凝血检测解决方案
APTT纠正试验检测方法的建立及临床应用
㊃短篇论著㊃A P T T纠正试验检测方法的建立及临床应用*王贤,夏茂,夏永泉,沈瀚ә南京大学医学院附属南京鼓楼医院检验科,江苏南京210007摘要:目的建立活化部分凝血活酶时间(A P T T)纠正试验的检测方法和解释规则,分析其在临床A P T T延长患者中的应用价值㊂方法选取该院A P T T延长,凝血酶原时间(P T)㊁凝血酶时间(T T)㊁纤维蛋白原(F g)正常的患者,根据患者确诊情况,将其分为单纯因子缺乏组㊁抗磷脂抗体阳性组㊁Ⅷ因子抗体阳性组(后两组均属于凝血抑制物阳性患者)㊂用枸橼酸钠抗凝静脉血进行A P T T纠正试验㊂绘制受试者工作特征曲线(R O C曲线),确定纠正试验中即刻试验R o s n e r指数(R I)㊁温育试验差值(温育差)的诊断界值,分析A P T T 纠正试验在筛查A P T T延长原因中的应用价值㊂结果即刻试验R I鉴别抗磷脂抗体阳性与单纯因子缺乏的诊断效能高于即刻试验R I鉴别凝血抑制物阳性与单纯因子缺乏的诊断效能(P<0.05)㊂即刻试验R I的诊断界值为11.0%,鉴别抗磷脂抗体阳性与单纯因子缺乏的灵敏度为85.7%,特异度为91.2%;温育试验差值的诊断界值为3s,鉴别检测Ⅷ因子抗体阳性与阴性的灵敏度为85.7%,特异度为'.2%㊂根据A P T T纠正试验中即刻试验R I㊁温育差将患者分为3类:单纯因子缺乏㊁非时间依赖性抑制物㊁时间依赖性抑制物㊂115例患者的A P T T纠正试验结果判定正确率为89.8%(103/115)㊂4例单纯因子缺乏患者被误判,其中2例患者的即刻试验R I及2例患者的温育差均接近诊断界值;8例被误判为单纯因子缺乏的患者,5例为低滴度狼疮抗凝物(L A)阳性,3例为低滴度Ⅷ因子抗体阳性㊂2例L A阳性患者被误判为凝血抑制物呈时间依赖性㊂结论该研究建立了A P T T纠正试验的检测方法和解释规则㊂A P T T纠正试验可以用于临床A P T T延长原因的鉴别诊断,是一项简单有效的筛查试验㊂关键词:A P T T纠正试验;诊断界值;抑制物;时间依赖性;非时间依赖性D O I:10.3969/j.i s s n.1673-4130.2021.04.026中图法分类号:R446.1文章编号:1673-4130(2021)04-0497-04文献标志码:A活化部分凝血活酶时间(A P T T)延长是临床常见的凝血功能障碍,原因主要是凝血因子的缺乏或者凝血抑制物的存在,其中凝血抑制物以抗磷脂抗体㊁Ⅷ因子抗体最常见㊂不同原因导致的A P T T延长,临床治疗方案不同[1-2]㊂A P T T纠正试验是分析A P T T延长原因的凝血筛查试验,用于判断患者是存在凝血因子缺乏还是凝血抑制物,为下一步治疗提供信息㊂A P T T纠正试验操作简便易行,不需要昂贵的仪器,基层单位也可开展㊂但是目前A P T T纠正试验没有标准化[3-4],国内文献较少见关于完整的A P T T纠正试验操作方法和解释规则建立㊁分析的报道,这影响了A P T T纠正试验的临床应用㊂本研究旨在建立完整的A P T T纠正试验的操作方法及解释规则,探讨A P T T纠正试验在鉴别A P T T延长原因中的应用价值,推进A P T T纠正试验的标准化和临床普及㊂1资料与方法1.1一般资料选取2019年1月至12月本院收治的A P T T延长㊁凝血酶原时间(P T)㊁凝血酶时间(T T)㊁纤维蛋白原(F g)正常的患者共115例㊂其中临床确诊为单纯内源凝血因子缺乏(简称单纯因子缺乏)的患者68例,各种不同类型凝血抑制物阳性患者47例㊂凝血抑制物阳性患者中,抗磷脂抗体阳性患者29例,包括狼疮抗凝物(L