第16章高效液相色谱法#(精选.)
高效液相色谱法测定固体食品中的安赛蜜
高效液相色谱法测定固体食品中的安赛蜜刁玉华，张加稳，陈娴（昆明市食品药品检验所，昆明 650032）摘要：建立一种高效液相色谱法测定固体食品中安赛蜜的方法。
以水为提取溶剂超声波提取安赛蜜，然后在提取液中加入沉淀剂除杂，采用C18反相色谱柱，紫外检测器，以0.02mol/L乙酸铵溶液∶甲醇=90∶10（v/v）为流动相，检测波长225nm，流速1.0mL/min，柱温30℃，进样量10μL进行检测，外标法定量。
安赛蜜出峰时间为4.348min，样品的检出限为0.57mg/kg，定量限1.89mg/kg，线性范围为0.5～50.0μg/mL，相关系数0.9998，安赛蜜的加标回收率在91.3%～99.3%之间，重复性实验的相对标准偏差在2% 以下（n=6）。
建立的前处理方法具有简单、快速、准确、实用性强的特点，可用于固体食品中安赛蜜的检测。
关键词：安赛蜜；高效液相色谱；固体食品中图分类号：TS207.3/TS202.1 文献标识码：A 文章编号：1006-2513（2021）03-0090-05 doi：10.19804/j.issn1006-2513.2021.03.015Determination of acesulfame K in solid food byhigh performance liquid chromatographyDIAO Yu-hua，ZHANG Jia-wen，CHEN Xian（Kunming Institute for Food and Drag Control，Kunming 650032）Abstract：A high performance liquid chromatography for determination of acesulfame K in solid food was developed. Acesulfame K was extracted using water，assisted by ultrasound，and purified by precipitation. Zinc acetate and potassium ferrocyanide was used for preparation. Acesulfame K was separated on a C18 column using 0.02mol/L ammonium acetate methanol（90∶10，v/v）as mobile phase at a flow rate of 1.0mL/min and detected by ultraviolet detector at 225 nm. The column temperature was 30℃ and injection volume was 10μL. The quantitative detection was carried out by external standard. The retention time of acesulfame K was 4.348 min. The limit of detection was 0.57mg/ kg and limit of quantification was 1.89mg/kg. The linear range was between 0.5 and 50.0μg/mL with correlation coefficient of 0.9998. The mean spike recoveries for acesulfame K in a blank sample was between 91.3%and 99.3%，with a relative standard deviation below 2%（n=6） . The method was simple，rapid，accurate and practical. It can be used for determination of acesulfame K in solid food.Key words： acesulfame K；high performance liquid chromatography（HPLC）；solid food安赛蜜，学名乙酰磺胺酸钾（Acesulfame-K）是一种健康新型高强度甜味剂。
高效液相色谱荧光检测法测定药物中的氯乙酰氯
