咔唑比色法测定果胶含量
咔唑比色法测定掺假蜂蜜中果胶的含量
咔唑比色法测定掺假蜂蜜中果胶的含量任雪梅;胡梅;周传静;王文特;吴裕健【摘要】A method for determination of pectin content in honey was established by carbazole colorimetry. The pectin was extracted by 63 ％hot ethonal to remove the sugar in honey. The results showed that the top grade concentrated sulphurie acid should be used during the experience. And the ethonal, which was used to dilute carbazole, should be pured. The recovery of pectin was 88.2％～ 94.6％ with the detectable limit of 0.15 mg/kg.%建立了咔唑比色法测定蜂蜜中掺假果胶含量的方法.采用63%热乙醇溶液洗除蜂蜜中的糖分,提取试样中的果胶.结果表明,试验过程中试剂要采用优级纯浓硫酸,配制咔唑显色剂的乙醇使用前要进行精制.半乳糖醛酸的加标回收率为88.2%-94.6%,检出限为0.15 mg/kg.【期刊名称】《山东农业科学》【年(卷),期】2011(000)003【总页数】3页(P100-102)【关键词】蜂蜜;果胶;掺假【作者】任雪梅;胡梅;周传静;王文特;吴裕健【作者单位】山东省产品质量监督检验研究院/国家加工食品质量监督检验中心,山东,济南,250100;山东省产品质量监督检验研究院/国家加工食品质量监督检验中心,山东,济南,250100;山东省产品质量监督检验研究院/国家加工食品质量监督检验中心,山东,济南,250100;山东省产品质量监督检验研究院/国家加工食品质量监督检验中心,山东,济南,250100;山东省产品质量监督检验研究院/国家加工食品质量监督检验中心,山东,济南,250100【正文语种】中文【中图分类】O656.31;S896.1蜂蜜是一种营养丰富、组成复杂的天然食品，它不仅能为人类提供各种营养元素以满足正常的生理需要，还有增进食欲、改善肠胃功能、治疗贫血、保护肝脏、提高人体免疫能力等多种功能，因此蜂蜜成为消费者青睐的营养保健品。
可溶性果胶检测试剂盒(咔唑比色法)
可溶性果胶(SP)检测试剂盒(咔唑比色法)简介：天然果胶类物质以原果胶、果胶(Pectin)、果胶酸的形态广泛存在于植物的果实、根、茎、叶中，是细胞壁的一种组成成分，它们伴随纤维素而存在，构成相邻细胞中间层粘结物，使植物组织细胞紧紧黏结在一起。
原果胶是不溶于水的物质，但可在酸、碱、盐等化学试剂及酶的作用下，加水分解转变成水溶性果胶。
果胶(Pectin)又称多聚半乳糖醛酸，是由D-半乳糖醛酸以α-1,4糖苷键连接形成的直链状聚合物，本质上是一种线形的多糖聚合物，含有数百至约1000个脱水半乳糖醛酸残基，其相应的平均相对分子质量为50000~150000。
Leagene 可溶性果胶(SP)检测试剂盒(咔唑比色法)检测原理是果胶物质水解生成半乳糖醛酸，后者在硫酸溶液中咔唑进行缩合反应形成紫红色的化合物，该化合物呈色强度与半乳糖醛酸浓度成正比，该化合物颜色在反应1-2h 内呈色最深，当反应液颜色最深时在波长530nm 处测定吸光度，通过与标准曲线比较，计算出样品中果胶含量。
该试剂盒主要用于定量检测植物组织或果实中果胶含量。
该25T 试剂盒可以检测25-30左右个样本。
该试盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
组成：自备材料：1、 蒸馏水2、 浓硫酸3、 实验材料：桃子、李子、苹果、杏等果实或其他植物组织4、 研钵或匀浆器5、 试管6、 离心机7、 水浴锅8、 比色杯9、 分光光度计 编号 名称 TC2113 25T Storage 试剂(A): 果胶标准(1mg/ml) 1ml 4℃ 避光 试剂(B): SP Lysis buffer 2×500ml RT 试剂(C): SP Assay buffer 3ml 4℃ 避光 使用说明书 1份操作步骤(仅供参考)：1、可溶性果胶提取：①取果实或其他植物组织，洗净，擦干，称取剪碎的新鲜样品0.2g，置于研钵或匀浆器。
