真菌感染的实验室检查进展
深部真菌病的实验诊断进展
深部真菌病的实验诊断进展深部真菌病指除表皮、毛发、甲床以外，真菌侵犯内脏、皮下组织和黏膜所致的感染，其发生取决于外界致病因素和人体免疫力的相互作用。
常见的病原真菌有念珠菌、曲霉、隐球菌等。
近年来，随着广谱抗生素等药物的广泛应用及免疫抑制剂人群的增多，真菌感染不断增多，已成为应用免疫抑制患者及其他危重病患者的主要死亡原因之一。
据最新统计，每年全球有100万艾滋病患者罹患隐球菌脑膜炎，其中70%在3个月内死亡。
真菌感染的预后有赖于早期治疗，研究显示早期治疗可以提高生存率。
日本一所教学医院收集77例怀疑为深部真菌病的病例，62%早期治疗患者的临床症状和血清学检查提示疾病有好转，而非早期治疗的患者相关改善率仅为21%。
遗憾的是，深部真菌病早期诊断困难，在缺乏依据的情况下，加用抗真菌药物不仅增加治疗成本和患者负担，也增加了发生不良反应的风险。
因此，深部真菌病的早期检测与鉴定受到临床的重视。
现就目前深部真菌病诊断方法作一综述。
一、直接镜检、培养和组织病理学检查一般取痰液、尿液、胸腹腔积液、脑脊液、活检组织等作标本，直接涂片是真菌学检查最经典的方法，具有快速、简便的特点，且可以根据特征性形态区分念珠菌、隐球菌、结合菌等。
无菌体液、皮下组织和各类活检组织标本中发现真菌成分常可确立深部真菌病的诊断，如脑脊液墨汁涂片中发现带有荚膜的隐球菌孢子、组织标本中发现真菌菌丝及孢子等。
但直接镜检的检出率很低，从而导致漏诊。
正常人痰液内可有真菌定植，故痰液涂片只有找到致病性真菌才可以确定诊断，找到条件致病性真菌不应轻易诊断为真菌感染，还应结合临床其他方面综合考虑，因此直接镜检法对深部真菌病诊断作用有限[?。
培养法灵敏度低，且周期长，不能为临床提供早期诊断的依据。
组织病理学检查因危重患者很难承受侵袭性的取材方法(如肺组织活检)，也给临床应用带来一定困难。
二、血清学诊断(一)真菌特异性抗原检测1．(1,3)-b-D葡聚糖测定(G试验)：(1,3)-b-D葡聚糖(BG)广泛存在于真菌细胞壁，细菌、病毒、人体细胞及其他病原菌无此成分，故作为真菌抗原有较高的特异性。
真菌实验室检测技术新进展护理课件
05
护理人员在真菌实验室检测技术 中的角色和责任
提高对真菌实验室检测技术的认识和理解
了解真菌实验室检测技术的目的和意义
护理人员应了解真菌实验室检测技术在诊断和治疗真菌感染中的重要作用，以及其对患者 预后的影响。
开发新型检测技术和方法
下一代测序技术
01
利用下一代测序技术对真菌进行全基因组测序或宏基因组测序
，快速准确地鉴定和分型真菌。
代谢组学和蛋白质组学技术
02
利用代谢组学和蛋白质组学技术分析真菌的代谢产物和蛋白质
表达，为真菌的鉴定和分型提供新的手段。
生物传感器技术
03
利用生物传感器技术对真菌进行快速、简便的检测，提高检测
学习真菌实验室检测技术的原理和方法
护理人员需要了解真菌实验室检测技术的原理、方法及操作流程，以便更好地配合实验室 工作。
掌握解读检测结果的能力
护理人员应具备解读真菌实验室检测结果的能力，能够根据结果判断患者是否感染真菌及 感染的具体病菌种类。
规范操作和维护实验室安全
遵守实验的规章制度，确保实验室内环境清 洁、卫生，符合安全要求。
护理人员应及时向医生反馈患者的病情变化和实验室检测结果，以便医
生根据情况调整治疗方案。
02
与其他护理人员协作
在真菌感染患者的护理过程中，护理人员之间应保持密切协作，共同完
成患者的诊断和治疗工作。
03
共同参与患者教育
护理人员可与医生、实验室技术人员共同参与患者教育活动，向患者及
家属介绍真菌感染的预防和注意事项，提高患者的自我保护意识和能力
深部真菌感染检验技术的研究进展ppt课件
主要适用于：念珠菌和新生隐球菌
NCCLS M38-A方案
产孢丝状真菌的液基稀释法抗真菌药敏试验方案 （Reference Method for Broth Dilution Antifungal Susceptibility Testing of ConidiaForming Filamentous Fungi）
在分光光度计530nm波长通过,相当于 McFarland 0.5浊度,
终浓度: 0.4x104 _ 5x104 cells/ml
分光光度计调整菌悬液浓度
曲霉、申克氏孢子丝菌OD值调整至0.09-0.11 （80-82%透光率）； 镰刀菌、波氏假阿利氏霉以及根霉OD值调整至 0.15-0.17（68-70%透光率）； 然后以RPMI-1640液体培基稀释50倍；波氏假阿 利氏霉接种悬液应以较低的（50%）稀释倍数接 种； 1：50稀释后得到2倍终浓度的接种悬液，其浓度 为0.4-5×104CFU/ml；
常用药物MIC值判定
二性霉素 B ： MIC 值判定为没有可见生长时的最低 药物浓度；若出现拖尾，临床上可能表现为耐药。 氟康唑、酮康唑或氟胞嘧啶： MIC值判定为相对于 生长对照有50%或更多的生长减少时的最低药物浓 度。 伊曲康唑及新三唑类： MIC值判定为100%抑制生长， 时的最低药物浓度；对于曲霉属以及其它条件致 病性丝状真菌出现拖尾时，可能反映临床上耐药。
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临床真菌学面临挑战——
免疫功能受损患者的增加 真菌感染日益严峻的问题 病原菌种类不断变化，新出现的致病菌 临床真菌工作者面临机遇和挑战
临床真菌学的任务
2024年真菌感染诊断市场发展现状
2024年真菌感染诊断市场发展现状1. 引言真菌感染是一种常见的疾病，它可以影响人体各个部位，包括皮肤、呼吸道、消化道等。
由于真菌感染的症状多样且类似于其他疾病，对其准确诊断一直是医疗领域中的一个挑战。
然而，随着现代医学技术的发展和市场需求的增加，真菌感染诊断市场正日益壮大。
2. 市场规模和增长趋势根据市场研究报告，真菌感染诊断市场在过去几年内取得了显著增长。
预计在未来几年内，市场规模将持续扩大。
这主要得益于以下因素：•真菌感染的发病率不断增加，尤其是在免疫功能较弱的人群中（如艾滋病患者、移植患者等）；•对真菌感染及其并发症的治疗需求日益增加，促进了对准确诊断的需求；•医疗技术的进步，特别是分子诊断技术的应用，提高了真菌感染的诊断准确率。
总体而言，真菌感染诊断市场的发展前景广阔，具有较大的增长潜力。
3. 主要产品和技术真菌感染诊断市场涵盖了多个产品和技术，下面是一些主要的产品和技术：3.1 血液培养血液培养是一种常用的真菌感染诊断方法。
通过从患者的血液样本中提取真菌并生长培养，在培养液中观察和鉴定真菌的类型和数量。
这种技术需要相对较长的培养时间，并且可能存在一定的假阴性结果。
3.2 免疫学试验免疫学试验是一种常用的真菌感染诊断方法，包括酶联免疫吸附试验（ELISA）和免疫荧光染色等。
免疫学试验通过检测患者血样中的特定抗体或抗原来确定真菌感染的存在。
这些试验通常具有较高的准确度和较短的反应时间。
3.3 分子诊断技术分子诊断技术是近年来迅速发展的一种真菌感染诊断方法。
它利用多种分子生物学技术，如PCR（聚合酶链式反应）和基因测序等，来检测和鉴定真菌的DNA或RNA。
分子诊断技术具有高度灵敏性和特异性，可以快速准确地诊断真菌感染。
4. 市场竞争格局真菌感染诊断市场存在着激烈的竞争。
