果胶含量的测定方法二
果胶物质的测定
流动水冷却至室温
在530nm 下
沸水浴加热10min
混合，冷却
充分混合，室温 放置30min
以0号为空白测 定吸光度 果胶提取液 稀释
绘制标准工作曲 线
含半乳糖醛 酸约 10-70ug ml
2ml稀释液与50ml比色管中
测吸光度查浓度
结果计算：
ρV K
X=——— ×100 m×10
6
式中：X——果胶物质（以半乳糖醛酸计）的含量，g／100g
主讲: 主讲:亓新会
果胶物质的定义及形态
果 胶 物 质 的 测 定
果胶物质在食品中的应用 果胶酸钙滴定法
蒸馏滴定法 果胶物质的测定 重量法
咔唑比色法
果胶物质
定义：果胶物质是一种植物胶，存在于果蔬类植物组织中，是构成植物细胞的主要成 分之一。
原果胶：果蔬未成熟时，存在于细胞壁中
果胶 物质 的形 态
果胶酸酯：可溶性
区别在于甲 氧基含量或 酯化程度不 同
果胶酸
(1)原果胶(Protopectin)：植物在未成熟前，果胶物质相互间，或它与半纤维素 (1)原果胶(Protopectin)：植物在未成熟前，果胶物质相互间，或它与半纤维素 及钙盐之间，以机械方式或化学方式相结合，形成了不溶于水的物质。原果 胶可以成为一种不溶于水的、亲水能力很大的结合剂，这时原果胶具有增稠 作用。 在酶的作用下，草莓等成熟的果实和胡萝卜等蔬菜中的原果胶，能逐渐变为 果胶酯酸。于是，一部分果胶物质呈溶解状态而存在细胞液中。原果胶在水 或酸性溶液中加热，也同样可转变为果胶酯酸。 或酸性溶液中加热，也同样可转变为果胶酯酸。
(2)果胶酯酸(Pectinic acid)：它的基本结构是 (2)果胶酯酸(Pectinic acid)：它的基本结构是 多聚半乳糖醛酸，呈胶态。其中甲基酯的含 量是可变的。酯化程度100%的完全甲基化的 量是可变的。酯化程度100%的完全甲基化的 果胶酯酸，甲氧基(CH3O— 含量为16.32%。 果胶酯酸，甲氧基(CH3O—)含量为16.32%。 按甲氧基含量的不同，果胶酯酸分为两类。 甲氧基含量大于7%的，叫作高甲氧基果胶( 甲氧基含量大于7%的，叫作高甲氧基果胶(又 称果胶，Pectin)；甲氧基含量小于7%的，叫 称果胶，Pectin)；甲氧基含量小于7%的，叫 作低甲氧基果胶(又称低酯果胶) 作低甲氧基果胶(又称低酯果胶)。果胶酯酸与 糖和酸在适当条件下能形成凝胶。甚至，不 用加糖，只要有多价正离子存在，，低酯果 胶也可形成凝胶。果胶酯酸的游离羧基与金 属离子可形成正盐或酸式盐。
造纸原料果胶含量的测定
造纸原料果胶含量的测定
果胶是一种常见的造纸原料，它的质量是影响造纸效果的重要因素。
因此，测定果胶含量是非常重要的。
学习测定果胶含量，首先要了解相关的理论知识。
果胶的定义，果胶的组成成分，果胶的收获和加工等，以及与果胶有关的分析技术，如果没有基础的知识，将无法准确测定果胶含量。
其次，要熟悉相关的实验方法。
目前，主要采用微新型光度法和液体析出法，测定果胶含量。
光度法是通过测量果胶经紫外线照射后发射的某些特定波长的光动态变化，来估算果胶含量；而液体析出法是通过将果胶与某种浓度的溶剂混合，使果胶迅速溶解，并用比色法或层析技术测定果胶含量。
最后，遵守安全和卫生要求。
在操作实验的时候，要严格遵守安全操作规程，确保实验无任何安全隐患。
对所有样品，实验前后应进行卫生消毒，并保持实验环境卫生，这样才能保证测试结果的可靠性。
以上就是测定果胶含量的基本方法，只要按照[正确的]方法来进行，就可以得到准确的测试结果。