化学分析计量CHEMICAL ANALYSIS AND METERAGE第30卷，第1期2021年1月V ol. 30，No. 1Jan. 202159doi ：10.3969／j.issn.1008–6145.2021.01.012高效液相色谱荧光检测法测定药物中的氯乙酰氯汤加园，陈向明(滨州医学院药学院，山东烟台 264003)摘要 建立测定药物中氯乙酰氯含量的高效液相色谱–荧光检测方法。
以吖啶酮乙酰肼为荧光标记试剂，对氯乙酰氯进行柱前衍生。
在室温下反应15 min ，衍生产率达到最大。
衍生溶液在XDB–C 18柱上，以水和乙腈为流动相进行分析，激发波长和发射波长分别为255 nm 和429 nm 。
氯乙酰氯浓度在1～1 000 nmol ／L 范围内与色谱峰面积具有良好的线性关系，线性相关系数r =0.999 9。
方法的检出限为0.35 nmol ／L ，仪器精密度和方法精密度分别为0.52%和0.67%(n =6)。
样品加标回收率为92.5%～95.6%。
该方法简单、准确，精密度良好，可用于测定药物中氯乙酰氯的残留量。
关键词 高效液相色谱；荧光检测；氯乙酰氯中图分类号：O657.7 文献标识码：A 文章编号：1008–6145(2021)01–0059–04Determination of chloroacetyl chloride in drug substance by high performanceliquid chromatography with fluorescence detectionTang Jiayuan ， Chen Xiangming(School of Pharmacy ， Binzhou Medical University ， Yantai 264003， China)Abstract A high performance liquid chromatography method coupled with fluorescence detection to determine chloroacetyl chloride in drug substance was developed. Acridone acetyl hydrazine was used as fluorescence labeling reagent and chloroacetyl chloride was derived before column. Optimum derivatization was obtained at room temperature for 15 min. The derivative was separated on a reversed-phase XDB–C 18 column in conjunction with water and acetonitrile as mobile phase. The excitation and emission wavelengths were 255 nm and 429 nm respectively. The concerntration of chloroacetyl chloride had good linear ralationship with the chromatographic peak area in the range of 1–1 000 nmol ／L, the linear correlation coefficient r =0.999 9. The instrument precision and method precision were 0.52%, 0.67%(n =6)，respectively. The detection limit of the method was 0.35 nmol ／L ，and the recoveries were in the range of 92.5%–95.6%. The method is simple ，accurate and showed good repeatability ，which can be used to determine the content of chloroacetyl chloride in drug substance.Keywords high performance liquid chromatography; fluorescence detection; chloroacetyl chloride药物中的遗传毒性杂质是一类能损伤细胞遗传物质并引起基因突变或体内诱变的物质，较少的摄入量就能够对身体健康产生严重的损害［1–2］。
