细菌截留验证指导程序
新版GMP对除菌过滤工艺及验证的要求
分类
测试名称
测试实施者
破坏性
细菌挑战测试
起泡点测试，扩散测试 ，保压实验，水侵入法
制造商
非破坏性
制造商及使用者
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应该在什么时候做完整性测试?
n
灭菌前？
n
灭菌后，过滤前使用前？
n
过滤后？
什么时候检测完整性？
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预过滤 澄清过滤
培养基预过 滤及除菌过 滤
除菌过滤
大/小容量注射剂 LVP and SVP
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预过滤
除菌过滤
API原料药
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N FF - Sterilization
气体除菌
澄 N FF - B ulk 清过滤
5
根据过滤阶段
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孔径逐渐减小的过滤系 列
澄清
在过滤系列开始是最大 的过滤容量
预滤
在过滤系列终端是最大 的过滤截留率
除菌
3 根据过滤阶段 Filtration stage
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主要除菌过滤器应该放在无菌区还是有菌区？
第七十五条 非最终灭菌产品的过滤除菌应当符合以下要 求： （一）可最终灭菌的产品不得以过滤除菌工艺替代最终灭 菌工艺。如果药品不能在其最终包装容器中灭菌，可用 0.22μm（更小或相同过滤效力）的除菌过滤器将药液 滤入预先灭菌的容器内。由于除菌过滤器不能将病毒或 支原体全部滤除，可采用热处理方法来弥补除菌过滤的 不足。
19:54
产品是否可以121℃湿热灭菌15分钟
否 是
产品是否可以湿热灭菌F0≥8 分钟，达到SAL≤10－6
否 是
超滤膜组件细菌截留性能测试方法研究
２１年 １ ０１ 月
天
津
化
工
ＶｏＩ ５ Ｎｏ１ Ｉ ． ２
Ｔａ ｊ ｈ ｍｉ ｌｎ ｕ ｔ ｉ ｉ Ｃ ｅ ｃ ｄｓ ｙ ｎｎ ａＩ ｒ
Ｊｎ２ １ ａ ．０ １
超 滤膜 组件 细 菌截 留性 能测 试 方法研 究
刘 士 栋 ， 小 焱 。 涛 于 于
（ 家海 洋 标 准计 量 中心 ， 津 ３ ０ １ 国 天 ０ １ ２）
摘要 ： 文 回顾 了国 内外在超 滤膜 细 菌截 留试 验领 域 的研 究成 果 。 中空 纤 维超 滤膜 组 件 的细 菌 本 对
截 留检 测 进 行 了 实验 研 究 ， 以期 为 开 展 超 滤 膜 组 件 细 菌 截 留 性 能 评 价 测 试 提 供 实验 依 据 。
Ｋｅ ｒ ：ｕ ａ ｉ ａｉｎ ｍｅ ｒ ｎｅ ｂ ｃｅ ｉ ｌ ｅ ｅ ｔｏ ； ｅ ｅ ｔｏ ｙ ｗｏ ｄｓ ｈｒｆｈｒ ｔｏ ｍｂ ａ ； ａ ｔ ｒａ ｔｎ ｉｎ ｄ ｔｃ ｉｎ ｒ
超滤 是介 于微 滤和 纳滤 之间 的一种 膜过 程 ， 膜 孔 径在 ｌ ｍ至 ５ ｍ之 间 ， 在实 际应 用 中一 般不 ａ ０ｎ 但
以孔径 表征超 滤膜 ， 而是 以截 留分 子量 表征 。与微 滤 膜一 样 ， 滤膜 也 被 视 为多 孔 膜 ， 要用 于 分 离 超 主 溶液 中的大分子 、 胶体 和微粒 。
超 滤膜 除 了用于 常规 的过滤外 ， 还被 经 常用 于
液体 的冷消毒 。许多 国家 对于用 于冷消毒 的超 滤膜 有较 高 的要 求 ， 如对 包 囊 、 细菌 以及病 毒 等 有机 体
３ 结论
通过 甲基 红 与溴 酸 钾进 行 的显 色 反应 及 条 件 试验 结果 分 析 ，该 方法 的检 测 范 围达 到 了 ０１ ． ．加 ９
滤膜法检验步骤
1 准备工作1.1 滤膜灭菌:将滤膜放入烧杯中，加入蒸馏水，置于沸水浴中煮沸灭菌三次，每次15min。
前两次煮沸后需更换水洗涤2~3次，以除去残留溶剂。
1.2 滤器灭菌: 用点燃的酒精棉球，火焰灭菌。