果胶的测定
韩雅珊．1992(2002)?．食品化学实验指导[M]．中国农业大学出版社果胶的测定：一、实验原理本实验采用钙离子螯合剂和果胶酶提取水果中的总果胶物质，然后用分光光度法测定总果胶物质，先用乙醇处理样品，使果胶沉淀，再用乙醇溶液洗涤沉淀，除去可溶性糖类、脂肪、色素等物质，从残渣中提得果胶物质。
采用NaOH溶液将果胶物质皂化，生成果胶酸钠，再经乙酸酸化使之生成果胶酸，再加入果胶酶使之水解。
分光光度法测定是以果胶分子的基本结构单位——半乳糖醛酸和咔唑的反应为基础的。
果胶经水解生成半乳糖醛酸，在强酸中与咔唑发生缩合反应，生成紫红色化合物，其呈色强度与半乳糖醛酸含量成正比，测定的结果可用脱水半乳糖醛酸（AUA）。
二、实验仪器与试剂仪器：玻璃器皿烧杯、试管、玻棒、胶头滴管、容量瓶、PH计、分光光度计试剂：①果胶酶提取液：1份果胶酶试剂和10份水在一起搅拌1h，然后离心除去沉淀，上清液即为果胶酶提取液；②1%EDTA溶液（乙二胺四乙酸）；③醋酸溶液（1份醋酸+2份水）；④浓硫酸；⑤95%乙醇；⑥精制乙醇：在1L 95%乙醇中，加入4g锌粉和4ml硫酸（1+1），在水浴中回流24h，然后蒸馏，在馏出液中加入4g锌粉和4gKOH后再蒸馏一次；⑦一水半乳糖醛酸。
三、实验步骤1、果胶物质的提取将10g新鲜橘皮和125ml95%乙醇一起捣碎，抽滤后保留沉淀，用50ml75%乙醇洗涤沉淀两次，将沉淀转移到250ml烧杯中，加入100ml 1%EDTA溶液，用1mol/LNaOH 将PH调节至11.5，保持30min后，再用醋酸溶液将果胶溶液酸化到PH5.0，然后加入10ml 果胶酶提取液，搅拌0.5h后，定容至250ml，用脱脂棉过滤，弃去沉淀和前20ml滤液，吸取部分滤液稀释10倍，作为测定果胶含量的样品。
2、半乳糖醛酸的比色测定在20Ⅹ200mm试管中准确加入12ml浓硫酸，用冰浴将试管及内容物冷却到3℃，吸入1.00ml待测溶液，每毫升溶液中含5~40µg果胶物质。
果胶的鉴定实验报告
一、实验目的1. 掌握果胶的提取和鉴定方法。
2. 了解果胶的化学性质及其在食品工业中的应用。
二、实验原理果胶是一种高分子化合物，主要由半乳糖醛酸组成。
在酸性条件下，果胶可以发生水解反应，生成果胶酸和果酸。
果胶具有胶凝（凝冻）特性，在一定条件下可以形成凝胶。
本实验通过重量法、比色法和容量法对果胶进行鉴定。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：苹果、梨、胡萝卜等富含果胶的植物材料，NaCl、CaCl2、甲醇、乙醇、丙酮、咔唑、醋酸、NaOH等试剂。
2. 实验仪器：电子天平、烧杯、玻璃棒、漏斗、滤纸、容量瓶、滴定管、分光光度计、烘箱等。
四、实验步骤1. 果胶提取（1）将植物材料洗净，切成小块。
（2）将植物材料放入烧杯中，加入150ml水，煮沸1h（搅拌加水解，避免损失）。
（3）冷却后，用漏斗和滤纸过滤，收集滤液。
2. 重量法鉴定（1）取25ml滤液于500ml烧杯中，加入0.1N NaOH 100ml，静置30min。
（2）加入50ml 1N 醋酸和50ml 2N CaCl2，煮沸5min。
（3）用烘至恒重的滤纸过滤，用热水洗至无Cl-。
（4）将滤纸残渣放入烘干恒重的称量瓶内，105℃烘至恒重。
3. 比色法鉴定（1）取5ml滤液于试管中，加入2ml 2%咔唑溶液，混匀。
（2）加入5ml 1mol/L HCl，混匀。