A)阳性25例,抗心磷脂抗体阳性4例;Ⅷ因子抗体阳性患者18例㊂所有患者均符合临床及实验室诊断标准㊂本研究所使用的标本均为本实验室进行凝血试验后剩余的枸橼酸钠抗凝血标本,排除有分析前误差及行抗凝治疗的患者标本㊂所有标本均进行A P T T纠正试验检测㊂1.2仪器与试剂日本S y s m e x C S-5100全自动凝血分析仪,试剂均为配套产品,包括A P T T检测试剂盒(凝固法)和氯化钙㊂1.3方法1.3.1制备正常血浆选取至少20份健康者的血浆混合,要求:A P T T结果接近参考范围(28~32s)的㊃794㊃国际检验医学杂志2021年2月第42卷第4期I n t J L a b M e d,F e b r u a r y2021,V o l.42,N o.4*基金项目:国家自然科学基金青年基金项目(81602702)㊂ә通信作者,E-m a i l:s h e n h a n10366@s i n a.c o m㊂本文引用格式:王贤,夏茂,夏永泉,等A P T T纠正试验检测方法的建立及临床应用[J].国际检验医学杂志,2021,42(4):497-500.中间值;避免选择妊娠妇女的血浆标本㊂混合后的正常血浆进行凝血因子(Ⅰ㊁Ⅱ㊁Ⅴ㊁Ⅶ㊁Ⅷ㊁Ⅸ㊁Ⅹ㊁Ⅺ㊁Ⅻ)活性和血小板计数的检测,要求:所有凝血因子水平要接近100%;血浆中血小板计数<10ˑ109/L㊂制备好的正常血浆分装后于-70ħ冷冻保存㊂1.3.2即刻试验取3支试管(1㊁2㊁3号),依次放入患者血浆㊁正常血浆㊁混合血浆(患者血浆与正常血浆1ʒ1混合),上机检测A P T T,测得的结果分别标记为A㊁B㊁C,计算R o s n e r指数(R I)=[(A-B)/C]ˑ100%㊂1.3.3温育试验即刻试验完成后,将混合血浆全部放入37ħ水浴温育2h,结束后再取1支试管(4号),放入温育后的混合血浆,上机检测3㊁4号管的A P T T,测得的结果分别标为D㊁E,计算温育试验检测管D与对照管E之间的差值(温育差)㊂1.4统计学处理采用S P S S17.0软件进行统计分析㊂计量资料呈非正态分布,以M(P25~P75)表示,组间比较采用秩和检验(Z检验)㊂采用非参数法构建受试者工作特征曲线(R O C曲线),确立诊断界值, R O C曲线间的比较采用Z检验㊂计数资料以百分率或频数表示,组间比较采用χ2检验,以P<0.05为差异有统计学意义㊂2结果2.1建立A P T T纠正试验中即刻试验R I的诊断界值凝血抑制物阳性患者的即刻试验R I[18.7% (6.7%~24.9%)]高于单纯因子缺乏患者[3.8% (1.6%~9.8%)],差异有统计学意义(Z=-8.847, P<0.001);绘制即刻试验R I用于凝血抑制物阳性与单纯因子缺乏患者鉴别诊断的R O C曲线,曲线下面积(A U C)为0.829(标准差为0.03),见图1㊂抗磷脂抗体患者的即刻试验R I[21.4%(11.2%~24.9%)]高于单纯因子缺乏患者[3.8%(1.6%~9.8%)],差异有统计学意义(Z=-11.484,P<0.001);绘制即刻试验R I用于抗磷脂抗体阳性与单纯因子缺乏患者鉴别诊断的R O C曲线,A U C为0.930(标准差为0.02),见图2㊂两条R O C曲线的A U C比较,差异有统计学意义(Z=2.801,P=0.002),即刻试验R I用于鉴别凝血抗磷脂抗体阳性与单纯因子缺乏的诊断效能比用于鉴别凝血抗磷脂抗体阳性与单纯因子缺乏的诊断效率高㊂即刻试验R I用于鉴别抗磷脂抗体与单纯因子缺乏患者的最佳诊断界值为11.0%,灵敏度为85.7%,特异度91.2%㊂即刻试验R I用于鉴别诊断的结果分析:68例单纯因子缺乏患者中,66例A P T T纠正试验结果显示为被纠正,纠正率97.1%;18例Ⅷ因子抗体阳性患者中,8例被纠正,纠正率44.4%;29例抗磷脂抗体阳性患者中,5例被纠正,这5例均为低滴度L