目前，市场上一些主要的参与者包括：•药企：许多制药公司正在主动投入到真菌感染诊断领域，开发出各种诊断产品；•诊断设备制造商：一些诊断设备制造商专注于开发和生产用于真菌感染诊断的设备；•实验室服务提供商：一些实验室服务提供商提供真菌感染诊断的服务，从而满足医疗机构的病理检查需求。
国内真菌临床检验技术的研究进展
国内真菌临床检验技术的研究进展真菌感染是近年来新出现的一种新型的临床常见疾病。
由于近几年来医学方面的研究力度逐渐增大，同时研制出很多的新型的治疗方法，其中真菌治疗便是具有代表性的一种。
然而，随着真菌治疗使用的广泛普及，真菌引起的感染疾病也越来越多，这一现象引起了很多人的极度关注。
标签：真菌感染；临床检验；生化检验前言：真菌感染疾病的临床治疗手段比较单一、缺乏有效药物，因此早期诊断、及时检出对提高治愈率、降低死亡率至关重要。
而最重要的是，真菌感染的临床治疗是医院临床检验中最薄弱的一个环节，并且它得到的重视程度远远不够，专业从事这个行业的专业人员又少，所以导致现如今真菌感染疾病临床治疗手段不够完善的局面，因此，我们应当更加重视真菌感染疾病的临床治疗。
1临床致病真菌的分类临床致病真菌按形态学主要分为3大类群：酵母菌、霉菌以及双相型真菌。
这些真菌按致病部位可以分为浅部真菌和深部真菌。
引起浅部感染的多为霉菌，引起深部感染的多为酵母菌和双相型真菌，也有少数霉菌（如曲霉菌、毛霉菌、青霉菌等）。
2我国真菌感染疾病的临床治疗技术的现状目前临床常用的真菌检验方法习惯上分为培养法和非培养法两种，主要包括形态学观查、生化指标检测以及分子生物学测试等。
有关真菌临床检验的一般方法以及国外在相关生化、分子生物学检验方面的研究进展，已有数篇简短的综述。
由于受到工作条件、研究条件和人员素质等多方面的限制，国内对于临床真菌检验方法学的研究相对薄弱，但国内同仁从来没有停止对相关领域的探索。
尤其值得指出的是，由于国内研究完全基于我国现有的临床检验条件，因而工作的开展更有针对性，结果也更有借鉴意义。
3近几年专家研究出的临床治疗手段3.1临床治疗技术之一——形态学观察形态学观察法主要包括直接镜检法和培养法两种最经典的检验方法。
直接镜检法包括湿片镜检和干片镜检两种方法，是一项简易快速有效的方法。
在皮肤科检查、妇科检查、排泄物检查及胸腹水、脑脊液等危重病患者医院内感染的深部真菌病的监测中是快速作出初步诊断的重要手段，但常规检查法检出率甚低，造成诊断上的困难。
真菌感染实验室诊断技术进展
的实验室有能力开展此项技术。
２ 快 速 培 养 鉴 定 方 法
直接显微 镜检查和病原体培养特别是 血培养方 法仍然是临 床检测真菌血症的金标 准。但 由于很 多病原体 直接镜 检检出率 不高 ， 病原体 培养需要 时间长 ， 使危重患者的诊 断治疗存在一定 的延时性 ， 而且这些常规技 术常 常受到检验 人员 的技术熟 练程 度和标本的采集方法 、 部位 和采集 时机等诸多 主观 因素 的影 响 ， 有时不能够得到客观 的阳性 结果 ， 常常延误 了患 者的最 佳治疗
（ ２ ０ １ ３—１ ０—０ ９ 收稿 ） （ 岳静 玲 编辑 ） 病学分册 ， １ ９ ９ ９ ， ２ ５ （ ４ ）： ２ ２ ６
［ ２ ］ 孟样光 ， 李
智， 王先猛 ， 等． 银屑病 局部治疗 和遗传 药理学 的关
．
系［ Ｊ ］ ． 中国临床药理学与治疗学 ， ２ ０ １ ２， １ ７（ １ Ｏ ）： １ １ ７ ９
．
３ ６．
河北联 合大学学报 （ 医学版） ２ ０ １ ４年 １ 月第 １ ６卷第 １ 期
Ｊ ｏ ｕ ｎ ｒ ａ ｌ ｏ ｆ Ｈ ｅ ｂ ｅ ｉ Ｕ ｎ ｉ ｔ ｅ ｄ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ （ Ｈ ｅ ａ ｌ ｔ ｈ Ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｃ ｅ ｓ ） ２ ０ １ ４ Ｊ ａ ｎ ． １ ６ （ １ ）
