凝胶电泳
琼脂糖凝胶电泳流程
琼脂糖凝胶电泳流程
琼脂糖凝胶电泳是一种用于分离和分析DNA、RNA 或蛋白质等生物大分子的技术。
以下是一般的琼脂糖凝胶电泳流程：
1. 准备电泳缓冲液：根据需要选择适当的电泳缓冲液，如TAE （Tris-乙酸-EDTA）或TBE（Tris-硼酸-EDTA）缓冲液。
缓冲液用于维持电泳过程中的酸碱平衡和离子浓度。
2. 制备琼脂糖凝胶：将琼脂糖粉末加入电泳缓冲液中，按照一定的比例加热溶解，制备琼脂糖凝胶。
通常根据需要选择不同浓度的琼脂糖凝胶，如0.8%、1%或1.2%等。
3. 制备样本：将待分析的DNA、RNA 或蛋白质样本与适量的电泳缓冲液混合，使其溶解或悬浮。
4. 加载样本：将样本小心地加载到琼脂糖凝胶的孔中，可以使用移液器或微量注射器。
加载时要避免产生气泡。
5. 电泳：将加载好样本的琼脂糖凝胶放入电泳槽中，连接电源，进行电泳。
根据样本的性质和目的，选择适当的电泳条件，如电压、电流和电泳时间。
6. 观察和记录：电泳过程中，DNA、RNA 或蛋白质样本会根据其大小和电荷性质在凝胶中移动。
可以通过染色或荧光染料来观察和记录样本的迁移情况。
7. 分析结果：根据样本在凝胶中的迁移距离和位置，可以判断样本的大小、纯度和数量等信息。
还可以通过凝胶成像系统对电泳结果进行拍照或分析。
具体的琼脂糖凝胶电泳流程可能会根据实验目的和样本类型有所不同。
在进行实验前，建议仔细阅读相关的实验手册和操作指南，并根据实际情况进行适当的调整和优化。
琼脂糖凝胶电泳原理
琼脂糖凝胶电泳原理简介琼脂糖凝胶电泳是一种常用的分离和检测生物大分子的方法。
它基于琼脂糖凝胶作为分离介质，通过电场作用使分子在凝胶中按照大小和形态的差异进行迁移，达到分离的目的。
该原理广泛应用于核酸和蛋白质的分离与分析领域。
原理琼脂糖凝胶电泳原理如下： 1. 凝胶制备：首先将琼脂糖与缓冲液混合并加热溶解，随后冷却形成凝胶。
凝胶的浓度可以根据需要调整，一般较低浓度的琼脂糖凝胶用于分离大分子，较高浓度的琼脂糖凝胶用于分离小分子。
2. 样品加载：将待分离的样品加入凝胶孔中。
琼脂糖凝胶是一种多孔的基质，具有类似于过滤器的功能。
样品中的分子会被凝胶网状结构所限制，在电场作用下沿凝胶中的微小通道向电极处迁移。
3. 电泳过程：连接正负极电源，通过电场使得带电分子根据大小和形态的差异在凝胶中迁移。
电泳时间的长短与迁移距离成正比，某些情况下可以通过控制电场强度或者时间来调节分离效果。
4. 可视化检测：根据需要，可以利用染色剂或标记物对凝胶中的分子进行可视化检测。
例如，核酸可以通过乙溴化氢染色可视化，蛋白质可以通过银染法或共价标记物进行检测。
琼脂糖凝胶电泳的原理主要涉及到两个方面：凝胶基质和电场迁移。
凝胶基质琼脂糖凝胶是一种由聚糖构成的多孔基质，其主要成分是琼脂糖和缓冲液。
琼脂糖是一种天然的含羟基多糖，具有较好的凝胶性质。
琼脂糖的浓度和凝胶构建方式可以根据需要来设计，以实现对待分离分子大小和分辨率的调控。
电场迁移琼脂糖凝胶电泳是利用电场作用使带电分子在凝胶中迁移。
电泳过程中，凝胶中的聚糖构成了一套通道网络，负载着电场的分布，变为一种微电泳介质。
带电分子受到电场力的影响，在凝胶中的通道中迁移。
根据分子的大小和形态的差异，迁移速率不同，从而实现分离效果。
较小的分子会迁移得更远，而较大的分子会受到较大的凝胶阻力，迁移距离较短。