（3）在沸水浴中加热10min。
（4）取出试管，冷却至室温。
（5）用分光光度计在波长530nm处测定吸光度。
4. 容量法鉴定（1）取一定量的滤液，加入适量的蒸馏水，使其成为稀释液。
（2）取稀释液一定体积，加入适量的BaCl2溶液，生成白色沉淀。
（3）用滴定管滴加标准NaOH溶液，直至沉淀完全溶解。
（4）根据滴定结果，计算果胶含量。
五、实验结果与分析1. 重量法鉴定：根据滤纸残渣重量，计算出果胶含量。
2. 比色法鉴定：根据吸光度，计算出半乳糖醛酸含量，进而计算出果胶含量。
3. 容量法鉴定：根据滴定结果，计算出果胶含量。
咔唑比色法测定果胶含量
咔唑比色法测定果胶含量-标准曲线的制作1方法原理方法基于果胶物质水解，生成半乳糖醛酸在强酸中与咔唑的缩合反应。
然后，对其紫红色呈色溶液进行比色定量。
2试剂(1)乙醇(化学纯)：无水乙醇和950mL·L-1乙醇。
(2)精制乙醇：取无水乙醇(化学纯)或950mL·L-1乙醇1000mL，加入Zn粉4g和硫酸(1∶1)4mL，置恒温水浴中回流10h后，用全玻璃仪器蒸馏。
馏出液每1000mL加入Zn粉和KOH各4g，进行重蒸馏。
(3) 1.5g·L-1咔唑乙醇溶液：称取化学纯咔唑0.150g，溶解于精制乙醇，并定容至100mL。
(4)标准半乳糖醛酸：以医药公司上海化学试剂采购供应站分装的L.Light出品α-D水解半乳糖醛酸作为标准半乳糖醛酸。
(5)浓硫酸(优级纯)(注2)。
(6)0.05mol·L-1HCl溶液。
3 操作步骤(1)半乳糖醛酸标准曲线的制作：准确称取α-D-水解半乳糖醛酸100mg，溶解于蒸馏水，并定容至100mL，混合后得1mg·mL-1的半乳糖醛酸原液。
移取上述原液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0mL，分别注入100mL容量瓶中，稀释至刻度，即得一系列浓度为10、20、30、40、50、60、70μg·mL-1的半乳糖醛酸标准溶液。
取30mm×200mm的硬质大试管7支，用吸管注入浓H2SO4各12mL。
置冰水浴中冷却，边冷却边分别沿壁徐徐加入上述不同浓度的半乳糖醛酸标准溶液各2mL，充分混合后，再置冰水浴中冷却。
然后，在沸水浴中加热10min，冷却至室温后，加入1.5g·L-1咔唑溶液各1mL，充分混和。
另以蒸馏水代替半乳糖醛酸标准溶液，依上法同样处理，作为试剂空白。
室温下放置30min后，用721型分光光度计，在波长530nm下，分别测定其吸光度(A)，以测得的吸光度(A)为纵座标，每mL标准溶液中半乳糖醛酸的含量为横座标，制作标准曲线。
果胶的提取与果胶含量的测定
果胶的提取与果胶含量的测定一、引言果胶广泛存在于水果和蔬菜中，如苹果中含量为—%（以湿品计），在蔬菜中以南瓜含量最多（达7%-17%）。
果胶的基本结构是以α-1，4苷键连接的聚半乳糖醛酸，其中部分羧基被甲酯化，其余的羧基与钾、钠、铵离子结合成盐。
在果蔬中，尤其是未成熟的水果和皮中，果胶多数以原果胶存在，原果胶通过金属离子桥（比如Ca2+）与多聚半乳糖醛酸中的游离羧基相结合。
原果胶不溶于水，故用酸水解，生成可溶性的果胶，再进行提取、脱色、沉淀、干燥，即为商品果胶。
从柑橘皮中提取的果胶是高酯化度的果胶（酯化度在70%以上）。
在食品工业中常利用果胶制作果酱、果冻和糖果，在汁液类食品中作增稠剂、乳化剂。
