艾滋病的实验室检测流程
HIV抗体检测标准操作程序(SOP)
HIV抗体检测标准操作程序（SOP）——微生物科一、样本的采集和处理二、检测方法和步骤三、质控品的应用方法四、仪器的使用和维护五、结果的记录、解释与报告六、保密程序七、实验室的清理、消毒八、艾滋病检测实验室安全防护九、附表样品的采集和处理1.1血清样品采集：用注射器抽出一定量静脉血，室温下自然放置1-2小时，待血清凝固和血块收缩后在用3000rmp离心15min，吸出血清备用。
1.2抗凝血样品采集：用加有抗凝剂的真空管或用消毒注射器抽取静脉血，转移至加有抗凝剂的试管，反复轻摇，分离血浆和血细胞备用。
1.3采样注意事项：1.3.1采集样品应按临床采血技术规范及试剂盒说明书要求进行。
1.3.2采集标本时应注意安全，直接接触HIV感染者或艾滋病病人血液和体液的操作应戴双层手套。
2、样品的保存：2.1用于抗体检测的血清或血浆样品应存放与-20摄食度以下，短期（1周）内进行检测的样品可存放于2-8摄食度。
3.样品的运送：3.1实验室间传递的样品应为血清或血浆，除特殊情况外一般不运送全血。
样品应置于带盖的试管内，试管上应有明显的标记，标明样品的编号或受检者姓名、种类、、采样时间。
3.2将试管放入专用带盖的容器内，容器的材料要易于消毒。
在试管的周围垫有缓冲吸水材料，以免碰碎。
3.3特殊情况下如需对个别样品进行复测，可以用特快专递形式投寄，但必须将盛有样品的试管包扎好，保证不会破碎和遗漏。
4.1含有感染性样品的包裹必须在具有处理感染源设备的实验室内由经过培训的工作人员打开，用后的包裹应进行消毒。
4.2核对标本与送检单，检查样品管有无破损及遗漏。
如发现遗漏应立即将尚存留的样品移出、对样品管和盛器消毒，同时还要报告有关领导和专家。
检验方法和步骤1.检验方法：酶联免疫吸附试验（ELISA）2.检验步骤：严格按照试剂说明书操作。
3.注意事项：3.1禁止肉眼判读！3.2保证酶标仪，洗板机正常运转，保证加样器准确，选择高质量的与加样器配套的TIP头3.3使用有效期内的试剂3.4保证样品质量质控品的应用方法1.质控品按临床样本对待，操作应依照实验室安全管理条例执行。
我国HIV常用检测方法和流程
我国HIV常用检测方法和流程初筛抗体+WB法确认目前国内实验室多采用「初筛抗体+WB 法确认」等两步法进行HIV检测及确诊。
初筛实验室初筛阳性，不能出具阳性报告，必须进入复检试验。
对初筛有反应的样品，用原有试剂双份或双孔进行复检试验（或者两种试剂复检），如均无反应，报告「HIV 抗体阴性」；如均有反应或一个有反应一个无反应，需要送检做确证实验，报告HIV 感染待确定。
目前大部分临床实验室为艾滋病初筛实验室，开展常规初筛实验，发现阳性结果初步复检后送省市CDC 或当地其他确认实验室做确认实验。
1、条带条带是HIV确认实验——免疫印迹试验（WB）实验所呈现出的结果，如上图。
原理是WB 采用间接法检测样品中的抗HIV-1/HIV-2 特异性抗体。
采用聚丙烯酰胺凝胶电泳把分子量大小不等的HIV 蛋白分离开来，经过一系列处理后，硝酸纤维素膜显示与特异抗原的结合的抗体条带，从而确诊抗体的存在。
HIV-1抗体特异带包括env带：gp160/gp120、gp41；gag带：p55、p24、p17（或p18）；pol带：p66（或p65）、p51、p31。
HIV-2抗体特异条带包括env带：gp140/gp105、gp36；gag带：p56、p26、p16；pol带：p68、p53、p34。
