药用百合多糖提取纯化工艺的研究
药用百合多糖提取纯化工艺的研究3何纯莲,张小艳,杨球桢,杨小红3(湖南师范大学医学院,湖南长沙 410006) [摘要] 目的:优化百合多糖提取、纯化工艺。
方法:以水提醇沉法提取百合多糖,s avage 法去蛋白纯化。
在单因素实验的基础上,采用正交试验的方法对影响百合多糖提取、纯化的因素进行优化。
结果:百合多糖的最佳提取工艺为:在65℃下,用15倍药材量的蒸馏水提取3次,每次4h 。
最佳纯化工艺为:样品:氯仿(v ∶v )为3∶2,氯仿:正丁醇为2∶1,振摇时间为15m in 。
结论:优化的百合多糖提取纯化工艺简单、稳定,易于产业化规模生产。
[关键词] 百合多糖;提取;纯化;正交实验[中图分类号]R 28412 [文献标识码]A [文章编号]1673-016x(2008)03-0007-03Study on the Extra ct i on an d Pur i f i ca ti on of L ily Pol ysaccha r i deHE Chun 2lian 1,ZHANG Xiao 2yan 2,Y ANG Q iu 2zhen3(1.Medica l college,H una n N or ma l U niv ersit y,Changsha 410006,China;2.M edica l college,Hunan N or m al U niversity Pha r m acy specia lit y 2004,Changsha 410006,China;3.M edica l college,Hunan N or m al U niversity Pha r m acy specia lit y 2006,Changsha 410006,China )[Abstra ct]O b ject ive The extraction and purifica tion technological conditi on of lily polysaccha ride s were op ti m ized.M e thods U sing the wate r extrac tion e thanol precipita ti on m ethod extract lily polysaccharides,savage m ethod r e moving pr oteins .On the ba sis of single 2fac t or experi ments,the extr acti on and purificati on teacnological conditions of polysaccharides fr om lily we r e op ti m ized by vertical 2me thod .R esu lt s The extrac tion technica l of lily polysaccha ride s is selected as f ollowing :15ti m es of distilled wa ter a s the s olvent,extrac tion f or 3ti m es and 4h for each ti me .The purification technical is se lected a s f oll ow ing:Sa mp le :chlor of or m (v ∶v )is 3∶2,chl or of or m:nbu 2tanol is 2∶1,15m in stirring ti m e .C on clusi on The opti m ized extr acti on technol ogy is stable and feasible .[Key words]lily polysaccha rides;extracti on;purification;vertical 2me thod 药用百合为百合科百合属植物百合的干燥肉质鳞叶,性甘味平,具有润肺止咳,宁心安神的功效[1],在现存的最早一部本草专著《神农本草经》上就有对其防病治病的药理性有记载,现代医学研究表明,百合具有抗癌、抗疲劳、耐缺氧、止咳等作用[2],含有多种微量元素、维生素B 1、B 2等营养物质、多糖、皂苷[3-7]、生物碱等抗癌活性成分和促进细胞免疫功能的生物功能活性成分[7-9]。
