蔗糖含量的测定方法二
蔗糖的检验
蔗糖的检验1. 在线产品检验：1.1. 仪器设备：全组分分析仪，100ml烧杯，恒温水浴锅，榨汁机1.2. 样品处理：1.2.1. 将配料奶、乳酸菌饮料等样品分别倒入100ml烧杯中，在恒温水浴锅中预热至30--40℃；1.2.2. 将酸奶样品经过榨汁机处理后，再放入恒温水浴锅中预热至30--40℃；1.2.3. 样品检验：将预热好的样品放在全组分分析仪的吸样管下，按测样键，仪器自动检测，结果显示于显示器上，记录结果。
2. 基准法（莱茵---埃农氏法）：2.1. 原理：蔗糖是非还原糖，没有还原力，但可以经过盐酸水解转化具有还原力的葡萄糖和果糖，在用测还原糖（如上述的乳糖）的方法进行测定。
2.2. 试剂：2.2.1. 200g/L乙酸铅溶液：取20g乙酸铅，溶解于100ml水中。
2.2.2. 草酸钾-磷酸氢二钠溶液：取草酸钾3g，磷酸氢二钠7g，溶解于100ml水中；2.2.3. 费林试液甲液：取34.63g硫酸铜，溶于水中，加入0.5ml浓硫酸，加水至500ml；2.2.4. 费林试液乙液：取173g酒石酸钾钠及50g氢氧化钠溶于水中，稀释至500ml，静止两天后过滤；2.2.5. 10g/L次甲基蓝溶液：称取1g次甲基蓝溶解于100ml水中；2.2.6. 体积比1：1的盐酸溶液；2.2.7. 300g/L氢氧化钠溶液：称取30 g氢氧化钠溶解于100ml水中；2.2.8. 5g/L酚酞溶液：称取0.5 g酚酞溶解于75ml95%的乙醇中，并加入20 ml水，然后再加入氢氧化钠溶液，直到加入一滴立即变成粉红色，再加水定容至100 ml。
2.3. 仪器：常用理化实验室仪器。
2.4. 操作步骤：2.4.1. 费林液的标定：2.4.1.1. 称取在105℃烘箱中干燥2小时的蔗糖约0.2 g（准确到0.2mg），用50ml水溶解并洗入100ml容量瓶中，加水10ml，在加入盐酸（2.6）10ml，置于75℃水浴锅中，时时摇动，在2分30秒至2分45秒间使瓶内温度升至67℃。
HPLC法测蔗糖,葡萄糖,果糖含量
HPLC法测蔓菁中果糖，葡萄糖，蔗糖的含量一、试剂与仪器1.果糖，葡萄糖，蔗糖的标准样品2．乙醇，乙腈为色谱纯，实验用水为超纯水3. 色谱仪二、糖标准溶液的配制1.称2g果糖，葡萄糖，蔗糖至100ml容量瓶中，加水定容。
（20mg/ml）2.逐级稀释至10、5、2.5、1.25、0.625mg/mL。
3.上机进样分析前经0.45μm 微孔滤膜过滤。
每个样品重复3 次。
三、样品处理1.样品在液氮中磨成粉末状，精确称取样品粉末1.00g，加入80% 的乙醇5mL。
2.80℃恒温水浴30min。
3.12000r/min，离心20min，取上清液。
4.残渣加入5mL 80% 的乙醇溶液重复提取1 次，合并提取上清液。
5.90℃水浴中蒸干乙醇，加入高纯水定容至5mL，混匀后用一次性注射器抽取提取样液，6.经0.45μm 微孔滤膜过滤后以备上机进样分析。
每个样品重复3 次。
四、色谱条件的优化1.流动相的选择采用Agilent Zorbax carbohydrate 柱以乙腈-水比例为85:15、80:20、75:25、70:30(V/V)不同比例的流动相测定糖混合标准品和蔓菁提取液中各种糖成分的含量和分离情况。