A阳性患者,L A标准化比值依次为1.2㊁1.2㊁1.3㊁1.5㊁1.5㊂单纯因子缺乏患者㊁Ⅷ因子抗体阳性患者㊁抗磷脂抗体阳性患者的纠正率依次降低,差异有统计学意义(P<0.05)㊂图1即刻试验R I用于鉴别凝血抑制物阳性与单纯因子缺乏患者的R O C曲线图2即刻试验R I用于鉴别抗磷脂抗体阳性与单纯因子缺乏患者的R O C曲线2.2建立A P T T纠正试验中温育差的诊断界值 Ⅷ因子抗体阳性患者的温育差[6.5(2.6~19.4)s]与Ⅷ因子抗体阴性患者[0.6(-1.3~2.7)s]相比,明显升高,差异有统计学意义(Z=-6.803,P<0.001)㊂绘制A P T T纠正试验中温育差用于鉴别Ⅷ因子抗体阳性与阴性患者的R O C曲线,A U C为0.927(标准差为0.02),最佳诊断界值为3s,灵敏度为85.7%,特异度为89.8%,见图3㊂2.3A P T T纠正试验结果判定规则的建立及应用根据A P T T纠正试验中即刻R I㊁温育差将患者分为3类:单纯因子缺乏㊁非时间依赖性抑制物(本研究中为抗磷脂抗体)阳性㊁时间依赖性抑制物(本研究中为Ⅷ因子抗体)阳性,见表1㊂A P T T纠正试验结果判定的正确率为89.6%㊃894㊃国际检验医学杂志2021年2月第42卷第4期I n t J L a b M e d,F e b r u a r y2021,V o l.42,N o.4(103/115),见表2㊂单纯因子缺乏组中,4例患者判定错误;其中2例被误判为时间依赖性抑制物阳性,温育差接近诊断界值,分别为3.0㊁3.3s;2例被误判为非时间依赖性抑制物阳性,即刻R I分别为11.2%㊁11.8%㊂抗磷脂抗体阳性组中,5例患者被误判为单纯因子缺乏,均为低滴度L A阳性患者;2例被判定为时间依赖性抑制物阳性,温育差分别为6.1㊁4.4s;Ⅷ因子抗体阳性组中,3例患者被误判为单纯因子缺乏,温育差分别为2.6㊁2.9㊁2.9s,Ⅷ因子抗体滴度分别为0.9㊁1.2㊁1.0B U/m L ㊂图3温育差用于鉴别Ⅷ因子抗体阳性与阴性患者的R O C曲线表1 A P T T纠正试验的结果判定规则即刻R I(%)温育差(s)结果判定<11.0<3单纯因子缺乏<11.0ȡ3时间依赖性抑制物阳性ȡ11.0ȡ3时间依赖性抑制物阳性ȡ11.0<3非时间依赖性抑制物阳性表2 A P T T纠正试验的判定结果分析(n)组别单纯因子缺乏时间依赖性抑制物阳性非时间依赖性抑制物阳性合计单纯因子缺乏组642268抗磷脂抗体阳性组522229Ⅷ因子抗体阳性组315018合计721924115 3讨论临床引起A P T T延长的原因主要有两大类,一类是凝血因子缺乏,一类是凝血抑制物存在,其中凝血抑制物主要有抗磷脂抗体和凝血因子抗体两类,根据反应特性又可以分为时间依赖性抑制物和非时间依赖性抑制物[3],其中时间依赖性抑制物中最常见的是Ⅷ因子抗体,非时间依赖性抑制物最常见的是抗磷脂抗体㊂A P T T延长原因不同患者的临床治疗方案差异很大:(1)凝血因子缺乏容易增加患者的出血风险,治疗上需要补充相应的凝血因子㊁解决凝血因子缺乏的原因;(2)Ⅷ因子抗体会抑制Ⅷ因子的活性,容易引起出血,加重血友病A患者的病情,使其原有治疗手段失效[5];(3)抗磷脂类抗体因为与磷脂结合,会干扰A P T T检测和基于A P T T试验的凝血因子检测,造成A P T T假性延长㊁凝血因子假性减少,抗磷脂抗体对于临床而言,更多的是增加血栓发生风险,而不是出血风险[6]㊂A P T T纠正试验是有助于临床判定A P T T延长原因的筛选试验,操作简单㊁耗时短且易于开展,为治疗方案的制订提供参考㊂目前,A P T T纠正试验无论是操作流程还是解释规则都没有统一的共识,缺乏标准化,各实验室间都存在很大的差异,所选取的诊断界值灵敏度和特异度差异也很大[7-10],限制了A