百合多糖的研究尚处于起步阶段,但因其良好的应用前景,近年逐渐引起越来越多的关注,并随着对百合多糖的研究的不断深入,发现百合多糖具有抗肿瘤、抗氧化、免疫促进、降血糖等多种药理活性[10]。
为了提高百合产品深加工的经济价值,开发百合新、特产品,本文对百合多糖的提取纯化工艺进行了较为系统的研究,初步探讨了一条较为理想的生产工艺。
7湖南师范大学学报(医学版)J Hunan Nor ma l Univ (M ed Sc i ) 2008,5(3)3收稿日期:2008-06-21基金项目湖南省科技厅资助科研项目(6F 3);湖南省教育厅资助科研项目(6)作者简介何纯莲(6—),女,湖南新邵县人,博士,副教授,从事天然产物有效活性成分研究与应用。
T 633,26@633通讯作者杨小红(66—),女,湖南益阳人,主要从事药物分析研究工作。
T 633:0J 1820C497:199el:8-71-891247E m ail :chunlianhe :19el :8-71-8912441 实验部分1.1 仪器与试剂B luestar紫外分光光度计(北京莱伯泰科仪器有限公司),PHS-3C酸度计(上海鹏顺科学仪器有限公司),W K-1600A高速药物粉碎机(青州市精诚机械有限公司),SH B-B95型循环水式多用真空泵(郑州长城科工贸有限公司)。
百合(湖南省龙山县提供),无水乙醇,95%乙醇,乙醚,丙酮,氯仿,正丁醇,葡萄糖对照品,浓硫酸,苯酚均为国产分析纯。
112 原料预处理将百合粉碎至20～40目,取适量于圆底烧瓶中,加入3倍量95%乙醇,回流115h,过滤取滤渣置培养皿中,于通风处风干,备用。
2 方法与结果2.1 百合多糖提取条件的优化工艺流程:称取预处理后的百合粉-热水浸提-离心-取上清液-减压浓缩-加95%乙醇-静置过夜-抽滤-沉淀用无水乙醇、丙酮、乙醚依次洗涤-干燥-称重-测定多糖含量。
在单因素实验的基础上,采用L9(34)正交试验的方法对提取时间、提取次数、固液比、浸提温度等因素进行优选。
因素水平设计见表1。
表1 百合多糖的提取因素水平表水平因素浸提次数A(次)浸提温度B(℃)浸提时间C(h)溶剂体积D(倍)115525 2265310 33754152.1.1 按照实验设计的方法,将实验分成9组,每组分别称取预处理后的百合粉20g,根据正交实验设计表进行浸提,浸提液于3000r/m in离心15m in,取上清液。
上清液置旋转蒸发仪中减压浓缩,然后加入4倍95%乙醇沉淀。
静置过夜。
抽滤,沉淀用无水乙醇、丙酮、无水乙醚依次洗涤。
洗涤完后,将沉淀置恒温干燥箱中于60℃干燥,测定多糖得率。
2.1.2 百合多糖的含量测定2.1.2.1 对照品溶液的制备:精密称取葡萄糖对照品(105℃干燥至恒重)100m g,置于100mL量瓶中,加水适量使溶解,稀释至刻度,摇匀。
精密吸取10100mL置于100mL量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,即得。
2.1.2.2 标准曲线的绘制:准确吸取葡萄糖对照品溶液1100、2100、3100、4100、5100、6100mL,置10mL 容量瓶中,用蒸馏水稀释至刻度,摇匀,分别精密量取1100mL,置10mL容量瓶内,加5﹪苯酚溶液1mL,浓硫酸5mL,立即摇匀,于70℃水浴中加热5,然后置冰水浴中5,再室温放置。
以L蒸馏水,L5%苯酚液,5L浓硫酸混合液按上述操作做空白。
置紫外可见分光光度计中,于490nm处测定吸收度(A),对测得的数据进行线性回归,回归方程为A=94107046C-0101127,r= 019939。
