叶绿素a和叶绿素b的吸收光谱曲线
试验十二叶绿素的定量测定分光光度法
实验二十叶绿素含量的测定叶绿素的含量与植物光合作用及氮素营养有密切的关系，在科学施肥、育种及植物病理研究上常有测定的需要。
方法I一、目的掌握叶绿素含量测定的基本原理和方法。
二、原理叶绿素与其他显色物质一样，在溶液中如液层厚度不变则其吸光度与它的浓度成一定的比例关系。
已知叶绿素a、b在652 nm波长处有相同的比吸收系数(均为34.5)。
因此，在此波长下测定叶绿素溶液的吸光度，即可计算出叶绿素a、b的总量。
三、材料、仪器设备及试剂1. 材料：菠菜叶；芥菜叶或其他植物叶片。
2. 仪器设备：电子分析天平；分光光度计；漏斗；25ml 容量瓶；剪刀；滤纸；玻棒等。
3. 试剂：95%乙醇、石英砂、碳酸钙粉。
四、实验步骤1. 叶绿素的提取称取植物鲜叶0.20g (可视叶片叶绿素含量增减用量)，剪碎放入研钵中，加少量碳酸钙粉和石英砂及3〜5ml95 %乙醇研成匀浆，再加约10ml 95 %乙醇稀释研磨后，用滤纸过滤入25ml 容量瓶中，然后用95%乙醇滴洗研磨及滤纸至无绿色为止，最后定容至刻度，摇匀，即得叶绿素提取液。
2. 测定取光径为1cm的比色杯，倒入叶绿素提取液距杯口1cm处，以95%乙醇为空白对照，在652 nm 波长下读取吸光度( A )值。
五、计算将测得的吸光度A652 值代入公式(1), 即可求得提取液中叶绿素浓度。
所得结果再代入公式－1⑵，即可得出样品中叶绿素含量( mg • g Fw )。
A652－1C ( mg • ml ) = .................................................................................................................... ( 1)34.5公式中：C —叶绿素 (a和b )的总浓度(mg • m「)A652 —表示在652nm 波长下测得叶绿素提取液的吸光度34.5 为叶绿素a 和b 混合溶液在652nm 波长的比吸收系数(比色杯光径为1cm, 样品浓度为1g • L-1时的吸光度)。
叶绿体色素吸收光谱曲线的绘制
叶绿体色素吸收光谱曲线的绘制一、引言叶绿体是植物细胞中的重要器官，通过光合作用为植物生长和代谢提供能量。
叶绿体内含有多种色素，其中叶绿素是叶绿体中最主要的光合色素，它能够吸收阳光中的能量，并转化为化学能以供植物生长代谢。
科研人员通常使用光谱曲线来研究叶绿体色素的吸收特性，本文将介绍叶绿体色素吸收光谱曲线的绘制方法。
二、叶绿体色素的吸收光谱1. 叶绿体色素的种类叶绿体中含有多种色素，其中叶绿素a和叶绿素b是最主要的两种色素，它们吸收光谱曲线在400-700nm范围内有两个峰值，分别是绿光谱和橙黄光谱。
2. 吸收光谱的特点叶绿体色素对不同波长的光具有不同的吸收能力。
在光谱曲线上可以清晰地看到叶绿素在红光和蓝光波长处的吸收峰值，这与植物在不同波长的光线下呈现不同的颜色有着密切的关系。
三、叶绿体吸收光谱曲线的绘制方法1. 实验材料与准备（1）测光仪：用于测量叶绿体吸收光谱的光谱仪器。
（2）叶绿体样品：新鲜的叶绿体样品需要在光谱测量前进行破碎提取。
（3）100的乙醇：用于提取叶绿体中的色素。
2. 测量步骤（1）将叶绿体样品破碎并配制成0.5的叶绿素提取液。
（2）将叶绿素提取液置于测光仪中，进行吸收光谱的测量，记录各个波长的吸光度数值。
（3）使用实验数据绘制叶绿体色素的吸收光谱曲线，其中横轴为波长，纵轴为吸光度。
3. 数据处理与分析（1）绘制曲线时需要对实验数据进行平滑处理，去除噪音影响。
（2）根据测量得到的各个波长的吸光度数据绘制曲线，得到叶绿体色素的吸收光谱图。
四、实验注意事项1. 实验中需要注意叶绿体样品的处理和提取方法，保证叶绿体色素的完整性和稳定性。
2. 测量过程中要严格控制光线和温度等环境因素，以保证实验数据的准确性。
3. 实验后需要做好仪器的清洁和样品的处理，避免交叉污染和实验结果的偏差。