二、实验材料、试剂与仪器材料：桔皮，苹果等；试剂：% HCL，95%乙醇（AR），精制乙醇，乙醚，L HCl，%咔唑乙醇溶液，半乳糖醛酸标准液，浓硫酸（优级纯）仪器：分光光度计，50mL比色管，分析天平，水浴锅，回流冷凝器，烘箱等三、实验步骤（一）果胶的提取1、原料预处理：称取新鲜柑橘皮20g（或干样8g），用清水洗净后，放入250mL 容量瓶中，加水120mL，加热至90℃保持5-10min，使酶失活。
用水冲洗后切成3～5mm的颗粒，用50℃左右的热水漂洗，直至水为无色、果皮无异味为止（每次漂洗必须把果皮用尼龙布挤干，在进行下一次的漂洗）。
2、酸水解提取：将预处理过的果皮粒放入烧杯中，加约60mL % HCL溶液，以浸没果皮为宜，调pH至～，加热至90℃煮45min，趁热用100目尼龙布或四层纱布过滤。
3、脱色：在滤液中加入～%的活性炭，于80℃加热20min，进行脱色和除异味，趁热抽滤（如抽滤困难可加入2%～4%的硅藻土作为助滤剂）。
如果柑橘皮漂洗。
干净萃取液为清澈透明则不用脱色．4、沉淀：待提取液冷却后，用稀氨水调pH至3～4。
在不断搅拌下加入95%乙醇溶液，加入乙醇的量约为原体积的倍，使酒精浓度达到50%～65%。
果胶含量的测定方法
果胶含量的测定方法嘿，小朋友们！我来给你们讲讲果胶含量怎么测定啦。
嘿，你们知道吗？这就像是一场小小的侦探游戏呢。
有一种方法是重量法。
就好像我们要称一称果胶有多重一样。
首先呢，我们要把含有果胶的东西，比如水果或者蔬菜，弄成小小的碎块。
这就像我们把积木拆成一个个小方块一样。
然后，我们把这些碎块放在一种特别的液体里。
这种液体可以把果胶从其他东西里面分离出来。
等果胶都出来之后，我们再用一种神奇的方法，让果胶变成固体。
就像把水变成冰一样。
这个时候，我们就可以用一个小秤来称一称果胶有多重啦。
就像我们称自己的小玩具一样。
比如说，我们要测苹果里的果胶含量。
我们把苹果切碎，放进液体里，果胶跑出来后，我们把它变成固体，称出重量，再和苹果原来的重量比一比，就能知道果胶占了多少啦。
还有一种是比色法呢。
这就更有意思啦。
果胶有一种本领，它能和一些化学物质发生反应，反应之后会变出颜色来。
我们先把含有果胶的样品准备好，还是像前面一样弄成碎块。
然后，我们加入那些能和果胶反应的化学物质。
等反应完了，我们就会看到有颜色出现啦。
颜色的深浅和果胶的含量是有关系的。
就像我们画画的时候，颜料用得多，颜色就深；颜料用得少，颜色就浅。
我们可以用一种专门的仪器，看看颜色有多深，然后就能算出果胶有多少啦。
比如说，我们用橙子来测。
把橙子弄碎后，加入化学物质，有了颜色变化后，通过仪器看颜色深浅，就能知道橙子里果胶的含量啦。
另外，还有容量法。
这就像是用量杯量东西一样。
我们把含有果胶的东西处理一下，让果胶和其他化学物质反应。
这个反应会消耗一些液体。
我们通过知道消耗了多少液体，就能算出果胶的含量啦。
就像我们知道喝了多少果汁，就能算出还剩下多少一样。
这些方法都能帮助我们找到果胶这个小调皮鬼，知道它藏在食物里有多少呢。
果胶测定国标
果胶测定国标果胶是一种天然的多糖，在食品、医药、化工等领域都有广泛应用。
果胶的含量和品质检测是保证产品质量的重要手段。
目前，国内用于果胶含量检测的方法较多，其中GB/T 22405-2008《果胶含量的测定》是一项通用方法。
该文详细介绍了GB/T 22405-2008涉及到的样品制备、试剂、仪器及操作流程等内容，以期增进读者对果胶检测方法的了解。
一、适用范围本标准适用于水果、蔬菜、糖果、果酱、果脯等产品中的果胶含量的测定。