应用琼脂糖凝胶电泳在生物学领域的应用非常广泛。
主要包括以下几个方面： - 核酸分离与分析：琼脂糖凝胶电泳可以用于核酸的分离与分析。
琼脂糖凝胶电泳-完整整理
基因组分析
分子诊断
用于分离和鉴定基因组DNA片段，如限制 性片段长度多态性分析、基因突变检测等 。
用于检测和鉴定基因突变、病原微生物DNA 等，如聚合酶链式反应（PCR）产物电泳、 单链构象多态性分析等。
基因克隆
测序
用于分离和纯化目的基模板，如末端测 序、全基因组测序等。
达差异。
04 琼脂糖凝胶电泳实验问题 与解决
常见问题
条带弥散
由于点样量过多或电压过高，导致条带弥散。
条带过宽
由于凝胶浓度不合适或样品浓度过高，导致 条带过宽。
条带拖尾
样品中蛋白质降解或核酸酶污染，导致条带 拖尾。
条带不亮
由于染料浓度过低或曝光时间过短，导致条 带不亮。
问题分析
条带弥散
可能是由于点样量过多或电压过高， 导致DNA在凝胶中扩散。
琼脂糖凝胶电泳-完 整整理
目录
CONTENTS
• 琼脂糖凝胶电泳介绍 • 琼脂糖凝胶电泳实验操作 • 琼脂糖凝胶电泳结果分析 • 琼脂糖凝胶电泳实验问题与解决 •凝胶电泳的定义
01
琼脂糖凝胶电泳是指在琼脂糖凝 胶中进行的电泳技术，主要用于 分离、鉴定和纯化DNA片段。
浓度比较
通过条带亮度，比较不同 样品中目标DNA片段的浓 度。
纯度评估
根据条带的亮度与背景噪 音的比例，评估DNA片段 的纯度。
结果应用
基因克隆
01
通过琼脂糖凝胶电泳检测目的基因是否被正确克隆到载体中。
突变分析
02
利用电泳结果判断是否存在基因突变或点突变。
基因表达分析
03
通过比较不同组织或细胞系中目的基因的表达水平，分析其表
01
条带分析
凝胶电泳的原理蛋白质
凝胶电泳的原理蛋白质凝胶电泳是一种常用的生物化学实验方法，主要用于分离和分析蛋白质、核酸等生物大分子。
凝胶电泳的原理主要涉及到电泳、凝胶和分子运动的三个方面。
1. 电泳原理：凝胶电泳利用带电粒子在电场中受力的原理进行分离。
在电场的作用下，带电颗粒（蛋白质、核酸等）会向带有相反电荷的电极移动。
电泳中的电场强度和方向会影响带电颗粒在电泳板上的移动速度。
2. 凝胶的作用：凝胶是细胞质或溶液中的物质通过聚合反应形成的一种高分子网络结构。
在凝胶电泳中，凝胶起到了分离带电颗粒的作用。
凝胶可以是聚丙烯酰胺凝胶或琼脂糖凝胶等物质。
凝胶的特点是具有多孔的结构，能够限制带电颗粒的移动，使其按照大小、形状等特性分离开来。
3. 分子运动原理：在凝胶电泳中，分离物质的迁移速度由分子的大小和分子量决定。
较小的分子能够通过凝胶孔道较快地向电极方向移动，而较大的分子则受到凝胶孔道的阻碍，移动速度较慢。
这样，根据分子的大小和分子量的不同，可以通过凝胶电泳将它们从混合物中分离开来。
在凝胶电泳实验中，通常会选择聚丙烯酰胺凝胶作为分离介质。
聚丙烯酰胺凝胶是一种交联聚合物，能够形成均匀的凝胶网络结构。
在制备聚丙烯酰胺凝胶时，通过加入丙烯酰胺单体和交联剂，进行聚合反应形成线性链和交联结构，形成凝胶网状结构。
在凝胶电泳中，通常使用垂直电泳装置。
将制备好的凝胶放置在装置中，通过两个电极加载电场。
样品通常会经过预处理，如加入电泳缓冲液、蛋白质还原和变性。
样品被加入凝胶孔道中，然后通电进行电泳。
在电泳过程中，根据蛋白质的大小和电荷，蛋白质会在凝胶中移动。
