中药化学实验指导—实验十二 中药化学成分预试验

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中药化学实验指导(全套

中药化学实验指导(全套

实验一大黄中游离蒽醌的提取分离与检识(一)目的要求学习羟基蒽醌类化合物的提取分离和检识,通过实验要求:1.掌握从大黄中提取和分离游离蒽醌的方法。

2.掌握用pH梯度萃取法分离不同酸性的羟基蒽醌类化合物。

3.掌握蒽醌类化合物的主要检识方法。

4.熟悉蒽醌类化合物的色谱检识方法。

5.了解用柱色谱法分离蒽醌类成分。

(二)主要化学成分的结构及性质大黄为蓼科植物掌叶大黄Rheum palmatum L.、唐古特大黄Rheum tanguticum Maxim. ex Reg.和药用大黄Rheum officinale Baill.的干燥根及根茎。

大黄中含有大黄酸、大黄酚、芦荟大黄素、大黄素、大黄素甲醚及其苷,总含量约3%~5%。

1.大黄酸(rhein) 分子式C15H8O6,分子量284.21。

黄色针状结晶(升华法),mp.321~322℃,330℃分解。

能溶于碱水、吡啶,略溶于乙醇、苯、氯仿、乙醚和石油醚,几不溶于水。

2.大黄素(emodin) 分子式C15H10O5,分子量270.23。

橙色针状结晶(乙醇),mp.256~257℃,能升华。

易溶于乙醇、碱水,微溶于乙醚、氯仿,几不溶于水。

3.芦荟大黄素(aloe-emodin) 分子式C16H10O5,分子量270.23。

橙色针状结晶(甲苯),mp.223~224℃。

易溶于热乙醇,可溶于乙醚和苯,并呈黄色;溶于碱液呈红色;氨水及硫酸中呈绯红色。

4.大黄酚(chrysophanol) 分子式C15H10O4,分子量254.23。

橙黄色六方形或单斜结晶(乙醇或苯),mp.196~197℃,能升华。

易溶于沸乙醇,可溶于丙酮、氯仿、苯、乙醚和冰醋酸,极微溶于石油醚、冷乙醇,几不溶于水。

5.大黄素甲醚(physcion) 分子式C 16H 12O 5,分子量284.26。

砖红色单斜针状结晶,mp.203~207℃,溶于苯、氯仿、吡啶及甲苯,微溶于醋酸及醋酸乙酯,不溶于甲醇、乙醇、乙醚和丙酮。

中药化学实验指导书

中药化学实验指导书

中药化学实验指导书中药教学部重庆邮电学院生物信息学院2005年02月前言中药化学是一门运用现代化学理论和方法研究中药化学成分的学科,近年来发展迅速,逐步渗透到中药鉴定、中药制剂、中药炮制等学科中,在药物的研制、中药资源的开发、药品检验、中药生产过程中有广泛的应用。

另一方面,中药化学是中药的基础研究,是中药现代化工作中十分重要的组成部分。

同时,中药化学是中药专业的专业课程,其基本实验技能的培养是本课程的重要组成部分,通过中药化学实验,培养学生的动手操作能力,为学生在中药鉴定、中药分析、制剂分析等专业课上打下坚实的专业基础。

为此,我们根据本课程教学大纲的要求,组织编写了本实验讲义。

生物信息学院中药学教学部高运玲潘正编著二OO五年二月目录第一节实验注意事项 (01)第二节试剂的使用 (04)第三节实验部分 (06)实验一层析练习 (06)实验二大黄中游离蒽醌的提取、分离与检识 (10)实验三秦皮中七叶苷、七叶内酯的提取、分离和鉴定 (13)实验四芦丁的提取和鉴定 (15)实验五葛根中黄酮类化合物的提取、分离及鉴定 (20)实验六茴香醚的提取分离和检识 (23)实验七三七总皂甙的提取和精制 (25)实验八薯蓣皂甙元的提取分离与鉴定 (27)实验九盐酸小檗碱的提取、精制及检识 (30)实验十掌叶防已碱的提取分离及延胡索乙素的制备 (34)实验十一苦参生物碱的提取、分离与鉴定 (39)实验十二中药化学成分的系统预试验 (43)附录 (53)第一节实验注意事项一、教学目的通过《中药化学》的实验教学,要求学生能够:1、掌握化学实验中常用的煎煮法、渗漉法、回流法、液-液萃取法等中药提取法的操作技术。