P T T纠正试验的临床应用,尤其是在基层医院临床实验室㊂本研究确立了A P T T纠正试验的即刻R I和温育差的诊断界值,建立了A P T T纠正试验的完整解释规则,并将其应用于临床A P T T延长原因的筛查㊂本研究采用建立的A P T T纠正试验方法和解释规则进行判定,正确率为89.6%,说明本研究建立的A P T T纠正试验方法可以有效地用于临床A P T T延长原因的筛查,为进一步推进A P T T纠正试验的标准化提供了依据㊂本研究中,4例被误判的单纯因子缺乏患者,2例的即刻R I,另2例的温育差均接近诊断界值;被误判为单纯因子缺乏的患者中,5例为低滴度L A阳性患者,即刻R I接近诊断界值,3例为低滴度Ⅷ因子抗体,温育差接近诊断界值㊂笔者认为当A P T T纠正试验在即刻R I㊁温育差检测值接近诊断界值时,结果判定的准确性下降,对于低滴度的抗磷脂抗体和低滴度的Ⅷ因子抗体阳性的患者,容易出现假阴性结果,导致漏诊㊂A P T T纠正试验在临床的应用中,对于这种现象应加以重视[11-13]㊂本研究认为,A P T T纠正试验稀释效应造成了低滴度凝血抑制物检测的假阴性[2,11],英国血液学标准委员会指南(B C S H2012)中指出稀释效应可导致弱阳性L A检测结果出现假阴性,即使1ʒ1混合试验结果阴性,筛选试验和确证试验检测结果呈阳性时,仍应判定结果为阳性㊂美国临床和实验室标准协会指南(C L S I2014)则完全更改了L A的检测流程(筛选试验-确证试验-1ʒ1混合试验)并指出只有在筛选试验和确证试验结果难以解释时再进行1ʒ1混合试验[5]㊂本研究结果与上述理论一致,A P T T纠正试验对于低滴度L A阳性患者会产生假阴性的结果㊂Ⅷ因子抗体有两种类型,一种是来自于血友病A㊃994㊃国际检验医学杂志2021年2月第42卷第4期I n t J L a b M e d,F e b r u a r y2021,V o l.42,N o.4患者的同型抗体,一种是获得性血友病患者的自身抗体,它们与Ⅷ因子的免疫反应均为时间依赖性,是一种慢反应性物质,在37ħ2h才能对Ⅷ因子达到完全的抑制[13]㊂本研究中的18例Ⅷ因子抗体阳性患者中,仅有10例被A P T T纠正试验中的即刻试验判定为未被纠正,8例被判断为被纠正,纠正率达44.4%,这与Ⅷ因子反应特性相符合,说明A P T T纠正试验仅凭即刻试验无法有效对Ⅷ因子抗体等时间依赖性抑制物阳性和单纯因子缺乏进行鉴别[14]㊂有文献报道,有10%~15%的L A也会呈时间㊁温度依赖性,因此纠正试验的温育试验并不能完全鉴别Ⅷ因子抗体和抗磷脂抗体阳性的患者[15]㊂本研究中,2例L A阳性患者被判定为时间依赖性抑制物阳性,温育差分别为6.1s和4.4s,猜测可能是患者体内有部分L A为时间依赖性慢反应抑制物,与文献[15]报道相符㊂这提示,单凭A P T T纠正试验无法完全鉴别抗磷脂抗体与Ⅷ因子抗体,必要时需要增加其他实验室检测项目来辅助结果的判定㊂综上所述,A P T T纠正试验是临床判定A P T T 延长原因,检测凝血抑制物的重要筛查试验㊂建立完整的操作流程和解释规则是A P T T纠正试验开展的关键㊂临床在根据A P T T纠正试验的检测数据进行结果判定时,要充分了解它的优势和局限性,才能得出准确的结论㊂参考文献[1]郭梦妮,华宝来,赵永强,等.北京协和医院住院患者凝血筛查试验异常原因的分析[J].血栓与止血学,2016,22(5):486-490.