较小的蛋白质通过凝胶网络孔隙较快地移动，而较大的蛋白质则移动较慢。
经过一段时间后，蛋白质会在凝胶中分离成一系列的条带，每个条带代表不同的蛋白质。
蛋白质在凝胶中的迁移速度受到多种因素的影响，包括凝胶浓度、电泳缓冲液的pH值和离子强度、电场强度等。
不同的蛋白质有不同的等电点（pI），即它们在特定pH下带有零电荷状态。
什么是凝胶电泳法原理及应用实例
什么是凝胶电泳法原理及应用实例凝胶电泳法是一种常用的生物化学实验技术，主要用于分离DNA、RNA和蛋白质等大分子。
其原理是根据分子的大小和电荷差异进行分离。
在凝胶电泳中，待分离的DNA或蛋白质样品被加载到多孔凝胶上，然后施加电流。
不同大小和电荷的分子将以不同的速度穿过凝胶，从而实现分离。
凝胶通常由琼脂糖等材料制成，并浸没在盐缓冲溶液中。
缓冲液的主要功能是控制系统的pH值。
在凝胶的两端放置两个电极，一个正极和一个负极。
然后将电流施加到凝胶中，带负电的分子将向正极移动，带正电的分子将向负极移动。
每个分子通过凝胶的速度称为其电泳迁移率，主要由其净电荷和大小决定。
较小的分子跑得更快，留下较大的分子。
因此，强电荷和小尺寸会增加分子的电泳迁移率，而弱电荷和大尺寸会降低分子的迁移率。
当样品中的所有分子大小相同时，分离将仅基于它们的大小。
分离完成后，凝胶用染料染色以显示分离带。
常见的染料包括溴化乙锭等荧光染料。
然后将凝胶放置在紫外透射仪上观察分离带。
染料也可以提前加载到凝胶中，以跟踪分子的迁移。
凝胶电泳法广泛应用于法医学、保护生物学和医学等领域的分子生物学和生物化学实验室。
其主要应用包括以下几个方面：1. 分离和纯化DNA、RNA和蛋白质样品，用于后续的测序、克隆、表达等实验。
2. 分析DNA、RNA和蛋白质的结构和功能，例如检测基因突变、蛋白质相互作用等。
3. 鉴定和纯化病毒、细菌和其他微生物，用于后续的分类、鉴定和致病性等研究。
4. 检测和鉴定生物样品中的其他小分子物质，例如代谢物、激素等。
总之，凝胶电泳法是一种非常有用的生物化学实验技术，可以用于分离和鉴定各种大分子物质，以及分析和鉴定生物样品中的其他小分子物质。
凝胶电泳技术原理
凝胶电泳技术原理
凝胶电泳技术是一种常用的生物分析技术，用于分离和鉴定DNA、RNA和蛋白质等生物大分子。
其原理基于这些生物大
分子在电场作用下，按照大小和电荷迁移速度不同，在凝胶介质中分离开来。
具体原理如下：
1. 凝胶介质选择：通常使用琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶作为分离介质，这些凝胶具有孔隙结构，可以分离不同分子大小的生物大分子。
2. 凝胶电泳槽：将凝胶嵌入电泳槽中，形成电泳通道。
其中一个电泳槽端接正极电极，另一个端接负极电极。
3. 样品加载：将待测样品混合物施加于凝胶的一端或中央孔，孔隙结构使得样品进入凝胶内。
4. 施加电场：开启电源，施加恒定直流电场。
正极电极的电场吸引带负电荷（DNA、RNA、蛋白质中带有负电荷）的生物
大分子从一端迁移到另一端。
5. 分离：不同分子大小和电荷的生物大分子会以不同速率迁移，较小的分子迁移速度较快，较大的分子迁移速度较慢。
在其迁移过程中，生物大分子会在孔隙结构中碰撞、扩散和交织，最终在凝胶中形成分离带，将不同的生物大分子分离开来。
6. 可视化：凝胶电泳完成后，利用染色、放射性标记或荧光标记等方法对分离带进行可视化，并记录和分析分离带的结果。