2、掌握薄层层析、纸层析的基本操作,熟悉它们在中药化学成分鉴定、提取、分离和检识中的应用。

3、训练常量、半微量成分的分离,精制及检识方法,并了解有关中药成分研究中的文献检索和工具书查阅的基本方法。

4、初步形成方法自我设计中药中主要有效成分提取的能力,培养独立分析问题、解决问题的能力。

中药化学预试实验

中药化学预试实验

系统预试法——应用一些简单的定性试验,对中药中所含各类化学成分作全面检查。

单项预试法——根据需要,有重点的检查某类成分或某药效成分。

方法:试管反应+薄层层析检查中草药主要来源于植物。

植物的化学成分较复杂,有些成分是植物所共有的,如纤维素、蛋白质、油脂、淀粉、糖类、色素等。

有些成分仅是某些植物所特有的,如生物碱类、甙类、挥发油、有机酸、鞣质等。

各类化学成分均具有一定的特性,一般可由药材的外观、色、嗅、味等作为初步检查判断的手段之一。

如药材样品折断后,断面不油点或挤压后有油迹者,多含油脂或挥发油;有粉层的多含淀粉、糖类;嗅之有特殊气味者,大多含有挥发油、香豆精、内酯;有甜奈者多含糖类;味若者大多含生物碱、甙类、苦味质;味酸者含有有机酸;味涩者多含有鞣质等等。

中草药所含化学成分均为多类的混合物,分析时常常互相干扰,不易得到正确结果。

因此需根据中草药所含各种化学成分的溶解度、酸碱度、极性等理化性质,再用各类成分的鉴别反应加以鉴别。

一、预试溶液的制备1、水提取液——糖、多糖、有机酸、皂苷、酚类、鞣质、氨基酸、多肽、蛋白质……2、乙醇提取液——酚类、鞣质、有机酸、香豆素、强心苷、黄酮、蒽醌、甾体……3、5%HCl-乙醇提取液——生物碱4、石油醚提取液——甾体、萜类、脂肪油……(一)鉴别注意事项1.根据各灰成分不同性质,选用适宜的溶剂提取,以保证等成分能被提取出来。

2.检品提取液的浓度应足以达到各该反应的灵敏度。

3.检品提取液的酸碱度(pH)值应不致影响鉴别反应中所需要的pH值。

相差甚大时应事先调节。

4.提取液较深时,常易影响观察鉴别反应的效果,此时可适当稀释,或进一步提纯。

5.鉴别反应时应注意防止多类成分的相互干扰,以免出现假阳性,或颜色不正等情况。

最好在化学鉴别的同时,做空白试验和对照试验(用已知含某类成分的中草药或纯品做阳性对照)。

6.在鉴别试验中,如果某一类成分的几个鉴别反应结果不一致时(即有的呈阳性反应,有的呈阴性)则应进行全面分析。

北中大中药化学实验指导03综合实验项目-1中药化学成份的系统预试验操作

北中大中药化学实验指导03综合实验项目-1中药化学成份的系统预试验操作

第三章综合实验项目实验一中药化学成份的系统预试验操作在研究一未知样品时,多采用中药化学成分的系统预实验。

先根据各化学成分的溶解性不同,选用适当的溶剂,极性梯变,顺次将各类溶解性相近的成分提出。

例如:石油醚、汽油、苯可溶解油脂、挥发油、植物甾醇、某些生物碱、亲脂性强的香豆素等亲脂性化合物;乙醚可提取出树脂、内酯、黄酮等化合物;氯仿可提取有利生物碱;丙酮、乙醇、甲醇则可提取出一些生物碱及其盐,有机酸及其盐、苷类、鞣制、无机盐类等化合物。

通过制备预实验的溶液,可减少各成分间的相互影响,提高预试的效果。

一般工作中常根据水能提取极性物质,石油醚可提取非极性物质,醇能提取大多数成分等特点,采用石油醚、95%乙醇和水为溶剂对样品进行分别提取。

预实验的结果仅能作为进一步提取分离有效成分的初步线索。

由于植物中各成分的复杂性和相互干扰,各定性反应常有例外,例如:碘化铋钾试剂,不仅对生物碱发生反应,对碱性氨基,生物胺等同样也发生反应。

生物碱沉淀反应作为预实验阴性结果可做出无生物碱存在的结论,阳性结果实际意义不大,须进一步配合其他反应或配合TLC及PC进行。

因此,决不能只跟据预试结果武断作出某种成分存在与否的结论。

为进一步了解所含成分单体的个数和情况可配合TLC 和PC。

一、实验目的掌握中药成分的预试验方法,总结中药中各主要化学类型成分的理化性质。

二、实验原理根据中药化学成分溶解度不同进行溶剂系统提取分离,达到分类,再利用各种沉淀试剂和显色剂进行预试,并配合TLC及PC,初步判断和了解各部分中可能含有的化学成分。