也可用121℃高压灭菌20min。
2 过滤水样用无菌镊子夹取灭菌滤膜边缘部分，将粗糙面向上，帖放在已灭菌的滤床上、，固定好滤器，将100mL水浴(如水样含菌数较多，可减少过滤水样量，或将水样稀释)注入滤器中，打开滤器阀门，在负0.5大气压下抽滤。
3 培养水样滤完后，再抽气约5s，关上滤器阀门，取下滤器，用灭菌镊子夹取滤膜边缘部分，移放在品红亚硫酸钠培养基上，滤膜截留细菌面向上，滤膜应与培养基完全贴紧，两者间不得留有气泡，然后将平皿倒置，放入37℃恒温箱内培养24h±2h。
4 观察结果4.1 挑出符合下列特征菌落进行革兰氏染色、镜检。
紫红色，具有金属光泽的菌落。
深红色，不带或略带金属光泽的菌落。
淡红色，中心色较深的菌落。
4.1.1凡革兰氏染色为阴性的无芽胞杆菌，再接种乳糖蛋白胨培养基液，于37℃培养24h，有产酸产气者，则判定为总大肠菌群阳性。
4.1.2 计算滤膜上生长的总大肠菌群数，以每100mL 水样中的总大肠菌群数报告之(CFU/100mL)数出的总大肠菌群菌落数*100总大肠菌群菌落数(CFU/100mL)＝─────────────────────── (1)过滤的水样体积(ml)1 准备工作1.1 滤膜灭菌:将滤膜放入烧杯中，加入蒸馏水，置于沸水浴中煮沸灭菌三次，每次15min。
前两次煮沸后需更换水洗涤2~3次，以除去残留溶剂。
1.2 滤器灭菌: 用点燃的酒精棉球，火焰灭菌。
也可用121℃高压灭菌20min。
2 过滤水样用无菌镊子夹取灭菌滤膜边缘部分，将粗糙面向上，帖放在已灭菌的滤床上、，固定好滤器，将100mL水浴(如水样含菌数较多，可减少过滤水样量，或将水样稀释)注入滤器中，打开滤器阀门，在负0.5大气压下抽滤。
微生物限度检查操作规程
微生物限度检查操作规程1.目的：建立一个测定微生物限度的检查方法。
2.范围：适用于需测定微生物限度的样品。
3.责任：质检科无菌检验员对实施本规程负责。
4.程序4.1概要4.1.1微生物限度检查法系检查非规定灭菌制剂及其原料、辅料受到微生物污染程度的方法。
检查项目包括细菌数、霉菌数、酵母菌数及控制菌检查。
4.1.2微生物限度检查应在环境洁净度10 000级下的局部洁净度100级的单向流空气区域内进行。
检验全过程必须严格遵守无菌操作，防止再污染。
单向流空气区与工作台面及环境应定期按《医药工业洁净室（区）悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法》的现行国家标准进行洁净度验证。
4.1.3供试品检查时，如果使用了表面活性剂、中和剂或灭活剂，应证明其有效性及对微生物的生长和存活无影响。
4.1.4除另有规定外，本检查法中细菌培养温度为30～35℃，霉菌、酵母菌培养温度为23～28℃，控制菌培养温度为35℃～37℃。
4.1.5检验结果以1g、1ml、10g、10ml或10cm2为单位报告。
4.2检验量4.2.1检验量即一次试验所用的供试品量（g、ml或cm2）。
4.2.2除另有规定外，一般供试品的检验量为10g或10ml；化学膜剂为100cm2；贵重药品，微量包装药品的检验量可以酌减。
4.2.3检验时，应从2个以上最小包装单位中抽取供试品，膜剂还不得少于4片。
4.2.4一般应随机抽取不少于检验用量（两个以上最小包装单位）的3倍量供试品。
4.3供试液的制备根据供试品的理化特性与生物学特性，采取适宜的方法制备供试液。
供试液制备若需用水浴加温时，温度不应超过45℃。
供试液从制备至加入检验用培养基，不得超过1小时。
除另有规定外，常用的供试液制备方法如下。
4.3.1液体供试品取供试品10ml，加pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml，混匀，作为1：10的供试液。
油剂可加入适量的无菌聚山梨酯80使供试品分散均匀。
水溶性液体制剂也可用混合的供试品原液作为供试液。
菌种检验程序