五、实验结果与分析通过上述方法绘制出叶绿体色素吸收光谱曲线后，我们可以清晰地观察到叶绿素在不同波长下的吸收特性。
分光光度法测定叶绿素含量
一、实验目的1.了解植物组织中叶绿素的分布及性质。
2.掌握测定叶绿素含量的原理和方法。
二、实验原理叶绿素广泛存在于果蔬等绿色植物组织中，并在植物细胞中与蛋白质结合成叶绿体。
当植物细胞死亡后，叶绿素即游离出来，游离叶绿素很不稳定，对光、热较敏感；在酸性条件下叶绿素生成绿褐色的脱镁叶绿素，在稀碱液中可水解成鲜绿色的叶绿酸盐以及叶绿醇和甲醇。
高等植物中叶绿素有两种：叶绿素a 和b ，两者均易溶于乙醇、乙醚、丙酮和氯仿。
叶绿素的含量测定方法有多种，其中主要有：1.原子吸收光谱法：通过测定镁元素的含量，进而间接计算叶绿素的含量。
2.分光光度法：利用分光光度计测定叶绿素提取液在最大吸收波长下的吸光值，即可用朗伯—比尔定律计算出提取液中各色素的含量。
叶绿素a 和叶绿素b 在645nm 和663nm 处有最大吸收，且两吸收曲线相交于652nm 处。
因此测定提取液在645nm 、663nm 、652nm 波长下的吸光值，并根据经验公式可分别计算出叶绿素a 、叶绿素b和总叶绿素的含量。
三、仪器、原料和试剂仪器分光光度计、电子顶载天平(感量0．01g)、研钵、棕色容量瓶、小漏斗、定量滤纸、吸水纸、擦境纸、滴管。
原料新鲜(或烘干)的植物叶片试剂1. 96％乙醇(或80％丙酮)2. 石英砂3. 碳酸钙粉四、操作步骤取新鲜植物叶片(或其它绿色组织)或干材料，擦净组织表面污物，去除中脉剪碎。
称取剪碎的新鲜样品2g ，放入研钵中，加少量石英砂和碳酸钙粉及3mL95％乙醇，研成均浆，再加乙醇10mL ，继续研磨至组织变白。
静置3～5min 。
取滤纸1张置于漏斗中，用乙醇湿润，沿玻棒把提取液倒入漏斗，滤液流至100mL 棕色容量瓶中；用少量乙醇冲洗研钵、研棒及残渣数次，最后连同残渣一起倒入漏斗中。
用滴管吸取乙醇，将滤纸上的叶绿体色素全部洗入容量瓶中。
直至滤纸和残渣中无绿色为止。
最后用乙醇定容至100mL ，摇匀。
取叶绿体色素提取液在波长665nm 、645nm 和652nm 下测定吸光度，以95％乙醇为空白对照。
光合作用(光合色素)
或引起原初光化学反应的色素。
【包括极少数处于特殊状态的叶绿素a，这类特殊色素与 蛋白质结合为复合体，称为反应中心】
天线色素吸收光能并将能量传递、汇集到反应中心， 反应中心色素接受能量并激发产生高能电子，实现 对光能的转化。
影响叶绿素生物合成的因素：
（1）光是叶绿素形成的必要条件
（2）温度影响酶的活动，进而影响叶绿素的生物合成
重难点1： 光合色素的种类、含量及吸收光谱（作用）
叶绿素a（50%） 叶绿素 （75%） 叶绿素b（25%） 吸收蓝紫光和红光
光合色素
叶黄素（17%） 类胡萝卜素 (25%) 吸收蓝紫光 光合色素分布于叶绿体中类囊 体的薄膜上。 胡萝卜素（8%）
光合色素：
在光合作用中参与吸收、传递光能
【也称天线色素，包括绝大多数叶绿素a，全部叶绿素b，胡 萝卜素和叶黄素。这类色素组成辅光系统。】
பைடு நூலகம்
（3）叶绿素由C、H、O、N、Mg组成，形成过程中还需要Fe 元素。
光合色素的提取和分离 ——纸层析法
要点： 【提取步骤】无水乙醇用来溶解色素； 二氧化硅用来使叶绿素研磨充分；
碳酸钙用来缓冲酸性环境，防止色素破坏。
【见初中课本】
[叶绿素含量测定]叶绿素含量测定
![[叶绿素含量测定]叶绿素含量测定](https://img.taocdn.com/s3/m/e49fc262ed630b1c59eeb5c1.png)
[叶绿素含量测定]叶绿素含量测定[叶绿素含量测定]叶绿素含量测定篇一 : 叶绿素含量测定叶绿素含量的测定根据朗伯-比尔定律，某有色溶液的吸光度A值与其中溶质浓度C以及光径L成正比，即A,aCL。
,)各种有色物质溶液在不同波长下的吸光值可通过测定已知浓度的纯物质在不同波长下的吸光度而求得。
如果溶液中有数种吸光物质，则此混合液在某一波长下的总吸光度等于各组分在相应波长下的吸光度的总和，这就是吸光度的加和性。
