生物化学与分子生物学常用试剂配方
分子生物学实验室常用试剂的配制
一.常用贮液与溶液1mol/L亚精胺（Spermidine）:溶解2.55g亚精胺于足量的水中，使终体积为10ml。
分装成小份贮存于-20℃。
1mol/L精胺（Spermine）：溶解3.48g精胺于足量的水中，使终体积为10ml。
分装成小份贮存于-20℃。
10mol/L乙酸胺（ammonium acetate）：将77.1g乙酸胺溶解于水中，加水定容至1L后，用0.22um孔径的滤膜过滤除菌。
10mg/ml牛血清蛋白(BSA）：加100mg的牛血清蛋白（组分V或分子生物学试剂级，无DNA酶）于9.5ml水中（为减少变性，须将蛋白加入水中，而不是将水加入蛋白），盖好盖后，轻轻摇动，直至牛血清蛋白完全溶解为止。
不要涡旋混合。
加水定容到10ml，然后分装成小份贮存于-20℃。
1mol/L二硫苏糖醇（DTT）：在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4ml水，分成小份贮存于-20℃。
或转移100mg的二硫苏糖醇至微量离心管，加0.65ml的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。
8mol/L乙酸钾（potassiumacetate）：溶解78.5g乙酸钾于足量的水中，加水定容到100ml。
1mol/L氯化钾（KCl）：溶解7.46g氯化钾于足量的水中，加水定容到100ml。
3mol/L乙酸钠（sodiumacetate）：溶解40.8g的三水乙酸钠于约90ml水中，用冰乙酸调溶液的pH至5.2，再加水定容到100ml。
0.5mol/L EDTA:配制等摩尔的Na2EDTA和NaOH溶液（0.5mol/L），混合后形成EDTA的三钠盐。
或称取186.1g的Na2EDTA·2H2O和20g的NaOH，并溶于水中，定容至1L。
1mol/LHEPES：将23.8gHEPES溶于约90ml的水中，用NaOH调pH（6.8-8.2），然后用水定容至100ml。
1mol/L HCl：加8.6ml的浓盐酸至91.4ml的水中。
分子生物学实验常用试剂缓冲液的配制方法
分子生物学实验常用试剂缓冲液的配制方法1.常见试剂配制方法：(1)磷酸盐缓冲液（PBS）的配制方法：-配制PBS需要使用NaCl、KCl、Na2HPO4和KH2PO4等化学品。
-以10倍浓度配制PBS的浓缩溶液，然后稀释为需要的浓度。
-例如，1倍浓度的PBS可以通过将1升的10倍浓度PBS溶液加入9升蒸馏水来制备。
(2) 神经元无血清培养基（Neurobasal Medium）的配制方法：- 配制Neurobasal Medium需要使用神经元培养基基本成分及其他补充物质。
-根据制造商提供的配方，按照相应比例将各种化学品溶解在无菌蒸馏水中。
-配制好的培养基可以用于维持和培养神经元体外培养。
(3) 洗涤缓冲液（Washing Buffer）的配制方法：-配制洗涤缓冲液需要使用磷酸盐缓冲液（PBS）及其他添加剂。
- 将PBS溶液中加入适当浓度的Tween-20或者Tris-HCl来制备洗涤缓冲液。
-根据实验需求，可以调整洗涤缓冲液的成分和浓度。
(4) 乙醇（Ethanol）溶液的配制方法：-配制乙醇溶液常用的浓度有70%和100%。
- 70%的乙醇溶液可以通过将70ml无菌蒸馏水加入30ml无水乙醇中配制得到。
-100%的乙醇溶液可以直接使用无水乙醇。
2.常见缓冲液配制方法：(1) Tris/Tricine缓冲液的配制方法：- 配制Tris/Tricine缓冲液需要使用Tris（三羟甲基氨基甲烷）和Tricine（三甘胺酸）等化学品。
- 根据实验要求，在一定PH范围内，按照不同比例混合Tris和Tricine，溶解于适量的蒸馏水中。
(2) 氯化钾缓冲液（KCl Buffer）的配制方法：- 配制KCl Buffer需要使用KCl和其他添加剂。
-将适量的KCl和其他缓冲液成分溶解在蒸馏水中。
-根据实验要求，调整KCl的浓度和缓冲液的PH值。
(3) Tris/Acetate缓冲液的配制方法：- 配制Tris/Acetate缓冲液需要使用Tris和乙酸等化学品。
分子生物学实验室常用试剂配方