（由于使用的毒株不同，HIV-2 env带也可为gp125/gp80、gp36）。
2、根据条带判断是否感染HIVHIV-1抗体阳性同时符合以下2条标准可判为HIV-1抗体阳性：①至少有2条env带（gp41和gp160/gp120）出现，或至少1条env带和p24带同时出现；②符合试剂盒提供的阳性判定标准。
（目前实验室判定阳性一般是gp41和gp160/gp120+p24）HIV-2抗体阳性出现HIV-2型特异性指示带的样品：如果同时呈HIV-1抗体阳性反应，报告HIV-1抗体阳性，不推荐进一步做HIV-2抗体确证试验；如果同时呈HIV-1抗体不确定或阴性反应，需用HIV-2型确证试剂再做HIV-2的抗体确证试验。
艾滋病的实验室检测流程
艾滋病的实验室检测流程艾滋病的实验室检测流程中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心继发布《全国艾滋病检测技术规范(2009 年版)》后，近日即将发布2015 年版《全国艾滋病检测技术规范》，此规范堪称艾滋病检测实验室的「红宝书」，适用于疾病控制中心艾滋病确认实验室和医疗机构的艾滋病初筛实验室的HIV 检测技术操作。
下面是yjbys店铺为大家带来的艾滋病的实验室检测流程的知识，欢迎阅读。
检测项目的样品种类1 HIV 抗体检测：全血、血清、血浆、口腔黏膜渗出液、尿液以及干血斑样品。
2 HIV 抗原检测：全血、血清、血浆、病毒培养上清液。
3 T 淋巴细胞亚群测定：EDTA 或肝素抗凝全血。
4 HIV-1 病毒载量、基因型、耐药检测：血浆、滤纸干血斑(DBS)。
5 HIV 核酸定性与定量、基因型检测和 HIV-1 分离培养：淋巴细胞富集液、外周血单核淋巴细胞(PBMC)及全血。
当然，实验室最常用的仍然是血液标本，其他只作为补充样本。
HIV 抗体检测HIV 抗体检测是艾滋病实验室检测的优先选择项目，在国内绝大多数初筛实验室应用最广泛。
1 初筛方法(1)酶联免疫吸附试验(ELISA)ELISA 法检测 HIV 抗体是 HIV 初筛实验室最常用最普遍的方法，目前检测试剂已经发展到第四代，即同时检测血液中HIV-1P24 抗原和HIV-1/2 抗体，秉承「宁可错杀一千，不可漏网一个」的革命精神，其灵敏度远高于特异性，直叫 HIV 抗体无处遁形。
(2)化学发光或免疫荧光试验(CIA/IFA)这个试验方法是近 10 年迅猛发展的一种新型检测方法，其采用发光或荧光底物，既可检测抗体，也可联合检测抗原抗体，用发光或荧光仪测定结果，其灵敏度较ELISA 有了进一步的提高，同时带来的是检测成本的增加和假阳性率的增高。
(3)快速检测(RT)方法此类方法操作简便快速，适用于应急检测、门诊急诊检测，但灵敏度和特异性远不如ELISA 和发光法，但是经济实惠，也有一定的市场影响力。
HIV实验室SOP文件
HIV筛查实验室工作管理程序一、目的对HIV筛查实验室工作全过程进行控制，保证检验工作符合规定要求，提供可靠的检验数据和有效的检验报告。
二、范围适用于本实验室开展的各类医学检验工作的各个环节。
三、职责1、工作人员负责门诊检验样品的采集。
2、工作人员负责住院检验样品的接收。
3、负责人负责组织协调完成检验任务，并负责对检验工作质量的监督。
4、工作人员负责执行检验任务，做好检验记录，填报检验数据。
5、报告授权审核人负责检验报告的签发、发放。
6、实验室负责人负责检验资料的归档保管(计算机)工作。
