氢化物发生— 原子荧光的基本原理及其

用氢：
2.血样的前处理方法：运用湿消化 法这一消化体系，因此法可更为完 全的消解血中蛋白及其他复杂成分。 我们采用的方法是在100μl血样中 加入4:1硝酸、高氯酸，经160℃消 化1.5小时后，再270℃消化1小时。 这种样品的处理方法对本实验最为 适用。
氢化物----原子荧光光谱的原理
原子吸收光谱法（AAS）测定As、Sb、Se和Te等元素 时遇到不少困难。原因在于样品溶液直接喷入火焰， 加上这些元素的最佳分析线都处于近紫外区（小于 230mm），在常规火焰中产生强大的背景吸收（比如 空气——乙炔火焰中193.7mm线的背景吸收等于有用 信号的62%），使信噪比很差。采用较低温度的氩 （载有空气）——氢火焰将193.7mm的背景吸收降到 有用信号的15%，从而改善了信噪比。但这种火焰蒸 发能力差，未完全解离的盐粒和分子将产生很大背景 吸收。电热原子器（石墨炉）测定的困难在于，这些 元素处于短波分析线，产生了碳粒光散射引起的严重 基体干扰
不同价态的元素与硼氢化物反 应并不相同，其最佳反映pH值、 峰状、信号的大小均可能不同。 如三价砷可以在较广泛的pH范 围内与硼氢化物反应，而五价 砷则在pH>3时几乎不与试剂反 应。
铅的氢化物为PbH4，但在
溶液中Pb一般以二价元素存 在，故一般需要加入氧化剂， 常用的氧化剂有铁氰化钾， 重铬酸钾，高锰酸钾等，其 酸度一般在pH=1左右。
5.方法可行性：
②. 精密度：取高、中、低三种铅浓 度的混合全血样品，用本法连续测 定 20 次 ， 测 定 的 平 均 值 分 别 为 48.6μg/L、134.5μg/L、224.8 μg/L， 批 内 变 异 系 数 (CV) 分 别 为 4.1% 、 3.6%、3.5%；连续测定20天，批间 变 异 系 数 （ CV ） 分 别 为 4.9% 、 4.6%、4.7%，表明本法精密度良好。
氢化物—原子荧光法测定血硒(Se)的应用：
3．还原剂的配置：
1.5%(W/V) 硼 氢 化 钾 溶 液 : 称取2g KOH溶于200ml纯水中， 加入15g硼氢化钾，溶解后用水 稀释至1000ml，摇匀。
氢化物—原子荧光法测定血硒(Se)的应用：
4．工作条件：
负高压 ：270V
灯主电流 ：90mA
用氢化物—原子荧光法测定末梢血血铅(Pb) 的研究及应用：
综上所述，应用氢化物发生 原子荧光法对儿童末梢血铅 含量进行定量测试，在一定 范围内，具有线性关系好、 灵敏度高、干扰小、采血量 小等优点。
氢化物—原子荧光法测定 末梢血血硒(Se)的应用：
氢化物—原子荧光法测定血硒(Se)的应用：
1.样品的处理：
(2) 全 国 铅 质 控 盲 样 的 检 测 ： 用本实验方法对中国预防医
学科学院环境卫生监测所的
全国铅质控盲样进行检测， 结果表明，测得每组6个不同 浓 度 (20---373μg/L) 含 量 与 “真值”间离散度小，报告 值与“真值”基本一致。
5.方法可行性：
④检测限：按检测下限由“0” 管的3倍标准差计算（n=20）， 本法的检测下限为血铅浓度 3μg/L（取样量0.1ml），最低 检出量为0.3ng铅。
原子化器温度：室温 原子化器高度 ：7mm
硼氢化钾浓度：1.5%
载流
：20%(V/V)HCl
Ar 气流量 ：800ml/min
测定方式 ：标准曲线法
读数方式 ：峰面积 积分时间 ：16 S
延时时间 ：2 S
进样体积 ：2 ml
“共振荧光”主要是指 激发光的波长和次级荧 光波长相同的共振，同 时也包含共振电子跃迁 的荧光发射。
2．非共振荧光
当 激 发 线 和 观 察 到 的 荧 光 线波长不相同时，就产生 非共振荧光。它的主要类 型有直跃线荧光，阶跃线 荧光和反斯托克斯荧光。
3．敏化荧光
被 外 部 光 源 激 发 的 原 子 或 分 子（给予体）通过碰撞把自 己的激发能量转移给待测原 子（接受体），然后接受体 通过辐射去活化而激发出原 子荧光，这就是敏化荧光。
产生态的氢把分析物质反应还 原成氢化物。
硼氢化物（NaBH4或KBH4）溶 液在水中极易分解很不稳定，必 须配制在碱性溶液中以防止其自 然分解。硼氢化物的浓度视分析 物质的量、不同分析元素氢化反 应要求而定。
硼氢化物的分解可能是表面催 化分解，其溶液碱性越大分解 越慢。硼氢化物在反应过程中 一般是过量的，这是为了保证 氢化物元素充分还原，反应时 产生的过量氢气有助于将反应 混合溶液中的氢化物释出。
100µl抗凝血于试管中，加入 4:1硝酸。高氯酸，165℃硝化 1.5小时剩余液体少量、无色。 用20%Hcl稀释至4ml，待测。
氢化物—原子荧光法测定血硒(Se)的应用：
2．标准液的配置： 用 Se 标 准 储 备 液
（ 100μg/ml ） 配 置 硒 的 标 准 系 列 ： 0.0 、 1.0 、 2.0 、 4.0 、 8.0μg/L。
六价的Se完全不与硼氢化钾（钠） 反应。四价的Se与氢化物发生反应