高效液相色谱法在蛋白质分离检测中的应用_唐玲玲
1 HP LC 基本原理
HPLC 由液体输送系统、进样系统、色谱柱和检 测系统 4 部分所组成。输液泵将流动相以稳定的流速 （或压力） 输送至分析体系，在进入色谱柱之前通过 进样器将样品导入，流动相将样品带入色谱柱，在色 谱柱中各组分依照分配系数、吸附力大小、带电性 质，乃至分子量大小的差异而被分离，并依次随流动 相流至检测器，将检测到的信号送至数据系统记录、 处理或保存。随着 HPLC 技术的日趋成熟，它已成为 分离和检测蛋白质的重要工具。
Samira Roufik 建立了用 HPSEC 分析多种乳清蛋 白组成的方法，可以作为食品中添加乳清蛋白配方的 依据[12]。由于 HPSEC 相对温和的色谱条件，不会导 致蛋白质和多肽的变性，故常用作一些乳源性生物活 性多肽的制备，如用乳白蛋白和酪蛋白制备血管紧张 素抑制肽[13]，在对 β- 乳球蛋白体外降解的组分进行 分离分析时，采用 HPSEC 能够较好地保持产物多肽 的物理化学性质[14]。 2.5 高效疏水色谱 （high performance hydrophobic iinteraction chromatography，HPHIC）
高效液相色谱法测定制麦中阿魏酸含量
３．Ｏ７
Ｍ ３ ５７ ．７６
．
０ Ｏ０ ２ Ｏ０ ４．Ｏ０ ６．Ｏ０ ８ Ｏ０ １０ Ｏ０ １２ Ｏ０１４ Ｏ０１６．Ｏ０ １８ Ｏ０ ２０ ００ 时 间／ｒａｉｎ
（ａ）流 动 相为 乙腈 ：００８５％磷 酸 为 ｌ７：８３
６．５８
７ ２０
１ ＼ ９ １４
３ ８８４．８８
９６
一
Ｄｅｔｅｒｍ ｉｎａｔｉｏｎｏｆ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｆｅｒｕｌｉｃ ａｃｉｄｂｙ ｈｐｌｃｄｕｒｉｎｇ ｍａｌｔｉｎｇ ｆｏｒ ｗｈｅａｔ Ｄ ＩＮ Ｇ Ｘｉａｏ—ｍ ａｎ，ＺＨ ＡＮ Ｇ Ｗ ｅｉ—ｗ ｅｉ，Ｄ ＯＮ Ｇ Ｙｉ－ｎｉｎｇ，Ｃ Ｈ Ａ Ｉ Ｘｉｎ－ｙｉ，Ｈ Ｅ Ｘｉａｏ—ｗｅｉ，ＬＩ Ｓｈｕａｎｇ—ｆａｎｇ （Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ａｎｄ Ｆｏｏｄ ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｃｈｕｚｈｏｕ Ｕ ｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈｕｚｈｏｕ ２３９０００，Ｃｈｉｎａ） Ａ ＢＳＴＲＡＣＴ ：Ｔ ｈｅ ｓｔｕｄｙ ｗ ａｓ ｔｏ ｅｓｔａｂｌｉｓｈ ａ Ｈ ＰＬＣ ｍ ｅｔｈｏｄ ｔｏ ｄｅｔｅｒｍ ｉｎｅ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｆｅｒｕｌｉｃ ａｃｉｄ ｉｎ ｍ ａｌｔ． Ｔｈｅ ｃｈｒｏｍ ａｔｏｇｒａｐｈｉｃ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｗ ｅｒｅ ａｓ ｆｏＩｌｏｗ ｓ：ｔｈｅ ｃｈｒｏｍ ａｔｏｇｒａｐｈｉｃ ｃｏｌｕｍ ｎ ｗ ａｓ Ａ ｇｉｌｅｎｔ Ｅｃｌｉｐｓｅ ＸＤＢ－Ｃ１８（４．６ ｍ ｍ × ２５０ ｍ ｍ ，５ ｕｍ ），ｍ ｅｔｈａｎｏｌ—ｇｌａ— ｃｉａｌ ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ（６Ｏ ：４０，ｐＨ ３．０）ａｓ ｍｏｂｉｌｅ ｐｈａｓｅ ｗｉｔｈ ａ ｆｌｏｗ ｒａｔｅ ｏｆ １．０ ｍｌ／ｍｉｎ，ｃｏｌｕｍｎ ｔｅｍ ｐｅｒａｔｕｒｅ ｗａｓ ３５℃ ，ｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ ｗａｓ ３２０ ｎｍ ａｎｄｔｈｅ ｓａｍｐｌｅ ａｍｏｕｎｔ ｗａｓ ２０ ，ａ１．Ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄ ｈａｄ ｇｏｏｄ ｌｉｎｅａｒ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｗｈｅｎ ｔｈｅ ｑｕａｌｉｔｙ ｒａｔｉｏ ｏｆ ｆｅｒｕｌｉｃ ａｃｉｄ ｗａｓ ０．２５～ ２００ ，ａｇ／ｇ （Ｒ。一 ０．９９９ ９）．Ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｆｅｒｕｌｉｃ ａｃｉｄ ｄｕｒｉｎｇ ｍａｌｔｉｎｇ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ （Ｐ＜ Ｏ．