植物淀粉含量试剂盒说明书

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α-淀粉酶测定试剂盒(CNPG3底物法)产品技术要求zhongshengbeikong

α-淀粉酶测定试剂盒(CNPG3底物法)产品技术要求zhongshengbeikong

α-淀粉酶测定试剂盒(CNPG3底物法)适用范围:本试剂用于体外定量测定人血清中α-淀粉酶的活性。

1.1规格液体单剂型试剂(R):60mL×2 ;试剂(R):80mL×2。

1.2规格划分说明根据净含量划分规格。

1.3主要组成成分试剂盒由试剂(R)液体组成。

1.3.1 试剂(R)液体主要组分:2-(N-吗啉基)-乙磺酸(MES)50mmol/L2-氯-对硝基苯-α-D-麦芽三糖(CNPG3)1.8 mmol/LNaCl350 mmol/L醋酸钙 6 mmo/L 硫氰酸钾900 mmol/L 叠氮钠0.01% 2.1 外观试剂(R)应为无色或浅黄色透明溶液,无杂质、无絮状物,外包装完整无破损。

2.2净含量液体试剂净含量应不少于标示值。

2.3试剂空白吸光度在波长405nm(400nm~420nm)处(光径1cm),试剂空白吸光度(A)应≤0.350,试剂空白吸光度变化率(△A/min)应≤0.002。

2.4 准确度测定GBW(E)090593,相对偏差应不超过±10%。

2.5 分析灵敏度对应于浓度为 85U/L的淀粉酶所引起的吸光度变化率(△A/min)的绝对值应在0.006~0.040的范围内。

2.6 重复性重复测定血清样本,变异系数(CV)应≤5%。

2.7 批间差测定血清样本,批间差(R)应≤10%。

2.8 线性范围在[5,2000]U/L检测范围内,线性相关系数(r)应≥0.990。

在(50,2000]U/L范围内,线性相对偏差应不超过±10%;在[5,50]U/L范围内,线性绝对偏差应不超过± 5U/L。

2.9 稳定性2.9.1效期稳定性原包装的试剂盒在2℃~8℃避光贮存,有效期为12个月。

试剂有效期满后2个月以内,试剂性能应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.8的要求。

2.9.2开盖稳定性试剂开盖后,在2℃~8℃避光保存,可稳定30天;开盖稳定期满后1天内,试剂性能应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.8的要求。

植物中淀粉含量测定

植物中淀粉含量测定

For personal use only in study and research; not for commercial useFor personal use only in study and research; not for commercial use实验 14 植物组织中淀粉含量的测定Ⅰ蒽酮硫酸法一、原理淀粉是由葡萄糖残基组成的多糖,在酸性条件下加热使其水解成葡萄糖,然后在浓硫酸的作用下,使单糖脱水生成糠醛类化合物,利用蒽酮试剂与糠醛化合物的显色反应,即可进行比色测定。

二、实验材料、试剂与仪器设备(一)实验材料任何植物材料。

(二)试剂•浓硫酸(比重 1.84 )。

• 9.2mol/L HClO 4 。

•蒽酮试剂,同实验 24 。

(三)仪器设备电子天平,容量瓶: 100 mL 4 个、 50 mL 2 个,漏斗,小试管若干支,电炉,刻度吸管 0.5mL 1 支、 2.0 mL 3 支、 5 mL 4 支,分光光度计,记号笔。

三、实验步骤1. 标准曲线制作同实验 24 恩酮法。

2. 样品提取称取 50 ~ 100 mg 粉碎过 100 目筛的烘干样品,置于 15 mL 刻度试管中,加入 6 ~ 7 mL 80 %乙醇,在 80 ℃水浴中提取 30 min ,取出离心( 3000 rpm ) 5 min ,收集上清液。

重复提取两次(各 10 min )同样离心,收集三次上清液合并于烧杯,置于 85 ℃恒温水浴,使乙醇蒸发至 2 ~3 mL ,转移至 50 mL 容量瓶,以蒸馏水定容,供可溶性糖的测定。

向沉淀中加蒸馏水 3 mL ,搅拌均匀,放入沸水浴中糊化 15 min 。

冷却后,加入 2 mL 冷的 9.2 mol/L 高氯酸,不时搅拌,提取 15 min 后加蒸馏水至 10 mL ,混匀,离心 10 min ,上清液倾入 50 mL 容量瓶。