要求的酸度范围很宽，且一般倾向
于较高酸度，因为⑴可得到较高的
分析灵敏度；⑵可增强体系对过渡
金属或金属离子抗干扰能力；⑶对 Se而言，盐酸本身可作为一种预还 原剂，把Se（Ⅵ）还原成Se （Ⅳ） （所用酸度一般在5~6mol/L左右）； ⑷高酸度的盐酸不会导致副反应。
的研究及应用：
1.采血过程中环境对标本的污染处理：由 于取血量少，检测方法灵敏度高，微量的 铅污染就可造成结果出现较大的误差。为 此我们改善了取血环境，尽可能减小污染。 采血前先用肥皂洗手，再分别用 1%EDTA 棉 球 、 酒 精 棉 球 、 干 棉 球 擦 拭 采血部位，采血时血流顺畅。在此条件下 采取的末梢血与静脉血血铅含量进行比较， 结果一致。
4.酸度、还原剂浓度及氧化剂的选择：
②还原剂浓度及氧化剂的选择：还原剂的 浓度会影响氢化物PbH4的生成浓度。因此， 选择硼氢化钾浓度为15g/L时最佳。由于铅 的氢化物为PbH4，但在溶液中Pb一般以二 价元素存在，故一般需要加入氧化剂，常 用的氧化剂有铁氰化钾、重铬酸钾、高锰 酸钾等。实验中在15g/L的硼氢化钾中加入 2%的铁氰化钾作为试验的还原剂，得出的 结果令人满意。（还原剂最好现用现配）
氢化物发生— 原子荧光 的基本原理及其应用
原子荧光：
是激发态的原子以光辐射的 形式放出能量的过程。当自 由原子吸收由一合适的激发 光源发射出的特征波长辐射 后被激发，接着辐射去活化 而发射出荧光。
1．共振荧光
当时的态E原 ， 亚2，子处 稳被受于 态激到基E1发波态）的长E的0原为电（子子或λA的由跃处光迁于E2能到E回0照激邻 到射发近 到 基放E从λA0=跃 E态 出λ2E回迁波F这0（ 到到长类为或EE荧20λ所时亚光f的吸放稳称荧收出态为光的的E共1。能能）振由量 量时荧于等 ，，光电于 因它。子它 此就由
反应介质及酸度
Se（ⅠⅤ） 1-6 mol/L HCl Pb（ⅠⅤ） 1%K3Fe(CN)6 1% HCl
氢化物发生技术的主要优点：
1．待测元素能与绝大多数基体成分 分离，并可消除其能产生的各种干 扰；
2．气态氢化物可直接导入原子化器 中，与溶液直接喷雾进样相比，氢 化物发生法能将待测元素充分预富 集、进样效率近似100%；
5.方法可行性：
③. 准确度：
(1)回收试验：取已测得铅含量为 51.5、112.2、206.4μg/L的全血标 本，分别加入浓度为50、100、 200μg/L 铅 标 准 液 进 行 回 收 试 验 ， 按体积比1：1混合。平均回收率 分 别 为 105.4% 、 98.5% 、 94.8% （n=6）。
氢化物发生技术的主要优点：
3．生成的气态氢化物在形成的氩氢 火焰石英管原子化器中有极高的原 子化效率；
4．连续流动氢化物发生装置易于实 现自动化；
5. 不同价态的元素氢化物发生，在 某些特定条件下，可进行价态分析。
用氢化物—原子荧光 法测定末梢血血铅(Pb)
的研究及应用：
用氢化物—原子荧光法测定末梢血血铅(Pb)
氢化物----原子荧光光谱的原理
C，N，O和卤族元素能生成共 价氢化物。4A、5A、6A中As、Sb、 Bi、Se、Te、Pb、Sn、Ge八种元素 的氢化物具有挥发性，通常情况下 为气态。当利用某些能产生初生态 的还原剂或者化学反应，将样品溶 液中的分析元素还原为挥发性共价 氢化物，然后借助载气将其导入原 子光谱系统进行测量。
用氢化物—原子荧光法测定末梢血血铅(Pb) 的研究及应用：
5.方法可行性：
5.方法可行性：
①.标准溶液及标准曲线：标 准溶液用国家标物中心 1000μg/ml铅储备液，配置成 0；1.00；2.00；4.00；8.00； 16.00ng/ml的标准系列，标准 曲线的相关系数r=0.99998。
用氢化物—原子荧光法测定末梢血血铅(Pb)
的研究及应用：
3.仪器及工作参数选择：负高压270 V； 灯主电流70 mA；灯辅助电流 30 mA； 原子化器温度，室温；原子化器高度
7mm；载流 1.5%（V/V）HCl；Ar气 流量 800 ml/min；测定方式：标准曲 线法；读数方式：峰面积；积分时间
16s；延时时间 2s；进样体积 2ml。
（仪器参数的选择可根据光源的灵敏度及仪器的状况 做最佳调整）
用氢化物—原子荧光法测定末梢血血铅(Pb) 的研究及应用：
4.酸度、还原剂浓度及氧化 剂的选择：
4.酸度、还原剂浓度及氧化剂的选择：
①酸度：氢化物发生原子荧光光谱法测定铅对 酸度的要求十分苛刻，酸度稍大稍小对测定结 果都有很大影响，只有在一个很窄的适宜的酸 度范围内，才能得到令人满意的结果。在保持 还原剂介质不变的条件下，改变试样酸度，得 到的实验结果表明，酸度越小，荧光强度曲线 峰中间形成的“吸收凹谷”越深；随着酸度增 大，荧光强度也增大，到0.12mol/L HCl时达到 最高，且没有凹谷；再加大酸度，荧光强度减 小，且随着酸度的加大荧光强度会出现负值。 因此，要求酸度在pH=1左右为最佳酸度。