０５），ｗｈｉｃｈ ｗａｓ ｔｈｅ ｈｉｇｈｅｓｔ ｉｎ ｍａｌｔ．Ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄ ｉｓ ｍｏｒｅ ｓｉｍ ｐｌｅ ａｎｄ ｆａｓｔｅｒ，ｗｈｉｃｈ ｃｏｕｌｄ ｂｅ ｕｓｅｄ ｔｏ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｆｅｒｕｌｉｃ ａｃｉｄ ｄｕｒｉｎｇ ｍ ａｌｔｉｎｇ ｆｏｒ ｗ ｈｅａｔ． Ｋ ＥＹＷ Ｏ ＲＤＳ：ｆｅｒｕｌｉｃ ａｃｉｄ；ｄｅｔｅｒｍ ｉｎａｔｉｏｎ ｍ ｅｔｈｏｄ；Ｈ ＰＬＣ ；ｄｕｒｉｎｇ ｍ ａｌｔｉｎｇ ｆｏｒ ｗ ｈｅａｔ
仪器分析 第十五-第十九章思考题
第十五章思考题1.色谱法具有同时能进行分离和分析的特点而区别于其它方法，特别对复杂样品和多组份混合物的分离，色谱法的优势更为明显。
2.按固定相外形不同色谱法是如何分类的？是按色谱柱分类：①平面色谱法：薄层色谱法、纸色谱法②柱色谱法：填充柱法、毛细管柱色谱法3.什么是气相色谱法和液相色谱法？气体为流动相的色谱称为气相色谱。
液体为流动相的色谱称为液相色谱。
4.保留时间（tr）、死时间（t0）及调整保留时间（t’r）的关系是怎样的？t’r = tr - t05.从色谱流出曲线可以得到哪些信息？①根据色谱峰的个数可以判断样品中所含组分的最少个数；②根据色谱峰的保留值可以进行定性分析；③根据色谱峰的面积或峰高可以进行定量分析；④色谱峰的保留值及其区域宽度是评价色谱柱分离效能的依据；⑤色谱峰两峰间的距离是评价固定相（或流动相）选择是否合适的依据。
6.分配系数在色谱分析中的意义是什么？①K值大的组分,在柱内移动的速度慢，滞留在固定相中的时间长，后流出柱子；②分配系数是色谱分离的依据；③柱温是影响分配系数的一个重要参数。
7.什么是选择因子？它表征的意义是什么？是A，B两组分的调整保留时间的比值α= t’r（B）/t’r（A）＞1意义：表示两组分在给定柱子上的选择性，值越大说明柱子的选择性越好。
8.什么是分配比（即容量因子）？它表征的意义是什么？是指在一定温度和压力下，组分在两相分配达到平衡时，分配在固定相和流动相的质量比。
K=ms/mm意义：是衡量色谱柱对被分离组分保留能力的重要参数；9. 理论塔板数是衡量柱效的指标，色谱柱的柱效随理论塔板数的增加而增加，随板高的增大而减小。
10.板高（理论塔板高度H/cm）、柱效（理论塔板数n）及柱长（L/cm）三者的关系（公式）？H=L / n11.利用色谱图如何计算理论塔板数和有效理论塔板数（公式）？12.同一色谱柱对不同物质的柱效能是否一样？同一色谱柱对不同物质的柱效能是不一样的13.塔板理论对色谱理论的主要贡献是怎样的？(1)塔板理论推导出的计算柱效率的公式用来评价色谱柱是成功的；(2)塔板理论指出理论塔板高度H 对色谱峰区域宽度的影响有重要意义。
高效液相色谱法教学【全】精选全文
例: 流动相极性变化对组分k’的影响
②更换色谱柱（改变N）
措施： a.选择长柱子(N=L/H) b.填料颗粒尽量小 c.低流速(溶质传质阻力小，峰扩展小) d.低的溶剂粘度(提高柱效)
高效液相色谱法
High Performance Liquid
Chromatography （HPLC）
前言:
HPLC是70年代以后发展最 快的一个分析化学分支，现 已成为生化、医学、药物、 化学化工、食品卫生、环保 检测等领域最常用的分离分 析手段。
我国：
开始仅为少数研究实验室拥有， 现很多的生产、研究、质检部门都拥有。 广泛应用于： 质量控制、分析化验、制备分离。 讲课目的：入门 教材：《实用色谱法》（詹益兴 编著） 学习要求：记好笔记，
ⅰ大分子，扩散系数小 ⅱ小分子，扩散系数大
5. 影响分离的因素与提高柱效的途径
• 液体的扩散系数仅为气体的万分之一，在高效液
相色谱中,速率方程中的分子扩散项B/u较小，可忽略 不计，即 H = A + C u
• 降低传质阻力是提高 柱效主要途径。 •气相和液相Ｈ－ｕ区别
§１－４ 分离度 (Rs)
于世林编著)
第一章 高效液相色谱法基本原理 §1－1 概述 一、色谱法
混合物最有效的分离、分析方法。 是一种分离技术。 混合物分离过程：试样中各组分在 固液两相间不断进行着的分配。 一相固定不动，称为固定相。 另一相是携带试样混合物流过固定 相的液体，称为流动相。
液相色谱仪
高效液相色谱仪流程图