二、样品制备1. 选择符合要求的样品。
从已知品种的样品中挑选质量良好、没有病虫害、不含过多水分的样品。
如样品经过冷冻或烘干等处理，应在一定条件下还原样品的含水量和组分构成。
2. 样品制备。
样品分为以下两类：(1)加热提取法。
将样品磨碎或切成小块，以水或盐酸为溶剂进行提取，得到果胶及其他化学成分。
这种方法比较适用于需要解决胶质组分的产品。
具体步骤如下：①将约5g干样品磨碎或切成小块，放入蒸发皿内。
②加入10mL蒸馏水，混合均匀。
③将蒸馏水加温至100℃，煮沸1h。
④冷却后将提取液移入250mL容量瓶，用蒸馏水补足至刻度线。
①将约2g干样品磨碎或切成小块，加入100mL含5% HCl的二硫化碳溶液中，封紧瓶盖。
②在室温下振荡酸解24h。
③感光滤液器滤除大口碎屑，用蒸馏水冲洗滤纸至可通过0.45μm滤膜为止。
三、试剂1. 拉曼光谱法定量分析标准品2. 0.05mol/L NaOH溶液3. 氨溶液，pH调至7-84. 氢氧化钠，10g/L 氨水溶液5. 氨硫酸，3mol/L 氨水溶液6. 95% 乙醇7. 1, 2-丙二醇8. 2-甲基-2-丁醇9. N-(1-萘基)乙二胺，称量出0.5g+N-(1-萘基)乙二胺，加入5mL 1, 2-丙二醇中，溶解后加蒸馏水定容至1000mL。
10. D- 核糖16. Dimethylsulfoxide, DMSO17. Methyl alcohol, CH3OH18. 苯乙酮19. 地龙酸葡萄糖酰胺酶20. 过氧化氢四、仪器1. 电子天平2. 恒温水槽或恒温器3. 精密分析天平4. 烘箱5. 磁力搅拌器6. 开口离心机7. pH计8. 原子吸收分光光度计9. 拉曼光谱仪五、操作流程1. 标准品制备①从1, 2-丙二醇、95% 乙醇和2-甲基-2-丁醇中，各取30吨，称量到250ml的量筒中，然后将其混合均匀。
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果胶的测定（方案一）：
黄晓钰，刘邻渭等．食品化学综合实验[M]．中国农业大学出版社. 2002．158~159
实验原理：果胶经水解，其产物——半乳糖醛酸可在强酸环境中与咔唑试剂产生缩合反应，生成紫红色化合物，其呈色深浅与半乳糖醛酸含量成正比，由此可进行比色定量
测定果胶。
实验试剂：1.化学纯无水乙醇或95%乙醇。
2.精制乙醇：取无水乙醇或95%乙醇1000ml，加入锌粉4g，硫酸（1:1）4ml，
至于衡温水浴中回流10h，用全玻璃仪器蒸馏，馏出液每1000ml加锌粉和氢
氧化钾各4g，并进行蒸馏。
3. 0.15%咔唑乙醇溶液：称取咔唑g，溶于精制乙醇并定容至100ml。
4.半乳糖醛酸标准溶液：先用水配置成浓度1 g/L的溶液，再配制成浓度分别为
（0、10mg/L、20 mg/L、30 mg/L、40 mg/L、50 mg/L、60 mg/L、70mg/L）的
系列半乳糖醛酸标准溶液。
5.优级纯浓硫酸。
操作方法：1样品处理：
总果胶提取：（鲜样）研磨新鲜样品50g，放入1000ml烧杯中，加入L HCl
400mL，放置沸水浴中加热1h，加热时应随时补充蒸发损失的水分。
冷却后，
移入500ml容量瓶，定容摇匀，过滤，滤液待用。
（干样）磨细的干燥样品
5g，置于250ml三角烧瓶，加入L HCL 150ml，装上冷凝器，与沸水浴中加热
回流1h，取出冷却甚至室温，用水定容至200ml，摇匀，过滤，滤液待用。
水溶性果胶提取：新鲜样品应尽量研磨碎，干燥的样品应磨细后过60目筛。