菌种开启GNA 或GNA+B划线于基础 革兰阳性杆菌阴性阳性GNA+B 有芽孢无芽孢BacillusListeria阴性 阳性Strep Staph氧化酶触酶血浆凝固酶动力 25℃+ 37℃-附 录 A 菌种检验流程图附录 B鉴定条使用说明书B.1 GN-ID 鉴定条使用说明书B.1.1 接种和培养（1）挑取培养18～24h的纯培养物至3～5ml无菌生理盐水中，混合均匀；（2）小心打开鉴定条的粘性封口膜（不要丢弃），用无菌滴管加3～4滴（约100微升）菌悬液至每个小管，然后在管上有黑色圈标志的管1、2、3、9（GN A）和管20、24（GN B）中滴加3～4滴矿物油；注：如果培养物为氧化酶阳性，则管（黑色虚线）20不加矿物油。
（3）用粘性封口膜封住管口，检查管7、11、12（GNA）和14（GNB）上面的封口膜上是否有透气小孔，然后放至35～37℃的培养箱中孵育；（4）对于肠杆菌科的培养物，在18～24小时后读结果，而氧化酶阳性培养物则在48小时后读结果。
B.1.2结果判读和添加配套试剂B.1.2.1 结果判读打开粘性封口膜，参考结果对照图和反应结果对照表读GN A和GN B的反应结果，并将结果记录于报告单上。
B.1.2.2 添加配套试剂（管的上部为绿色标志）：加2滴Kovac试剂于管8（GNA）中，60秒后记录结果，红色为阳性；加1滴VPⅠ和一滴VPⅡ于管10（GNA）中，15-30分钟后记录结果，深红色表明为阳性结果；加1滴TDA于管12（GNA）中，60秒后记录结果，桃红色标明阳性。
记录ONPG的结果之后，在管7中加1滴Nitrate A和1滴Nitrate B试剂，60秒后记录反应结果，红色表示阳性，黄色或无色表示阴性(若为黄色或无色，可加少量锌粉，如果仍保持无色或黄色，则表示硝酸盐已被彻底还原为氮气，判断为阳性，若变红色，则说明硝酸盐仍保留在管内，被锌粉还原，判断为阴性)；如：加入NITA+ NITB红色——阳性无色或黄色——阴性加入锌粉：无色或黄色——阳性红色——阴性B.1.3 结果记录和读取在GN-ID A+B的结果记录单上，将每三个反应分为一组，每组中反应底物下面均标有1、2、4数值，将每组中阳性反应对应的数值加起来，将得到一个四位数（GN A）、或者八位数（氧化酶阴性GN A+B）或者九位数（氧化酶阳性GN A+B），将这个数值输入microgen 电脑鉴定软件系统，系统将显示数据库中 5 个最接近结果的菌种，以及每个结果的可能性几率以及相似性，从而得到鉴定结果。
34 微生物限度检查标准操作规程
微生物限度检查标准操作规程1.目的：建立一个微生物限度检验标准操作规程。
2.范围：本公司的药品、原辅料、器具设备、工艺流程、生产环境和操作人员。
3.职责：微生物限度检验人员对实施本程序负责。
4.规程：4.1取样：按各《取样标准操作程序》，应随机抽取不少于检验用量（两个以上最少包装单位）的3倍量供试品。
每份供试品最低应取2个以上最少包装单位，膜剂不得少于4片。
4.2 培养基的制备：按“培养基制备标准操作规程”。
4.3 稀释剂的制备：称取pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液14.63g，置1000ml三角瓶中，加纯化水1000ml，摇匀，加热溶解,于121℃高压蒸汽灭菌20min，备用。
4.4检验量：除另有规定外，每份供试品最低应取2个以上最小包装单位，膜剂不得少于4片。
一般供试品的检验量为10g或10ml；中药膜剂为100cm2。
要求检查沙门菌的供试品，其检验量应增加20g或20ml（其中10g或10ml 用于阳性对照试验）。
4.5 试验前的准备：4.5.1将所有已灭菌的平皿，三角瓶、吸管、量杯、研钵、稀释剂及供试品等移至无菌室的传递窗内，打开紫外灯消毒15min，风淋10s。
4.5.2开启无菌室紫外线灭菌灯20分钟。
4.5.3关闭紫外线灭菌灯，进入缓冲一室，用肥皂洗手，换工作鞋，除外衣；进入缓冲二室，穿戴无菌衣、帽、口罩，用消毒剂消毒双手，戴上手套，进入操作间。
4.5.4开启工作台，用乙醇棉球擦手及供试品瓶、盒、袋等的开口处周围，待干后用灭菌剪刀将供试品启封。
4.6操作:4.6.1供试液的制备:4.6.1.1固体、半固体或黏稠性供试品: 取供试品10g,置灭菌研钵中,以100ml稀释剂分次加入研磨,混匀使成1:10供试液。
4.6.1.2液体供试品：取供试品10ml，置灭菌锥形瓶中，加入90ml稀释剂，充分摇匀，即为1:10供试液，也可取原液作为供试液。