[2]B A R B O S A A C N,MO N T A L V A O S A L,B A R B O S A KG N,e t a l.P r o l o n g e d A P T T o f u n k n o w n e t i o l o g y:a s y s-t e m a t i c e v a l u a t i o n o f c a u s e s a n d l a b o r a t o r y r e s o u r c e u s e i n a n o u t p a t i e n t h e m o s t a s i s a c a d e m i c u n i t[J].R e s P r a c tT h r o m b H a e m o s t,2019,3(4):749-757.[3]T A N G N,C H E N Y,L I D,e t a l.D e t e r m i n i n g t h e c u t o f f v a l u e o f t h e A P T T m i x i n g t e s t f o r f a c t o rⅧi n h i b i t o r[J].C l i n C h e m L a b M e d,2019,57(5):88-90.[4]K UMA N O 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血液制品全自动检测的难点和应对方法
血液制品属于生物制品范围，主要指以健康人血浆为原料，采用生物学工艺或分离纯化技术制备的生物活性制剂。
主要分为三大类：人血白蛋白、人免疫球蛋白类和凝血因子类，其中凝血因子类产品种类最多。
目前，我国除白蛋白和重组凝血因子类产品允许进口外，其他类型的血液制品只能在国内进行生产。
以白蛋白为例，当前有40%的市场份额为国产供应，而进口供应则占到了60%。
另一个现象也同样值得关注，即市面上的血液制品主要来源于人体的天然成分。
虽有部分厂商的研究方向为从植物中提取白蛋白，并已申请了相关技术专利，但至今为止，没有一家从植物中提取白蛋白产品的公司能够实现量产。
血液制品经历了从产品供不应求、无限扩张以致于出现安全问题，到后来有关部门出面整顿，再次进入快速发展阶段，目前已经进入成熟期，增速放缓。
根据世界血浆蛋白治疗协会（PPTA）下属物料审查委员会（MRB）的数据统计，全球血液制品行业最早有102家企业。
由于世界范围内产品安全事件的不断升级，引起了各国政府的足够重视，格局由此开始发生改变，在各国政府的严密监管和企业兼并重组的双重历练下，目前国外仅剩下不到20家血液制品企业，而CSL Behring、Baxter、Grifols、Octapharma等几家大型企业的产品就占据了该行业市场份额的80%～85%。
预计今后行业集中度将更为凸显。
与国外的情况类似，我国政策也在助推行业朝着集中化发展。
作为准入壁垒较高的行业，经过了多年的整合后，国内血液制品集中化趋势亦开始显现。
中生集团、上海莱士、华兰生物、泰邦生物等企业逐渐成为行业龙头。
预估未来行业还会进一步整合，生产企业的数量在现有政策下只会越来越少。
集中化生产必然会带来产量的迅速扩张，随之而来的必将是对更高效率的检测解决方案的刚需。
那么血液制品的检测包括哪些项目呢？血液制品的质量标准和检测要求见表1［1］。
红框标识出来的3个方面是目前人工和全自动检测的主要适用领域。
由于国内血液制品以白蛋白为主，占75%的市场份额，因此白蛋白产品是柯尔柏重点关注的待检测产品。
血栓与止血检验的质量控制
抗凝剂
枸橼酸钠，0.109mol/L
抗凝剂与血液比例严格按1：9
当Hct增高>55%或<25%时，用如下公式换算 ：
抗凝剂的用量（ml） =0.00185×全血量（ml）×[100-Hct(%)]
特别要注意的是Hct增高的标本
六、凝血结果复查规则
PT 超过对照 3 秒 APTT超过对照 10 秒 FIB 低于1.5 g/L