图1 标准曲线2.1.2.3样品测定:精密称取干燥至恒重的样品约50m g于100mL量瓶中,加水适量使溶解,再加水稀释至刻度,摇匀。
精密吸取1L于L容量瓶中,加水适量使溶解,并稀释至刻度,摇匀。
精密吸取1L样品溶液于L容量瓶中,加入5%8湖南师范大学学报(医学版),2008,5(3)1m in1min40min1m1m m1000m100m100m10m苯酚1mL,混匀,迅速加入5mL浓硫酸,摇匀,测定吸光度值,计算多糖的得率,结果见表2。
2.1.2.4百合多糖提取试验的结果表2 水提百合多糖正交试验方案及结果实验号A B C D多糖得率(%) 111112102212223146313335128421234145522316196623127181731327108832116149933239194K110176131551613215147K219122161911718518135K323151231031913219167k13159415251445116k26141516451956112k37184716861446156R4125311611001140SS281061514011503108 由表2分析可知,各因素对提取效果的影响程度依次为A(浸提次数)﹥B(浸提温度)﹥D(溶剂体积)﹥C(浸提时间),分析表明百合多糖提取的最佳工艺为A3B3C3D3,即在65℃下,加入15倍量的蒸馏水,浸提3次,每次4h。
212 百合多糖的纯化工艺流程:取百合多糖用适量蒸馏水溶解-用1%醋酸溶液调pH415-加氯仿、正丁醇振荡-离心分离-取水相-重复氯仿、正丁醇处理、离心分离,并操作数次至无胶状物质生成-水相-加4倍量95%乙醇-静置过夜-抽滤-沉淀用无水乙醇、丙酮、乙醚依次洗涤-60℃干燥-称重-含量测定,对多糖采用茚三酮检测不显蓝色。
21211 百合多糖中蛋白质的脱除百合多糖粗品中的蛋白质脱除用Savage法。
采用L9(33)正交试验法对氯仿、正丁醇体积及振摇时间进行优选。
因素水平设计见表3。
表3 百合多糖粗品纯化因素水平表水平因素振摇时间A(h)样品:氯仿B(v∶v)氯仿:正丁醇C(v∶v) 55∶5∶3∶5∶353∶∶ 按照实验设计的方法,将实验分成9组,每组分别称取适量百合多糖(相当于百合粉20g提取量),用适量蒸馏水溶解。
滴加1%醋酸溶液至pH415。
根据正交设计进行实验,计算多糖的得率,以多糖得率为指标,多糖纯化结果见表4。
百合多糖的提取与纯化研究进展_唐明
农产品加工·创新版2009年第10期收稿日期：2009-09-17作者简介：唐明（1985-），男，湖南人，研究方向：农产品深加工。
E-mail ：yefenghan204@ 。
百合多糖的提取与纯化研究进展唐明，秦丹，刘沙（湖南农业大学食品科学技术学院，湖南长沙410128）摘要：我国百合资源丰富，百合多糖具有广泛的保健作用。
介绍了几种百合多糖的提取与纯化方法。
关键词：百合多糖；提取；纯化中图分类号：S644.1文献标志码：AResearch Advance on Extraction and Purification Methods of PolysaccharideTang M ing ，Qin Dan ，Liu Sha（College of Food Science ，Hu'nan Agricultural University ，Changsha ，Hu'nan 410128，China ）Abstract ：Bulbuslily polysaccharide have comprehensive health function ，there are abundant bulbuslily resources in China.This article mainly describe extraction and purification methods of polysaccharide.Key words ：bulbuslily polysaccharide ；extraction ；purification0引言百合（BulbusLily ），又名白百合、家百合、喇叭筒、山百合、药百合等，为百合科植物卷丹（nafolium Thunb ）、磨香百合（L.long orum Thunb ）、细叶百合（L.pumilum Do.）等的干燥肉质鳞叶，其鳞茎酷似大蒜，其味如山薯，故古时称为“蒜脑薯”[1，2]。