选出在分离速度和分离效果上最佳的流动相。
2.色谱柱柱温的选择比较色谱柱温度在2 5 、2 8 、3 0 、35℃条件下糖混合标准品和蔓菁提取液中各种糖成分的含量和分离情况。
选出在分离速度和分离效果上最佳的柱温。
3.流动相流速的选择在0.8～1.2mL/min 范围内改变流动相流速，找出 3 种糖出峰时间合适，峰形较好的流速。
五、标准曲线的制作1.取果糖、葡萄糖、蔗糖各级标准溶液( 2 0 、1 0 、5、2.5、1.25、0.625mg/mL)，进样20μL，2.以标样峰面积y 为纵坐标、标样质量浓度x 为横坐标，绘制标准溶液曲线，得线性回归方程，六、糖含量分析测定两个不同甘蔗品种(福农28 和ROC-5)偶数节间果糖、葡糖糖、蔗糖的色谱峰峰面积，代入工作曲线别计算其含量。
GMP质量体系蔗糖检验方法
GMP质量体系蔗糖检验方法GMP（Good Manufacturing Practice）质量体系是一种制药行业常用的质量管理体系，旨在确保药品的质量和安全性。
在研发和生产过程中，对原材料进行检验是一个重要的环节，以确保药品的质量符合相关要求。
对于蔗糖这样的原材料，也需要进行相应的检验方法。
蔗糖是一种常见的原料，广泛应用于医药、食品等领域。
蔗糖的质量检验方法主要包括物理性质检验、化学性质检验和微生物检验三个方面。
物理性质检验主要包括外观检验、颗粒度检验和颜色检验。
外观检验是对蔗糖样品外观是否符合要求进行判断，如是否有未消化的蔗渣、异物等。
颗粒度检验是对蔗糖颗粒大小和分布进行检验，可以通过显微镜观察颗粒形态、大小等指标来评估。
颜色检验是对蔗糖样品的颜色进行检验，可以使用色差仪来测量样品的颜色数值，然后根据标准确定颜色的接受范围。
化学性质检验是对蔗糖样品的化学成分进行检验。
其中，含量测定是最主要的一项。
通常使用苏丹III方法进行含量测定。
该方法是将酸性消旋糖溶液与苏丹III溶液相混合后，在槽内产生红色的混合溶液，通过光度计测定混合溶液的吸光度，然后使用标准曲线计算蔗糖的含量。
另外，还可以对蔗糖的糖度进行检验。
糖度是指蔗糖溶液中的可溶性固形物含量，可以通过折射仪测定蔗糖溶液的折射率，然后使用标准曲线计算蔗糖的糖度。
微生物检验主要是对蔗糖样品中的微生物污染进行检验，以确保产品的微生物质量符合要求。
常用的微生物检验方法包括总生菌数检验和大肠杆菌检验。
总生菌数检验是通过将蔗糖样品接种在富营养培养基上，培养一段时间后，参照标准计算样品中的总生菌数。
大肠杆菌检验是通过将蔗糖样品接种在大肠杆菌选择培养基上，培养一段时间后，观察培养皿上是否有大肠杆菌的生长。
在执行蔗糖检验方法时，需要严格按照相关的操作规程和标准操作。
同时，要使用符合要求的仪器设备和试剂，确保检验结果准确可靠。
对于检验结果超出规定范围的样品，需要进行复检或淘汰处理。
蔗糖的测定实验报告
一、实验目的1. 通过旋光法测定蔗糖溶液的旋光度，进而计算出蔗糖的浓度。
2. 掌握旋光仪的使用方法，了解旋光性质在化学分析中的应用。
3. 学习利用旋光度与浓度的关系，进行定量分析。
二、实验原理蔗糖是一种旋光性物质，其旋光度与溶液的浓度成正比。
在一定条件下，旋光度与浓度的关系可以表示为：\[ \alpha = [\alpha] \cdot c \cdot l \]其中，\(\alpha\) 为旋光度，[\(\alpha\)] 为比旋光度，\(c\) 为溶液的浓度，\(l\) 为溶液的光程。