4.6.1.3胶囊剂和空心胶囊供试品：取供试品10g，分离囊帽与囊身，同置灭菌锥形瓶中，加100ml稀释剂。
除菌过滤器微生物截留的试验分析
除菌过滤器微生物截留的试验分析录入时间:2011-9-22 9:20:27 来源：中国论文下载中心【摘要】目的：探讨非最终灭菌注射剂生产过程中除菌过滤器对微生物的截留效果，确认过滤除菌工艺的有效性与安全性。
方法：采用孔径为0.22 μm除菌级聚醚砜滤芯，以直径在0.3～0.4 μm的缺陷假单胞菌为生物指示剂，将菌液用滤芯过滤，计算被过滤液体过滤前的微生物数量与过滤后的微生物数量比的常用对数值(LRV)。
结果：菌液过滤前后微生物数量比的常用对数值LRV大于7。
结论：滤芯每平方厘米有效过滤面积符合中国药典2005年版2部附录ⅩⅦ灭菌法的规定，确认除菌过滤工艺在注射剂生产过程中的有效性与安全性。
【关键词】除菌过滤器；缺陷假单胞菌；微生物截留；无菌保证程度除菌过滤器在药品生产中主要用于无菌药品的除菌过滤，除菌过滤是药品生产过程中非常重要的一种除菌方式，特别是对非最终灭菌的注射剂而言，除菌过滤是消除药液中微生物的唯一方法。
通过对除菌过滤器滤芯材质的选择、灭菌方法、完整性测试以及细菌的截留试验，确认除菌的效果，提高除菌过滤在注射剂生产过程中无菌保证程度重要性的认识。
1 材料与方法1.1 试验材料(1)滤芯：滤膜材质为聚醚砜，10英寸226卡式，孔径：0.22 μm，级别：除菌级，滤膜面积：3 600 cm2。
来源：颇尔过滤器(北京)有限公司。
(2)全自动过滤器完整性测试仪：上海先维过滤设备厂，型号：212A。
(3)甘露醇：广西南宁化学制药有限公司，批号：0809110，配置20 kg 浓度为0.5%的水溶液。
(4)微生物指示剂：缺陷假单孢菌(ATCC19146直径0.3～0.4 μm)，北京鑫四环消毒技术开发中心。
(5)菌液浓度：每平方厘米应达到107个菌的挑战水平。
(6)培养基：硫乙醇酸盐流体培养基：北京三药科技开发公司，批号:081111；营养琼脂：广东环凯微生物科技有限公司，批号:200902081；营养肉汤：广东环凯微生物科技有限公司，批号:200901071。
除菌过滤验证—细菌截留试验课件
对行业的深远影响
提高产品质量
除菌过滤技术的广泛应用将有助于提高各行各业的产品质量和安 全性，增强消费者信心。
促进产业升级
除菌过滤技术的发展将推动相关产业的升级和转型，加速行业的技 术进步和创新。
保障人类健康
通过除菌过滤技术的不断革新和应用拓展，将为人类健康提供更加 可靠的保障，降低疾病传播的风险。
论谴责。
经验教训与改进建议
经验教训
除菌过滤验证是确保产品无菌的重要手段，企业必须充分认识到细菌截留试验的重要性，严格按照相关标准和规 范进行操作，确保试验结果的准确性和可靠性。
改进建议
企业应加强除菌过滤验证的细菌截留试验的培训和指导，提高操作人员的技能水平；同时，应不断优化试验方案 和改进设备，提高除菌效率和质量，确保产品的安全性和有效性。
根据试验数据，计算过滤器对细 菌的截留效率。
03
实际操作与结果分析
操作步骤
准备试验材料
准备试验所需的除菌过滤器、细菌培 养基、无菌水、试验管等。
02
试验设置
将除菌过滤器安装在试验管上，用无 菌水冲洗过滤器，然后加入一定量的 细菌培养基。
01
03
过滤操作
开启过滤器，使细菌培养基通过过滤 器进行过滤，收集过滤后的液体。
结果分析
分析试验数据，找出影响除菌效果 的因素，为改进过滤器提供依据。
误差分析
01
02
03
04
操作误差
在试验过程中，可能由于操作 不规范或仪器使用不当造成误
差。
环境因素误差
试验环境中的温度、湿度等变 化可能对试验结果产生影响。
测量误差
在测量液体体积、温度等参数 时，可能由于测量工具或方法
除菌过滤验证—细菌截留试验
抑菌/杀菌/非分散溶液
由于直接接种法是理想的 由于测试微生物活性的一些问题，一个成功的 测试计划可能需要改变
挑战液体 挑战条件 或两者兼有
可能需要预处理过滤器 文件给出了定义毒性水平的指南
2. 直接法
B. Diminuta / 挑战微生物
化验滤出液 中的微生物
药品
可存活的 微生物?