四、工作程序（一）、检验工作分类本实验室的检验工作，根据标本的来源不同分为采样检验和送样检验，根据工作性质分为常规标本检验和检验质量抽检委托复检。
（二）、委托复检工作需按下列程序执行：1、当面核对标本姓名、性别、年龄及标本质量等资料；2、按要求进行检验；3、必要时委托方可全程参与检验过程；4、其余程序与常规检验标本相同。
（三）、采样及样品管理采样执行本科程序文件《标本采样管理程序》。
样品接收、分发和保管处理，执行本科程序文件《标本管理程序》和《标本采样管理程序》。
样品一旦受理即给予受理编号。
（四）、标本检验检验执行本科程序文件《标本检验管理程序》和《检验项目标准操作规程》。
（五）、检验依据1、国家标准方法；2、部颁标准方法和检验规范；3、卫生技术部门推荐使用方法；4、有关科技文献或杂志上发表的方法；5、自编规程的使用执行《检验方法确认程序》。
（六）、检验实施检验人员按检验标准或作业指导书的要求按时完成检验任务，并按程序文件《记录档案管理程序》做好原始记录。
（七）、检验报告的编制、复核和签发按本科程序文件《检验报告管理程序》执行。
（八）、检验方法控制检验必须按《全国临床检验操作规程》规定的方法或标准检验方法进行，也可用经本科技术负责人批准的非标准检验方法进行。
其他检验方法不得采用。
HIV筛查实验室工作流程图HIV筛查实验室规章制度一、实验室工作制度1、热爱党，热爱社会主义，坚持四项基本原则，全心全意为人民服务。
实验室艾滋、梅毒和乙肝相应项目的标准化操作程序
实验室艾滋、梅毒和乙肝相应项目的标准化操作程序实验室是进行各类病原微生物检测的重要场所，包括艾滋病、梅毒和乙肝等项目的标准化操作程序也是实验室工作的核心。
标准化操作程序的制定，旨在确保实验室工作的准确性、可靠性和连续性，最大程度地减少误差和风险。
下面将详细介绍实验室艾滋病、梅毒和乙肝项目的标准化操作程序。
一、艾滋病检测项目的标准化操作程序：1.标本采集：按照规定的采样方法采集血液标本，包括静脉血和采血盒采集的血液。
2.样本处理：收到标本后，首先检查样本标签和申请单上的信息是否一致，然后进行样本分装和保存，确保样本的完整性和稳定性。
3.样本检测：使用艾滋病抗体检测试剂盒进行检测。
按照检测试剂的说明书，将样本和试剂按照比例混合并孵育一定时间，然后进行洗涤和显色。
4.结果判断：根据试剂盒的说明书，根据显色反应的强度和比色卡提供的判断标准，判断样本阴阳性。
5.结果记录和报告：将检测结果记录在检验记录中，并生成相应的实验报告，确保结果能够及时准确地传达给临床医生。
二、梅毒检测项目的标准化操作程序：1.标本采集：按照规定的采样方法采集血液标本，包括静脉血和采血盒采集的血液。
2.样本处理：收到标本后，首先检查样本标签和申请单上的信息是否一致，然后进行样本分装和保存，确保样本的完整性和稳定性。
3.样本检测：使用梅毒抗体检测试剂盒进行检测。
按照检测试剂的说明书，将样本和试剂按照比例混合并孵育一定时间，然后进行洗涤和显色。
4.结果判断：根据试剂盒的说明书，根据显色反应的强度和比色卡提供的判断标准，判断样本阴阳性。
5.结果记录和报告：将检测结果记录在检验记录中，并生成相应的实验报告，确保结果能够及时准确地传达给临床医生。
三、乙肝检测项目的标准化操作程序：1.标本采集：按照规定的采样方法采集血液标本，包括静脉血和采血盒采集的血液。
2.样本处理：收到标本后，首先检查样本标签和申请单上的信息是否一致，然后进行样本分装和保存，确保样本的完整性和稳定性。
HIV初筛实验室标准操作规程