湖州药用百合和兰州食用百合多糖提取及含量测定比较
１１ 实验 仪 器 及 试 剂 ．
复 合 物 ， 百 合 多糖 的测 定 带来 很 大 困难 ， 以在测 定 前必 给 所
须进 行 除蛋 白处理 。本 文通 过 正交 实验 对 Ｓ ｖｇ法 进行 了优 ｅａ 化 ， 佳 除 蛋 白纯 化 工 艺 为 ： 仿一 丁 醇体 积 比为 ２ １ 样 最 氯 正 ：、 品一 （ 氯仿 一 丁 醇 ） 积 比为 ５２ 振 摇 时 间 ３ ｎ 正 体 ：、 ０ｍｉ。
与 蛋 白质 两 种 高 分 子 成 分共 同存 在 。 二 者 常 形 成 糖 蛋 白 且
大 肉肥 ． 养丰 富 ， 有芳 香 微苦 的特点 ， 一种 高级 的 滋补 营 具 是
食 品 ， 是一 味重 要 的 中药材 【 因此本 文 主要 对 湖州 百合 药 又 ｌ Ｊ 。 用 成分 的提 取 和纯 化方 面 进行 研 究 。 与 兰 州百 合 多 糖含 量 并 进 行 比较 ． 此后 相 关 方 面 的 研 究作 一 参 考 ， 时也 为 药 食 为 同 两 用 型天然 产 物研 究 积 累一定 的研 究 资 料 。
ｃ ｍｐ ｒ ｈ ｏ ｔ ｎ ｆＨｕ ｈ ｕ，ａ ｄ Ｌ ｎ ｈ ｕ Ｌ ｌ ｉ ｕ ｐ ｌ ｓ ｃ ｈ ｒｄ ． ｅ ｈ ｄ ｏ ａｅｔ ｅｃ ｎ ｅ ｔ ｚ ｏ ｏ ｎ ａ ｚ ｏ ｉ Ｌ ｌ ｍ ｏ ｙ ａ ｃ ａ ｉ ｅ Ｍ ｔ ｏ ｓ：Ｆ ｌ ｒｏ ｔｔ ｅ ｂ ｓ ｒ ｔ ｉ ｏｙ ａ ｃ ａ ｙ ｉ ｉ ｅ ｕ ｈ ｅ ｔｐ ｏ ｅ ｎ ｐ ｌ ｓ ｃ ｈ － ｔ
Ｚ ＨＥＮＧ ｅｈ ｎ Ｗ ｉ ｏ ｇ，Ｚ ＨＡＮＧ Ｘｉ ｏ ｉ ｇ ａ ｌｎ
（ ｚ ｏ ｅｃ ｅ Ｃ ｌ ｇ， ｈ ａ ｇＰ ｏｉｃ ， ｕｈ ｕ ３ ０ ， ｈｎ ） Ｈｕｈ ｕＴ ａｈ ￣ ｏｌ ｅ Ｚ ￣ｉｎ ｒｖｎ ｅ Ｈ ｚｏ ０ ０ Ｃ ｉａ ｅ １ ３ ［ ｓｒ ｃ］Ｏｂｅ ｔ ｅ Ｔ ｐｉ ｚ ｈ ｘｒｃ ｏ ｎ ｕ ｆ ａ ｏ ｆｐ ｌｓｃｈ ｒ ｅ ｎ ｔｃ ｎ ｌ ｙ ｎ ｏ ｅｔ ｃ ｎ Ａｂ ｔａ ｔ ｊ ｃｉ ： ｏｏ ｔ ｅ ｔｅ ｅｔ ｔ ｎ ａ ｄ ｐ ｒ ｃ ｔ 。 ｏ ｏｙａ ｃ ａｉ ｓｉ ｅｈ ｏ ｇ ，ａ ｄ ｔ ｘｒ ｔａ ｄ ｖ ｍｉ ａｉ ｉ ｉ ｉｎ ｄ ｏ ａ
药百合多糖的提取工艺研究
药百合多糖的提取工艺研究
储俊;许娜;凤先哲;孙玉军;周正义
【期刊名称】《中国林副特产》
【年(卷),期】2009(000)001
【摘要】对药百合多糖的提取工艺进行了探索性研究,选取与比较了固液比、提取时间、提取温度3个因素对药百合粗多糖提取率的影响,并采用L9(33)正交设计法优化提取条件, 确定了最佳的提取条件为:提取温度70℃、固液比1∶15、提取时间4h.选择此条件提取药用百合粗多糖, 提取率为1.25%.
【总页数】3页(P15-17)
【作者】储俊;许娜;凤先哲;孙玉军;周正义
【作者单位】安徽科技学院生命科学院,安徽,凤阳,233100;安徽科技学院生命科学院,安徽,凤阳,233100;安徽科技学院生命科学院,安徽,凤阳,233100;安徽科技学院生命科学院,安徽,凤阳,233100;安徽科技学院生命科学院,安徽,凤阳,233100
【正文语种】中文
【中图分类】TQ46
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百合多糖的研究进展