再向沉淀中加入 2 mL 4.6 mol/L 高氯酸,搅拌提取 15 min 后加水至 10 mL ,混匀后离心 10 min ,收集上清于容量瓶。

实验六淀粉含量测定

实验六淀粉含量测定

实验六淀粉含量测定
实验六淀粉含量测定
一、实验目的
本实验旨在通过碘显色法测定样品中的淀粉含量,了解和掌握该方法的基本原理和操作技巧。

二、实验原理
淀粉能与碘发生显色反应,生成稳定的紫蓝色化合物。

因此,通过测定样品溶液显色后吸光度值,可以推算样品中的淀粉含量。

本实验采用碘显色法进行淀粉含量的测定。

三、实验步骤
1.样品处理:称取适量样品,加入适量蒸馏水研磨成匀浆,备用。

2.制作标准曲线:分别吸取0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL的淀粉标准液,
各加入到10mL容量瓶中,再加入1mL碘液,摇匀,显色10分钟,用分光光度计在660nm处测定吸光度值,绘制标准曲线。

3.样品测定:取1mL样品溶液加入到10mL容量瓶中,再加入1mL碘液,摇
匀,显色10分钟,用分光光度计在660nm处测定吸光度值。

4.结果计算:根据测得的吸光度值,在标准曲线上查得相应的淀粉含量,计算
样品中淀粉的含量。

四、实验结果与分析
1.标准曲线的绘制结果如下表所示:
性回归方程为y=0.323x+0.029(R²=0.993)。

结果表明,在所选范围内,淀粉含量与吸光度值呈良好的线性关系。

2.样品测定结果如下表所示:
(绿豆粉等)中的淀粉含量较高,而玉米粉和小麦粉中的淀粉含量相对较低。

这说明不同粮食作物的营养成分组成存在差异,因此在实际应用中需要根据用途选择合适的粮食作物。

同时,本实验方法具有操作简便、快速、准确等特点,可用于实际生产中的质量控制和检测。

直链淀粉含量检测试剂盒说明书 微量法

直链淀粉含量检测试剂盒说明书 微量法

直链淀粉含量检测试剂盒说明书微量法注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

货号:BC4265规格:100T/96S产品简介:直链淀粉是D-葡萄糖基以α-(1,4)糖苷键链接的多糖链,直链淀粉含量影响着食品的食用品质和外观品质,与食品安全息息相关。

直链淀粉和碘形成蓝色络合物,利用乙醇分开样品中的可溶性糖和淀粉,再用碘与其反应得到直链淀粉含量。

试验中所需的仪器和试剂:可见分光光度计/酶标仪、天平、台式离心机、微量玻璃比色皿/96孔板、可调式移液枪、研钵/匀浆器、乙醚、无水乙醇、EP管。

产品内容:试剂一:液体110mL×1瓶,4℃保存;试剂二:乙醚100mL×1瓶,自备;试剂三:液体55mL×1瓶,4℃保存;O=9mL:91mL混匀,现用现配,4℃保存半年。

试剂四:将试剂三:H2试剂五:液体0.5mL×1支,4℃保存;粉剂一:粉剂×1瓶,4℃保存;粉剂二:粉剂×1瓶,4℃保存;试剂六的配制:将粉剂一倒入粉剂二,用蒸馏水定容至10mL,4℃避光保存一个月。

标准品:10mg直链淀粉×1支,4℃避光保存。

临用前加入0.1mL无水乙醇和0.9mL试剂三,混匀后封口膜封口,沸水浴至溶解,即10mg/mL的直链淀粉。

吸取0.1mL加入0.9mL蒸馏水配制为1mg/mL的标准溶液待用。

操作步骤:一、直链淀粉的提取:称取0.005g烘干样本于研钵中研碎,加入1mL试剂一,充分匀浆后转移到EP管中,80℃水浴提取30min,3000g,25℃离心5min,弃上清,留沉淀,加入1mL试剂二(乙醚)振荡5min,3000g,25℃离心5min,弃上清,留沉淀,加入5mL试剂四充分溶解,90℃水浴10min,冷却后3000g,25℃离心5min,取上清待测。

二、测定步骤:1、分光光度计/酶标仪预热30min以上,调节双波长至550nm和485nm,蒸馏水调零。

淀粉检验操作规程

淀粉检验操作规程

淀粉检验操作规程淀粉是广泛存在于植物中的一种碳水化合物,是植物储存能量的主要形式。

淀粉的存在对人类起着重要的作用,因此淀粉的检验也显得十分重要。

下面是淀粉检验的操作规程。

1.实验材料与试剂准备:(1)实验材料:需要检验的淀粉样品(2)试剂:1%碘酒溶液、1%淀粉酶溶液、蒸馏水2.实验仪器准备:显微镜、试管架、试管夹、移液管、显微镜玻片、滴管、可调光显微镜等。