常见于：肾病、产科、多发伤
分析： 采血不顺利 部分凝固 抗凝剂不足
处理： 检查标本
（抗凝比例、凝块）
重新采血
凝血酶的生成
因子X的激活：
FX
[FIXa-VIIIa-Ca++-PF3] [TF-VIIa- Ca++]
FXa
因子V的激活：
Ca++#43;++PF3+FXa+FVa]
IIa
• 要求：判断检测结果是否落在本室设定
•
的参考区间内（95％以上）。
五、标本采集说明
确认病人的身份及容器（硅化或塑料）。 多次反复采血的病人在同一条件下采血。 止血带不要超过5分钟，强调采血顺利。 迅速将血液和抗凝剂轻轻的颠倒混匀。
各管采血顺序
美国BD公司推荐多管采集顺序
血培养→凝血管→血清管 → 肝素抗凝管→血常规管→血糖管 凝血管总是放第二，当只有一只凝血管时建议先采集
仪器使用前的评价：
验证其性能是否能达到制造商的性能要求（制造 商规定的性能要求必须满足临床需要）。如：精密 度、准确度、携带污染、可报告范围等。
批内精密度：
• 实验方案：取正常、异常新鲜血浆或质控，
小鼠出凝血时间测定实验报告
小鼠出凝血时间测定实验报告【关键词】凝血检验；影响因素；对策；综合操作凝血检验是对人体血功能进行检测的重要方式，根据凝血功能强弱可判断是否存在异常的疾病隐患。
但是，由于检验人员及检验条件等因素的限制，凝血实验结果往往达不到预期的要求，进而误导了疾病治疗方案的实施。
1资料与方法1.1临床资料随机抽取2010年6月——2011年6月，在我院接受凝血功能障碍诊治的60例患者资料。
30例常规手术，5例血栓，10例肝病，15例门诊，对上述患者进行综合性的对比研究。
1.2方法1.2.1仪器和试剂使用TS6000血凝分析仪和原厂配套试剂，由天津美德太平洋科技有限公司提供。
1.2.2统计学处理对实验检测所得数据进行验证。
2结果2.1影响凝血实验检测的因素分析根据实验室操作积累的经验，常见的影响血凝试验的因素包括：受检者状态、标本的采集和处理、抗凝剂的选择及使用、实验仪器及实验方法的影响，和操作者技术的因素。
本次统计如表1。
2.1.1个体状态当被检测者处于不稳定状态时，凝血检测结果与标准值具有明显的差异性，这是影响凝血检测精度的关键因素[1]。
例如，剧烈运动或月经期，可使纤溶活性增高。
口服避孕药可增加凝血活性，降低纤溶活性等。
2.1.2标本采集在采集标准过程中未选用合适的器具，进而干扰了凝血指标的分析对比。
应使用对凝血因子无激活作用的塑料制品或经硅化的玻璃器皿，且应配有塞子。
因为普通玻璃容器可以激活凝血过程，引起血小板释放PF4。
处理标本离心过程中切勿去除塞子，敞口试管可使血液中二氧化碳丢失，PH增高，使凝血酶原时间或活化部分凝血酶时间的结果延长。
2.1.3操作流程实验室人员进行凝血实验过程中，没有按照检验科工作标准程序操作，因人为因素操作失误而干扰了正确的实验结果。
此外，实验中所得数据处理的结果不一致，与原先预期的数据方案不协调。
3讨论3.1凝血检验的医学价值传统医疗方案偏向于资料的积累，多数参照过去凝血功能障碍治疗记录实施处理，这与现代医学研究发展是不相符的。
凝血检测及质量控制
CLIA规定了临床实验室的质量管理要求，包括凝血检测的质量控制标准和规范。
各国家和地区的行业标准
不同国家和地区可能还有自己的行业标准，对凝血检测的质量控制也有相应的规定和要求 。
03 凝血检测的实验操作
实验前的准备
01
仪器准备
确保全自动凝血分析仪处于正常工作状态，检查试剂和样品针是否清洁，
对于异常结果或疑似异常结果，需要进行复核和确认。可 以采用手动凝血检测方法或其他相关实验进行验证。
结果报告与沟通
将实验结果及时报告给临床医生或相关医疗人员，以便进 行诊断和治疗决策。同时，与临床医生保持沟通，解答关 于实验结果的疑问和提供必要的建议。