有效；同时酶提多糖对于人红细胞的脂质过氧化有明显抑制， 而水提多糖的抑制作用并不明显。另外他们提取纯化得到３ 种百合多糖（ＬＢＰ一１，ＬＢＰ一２，ＬＢＰ一３重均相对分子质量 ５３ ７００，１７ ９００，１３ ４００），并发现ＬＢＰ一３是其主要的抗氧化活 性组分。 ３．２纯化百合多糖的药理作用 纯化百合多糖也具有多方 面的药理作用。赵国华等分离出均一多糖（ＬＢＰＳ—ｌ，重均相 对分子质量为３０ ２００）在体内具有明显的抗肿瘤作用，在等于 或高于５０ ｍｇ／ｋｇ剂量的ＬＢＰＳ一１对移植性黑色素Ｂ。６和 Ｌｅｗｉｓ肺癌的抑制效果都达到了显著以上水平，中等剂量 （１５０ｍｓ／ｋｇ）作用最佳，抑瘤活性呈量效相关性。
（收稿日期：２００５４３４－２６）
新型免疫调节剂来氟米特的临床 应用
孙夫东，金春平，许桂月（山东省平邑县人民医院药剂科
山东平邑２７３３００） 中图分类号：Ｒ９７９．５
文献标识码：Ａ
文章编号：１００４－２４０７（２００５）０６４）２８５４）２
来氟米特（Ｌｅｆｌｕｎｏｍｉｄｅ）商品名爱若华（Ａｒａｖａ），是一种新 型的免疫调节剂，能改变类风湿关节炎（ＲＡ）病程及减轻骨质 破坏的药物。现就其药理及临床应用作一综述。 １药理作用
研究［Ｊ］．食品科学，２００２，２３（２）：８７—８９． ［４］滕利荣，孟庆繁，刘培源，等．酶法提取百合多糖及其体
百合多糖的纯化与化学结构鉴定研究
腔柱层析鉴定均为单一组分 ， 两种多糖进行气相色谱 和凝腔柱层析分析 ， 将这 结果如下 ： Ｌ１ Ｐ 由葡 萄糖 、 甘露糖组成 ， 比例为 １２ ４ ， ： ．６ 分子量为 ７ ９ １ ＇ ４ｘ ０ Ｌ２ Ｐ 由葡 萄糖 、 半乳糖 、 甘露糖 、 阿拉伯糖、 半乳糖醛酸组成 ， 比例 为 １０ ７ ： ． ： ． ： ４ 分子量 １８ ５ｘ１４ ： ．３ ２ ６ １８ ０ ８ ， ． １ ０
纯 化方法 。本研究 从百 合水提 液 中分 离纯 化 鉴定 了两 Ｓ ａ 司产 品 ｉ 公 ｍ ｇ
种百合中功能性多糖 ， 为百合保健食品的开发研究提
供 了理 论依 据 。
１ 仪器 与 材料
兰色葡 聚糖 和 Ｇ一 ０ 为 Ｐ ａｍａｉ 司产 品 ２０ ｈｒ ｃ ａ公
木瓜蛋 白酶 （ 酶活力 ６ 万单位） ０ 为食用级 酶制剂厂产品
维普资讯
ｌ４ ０２ ｊ ３ ． １ ２０， ． ． ５ ２
矗 嗣■ 学
※分析检验
百合多糖 的纯化与化学结构鉴定研究
刘成梅
摘 要
付桂明
游海
涂宗财
万茵
江西南太 中德食品工程中心
南昌 ３０ ４ ３０７
本研究从百合水提液 中分离纯 化得到两种多糖 Ｌ ｔ ：得率分别为鲜百合重 ０ ５ ％ 、 ５ ， Ｐ、 ， ５ ０ ２ ％ 经纸层析和凝
二十世纪六十年代以来 ， 对百合保健功能的研究 开 始从单 纯药理 研 究 向保 健功 能成分 的研 究转变 ，国 式为 ｃｚ Ｏ， ｚ Ｎ 并对其抗癌功能作用及机理做了许多 Ｈ 研究 “。另有研究表明， 】 从百合中提取的皂甙具有止
咳 、平 喘等 功能 。而作为 百合 中主要功 能成分 之一 的
百合多糖的超声波提取条件的研究
百合多糖的超声波提取条件的研究作者：夏凡来源：《科技资讯》 2014年第35期夏凡（南京化工职业技术学院应用化学系江苏南京210048）摘要:以百合为原料制备百合多糖，研究百合多糖的超声波提取条件。
取 5.0 g百合碎片，超声波提取，滤去饱和残渣，合并提取液，减压浓缩至原溶液的1/4，加入5倍量无水乙醇沉淀，得到多糖粗品。
将多糖粗品溶解，采用Sevag法除去蛋白质，得到百合多糖。
以苯酚-硫酸法测定百合多糖含量。
在超声波功率500 w时，提取条件为提取时间30 min，料液比1:10，提取次数1次，得到的百合多糖含量最高。
通过对百合多糖的超声波提取条件的研究，为百合多糖的进一步开发利用提供了实验依据和有价值的参考。
关键词:百合多糖超声波提取条件中图分类号:R284.2文献标识码:A文章编号:1672-3791（2014）12（b）-0063-02百合既是珍贵蔬菜，又是著名的观赏球根类花卉，更是药食兼有的滋补佳品。
现代医学研究表明，百合为常用中药，性味甘寒，具有养阴清肺、清心安神、补中益气之功效。
百合多糖与其他植物多糖一样，具有较为广泛的药理作用，主要包括抗氧化、抗肿瘤、降血糖与免疫调节[1-13]。