HIV初筛实验室标准操作规程人类免疫缺陷病毒（HIV）1+2型抗体酶联免疫原理和方法（上海科华生物）原理：用HIV-1+2型抗原包被酶联板。
待检血清或血浆中的抗-HIV抗体与包被抗原反应，再与酶标HIV-1+2型抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物。
加底物（TMB显色，在酶标仪上测定后根据0D值判定有无HIV抗体的存在。
操作步骤：1、取出HIV抗原包被板。
每次试验设空白对照1孑L,阴性对照各1孑L,阳性对照各3孔（其中阳性对照1两孔，阳性对照2 一孔），质控一孔。
分别加入HIV阴、阳性对照质控血清各100微升，其余孔加入待检样本各100微升。
贴上封口胶，置37C温育60分钟。
2、将浓缩洗液用纯化水25倍稀释后洗涤用。
3、弃去各孔中样品、拍干。
每孔加满洗液，静置数秒后弃去，如此重复洗5次，拍干。
4、每孔加入酶标抗原工作液100微升，贴上封口胶。
37E温育30分钟。
5、弃去各孔中酶液，用洗液反复洗涤5次（操作同步骤3）。
&每孔加入底物液A50微升，再加入底物液B50微升，轻拍混匀，置37E 避光显色30分钟。
7、显色完毕后，每孔加入终止液50微升，轻拍混匀，置酶标仪450nm波长处测定OD fi （参考波长为630nm。
结果判定：阴、阳性对照和被检样本的0D值减去空白对照0D值即为计算值。
2、若阴性对照0D均值小于按计算。
3、临界值（cut off 值）的设定：cutoff 值=PCx X 10% （若PCx＞按算）4 、被检样本的OD®》临界值应判为HIV抗体阳性反应，＜临界值为阴性反应。
检测样本的OD值》临界值判为HIV抗体阳性，应重新取样双孔复试，复试阳性者应按照“全国HIV检测管理规范”送“ HIV确认实验室”进行确认实验。
注意事项：1、本试剂的使用单位必须是当地卫生行政部门批准的HIV初筛实验室。
2、整个HIV检测必须符合《全国艾滋病检测工作规范》严格防止交叉感染。
操作时必须戴手套，穿工作衣，严格健全和执行消毒隔离制度。
艾滋病检测实验室基本操作流程
艾滋病检测实验室基本操作流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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HIV实验室检测方法和步骤
HIV实验室检测方法和步骤HIV，也称为人类免疫缺陷病毒，是一种能导致艾滋病的病毒。
HIV实验室检测方法和步骤被广泛应用于检测感染HIV的个体。
以下是一般情况下使用的实验室检测方法和步骤的详细说明。
1.预处理和登记在进行HIV实验室检测之前，需要对样本进行预处理和登记。
预处理包括标识样本的相关信息，如样本编号和患者信息。
这些信息对于结果记录和跟踪是至关重要的。
此外，还需检查样本的适应性和完整性。
2.血液样本采集3.血清分离采集到的血液样本需要进行血清分离。
这可以通过离心来分离血液的不同成分，例如血红蛋白和血清。
离心速度和时间需要根据实验室设备和协议进行调整。
4.酶联免疫吸附测定法（ELISA）最常用的HIV实验室检测方法是酶联免疫吸附测定法（ELISA）。
这种方法使用特定的抗体来检测血液中特定的抗原。
根据ELISA方法的不同，可检测HIV抗原或抗体。
实验室技术人员将患者血清样本加入到已包含HIV相关抗原或抗体的试剂盘中，然后根据试剂盘的建议操作，包括孵育时间、温度和洗涤步骤。