(1) 存在着浓度差，产生纵向扩散;
(2) 扩散导致色谱峰变宽，H↑(Ｎ↓)，分离变差; (3) B/u与流速有关：流速↓→ 滞留时间↑→ 扩散↑
高效液相色谱法测定复方磺胺甲恶唑片中磺胺甲恶唑和甲氧苄啶的含量_熊久林
续表1序号保留时间t /min化合物名称分子式分子量相对含量(%)79.3213-octadecenoic acid(Z)(Z)-13-十八碳烯酸C 18H 34O 228221.6289.73octadecan oic acid 十八烷酸C 18H 36O 228433.46910.6210,13-octadecadienoic acid 10,13-十八碳二烯酸C 18H 32O 22800.131010.7910-noadecen oic acid 10-十九烯酸C 19H 36O 22960.091111.26noadecanoic caid 十九烷酸C 19H 38O 22980.281212.7211-eicosenoic acid 11-二十碳烯酸C 20H 38O 2310 2.101313.23eicosanoic acid 二十碳烷酸C 20H 40O 2312 1.771417.42docosanoic acid 二十二碳烷酸C 22H 44O 23400.18由表1可以看出,从中药材木鳖子中共鉴定出14种脂肪酸,占脂肪酸总含量的89.23%,其中饱和脂肪酸7种,占总脂肪酸含量的47.32%不饱和脂肪酸7种,占脂肪酸总量的41.91%。
3 讨论木鳖子中不饱和脂肪酸以亚油酸(19.85%)、(Z)-13-十八(碳)烯酸(21.62%)、11-二十(碳)烯酸(2.10%)为主。
近年来的研究表明不饱和脂肪酸对人体有降低血脂、胆固醇和血压,抗血栓、抗动脉硬化,预防心血管疾病,增强记忆力,预防老年痴呆症,防癌等多种作用[3]。
木鳖子是一种常见的中药,对中药木鳖子的研究已较深入,但对其脂肪酸的研究还未见报道。
本实验方法具有简单、准确、脂肪酸检出率高等优点,其结果将对木鳖子的深层次的开发和应用提供科学依据。
参考文献:[1] 宋立人,洪 恂,丁绪亮,等.现代中药大辞典,上册[M ].北京:人民出版社:349-351.[2] S.R..Heller ,G.W.A.M iline.EPA/NIH M ass Spectral date[M ].U .S.Washington D.C.,1978:1-4.[3] 周永红.火麻仁油中脂肪酸的GC-M S 分析[J ].中国油脂,2004,29(3):72-72.收稿日期:2004-11-12; 修订日期:2005-02-12作者简介:熊久林(1956-),男(汉族),湖北黄梅人,现任湖北省黄石市药品检验所副主任药师,主要从事药品检验工作.高效液相色谱法测定复方磺胺甲唑片中磺胺甲唑和甲氧苄啶的含量熊久林,孙仲葆,黎 源,马锦星,运 委,张 晶(湖北省黄石市药品检验所 435000)摘要:目的:建立同时测定复方磺胺甲唑片中磺胺甲唑和甲氧苄啶含量的高效液相色谱法。
高效液相色谱分析HPLC
高效液相色谱
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第7讲
高效液相色谱
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§3-4 液相色谱法固定相
色谱柱是色谱法的心脏，固定相及装柱技术是关键。 一、液-液色谱法及离子对色谱法固定相 1.全多孔型担体：直径小于10µm（75/-4） 2.表面多孔型担体，目前不用。 3.化学键合固定相（P76及P69） a.成相：用化学的方法通过化学键把有机分子结合 到担体表面。常用18碳柱 b.特点76/-5：4点. 4.分离机制77/2：既不是全部吸附过程，亦不是典型 的液-液分配过程，而是双重机制兼而有之，只是 按键合量的多少而各有侧重.
第7讲
高效液相色谱
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离子对色谱分离过程示意图
第7讲
高效液相色谱
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五、离子色谱法 1.固定相:离子交换树脂 流动相:电解质溶液 检测器:电导检测器 主配件：抑制柱 2. 流程图：fig3-2 3.分离机制 （阴离子为例） a.双柱型：化学抑制型离子色谱法； b.单柱型：非抑制型，用低电导的洗脱液； 4.应用：从无机和有机阴离子到金属阳离子，从 有机阳离子到糖类、氨基酸等均可用该法分析.