三、溶剂及试剂95%乙醇150ml,石油醚150ml,1%HCl 30ml,氯仿40ml,氨水适量。

四、实验操作(一)与实验溶液的制备1.水提取液样品粉末10g(过20目筛)10倍量水,室温浸泡过夜过滤(滤取一半量)滤液(检液A)部分浸液及药渣60℃水浴加热10min-1h过滤滤液(检液B)滤渣此滤液供糖、多糖、有机酸、皂苷、苷类、酚类、鞣质、氨基酸、生物碱等项的预试。

中药化学成分预实验实验报告

中药化学成分预实验实验报告

中药化学成分预实验实验报告
一、实验目的
通过对中药化学成分的预实验,初步了解中药中所含有的化学成分,为后续的分离和鉴定工作提供依据。

二、实验材料
1. 中药样品(例如:丹参、黄连、甘草等)
2. 实验试剂:乙醇、石油醚、乙酸乙酯、甲醇、氯仿等
3. 实验仪器:索氏提取器、薄层色谱板、紫外灯、试管、滴管等
三、实验步骤与观察
1. 索氏提取法:采用索氏提取器,以乙醇作为溶剂,提取中药样品中的脂溶性成分。

观察提取液的颜色和质地,记录提取液中可能存在的成分。

2. 溶剂萃取法:将中药样品分别用石油醚、乙酸乙酯、氯仿进行萃取,观察不同溶剂萃取后得到的萃取液的颜色和质地,初步判断各萃取液中所含有的化学成分。

3. 薄层色谱法:将中药样品进行薄层色谱分离,在紫外灯下观察斑点的颜色和位置,初步确定样品中可能存在的化合物。

四、实验结果与讨论
根据实验观察和记录,初步确定中药样品中可能含有的化学成分。

例如,丹参可能含有丹参酮类化合物,黄连可能含有小檗碱类化合物,甘草可能含有甘草甜素等。

讨论这些成分的生理活性及其在中药中的作用。

五、实验结论
通过本次预实验,初步了解了中药中所含有的化学成分,为后续的分离和鉴定工作提供了依据。

在实验过程中,应进一步优化实验条件和方法,提高分离和鉴定的准确性和可靠性。

中药化学成分预实验大全7页word

中药化学成分预实验大全7页word

中药化学成分预试验大全系统预试法——应用一些简单的定性试验,对中药中所含各类化学成分作全面检查。

单项预试法——根据需要,有重点的检查某类成分或某药效成分。

方法:试管反应+薄层层析检查中草药主要来源于植物。

植物的化学成分较复杂,有些成分是植物所共有的,如纤维素、蛋白质、油脂、淀粉、糖类、色素等。

有些成分仅是某些植物所特有的,如生物碱类、甙类、挥发油、有机酸、鞣质等。

各类化学成分均具有一定的特性,一般可由药材的外观、色、嗅、味等作为初步检查判断的手段之一。

如药材样品折断后,断面不油点或挤压后有油迹者,多含油脂或挥发油;有粉层的多含淀粉、糖类;嗅之有特殊气味者,大多含有挥发油、香豆精、内酯;有甜奈者多含糖类;味若者大多含生物碱、甙类、苦味质;味酸者含有有机酸;味涩者多含有鞣质等等。

中草药所含化学成分均为多类的混合物,分析时常常互相干扰,不易得到正确结果。

因此需根据中草药所含各种化学成分的溶解度、酸碱度、极性等理化性质,再用各类成分的鉴别反应加以鉴别。

一、预试溶液的制备1、水提取液——糖、多糖、有机酸、皂苷、酚类、鞣质、氨基酸、多肽、蛋白质……2、乙醇提取液——酚类、鞣质、有机酸、香豆素、强心苷、黄酮、蒽醌、甾体……3、5%HCl-乙醇提取液——生物碱4、石油醚提取液——甾体、萜类、脂肪油……(一)鉴别注意事项1.根据各灰成分不同性质,选用适宜的溶剂提取,以保证等成分能被提取出来。

2.检品提取液的浓度应足以达到各该反应的灵敏度。

3.检品提取液的酸碱度(pH)值应不致影响鉴别反应中所需要的pH值。

相差甚大时应事先调节。

4.提取液较深时,常易影响观察鉴别反应的效果,此时可适当稀释,或进一步提纯。

5.鉴别反应时应注意防止多类成分的相互干扰,以免出现假阳性,或颜色不正等情况。

最好在化学鉴别的同时,做空白试验和对照试验(用已知含某类成分的中草药或纯品做阳性对照)。

6.在鉴别试验中,如果某一类成分的几个鉴别反应结果不一致时(即有的呈阳性反应,有的呈阴性)则应进行全面分析。

(整理)中药化学成分的预试验.

(整理)中药化学成分的预试验.

