和鉴定。
选择恰当的腺病毒毒株，可以针对不同治疗疾病的目的，选择合适的载体来完成基因治疗。
2.构建质粒在选择了合适的腺病毒毒株后，需要构建质粒，以便将外源基因并入腺病毒的基因组。
质粒中除了外源基因外，还包括其他辅助基因，比如腺病毒毒衣壳外衣和细胞克隆等。
而且，对于外源基因的选择，需要考虑到其表达效率和拓扑结构等方面。
3.转染细胞和腺病毒表达质粒构建完成后，通过转染细胞并带入质粒中的外源基因，使细胞“表达”出腺病毒。
随着腺病毒的制备，将腺病毒载体大量表达出来。
三、基因治疗的研究基因治疗是一种针对遗传病和非遗传病的新型治疗方法，它通过人工调控异常基因的表达，达到基因治疗的效果。
具体来说，是针对某些致病基因的缺失或突变，通过腺病毒载体的插入溶液，传递外源基因到受体细胞中，使外源基因代替致病基因，达到基因治疗的效果。
研究表明，基因治疗可以在癌症、神经系统疾病、血液系统疾病、因人类免疫缺陷病毒感染引起的疾病、代谢性疾病等方面发挥重要作用。
四、展望尽管基因治疗在现在处于起步阶段，但在未来，随着载体、技术的不断改进和完善，它在医学领域的应用将会越来越广泛，并会为治疗一些顽疾带来新的突破。
腺病毒载体在基因治疗研究中的应用
２ 利 用 重 组 腺 病 毒 载 体 进 行 基 因治 疗 的原 理
通 过缺 失腺 病毒某 些 片段可 以产 生复 慢病 毒载 体 、 转 录病 毒 逆
载体 、 腺病 毒 载 体 等 。近 年来 腺 病 毒 载 体 以操 作 方便、 滴度 高 、 全性好 等 优 点 ，已成为 研究 的热 安
是先将 一种 质粒 转 化 到 细 菌 感 受态 细 胞 中 ， 选 筛
出 阳性 克 隆 ， 把 含质 粒 的细 菌 制备 成 感 受 态 细 再
作 者 简 介 ： 爱 玲 （ ９ ８）女 ， 族 ， 苏 徐 州 人 ， 士 ， 师 ， 究 方 向为 遗 传 与 分 子 生 物 学 。 李 １７ ， 汉 江 硕 讲 研
腺病毒载体在基因治疗中的应用研究
腺病毒载体在基因治疗中的应用研究从基因治疗的出现到现在，各种基因传递载体已经被开发出来。
腺病毒载体是其中最常用的一种。
腺病毒是单链DNA病毒，其能力具有针对患者和细胞的高效度和安全性。
在基因治疗中，腺病毒载体被用作基因传递介质，将目标序列输送到患者的细胞中，实现基因治疗。
腺病毒载体的种类目前，根据不同的模板基因和载体描述，分别有以下几种腺病毒载体：1. 腺病毒质粒宿主原型 (Adeno-Associated Virus-Derived Plasmid Host Prototype)2. 腺病毒质粒腺病毒 (Adeno-Associated Virus-Derived Plasmid Adeno-Associated Virus)3. 腺病毒质粒第一类全退化腺病毒 (Adeno-Associated Virus-Derived Plasmid Type-I AAV-Derived Pseudo-Adeno-Associated Virus)4. 腺病毒质粒第二类全退化腺病毒 (Adeno-Associated Virus-Derived Plasmid Type-II AAV-Derived Pseudo-Adeno-Associated Virus)5. 腺病毒基因疗法治疗CNS 疾病的腺病毒质粒 (Adeno-Associated Virus-Derived Plasmid for CNS Disorders)以上五种腺病毒载体的核心是由100个噬菌体相应核心重复序列（DRs）的一对反向定向的重复片段组成。
这些载体在噬菌体库中产生，并用于表达与腺病毒辅助质粒相对应的重组腺病毒质粒的核酸聚合酶。
腺病毒载体的优点相比较其他基因载体，腺病毒有如下优点：1. 小体积～5.1Kb（噬菌体中的序列长通常为10kb以上），可以输送到大多数疾病相关的基因。
2. 由于非可复制性（因为腺病毒无法自行进行复制）并且与人类生化系统共生,这意味着细胞从无害的感冒病毒转变为病毒感染后的目标细胞。
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腺病毒和反转录病毒载体及其在基因治疗中的应用进展（南京农业大学生命科学学院生命基地111班）摘要：本文首先介绍了最应用最广泛的Baltimore病毒分类系统，然后引用最新的The Journal of Gene Medicine的数据，展示了最新的基因治疗和载体情况，最后对腺病毒和反转录病毒在基因治疗中尤其是在临床医学治疗中的近年来应用情况。
关键词：腺病毒载体；反转录病毒载体；基因治疗Adenovirus and retrovirus vectors and advances of their application in gene therapy (College of Life Sciences,Nanjing Agricultural University)Abstract:This paper first introduced the most popular Baltimore virus classification system.Then,I cited data statistical data from The Journal of Gene Medicine, in order to show how gene therapy and vectors for it have developed. At last,I reviewed the up to date application of different adenovirus and retrovirus vectors in gene therapy, especially in clinical application.Key words: adenovirus vectors; retrovirus vectors;gene therapy病毒载体是基础生物学研究中常用的遗传物质传递的载体。