3.操作步骤:(1)取一小段透明的淀粉样品,放置在显微镜盒中。

(2)在显微镜盒中加入适量的蒸馏水,用移液管充分搅拌溶解。

(3)加入一滴1%碘酒溶液,再次充分搅拌。

(4)然后观察淀粉颗粒的表现情况,通过在显微镜下进行观察淀粉颗粒的颜色和形态来判断样品中是否含有淀粉。

(5)如果样品中含有淀粉,那么淀粉颗粒会呈现出蓝色、黑色或紫色。

而纯净的蒸馏水不会变色。

(6)如果初步检验结果显示样品中含有淀粉,可以进一步进行淀粉的酶解试验。

(7)取一部分检验样品,加入适量的1%淀粉酶溶液,同时在控制组中加入相同体积的蒸馏水作为对照。

(8)将试管放置在37℃恒温箱中,保持恒温1-2小时。

(9)取出试管,加入适量的碘酒溶液进行观察。

(10)观察结果显示,如果样品中的淀粉被完全酶解,那么样品会变成无色,而对照组中的样品仍然呈现淀粉的蓝色。

4.结果分析与结论:(1)如果观察结果显示样品中的颗粒呈现蓝色、黑色或紫色,可以判断样品中含有淀粉。

(2)如果样品经过酶解试验后呈现无色,说明淀粉已经被酶解,不存在于样品中。

(3)结合实验结果和观察现象,可以得出对样品中是否含有淀粉的结论。

通过以上的操作规程,可以较准确地对淀粉样品进行检验,从而判断样品中是否含有淀粉。

这对于食品行业、农业、医药等领域的品质检验具有重要意义。

植物 β-淀粉酶(β-amylase,β-AL)试剂盒说明书

植物 β-淀粉酶(β-amylase,β-AL)试剂盒说明书

货号:QS3402 规格:50管/24样植物β-淀粉酶(β-amylase,β-AL)试剂盒说明书可见分光光度法正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定测定意义:淀粉酶负责水解淀粉,主要包括α-淀粉酶和β-淀粉酶。

β-淀粉酶(EC 3.2.1.2)可随机地作用于淀粉中的α-1,4-糖苷键,生成葡萄糖、麦芽糖、麦芽三糖、糊精等还原糖。

测定原理:还原糖还原3,5-二硝基水杨酸生成棕红色物质。

α-淀粉酶不耐酸,β-淀粉酶不耐热。

根据上述特性,钝化其中之一,就可测出另一种淀粉酶的活力。

自备实验用品和仪器:可见分光光度计、恒温水浴锅、离心机、可调式移液器、玻璃比色皿、研钵和蒸馏水。

试剂的组成和配制:试剂一:50mL×1瓶,常温保存,若有黄色晶体析出,需90℃加热溶解后再用;试剂二:40mL×1瓶,4℃保存,若有沉淀析出,需70℃加热后再用。

粗酶液提取:组织:称取0.1~0.2g样本(建议称取约0.1g样本),加入1mL蒸馏水,研磨匀浆;将匀浆倒入离心管中,提取液在室温下放置提取15min,每5min振荡1次,使其充分提取;3000g,25℃离心10min,取上清液加蒸馏水定容至10 mL,摇匀,即淀粉酶原液。