通过测量蔗糖溶液在不同浓度下的旋光度，可以绘制出旋光度与浓度的关系曲线，从而计算出蔗糖的浓度。
三、实验仪器与试剂1. 仪器：旋光仪、旋光管、移液管、容量瓶、烧杯、玻璃棒、电子天平。
2. 试剂：蔗糖、蒸馏水、盐酸。
四、实验步骤1. 准备一系列已知浓度的蔗糖溶液。
具体方法如下：- 称取一定质量的蔗糖，用蒸馏水溶解，配制成不同浓度的蔗糖溶液。
- 将配好的蔗糖溶液转移至容量瓶中，定容至刻度线。
2. 使用移液管吸取一定体积的蔗糖溶液，转移至旋光管中。
3. 打开旋光仪，调整光路，使光束通过旋光管。
4. 记录旋光度读数，重复测量三次，取平均值。
5. 根据旋光度与浓度的关系，绘制旋光度与浓度的关系曲线。
6. 从曲线中找出与实验数据对应的蔗糖浓度。
五、实验结果与讨论1. 通过实验，绘制出旋光度与浓度的关系曲线，发现旋光度与浓度呈线性关系。
2. 根据曲线，计算出实验样品中蔗糖的浓度。
六、实验误差分析1. 旋光仪的读数误差：旋光仪的读数误差主要来自于刻度盘的精度和读数时的主观误差。
2. 旋光管的光程误差：旋光管的光程误差主要来自于旋光管的长度和测量时的误差。
3. 蔗糖溶液的配制误差：蔗糖溶液的配制误差主要来自于称量、溶解和定容等操作过程中的误差。
七、实验总结通过本实验，我们掌握了旋光法测定蔗糖浓度的方法，了解了旋光性质在化学分析中的应用。
蔗糖含量的测定方法二
蔗糖含量测定（方案一）：果实中蔗糖含量测定可参考（薛应龙等.植物生理学实验手册〔M].上海:上海科学技术出版社，1985.135~138）1实验原理：先用碱性溶液同植物材料的可溶性糖提取液一起加热，破坏其中的还原糖。
然后用蒽酮法在较低的温度下，测定蔗糖中的果糖部分。
不含果糖苷的其他糖类在较低的温度下不与蒽酮显色，材料中如含有其他带有果糖苷的非还原糖（如：棉子糖、松三糖和土木香粉）对测定会有干扰，但是在有蔗糖存在的生物材料中这些糖几乎是不存在的。
一般的说此方法的精确性是很高的。
2实验仪器：衡温水浴，分光光度计、3实验材料：植物的根、茎、叶。
4实验试剂：30%KOH的水溶液；蒽酮试剂【150mg 蒽酮溶于100ml 稀硫酸（76ml 浓硫酸溶于30ml 水中）】；标准蔗糖溶液（1 mg/ml）；转化酶溶液。
5实验步骤：植物材料在110摄氏度下杀死，经70~80摄氏度烘干研磨，称取50mg加3ml 80%的乙醇，在80摄氏度下提取半小时，离心取上清液，共提取3次。
合并上清液，加少许（约0.1克）活性炭脱色，并定容至10ml。
根据蔗糖含量的多少吸取0.1~1.0ml于试管中，沸水浴中加热浓缩至0.05~0.1ml（不要大于0.1ml，否则显色时间要延长），加入0.1ml30%的KOH，在沸水浴中放10min，冷却至室温。
加入3ml蒽酮试剂，40摄氏度保温10~15min，在620nm测定吸光度值。
同时取20~100μg蔗糖（在0.1ml体积中）于一系列试管中，加入0.1ml30%KOH以同法显色，做成标准曲线。
据此计算植物材料中蔗糖的含量。
如植物材料中有其他含果糖苷的干扰物质存在，可将糖的提取物去掉酒精后，与转化酶一起保温。
200μg蔗糖水解97~99%。