随着对病毒的遗传机制和致病机理的深入研究，越来越多的病毒载体被用于人类疾病的诊断和治疗。
病毒载体应用于基因诊断有曲折的历史。
起初被认为在充分了解病毒的分子和遗传机理的情况下，可用于之治疗任何疾病。
但是，1999年，宾夕法尼亚大学用经改造的腺病毒载体治疗一位18岁患有鸟氨酸转氨嫁酰酶部分缺失症男性，导致病人死亡；2002-2003年MLV载体在被用于治疗患有人类联合免疫缺陷症XI时，导致部分病人出现了类似白血病的病症[1]。
以上问题都归因于对病毒载体和宿主之间的相互作用不了解。
自此，人们开始更加注重对载体生物学和药理学的研究。
过去的十多年时间里，人们花了大量的精力研究病毒载体和其与宿主的互作，本文着重讨论近年来在基因诊疗中腺病毒和反转录病毒载体应用的进展情况。
1病毒载体和基因治疗1.1 病毒分类Baltimore分类系统根据病毒的核酸类型、核酸链的类型（单链或双链）、正负链和复制类型将病毒分为七类：表1：Baltimore分类系统ds:双链；ss:单链基因治疗首先被设计应用于遗传性单基因疾病[2]，如今获得性疾病例如癌症[3]、心血管疾病[4]、神经变性疾病[5]和传染病[6]都是很多基因治疗研究的范畴。
由于病毒的多样性，用于基因治疗的病毒载体也是多样的，他们各具特点。
1.2 基因治疗统计The Journal of Gene Medicine (Wiley Database)对世界范围内1996项完成的或正在进行的基因疗法涉及的疾病和载体种类进行了统计，如下图所示：图一基因治疗的疾病种类样本总量：n=1996；Cancer diseases：癌症；Monogenic diseases：单基因病；Infectious diseases：传染病；Cardiovascular diseases：心血管疾病；Neurological diseases：神经疾病；Ocular diseases：眼科疾病；Inflammatory diseases：炎症性疾病由图一可以看出，研究最广泛的是癌症，其次是单基因疾病，再次是传染性疾病，心血管疾病位居第四。
图二基因治疗的载体样本总量：n=1996；Adenovirus：腺病毒；Retrovirus：逆转录病毒；Vaccinia virus：牛痘病毒；Adeno-associated virus：腺伴随病毒；Poxvirus：痘病毒；Lentivirus：慢病毒；Herpes simplex virus：单纯疱疹病毒由图二可以看出，腺病毒和逆转录酶病毒是应用最广泛的两类病毒载体。
牛痘病毒、腺伴随病毒、痘病毒、慢病毒、单纯疱疹病毒均有不同程度的使用。
因为慢病毒是逆转录病毒的一种，所以逆转录病毒载体的使用比例可达22.7%。
下文将综述腺病毒载体和逆转录病毒载体这两种使用比例最高的载体在基因诊断中的应用。
2腺病毒载体腺病毒（Adenovirus）是中等体积的（90-100nm），无包被病毒，其二十面体核衣壳包含一条双链DNA，在Baltimore分类系统中属于I类。
腺病毒常导致温和的感染，感染部位包括上下呼吸道、胃和肠道以及结膜[7]。
目前，人们共发现了53种人类腺病毒血清型[8]，它们被分为六组，分别为A-F。
在针对人类免疫缺陷疾病的治疗中，Ad5载体被Merck和NIH疫苗研究中心选用，因为相比较于痘病毒和DNA疫苗，它能激发人体更多的体液和细胞免疫应答[9]。
但2007年该研究被终止，由于受治疗的人有增加的HIV-1感染趋势，很多学者对其中的原因展开了研究[10]。
2012年，Hualin Li等发现了一种肌肉注射的腺病毒载体，可诱导rhesus猴中针对猿猴免疫缺陷病毒的T淋巴细胞应答，这种应答可在外周血和多种气管组织中持续2年[11]。
2013年，Wendy等比较分析了三种（Ad5，Ad26，Ad35）腺病毒载体对小鼠免疫缺陷病毒Gag-specific CD8+T细胞的诱导情况，发现除了Ad5型的腺病毒载体，其他血清型的载体在对抗HIV-1中也是有效的[12]。
腺病毒载体的另一应用是针对肝炎病毒。
2012年，Eleanor等发现一种腺病毒疫苗，该疫苗可引起人体针对肝炎C病毒的广泛而持续的T细胞应答[13]。
LI–RUNG HUANG等用腺病毒载体携带HBV（肝炎B病毒）基因组，注射入小鼠并成功构建了小鼠B型肝炎动物模型[14]。
腺病毒载体用于癌症的研究有其独特的优势：转染高效，负载能力强，没有插入基因，但是一些原因也制约了它在临床中的应用，例如：引起机体的免疫反应，对肝细胞的毒性，半衰期短，在靶位点聚集少等[15]。
一些研究对克服这些缺点做了尝试，2010年，Sergey等用DAF(decay-accelerating factor)-Displaying腺病毒载体进行实验，发现该载体降低了小鼠体液和细胞适应性免疫应答[16]。
2012年，Christina等发现了一种可与宿主细胞基因组稳定整合的HC-AdV（高容量腺病毒载体）载体[17]。
纳米技术与腺病毒载体的联合使用可提高腺病毒载体靶向的特异性[18]。
3逆转录病毒载体逆转录病毒（Retrovirus）在Baltimore分类系统中属于VI类病毒，外表层为脂蛋白封套，包被有一二十面体的核蛋白衣壳，是一类RNA病毒，它们可将遗传物质稳定地整合在宿主细胞中。
根据其致病性不同，可将其分为三类：致瘤病毒、慢病毒、泡沫病毒。
逆转录病毒中，用于基因治疗最常见的是伽马逆转录病毒载体（Gammaretroviral vectors）和慢病毒载体（lentiviral vectors）,泡沫病毒的研究仍处在临床前阶段。
大多数伽马逆转录病毒载体都是在鼠白血病病毒的基础上改造而来[19]。
因为其不含任何致病基因，重组的病毒载体只能感染一个细胞并且不能复制。
但他的缺点是只能感染增殖细胞，除非载体解体并把自己的cDNA整合到宿主基因组中[20, 21]。
因此，对于非增殖或分化终止的细胞（神经细胞），需要慢病毒来源的载体。
