呼吸道感染IgM九项联检试剂说明书终稿子

呼吸道感染IgM九项联检试剂盒（间接免疫荧光法）

说明书

【产品名称】

通用名称：呼吸道感染IgM九项联检试剂盒（间接免疫荧光法）

英文名称：PNEUMOSLIDE IgM

商品名称：PNEUMOSLIDE IgM

【包装规格】

10人份/盒

【预期用途】

采用间接免疫荧光法（IFA），同时检测人血清中呼吸道感染主要病原体的IgM 抗体，可检的病原体包括：嗜肺军团菌血清1型、肺炎支原体、Q热立克次体、肺炎衣原体、腺病毒、呼吸道合胞病毒、甲型流感病毒、乙型流感病毒和副流感病毒1、2和3型。

已报道的非典型性肺炎的病原体有很多，其中最常见的有：

嗜肺军团菌

人最易感染的是嗜肺军团菌血清1型，非典型性肺炎常伴随有全身症状。10%的肺炎是由嗜肺军团菌血清1型引起的。在血清学诊断中，间接免疫荧光法（IFA）是唯一的标准技术。

肺炎支原体

肺炎支原体引起的肺炎在儿童和青少年中最为常见，由于很难将其固定在载玻片上，因此先将肺炎支原体抗原固定在细胞中。

Q热立克次体

Q热是由Q热立克次体引起的全身疾病，会造成发热、非典型性肺炎、肝炎或心内膜炎。血清学诊断中，IFA检测是最灵敏和最具指示性的血清学诊断方法。

肺炎衣原体

肺炎衣原体极易造成呼吸系统感染，特别是支气管炎和肺炎。在老年人中发病率较高，它所引起的肺炎占所有肺炎病例的10%。微量免疫荧光法（MIF）是最灵敏和最特异的诊断方法。

腺病毒

腺病毒是一种重要的呼吸道病原体，能引起上呼吸道疾病，伴随有急骤发热和轻度呼吸道感染。

呼吸道合胞病毒

呼吸道合胞病毒（RSV）是两岁以下幼儿呼吸道感染的主要病原体，在冬季爆发流行。

流感病毒

它是流感的病原体，在具有潜在病理学的患者中会产生严重的并发症。由于它易于与其它呼吸道疾病混淆，所以在流行期临床诊断很困难。因此，实验室诊断就显得非常重要。

副流感病毒

副流感病毒1、2和3型在2-4岁儿童中能引起喉气管支气管炎（哮吼）。3型具有流行性，1和2型具有地域性。

【检测原理】

间接免疫荧光法（IFA）是基于待测样本中的抗体与吸附在载玻片上的抗原发生的反应。样本中存在的特异性抗体和抗原反应，未与抗原结合的免疫球蛋白在洗涤步骤中除去。在下一步骤中，抗原-抗体复合物与荧光素标记的抗人球蛋白反应。用免疫荧光显微镜观察结果。