任何与接触抗原或抗体反应的特异性颜色改变，都可作为阳性结果。
否则，结果被视为阴性。
5.确认试验在进行HIV检测的初步结果后，通常会进行一个或多个确认试验。
确认试验的目的是统一确定检测结果的可靠性。
常用的确认试验包括HIV免疫荧光试验（IFA）和西方印迹法（Western blot）。
这些试验通过检测血清中的HIV特异性抗体，以确保先前的结果的准确性。
6.分子检测有时，为了获得更加可靠和敏感的结果，实验室会使用分子检测方法，例如聚合酶链式反应（PCR）。
PCR可以检测和放大病毒的基因或核酸，以确定HIV感染的存在和病毒的数量。
7.结果解读和记录HIV实验室检测结束后，实验室技术人员需要解读并记录结果。
阳性结果意味着存在HIV感染，而阴性结果则表示未检测到HIV感染。
针对不同的检测方法和样本类型，结果的解释可能有所不同。
因此，在结果解读和记录时，实验室人员需要严密遵循实验室的标准操作规程（SOP）。
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艾滋病的实验室检测流程
中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心继发布《全国艾滋病检测技术规范(xx 年版)》后，近日即将发布 xx 年版《全国艾滋病检测技术规范》，此规范堪称艾滋病检测实验室的「红宝书」，适用于疾病控制中心艾滋病确认实验室和医疗机构的艾滋病初筛实
验室的 HIV 检测技术操作。
下面是为大家带来的艾滋病的实验室检测流程的知识，欢迎阅读。
检测项目的样品种类
1 HIV 抗体检测：全血、血清、血浆、口腔黏膜渗出液、尿液以及干血斑样品。
2 HIV 抗原检测：全血、血清、血浆、病毒培养上清液。
3 T 淋巴细胞亚群测定：EDTA 或肝素抗凝全血。
4 HIV-1 病毒载量、基因型、耐药检测：血浆、滤纸干血斑(DBS)。
5 HIV 核酸定性与定量、基因型检测和 HIV-1 分离培养：淋巴细胞富集液、外周血单核淋巴细胞(PBMC)及全血。
当然，实验室最常用的仍然是血液标本，其他只作为补充样本。
HIV 抗体检测
HIV 抗体检测是艾滋病实验室检测的优先选择项目，在国内绝大多数初筛实验室应用最广泛。
1 初筛方法
(1)酶联免疫吸附试验(ELISA)
ELISA 法检测 HIV 抗体是 HIV 初筛实验室最常用最普遍的方法，目前检测试剂已经发展到 * ，即同时检测血液中 HIV-1P24 抗
原和 HIV-1/2 抗体，秉承「宁可错杀一千，不可漏网一个」的革命
精神，其灵敏度远高于特异性，直叫 HIV 抗体无处遁形。
(2)化学发光或免疫荧光试验(CIA/IFA)
这个试验方法是近 10 年迅猛发展的一种新型检测方法，其采
用发光或荧光底物，既可检测抗体，也可联合检测抗原抗体，用发光或荧光仪测定结果，其灵敏度较 ELISA 有了进一步的提高，同时带
来的是检测成本的增加和假阳性率的增高。
(3)快速检测(RT)方法
此类方法操作简便快速，适用于应急检测、门诊急诊检测，但
灵敏度和特异性远不如 ELISA 和发光法，但是经济实惠，也有一定
的市场影响力。
主要包括以下几种方法：明胶颗粒凝集试验(PA)、免疫渗滤试验、免疫层析试验。
2 确认实验
(1)免疫印迹试验(WB)
WB 采用间接法检测样品中的抗 HIV-1/HIV-2 特异性抗体。
采
用聚丙烯酰胺凝胶电泳把分子量大小不等的 HIV-1 蛋白分离开来，
经过一系列处理后，硝酸纤维素膜显示与特异抗原的结合的抗体条带，从而确诊抗体的存在。