在与转化酶保温前后各测定一次，两次结果相减，即为蔗糖测定结果。
但转化酶也能水解棉子糖，而不水解松三糖及土木香粉。
蔗糖含量测定（方案二）：（张志良等编．植物生理学实验指导[M]．高等教育出版社，2009，106．）1实验仪器：分光光度计，恒温水浴锅，电子天平，烘箱，刻度离心管，带塞试管，漏斗。
【精品】食品中蔗糖测定方法
【关键字】精品食品中蔗糖的测定方法酶－比色法食品中蔗糖的测定方法，一般采用盐酸水解法。
由于盐酸水解蔗糖过程中，还有其他糖类被水解为还原糖，导致测定结果偏高。
本标准采用的酶-比色法是在检索了近20年148 篇国外文献的基础上，经过反复实验、验证而制定的。
由于酶法具有高度的专一性(β-果糖苷酶只能催化蔗糖转化为葡萄糖和果糖)，灵敏度高，操作简便，因此测定结果准确。
蔗糖酶解后的产物-葡萄糖的测定方法，与GB／T 16285－96保持一致。
食品中蔗糖的测定方法GB／T 16286-96酶－比色法1 范围本标准规定了用酶－比色法测定食品中蔗糖的方法，适用于各类食品中蔗糖的测定。
本标准最低检出限量为0.04μg(蔗糖)／mL(试液)。
2 原理在β－果糖苷酶(β－FS)催化下，蔗糖被酶解为葡萄糖和果糖。
葡萄糖氧化酶(GOD)在有氧条件下，催化β－D－葡萄糖(葡萄糖水溶液状态)氧化，生成D －葡萄糖酸－δ－内酯和过氧化氢。
受过氧化物酶(POD)催化，过氧化氢与4 －氨基安替比林和苯酚生成红色醌亚胺。
在波长505nm处测定醌亚胺的吸光度，计算食品中蔗糖的含量。
β－FSC12H22O11 ＋H2O ────> C6H12O6(G) ＋C6H12O6(F)GODC6H12O6(G) ＋O2 ────> C6H10O6 ＋H2O2PODH2O2 ＋C6H5OH ＋C11H13N3O ────> C6H5NO ＋H2O3 试剂3.1 组合试剂盒1号瓶：内含β－果糖苷酶(fructosidase)400U(活力单位)、柠檬酸、柠檬酸三钠；2号瓶：内含0.2mol／L 磷酸盐缓冲液(pH＝7.6) 200mL，其中含4 －氨基安替比林0. 00154mol／L；3号瓶：内含0.022mol／L苯酚溶液200mL；4号瓶：内含葡萄糖氧化酶(glucose oxidase)800U(活力单位)、过氧化物酶(辣根，peroxidase)2000U(活力单位)。
蔗糖分的测定
8.5.14 蔗糖仪器和设备：恒温水浴锅（65℃）容量瓶（200mL、250mL）移液管（5mL、50mL）滴定管（50mL）锥形瓶（500mL）加热板或火炉（有三脚架和石棉网）分析天平秒表试剂：盐酸（SG＝1.103）盐酸（0.5M）氢氧化钠（4M）酚酞指示剂（1％）费林氏试剂（A和B）EDTA溶液（4％）浮石粉末甲基蓝溶液（1％）液体石蜡玻璃珠8.5.14.1 测量方法（a）准确称量接近10g糖浆。
（b）用蒸馏水将糖浆转移至一250mL容量瓶中，加入10mL EDTA（4％）溶液，然后加蒸馏水至刻线。
（c）用称液管移取25mL稀释糖液，放入一200mL容量瓶（1）中，用来测定转化糖总含量。
8.5.14.1.1 酸转化处理和转化糖总含量的测定（a）在容量瓶（1）中加入约30mL蒸馏水，然后将其浸入恒温水浴锅（65℃）中，加热10min。