分子生物学实验室常用试剂配方：医药观察之我见2. 常用试剂配方（Prescriptions of Ordinary Reagents）（高媛）. (217)(1) PBS (217)(2) 胰酶Trypin (217)(3) Tris-NH4Cl (217)(4) Running buffer (218)(5) Washing buffer (218)(6) 湿转液 (218)(7) LB培养基 (218)(8) LB培养板 (218)PBS:PBS是磷酸缓冲盐溶液（phosphate buffer saline）一般作为溶剂，起溶解保护试剂的作用。
主要成分为Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和KCl，由于Na2HPO4和KH2PO4它们有二级解离，缓冲的pH值范围很广；而NaCl和KCl主要作用为增加盐离子浓度。
配置方法：NaCl : 320g 优级纯Na2HPO4. 12H2O 61.44gKCl 8gKH2PO4 8g三蒸水4L烧杯溶解后用HCl调PH为7.2-7.4，细胞用需要高温灭菌，放于超净台冷却，贴上封口膜及标签。
胰酶：Trypsin 一种胰蛋白酶，通过在特定位置上降解蛋白，使细胞膜上和培养皿壁结合处蛋白降解，使两者分离。
细胞消化胰酶常用工作浓度为0.25%，PH为7.2-7.4，储存液放在-20冻存，使用液放在4度。
Tris-NH4Cl :红细胞裂解液，是一种从人，鼠及其他哺乳动物等体内烦人组织样品或血液中裂解并去除无核红细胞的溶液，应用低渗的原理，改变红细胞渗透压，使得红细胞胀大破裂。
配置方法：2L 体系：NH4Cl : 14.94g 溶于1800mL ddH2O 混匀HCl调节PH为7.2-7.4 过滤Tris : 5.15g 溶于200mL ddH2O3L体系NH4Cl : 22.41g 溶于2700mL ddH2O 混匀HCl调节PH为7.2-7.4 过滤Tris : 7.725g 溶于300mL ddH2ORunning buffer: 4L （5X）Tris: 60.6gGly: 288.3gSDS: 20gddH2O 3.78LWashing buffer: 4L (10X)Tris : 48.6gNaCl : 116.9gTween 20 : 40mLddH2O: 3.9L湿转液：4L (10X)Tris: 121.4gGly: 576.6gddH2O 3.57LLB液体培养基：名字来源于英语lysogeny broth 即溶菌肉汤，应用最广泛和最普通的细菌基础培养基。
实验室常用染色液和试剂配方
实验室常用染色液和试剂配方染色液和试剂在实验室中被广泛使用，用于各种科学研究和实验。
它们可以用来染色细胞、分析化合物和反应产物、诊断疾病等。
下面是一些常用的染色液和试剂配方。
1. Hematoxylin-Eosin染色液：Hematoxylin-Eosin（HE）染色液是一种经典的组织染色方法，常用于病理学研究和诊断。
配方如下：- Hematoxylin染色液：将5 g hematoxylin溶解在100 mL乙醇中，加入2 mL盐酸和900 mL蒸馏水，最后调节pH值为5-6-酸性酒红染液：将0.5g酸性酒红溶解在100mL乙醇中。
- Eosin染色液：将0.5 g eosin溶解在100 mL乙醇中。
2. Giemsa染色液：Giemsa染色液用于染色细胞，特别是白细胞，常用于血液学和微生物学研究。
配方如下：- Giemsa染色液：将4 g Giemsa粉末溶解在1 L蒸馏水中。
可以加入2 mL甲醇增强染色效果。
3.厌氧培养试剂：用于厌氧条件下培养微生物的试剂。
配方如下：- Thioglycollate培养基：将11.5 g thioglycollate溶解在1 L蒸馏水中，加热至溶解。
- Dithiothreitol（DTT）溶液：将1 g DTT溶解在100 mL蒸馏水中，用10 mL离心管分装，-20℃保存。
4. Bradford试剂：用于蛋白质的浓度测定，常用于生物化学和分子生物学实验。
配方如下：- Coomassie Brilliant Blue G-250：将100 mg染料溶解在50 mL浓硫酸中，加热至溶解。
再用1 L蒸馏水稀释至30%浓度。
5. Gill's胶片显影试剂：用于胶片的显影，常用于分子生物学实验。
配方如下：-显影溶液A：将1.5g氯化钴和1g柠檬酸溶解在200mL蒸馏水中，用0.1MNaOH调节pH值至6.4-6.8-显影溶液B：将3g溴化钾和1g柠檬酸溶解在200mL蒸馏水中，用0.1MNaOH调节pH值至6.4-6.86.RIPA裂解缓冲液：用于细胞或组织的裂解，提取蛋白质或RNA，常用于生物化学和分子生物学实验。
分子生物学常用试剂配制