04 凝血检测的影响因素及解 决方案
影响因素分析
参加室间质评活动
参加凝血检测的室间质评活动，了解自身检 测水平与行业标准的差距，持续改进。
强化室内质量控制
通过定期开展室内质控，监控检测过程的稳 定性和准确性。
加强与临床沟通
与临床医生保持密切沟通，了解检测结果的 临床意义，共同提高诊疗水平。
05 凝血检测的临床应用与案 例分析
临床应用概述
1 2
关注患者需求
在凝血检测的发展过程中，应始终关注患者的需求和体验，不断优化 检测流程和服务质量，提高患者的满意度和信任度。
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对未来凝血检测的期待与建议
提高检测准确性
期待通过不断的技术创新和改进，提高凝血检测的准确性和可靠性， 减少误诊和漏诊的可能性。
加强质量控制
建议凝血检测实验室建立完善的质量控制体系，确保检测结果的准确 性和可比性。
推动多学科合作
凝血试验的质量控制
凝血试验的质量控制一、背景介绍凝血试验是临床常用的检验项目之一，用于评估患者的凝血功能。
为了确保凝血试验结果的准确性和可靠性，质量控制是必不可少的。
本文将详细介绍凝血试验的质量控制标准和流程。
二、质量控制标准1. 内部质量控制内部质量控制是指实验室自行进行的质量控制，用于监测试验过程中的系统误差和随机误差。
以下是内部质量控制的标准要求：- 凝血试验仪器的校准：确保仪器的准确性和稳定性。
- 试剂的质量控制：使用标准品进行试剂的校准和验证，确保试剂的质量符合要求。
- 样本质量控制：使用已知结果的质控样本进行检测，以评估试验结果的准确性和可靠性。
- 内部质量控制记录：记录每次内部质量控制的结果，及时发现和纠正问题。
2. 外部质量控制外部质量控制是指实验室参加由专业机构组织的质量控制活动，通过与其他实验室的比对，评估实验室的准确性和可靠性。
以下是外部质量控制的标准要求：- 参加合格的外部质量控制方案：选择与实验室所使用的试剂和方法相符合的外部质量控制方案，确保参预的质控活动具有代表性。
- 及时提交质控结果：按照外部质量控制方案的要求，及时提交质控结果，以便进行评估和比对。
- 分析质控结果：对质控结果进行分析，及时发现和纠正问题，并采取相应的措施进行改进。
三、质量控制流程1. 内部质量控制流程- 准备质控样本：选择已知结果的质控样本，按照试验要求进行适当的稀释。
- 进行质控样本的检测：按照试验方法进行质控样本的检测，记录结果。
- 分析质控结果：将质控样本的结果与目标范围进行比较，评估试验结果的准确性和可靠性。
- 纠正问题：如果质控结果不符合要求，及时发现问题并采取相应的纠正措施，如重新校准仪器、更换试剂等。
- 记录质控结果：将每次质控结果记录在质控记录表中，以备查阅和分析。
2. 外部质量控制流程- 选择外部质量控制方案：根据实验室的需求和试验项目，选择合适的外部质量控制方案。
- 注册参预质控方案：按照外部质量控制方案的要求，完成注册并获得参预资格。
SF-8200全自动凝血分析仪标准操作程序
SF-8200全自动凝血分析仪标准操作程序1.目的建立规范标准的SF-8200全自动血凝仪标准操作程序。
1.仪器工作原理和方法本仪器凝血测试采用的是凝固法，测试样品中加入一粒测试珠，通过电磁场在样品中进行运动，加入试剂后通过传感器感应测试珠的运动情况，确定被测样品凝固与否，从而计算出凝血时间。
主要是利用血浆凝固过程中，在其内部运动的物体所受阻力的增加的原理，测定物体受阻情况反应血浆凝固情况。
3.仪器运行环境3.1 运行环境为保证仪器的正常运行，仪器必须在满足下列各条件和维持相应环境的情况下使用：3.1.1灰尘少、换气良好的环境。
3.1.2避免阳光直接照射，远离热源。
3.1.3仪器放置水平良好。
