高迁移率族蛋白1刺激人肾系膜细胞增殖并分泌纤维化相关因子
高迁移率族蛋白B1在肾间质纤维化中作用
［ Ａｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ］Ｏｂ ｊ ｅ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ ： Ｔ ｏ ｉ ｎ ｖ ｅ ｓ ｔ ｉ ｇ ａ ｔ ｅ ｔ ｈ ｅ ｅ ｘ ｐ ｒ ｅ ｓ ｓ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｈ ｉ ｇ ｈ ｍ ｏ ｂ ｉ ｌ ｉ ｔ ｙ ｇ ｒ ｏ ｕ ｐ ｐ ｒ ｏ ｔ ｅ ｉ ｎ Ｂ １（ Ｈ ＭＧ Ｂ １ ）ｉ ｎ ｒ ａ ｔ ｍ ｏ ｄ ｅ ｌ ｏ ｆ ｒ ｅ ｎ ａ ｌ ｔ ｕ ｂ ｕ ｌ ｅ ｉ ｎ ｔ ｅ ｒ ｓ ｔ ｉ ｔ ｉ ａ ｌ ｉ ｆ ｂ ｒ ｏ ｓ ｉ ｓ （ Ｒ Ｉ Ｆ ） ， ａ ｎ ｄ ｔ ｏ ｏ ｂ ｓ ｅ ｒ ｖ ｅ ｔ ｈ ｅ ｃ ｕ ｒ ａ ｔ ｉ ｖ ｅ ｅ ｆ ｆ ｅ ｃ ｔ ｏ ｆ Ｓ ｈ ｅ ｎ ｙ ａ ｎ ｓ ｈ ｕ（ ａ
（ ｋ ｇ・ ｄ ） ］ ， 采 用单侧输尿管结扎术 （ ｕ ｕ ｏ ） 制作 肾小 管间 质纤维 化大 鼠模 型 ， 术 后第 ７天及第 １ ４天分别 处死 各
组 中 ６只大 鼠。检测各组 大鼠肾小管间质损 害程 度及组 织 中 Ｈ ＭＧ Ｂ １ 、 转 化生 长因子． ８ １ （ Ｔ Ｇ Ｆ ． １ ３ １ ） 的表达 。结 果： 模型组 ＨＭＧ Ｂ １ 、 Ｔ Ｇ Ｆ — Ｂ １的表 达及 肾小管 间质 损伤指 数 明显高 于同期假 手术组 （ Ｐ＜ ０ ． ０ ５ ） ， 肾炎舒 治疗组 ＨＭＧ Ｂ １ 、 Ｔ Ｇ Ｆ 一 ３ １ １的表达及 肾小管间质损伤指数 明显 低于 同期模型组 （ Ｐ＜ ０ ． ０ ５ ） 。结论 ：Ｈ ＭＧ Ｂ １ 可 能协 同 Ｔ Ｇ Ｆ ． Ｂ １ 促 进肾小管 间质纤维 化 ， 肾炎舒胶囊 可抑制 肾组织 中 Ｈ ＭＧ Ｂ １ 及Ｔ Ｇ Ｆ － ３ １ １的表达 ， 对 肾间质纤维化有一定 的防 治作用 。
细胞自噬在器官纤维化病变中的作用
细胞自噬在器官纤维化病变中的作用毛 骏１，３ 李仁礼１，３ 李?华２，３ 张 青２，３ 李 海２，３ 向晓辉２，３，△（１武警后勤学院，天津３００３０９；２天津市西青医院消化内科，天津３００３８０；３天津市肝脏胰腺纤维化与分子诊疗重点实验室，天津３００１６２）摘要 自噬是细胞中一种进化上保守的生物学过程，通过降解受损的细胞器和多余的蛋白质使细胞在应激损伤时能够维持正常的平衡。
它包括一系列连续的过程，如吞噬泡的形成与延伸、自噬体的成熟、自噬体与溶酶体的融合等。
目前，对于调节自噬过程不同阶段的分子机制以及在疾病发展中作用的认识正逐渐加强。
本文综述了近几年来细胞自噬在多种器官纤维化病变中的研究进展，着重整理归纳与疾病相关的发生机制，以期为纤维化疾病的治疗提供新的理论指导和临床思路。
关键词 自噬；器官纤维化；分子机制中图分类号 Ｒ５９３ＣｅｌｌｕｌａｒＡｕｔｏｐｈａｇｙｉｎＯｒｇａｎＦｉｂｒｏｓｉｓ ＭＡＯＪｕｎ１，３，ＬＩＲｅｎ Ｌｉ１，３，ＬＩＭａｎ Ｈｕａ２，３，ＺＨＡＮＧＱｉｎｇ２，３，ＬＩＨａｉ２，３，ＸＩＡＮＧＸｉａｏ Ｈｕｉ２，３，△（１ＬｏｇｉｓｔｉｃｓＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＰｅｏｐｌｅ＇ｓＡｒｍｅｄＰｏｌｉｃｅＦｏｒｃｅｓ，Ｔｉａｎｊｉｎ３００３０９，Ｃｈｉ ｎａ；２ＤｉｇｅｓｔｉｖｅＤｅｐａｒｔｍｅｎｔ，ＴｉａｎｊｉｎＸｉｑｉｎｇＨｏｓｐｉｔａｌ，Ｔｉａｎｊｉｎ３００３８０，Ｃｈｉｎａ；３ＴｉａｎｊｉｎＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＨｅｐａｔｏ ｐａｎｃｒｅａｔｉｃＦｉｂｒｏｓｉｓａｎｄＭｏｌｅｃｕｌａｒＤｉａｇｎｏｓｉｓ＆Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ，Ｔｉａｎｊｉｎ，３００１６２，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ Ａｕｔｏｐｈａｇｙｉｓａｎｅｖｏｌｕｔｉｏｎａｒｉｌｙｃｏｎｓｅｒｖａｔｉｖｅｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｐｒｏｃｅｓｓｉｎｃｅｌｌｓ．Ｉｔｃａｎｍａｉｎｔａｉｎａｎｏｒ ｍａｌｂａｌａｎｃｅｂｙｄｅｇｒａｄｉｎｇｄａｍａｇｅｄｏｒｇａｎｅｌｌｅｓａｎｄｒｅｄｕｎｄａｎｔｐｒｏｔｅｉｎｓｗｉｔｈｓｔｒｅｓｓｉｎｊｕｒｙ．Ｉｔｉｎｃｌｕｄｅｓａｓｅ ｒｉｅｓｏｆｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓｐｒｏｃｅｓｓｅｓ，ｓｕｃｈａｓｔｈｅｆｏｒｍａｔｉｏｎａｎｄｅｌｏｎｇａｔｉｏｎｏｆｐｈａｇｏｐｈｏｒｅ，ｔｈｅｍａｔｕｒａｔｉｏｎｏｆａｕｔｏ ｐｈａｇｏｓｏｍｅ，ｔｈｅｆｕｓｉｏｎｏｆａｕｔｏｐｈａｇｏｓｏｍｅａｎｄｌｙｓｏｓｏｍｅ．Ａｔｐｒｅｓｅｎｔ，ｔｈｅｕｎｄｅｒｓｔａｎｄｉｎｇｏｆｔｈｅｍｏｌｅｃｕｌａｒｍｅｃｈａｎｉｓｍｒｅｇｕｌａｔｉｎｇｄｉｆｆｅｒｅｎｔｓｔａｇｅｓｏｆａｕｔｏｐｈａｇｙａｎｄｉｔｓｒｏｌｅｉｎｔｈｅｐｒｏｃｅｓｓｏｆｄｉｓｅａｓｅｓｉｓｇｒａｄｕａｌｌｙｓｔｒｅｎｇｔｈｅｎｅｄ．Ｉｎｔｈｉｓｒｅｖｉｅｗ，ｔｈｅｒｅｃｅｎｔｒｅｓｅａｒｃｈｐｒｏｇｒｅｓｓｏｆａｕｔｏｐｈａｇｙｉｎｏｒｇａｎｆｉｂｒｏｓｉｓａｎｄｔｈｅｐａｔｈｏ ｇｅｎｅｓｉｓｒｅｌａｔｅｄｔｏｔｈｅｄｉｓｅａｓｅｓｉｓｓｕｍｍａｒｉｚｅｄｉｎｏｒｄｅｒｔｏｐｒｏｖｉｄｅｎｅｗｔｈｅｏｒｅｔｉｃａｌｇｕｉｄａｎｃｅａｎｄｃｌｉｎｉｃａｌｉｄｅ ａｆｏｒｔｈｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆｏｒｇａｎｆｉｂｒｏｓｉｓ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ ａｕｔｏｐｈａｇｙ；ｏｒｇａｎｆｉｂｒｏｓｉｓ；ｍｏｌｅｃｕｌａｒｍｅｃｈａｎｉｓｍ 纤维化是指组织中细胞外基质（ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｍａｔｒｉｘ，ＥＣＭ）发生过度沉积，细胞再生能力不能满足损伤修复的动态病理过程，几乎可以发生在任何实体器官或组织中，终末期可导致肝、肺、肾等重要器官的衰竭［１］。
高迁移率蛋白1相关信号通路在肾脏疾病中的作用
高迁移率蛋白1相关信号通路在肾脏疾病中的作用黄仁发;梁群卿;黄国东;向少伟;龙韵;赖虹伊;高玉;杜登攀(综述);吴金玉(审校)【摘要】High mobility group box-1 protein(HGMB1) is a member of high mobility group box-1 pro-tein family that plays comprehensive physical roles such as genetic recombination in nucleus ,chromatin struc-ture stability,gene transcription regulation,cell repair,differentiation,which is the key of the cell and organ-ism survival.HGMB1-associated pathway, as late inflammatory mediators, plays an important role in the kideny diseases including ischemia-reperfusion injury,acute kidney injury,chronic kidney disease,and lupus nephritis.