为促进百合多糖的进一步开发和应用，该文研究了百合多糖的超声波提取条件，并对超声波提取百合多糖的最优化工艺条件进行了研究。
1材料与方法1.1 原材料与主要试剂百合产自湖南，符合2010年药典。
切小片。
苯酚，浓硫酸（98%），正丁醇，氯仿，所用水为三级纯水。
1.2 实验方法1.2.1 超声波提取取5.0 g百合碎片，加入蒸馏水，超声波提取，滤去饱和残渣，合并提取液，减压浓缩至原溶液的1/4，加入5倍量无水乙醇沉淀，得到多糖粗品。
将多糖粗品溶解，采用 Sevag法[14]除去蛋白质，得到百合多糖。
采用苯酚-硫酸[15]法测定多糖含量和得率。
1.2.2 苯酚-硫酸测定法精密量取供试品溶液1mL，置具塞试管中，加水1.0mL，精密加入5%苯酚溶液1mL摇匀，迅速精密加入硫酸5mL，摇匀，放置10 min，置40 ℃水浴中保温18 min，取出后迅速冷却至试温，以相应的试剂为空白，照紫外-可见分光光度法，在490 nm的波长处测定吸光度。
百合多糖提取技术研究进展
百合多糖提取技术研究进展作者：黄娟付亮李勇谢洲王强来源：《现代农业科技》2015年第17期摘要百合多糖是百合多种临床功效的主要作用因子之一，其生物活性高，在食品和生物医药方面具有广阔的应用前景。
综述了目前百合多糖提取的常用方法，包括溶剂法、酶法、超声辅助法和微波辅助法等，以供参考。
关键词百合多糖；提取；溶剂法；酶法；超声辅助法；微波辅助法中图分类号 R284.2 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2015）17-0317-01百合来源于百合科植物卷丹、百合、细叶百合等的干燥肉质鳞叶，它不仅营养丰富，而且还含有多糖、甾体皂苷、酚类化合物、黄酮类化合物和生物碱等多种活性物质，是一种药食兼用的保健食品和常见中药[1]。
在百合众多的天然活性物质中，多糖作为主要作用因子之一，具有增强免疫力、降血脂、抗氧化、防癌、抗癌等作用，在食品、生物医药方面具有广阔的应用前景。
随着百合多糖研究的不断深入，其提取技术也得到了很好的发展，目前百合多糖的提取方法主要有溶剂法、酶法、超声辅助法、微波辅助法等。
1 溶剂法溶剂提取法是从植物中提取有效成分的最传统方法，它依据相似相容原理，使有效成分溶于溶剂，早期的中草药煎煮或泡酒均采用此方法。
植物多糖属于极性化合物，提取过程中溶剂普遍选择水、醇等。
近年来，我国对多种植物多糖的提取进行了研究。
王文武等[2]采用水提法提取海藻多糖，提取工艺为温度80 ℃、pH值7.0、时间10 h，多糖提取率达7.8%，该方法操作简便、快速、成本低。
张玉等[3]研究表明金银花多糖的最佳提取工艺为水浸提2 h、温度90 ℃、氯仿萃取1次、80%乙醇沉析。
而百合多糖的水提工艺研究在近年也逐步开展起来。
刘成梅等[4]通过正交试验对影响百合多糖提取率的因素（固液比、温度、时间）进行了比较分析，结果表明影响多糖提取率的因素主次关系为温度>时间>固液比，并初步确定水提法提取百合多糖的最佳工艺条件为固液比1∶5、温度95 ℃、时间2 h。
水提法提取百合多糖优选工艺的研究
水提法提取百合多糖优选工艺的研究作者：熊明郁牛世全来源：《安徽农业科学》2014年第36期摘要[目的]优选水提法提取百合多糖的工艺条件。
[方法]以新鲜兰州百合为原料，采用水提法提取百合多糖，以浸提时间、固液比、温度以及浸提次数作为因素进行单因素试验，在单因素试验的基础上，采用L9（34）正交试验设计优化百合水溶性多糖的提取工艺条件。
[结果]试验表明，百合水溶性多糖的最优提取工艺条件为：固液比1∶20 g/ml，温度80 ℃，浸提时间1 h，浸提2次，此条件下百合粗多糖提取率为0.92%。
[结论] 研究可为兰州百合的研究与利用提供一定的理论依据。