(2)条带/线性免疫试验(RIBA/LIA)
实验原理基本同 WB 法，不再赘述。
HIV-1 抗原检测
1 筛查实验
(1)酶联免疫吸附实验(ELISA 法)：即 * 抗原抗体联合检测试剂盒。
抗体包被固相反应孔(管)的底部，待测样本中 P24 抗原与包被抗体形成抗原抗体复合物，再加入酶(HRP)标记的 HIV-1 抗体与抗原结合，加底物显色，在酶标仪上读取结果。
因同时检测抗原抗体，灵敏度大大提高，有效缩短了 HIV 感染的检测窗口期，但因试剂成本较高，在普通筛查实验室推广有一定难度。
(2)酶联荧光分析法(ELFA)：待测样品的 p24 抗原与包被在固相孔(管)内的 p24 抗体结合，并被生物素标记的 p24 抗体识别。
临床实验室应用前景不明朗，需要荧光检测设备，成本较高。
(3)电化学发光法(ECLIA)：待测样品的 p24 抗原与包被抗体的磁性微粒和发光剂标记的抗体在反应管中温育，形成磁性微珠包被抗体-抗原-发光剂标记抗体复合物。
(4)抗原抗体快速检测法：同快速方法(RT)检测抗体，不同之处是用 HIV 抗体包被载体，检测灵敏度同样较差。
2 中和试验
中和试验主要是 p24 抗原检测的补充试验，还可做 HIV-1RNA 的定性或定量检测，以排除筛查试验的假阳性。
(1)酶联免疫吸附实验(ELISA 法)：待检样品先与中和剂(p24 抗原的抗体)共同孵育，如果样品中存在 p24 抗原，中和抗体将与之结合形成复合物，而不能与固相载体上的捕获抗体结合。
(2)酶联荧光分析法(ELFA)：原理和检测步骤同上述酶联免疫吸附实验(ELISA 法)，中和率≥ 60 %，认为样品中的 p24 抗原是真
阳性。
(3)电化学发光法 (ECLIA)：原理和检测步骤同上述酶联免疫吸附实验(ELISA 法)，中和率大于 50%，认为样品中的 p24 抗原是真
阳性。
HIV 核酸检测
目前国内 HIV 核酸检测试剂主要为 Taqman 实时荧光 PCR 检
测试剂，可检测血浆、血清、组织器官或血液制品的 HIV-1RNA 和 DNA，DBS 可用于检测 RNA/DNA。
全球目前正式用于临床诊断 HIV-1 急性
期感染的核酸检测试剂比较少，主要是美国 FDA 批准的 Gen-Probe 公司生产的 Aptima HIV-1 RNA 核酸定性检测试剂和欧盟批准的Abbott M2000 HIV-1 RNA/DNA 定性检测试剂。
临床诊断相关的检测策略及结果报告
HIV 检测阳性结果的检测过程一般经历两个阶段，初筛和复检
程序。
以 HIV 抗体检测为例，具体流程如下：
试剂 1 进行初筛，结果无反应，报告「HIV 抗体阴性」;结果
有反应，不能出具阳性报告，必须进入复检试验。
对初筛有反应的样品，用原有试剂双份或双孔进行复检试验(或者两种试剂复检)，如均无反应，报告「HIV 抗体阴性」;如均有反应或一个有反应一个无反应，进行补充试验(抗体确证试验和 HIV-1 核酸试验)，报告 HIV 感染待确定。
目前大部分临床实验室为艾滋病初筛实验室，开展常规初筛实验，发现阳性结果初步复检后送省市 CDC 或当地其他确认实验室做确认实验。
临床诊断筛查检测流程见下图：
目前国内实验室多采用「初筛抗体+WB 法确认」等两步法进行HIV 检测及确诊，并严格进行人员、仪器、方法学质量控制，建立了遍布全国的临床医疗机构的初筛实验室及省市 CDC 的确认实验室，基本满足了日益增长的艾滋病病人的检测及病情的变化的监测。
内容仅供参考。