20名患有SCID（severe combined immunodeficiency）-X1的儿童使用编码IL2RG的伽马逆转录病毒载体治疗，18位儿童重建了免疫能力，但是，其中的5位在接下来的2-5年内出现了白血病，1位死亡[22, 23]。
对患病儿童的分析表明，白血病T细胞克隆引入了插入突变。
截至2008年，超过30位患有ADA-SCID（adenosine deaminase-severe combined immunodeficiency）的儿童通过伽马逆转录病毒载体治愈，其中大约67%没有检测到副作用[24]。
慢病毒载体主要基于HIV[25]，但是猿猴免疫缺损病毒或猫免疫缺陷病毒[26]、马免疫缺陷病毒[27]等改造而来的载体也有应用。
首项基于HIV病毒载体的对抗HIV病毒I期临床实验开始于2003年[28]，目前为止，还没有相关的插入突变的报道。
4结论与展望腺病毒载体和反转录病毒载体是目前基因诊疗中应用最广泛的载体，有较多成功的案例报道。
但是，这两种载体都有较多的缺陷，尤其是用于临床实验中，更应该谨慎对待。
对于腺病毒载体，以后应该考虑新血清型的载体，并且可与一些新技术结合；对于慢病毒载体，主要是构建一种不会导致插入突变的载体。
参考文献：[1] Fischer A, Hacein-Bey S, Le Deist F, de Saint Basile G, de Villartay JP, Cavazzana-Calvo M. Gene therapy of immunodeficiency disorders[J]. B Acad Nat Med Paris 2000;184:1417-30.[2] Kay MA, Woo SLC. Gene-Therapy for Metabolic Disorders[J]. Trends Genet 1994;10:253-7.[3] Lowenstein PR. Why are we doing so much cancer gene therapy? Disentangling the scientific basis from the origins of genetherapy[J]. Gene Ther 1997;4:755-6.[4] Isner JM. Myocardial gene therapy[J]. Nature 2002;415:234-9.[5] Baekelandt V, De Strooper B, Nuttin B, Debyser Z. Gene therapeutic strategies for neurodegenerative diseases[J]. Curr Opin Mol Ther 2000;2:540-54.[6] Bunnell BA, Morgan RA. Gene therapy for infectious diseases[J]. Clin Microbiol Rev 1998;11:42-+.[7] Lynch JP, Fishbein M, Echavarria M. Adenovirus[J]. Semin Resp Crit Care 2011;32:494-511.[8] Davison AJ, Benko M, Harrach B. Genetic content and evolution of adenoviruses[J]. J Gen Virol 2003;84:2895-908.[9] Shiver JW, Emini EA. Recent advances in the development of HIV-1 vaccines using replication-incompetent adenovirus vectors[J].Annu Rev Med 2004;55:355-72.[10] Barouch DH. Novel adenovirus vector-based vaccines for HIV-1[J]. Curr Opin Hiv Aids 2010;5:386-90.[11] Li HL, Liu JY, Carville A, Mansfield KG, Lynch D, Barouch DH. Durable Mucosal Simian Immunodeficiency Virus-Specific Effector Memory T Lymphocyte Responses Elicited by Recombinant Adenovirus Vectors in Rhesus Monkeys[J]. J Virol2011;85:11007-15.[12] Tan WG, Jin HT, West EE, Penaloza-MacMaster P, Wieland A, Zilliox MJ, et al. Comparative Analysis of Simian Immunodeficiency Virus Gag-Specific Effector and Memory CD8(+) T Cells Induced by Different Adenovirus Vectors[J]. J Virol 2013;87:1359-72.[13] Barnes E, Folgori A, Capone S, Swadling L, Aston S, Kurioka A, et al. Novel Adenovirus-Based Vaccines Induce Broad and Sustained T Cell Responses to HCV in Man[J]. Sci Transl Med 2012;4.