关键词百合多糖；水法提取；正交试验中图分类号S644.1文献标识码A文章编号0517-6611（2014）36-13047-03Abstract[Objective] To optimize technique conditions for Lilium brownii polysaccharide. [Method] With fresh Lilium brownii as raw material， water extraction method was adopted，soaking time， solidliquid ratio， temperature and soaking times were used as factors to conduct single factor test. On the basis of this， L9（34） orthogonal design was conducted to optimize extraction technique for polysaccharide from Lilium brownii. [Result] The optimal extraction conditions are： solidliquid ratio 1∶20 g/ml， temperature 80 ℃， soaking time 1 h， the extraction rate of crude polysaccharide from Lilium brownii is up to 0.92%. [Conclusion] The study can provide a certain theoretical basis for research and utilization of Lilium brownii.Key words Lilium brownii polysaccharide； Water extraction method； Orthogonal design兰州百合（Lilium Brownii）是一种多年生鳞茎类草本植物，是百合科百合属川百合的一个变种。
百合多糖的分离纯化及抗肿瘤作用_弥曼
178
西 安 交 通 大 学 学 报 (医 学 版 )
第 30 卷
1. 2 实验动物 ICR 封闭群小鼠 , 清洁级 ( 合格证 号: 陕医动字 : 08-004) , 体重 18 ～ 22 g , 由西安交通大 学医学院实验动物中心提供 ; H 22 种鼠由第四军医 大学实验动物中心提供 。 1. 3 方法 1. 3. 1 百合多糖的提取及分离纯化 采用水提醇沉 法 , 得水溶性百合粗多糖 。 百合粗多糖经 Sevag 法除 蛋白 8 次 , 经透析 、 冷冻干燥后 , 得到初步纯化的百合 多糖 。 采用 DEA E-纤维素柱分离法[ 1] 对冷冻干燥物 进行分离纯化 。 取定量 DEA E-纤维素 , 用蒸馏水浸 泡 , 再用 0 . 5 mol/ L NaOH 及 0 . 5 m ol/ L NaCl 混合 液处理 30 min , 抽干后用蒸馏水洗至中性 , 0 . 5 m ol/ L H Cl 溶液处理 30 min , 抽干后 用蒸馏 水洗至 中性 。 用 pH 6 . 0 磷酸 盐缓冲 溶液处理 后 , 脱气 装柱 ( 2. 5 cm ×50 cm ) 。 把冷冻 干燥物溶于蒸馏水 , 制成 0 . 5 g / L 水溶性百合多糖溶液 。 准确吸取该溶液 2 mL 上 样 , 5 min 后待多糖渗入 DEAE-纤维素后以蒸馏水洗 脱 , 流速为 0 . 5 m L/ min , 每管 5 m L , 各管用蒽酮硫酸 法检测 , 直至无洗脱峰为止 。 再用 0 . 1 mo l/ L 和 0 . 5 m ol/ L 的 NaCl 溶液 洗脱 弱 酸性 多糖 , 最 后用 0 . 5 m ol/ L 的 NaOH 溶液 洗脱酸性 多糖及蛋 白质类物 质 。 在各过程中 , 均用蒽酮硫酸法检测多糖 , 并用紫 外分光光度计在 280 nm 处对蛋白质类物质的洗脱情 况进行监测 。 将用蒸馏水洗脱的洗脱液按洗脱峰进 行收集得纯化的百合多糖 , 其为百合中性多糖 。 1. 3. 2 百合中性多糖的纯度测定 凝胶层析柱法[ 2-3] 检验纯度 。 取 SephadexG-200 凝胶柱( 1. 5 ×45) 层析 。 使用前用 0 . 