试剂配制：1、1 M Tris-HCl (pH 8.0): 称取Tris-Base 121g, 加入约800 ml 水在磁力搅拌器上搅拌，使其充分溶解后加入浓盐酸调整pH至8.0后加水定溶至1000 ml. 灭菌后于室温保存。
2、0.5 M EDTA (pH 8.0): 称取EDTA-Na2盐187 g 加入约800 ml水，在磁力搅拌器上边搅拌边加入固体NaOH，当EDTA和NaOH均完全溶解，溶液变清时其pH值刚好达到8.0左右，再用pH试纸略加调整即可, 灭菌后于室温保存。
3、5.0 M NaCl:称取NaCl 300 g, 加入蒸馏水约800 ml 于磁力搅拌器上充分搅拌，约5分钟后停止搅拌，静止2~3分钟，倒出上清液，再加入100 ml蒸馏水重复前面的步骤，直到NaCl充分溶解后定溶至1000 ml., 灭菌后于室温保存。
4、DNA Buffer的配制：1 M Tris-HCl (pH 8.0) 100 ml0.5 M EDTA (pH 8.0): 100 ml5.0 M NaCl: 300 mlH2O 500 ml灭菌后于室温下保存3个月左右，用时按往Buffer中加入15g CTAB，10g PVP在电炉上烧开；在通风橱里加入1%的巯基乙醇( 现配现用)。
5、5 X TBE溶液配制：约800 ml蒸馏水中加入Tris-base 54 g，硼酸27.5 g，充分溶解后加入0.5 M EDTA（pH: 8.0）定溶到1000 ml, 调节pH为8.0备用，于室温下短期存放。
使用时配制成1×TBE或0.5×TBE稀释缓冲液。
6、1XTE10ml 1M Tris-HCl (pH 8.0)，2ml 0.5M EDTA (pH 8.0)定溶到1000 ml, 调节pH为8.0备用。
实验室常用试剂和缓冲液配方
实验室常用试剂和缓冲液配方实验室中常用的试剂和缓冲液种类繁多，根据实验需求，可以根据不同的试剂和缓冲液配方来满足实验要求。
以下是一些常见的试剂和缓冲液配方，以及其用途和制备方法。
1. 磷酸缓冲液（Phosphate buffer）磷酸缓冲液常用于生化和分子生物学实验中，用于控制溶液的pH值，适用于酸性和碱性条件下。
常见的配方包括0.1M磷酸盐缓冲液（pH7.2-7.4），需要用磷酸盐和盐酸或氢氧化钠来制备。
2. 氯化钠溶液（Sodium chloride solution）氯化钠溶液是实验室中常见的缓冲液配方之一，通常用于调节生物样品的渗透压和离子浓度。
可以制备不同浓度的氯化钠溶液，常见的配方为0.9%氯化钠溶液（生理盐水）。
3. 碳酸氢盐缓冲液（Bicarbonate buffer）碳酸氢盐缓冲液常用于细胞培养和生理实验中，用于维持细胞培养基或实验液的pH稳定。
一种常见的配方为10mM碳酸氢盐缓冲液（pH7.2-7.4），需要用碳酸氢钠和盐酸来制备。
4. Tris缓冲液（Tris buffer）Tris缓冲液是一种常见的生化实验缓冲液，可以调节到不同的pH值。
常见的配方为50 mM Tris缓冲液（pH 7.4），需要用Tris（三氯甲烷磺酸，Tris-HCl）和盐酸来制备。
5. PBS缓冲液（Phosphate-buffered saline）PBS缓冲液是一种用于细胞和组织处理的常见缓冲液，具有稳定pH值和离子浓度的特点。
常见的配方为10mMPBS缓冲液（pH7.4），需要用磷酸盐和盐酸或氢氧化钠来制备。
6. 甘氨酸缓冲液（Glycine buffer）甘氨酸缓冲液常用于蛋白质电泳实验中，用作电泳缓冲液和传递缓冲液。
常见的配方为25mM甘氨酸缓冲液（pH8.3），需要用甘氨酸和盐酸来制备。
7. BSA溶液（Bovine serum albumin solution）BSA溶液是实验室中常见的蛋白质标准物质，用于测定蛋白质浓度和酶活性等实验。
分子生物学实验常用试剂、缓冲液的配制方法
实验常用试剂、缓冲液的配制方法1、1M Tris-HCl□组份浓度1 M Tris-HCl（pH7.4，7.6，8.0）□配制量1L□配置方法1. 称量121.1gTris置于1L烧杯中。
2. 加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。
pH值浓HCl7.4 约70mL7.6 约60mL8.0 约42mL4. 将溶解定容至1L。
5. 高温高压灭菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH 值随温度的变化差很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。