今欲测定叶绿体色素提取液中叶绿素a、b含量，只需测定该提取液在2 个特定波长下的吸光度度值，并根据叶绿素a与b在该波长下的吸光系数即可求出各自的浓度。
在测定叶绿素a、b含量时，为了排除类胡萝卜素的干扰，所用单色光的波长应选择叶绿素在红光区的最大吸收峰。
已知叶绿素a、b的80 ,丙酮提取液在红光区的最大吸收峰分别为663nm 和645nm，又知在波长663nm下，叶绿素a、b在该溶液中的比吸收系数分别为82.04 和9.27，在波长645nm下分别为16.75和45.60，可根据加和性原则列出以下关系式:A663=82.04Ca +9.27Cb………………A645=16.75Ca+45.6Cb………………式中A663、A664分别为波长663nm和645nm处测定叶绿素溶液的吸光度值;Ca、Cb分别为叶绿素a、b的浓度。
解联立方程、可得以下方程:Ca=0.0127A663-0.00269A645…………Cb=0.0229A645-0.00468A663…………如把叶绿素含量单位由g/L改为mg/L，、式则可改写为:Ca=12.7A663-2.69A645…………Cb=22.9A645-4.68A663…………叶绿素总量CT=Ca+Cb=20.2A645+8.02A663……叶绿素总量也可根据下式求导A652=34.5×CT由于652nm为叶绿素a与b在红光区吸收光谱曲线的交叉点，两者有相同的比吸收系数，因此也可以在此波长下测定一次吸光度求出叶绿素总量: CT=A652/34.5CT=A652×1000/34.5………因此，可利用、式可分别计算叶绿素a与b含量，利用式或式可计算叶绿素总量。
光合作用中色素的光谱分析
光合作用中色素的光谱分析光合作用是植物中最为重要的代谢过程之一，其实现的关键是色素分子。
而颜色的根基也是来自于色素。
因此，我们研究色素在光合作用中的作用是至关重要的。
本文将从光合作用中色素的光谱分析来探讨这个问题。
一、色素的种类在光合作用中，植物所涉及的色素包括叶绿素、类胡萝卜素、反式-类胡萝卜素和叶黄素。
其中，叶绿素是最为重要的色素，是进行光合作用的关键色素。
二、色素的吸收光谱光合作用中的色素分子对光有很强的吸收能力，吸收的光谱是确定其功能的关键。
吸收光谱的研究可以得出色素分子在不同波长和强度的光线下的吸收能力。
我们通过研究色素分子的吸收光谱，可以得出一下结论：1. 叶绿素吸收光谱呈现两个峰，一个在420nm左右，另一个在660nm左右。
这两个峰代表具有不同波长的光对叶绿素的吸收能力，分别是蓝光和红光。
2. 类胡萝卜素和反式-类胡萝卜素的吸收峰在450nm左右。
而叶黄素的吸收峰在400nm左右。
3. 叶绿素a和叶绿素b在不同波长下的吸收效果不同。
其中，叶绿素a在660nm左右的波长吸收效果更好，而叶绿素b在多种波长下的吸收效果都比叶绿素a弱。
三、色素的作用机制根据吸收光谱的研究结果，我们可以了解到不同色素在吸收不同波长和强度的光线时所起到的作用。
植物通过叶绿素吸收光线的能量，进而将其转化为化学能。
类胡萝卜素和反式-类胡萝卜素则通过吸收光线，起到保护叶绿素的作用。
在光合作用过程中，叶绿素通过吸收蓝光和红光的能量，将其转化为化学能，进而为植物的生长代谢提供能量。
而叶黄素作为一个副作用较小的色素，其吸收的光线穿透叶绿素分子后，被转化为热能散发出去。
四、结论通过对光合作用中色素的光谱分析，我们可以清楚的了解不同色素在吸收不同波长和强度的光线时所起到的作用。
这有助于我们进一步了解光合作用的机制，指导我们在农业和生态环境等领域中对植物的种植和保护。
总之，光合作用中色素的光谱分析对于我们对植物生长代谢以及控制植物生长环境有着重要的意义，而我们通过对其进行深入的研究，将为未来科学与技术的发展提供有用的参考。
叶绿素a和叶绿素b的快速鉴定