凝胶电泳法 鉴定dna
凝胶电泳法鉴定dna以凝胶电泳法鉴定DNA引言：DNA是所有生物体中的遗传物质，它的结构和序列对于生物体的功能和特征起着重要的作用。
凝胶电泳是一种常用的分离和鉴定DNA 的方法，通过对DNA片段的大小和电荷进行分离，可以得到DNA的特征信息。
本文将介绍凝胶电泳的原理、步骤以及其在DNA鉴定中的应用。
一、凝胶电泳的原理凝胶电泳是利用凝胶作为分离介质，通过电场将DNA片段分离开来的方法。
主要原理包括DNA的负电荷特性、凝胶的筛选作用和电场的驱动作用。
1. DNA的负电荷特性DNA分子由磷酸基团组成，带有负电荷。
在电场作用下，DNA分子会向正极移动。
2. 凝胶的筛选作用凝胶通常采用琼脂糖或聚丙烯酰胺等材料制成，具有网状结构。
DNA 片段在凝胶中的移动受到凝胶孔隙大小的限制，较小的DNA片段能够更快地通过凝胶孔隙，而较大的DNA片段则移动较慢。
3. 电场的驱动作用通过在凝胶两端施加电场，正极吸引DNA分子向负极移动。
移动的速度与DNA片段的大小成反比，较小的DNA片段移动速度较快，较大的DNA片段移动速度较慢。
二、凝胶电泳的步骤凝胶电泳的步骤包括样品制备、凝胶制备、电泳条件设置、电泳分离和结果分析等。
1. 样品制备需要从待检测的样品中提取DNA，并经过适当的处理，如PCR扩增等，以获得足够量的DNA片段作为分析对象。
2. 凝胶制备凝胶通常采用琼脂糖制备，将琼脂糖加入缓冲液中，加热并搅拌至完全溶解后，倒入凝胶模具中，插入梳子形成凝胶孔隙，待凝固后，将凝胶取出放入电泳槽中。
3. 电泳条件设置根据需要分离的DNA片段大小范围设置电泳条件，包括电泳缓冲液的配制、电泳时间和电场强度等。
一般情况下，较小的DNA片段需要较长的电泳时间和较高的电场强度。
4. 电泳分离将样品加入凝胶孔隙中，连接电源，通电进行电泳分离。
分离时间根据需要调整，通常为数十分钟至数小时。
5. 结果分析电泳结束后，可通过染色或荧光染料等方法使DNA片段可见。
凝胶电泳步骤
凝胶电泳步骤
凝胶电泳是一种分离和分析DNA、RNA或蛋白质的常用实验方法。
以下是凝胶电泳的一般步骤：
1. 准备凝胶：根据需要分离的目标分子大小选择合适的凝胶，常用的有琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶。
按照产品说明书的要求溶解凝胶粉末，并加入缓冲液，进行融化和固化。
2. 准备样品：根据实验目的，将需要分离的DNA、RNA或蛋白质样品进行处理。
例如，可以通过酶切DNA，或者将蛋白质样品进行还原和变性处理。
3. 装置凝胶电泳槽：使用凝胶电泳槽，将凝胶定位在槽中并加入足够的缓冲液，以保持凝胶浸泡在电解质缓冲液中。
4. 加载样品：使用微量移液器将样品加入凝胶的载样孔或井中。
为了准确确定迁移位置，在几个载样孔或井中加入标准品样品。
5. 进行电泳：将电泳槽连接到电源并设定适当的电压和运行时间。
DNA和RNA通常在常温下进行电泳，而蛋白质需要在冰水中进行电泳。
6. 可视化分离结果：当电泳完成后，取出凝胶，使用染色剂或荧光探针染色。
然后使用透光台或影像设备观察凝胶上分离的目标分子带。
7. 分析和解读结果：根据分离带的位置和密度，进行分析和解读实验结果。
通常可以通过与标准品样品对照来确定目标分子的大小和含量。