%高迁移率蛋白1（HMGB1）是高迁移率蛋白家族成员之一，其生理作用广泛，参与细胞核内DNA重组、染色质结构稳定、基因转录调控、细胞修复、分化等生命活动，是细胞及生物体存活的关键。
HMGB1相关信号通路作为晚期炎性介质信号，参与了缺血／再灌注损伤、急性肾损伤、慢性肾脏病、狼疮性肾炎等肾脏病。
【期刊名称】《医学综述》【年(卷),期】2016(022)018【总页数】5页(P3545-3549)【关键词】肾脏疾病;高迁移率蛋白1;晚期炎症反应【作者】黄仁发;梁群卿;黄国东;向少伟;龙韵;赖虹伊;高玉;杜登攀(综述);吴金玉(审校)【作者单位】广西中医药大学附属瑞康医院肾内科，南宁530011;广西中医药大学附属瑞康医院健康体检中心，南宁530011;广西中医药大学附属瑞康医院肾内科，南宁530011;广西中医药大学附属瑞康医院肾内科，南宁530011;广西中医药大学附属瑞康医院肾内科，南宁530011;广西中医药大学，南宁530299;广西中医药大学，南宁530299;广西中医药大学，南宁530299;广西中医药大学第一附属医院肾内科，南宁 530023【正文语种】中文【中图分类】R34;R692高迁移率蛋白1 (high mobility group box protein-1,HMGB1)是高迁移率蛋白家族成员之一，进化上高度保守。
晚期炎症介质高迁移率族蛋白1与重症急性胰腺炎
晚期炎症介质高迁移率族蛋白1与重症急性胰腺炎陈畅;张文俊;李兆申【摘要】重症急性胰腺炎（SAP）死亡率高，预后差。
SAP的发生与大量细胞因子级联反应引起的全身炎症反应综合征（SIRS）密切相关。
SIRS是造成多器官功能不全综合征（MODS）的重要原因。
近10余年临床研究显示，早期释放的炎症因子如TNF—α、IL-1等均在模型建立后迅速升高至峰值，并迅速下降，而此时炎症反应仍在继续，并且临床应用TNF—α、IL-1受体拮抗剂并未取得显著效果，提示可能存在晚期炎症介质参与病理反应。
高迁移率族蛋白1（highmobility group box 1，HMGB1）是一类广泛存在于真核细胞内的非组核蛋白，近年来有关HMGB1的报道逐年增加。
本文就此做一简要综述。
【期刊名称】《中华胰腺病杂志》【年(卷),期】2007(007)001【总页数】3页(P59-61)【关键词】高迁移率族蛋白1;重症急性胰腺炎;晚期炎症介质;全身炎症反应综合征;IL-1受体拮抗剂;器官功能不全综合征;HMGB1;级联反应【作者】陈畅;张文俊;李兆申【作者单位】443000,宜昌,湖北省宜昌市第一人民医院消化内科;上海第二军医大学长海医院消化内科;上海第二军医大学长海医院消化内科【正文语种】中文【中图分类】R5重症急性胰腺炎(SAP)死亡率高，预后差。
SAP的发生与大量细胞因子级联反应引起的全身炎症反应综合征(SIRS)密切相关。
SIRS是造成多器官功能不全综合征(MODS)的重要原因。
近10余年临床研究显示，早期释放的炎症因子如TNF-α、IL-1等均在模型建立后迅速升高至峰值，并迅速下降，而此时炎症反应仍在继续，并且临床应用TNF-α、IL-1受体拮抗剂并未取得显著效果，提示可能存在晚期炎症介质参与病理反应。