高效液相色谱
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第三章
高效液相色谱分析（HPLC）
§3-1高效液相色谱的特点 一、定义：液相色谱法是指流动相为液体的色谱 技术。 二、特点 1.高压: 可达150～350×105 Pa 2.高速: 例，分离20种氨基酸，经典色谱法要20 多小时，用HPLC只需1小时。 3.高效：3万塔板/米（GC2000塔板/米） 4.高灵敏度： 紫外检测器10-9 g 荧光检测器10-11g
高效液相色谱
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第7讲
高效液相色谱
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第16章高效液相色谱法【16-1】从分类原理、仪器构造及应用范围，简述气相色谱及液相色谱的异同点。
答：二者都是根据样品组分与流动相和固定相相互作用力的差别进行分离的。
从仪器构造上看，液相色谱需要增加高压泵以提高流动相的流动速度，克服阻力。
同时液相色谱所采用的固定相种类要比气相色谱丰富的多，分离方式也比较多样。
气相色谱的检测器主要采用热导检测器、氢焰检测器和火焰光度检测器等。
而液相色谱则多使用紫外检测器、荧光检测器及电化学检测器等。
但是二者均可与MS等联用。
二者均具分离能力高、灵敏度高、分析速度快，操作方便等优点，但沸点太高的物质或热稳定性差的物质难以用气相色谱进行分析。
而只要试样能够制成溶液，既可用于HPLC分析，而不受沸点高、热稳定性差、相对分子量大的限制。
【16-2】高效液相色谱仪由几大部分构成？各部分的主要功能是什么？答：高效液相色谱仪由高压输液系统，进样系统，分离系统，检测系统和记录系统五大部分组成。
高压输液系统：主要是通过高压输液泵将溶剂储存器中的流动相以高压形式连续不断地送入液路系统，使试样在色谱柱中完成分离过程。
进样系统：把分析试样有效地送入色谱柱中进行分离。
分离系统：将试样各组分分离开来。
检测系统：对被分离组分的物理或物化特性有响应；对试样和洗脱液总的物理或化学性质有响应。
记录系统：记录被分离组分随时间变化的信号。
【16-3】液相色谱中影响色谱峰展宽的因素有哪些? 与气相色谱相比其主要区别何在？答：液相色谱中引起色谱峰扩展的主要因素为涡流扩散、流动的流动相传质、滞留的流动相传质以及柱外效应。
在气相色谱中径向扩散往往比较显著，而液相色谱中径向扩散的影响较弱，往往可以忽略。
另外，在液相色谱中还存在比较显著的滞留流动相传质及柱外效应。
【16-4】何谓化学键合相色谱、正相色谱和反相色谱？答：化学键合相色谱是指在化学键合固定相上进行物质分离的一种液相色谱法。
正相色谱是采用极性键和固定相流的相用比键合相极性小的非极性或弱极性有机溶剂。
反相色谱采用非极性键和固定相流的相为强极性的溶剂。
【16-5】何谓化学键合固定相？它的突出优点是什么？答：利用化学反应将固定液的官能团键合在载体表面形成的固定相称为化学键合固定相。
优点: 固定相表面没有液坑,比一般液体固定相传质快的多；无固定相流失,增加了色谱柱的稳定性及寿命；可以键合不同的官能团,能灵活地改变选择性,可应用与多种色谱类型及样品的分析；有利于梯度洗提,也有利于配用灵敏的检测器和馏分的收集。
【16-6】什么叫梯度洗脱？它与气相色谱中的程序升温有何异同？答：梯度洗脱是指将两种或两种以上不同极性但可互溶的溶剂，随着时间的改变而按一定比例混合。
以连续改变色谱柱中淋洗液的极性，离子强度或pH等，从而改变被测组分的相对保留值、提高分离效率、加快分离速度的一种洗脱方式。
液相色谱中梯度淋洗和气象色谱中程序升温作用相同。
不同的是：在起诉相色谱中通过改变温度条件，达到高效快速分离目的；而液相色谱是通过改变流动相极性来达到目的。