中药化学成分的预试验系统预试法——应用一些简单的定性试验,对中药中所含各类化学成分作全面检查。

单项预试法——根据需要,有重点的检查某类成分或某药效成分。

方法:试管反应+薄层层析检查中草药主要来源于植物。

植物的化学成分较复杂,有些成分是植物所共有的,如纤维素、蛋白质、油脂、淀粉、糖类、色素等。

有些成分仅是某些植物所特有的,如生物碱类、甙类、挥发油、有机酸、鞣质等。

各类化学成分均具有一定的特性,一般可由药材的外观、色、嗅、味等作为初步检查判断的手段之一。

如药材样品折断后,断面不油点或挤压后有油迹者,多含油脂或挥发油;有粉层的多含淀粉、糖类;嗅之有特殊气味者,大多含有挥发油、香豆精、内酯;有甜奈者多含糖类;味苦者大多含生物碱、甙类、苦味质;味酸者含有有机酸;味涩者多含有鞣质等等。

中草药所含化学成分均为多类的混合物,分析时常常互相干扰,不易得到正确结果。

因此需根据中草药所含各种化学成分的溶解度、酸碱度、极性等理化性质,再用各类成分的鉴别反应加以鉴别。

一、预试溶液的制备1、水提取液——糖、多糖、有机酸、皂苷、酚类、鞣质、氨基酸、多肽、蛋白质……2、乙醇提取液——酚类、鞣质、有机酸、香豆素、强心苷、黄酮、蒽醌、甾体……3、5%HCl-乙醇提取液——生物碱4、石油醚提取液——甾体、萜类、脂肪油……(一)鉴别注意事项1.根据各灰成分不同性质,选用适宜的溶剂提取,以保证等成分能被提取出来。