叶绿素a和叶绿素b的快速鉴定目录一、内容概括 (2)1. 叶绿素简介 (2)2. 叶绿素a与叶绿素b的重要性 (3)二、实验原理 (4)1. 叶绿素a与叶绿素b的光谱特性 (5)2. 鉴定原理 (5)三、材料与方法 (6)1. 实验材料 (7)样品来源 (8)样品处理 (8)2. 实验仪器与试剂 (9)萃光仪 (10)分光光度计 (10)缓冲液 (11)3. 实验步骤 (12)样品提取 (12)测定波长 (13)重复测定 (14)四、结果分析 (15)1. 叶绿素a与叶绿素b的吸收光谱图 (16)2. 数据处理与结果解读 (17)3. 结果讨论 (18)五、结论 (20)1. 快速鉴定叶绿素a与叶绿素b的效果 (21)2. 实验的局限性及改进方向 (21)一、内容概括本文档旨在介绍叶绿素a和叶绿素b的快速鉴定方法。
内容将涵盖叶绿素a和叶绿素b的基本性质、特点及其在生物体系中的重要性。
本文还将详细阐述快速鉴定叶绿素a和叶绿素b的流程和步骤，包括实验前的准备、实验操作的具体步骤以及结果的解析。
还将提及一些可能出现的问题以及解决策略，以确保实验的准确性和可靠性。
本文档旨在为研究人员、学生及叶绿素相关领域的从业者提供一种便捷、高效的鉴定方法，以推动相关领域的研究进展。
1. 叶绿素简介又称植物色素，是植物中一类重要的绿色色素，广泛存在于高等植物、藻类和某些微生物中。
它们是植物进行光合作用的关键色素，通过吸收和转化光能，将二氧化碳和水转化为有机物质，并释放氧气。
叶绿素的结构中包含一个镁原子，其骨架由两个吡咯环和一个碳链组成，这使得叶绿素具有特定的光谱特性，能够在特定波长下吸收光。
叶绿素a和叶绿素b是叶绿素中最主要的两种类型，它们在结构上有所不同。
叶绿素a的分子结构中除了镁原子外，还包含一个长链的碳链和一个醛基，这使得它呈现出蓝绿色的特征。
而叶绿素b的分子结构中则不含醛基，因此它呈现出黄绿色。
尽管这两种叶绿素在颜色上有所差异，但它们在光合作用中的作用却是相同的。
不同环境条件下植物叶绿素a、b含量的比较
一、实验课题名称：不同环境条件下植物叶绿素a、b含量的比较二、选题背景或文献综述：《植物生理学实验指导》（第四版）、《植物生理学》（第六版）、上网查阅相关资料阴生植物也称“阴性植物”，是在较弱的光照条件下生长良好的植物，但并不是阴生植物对光照强度的要求越弱越好，而是必须达到阴生植物的补偿点，植物才能正常生长，阳生植物也称“阳性植物”，光照强度对植物的生长发育及形态结构的形成有重要作用，在强光环境中生长发育健壮，在阴蔽和弱光条件下生长发育不良的植物称阳性植物，这类植物要求全日照，并且在水分、温度等条件适合的情况下，不存在光照过强的问题。
文档来自于网络搜索阳生植物和阴生植物的区别:关于光的饱和点和补偿点光是光合作用的能量来源，光照强度直接影响光合速率，在其它条件都适宜的情况下，在一定范围内，光合速率随光照强度提高而加快，当光照强度高到一定数值后，光照强度再提高而光合速率不再加快，这种现象叫光饱和现象。
开始达到光饱和现象的光照强度称为光饱和点，在光饱和点以下，随着光照强度减弱，光合速率减慢，当减弱到一定光照强度时，光合作用吸收二氧化碳量与呼吸释放二氧化碳的量处于动态平衡，这时的光照强度称为光补偿点。
此时植物制造有机物量和消耗有机物量相等，不同类型植物的光饱和点和补偿点是不同的，阳性植物的光饱和点和补偿点一般都高于阴性植物。
结构和特性的区别:阴生植物的叶片的疏导组织比阳生植物稀疏，以叶绿体来说，阳生植物有较大的基粒，基粒片层数目多的多，叶绿素含量也高，阴生植物在较低的光照条件下充分的吸收光线，叶绿素a/叶绿素b的比值小，能够强烈的利用蓝紫光，阳性植物叶片小而厚，表面具蜡质或绒毛，叶脉密，单位面积内气孔多，叶绿素含量高，体内含盐分多，渗透压高，可以抗高温干旱，阳生植物的气孔一般在叶片下表皮分布的数量多于上表皮，这样可以避免阳光直晒而减少水分散失，阳生植物的呼吸速率高于阴生植物。
区分阳生植物与阴生植物，主要是根据植物对光照强度需要的不同，阳生植物要求充分直射日光才能生长或生长良好，阴生植物适宜于生长在荫蔽环境中，它们在完全日照下反而生长不良或不能生长，阳生植物和阴生植物之所以能适应不同光照，是与它们的生理特征和形态特征不同有关，以光饱和点来说，阳生植物的光饱合点是全光照（即全部太阳光照）的100％，而阴生植物是全光照的10％～50％。