吸取上述淀粉酶原液1mL,加入4mL蒸馏水,摇匀,即为淀粉酶稀释液,用于(α+β)淀粉酶总活力的测定。

血清(浆)等液体样本:(1)直接检测α-淀粉酶。

(2)吸取淀粉酶原液1mL,加入4mL 蒸馏水,摇匀,即为淀粉酶稀释液,用于(α+β)淀粉酶总活力的测定。

测定步骤:1、分光光度计预热30min以上,调节波长到540 nm,蒸馏水调零。

2、试剂一和试剂二40℃预热10min。

、A3和A4。

第1页,共2页酶活性计算:1、标准条件下测定回归曲线为y=3.7215x -0.1778; x为标准品浓度(mg/mL),y为吸光值。

2、α-淀粉酶活性(1)按照样本质量计算单位定义:每g组织每分钟催化产生1mg还原糖定义为1个酶活力单位。

MEGAZYME直链淀粉试剂盒说明书

MEGAZYME直链淀粉试剂盒说明书

前言:谷类淀粉的许多特性决定其最终用途,这些取决于直链淀粉/支链淀粉的比率。

这些特性包括糊化和凝胶化,溶解度,抗性淀粉的形成以及整颗大米的烹饪和构造特性。

因此,淀粉中直链淀粉含量的测定是淀粉加工的一个重要的质量参数。

最常用的测定谷物淀粉中直链淀粉含量的方法是利用电势,电流测定或直链淀粉的碘结合能力比色测定直链淀粉-碘色合配合物。

然而,这些方法具有不确定性。

支链淀粉-碘复合物也可以形成,这样降低了利用非比色法测定的游离碘离子的浓度,并且用比色法测量时,该复合物可能和直链淀粉-碘复合物吸收相同波长的光。

这种复合物致使直链淀粉的测定含量超过实际含量,需要进行校正。

Gibson等详细列举了使用这些方法所遇到的许多其他问题。

支链淀粉结合ConA的特殊复合物为淀粉中直链淀粉的测定提供了一种替代方法,而且不存在不确定性问题。

在指定pH值,温度和离子强度的条件下,ConA特异性结合分支多糖并形成沉淀,这种结合以多个非还原性末端基团上的α-D-吡喃葡萄糖基或α-D-吡喃甘露糖基单位为基础。

因此,ConA可以有效结合淀粉中的支链淀粉成分,但是不能结合线性为主的直链淀粉成分。

此方法是Yun和Matheson改进的ConA方法。

分析之前用乙醇预处理去除脂质。

原理:淀粉样品通过加热完全地溶解在二甲基亚砜(DMSO)里。

用乙醇沉淀淀粉去除其中的脂质,回收沉淀的淀粉。

用醋酸/盐溶液溶解沉淀的样品,加入ConA,特异性沉淀支链淀粉,离心去除沉淀。

单位体积上清液中的直链淀粉用酶水解为D-葡萄糖,然后用葡萄糖氧化酶/过氧化物酶试剂进行测定。

另外一份单位体积醋酸/盐溶液中的总淀粉同样用酶水解为D-葡萄糖,然后加入葡萄糖氧化酶/过氧化物酶,用比色法测定。

根据ConA沉淀样品的上清液和与总淀粉样品中的GOPOD在510 nm处的吸光光度值之比判断直链淀粉在总淀粉中的含量。

该方法适用于所有的纯淀粉和谷物粉。

精确性样品如为纯淀粉,相对标准偏差为<5%。

直链淀粉含量检测试剂盒

直链淀粉含量检测试剂盒

直链淀粉含量检测试剂盒说明书(货号:NM-W-0214 微量法100T/96S)一、产品简介:直链淀粉是D-葡萄糖基通过α-(1,4)糖苷键以直链状结构连接而成的大分子物质。

直链淀粉的含量是影响食品感官品质和加工特性的一个重要因素,并且与淀粉的特性密切相关,其含量测定对食品营养价值评价、粮食的合理加工,淀粉的合理利用和农业育种等具有重要意义。

直链淀粉与碘能够形成蓝色络合物,通过测定605 nm 和435 nm 处吸光值的变化即可定量检测直链淀粉的含量。

二、试剂盒组分与配制:三、需自备的仪器和用品:酶标仪、96孔板、台式离心机、恒温水浴锅/培养箱、研钵/匀浆器、天平、60目筛、可调式移液器、乙醚、蒸馏水。

四、操作步骤:建议正式实验前选取2个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验样本和试剂浪费!1、预实验样本制备℃ 将样本烘干后充分研磨,准确称取0.01g样本至2mL的EP管中,加入1mL试剂一,充分匀浆,80℃水浴提取30min,冷却至室温,4000g,25℃离心5min,弃上清,留沉淀(尽量保留沉淀)。

℃ 向沉淀中加入1mL试剂二,混匀并振荡5min,4000g,25℃离心5min,弃上清,留沉淀(尽量保留沉淀)。

℃ 向上步沉淀中,加入1mL试剂三,混匀(使样本全部浸在液体中),封口,90℃水浴10min(密封以防止水分散失)。

℃ 冷却至室温,将EP管中全部液体转移至10mL EP管中(用1mL蒸馏水冲洗EP管,全部转至10mL EP管中,重复三次),再加蒸馏水准确定容至10mL,混匀,4000g,25℃离心5min,取上清液作为待测样本。