2.检品提取液的浓度应足以达到各该反应的灵敏度。

3.检品提取液的酸碱度(pH)值应不致影响鉴别反应中所需要的pH值。

相差甚大时应事先调节。

4.提取液较深时,常易影响观察鉴别反应的效果,此时可适当稀释,或进一步提纯。

5.鉴别反应时应注意防止多类成分的相互干扰,以免出现假阳性,或颜色不正等情况。

最好在化学鉴别的同时,做空白试验和对照试验(用已知含某类成分的中草药或纯品做阳性对照)。

6.在鉴别试验中,如果某一类成分的几个鉴别反应结果不一致时(即有的呈阳性反应,有的呈阴性)则应进行全面分析。

最新中药化学试验技术1

最新中药化学试验技术1

中药化学试验技术1第一章绪论第一节中药化学研究成果及应用第二节中药化学成分的预试验系统预试法——应用一些简单的定性试验,对中药中所含各类化学成分作全面检查。

单项预试法——根据需要,有重点的检查某类成分或某药效成分。

方法:试管反应+薄层层析检查一、预试溶液的制备1、水提取液——糖、多糖、有机酸、皂苷、酚类、鞣质、氨基酸、多肽、蛋白质……2、乙醇提取液——酚类、鞣质、有机酸、香豆素、强心苷、黄酮、蒽醌、甾体……3、5%HCl-乙醇提取液——生物碱4、石油醚提取液——甾体、萜类、脂肪油……二、各类成分的检查1、生物碱(1)沉淀反应——碘化汞钾试剂→白色或浅黄色沉淀碘化铋钾试剂→橘红色沉淀碘—碘化钾试剂→浅棕或暗棕色沉淀硅钨酸试剂→浅黄或黄棕色沉淀磷钨酸试剂→浅黄色沉淀磷钼酸试剂→白色或淡黄色沉淀苦味酸试剂→黄色结晶或非结晶形沉淀鞣酸试剂→棕黄色沉淀氯化金试剂→黄色结晶氯化铂试剂→白色结晶雷氏铵盐→红色无定形沉淀(2)薄层层析检查:吸附剂——碱性氧化铝(Ⅲ级,干法铺板)硅胶G(稀碱湿法铺板)展开剂——氯仿:甲醇显色——UV;碘化铋钾2、氨基酸、多肽、蛋白质(1)加热沉淀试验:加热煮沸→混浊或沉淀(蛋白质)+5%H2SO4(不加热)→混浊或沉淀(2)双缩脲反应:+40%NaOH,1%CuSO4→紫色、红色或紫红色(多肽、蛋白质)(3)茚三酮反应:+0.2%茚三酮试液→蓝或蓝紫色(氨基酸、多肽、蛋白质)(4)吲哚醌反应:+吲哚醌试液→各种颜色(氨基酸)(5)Millon反应:+Hg,H2NO2→红色(蛋白质分子中有酪氨酸组成)(6)Hopkins-Cole反应:+乙醛酸,浓硫酸→各色(蛋白质分子中有色氨酸组成)(7)氨基酸的薄层层析检查:吸附剂——硅胶G展开剂—— n-BuOH,n-BuOH:HAc:H2O显色剂——0.25%茚三酮试液→紫红色斑点3、有机酸(1)PH试纸检查(2)溴酚兰试液:喷洒→蓝色背景黄色斑点(3)薄层层析检查:吸附剂——硅胶G或酸性氧化铝展开剂—— C6H6:EtOH显色剂——0.1%溴酚兰试液→黄色4、酚类和鞣质(1)FeCl3试剂:+1%FeCl3试液→蓝、暗绿或蓝紫色(2)三氯化铁-铁氰化钾试剂:喷洒→蓝色斑点(3)香草醛-盐酸试剂:喷洒→红色(间苯二酚、间苯三酚)(4)重氮盐试剂:+对硝基苯胺、亚硝酸钠→红色(5)薄层层析检查:吸附剂——硅胶G或纤维素展开剂—— n-BuOH:HAc:H2O;15%HAc显色剂——1% FeCl3试液1%三氯化铁-1%铁氰化钾试液→蓝、绿或黑色鞣质与酚类的区别:+明胶——沉淀上清液 +1%FeCl3试液→蓝、暗绿或蓝紫色5、糖和苷(1)斐林试剂:+硫酸铜、酒石酸钾钠——砖红色沉淀(还原糖)(—)+1%HCl +NaOH 沉淀(苷元)△30min 上清液(+)(多糖、苷)(2)Molish反应:+α-萘酚-浓硫酸→紫红色环(3)银镜反应:+0.1N硝酸银、5N氨水→银褐色(还原糖)(4)薄层层析检查::吸附剂——硅胶G或纤维素展开剂—— n-BuOH:Pd:H2O;15%HAc显色剂——苯胺-邻苯二甲酸6、皂苷(1)泡末试验:振摇→大量持续性泡末+0.1M HCl 二管泡末高度相同(三萜皂苷)+0.1M NaOH 碱管高于酸管(甾体皂苷)(2)溶血试验:+2%红血球悬浮液→溶血(3)Lieberman—Burchard反应:+醋酐-浓硫酸——紫红色(三萜皂苷)黄-红-紫-污绿(甾体皂苷)7、甾体(1)Lieberman—Burchard反应:+醋酐-浓硫酸→黄-红-紫-污绿(2)氯仿-浓硫酸反应:+氯仿-浓硫酸氯仿层→红或青色硫酸层→绿色荧光(3)五氯化锑或三氯化锑反应:+SbCl3或SbCl5→红色(4)薄层层析检查:吸附剂——中性氧化铝或硅胶G展开剂—— C6H6-MeOH;CHCl3-MeOH显色剂—— 10%磷钼酸→蓝-蓝紫色5%三氯化锑试液→红、棕红或绿色8、黄酮(1)盐酸-镁粉反应:+HCl-Mg →红色(2)三氯化铝反应:+AlCl3→黄色(3)浓氨水反应:+NH3→亮黄或橙色(4)薄层层析检查:吸附剂——聚酰胺或硅胶G展开剂—— MeOH-H2O;EtOH-H2O显色剂—— UV→亮黄或黄绿色荧光1%三氯化铝试液→亮黄色9、香豆素、内酯(1)开闭环反应:+1%NaOH→澄清 +2%HCl→混浊(2)异羟污酸铁反应:+7%盐酸羟胺、10%KOH △ +稀HCl、1%FeCl3→红色(3)重氮盐试剂:+对硝基苯胺、亚硝酸钠→红色(4)薄层层析检查:吸附剂——酸性硅胶G或硅胶G 或酸性氧化铝展开剂——甲苯-乙酸乙酯-甲酸(5:4:1)显色剂—— UV→蓝色荧光异羟污酸铁试液→红色10、强心苷(1)Kedde试剂:+3,5-二硝基苯甲酸试液→紫红色(2)Baljet试剂:+碱性苦味酸试液→橙或橙红色(3)Legal试剂:+亚硝酰铁氰化钠试液→紫红色(4)K-K反应:+FeCl3/冰HAc、浓H2SO4→上层绿~蓝色(2-去氧糖)界面红棕色(5)薄层层析检查:吸附剂——硅胶G 或中性氧化铝展开剂—— n-BuOH:HAc:H2O(4:1:5)显色剂——碱性3,5-二硝基苯甲酸试液→紫红色碱性苦味酸试液→橙红色11、蒽醌(1)碱液反应:+10%NaOH →红色 +H2O2→红色不褪 +H+→红色褪去(2)醋酸镁反应:+1%MgAc2→红色(3)薄层层析检查:吸附剂——硅胶G展开剂——Pet:EtOAc显色剂—— UV→黄色荧光5%NaOH →红色12、挥发油、油脂(1)油斑检查:油斑挥发→挥发油;油斑不消失→油脂或类脂(2)磷钼酸反应:喷洒5%磷钼酸试液→蓝色(油脂、三萜、甾醇)第二章化合物结构与溶解性中药中的化学成分十分复杂,一味中药中有少则几十种,多则几百种成分。