除菌级性能的基本解释
除菌过滤是在对产品没有不良影响的前提下从流动的 液体中去除微生物的过程。 ASTMF 838-05 是一种标准的内置TM，可以用于比 较所有灭菌级的膜。 证明能去除一种标准试验细菌(Brevundimonas diminuta) 最低浓度为107 cfu/cm2 这是一个很好的开始，但是还要考虑其他因素
Section 6.2
细菌截留验证需要考虑的方面
应该在产品细菌挑战后调查测试微生物是否在 过滤器的下游重现。 如果调查确认测试微生物穿过了过滤器，并且 过滤器达到了完整性测试要求
那么应重新考虑该过滤器是否适合于这样的过程条 件。
Section 6.2
细菌截留验证需要考虑的方面
成分相同、只有浓度不同的系列产品可以通过 挑战极限浓度和接受中间一组浓度来验证。 如果某个单个产品被认为是最差情况代表，则 应伴有依据和数据。
47 mm 盘
Section 6.16
膜
滤筒
盘测试的原因: 确保过滤装置完整性
过滤器最初的和过程中的完整性通过以下手段 得以充分保证…
证明过滤器与过程相匹配的充分研究 过滤器生产商质量系统审查 经验证的完整性测试
除菌过滤验证—细菌截留试验
Bowman et al., J. Pharm. Sci., 56: 222 (1967) 0.45 μm 过滤器截留数量 >104-106 cfu/cm2 检查过大的孔 “除菌级”的定义
聚集
单分散性的细胞最适用于挑战 用光学显微镜甄选菌株 使用超声波/振动使其散开 通过光学显微镜和存活计数予以确定 使用 0.45 μm过滤器作为过滤器挑战测试中的
去除过滤器的毒杀活动维持全部过程条件验证此步骤确保细菌活性18修改产品过程的两个例子杀菌产品预处理8小时修改过的产品8小时预处理截留测试预处理4小时实际的产品4小时冲洗19细菌截留研究的一般图示接种后产品储存罐无菌储存罐测试过滤器装置细菌截留一般测试结构压力计蠕动泵化验过滤器支架20细菌截留研究的一般图示接种挑战溶液的再循环21研究设计决策树22validationstrategystudydesign23validationstrategystudydesign24validationstrategystudydesign25validationstrategystudydesign26挑战微生物的选择推荐选择brevundimonasdiminuta作为用于除菌级过滤器验证的微生物
用于细菌截留验证试验的三个膜中至少有一个 膜应该在试验前或使用前物理完整性测试数值 达到或接近过滤器生产商的测试要求。
可能无法获得达到或接近过滤器生产商要求 的膜
在这种情况下，应该从一批使用前完整性测试数值 尽量低的膜产品中选取测试膜。
然后根据（验证研究中）使用前物理完整性测试数 值最接近生产商要求的膜来确定一个特定过滤过程 的完整性测试要求
重要参考 – ASTM F 838-05
ASTM 标准 F838-05, “决定液体过滤器过滤膜细菌 截留性能的标准测试方法”, 宾州Conshohocken美国 测试和材料协会 ASTM 委员会 D19(2005)
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细菌截留验证程序和方案形成
应使用标准方法确证膜过滤器的微生物截留能力。
然而，对于某种产品来说，仅证明缺陷假单胞菌在水溶液中被截留，而不是在特定产品中，不足以验证此产品的除菌过滤工艺。