高迁移率族蛋白 1(high-mobility group box 1, HMGB1)是一类广泛存在于真核细胞内的非组核蛋白[1]，近年来有关HMGB1的报道逐年增加。
高迁移率族蛋白1蛋白作用
高迁移率族蛋白1蛋白作用引言高迁移率族蛋白1（High Mobility Group protein 1，HMG1）是一种高度保守的核蛋白，广泛存在于真核生物中。
HMG1蛋白在细胞核内发挥重要的功能，参与调控基因转录、DNA修复和染色体结构的维持等多方面的生物学过程。
本文将深入探讨HMG1蛋白在细胞功能调控中的作用机制。
HMG1蛋白的结构特点HMG1蛋白是一种非组蛋白，具有两个DNA结合域（A和B盒）和一个非特异性的C-末端酸性尾巴。
其DNA结合域能够与非B-DNA结构（如非规范的DNA弯曲、DNA缺口等）结合，并介导HMG1蛋白与DNA之间的相互作用。
C-末端酸性尾巴则参与了HMG1蛋白与其他蛋白质的相互作用。
HMG1蛋白的功能和调控机制HMG1蛋白在细胞核内具有多种功能，并通过不同的调控机制参与到生物学过程中。
以下是HMG1蛋白的主要功能和调控机制的详细介绍：1. 调控基因转录HMG1蛋白能够结合到DNA的特定区域，通过与转录因子和RNA聚合酶的相互作用，对基因的转录进行调控。
它可以作为转录激活子结合到启动子区域，促进基因的转录。
同时，HMG1蛋白还能够结合到转录抑制子，在一定条件下阻止基因的转录。
2. 参与DNA修复HMG1蛋白在DNA单链断裂修复和双链断裂修复中发挥重要的作用。
它可以结合到DNA缺口或非规范的DNA结构，通过与其他DNA修复相关蛋白的相互作用，促进DNA损伤的修复过程。
研究表明，HMG1蛋白在DNA修复中的缺失或功能异常会导致细胞对DNA损伤的敏感性增加和基因组不稳定性。
3. 维持染色体结构HMG1蛋白参与细胞有丝分裂和减数分裂过程中的染色体结构的维持。
它可以结合到染色体的特定区域，通过与核骨架蛋白和其他结构蛋白的相互作用，维持染色体的形态和稳定性。
此外，HMG1蛋白还能够调节染色体的高级结构，影响染色体上基因的表达。
HMG1蛋白与疾病的关系HMG1蛋白的功能异常与多种疾病的发生和发展密切相关。
高迁移率族蛋白1在炎症和心血管疾病中的作用
高迁移率族蛋白1在炎症和心血管疾病中的作用虞莹;姜红;葛均波【期刊名称】《中国分子心脏病学杂志》【年(卷),期】2010()4【摘要】高迁移率族蛋白(HMGB1)广泛存在于体内各种细胞中,作为DNA结合蛋白调控细胞的基因转录。
在组织损伤或免疫细胞受到病原体刺激后HMGB1被分泌至细胞外,发挥促炎症因子和化学趋化因子的作用,诱导不同炎症反应的发生,如:脓毒血症及多器官功能障碍综合征(MODS)、自身免疫疾病等,并可能参与了心力衰竭的发生及防止血栓生成。
而随着对它的深入研究,发现HMGB1对组织修复、血管形成可能具有重要作用。
鉴于HMGB1在胞外兼具促炎症反应和促组织修复的双向作用,其越来越受到关注。
本文结合HMGB1诱导相关疾病发生的作用机制,主要就其在炎症及缺血性心脏病后组织修复和心力衰竭中的作用作一综述。
【总页数】4页(P245-248)【关键词】HMGB1;炎症反应;促炎症因子;缺血性心脏病;心力衰竭;组织修复【作者】虞莹;姜红;葛均波【作者单位】复旦大学附属中山医院上海心血管疾病研究所【正文语种】中文【中图分类】R392.1【相关文献】1.高迁移率族蛋白1及其炎症信号通路在大鼠扩张型心肌病中的表达及意义 [J], 沈丽娟;陆曙;周永华;邢清敏;李岚;周春刚2.高迁移率族蛋白在心血管系统疾病中的作用 [J], 刘敏;杨俊3.高迁移率族蛋白在高钙尿相关炎症反应中的作用研究进展 [J], 赵雨桐4.高迁移率族蛋白B1在心脏炎症反应性疾病中的研究进展 [J], 陈丰; 苏强; 朱继金5.高迁移率族蛋白B1参与神经炎症反应及其抑制剂在神经精神疾病中的应用 [J], 张姗姗;王月华;杜冠华因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