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实验十二中药化学成分预试验(一)目的要求1.掌握常见中药化学成分的鉴别原理及实验技术。

2.能根据实验结果,判断检品中所含化学成分的类型。

3.认真做好预试验记录,正确书写实验报告。

(二)试验材料本实验中的供试液(品),可根据各类成分鉴别实验的具体需要,选择有代表性的各类成分或含相应成分的药材提取物,根据实验的具体要求进行准备。

需要鉴别的主要药物成分的类型有:生物碱、糖、苷、氨基酸、蛋白质、鞣质、黄酮、蒽醌、香豆素、强心苷、皂苷、挥发油、油脂、有机酸等。

(三)实验原理中药中所含的化学成分很多,在提取分离某种有效成分之前,一般可先通过简单的预试验,初步了解药材中可能含有哪些类型的化学成分,以便选用适当的方法对其中有效成分进行提取、分离。

预试验通常分为二类:系统预试验和单项预试验。

其基本原理是利用中药中各类化学成分在不同溶剂中溶解度不同,分成数个部分,如水溶性、醇溶性及石油醚溶性等部分,再分别进行各种定性反应。

各成分的检识反应可在试管或滤纸片上进行,也可用色谱法,然后根据各化学反应的现象进行分析判断,以了解试样中可能含有哪些类型的化学成分。

(四)实验内容1.水溶性成分的检识取中药粗粉5g,加50ml蒸馏水,浸泡过夜,或于50~60℃水浴中温浸1小时,滤过,滤液供检识下列各类成分:(1)糖、多糖和苷类1)Molish反应:取1ml供试液于试管中,加入1~2滴10%α-萘酚乙醇试剂摇匀,倾斜试管45°,沿管壁滴加1ml浓硫酸,分成两层。

如在两液层交界面出现紫红色环,表明可能含有糖、多糖或苷类。

2)斐林反应:取1ml供试液于试管中,加入新配制的4~5滴斐林试剂,在沸水浴中加热数分钟,如产生砖红色氧化亚铜沉淀,表明可能含有还原糖。

将上述溶液中沉淀滤过除去,滤液加1ml 10%盐酸溶液,置沸水浴中加热水解数分钟,放冷后,滴加10%氢氧化钠溶液调pH至中性,重复上述斐林反应,如仍产生砖红色氧化亚铜沉淀,表明可能含有多糖或苷类。

(2)氨基酸、多肽和蛋白质类1)茚三酮反应:取供试液点于滤纸片上,喷雾茚三酮试剂后,吹热风数分钟,如呈紫红色或蓝色,表明可能含氨基酸、多肽或蛋白质。

2)双缩脲反应:取1ml供试液于试管中,加1滴10%氢氧化钠试剂,摇匀,再加0.5%硫酸铜溶液,边加边摇匀,如溶液呈现紫色、红紫色或蓝紫色,表明可能含有多肽或蛋白质。

3)酸性蒽醌紫反应:取供试液点于滤纸片上,喷洒酸性蒽醌紫试剂,如呈现紫色,表明可能含有蛋白质。

(3)酚类、鞣质类化合物1)三氯化铁反应:取1ml供试液于试管中,加醋酸酸化后,加数滴1%三氯化铁试剂,溶液如呈显绿、蓝绿、蓝黑或紫色,表明可能含有酚性成分或鞣质。