【主要组成成份】

除PBS外，所有试剂均可直接使用。为了易于识别，所有试剂均有一个给定的编号。在操作骤中，写明了每一步所使用试剂的编号。

1载玻片：10片（10孔/片），含有下列抗原：

1. 嗜肺军团菌血清1型（悬浮于0.5%正常鸡卵黄囊中以增强抗原吸附性和避免细

菌聚集）

2. McCoy细胞中的肺炎支原体

3. Q热立克次体II期（悬浮于0.5%正常鸡卵黄囊中以增强抗原吸附性和避免细菌

聚集）

4. 肺炎衣原体（原生小体）

5. HEp-2细胞中的腺病毒

6. HEp-2细胞中的呼吸道合胞病毒

7. LLC-MK2细胞中的甲型流感病毒

8. LLC-MK2细胞中的乙型流感病毒

9. LLC-MK2细胞中副流感病毒1、2和3型

10. 质控孔。

除了嗜肺军团菌，载玻片中的所有抗原都是从细胞培养物中获得。每一个病毒孔里都含有1%~15%用甲醛灭活的感染细胞，无感染的细胞用丙酮固定。

：1瓶，pH 7.2PBS粉末，用1L蒸馏水溶解。

阳性质控：500 µL阳性质控血清，含叠氮钠。

阴性质控：500 µL阴性质控血清，含叠氮钠。

标记的抗人IgM结合物：2 x 1.1mL，荧光素标记的抗人IgM磷酸缓冲液，含有伊文斯蓝、叠氮钠和蛋白稳定剂。

封闭介质：3mL，甘油缓冲液，含叠氮钠。

抗人IgG球蛋白（吸附剂）：1 x 1.5mL（羊抗人IgG，含叠氮钠）。

需要但未提供的材料：

1.精确的微量移液器

2.恒温培养箱

3.蒸馏水

4.24x60 mm盖玻片

5.湿盒

6.荧光显微镜以及制造商推荐的滤光片

【储存要求及有效期】

2~8℃储存。不要使用超出标签上有效期的试剂。未拆封的试剂盒2~8℃储存可稳定至标示有效期的月末。

拆封后试剂的储存

试剂的稳定性及操作

在无菌条件下操作试剂以防微生物污染。仅使用试验所需量的吸附剂、PBS、质控血清和结合物溶液，剩余的试剂不要倒回瓶中。PBS溶解后储存在2~8 ºC，如出现浑浊请勿使用。

对于试剂盒内试剂的不正确操作，VIRCELL, S.L.将不对其试验结果负责。

【适用仪器】

荧光显微镜

【注意事项】

1. 仅用于体外诊断。仅限专业人员使用。

2. 仅使用试剂盒内的组分，不要混用不同试剂盒或不同厂家的试剂组分。只有PBS、吸附剂、封闭介质和载玻片可与其他批次VIRCELL IFA试剂盒通用，其它组分同批次可以混用。

3. 每步操作必须使用干净吸头，仅使用干净的耗材，最好是一次性使用的耗材。

4. 包装如有损坏请勿使用。

5. 切勿用嘴吸移液管加样。

6. 本试剂盒中的吸附剂、结合物和质控血清含有动物源性物质，质控血清还含有人源性物质。尽管本试剂盒中的人血清质控品已经测试为HBsAg、HCV抗体和HIV抗体阴性，质控血清和病人样本仍应作为潜在感染性物质进行处理。孔内包被的经灭活的

嗜肺军团菌血清1型、肺炎支原体、Q 热立克次体、肺炎衣原体、腺病毒、呼吸道合胞病毒、甲型流感病毒、乙型流感病毒和副流感病毒1、2和3型，也仍应视为具有潜在感染性并小心处置。目前没有方法可以确保这些或其他感染性物质不存在，因此所有的材料应视为具有潜在感染性进行处置，应遵守当地关于临床废弃物处理的法规。

7. 结合物、吸附剂、封闭介质和质控品含有叠氮钠（浓度＜0.1%），避免接触酸和重金属。

8. 封闭介质含有甘油，请勿接触酸和暴露在高温下。

9. 伊文斯蓝（浓度＜0.1%）是一种致癌物。请勿接触皮肤和眼睛。万一接触到该溶液，用水彻底冲洗并到医院检查。

10. 仅按本说明书进行操作，不遵守规定的温育时间和温度会导致错误的结果。 11. 载玻片上病人样本交叉污染会导致错误结果，要小心操作防止发生。 12. 显微镜光学系统、光源条件和类型会影响荧光质量。 13. 不要将试剂不必要地放置在室温下过长的时间。

14. 每个载玻片只能使用一次。不要分割，也不要再使用没有用过的孔。 15. 试剂盒里的玻璃组分破碎时可能伤及身体，小心处理。 16. 吸附剂加入样本后要注意观察是否有明显的沉淀出现。 【样本要求】

需由专业人员无菌静脉穿刺采集血液。使用消毒或无菌技术能保持样本的完整性。血清样本采集后2~8 ºC 冷藏，如7天内不检测，则应冷冻（-20ºC ）保存。不要反复冻融以防止免疫球蛋白滴度降低，特别是IgM 。不要使用高血脂或污染的血清。若样本中含有微粒要离心使之澄清。 【检测方法】 *实验步骤

1. 使用前，将所有试剂平衡至室温。载玻片平衡至室温后再打开。

*实验前准备

只有PBS 需要预先配制。将试剂

中的成分加入1L 蒸馏水中，摇匀直止完全溶解。配好后储存在2-8ºC 。