高迁移率族蛋白1和Treg细胞与类风湿关节炎相关性的研究进展
高迁移率族蛋白1和Treg细胞与类风湿关节炎相关性的研究进展作者：王贵黄晶徐慧慧郭明慧吕爽赵宏艳肖诚来源：《风湿病与关节炎》2016年第07期【摘要】类风湿关节炎的发展过程与免疫细胞及炎症介质的相互作用有密切联系。
高迁移率族蛋白1（HMGB1）是一种新发现的晚期炎性介质，具有促进类风湿关节炎滑膜炎症反应的表现。
调节性T细胞（Treg）负向调节免疫应答，抑制细胞免疫及炎症反应。
类风湿关节炎患者Treg细胞数量减少且输注Treg细胞后症状得到改善，提示Treg细胞在类风湿关节炎病变中发挥作用。
晚期糖基化终产物受体（RAGE）是第一个被证实的HMGB1受体，Toll样受体（TLRS）是诱导机体炎症反应重要的模式识别受体（PRRs），HMGB1是其家族中TLR2、TLR4的内源性配体。
Treg细胞表达TLR2、TLR4和RAGE受体，HMGB1作为这些受体的配体可作用于Treg，故表明HMGB1和Treg细胞与类风湿关节炎疾病发展有密切联系。
【关键词】关节炎，类风湿；高迁移率族蛋白1；Treg细胞；RAGE受体；综述类风湿关节炎（rheumatoid arthritis，RA）是一种以关节、滑膜病变为主的系统性炎性自身免疫性疾病，其主要病理改变为慢性进行性关节滑膜炎、骨和关节软骨的破坏。
其发病机制尚不明确，已发现炎症因子及自身免疫反应介导的免疫功能紊乱在RA的发病中起重要作用。
抗原呈递细胞对自身抗原的异常加工、处理及呈递，使机体免疫细胞数量功能改变，如自身反应性T细胞大量激活，免疫球蛋白的产生，致炎细胞因子等炎症介质增多，机体对自身正常组织产生免疫反应，引起炎细胞浸润、滑膜增生、血管翳形成、骨及软骨破坏，进而导致关节畸形功能丧失[1]。
高迁移率族蛋白1（HMGB1）是一种晚期炎性介质和致炎细胞因子，RAGE、TLR2、TLR4是其3种主要的受体，结合后可促进炎症因子释放延长、增强炎症反应，并介导细胞免疫和体液免疫[2]。
高迁移率族蛋白B1对人脐静脉内皮细胞增殖及迁移能力的影响
探讨高迁移率族蛋 白 Ｂ １ （ Ｈ ＭＧ Ｂ １ ） 对人 脐静脉 内皮细胞 （ Ｈ Ｕ Ｖ Ｅ Ｃ ） 增 殖和迁移能力 的影 【 摘要 】 目的
响。方法
通过稳定转染 的方法将 ｐ Ｒ Ｎ Ａ — ｕ ６ ． １ ／ Ｎ ｅ ｏ 一对照和 ｐ Ｒ Ｎ Ａ — ｕ ６ ． １ ／ Ｎ ｅ ｏ — Ｈ ＭＧ Ｂ １ 短发夹 Ｒ Ｎ Ａ （ ｓ ｈ Ｒ Ｎ Ａ） 质
Ｃ ｏ ｒ ｒ ｅ ｓ ｐ ｏ ｎ ｄ ｉ ｎ ｇ ａ ｕ ｔ ｈ ｏ ｒ ：朋 Ｘｉ ａ ｏ － ｃ ｈ ｕ ｎ．Ｅｍａ ｉ ｌ ：ｘ ｃ ｍａ ２ ９ ７ ２ ＠ｓ ｉ ｎ ｒ ａ ｃ ｏ ｍ
【 Ａｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ 】 Ｏ ｂ ｊ ｅ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ Ｔ ｏ ｉ ｎ ｖ ｅ ｓ ｔ ｉ ｇ ａ ｔ ｅ ｔ ｈ ｅ ｅ ｆ ｆ ｅ ｃ ｔ ｏ ｆ ｄ ｏ ｗ ｎ － ｒ ｅ ｇ ｕ ｌ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｈ ｉ ｇ ｈ ｍｏ ｂ ｉ ｌ ｉ ｔ ｙ ｇ ｒ ｏ ｕ ｐ ｂ 似一 １（ ＨＭＧ Ｂ１ ）