2)三氯化铁-铁氰化钾反应:取供试液点于滤纸片上,干燥后,喷洒三氯化铁-铁氰化钾试剂,如立即呈现蓝色,表明可能含有鞣质。

喷试剂后应立即观察,若放置一段时间,背景也能逐渐呈蓝色。

如欲使纸上的斑点保存下来,在纸片仍湿润时,用稀盐酸洗涤,再用水洗至中性,置室温干燥即可。

3)香草醛-盐酸反应:取供试液点于滤纸片上,干燥后,喷洒香草醛-盐酸试剂,如立即呈不同程度的红色,表明含有间苯二酚和间苯三酚结构的化合物。

4)明胶-氯化钠反应:取1ml供试液于试管中,加入1~2滴明胶-氯化钠试剂,如产生白色混浊或沉淀,表明可能含有鞣质。

5)咖啡碱反应:取1ml供试液于试管中,加入数滴0.1%咖啡碱溶液,如产生棕色沉淀,表明可能含有鞣质。

(4)有机酸类1)pH试纸反应:取供试液,以广泛pH试纸测试,如呈酸性,表明可能含有有机酸或酚类成分。

2)溴酚蓝反应:取供试液点于滤纸片上,喷洒0.1%溴酚蓝试剂的70%乙醇溶液,如在蓝色背景上产生黄色斑点,表明可能含有有机酸。

如显色不明显,可再喷雾氨水,然后暴露于盐酸蒸气中,背景逐渐由蓝色变成黄色,而有机酸的斑点仍为蓝色。

(5)皂苷类1)泡沫反应:取2ml供试液于试管中,剧烈振摇2分钟,如产生大量持久性泡沫,再把溶液加热至沸或加入乙醇,再振摇,如仍能产生多量持久性泡沫,表明可能含有皂苷。

2)溶血反应:取供试液点于滤纸片上,干燥后,加1滴2%红细胞试液,数分钟后,如在红色背景中出现白色或淡黄色斑点,表明可能含有皂苷。

本实验也可在试管中进行。

2.醇溶性成分的检识取10g中药粗粉,加100ml乙醇,沸水浴中回流提取1小时,滤过。

滤液回收乙醇至无醇味,取1/2量浓缩液,加10ml乙醇溶解,供甲项检识。

剩余的浓缩液加10ml 5%盐酸,充分搅拌,滤过,滤液部分供乙项检识。

酸水不溶部分,加10ml醋酸乙酯溶解,醋酸乙酯液用5%氢氧化钠溶液振摇洗涤2次(每次2~3ml),弃去碱水层。

醋酸乙酯层再用蒸馏水洗1~2次,至水洗液呈中性,弃去水洗液,置于水浴上蒸发除去醋酸乙酯,残留物用15ml乙醇溶解,供丙项检识。

甲项检识(1)鞣质类:同水溶性成分检识(2)有机酸类:同水溶性成分检识(3)黄酮类1)盐酸-镁粉反应:取1ml供试液于试管中,加镁粉适量,摇匀,加2~5滴浓盐酸,即产生剧烈反应,如溶液呈红色或紫红色,表明可能含有黄酮类。

2)三氯化铝反应:取供试液点于滤纸上,晾干,喷雾三氯化铝试剂,干燥后,斑点呈鲜黄色,如在紫外灯下观察,斑点有明显的黄绿色荧光,表明可能含有黄酮类。

3)氨熏反应:取供试液滴于滤纸片上或硅胶色谱板上,置氨气中熏片刻,斑点呈亮黄色,在紫外灯下观察,斑点呈黄色荧光,表明可能含有黄酮类。

(4)蒽醌类化合物1)碱液反应:取1ml供试液于试管中,加10%苛性碱试剂呈红色,如加酸使成酸性,则红色褪去,表明可能含有蒽醌类。

2)醋酸镁反应:取1ml供试液于试管中,加数滴1%醋酸镁甲醇溶液,如溶液呈橙红色、紫色等颜色,表明可能含有蒽醌类。

(5)甾体和三萜类1)醋酐-浓硫酸反应:取1ml供试液,置蒸发皿中水浴蒸干,加1ml冰醋酸使残渣溶解,再加1ml醋酐,最后加1滴浓硫酸,如溶液颜色由黄→红→紫→蓝→墨绿,表明可能含有甾体类成分。

如溶液最终呈现红或紫色,表明含有三萜类成分。

2)三氯醋酸反应:取供试液滴于滤纸片上,滴三氯醋酸试剂,加热至60℃,产生红色,渐变为紫色,表明含甾体类成分。

加热至100℃才显红色、红紫色,表明含有三萜类成分。

3)氯仿-浓硫酸反应:取1ml供试液,置于蒸发皿中水浴蒸干,加1ml氯仿使残渣溶解,将氯仿液转入试管中,加1ml浓硫酸使其分层,如氯仿层显红色或青色,硫酸层有绿色荧光,表明可能含有甾体或三萜。