样品中存在有果胶酶时，为了顿化酶的活性，可以加入适量热的95%乙醇，
是样品溶液的乙醇最终浓度约为70%，然后于沸水浴中沸腾回流15min，使果
胶酶钝化，冷却过滤后，以95%乙醇洗涤多次，再用乙醚洗涤，以除去全部
糖类、脂类及色素，最后风干除去乙醚。
2果胶提取：水溶性果胶的提取：将样品研碎，新鲜样品标准称取30~50g，干
燥样品准确称取5~10g至于250ml烧杯，加入150ml水。
加热至沸腾，并保
持此状态1h。
加热过程随时填补蒸发损失的水分。
取出冷却，将杯中物质移
入250ml容量瓶，用水洗涤烧杯，洗液并入容量瓶，最终定容至刻度，摇匀
过滤，记录滤液体积。
3标准曲线制作：取试管8支，各加入12ml浓硫酸，置冰水浴中冷却后，分别
将各种浓度的半乳糖醛酸2ml 徐徐各加入试管中，充分混匀后，再置冰水浴
中冷却，然后置沸水浴中加热10min，迅速冷却至室温，各加入1ml %咔唑试
剂，摇匀，与室温下静置30min，用0好使观众的溶液调仪器零点，在530nm
波长下测定各管溶液的A530nm值，以A为横坐标，半乳糖醛酸浓度为纵坐标
绘制标准曲线。
4测定：取果胶提取液用水稀释至适量浓度（含半乳糖醛酸10~70mg/L）。
移
取12ml 冰水冷却的浓硫酸加入试管中，然后加入2ml 样品稀释液，充分混
合后，至于冰水冷却。
取出后在沸水浴中加热10min，冷却至室温，加入1mL %
咔唑试剂，摇匀，于室温下静置30min，用空白试剂调零，在530nm波长下
测定A530nm值，与标样对照，求出样品果胶含量。
计算：
可溶性果胶质含量（以半乳糖醛酸计）=100%1000
10g 100200mg/⨯⨯⨯⨯⨯）样品质量（）半乳糖醛酸（L
说明：1糖分的存在对本法比色反应较大，使结果偏高，故样品中的糖分应预先出尽。
2硫酸浓度对显色有影响，操作时必须保持硫酸浓度一致。
果胶的测定（方案二）：
一、 实验原理
本实验采用钙离子螯合剂和果胶酶提取水果中的总果胶物质，然后用分光光度法测定总果胶物质，先用乙醇处理样品，使果胶沉淀，再用乙醇溶液洗涤沉淀，除去可溶性糖类、脂肪、色素等物质，从残渣中提得果胶物质。
采用NaOH 溶液将果胶物质皂化，生成果胶酸钠，再经乙酸酸化使之生成果胶酸，再加入果胶酶使之水解。
分光光度法测定是以果胶分子的基本结构单位——半乳糖醛酸和咔唑的反应为基础的。
果胶经水解生成半乳糖醛酸，在强酸中与咔唑发生缩合反应，生成紫红色化合物，其呈色强度与半乳糖醛酸含量成正比，测定的结果可用脱水半乳糖醛酸（AUA ）。
二、 实验仪器与试剂
仪器：玻璃器皿烧杯、试管、玻棒、胶头滴管、容量瓶、PH 计、分光光度计
试剂：①果胶酶提取液：1份果胶酶试剂和10份水在一起搅拌1h ，然后离心除去沉淀，上清液即为果胶酶提取液；②1%EDTA 溶液（乙二胺四乙酸）；③醋酸溶液（1份醋酸+2份水）；④浓硫酸；⑤95%乙醇；⑥精制乙醇：在1L 95%乙醇中，加入4g 锌粉和4ml 硫酸（1+1），在水浴中回流24h ，然后蒸馏，在馏出液中加入4g 锌粉和4gKOH 后再蒸馏一次；⑦一水半乳糖醛酸。
三、 实验步骤
1、 果胶物质的提取
将10g 新鲜橘皮和125ml95%乙醇一起捣碎，抽滤后保留沉淀，用50ml75%乙醇洗
涤沉淀两次，将沉淀转移到250ml烧杯中，加入100ml 1%EDTA溶液，用1mol/LNaOH 将PH调节至，保持30min后，再用醋酸溶液将果胶溶液酸化到，然后加入10ml果胶酶提取液，搅拌后，定容至250ml，用脱脂棉过滤，弃去沉淀和前20ml滤液，吸取部分滤液稀释10倍，作为测定果胶含量的样品。