ｏ ｆＣ ｒ ｉ ｔ ｉ ｃ ａ ｌ Ｃ ａ ｒ ｅ Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ｉ ｎ ｅ ， ｔ ｈ ｅ Ｆ ｉ ｒ ｓ ｔ Ｈｏ ｓ ｐ ｉ ｔ ａ ｌ ｏ ｆＣ ｈ ｉ ｎ ａＭｅ ｄ ｉ ｃ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ ， Ｓ ｈ ｅ ｎ ｙ ｕｇ ａ １ １ ０ ０ ０ １ ， Ｌ ｉ ａ ｏ ｎ ｉ ｎ ｇ ． Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ
中华危重病急救医学 ２ ０ １ ３ 年ｌ ２ 月第 ２ ５ 卷第 １ ２ 期 Ｃ ｈ ｉ ｎ Ｃ ｒ ｉ ｔ Ｃ ａ ｒ ｅ Ｍ ｅ ｄ ， Ｄ ｅ ｃ ｅ ｍ ｂ ｅ ｒ ２ ０ １ ３ ， Ｖ ｏ １ ． ２ ５ ， Ｎ ｏ ． １ ２
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高迁移率族蛋白1刺激人肾系膜细胞增殖并分泌纤维化相关因子摘要】目的：探讨高迁移率族蛋白1（high mobility group prptein,HMGB1)在促使人肾系膜细胞(human renal mesangial cell, HRMCs)增殖及分泌纤维化相关因子中的作用。
方法：用不同浓度梯度的重组HMGB1刺激体外培养的人肾系膜细胞，以CCK-8测定人人肾系膜细胞增殖情况，以ELISA方法检测培养上清液中纤维化相关因子TGF-β1的分泌量，以real-time PCR法测定细胞周期蛋白cyclinD、PNCA蛋白的表达。
结果：一定浓度的HMGB1可刺激人肾小球系膜细胞的增殖，细胞内细胞周期蛋白cyclinD、PNCA基因表达增加，细胞培养上清液中TGF-β1浓度增高。
结论：HMGB1通过刺激人肾小球系膜细胞增殖并分泌TGF-β1参与了肾脏纤维化过程。
【关键词】高迁移率族蛋白1；人系膜细胞；纤维化；TGF-β1；增殖；细胞因子【中图分类号】R68 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2017）36-0023-03Effect rHGMB1 on proliferation of human renal mesangial cells and secretion of fibrosis-related cytokines.Zhou Jianguang,Chen Yu.Department of General Medicine, The First Affiliated Hospital, Zhejiang Chinese Medical University,Hangzhou 310019, China.【Abstract】Objective To investigate the role of HMGB1 in inducing human renal mesangial cells (HMCs) to proliferate and secret fibrosis-related cytokines. Methods Recombinant protein HMGB1 (rHMGB1) was incubated with HMCs and then proliferation assay was carried out with CCK-8; cyclinD and PCNA genes were determined with real time PCR; supernate of cultured HRMCs with rHMGB1 was examined for detection of TGF-β1 with ELISA method. Results HMGB1 promoted proliferation of HRMCs; HMGB1 