②加入SP Lysis buffer，充分研磨或匀浆后转入10ml试管中。
果胶的检测技术
3 果胶的检测技术在对果胶的研究中，通常以含量、酯化度、相对分子质量、凝胶度等作为评价指标。
3.1 果胶含量的测定目前，测定果胶含量的方法主要有：质量法、咔唑比色法、果胶酸钙滴定法和蒸馏滴定法。
果胶酸钙滴定法较适于纯果胶的测定，对于例如柑橘果皮这种有色样品，不易确定滴定终点；而蒸馏滴定法在蒸馏的时候部分糠醛会发生分解，影响回收率，故而运用较少。
所以，果胶含量的测定一般采用质量法和咔唑比色法。
近年来新的果胶含量检测方法——离子交换色谱法（Ion ex-change chromatogram，IEC）引起了人们的关注，其常用的色谱柱和检测器见表3。
吴玉萍等[1]研究了用高效液相色谱法测定烟草中果胶含量。
烟草中的果胶先采用盐酸水解，水解产生的半乳糖醛酸以Waters Sugar-Pak1钙型阳离子交换柱为固定相，0.05g/L EDTA钙钠水溶液为流动相，示差折光仪为检测器测定半乳糖醛酸含量，由半乳糖醛酸含量换算为果胶含量。
B.M. Yapo等[2]以高效阴离子色谱-脉冲安培检测（HPAEC-PAD）技术测定果胶含量。
采用脉冲安培检测器，离子色谱以CarboPacPA-100柱（250mm×4 mm i.d.）为固定相，流动相为0.1 mol/L NaOH 和0.17 M NaOAc，流速为1 mL/min；柱温30℃，测表3：检测果胶含量的离子交换色谱法3.2 果胶酯化度的测定自然界果实中天然存在的果胶都是高酯果胶，经酸或碱处理高酯果胶降低酯化度后可获得低酯果胶。
果胶中含甲氧基的最大理论值为16.3％，若该值以酯化度来表示是100％，则甲氧基含量与酯化度的转换计算式应是：酯化度= 甲氧基含量/16.3%。
果胶酯化度的检测技术由最早的比色法、滴定法发展到80年代的高效液相和气相、90年代的核磁共振和红外光谱等方法。
而近几年，拉曼光谱分析果胶的酯化度的方法也有报导。
Synytya等[4]用拉曼谱不仅可测定甲酯化程度，而且还可测定乙酰化程度。
咔唑比色法测定剑麻果胶含量.kdh
UV2102 PCS 紫外可见分光光度计：上海尤尼科
基金项目：广西科技攻关项目（No.0480005） 作者简介：丁建东（1983—），女（汉），硕士，研究方向：天然产物的开 发与研究。 * 通信作者：林翠梧(1958—)，女（汉），教授，博士生导师。
仪器有限公司；HHS11-2 电热恒温水浴锅：上海医疗 器械五厂；AL204 型电子分析天平：上海梅特勒-托利 多称重设备有限公司。
平均含量值/% 67.8
相对标准偏差/% 1.69
吸光度
显色时间/min 图 6 显色时间的影响 Fig.6 Effect of color Time
吸光度达到最大且基本稳定，试验选择显色时间为 30 min。 综上所述，最佳的显色条件是咔唑溶液用量
0.5 mL，显色时间 30 min。 2.4 标准曲线的绘制
测定 6 次，结果见表 2。
表 2 回收率试验 (n=6) Table 2 Recovery experiments (n=6)
样品含量/μg 24.62 31.59
加入量/μg 29.90 29.90
测得总量/μg 54.31 62.94
回收率/% 99.6 102.2
试验回收率在 99.6 %~102.2 %之间，表明本方法 准确度良好，符合测定要求。
水解时间 /min 图 4 水解时间的影响 Fig.4 Effect of hydrolytic time Absorbance
如图 4 所示加热时间 20 min 时吸光度最大，之后 便降低，其原因可能是水解时间太长会破坏半乳糖醛 酸的结构。试验中水解时间选择 20 min。
综上所述，果胶粉水解的适宜条件为：浓硫酸加 入量为 6.0 mL，水解温度为 70 ℃，水解时间为 20 min。 2.3 显色条件的选择 2.3.1 咔唑溶液用量对吸光度的影响
咔唑比色法测定造纸法再造烟叶中的果胶含量_杨海健
。 果胶是亲水胶体物质， 通