（b）加入10mL盐酸（SG＝1.103），混合均匀。
（c）静置30min。
（d）将糖液调至中性：加入一滴酚酞，逐滴加入4M氢氧化钠溶液，直至糖液呈粉红色（一般需要16.5mL氢氧化钠）。
然后逐滴加入盐酸（0.5M），直至指示剂粉红色恰好消失（需要的盐酸量一般不超过0.5mL）。
加蒸馏水至刻线，混合均匀。
（e）分别用两移液管移取5mL费林氏试剂甲液和5mL费林氏试剂乙液放入同一500mL锥形瓶，加入少量浮石粉末，4滴液体石蜡和3颗玻璃珠。
（f）用D的稀释转化糖浆装满滴定管，然后从滴定管中滴加15mL糖液至E的锥形瓶内，然后将其放在加热板上，加热直至沸腾（开始加热至溶液开始沸腾耗时不能超过2.25min）。
（g）待溶液沸腾10～15s后，观察溶液的颜色，如果仍与费林试剂接近，则表明溶液中还有大量费林试剂未被还原，需要加入更多的糖汁。
从滴定管中继续往锥形瓶中加糖汁。
每加5mL糖汁后，让溶液沸腾几秒后，观察溶液颜色。
若溶液颜色仍与费林试剂溶液接近，则继续加入糖汁直至试剂的原始颜色消失。
食品中蔗糖的测定方法
食品中蔗糖的测定方法酶－比色法食品中蔗糖的测定方法，一般采用盐酸水解法。
由于盐酸水解蔗糖过程中，还有其他糖类被水解为还原糖，导致测定结果偏高。
本标准采用的酶-比色法是在检索了近20年148篇国外文献的基础上，经过反复实验、验证而制定的。
由于酶法具有高度的专一性(β-果糖苷酶只能催化蔗糖转化为葡萄糖和果糖)，灵敏度高，操作简便，因此测定结果准确。
蔗糖酶解后的产物-葡萄糖的测定方法，与GB／T 16285－96保持一致。
食品中蔗糖的测定方法GB／T 16286-96酶－比色法1 范围本标准规定了用酶－比色法测定食品中蔗糖的方法，适用于各类食品中蔗糖的测定。
本标准最低检出限量为0.04μg(蔗糖)／mL(试液)。
2 原理在β－果糖苷酶(β－FS)催化下，蔗糖被酶解为葡萄糖和果糖。
葡萄糖氧化酶(GOD)在有氧条件下，催化β－D－葡萄糖(葡萄糖水溶液状态)氧化，生成D －葡萄糖酸－δ－内酯和过氧化氢。
受过氧化物酶(POD)催化，过氧化氢与4 －氨基安替比林和苯酚生成红色醌亚胺。
在波长505nm处测定醌亚胺的吸光度，计算食品中蔗糖的含量。
β－FSC12H22O11＋H2O ────> C6H12O6(G) ＋C6H12O6(F)GODC6H12O6(G) ＋O2────> C6H10O6＋H2O2PODH2O2＋C6H5OH ＋C11H13N3O ────> C6H5NO ＋H2O3 试剂3.1 组合试剂盒1号瓶：内含β－果糖苷酶(fructosidase)400U(活力单位)、柠檬酸、柠檬酸三钠；2号瓶：内含0.2mol／L 磷酸盐缓冲液(pH＝7.6) 200mL，其中含4 －氨基安替比林0. 00154mol／L；3号瓶：内含0.022mol／L苯酚溶液200mL；4号瓶：内含葡萄糖氧化酶(glucose oxidase)800U(活力单位)、过氧化物酶(辣根，peroxidase)2000U(活力单位)。
蔗糖的测定
0.1
0.2
0.4
0.6
0.8
0.9
蒸馏水（ml）
0.9
0.8
0.7
0.5
0.3
0.1
0
2N氢氧化钠（ml）
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