2、半乳糖醛酸的比色测定
在20Ⅹ200mm试管中准确加入12ml浓硫酸，用冰浴将试管及内容物冷却到3℃，吸入待测溶液，每毫升溶液中含5~40μg果胶物质。
将试管中的内容物振荡均匀后，在冰浴中冷却至5℃以下，然后将试管在100℃水浴中加热10min，冷却至20℃，吸入咔唑试剂，充分混匀，在室温下放置25min，在520nm波长下测定溶液的吸光度，从加入咔唑试剂到测定溶液吸光度的时间和温度在各次测定中应保持一致。
3、标准曲线的绘制
准确称量一水半乳糖醛酸（相对分子质量为212），加入LNaOH使之溶解，然后用水定容到1L，放置过夜。
1ml上述溶液中含AUA100μg，将此标准溶液分别稀释到每ml含10、20、30、40、50、60μgAUA。
然后按前述方法测定每个溶液中咔唑试剂反应后的吸光度，以吸光度为纵坐标，脱水半乳糖醛酸的质量为横坐标绘制标准曲线。
四、实验注意事项
1、在半乳糖醛酸的测定中，从加入咔唑试剂到测定溶液吸光度的时间和温度在各次测定中
应保持一致；
2、硫酸的纯度对咔唑的呈色反应有很大影响，必须用分析纯的硫酸。
五、数据记录与处理
实验中称取沉淀，所以计算式中样品重量为1000g，波长520nm
标准曲线为：y =
将y1=，y1=分别代入得x1=μg/ml，x2=μg/ml
计算：水果中总果胶物质的质量分数（以AUA计）计算如下：
AUA含量（μg/ml）Ⅹ稀释倍数Ⅹ250（ml）/样品重量（g）/1000000Ⅹ100%
①x1=μg/ml AUA1=μg/ml 代入上式得w1 = %
②x2=μg/ml AUA2=μg/ml 代入上式得w2 = %
w =（w1+w2）/2 = %
平均偏差= （│w1-w│+│w2-w│）/2 = %
相对平均偏差= 平均偏差/w = % / % = %
六、思考题
1、加入EDTA溶液的作用是什么？
答：水溶液中的某些金属离子可能会与果胶络合对实验结果产生影响，而EDTA作为一种螯合剂，可以与碱金属、稀土金属和过渡金属等形成稳定的。
2、当样品中存在着其他种类的相对分子质量较高的碳水化合物，对实验结果会造成怎样的
影响？
答：高分子碳水化合物的存在会对咔唑的呈色反应产生较大影响，从而使实验测量结果偏高。
3、果胶在提取中发生了什么样的化学变化？
答：果胶首先在NaOH的作用下发生了皂化反应，水解成果胶酸钠和醇，又被乙酸酸化成果胶酸，最后在果胶酶作用下水解成半乳糖醛酸。
4、原果胶、果胶、果胶酸在结构和性质上有什么差异？
答：原果胶：即天然果胶是由D-半乳糖醛酸以及?-1,4糖苷键相连形成的直链高分子化合物，其中大部分门羧基已形成甲基酯，原果胶是一种无定形的胶质，有强亲水性，粘着而柔软，可被酸碱、果胶酶等溶液，水解成果胶。
果胶：是一种酸性多糖，是由?-1,4连接的多聚半乳糖醛酸，具有水溶性，适宜条件下气溶液能形成凝胶，部分发生甲基氧化。
果胶酸：由半乳糖醛酸聚糖、半乳聚糖和阿拉伯聚糖以不同比例组成的杂多糖果胶、果胶酸不含甲酯基。
5、配制标准溶液时为何要称量一水半乳糖醛酸？
答：一水半乳糖醛酸式量M=212，脱水半乳糖醛酸（AUA）式量=176
标准曲线绘制时要求：标准溶液AUA=100μg/ml=L
根据一水半乳糖醛酸与脱水半乳糖醛酸物质的量相等，即
x/212=176 得出，x=L
定容为1L时，配置标准溶液需称取一水半乳糖醛酸。