肺部真菌感染诊治进展
细菌感染
真菌感染
泌尿道 31%
0.7%（34/4956）
肺炎 27% （86%机械通气） 0.2%（7.8/4389)
血循环 19%(87%与中心置管有关) 0.3%(8.8/2971)
深部真菌感染的部位
5％ 65％
15％
18％
欧洲1992年 14个国家 10038例（ ）
真菌感染 17.1%（居第5位）
3 同一部位的标本涂片菌丝阳性（可伴或不伴有芽孢阳 性） ≧2次
4 同一部位的标本真菌培养阳性≧2次 5 同一部位的标本涂片菌丝阳性和芽孢阳性≧1次伴真菌
培养阳性≧1次 6 ≧2个部位培养出同一真菌 • 不能满足上述条件，但曾有标本涂片菌丝和/或芽孢阳
性，或培养1次结果阳性，为可疑感染组
深部真菌感染率上升原因
• Palabiyikoglu等前瞻性研究ＩＣＵ患者机械通气 ４８小时后从气管吸引物（ＥＡ）中半定量培 养分离到念珠菌的阳性率。念珠菌定植定义为 从下呼吸道分离到念珠菌属但缺乏感染的症状 和体征，将患者分为住院时即有念珠菌定植 （Ａ组），住院期间定植（Ｂ组），没有定植 （Ｃ组）。Ａ组和Ｂ组的发生率均较低，为１ ２％。年龄、住院天数、应用广谱抗生素或免 疫抑制剂、基础疾病均不是念珠菌定植的危险 因素。所有菌株均为白念珠菌，未发现耐药念 珠菌。
呼吸道 泌尿道 血循环 其它
深部真菌感染的部位(国内)
呼吸道 消化道 血液 泌尿道
深部真菌感染的致病菌情况
呼吸道致病菌
美国:
萄葡球菌
21%
绿脓杆菌
21%
大肠菌
7.8%
不动杆菌
6%
欧洲
呼吸道真菌感染
念珠菌/真菌
82%
真菌感染的常规检验方法
真菌感染的常规检验方法真菌的临床实验室检查一般包括标本采集、直接镜检、染色镜检、分离培养、生化反应及免疫学试验等。
以直接镜检和分离培养最重要。
1标本采集不同真菌感染应采用不同的临床标本。
浅部真菌感染可以采集毛发、皮屑、指(趾)甲、痂等，标本在分离前常先用75％的乙醇消毒。
深部真菌感染的检查可取痰、尿液、口腔或阴道分泌物、脑脊液、各种穿刺液和活检组织等。
采集标本时应注意无菌操作。
采集标本后应及时转运至实验室进行检查，一般不超过1～2h，以免标本变质污染。
标本须在用药前采集，对已用药者则需停药一段时间后再采集标本。
2检查方法2.1 直接检查法直接镜检是最简单也是很有价值的实验室诊断方法。
其优点在于简便、快速，无菌部位的阳性结果可直接确定真菌感染。
但是，除了少数真菌外，多数不能确定其种类。
由于阳性率较低，阴性结果亦不能排除诊断，有时需反复检查或做其他方法检查以进一步确定。
直接镜检对于浅表和皮下真菌感染最有帮助。
2.1.1 不染色标本检查取皮屑、毛发、指(趾)甲屑等标本置于载玻片中央，滴加100～200g／L KOH溶液1～2滴，以盖玻片覆盖后在火焰上微微加热，使组织或角质溶解、透明后，先于低倍镜检查有无真菌菌丝或孢子，再以高倍镜检查其特征，可初步诊断真菌感染。
2.1.2 染色标本检查有些真菌如深部真菌需要染色后才能更清楚地观察，常用的染色方法如下。
(1)革兰染色法：多用于白假丝酵母菌、孢子丝菌和新近感染的组织胞浆菌等。
所有真菌均为革兰阳性。
(2)乳酸酚棉蓝染色法：取标本于载玻片上，滴加染液，加上盖玻片后于镜下观察，真菌被染成蓝色。
该法适用于各种真菌的直接检查，培养物涂片检查及小培养标本保存等。
(3)荧光染色法：用0.1％吖啶橙对标本涂片和组织切片进行染色，在荧光显微镜下观察，白假丝酵母菌、皮炎芽生菌、球孢子菌为黄绿色，新型隐球菌、鼻孢子菌为红色，组织胞浆菌为红黄色，曲霉菌为绿色。
2.2 分离培养法真菌培养是目前鉴定真菌的唯一方法。