increased expression of cyclinD and PCNA genes involving cell proliferation; rHMGB1 increased secretion of TGF-β1 in supernate of cultured HMCs. Conclusion rHMGB1 was involved in fibrosis of kidney by inducing HRMCs to proliferate and secret fibrosis-related cytokines.【Key words】HMGB1; Human renal mesangial cells; Fibrosis; Cytokines; Proliferation; TGF-β1肾脏纤维化是多种疾病导致肾功能衰竭的共同通路。
肾脏系膜细胞的增殖，纤维化相关因子对肾脏固有细胞的刺激，是肾脏纤维化的两个重要因素。
慢性的炎症反应又是导致肾脏纤维化的另一重要因素。
高迁移率族蛋白1（high mobility group prptein, HMGB1)是晚期炎症因子，可诱发和促进炎症反应，也和多个脏器的纤维化有关。
狼疮性肾炎的主要病理表现为增生性肾小球肾炎。
我们在前期狼疮小鼠的研究中发现，系膜增生明显的小鼠肾脏组织HMGB1表达明显升高。
据此推测HMGB1可能促进人肾系膜细胞的增殖，后者分泌纤维化相关因子，促使肾脏纤维化的进程。
本实验拟通过体外细胞学实验观察重组HMGB1对人肾系膜细胞增殖和纤维化相关因子分泌的影响。
1.材料和方法1.1 材料和试剂CCK-8试剂盒购买自江苏碧云天生物有限公司，逆转录试剂盒以及Real time-PCR试剂盒购自TAKARA公司。
ELISA试剂盒（TGFbeta1）购自RD公司。
人肾系膜细胞株购自上海信裕生物科技有限公司。
1.2 方法1.2.1细胞培养人肾系膜细胞株，于含10%胎牛血清的RPMI1640培养液、5%CO2、37℃的孵箱中传代培养。
生长至80%融合时，饥饿培养24小时，使细胞同步。
按照处理因素不同进行分组：加入低中高不同浓度（据预实验）的HMGB1刺激后进行下一步实验，设置空白对照组。
1.2.2 CKK-8检测细胞增殖培养于96孔培养板的经过相关因素处理的系膜细胞，每孔加入10μl CCK-8，放置于孵箱中2小时后，置于分光光密度仪570nm读取吸光度。
每个浓度设置5个复孔，重复实验3次。
1.2.3用ELISA方法检测培养上清液中的纤维化相关因子购买TGFβ1的ELISA试剂盒，留取经相关因素处理的系膜细胞培养上清液，按照试剂盒步骤检测相关因子。
1.2.4 Real time PCR法检测cyclin D、PCNA基因表达水平经相关因素处理的系膜细胞，用1ml Trizol总RNA提取试剂盒提取总RNA。
取2μg提取的总RNA，用TAKARA试剂盒逆转录为cDNA，并进行Real time PCR检测。
cyclin D的引物序列为5’-GGATGCTGGAGGTCTGCGA-3’(正向)5’-AGAGGCCACGAACATGCAAG-3’(反向),PCNA的引物序列5’-CGCGGATCCATGTTCGAGGCGCGCCTG-3’(正向)，5’-CCGCTCGAGCTAAGATCCTTCTTCATCCTCGATC-3’(反向)。
1.3 统计学处理使用SPSS19统计软件进行分析，组间差异用t检验，P<0.05提示具有统计学意义。
2.结果2.1 高浓度HMGB1能够显著促进人系膜细胞HMCs增殖我们将HMC细胞培养在不同浓度的HMGB1培养基内，观察期48h后细胞增殖情况。
HMGB1浓度分比为0ng、20ng、50ng、100ng和500ng。