【16-7】指出下列各种色谱法中最适宜分离物质。
（1）气液色谱；（2）正相色谱；（3）反相色谱；（4）离子交换色谱；（5）凝胶色谱；（6）气固色谱；（7）液固色谱。
答：（1）气液色谱：适宜分离气体或易挥发性液体和固体。
（或可转化为易挥发性液体和固体。
）（2）正相色谱：适宜分离极性化合物。
（3）反相色谱：适宜分离多环芳烃等低极性化合物。
（4）离子交换色谱：适宜分离离子型和可离解化合物。
（5）凝胶色谱：适宜分离大分子化合物，（分子量>2000）例蛋白质、氨基酸、核酸等生物大分子。
（6）气固色谱：适宜分离永久性气体及烃类化合物。
（7）液固色谱：适宜分离不同极性的化合物，或不同类型的化合物，特别适合分离异构体。
【16-8】指出下列化合物被液体流动相从氧化铝柱中洗脱的峰序：正丁醇、1-丁基氯、正己酸、正己烷、2-己烯。
答：正己烷，2-己烯，1-丁基氯，正丁醇，正己酸。
【16-9】指出下列化合物从氧化钙柱中流出的顺序：正丁醇、甲醇、正己醇、乙醇。
答：甲醇，乙醇，正丁醇，正己醇。
【16-10】指出下列物质在正相色谱中的洗脱顺序。
（1）正己烷，正己醇，苯；（2）乙酸乙酯，乙醚，硝基丁烷。
答：（1）正己烷，苯，正己醇（2）乙醚，硝基丁烷，乙酸乙酯【16-11】指出习题10中物质在反相色谱中的洗脱顺序。
答：（1）正己醇，苯，正己烷（2）乙酸乙酯，硝基丁烷，乙醚【16-12】指出下列离子从阴离子交换柱中流出的顺序：Cl-，I-，F-，Br-。
答：F-，Cl-，Br-，I-。
【16-13】预测下列离子从阳离子交换柱中流出的可能顺序：Ca2+，Ba2+，Mg2+，Be2+，Sr2+。
答：Be 2+，Mg 2+，Ca 2+，Sr 2+，Ba 2+。
【16-14】 相对分子质量约为120000的蛋白质在1根排阻极限为80000的凝胶柱上的保留体积为15mL ，萘（MW128）在同1根柱上的保留体积为124mL ，某特定试样组分的保留体积为87mL 。
假定萘的相对分子质量小于凝胶的渗透极限，计算总孔容积和试样组分的分配系数。
答：109mL ，0.66【16-15】 用1根以二甲基甲酰胺作为流动相的排阻色谱柱检测聚氧化乙烯的保留体积，试利用表中结果估计保留体积为13.5mL 的聚氧化乙烯聚合物的相对分子质量。
相对分子质量 V /mL 相对分子质量 V /mL 1.1×103 17.2 7.7×104 14.1 5.1×103 16.3 7.0×10512.7 2.0×10415.1解：以相对分子量Mr 取对数logMr 作为纵坐标以保留体积V 为横坐标，求出斜率K341lg 5.110lg1.11016.317.(2)K ⨯⨯=－－10.744K =-442lg 7.710lg 2.01014.1 4.)3(K ⨯⨯=－－20.57K =－1220.657K K K =+=－ 保留体积为13.5mL 的相对分子质量lg7.0105lg 0(.65712.735)1.Mr ⨯=－－－ 解得52.110Mr =⨯ 【16-16】 为了解决下列分析课题，可否采用色谱法（应指出其具体的方法名称）？若不能采用，应当用哪些方法较为合理？（1）液体中的烯烃、炔烃和芳烃三族物质的分类和分析； （2）水溶液中甲酸、乙酸、丙酸和丁酸的总酸度的测定； （3）甲酸、乙酸、丙酸和丁酸混合物中含量的分别测定；（4）某工厂临时购得一批乙醇原料，其中含丙酮约为5%~10%，要求比较准确测出原料中丙酮的含量；（5）混合物中对、间、邻二甲苯含量的分别测定； （6）鉴定某一商品高聚物；（7）生物化学制品，如蛋白质、胆汁酸的分类分析；（8）空气中氟化氢、二氧化硫气体的分析；（9）氯化钾和氯化钠水溶液中两种正离子含量的分别测定；（10）钢铁中为了N2、O2、H2的测定。