[14] Huang LR, Gabel YA, Graf S, Arzberger S, Kurts C, Heikenwalder M, et al. Transfer of HBV Genomes Using Low Doses of Adenovirus Vectors Leads to Persistent Infection in Immune Competent Mice[J]. Gastroenterology 2012;142:1447-+.[15] Kasala D, Choi JW, Kim SW, Y un CO. Utilizing adenovirus vectors for gene delivery in cancer[J]. Expert Opin Drug Del2014;11:379-92.[16] Seregin SS, Aldhamen YA, Appledorn DM, Zehnder J, V oss T, Godbehere S, et al. Use of DAF-Displaying Adenovirus Vectors Reduces Induction of Transgene- and Vector-Specific Adaptive Immune Responses in Mice[J]. Hum Gene Ther 2011;22:1083-94. [17] Rauschhuber C, Noske N, Ehrhardt A. New insights into stability of recombinant adenovirus vector genomes in mammalian cells[J]. Eur J Cell Biol 2012;91:2-9.[18] Duffy MR, Parker AL, Bradshaw AC, Baker AH. Manipulation of adenovirus interactions with host factors for gene therapy applications[J]. Nanomedicine-Uk 2012;7:271-88.[19] Miller AD, Rosman GJ. Improved Retroviral Vectors for Gene-Transfer and Expression[J]. Biotechniques 1989;7:980-&.[20] Lewis PF, Emerman M. Passage through Mitosis Is Required for Oncoretroviruses but Not for theHuman-Immunodeficiency-Virus[J]. J Virol 1994;68:510-6.[21] Miller DG, Adam MA, Miller AD. Gene-Transfer by Retrovirus Vectors Occurs Only in Cells That Are Actively Replicating at the Time of Infection[J]. Mol Cell Biol 1990;10:4239-42.[22] Cavazzana-Calvo M, Hacein-Bey S, Basile CD, Gross F, Yvon E, Nusbaum P, et al. Gene therapy of human severe combined immunodeficiency (SCID)-X1 disease[J]. Science 2000;288:669-72.[23] Gaspar HB, Parsley KL, Howe S, King D, Gilmour KC, Sinclair J, et al. Gene therapy of X-linked severe combined immunodeficiency by use of a pseudotyped gammaretroviral vector[J]. Lancet 2004;364:2181-7.[24] Sokolic R, Kesserwan C, Candotti F. Recent advances in gene therapy for severe congenital immunodeficiency diseases[J]. Curr Opin Hematol 2008;15:375-80.[25] Naldini L, Blomer U, Gage FH, Trono D, Verma IM. Efficient transfer, integration, and sustained long-term expression of the transgene in adult rat brains injected with a lentiviral vector[J]. P Natl Acad Sci USA 1996;93:11382-8.[26] Barraza RA, Poeschla EM. Human gene therapy vectors derived from feline lentiviruses[J]. Vet Immunol Immunop 2008;123:23-31.[27] Poeschla EM. Non-primate lentiviral vectors[J]. Curr Opin Mol Ther 2003;5:529-40.[28] Manilla P, Rebello T, Afable C, Lu XB, Slepushkin V, Humeau LM, et al. Regulatory considerations for novel gene therapy products:A review of the process leading to the first clinical lentiviral vector[J]. Hum Gene Ther 2005;16:17-25.。