2、1.5 M Tris-HCl□组份浓度1.5 M Tris-HCl（pH8.8）□配制量1L□配置方法1.称取181.7gTris置于1L烧杯中。
2. 加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 用浓盐酸调pH值至8.8。
4. 将溶液定容至1L。
5. 高温高压灭菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。
3、10×TE Buffer□组份浓度100 mM Tris-HCl，10 mM EDTA （pH 7.4，7.6，8.0）□配制量1L□配置方法1. 量取下列溶液，置于1L烧杯中。
1 M Tris-HCl Buffer（pH7.4，7.6，8.0）100mL500 mM EDTA（pH8.0）20mL2. 向烧杯中加入约800mL的去离子水，均匀混合。
3. 将溶液定至1L后，高温高压灭菌。
4. 室温保存。
4、3 M 醋酸钠□组份浓度3 M 醋酸钠（pH5.2）□配制量100mL□配置方法1. 称取40.8gNaOAc•3H2O置于100～200mL烧杯中，加入约40mL的去离子水搅拌溶解。
2. 加入冰乙酸调节pH值至5.2。
3. 加入去离子水将溶液定容至100mL。
生物实验中常用的化学试剂配制方法
生物实验中常用的化学试剂配制方法生物实验中常用的化学试剂配制方法1．乳酸苯酚固定液乳酸10g, 结晶苯酚10g, 甘油20g, 蒸馏水10mL。
2. 1.6%溴甲酚紫溴甲酚紫1.6g溶于100mL乙醇中，贮存于棕色瓶中保存备用。
用作培养基指示剂时，每1000mL培养基中加入lmL 1.6%溴甲酚紫即可。
3. V.P.试剂CuSO4 1g，蒸馏水l0mL，浓氨水40mL，10% NaOH 950mL。
先将CuSO4溶于蒸馏水中，然后加浓氨水，最后加入10%NaOH。
4. 0.02%甲基红试剂甲基红0.1g，95% 乙醇760mL，蒸馏水100mL。
5. 吲哚反应试剂对二甲基氨基苯甲醛8g, 95%乙醇760mL，浓HCl160mL。
6. Alsever’s血细胞保存液葡萄糖2.05g, 柠橡酸钠0.8g, NaCl 0.42g，蒸馏水l00mL。
以上成分混匀后，微加温使其溶解后，用柠檬酸调节pH 6.1，分装于三角瓶中(30～50mL/瓶), 113℃湿热灭菌15min，备用。
7. Hank’s液(l)贮存液A液：(I)NaCl80g, KCl4g, MgSO4·7H2O1g，MgCl2·6H2O1g，用双蒸馏水定容至450mL：(II)CaCl2 1.4g (或CaCl2·2H2O 1.85g) 用双蒸馏水定容至50mL。
将I和II液混合，加氯仿1mL即成A液。
(2)贮存液B液：Na2HPO4·12H2O 1.52g，KH2PO4 0.6g, 酚红0.2g, 葡萄糖10g,用双蒸馏水定容至500mL，然后加氯仿1mL，酚红应先置研钵内磨细，然后按配方顺序一一溶解。
(3)应用液：取上述贮存液的A和B液各25mL，加双蒸馏水定容至450mL，113℃湿热灭菌20min。
置4℃下保存。
使用前用无菌的3% NaHCO3调至所需pH。
注意：药品必须全部用A.R试剂，并按配方顺序加入，用适量双蒸馏水溶解，待前一种药品完全溶解后再加入后一种药品，最后补足水到总量。
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30%聚丙烯酰胺溶液-----30%（w/v）Acrylamide 100mL将29克丙烯酰胺和1克N,N’-亚甲丙烯酰胺溶于总体积为60ml温热（37℃左右）的去离子水中，充分搅拌溶解，补加水至终体积为100ml。
0.45µm微孔滤膜过滤除菌和杂质，储于棕色瓶，4℃避光（用铝箔纸包扎起来）保存。
严格核实PH不得超过7.0，因可以发生脱氨基反应是光催化或碱催化的。
使用期不得超过两个月，隔几个月须重新配制。
如有沉淀，可以过滤。
【保存条件】4℃避光（用铝箔纸包扎起来）保存【注意事项】丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可通过皮肤吸收，其作用具有累积性。
称量丙烯酰胺和N,N’-亚甲丙烯酰胺时应戴手套和面具。
可认为聚丙烯酰胺无毒，但也应谨慎操作，因为它还可能含有少量未聚合材料。
5×Tris-甘氨酸电泳缓冲液----- 5×Tris-Glycine buffer （SDS-PAGE电泳缓冲液）称取15.0gTris，94.0g甘氨酸（glycine），5.0gSDS，用800ml蒸馏水或去离子水溶解，充分搅拌溶解，定容至1000ml，室温保存。