【16-17】欲测定下列试样，采用哪种色谱法较为适宜？并指出所选用的固定相、流动相和检测器。
（1）（蒽）和（菲）；（2）CH3CH2OH和CH3CH2CH2OH；（3）Ba2+和Sr2+；（4）C4H9COOH和C5H11COOH；（5）高相对分子质量的葡糖苷；（6）苯和丁酮；（7）丁酮和乙醇；（8）正己烷、正庚烷、正辛烷和正癸烷；（9）分析苯中微量水分；（10）苯乙酮、苯、硝基苯；（11）苯、萘、联苯、菲、蒽；（12）ClOCOOC2H5HH和ClOCOOC2H5HH（13）F-、Cl-、Br-、NO3-；（14）乙酸、丙酸、丁酸、戊酸、己酸、庚酸、辛酸、壬酸、癸酸；（15）OH，OHCH3，OHCHO，OHClCl（16）N2和O2；（17）邻二甲苯、间二甲苯和对二甲苯。
解：部分答案如下表：【16-18】电渗流是如何产生的？讨论电渗流在毛细管电泳分类中的意义。
答：电渗现象中整体移动着的液体称为电渗流。
HPCE中通常使用石英作为毛细管材料，石英的等电点约为1.5，因此在常用缓冲溶液中(pH＞3)，管壁带负电，石英毛细管表面的硅羟基(≡SiOH)电离为硅氧基负离子(≡SiO-)，并将溶液中水合离子(一般为阳离子)吸附到毛细管表面附近，形成双电层。
当在毛细管两端加电压时，双电层中的阳离子向阴极移动，由于离子是溶剂化的，所以带动了毛细管中整体溶液向阴极移动，形成电渗流(EOF)。
电渗流在电泳分离过程中的有重要意义。
体现在：①使混合物中的正、负离子和中性分子产生差速迁移而实现分离；②通过EOF的大小和方向的控制，可以提高CE的分离效率、选择性和分离度。
【16-19】毛细管电泳有哪些主要分离模式？答：（1）毛细管区带电泳（CZE）将待分析溶液引入毛细管进样一端，施加直流电压后，各组分按各自的电泳流和电渗流的矢量和流向毛细管出口端，按阳离子、中性粒子和阴离子及其电荷大小的顺序通过检测器。
中性组分彼此不能分离。
出峰时间称为迁移时间（tm），相当于高效液相色谱和气相色谱中的保留时间。
（2）毛细管凝胶电泳（CGE）在毛细管中装入单体和引发剂引发聚合反应生成凝胶，这种方法主要用于分析蛋白质、DNA等生物大分子。
另外还可以利用聚合物溶液，如葡聚糖等的筛分作用进行分析，称为毛细管无胶筛分。
有时将它们统称为毛细管筛分电泳，下分为凝胶电泳和无胶筛分两类。
（3）毛细管等速电泳（CITP）采用前导电解质和尾随电解质，在毛细管中充入前导电解质后，进样，电极槽中换用尾随电解质进行电泳分析，带不同电荷的组分迁移至各个狭窄的区带，然后依次通过检测器。
（4）毛细管等电聚焦电泳（CIEF）将毛细管内壁涂覆聚合物减小电渗流，再将样品和两性电解质混合进样，两个电极槽中分别加入酸液和碱液，施加电压后毛细管中的操作电解质溶液逐渐形成pH梯度，各溶质在毛细管中迁移至各自等电点（pI）时变为中性形成聚焦的区带，而后用压力或改变检测器末端电极槽储液的pH值的办法使溶质通过检测器。
（5）胶束电动毛细管色谱（MEKC或MECC）当操作缓冲液中加入大于其临界胶束浓度的离子型表面活性剂时表面活性剂就聚集形成胶束，其亲水端朝外憎水非极性核朝内，溶质则在水和胶束两相间分配，各溶质因分配系数存在差别而被分离。
（6）毛细管电色谱（CEC）将细粒径固定相填充到毛细管中或在毛细管内壁涂覆固定相以电渗流驱动操作缓冲液（有时再加辅助压力）进行分离。
【16-20】试比较毛细管电泳与高效液相色谱方法。
高效毛细管电泳仪（HPCE）是以毛细管为分离通道，以高压直流电场为驱动力，利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离，是分析科学继高效液相色谱仪（HPLC）之后的又一重大进展，使分析科学从微升级进入到了纳升级水平，不仅使单细胞乃至单分子分析成为可能，也使蛋白质和核酸等生物大分子分析有了新的转机。