2、标准溶液的配制:把10mg/mL的标准品母液用试剂四稀释成2、1、0.5、0.25、0.125、3、预实验上机操作:℃ 酶标仪预热30min以上,调节双波长至605 nm 和435 nm。

℃ 操作表:4、正式实验:℃ 若预实验测定吸光值超出标准吸光值线性范围:高于最高值建议将待测样本用试剂四适当稀释后再进行测定,低于最低值建议适当增加样本质量W后再进行测定,并将改变后的D和W代入公式计算;℃ 确定好最适实验条件后,正式实验样本制备同预实验样本制备;℃ 正式实验按照预实验上机操作步骤进行(标准管和空白管预实验已做,正式实验可选做)。

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货号:MS3400 规格:100管/96样
植物淀粉含量试剂盒说明书
微量法
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
淀粉是植物中糖的主要储存形式,其含量测定对于评价食品营养价值和调查植物体内糖代谢都有重要意义。

测定原理:
利用80%乙醇可以把样品中可溶性糖与淀粉分开,进一步采用酸水解法分解淀粉为葡萄糖,采用蒽酮比色法测定葡萄糖含量,即可计算淀粉含量。

自备实验用品及仪器:
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰、浓硫酸(不允许快递)和蒸馏水。

试剂的组成和配制:
试剂一:液体100mL×1瓶,4℃保存;
试剂二:液体105mL×1瓶,4℃保存;
试剂三:粉剂×1瓶,4℃避光保存;
淀粉提取:
1、称取0.1~0.2g样本(建议称取约0.1g样本)于研钵中研碎,加入1mL试剂一,充分匀浆
后转移到EP管中,80℃水浴提取30min,3000g,25℃离心5min,弃上清,留沉淀。

2、沉淀中加入0.5mL蒸馏水,放入95℃水浴中糊化15min(盖紧,以防止水分散失)。

3、冷却后,加入0.35mL试剂二,25℃常温提取15min,振荡3-5次。

4、加入0.85mL蒸馏水,混匀,3000g,25℃离心10min,取上清液待测。

测定步骤:
1、分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至620nm,蒸馏水调零。

2、调节水浴锅至95度。

3、工作液的配制:临用前在试剂三中加入3.75mL蒸馏水后,缓慢加入21.25mL浓硫酸,不断搅拌,充分溶解,待用;用不完的试剂4℃保存一周;
4、样本测定:取50μL样本和250μL工作液至EP管中,95度水浴10 min(盖紧,防止水分散失),自然冷却至室温,取200uL至微量石英比色皿或96孔板中,在620 nm 波长下记录测定吸光度值A。

淀粉含量计算:
a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准条件下测定的回归方程为y = 5.872x - 0.0295;x为标准品浓度(mg/mL),y为吸光值。

1、按照蛋白浓度计算
淀粉含量(mg/mg prot)=[(A+0.0295)×V1]÷5.872 ÷(V1×Cpr)=0.17×(A+0.0295) ÷Cpr 2、按样本鲜重计算
淀粉含量(mg/g 鲜重)= [(A+0.0295)×V1] ÷5.872÷(W×V1÷V2) =0.289×(A+0.0295) ÷W
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V1:加入反应体系中样本体积,0.05mL;V2:加入提取液体积,1.7 mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g
b.用96孔板测定的计算公式如下
标准条件下测定的回归方程为y = 2.936x - 0.0295;x为标准品浓度(mg/mL),y为吸光值。

1、按照蛋白浓度计算
淀粉含量(mg/mg prot)=[(A+0.0295)×V1]÷2.936 ÷(V1×Cpr)=0.34×(A+0.0295) ÷Cpr 2、按样本鲜重计算
淀粉含量(mg/g 鲜重)=[(A+0.0295)×V1]÷2.936÷(W×V1÷V2) =0.578×(A+0.0295) ÷W
V1:加入反应体系中样本体积,0.05mL;V2:加入提取液体积,1.7 mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g
注意:
由于工作液具有强腐蚀性,请谨慎操作。

若吸光值大于1,请将样本用提取液稀释后再测定,计算公式中乘以相应的稀释倍数。

提取液的配置:0.35mL试剂二+1.35mL水。

用多少按照此比例配多少。

最低检测限为10μg/g鲜重或100ng/mgprot。

第2页,共2页。

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