对烟叶的吸湿性和弹性起一 过渗透作用吸收水分， 定的作用。烟草中的果胶质含量过高时会使烟草 在燃吸时不完全， 并产生甲醇， 对烟草吸味及安全 性不利。因此， 烟草中果胶含量的测定已成为烟草 品质的重要指标之一 法
［5 ］ ［、 高效液相色谱法
Study on pectin content in papermaking reconstituted tobacco with carbazole spectrophotometric determination method YANG Haijian，DING Hongying，YU Guodong，LI Huayu and WANG Wenling * （ Henan Cigarette Industry Tobacco Sheet Co． Ltd． ，Xuchang 461100 ） ， Fenxi Shiyanshi， 2012 ， 31 （ 6 ） ： 100 ～ 102 Abstract ： A method was described for the determination of pectin content in papermaking reconstituted tobacco by carbazole and sulphuric acid spectrophotometric method． With the systemic experimental investigation and optimization，the optimized conditions were determined as follows： 6． 0 mL of sulphuric acid， 85 ℃ and 15 min for the hydrolytic process， 0． 2 mL of 0. 15% carbazole ethanol solution， 25 ℃ and 2h for the reaction process． The precision and spike recovery of the method were also investigated and good results were obtained． The method can be applied successfully to the determination of actual samples． Keywords： Pectin； Papermaking reconstituted tobacco； Carbazole； Spectrophotometry
咔唑比色法测定苹果渣提取液果胶含量的研究
通讯作者 ： 仇农学 ， 陕西师范大学食 品工程 系，１０２ ｍ ｉ ｏｘ ＿３ １ ２． ｍ ７０６． ａ＇ ｕｉ ８０＠１６ ｏ ｏ ｇ Ｌ ｙ ｎ ｃ
ａ ｔ ａ ａ ｌ ｓａ ｄ ｓ ｔ ｆ ｃｏ ｙ ｒｓ ｌ ｒ ｂ ａｎ ｄ ｃ ｕ ｌ ｍｐ ｅ ａ ｉ ａ ｔｒ ｅ ｕ ｔ ｗｅ ｏ ｔ ｉ ｅ ． ｓ ｎ ｓ ｓ ｅ
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咔唑比色法测定豆腐柴叶果胶含量的研究_徐汶
基金项目:湖北省教育厅科学研究计划2001年重大项目(2001Z20005)作者简介:徐汶(1966-),男,武汉科技大学化工与资源环境学院高级实验师。
E 2m ai:l j azzyx @126.co m 通信作者:王存文收稿日期:2006-04-01第22卷第3期2006年5月Vol .22,No .3M ay,2006咔唑比色法测定豆腐柴叶果胶含量的研究De te r m i n a ti o n o f p rem na m i c rophy l l a pe c ti n con t e n t by ca rba zo l espe c tropho t om e tri c m e thod 徐 汶1,2XU We n1,2王光辉1W A NG Guang 2hu i1王存文2W A NG Cun 2we n2陈亚琴2C HE N Y a 2qi n2王为国2W A NG Wei 2guo2张俊峰2Z HA NG Jun 2fe ng2(1.