3.1.4室内温度保持在18℃～30℃。
3.1.5室内相对湿度应小于70%。
3.1.6大气压保持在86.0kPa～106.0kPa。
3.1.7测试系统附近无强的电磁场干扰、无剧烈震动、无腐蚀性气体。
3.1.8网电源电压必须稳定在220V±22V以内，地线不得带电。
3.1.9有保护性接地（接地电阻在10Ω以下）。
3.2 仪器安全3.2.1 在仪器上面和周围不要使用可燃性危险品、避免引起火灾和爆炸。
3.2.2 遵守指定的安装条件，否则有可能影响测定的可靠性或损伤仪器。
3.2.3仪器的操作、保养应按规定的程序进行，不触摸指定部位以外的地方。
4.授权操作人适用于经授权的检验专业技术人员5.标本类型标本均为109mmol/L的枸橼酸钠1：9抗凝血浆，并且无任何凝块。
每管标本均需在1500g 的离心力下离心15分钟。
6.试剂APTT冻干试剂、CaCl2溶液、TT冻干试剂、FIB冻干试剂、咪唑缓冲液、PT冻干试剂、PT复溶液、SFW-清洗液、SF-特殊清洗液。
7.开关机程序7.1 开机7.1.1打开测试仪电源总开关（位于仪器前面板），此时按键面板上“电源”开关右上角的指示灯为熄灭状态，按下此开关，指示灯变为绿色，仪器处于开机状态。
试述血凝试验的操作步骤
血凝试验是一种常见的临床实验室检测方法，用于评估凝血功能和诊断凝血相关疾病。
下面我将为您详细介绍血凝试验的操作步骤。
一、试验前准备1. 准备所需材料：试验用血清管、试验管架、试验管塞、试管标签、离心机、凝血试剂盒等。
2. 检查仪器是否正常工作并校准，确保试剂未过期。
3. 打开试剂盒，按照说明书要求进行储存条件和试剂稳定性的确认。
二、标本采集和处理1. 无菌操作，使用无菌针头和注射器采集静脉血标本。
2. 将采集的静脉血标本放入无抗凝试管中，并轻轻倒置数次，使其与抗凝剂充分混合。
3. 离心采集的血液标本，以分离血浆和红细胞，将血浆转移到干净的试验管中。
4. 将试验管中的血浆再次离心，以去除悬浮的红细胞和其他杂质。
三、试验操作1. 取出准备好的试验管架，并按照试验方案标注试验管标签。
2. 将血浆样本平均分配到不同的试管中，每个试管的血浆量应保持一致。
3. 在试管中加入预先配置好的试剂。
根据实验要求和试剂盒的说明书，在不同试管中加入不同的试剂。
4. 轻轻摇晃试管，使血浆和试剂充分混合，确保试剂与血浆反应顺利进行。
5. 根据试剂盒的说明书，在适当的温度下孵育一段时间，以促进血浆的凝固过程。
6. 在孵育结束后，观察试管内血浆的凝固状态。
可以通过目视观察或使用特定仪器来进行血凝结果的判断。
7. 记录血凝试验的结果，包括凝血时间、凝血酶原时间等指标，并按照实验室标准进行解读和报告。
四、结果分析与报告1. 根据试验结果，判断血浆的凝固功能是否正常。
根据实验室的参考范围，对结果进行解读，判断是否存在凝血功能障碍或异常。
2. 根据实验结果，提供凝血功能的定量指标，如凝血时间、凝血酶原时间等，以便医生进行临床诊断和治疗方案的制定。
3. 撰写实验报告，包括样本信息、试验方法、结果解读等内容，并及时提交给相关医疗专业人员。
血凝试验是一项复杂的实验室检测技术，需要严格的操作和仪器校准。
只有正确地执行每个步骤，才能确保试验结果的准确性和可靠性。
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资料显示，从2008年至2010年， 在检验科检验类别中，血、尿、 大便常规及微生物不合格样本 的状况都得到了良好的改善， 但出凝血不合格样本仍居高不 下。 针对出凝血不合格样本的原因进 行分析，样本凝固及样本量少两 项仍为主要因素。
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