乙项检识(1)生物碱类1)碘化铋钾反应:取1ml供试液于试管中,加1~2滴碘化铋钾试剂,如立即有棕黄色至棕红色沉淀产生,表明可能含有生物碱。

2)碘化汞钾反应:取1ml供试液于试管中,加2~3滴碘化汞钾试剂,如产生白色或类白色沉淀,表明可能含有生物碱。

3)碘-碘化钾反应:取1ml供试液于试管中,加2~3滴碘-碘化钾试剂,如产生褐色或暗褐色沉淀,表明可能含有生物碱。

4)硅钨酸反应:取1ml供试液于试管中,加1~2滴硅钨酸试剂,如产生黄色沉淀或结晶,表明可能含有生物碱。

丙项检识(1)强心苷类1)碱性苦味酸反应:取1ml供试液于试管中,加数滴碱性苦味酸试剂,如溶液即刻或15分钟内显红色或橙红色,表明可能含有强心苷类。

2)间二硝基苯反应:取1ml供试液于试管中,加数滴间二硝基苯试剂,摇匀后再加数滴20%氢氧化钠,如产生紫红色,表明可能含有强心苷类。

3)冰醋酸-三氯化铁反应:取1ml供试液于蒸发皿中,水浴上蒸干,残留物加0.5ml冰醋酸-三氯化铁试剂溶解后,置于试管内,沿管壁加入1ml浓硫酸,使分成二层,如上层为蓝绿色,界面处为紫色或红色环,表明可能含有2,6-二去氧糖的强心苷类。

4)呫吨氢醇反应:取1ml供试液于蒸发皿中,水浴上蒸干,加呫吨氢醇试剂,置水浴上加热2分钟,如溶液显红色,表明可能含有2,6-二去氧糖的强心苷类。

本实验也可取强心苷固体试样少许,加入1ml呫吨氢醇试剂振摇,置水浴上加热3分钟,如呈现红色,表明可能含有2,6-二去氧糖。

(2)香豆素、内酯类1)异羟肟酸铁反应:取1ml供试液于试管中,加7%盐酸羟胺醇溶液及10%氢氧化钠溶液各2~3滴,置沸水浴上加热数分钟至反应完全,放冷,加1%盐酸调pH3~4,再加1~2滴1%三氯化铁试剂,如溶液为红色或紫色,表明可能含有香豆素或内酯类。

2)开环-闭环反应:取1ml供试液于试管中,加2~3滴1%氢氧化钠溶液,于沸水浴上加热3~4分钟,得澄清溶液,再加3~5滴2%盐酸使溶液酸化,如溶液变为混浊,表明可能含有内酯类化合物。

3)重氮化偶合反应:取1ml供试液于试管中,加数滴5%碳酸钠试剂,于沸水浴上加热数分钟,冷后,加数滴新配制的重氮盐试剂,如呈红色或紫色,表明可能含有香豆素类化合物。

4)间硝基苯反应:取供试液点于滤纸片上,喷洒2%间硝基苯试剂,待乙醇挥发后,再喷洒2.5mol/L氢氧化钾溶液,置70~100℃的恒温箱中加热,如呈紫红色,表明可能含有内酯类化合物。

本试验也可在试管中进行。

5)荧光反应:取供试液,点于滤纸片上或硅胶色谱板上,干燥后置紫外灯下观察,如呈现蓝-绿色荧光,再喷洒1%氢氧化钾试剂,荧光加强,表明可能含有香豆素类化合物。

3. 石油醚溶性成分的检识取2g中药粗粉,加10ml石油醚,室温下浸渍提取2~3小时,滤过,滤液作下列成分检识。

(1)甾体、三萜类:同醇溶性成分甲项检识。

(2)挥发油、油脂类1)油斑试验:取供试液点于滤纸片上,室温下挥去溶剂后,滤纸片上如留有油斑,表明可能含有油脂或挥发油,若稍经加热,油斑消失或减少,表明可能含有挥发油,如油斑无变化,表明可能含有油脂。

2)香草醛-浓硫酸反应:取供试液点于硅胶色谱板上,挥去石油醚,喷洒香草醛-浓硫酸试剂,如产生红、蓝、紫等颜色,表明可能含有挥发油、萜类和甾醇。

4.氰苷类成分的检识(1)苦味酸钠反应:取1g试样,捣碎,置于试管中,加数滴蒸馏水使湿润,于试管中悬挂一条苦味酸钠试纸(勿使试纸接触试管下部试样),用胶塞塞住试管,于50~60℃水浴中加热15~30分钟,,如试纸由黄色变为砖红色,表明可能含有氰苷。

(2)普鲁士蓝反应:取1g试样,捣碎,置于试管中,加蒸馏水使湿润,立即用滤纸将试管口包紧,并在滤纸上加1滴10%氢氧化钾溶液,于50~60℃水浴中加热15~30分钟,再在滤纸上分别滴加10%硫酸亚铁试剂、10%盐酸、5%三氯化铁试剂各1滴,如滤纸显蓝色,表明可能含有氰苷。

5.实验说明及注意事项(1)本实验所用的供试品,可根据具体情况,灵活选择,但应包括试验材料项中所列出的成分,提倡尽可能使用有代表性的化学对照品。

(2)预试验反应完成后,首先对反应结果明显的成分进行分析判断,作出初步结论。

而对某些反应结果不十分明显的,应进一步浓缩处理供试液,再进行检识或另选一些试剂进行检识,有时可配合色谱法检识。

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