武汉科技大学化工与资源环境学院,湖北武汉 430081;2.武汉化工学院化工与制药学院,湖北武汉 430074)(1.C olle ge o f Che m ica l E ngineer i ng,Res ources a nd Envi ron m ent ,Wuhan Univ ersity of Science and Technolo gy ,Wuha n ,Hubei 430081,Chi na;2.School of Che m ica l Eng i neering and P ha r ma cy ,Wuhan Institute o f Che m ica l Technolo gy ,Wuha n ,Hubei 430073,China )摘要:介绍了采用咔唑硫酸分光光度法测定豆腐柴叶果胶粉果胶含量的方法,对其测定条件作了详细的试验,获得了较佳的测定条件:浓硫酸用量为5.0mL ,水解温度为75e ,水解时间为15m i n ,0.15%咔唑无水乙醇溶液用量为0.2mL ,显色温度为25e 左右,显色时间为2h 。
咔唑比色法测定剑麻果胶含量
咔唑比色法测定剑麻果胶含量
丁建东;张雪红;姚先超;黄艳伟;林翠梧
【期刊名称】《食品研究与开发》
【年(卷),期】2010(031)011
【摘要】采用咔唑比色法测定剑麻果胶粉中果胶含量的方法,对其测定条件作了详细的试验,获得了较佳的测定条件:浓硫酸用量为6.0mL,水解温度为70℃,水解时间为20min,0.15%咔唑无水乙醇溶液用量为0.5 mL,在室温下显色,显色时间为
30min.用于实际样品的测定时,结果较为满意.
【总页数】3页(P138-140)
【作者】丁建东;张雪红;姚先超;黄艳伟;林翠梧
【作者单位】广西大学化学化工学院,广西,南宁,530004;广西大学化学化工学院,广西,南宁,530004;广西师范学院,化学与生命科学学院,广西,南宁,530001;广西大学化学化工学院,广西,南宁,530004;广西大学化学化工学院,广西,南宁,530004;广西大学化学化工学院,广西,南宁,530004
【正文语种】中文
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咔唑比色法测定果胶含量-标准曲线的制作
1方法原理
方法基于果胶物质水解，生成半乳糖醛酸在强酸中与咔唑的缩合反应。
然后，对其紫红色呈色溶液进行比色定量。
2试剂
(1)乙醇(化学纯)：无水乙醇和950mL·L-1乙醇。
(2)精制乙醇：取无水乙醇(化学纯)或950mL·L-1乙醇1000mL，加入Zn粉4g和硫酸(1∶1)4mL，置恒温水浴中回流10h后，用全玻璃仪器蒸馏。
馏出液每1000mL加入Zn粉和KOH各4g，进行重蒸馏。
(3) 1.5g·L-1咔唑乙醇溶液：称取化学纯咔唑0.150g，溶解于精制乙醇，并定容至100mL。
(4)标准半乳糖醛酸：以医药公司上海化学试剂采购供应站分装的L.Light出品α-D水解半乳糖醛酸作为标准半乳糖醛酸。
(5)浓硫酸(优级纯)(注2)。
(6)0.05mol·L-1HCl溶液。
3 操作步骤
(1)半乳糖醛酸标准曲线的制作：准确称取α-D-水解半乳糖醛酸100mg，溶解于蒸馏水，并定容至100mL，混合后得1mg·mL-1的半乳糖醛酸原液。
移取上述原液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0mL，分别注入100mL容量瓶中，稀释至刻度，即得一系列浓度为10、20、30、40、50、60、70μg·mL-1的半乳糖醛酸标准溶液。
取30mm×200mm的硬质大试管7支，用吸管注入浓H2SO4各12mL。
置冰水浴中冷却，边冷却边分别沿壁徐徐加入上述不同浓度的半乳糖醛酸标准溶液各2mL，充分混合后，再置冰水浴中冷却。
然后，在沸水浴中加热10min，冷却至室温后，加入1.5g·L-1咔唑溶液各1mL，充分混和。
另以蒸馏水代替半乳糖醛酸标准溶液，依上法同样处理，作为试剂空白。
室温下放置30min后，用721型分光光度计，在波长530nm下，分别测定其吸光度(A)，以测得的吸光度(A)为纵座标，每mL标准溶液中半乳糖醛酸的含量为横座标，制作标准曲线。
2、根据标准曲线计算未知浓度的样品含量。