利用MTT法检测，我们发现48h后，随着HMGB1浓度增加，细胞的数量随之增加20ng、50ng、100ng和500ng依次增加，同时相互之间差别显著（P<0.05），见图1。
Fig.1 Proliferation of HMCs with different concentration of rHMGB1图1 不同浓度的rHMGB1促进HMCs细胞增殖2.2 HMGB1增加细胞增殖相关基因PCNA和cyclin D的表达利用real time PCR法，我们检测PCNA和cyclin D的mRNA在不同浓度rHMBG1处理后的表达情况。
如图2和3所示，rHGMB1可以上调PCNA和cyclin D mRNA的表达（GB200），和空白对照组（con）相比具有统计学意义(P<0.05)Fig.4 Level of TGFβ1 in supernate of cultured HMCs stimulated by rHMGB1图4 TGFβ1在培养上清中的表达水平随着rHMGB1浓度增加而升高3.讨论在本研究中，我们以人系膜细胞为模型，HMGB1为刺激因子，研究HMGB1在肾脏纤维化中的作用。
我们发现经过重组HMGB1的刺激，HMCs增生，细胞内增殖相关基因PCNA和cyclin D基因的表达也增加，同时细胞培养上清液中TGF-β1表达水平随着HMGB1增加而增加。
各种肾脏疾病的终末表现几乎都是肾脏纤维化。
肾小球系膜细胞的增殖，纤维化相关因子对肾脏固有细胞的刺激，是肾脏纤维化的两个重要因素。
肾小球系膜细胞增生及基质增多是多种类型肾小球疾病常见而又突出的病理形态学特征。
系膜细胞是多种细胞因子的分泌源，同时又是多种细胞因子作用的主要靶细胞。
在病理情况下，系膜细胞可通过自分泌或旁分泌形式释放多种细胞因子，使细胞外基质产生增加，而某些高浓度的细胞因子又反过来促进系膜细胞的增殖，进而加重肾小球的损害[1]。
系膜细胞是分泌产生细胞外基质的主要细胞之一，而系膜基质聚集则是肾小球纤维化甚至硬化的关键。
在前期研究中我们发现HMGB1在系膜细胞增生明显的狼疮鼠肾脏组织中高表达，在本研究中我们又发现rHMGB1可刺激体外HMCs的增生，并提高细胞周期相关基因的表达，提示HMGB1可能通过刺激HMCs的增生参与了肾脏的纤维化过程。
越来越多的研究表明，纤维化相关细胞因子在肾脏纤维化发展过程中起重要作用。
其中研究最多的致纤维化细胞因子是转化生长因子β1（transforming growth factor-β1，TGF-β1），TGF-β1是一个独立的、关键的致纤维化因子[2]，它能够刺激系膜细胞、间质成纤维细胞、肾小管上皮细胞转分化而成的成纤维细胞增殖并分泌细胞外基质[3]。
TGF-β1/Smad信号途径是目前研究最为透彻的致肾纤维化途径[4]。
通过阻断TGF-β1/Smad信号途径可以抑制系膜细胞的增生，延缓肾小球纤维化[5]。
TGF-β1是直接或间接整合其他多种纤维化因素的共同途径[2]。
我们在本研究中发现HMCs培养上清液中的TGF-1的浓度随着加入HMGB1浓度的增加而升高，提示HMGB1可促进HMCs分泌TGF-β1而参与肾脏纤维化过程。
高迁移率族蛋白1(high mobility group box-1 protein, HMGB1)是20世纪70年代发现的存在于真核细胞核内的非组蛋白染色体结合蛋白，因其在聚丙烯酞胺凝胶电泳(PAGE)中迁移速度快而得名。
HMGB-1传统角色是非组蛋白染色体结合蛋白。
在核内，HMGB-1参与核小体的构建和稳定、协助基因的转录，调节类固醇受体活性。
1999年，Wang等人发现了核外HMGB-1的重要致炎作用[6]。
大量体内外研究表明，HMGB1作为晚期促炎因子在炎症过程中具有潜在的中心作用，这使HMGB1成为抗炎治疗的新靶向分子，尤其是在慢性持续性炎症过程中发挥了重要作用。