需要注意的是，凝胶电泳是一种常见的实验方法，但具体步骤可能会因为实验目的和样品类型的不同而有所变化。
因此，在进行凝胶电泳实验前，最好参考相关的实验方法和文献资料，确保按照正确的步骤操作。
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凝胶电泳————————————————————————————————作者：————————————————————————————————日期：论文题目：凝胶电泳专业：化学年级：10级学号：10101550203姓名：马慧摘要凝胶电泳（Gel electrophoresis）或称胶体电泳，也可称为扁平式电泳法，是一大类技术，被科学工作者用于分离不同物理性质（如大小、形状、等电点等）的分子。
它是以淀粉胶、琼脂或琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等作为支持介质的区带电泳法。
凝胶电泳通常用于分析用途，但也可以作为制备技术，在采用某些方法，如质谱、聚合酶链式反应、克隆、DNA测序或者免疫印迹检测之前，进行部分提纯分子。
通过学习，了解凝胶电泳的类别、原理、特点及其应用范围。
关键词：制备，类别，定义，原理，特点，应用范围正文一、凝胶制备1、设备与试剂：琼脂糖凝胶电泳分为垂直及水平型两种。
其中水平型可制备低浓度琼脂糖凝胶，而且制胶与加样都比较方便，故应用比较广泛。
核酸分离一般用连续缓冲体系，常用的有TBE（0.08mol/L Tris•HCl，pH8.5，0.08mol/L硼酸，0.0024mol/L EDTA）和THE（0.04mol/L Tris•HCl。
pH7.8，0.2mol/L醋酸钠，0.0018mol/L EDTA）。
2、凝胶制备：用上述缓冲液配制0.5％-0.8％琼脂糖凝胶溶液，沸水浴或微波炉加热使之融化，冷至55℃时加入溴化乙锭（EB）至终浓度为0.5μg/ml，然后将其注入玻璃板或有机玻璃板组装好的模子中，厚度依样品浓度而定。
注胶时，梳齿下端距玻璃板0.5-1.0mm，待脱凝固后，取出梳子，加入适量电极缓冲液使板胶浸没在缓冲液下1mm处。
3、样品制备与加样：溶解于TBE或THE内的样品应含指示染料（0.025％溴酚蓝或桔黄橙）、蔗糖（10％-15％）或甘油（5％-10％），也可使用2.5％Fico Ⅱ增加比重，使样品集中，每齿孔可加样5-10μg二、电泳方法将待测分子放进凝胶上的井并导入适当的电流，分子就会以不同的速率在有孔隙的胶体中移动；如果分子带负电多就会往氧化极，带正电多就往还原极移动（注意到胶凝电泳操作原理相似于电解电池，氧化极带正电而还原极带负电）。
以核酸(DNA或RNA)的例子里，待测分子从负电极到正电极的移动方向是因为核酸本身在凝胶上携带糖-磷酸盐而造成负电。
双股DNA片段自然的形成长杆状，所以核酸片段在凝胶内的移动和他们的旋转半径有关。
简单的说，就是和分子大小相关。
单股DNA或RNA倾向于折叠成复杂形状的分子，根据它们的三级结构，以复杂的方式在凝胶内移动。
因此，像是氢氧化钠或甲酰胺这类可以破坏氢键的化学物，就用来把DNA或RNA从三级结构变性，再度形成长杆状。
在跑完电泳，最小的分子几乎到达氧化极之后，可以对凝胶里的分子染色，这样才能看到分子。
可以用溴化乙锭，银或考马斯亮蓝染色。