混合后100℃沸水浴中10min,冷却。再加入间苯二酚，Hcl。
间苯二酚（ml）
1
1
1
1
1
1
1
10N盐酸（ml）
3
3
3
3
3
3
3
蔗糖量
0
40
80
160
蔗糖含量（%）=（C×V/a×n）/(W×106)
式中C---标准方程求的蔗糖量(微克)。
a---吸取样品液体积(ml)
V---提取液(ml)
n---稀释倍数(ml)
W---重量（g）
240
320
360
混合后100℃沸水浴中10min,冷却。500nm下测定光密度。绘制标准曲线。
2样品的测定取0.9ml的样品，加入0.1ml 2N的氢氧化钠,混合后100℃沸水浴中10min,冷却。再加入1ml间苯二酚，3ml 10NHcl,混合后100℃沸水浴中10min,冷却。500nm下测定光密度。
蔗糖的测定
实验试剂:
1.间苯二酚:0.1g的间苯二酚用6N的盐酸溶解后定容到100ml.
2.10N的盐酸
3.2N的氢氧化钠
4.蔗糖标准溶液：0.1g溶解定容到100ml。
实验步骤：
1.标准曲线的制定：1mg/ml的蔗糖溶液稀释成0.4mg/ml蔗糖溶液。
试管号
紫外分光光度法测定蔗糖含量
从试验结果可见该方法具有很好的选择性和较 高的灵敏度 ,适用于各种饮料中的蔗糖含量测定 。
(下转第 365 页)
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夏岫云 : ED TA 滴定法测定稀土镁硅铁中氧化镁
本文选择重铬酸钾溶液溶解样品 。 2. 2 溶样时间的确定
蔗糖在盐酸介质中发生水解产生果糖和葡萄 糖 ,果糖在盐酸的作用下生成羟甲基糠醛[6] ,通过对 产物的吸收光谱进行扫描 ,发现在 291 nm 波长处 有最大吸收 。蔗糖浓度在0～50 mg ·L - 1 范围内服 从比耳定律 。本法只加入盐酸 ,不加入其它显色物 质 ,样品无需预处理 ,方法简便 、快速 、灵敏 ,无污染 。
1 试验部分
1. 1 试剂与仪器 蔗糖标准溶液 : 0. 200 0 g ·L - 1 ,称取蔗糖 (分
析纯试剂) 01 200 0 g 溶于二次蒸馏水 ,并定容到 1 L。
TU21201 紫外可见分光光度计 水为二次蒸馏水 1. 2 试验方法 在具塞比色管中加入适量的 0. 200 0 g ·L - 1 蔗 糖标准溶液 , 加入浓盐酸 3 mL , 用二次水定容至 10 mL 。在沸水中加热 8 min ,取出用流水冷却. 用 1 cm 比色皿 ,以试剂空白为参比 ,于 291 nm 波长处 测定其吸光度 。
按试验方法进行了干扰试验 ,结果表明 ,维生素 C 、柠檬酸 、2 g ·L - 1 苯甲酸钠对测定没有干扰 。 2. 6 工作曲线的绘制
吸取 0. 200 0 g ·L - 1 蔗糖标准溶液 0. 0 ,0. 5 , 1. 0 ,1. 5 ,2. 0 ,2. 5 mL ,按试验方法测定吸光度 ,绘 制工作曲线 ,蔗糖含量在 0～50 mg ·L - 1 范围内服 从比耳定律 ,线性方程 A = 0. 016 4 c + 0. 009 6 ,相 关系数为 0. 998 4 。对 40 mg ·L - 1 蔗糖进行 11 次 测定 ,相对标准偏差为 2. 6 %。 2. 7 样品分析