为了确定正确的挑战测试方法，应将测试微生物直接接种在承载流体（产品或替代品）中以证明其生存性。
微生物应以与挑战实验中使用的同等方式培养，以保留其生物形态特征和生理特征。
用于生存性研究的测试暴露时间应该等于或超过实际工艺过滤时间。
当测试微生物在产品中的生存性已经完成测试，就应该形成挑战方法和方案了。
细菌挑战实验的条件应模拟实际生产工艺。
既然细菌挑战实验通常都在实验室里进行，那么方法的规模也应相应调整。
通量应调整到每单位面积的流速，表示为基于滤芯表面积的形式(ml/min)/cm2。
如果过滤过程按压差控制，则挑战实验压差至少等同于最大工艺压差。
如果制订方案过程中遇到关于测试方法可接受性的问题，则建议联系相关管理机构以获取指导。
图1列出了在为特定过滤器和产品/工艺组合选择合适的验证策略时需要考虑的关键步骤。
（1）非杀菌性的工艺和流体
直接在产品中接种测试微生物是测试除菌级过滤器微生物截留能力的首
选方法。
当产品和工艺流体被证明在产品和工艺条件下没有杀菌效力的时候，这样是可行的。
在这些工艺中，应使用足够浓度的挑战微生物在产品中接种，而且要在实际工艺条件下，包括时间、压差、流速和其它关键变量（例如温度），应尽量减少稀释，以避免不必要的产品改变。
（2）抑菌的/杀菌的/非分散的挑战流体
在杀菌性的产品中进行细菌截留测试，使得与验证相关的一些问题更难回答，例如：产品对过滤器有什么影响，产品对其中的生物菌落有什么影响。
在杀菌性产品中或是在不利于微生物活性的条件（例如，温度上升）下进行的细菌截留测试不一定能得到正确的结果。
为了评估产品/工艺对过滤器的潜在影响，可以使用产品和实际的工艺条件，包括流速、压差、温度和时间，对过滤器进行预处理。
这种预处理可在一个闭路系统中将产品循环通过测试过滤器或者单路通过测试过滤器，接着对滤
芯进行细菌挑战。
（具体方法见下文实例分析部分测试方法修改的例子，这些修改被用于适应这种细菌挑战测试。
）
F. 滤出液分析
对全部挑战滤出液的分析对确认除菌级过滤器截留细菌挑战的能力是必
要的。
可以从安装在测试过滤器下游的合适的分析过滤器或膜片上直接通过，或者先收集滤出液在无菌容器中然后再用分析膜片过滤，两种方法均可。
通常，使用0.45微米或除菌级膜片来收集缺陷假单胞菌菌或其它微生物污染挑战细菌。
安装分析过滤器不应影响测试过滤器的预定压差。
对滤出液部分取样的作法不足以验证除菌过滤，因为一小部分细菌可能已经穿过过滤器，存在于未取样和分析的滤出液中。
G. 结果判读
在阳性对照有效的情况下，三支测试过滤器都没有检测到挑战细菌的透过，则达到除菌级过滤器的接受标准。
如果有一支被发现细菌穿过，但没有确认是什么原因引起的，那么在调查和风险评估后，可重新测试（例如，从失败膜所属批次中选三支过滤器）。
如果可以找到导致测试失败的确定原因，那么疑问批次的过滤器应被重新检测。
H. 连续过滤
两个或多个过滤器在一起使用，以达到：
●确保滤出液是无菌的。
●至少一个过滤器通过完整性测试。
●到达最后一级过滤器的细菌浓度小于10 CFU/100ml。
这样的组合中，最后的最接近滤出液的过滤器，称为首要过滤器，另外一个或多个，为冗余过滤器，是对除菌过滤工艺的再次保障。
当怀疑发生细菌穿过除菌级过滤器的情况时，可以使用串联在一起的两个或多个过滤器滤器，实际为两个或者多个过滤器是作为一个除菌过滤单元在使用。
在这样的工艺条件下，所有过滤器均要达到完整性测试接受标准。
这种情况下的两个或多个过滤器的总称为组合过滤器。