也可以用其他方法看到凝胶里分离后的混合物组成。
如果分析物的分子在紫外线下会发光，就可以在紫外线下拍出凝胶的照片。
如果要分离的分子有放射性原子，凝胶可以用同位素示踪剂记录，记录方法同上面所述。
如果一开始有很多个混合物一个接一个注入相邻的孔里，跑出来的结果会是一条一条平行的行。
根据不同分子的数量，每一行都有一条或一条以上明显的亮带，表示原本混合物分离出来的组成，每个亮带代表一个组成，组成物分离不完全就会跑出重叠的亮带，或者难以辨别的污点就表示许多组成物没有分解。
三、凝胶电泳的种类及其各自的定义，原理，影响因素和应用。
凝胶电泳被广泛用于分子生物学、遗传学和生物化学。
1、琼脂糖凝胶电泳定义：用琼脂糖凝胶作支持物的电泳法。
借助琼脂糖凝胶的分子筛作用，核酸片段因其分子量或分子形状不同，电泳移动速度有差异而分离。
是基因操作中常用的重要方法。
原理：琼脂糖凝胶具有网络结构，琼脂糖凝胶电泳是用琼脂或琼脂糖作支持介质的一种电泳方法。
其分析原理与其他支持物电泳的最主要区别是：它兼有“分子筛”和“电泳”的双重作用。
特点：琼脂糖凝胶结构均匀，含水量大（约占 98 %～ 99 %），近似自由电泳，样品扩散度较自由电泳小，对样品吸收吸附极微，因此电泳图谱清晰，分辨率高，重复性好；琼脂糖呈透明状，无紫外吸收，电泳后的样品可直接用紫外检测；电泳后区带易染色，样品易洗脱，便于定量测定；操作简单，电泳速度快，样品不需事先处理就可进行电泳。
应用范围和应用实例：由于其孔径相当大，对大多数蛋白质来说其分子筛效应微不足道，现广泛应用于分离纯化超螺旋DNA，检测核酸。
2、聚丙烯酰胺凝胶电泳定义：聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺单体和少量交联剂甲叉双丙烯酰胺通过化学催化剂（过硫酸铵），四甲基乙二胺（TEMED）作为加速剂或光催化聚合作用形成的三维空间的高聚物。
原理：聚丙烯酰胺凝胶为网状结构，具有分子筛效应。
它有两种形式：非变性聚丙烯酰胺凝胶及SDS-聚丙烯酰胺凝胶（SDS-PAGE）。
特点：非变性聚丙烯酰胺凝胶，在电泳的过程中，蛋白质能够保持完整状态，并依据蛋白质的分子量大小、蛋白质的形状及其所附带的电荷量而逐渐呈梯度分开。
而SDS-PAGE仅根据蛋白质亚基分子量的不同就可以分开蛋白质。
蛋白质亚基的电泳迁移率主要取决于它的相对分子质量，而与所带电荷和分子形状无关。
应用范围和应用实例：分离不同荷电量、不同分子量的物质，而使其固定在凝胶中而不是丢失在溶液中。
可以调节凝胶浓度而调节网孔大小，以适应你的目标物质的分子量。
一般可用于蛋白质、核酸等两性大分子物质分离分析。
3、毛细管电泳定义：以毛细管为分离通道、高压电场为驱动力的电泳分离分析法。
包括毛细管自由流动电泳、毛细管区带电泳等。
原理：毛细管电泳所用的设备是石英毛细管柱，在pH值>3的情况下，其内表面带负电，与缓冲液接触时形成双电层，在高压电场作用下，形成双电层一侧的缓冲液由于带正电而向负极方向移动，从而形成电渗流。
同时，在缓冲溶液中，带电粒子在电场作用下，以各自不同速度向其所带电荷极性相反方向移动，形成电泳。
特点; 容积小（一根100 cm×75 μm 管子的容积仅4.4 μL）；侧面/截面积比大，因而散热快、可承受高电场（100-1000 V/cm）；可使用自由溶液、凝胶等为支持介质；在溶液介质下能产生平面形状的电渗流。