得0.125mol/L Tris-1.25mol/L甘氨酸电极缓冲液。
临用前稀释5倍。
【保存条件】室温保存，两年有效。
【注意事项】配制好的电泳液使用时间不宜超过两周。
电泳缓冲液可以回收，回收后可再使用1-2次，但为了取得最佳的电泳效果，应使用新电泳液。
摘自Takara 商品目录--实验室常规试剂配制方法10%十二烷基硫酸钠SDS溶液-----10%(w/v)SDS 配制20mL【组分浓度】10%(w/v)SDS【配制方法】称取2g高纯度的SDS置于100~200ml烧杯中，加入约16ml的去离子水，68℃加热溶解，滴加浓盐酸调节PH至7.2，定容至20ml后，室温保存【保存条件】室温保存【注意事项】对人体有害，请注意防护。
摘自Takara 商品目录--实验室常规试剂配制方法膜转移缓冲液(Transfer Buffer)配方一：takara称取2.9g甘氨酸（glycine），5.8gTris碱，0.37g SDS溶于约600mL的去离子水，充分搅拌溶解，定容至800mL后，并加入200ml甲醇，摇晃混匀，室温保存。
【保存条件】室温保存【注意事项】1 SDS妨碍蛋白与膜的结合，特别是对小蛋白更是如此，因此，对于小分子的蛋白，电转移缓冲液中可以不加SDS。
2保持20%的甲醇浓度摘自Takara 商品目录--实验室常规试剂配制方法膜转移缓冲液(Transfer Buffer)(pH8.5)配方二：cell signal先配制1M Tris base (MW:121.1) 100ml: 12.1g Tris base + ddH2O至100ml,PH约111M 12.5ml Tris base + 7.5g glycine(MW:75.05) +100ml methanol+ ddH2O 至400ml,调好PH值8.5, 再加ddH2O至500ml. 先置于4℃保存备用。
【保存条件】4℃保存【注意事项】1 SDS妨碍蛋白与膜的结合，特别是对小蛋白更是如此，因此，对于小分子的蛋白，电转移缓冲液中可以不加SDS。
2保持20%的甲醇浓度摘自Cell signal Technology Protocol/support/protocols/Western.html1MTris-HCL（pH6.8）配制10mL【组分浓度】1MTris-HCL【配制方法】称量121.1gTris碱溶于800mL的去离子水，充分搅拌溶解，加>0.7mL的浓HCL调节所需要的pH值（7.4-大约0.7mL，7.6-大约0.6mL，8.0-大约0.42mL），将溶液定容至1L，高温高压灭菌后，室温保存。
应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。
【保存条件】室温保存。
【注意事项】对人体有刺激性，请注意适当防护。
摘自Takara 商品目录--实验室常规试剂配制方法1.5MTris-HCL（pH8.8）配制20mL【组分浓度】1.5MTris-HCL【配制方法】1L称量181.7gTris碱溶于800mL的去离子水，充分搅拌溶解，加浓HCL调节所需要的pH值=8.8，将溶液定容至1L，高温高压灭菌后，室温保存。
（1.5mmol/LTris-HCL(pH8.8):18.15gTris和48ml1mol/LHCL 混合，加水稀释到100ml终体积。
过滤后40C保存。
）【保存条件】室温保存【注意事项】应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。
摘自Takara 商品目录--实验室常规试剂配制方法5×SDS-PAGE加样缓冲液----- 5×SDS-PAGE Loading Buffer 需要3ml【组分浓度】0.25MTris-HCL(pH6.8)；10%(W/V)SDS；0.5%(W/V) BPB(溴酚蓝)；50%(V/V) 甘油；5%(W/V)β-巯基乙醇(2-ME)量取1.25mL 1MTris-HCL（pH6.8），0.5g SDS，25mg BPB，2.5mL甘油，置于10mL塑料离心管中，加去离子水溶解后，定容至5mL，小份（0.5mL/份）分装，于室温保存。
使用前将25μL的2-ME加入到每小份中。
加入2-ME的Loading Buffer可在室温下保存一个月左右。
【保存条件】-20℃保存，至少一年有效。
【注意事项】SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5X)中含少量DTT和巯基乙醇，有轻微刺激性气味，必须完全溶解后再使用。