05 mol/ L NaCl 平衡 2 d , 流速为 5 ～ 6 mL/ h , 取纯化的百合多糖 3 mg 溶于最小体积的 0 . 05 mol/ L NaCl 中 , 上柱 , 用 0 . 05 mol/ L NaCl 溶 液洗 脱 , 流 速 8 mL/ h , 按 2 mL/ 管分部收集 , 并每管以蒽酮硫酸法跟 踪检测糖含量 , 观察洗脱峰以检验纯度 。 1. 3. 3 免疫器官重量及肿瘤抑制率的测定 取接种 7 d 的种鼠腹水癌细胞 , 用生理盐水制成细胞数为 1 ×106 个/ mL 的细胞悬液 , 以每鼠 0 . 2 mL 接种于小鼠右腋皮 下 , 24 h 后随机分为正常组 、 肿瘤模型对照组 、 不同剂量 纯化百合多糖给药组[ 50 、 100 、 200 mg/( kg · d) ] 及5 -Fu 对照组 , 每组 10 只 。 正常组及肿瘤模型对照组用等量 生理盐水灌胃 , 不同剂量纯化百合多糖给药组及 5 -Fu 对照组分别给予纯化百合多糖及5 -Fu灌胃 , 连续 7 d 。 第 8 天处死小鼠 , 摘取瘤块 、 胸腺 、 脾 , 分别按文献方法计算 肿瘤抑制率 、 胸腺指数及脾指数[ 4] 。 1. 3. 4 LP-1 小鼠巨噬细胞吞噬活性的测定 接种 、 分 组及给药同上 。 各组小鼠于给药第 2 天 、 第 5 天分别腹 腔注射 5 g/ L 可溶性淀粉 25 mL/ kg多糖中分离出百合中性 多糖 、 百合弱酸性多糖 、酸性多糖及蛋白质 , 并对中性 多糖进行了抗肿瘤及非特异性免疫调节研究 。 1 材料与方法 1. 1 主要 试剂与 仪器 百合 粗多糖 干燥制 剂 ( 自 制) ; DEAE-纤维素 ( 上 海生化试 剂公司 ) ; SephadexG-200( 上海生物工程公司) ; 其他试剂 均为国产分 析纯 。 大容量离心机 、旋转蒸发器 、烘箱 、透析袋( 截 留分子质量 8000 , 华美生物工程公司) ; 磁力搅拌器 、 H L-2B cm 数显恒流泵 、梯度混合仪 、SBS-100 自动 分部收集器( 上海沪西分析仪器厂) 。
百合多糖的研究进展
百合多糖的研究进展摘要：本文主要通过对百合多糖的提取纯化工艺、结构分析、药理作用进行整理分析。
指出在百合多糖研究过程中的一些不足，探讨百合多糖将来的的研究方向。
关键词：百合多糖；药理作用The research progress of Lily- PolysaccharideHE Hong,LIU Yuehong,LIU Jie.(Dong zhi men Hospital Beijing University of Chinese Medicine,Beijing100700,China)Abstract: This article collects and analyze that the extraction 、depuration 、 structural analysis and pharmacologic actions of Lily- Polysaccharide。
Indicating that the shortage of the research procedure, and approaching the trend of future' s research.Keywords: Lily- Polysaccharide pharmacological effects原发性肝癌是最常见的消化系统恶性肿瘤之一,当今在治疗肝癌的方法上不断改进，主要有手术切除、进行肝脏移植、放化疗、细胞免疫法治疗等，治病同时还要考虑病人的术后生存率。
诸多因素，对肝癌的治疗仍然很局限，特别在预防方面和治疗手段的选择上都不太成熟。
近年来[2]，一些中药材所含的植物多糖的多种显著的生物活性和药理作用备受关注重视。
百合中含有含秋水仙碱、皂苷、百合多糖等多种天然活性成分，其中百合多糖是其主要功能因子之一，具有多种药理作用：抗肿瘤作用，降血糖作用,抗氧化作用，免疫调节作用，抗疲劳、抗应激作用。
这是多糖类所共有的功效[4]。