应用范围和应用实例：测定药物与蛋白结合常数，如区带毛细管电泳法是利用蛋白质与药物的结合产物同游离的药物或蛋白的淌度差异来研究相互作用的。
也可以和质谱联用，对一些紫外吸收较弱的化合物的检测。
4、明胶酶谱法定义：将样品进行SDS-聚丙烯酰胺（SDS-PAGE，含0.1%明胶）电泳分离，然后在有二价金属离子存在的缓冲系统中使样品中的MMP-2和MMP-9恢复活性，在各自的迁移位置水解凝胶里的明胶，最后用考马斯亮蓝将凝胶染色，再脱色，在蓝色背景下可出现白色条带，条带的强弱与MMP-2和MMP-9活性成正比。
原理：在电泳过程中，SDS与样品中的MMPs结合（当然是可逆性结合），破坏其氢键、疏水键而使MMPs不能发挥其分解明胶的作用，而只有当将胶置齿孔中洗脱（最好是放在摇床上摇，30min/次，做2次或15min/次，4次。
静置于齿孔中是不妥的。
）时，由于SDS被齿孔结合而去除，从而使MMPs恢复了活性。
特点：明胶酶谱的活性受钙离子，锌离子，和PH值等因素的影响，因此缓冲液配制应严格准确，尽量用超纯水，孵育温度也掌握好。
应用范围和应用实例：分离鉴定化合物。
如分离二价金属离子。
5、变性梯度胶凝电泳（DGGE）定义：在一般的聚丙烯酰胺凝胶基础上，加入了变性剂（尿素和甲酰胺）梯度，从而能够把同样长度但序列不同的DNA 片段区分开来。
原理：一个特定的DNA 片段有其特有的序列组成，其序列组成决定了其解链区域和解链行为。
一个几百个碱基对的DNA 片段一般有几个解链区域，每个解链区域有一段连续的碱基对组成。
当变性剂浓度逐渐增加达到其最低的解链区域浓度时，该区域这一段连续的碱基对发生解链。
当浓度度再升高依次达到各其他解链区域浓度时，这些区域也依次发生解链。
直到变性剂浓度达到最高的解链区域浓度后，最高的解链区域也发生解链，从而双链DNA 完全解链。
特点：几乎可以检出所有突变；对突变分子无损害；无须标记；电泳前只需一步操作；可以配置外置式冷却器，温度能在0℃和70℃之间控制，可用于TGGE（温度梯度凝胶电泳）分析。
DGGE实验及很多其他实验，温度是一个关键因素。
使用缓冲液系统，精确控制温度变化保持在0.1℃内。
应用范围和应用实例：广泛应用于各微生物生态系统的研究；能够快速同时对比分析大量的样品；可以跟踪监测细菌测富集和分离；可用于未经扩增的基因组DNA检测；可检测出像甲基化的DNA修饰。
结论凝胶电泳是一大类技术，它分为好几种类型，每种电泳法都有其原理、特点和应用范围。
要想完全了解凝胶电泳，需要分类学习，对比总结其特点和差异。
通过搜集资料，查阅文献，我学到了很多关于凝胶电泳的知识。
也知道了凝胶电泳的应用范围很广。
可以应用在生物学、遗传学、生物化学方面。
即可以检测物质，也可以分离提纯。
凝胶电泳是一项非常有使用价值的技术。
我们应该了解每种凝胶电泳方法的原理、特点（优缺点），将其应用到生活、科学研究当中。
参考文献【1】《琼脂糖凝胶电泳技术》刘维全、高士争、王吉贵主编，化学工业出版社；【2】《酶的凝胶电泳检测手册》Gennady P. Manchenko;华子春，郑伟娟等译，化学工业出版社；【3】《SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳及蛋白印迹》董晓燕主编，化学工业出版社；【4】《毛细管电泳加工技术》陈义编著，化学工业出版社。