摘自Takara 商品目录--实验室常规试剂配制方法10%过硫酸铵溶液-----10%(w/v)AP 1ml【组分浓度】10%(w/v) 过硫酸铵【配制方法】称取0.1g过硫酸铵置于1.5ml离心管，加1ml去离子水吹打溶解，4℃保存【保存条件】4℃保存【注意事项】10%过硫酸铵溶液在4℃保存时，可使用2周左右，超过期限会失去催化作用一次性称取4、5管过硫酸铵（0.1g/管），使用时加1ml去离子水溶解摘自Takara 商品目录--实验室常规试剂配制方法TBST Buffer【组分浓度】20mMTris-HCL150mM NaCl；0.05%（v/v）Tween 20称量8.8g NaCl , 20ml 1MTris-HCL(pH8.0)置于1L烧杯中，加约800ml的去离子，磁力搅拌30min 充分溶解，加入0.5ml Tween20后充分混匀，去离子水定容至1L，4℃保存【保存条件】4℃保存【注意事项】Tween20 非常粘稠，用枪头不易吸取，请确定加入准确的量摘自Takara 商品目录--实验室常规试剂配制方法10xTBS (concentrated TBS)-- 10X Tris Buffered Saline【组分浓度】200 mM Tris1.37M NaCl(Sodium Chloride)【配制方法】1L称量24.23g Tris base, 80.06g NaCl，加约800 ml 超纯水，用纯HCl调pH 至7.6，定容至 1 L. 【保存条件】【注意事项】摘自Cell signal Technology Protocol/support/protocols/Western.htmlTris Buffered Saline with Tween 20 (TBST-1X)【组分浓度】20mM Tris,137mM Sodium Chloride,量取100ml 10xTBS(pH 7.6)+ 1ml Tween-20，加约900ml去离子水定容至1L【保存条件】4℃保存【注意事项】Tween20 非常粘稠，用枪头不易吸取，请确定加入准确的量(可以称量1ml的质量，依据质量确定所需0.2/0.3/0.4ml), 最好用Tris buffer.配成10%的Tween20母液后使用。
摘自Cell signal Technology Protocol/products/9997.html封闭缓冲液-----Blocking Buffer:5%(w/v)脱脂奶粉/TBST Buffer称量5g脱脂奶粉加入到100ml的TBST Buffer中，充分搅拌溶解，4℃保存待用,本封闭液现用现配。
【保存条件】4℃保存【注意事项】本封闭液现用现配摘自Takara 商品目录--实验室常规试剂配制方法一抗稀释液-----Primary Antibody Dilution Buffer【组分浓度】1X TBS, 0.1% Tween-20 with 5% BSA or 5% nonfat dry milk(封闭液)称量1g脱脂奶粉加入到20ml的TBST Buffer中，充分搅拌溶解，4℃保存待用,本封闭液现用现配。
【保存条件】4℃保存【注意事项】本封闭液现用现配1X TBS, 0.1% Tween-20 with 5% BSA or 5% nonfat dry milk as indicated on primary antibody datasheet; for 20 ml, add 2 ml 10X TBS to 18 ml water, mix. Add 1.0 g BSA or nonfat dry milk and mix well. While stirring, add 20 μl Tween-20 (100%).摘自Cell signal Technology Protocol/support/protocols/Western.html二抗稀释液-----TBSTECL工作液显影液和定影液配制：先称量显影液2个组份的总重量，做好记录，写在标签上。
显影液配制：1瓶显影液可以配制1L，1月内有效，根据实验需要每次配100ml称取1/10重小袋粉，溶于约60ml 50℃温水中，小袋粉溶解后溶液呈淡粉红色再称取1/10重量的大袋粉，溶于其中，定容至100ml，液体略显黄色显影液配好后，棕色瓶4℃避光保存，刚开始略显黄色，如果液体变成黄褐色即失效，需重新配制。
定影液配制：称取定影粉重量的1/10，溶解于25℃温水100ml中，棕色瓶4℃避光保存。