大鼠心肌细胞原代培养
氯胺酮对培养大鼠乳鼠缺氧心肌细胞的影响
乳 鼠心肌 细胞 分 为 ３组 ： 照组 （ 化钠 造 成心肌 细胞 细胞 内缺 氧模 型 ） 氯胺 酮 １组 （ 氧＋ ０Ｉ ｏ Ｌ氯胺 对 氰 ， 缺 １ ｍ ｌ ｘ ／ 酮 ）氯胺 酮 ２组（ ， 缺氧＋ ０ ￣ ｌ １０ ｐ ／ ｍｏ Ｌ氯胺酮 ） 比较 ３组心肌 细胞 形态学的变化 及吸光度 （ 值 的改 变。 。 Ａ） 结果 形态学变化逐渐 明显 ， 对照组较 实验 组变化更 显著 。 结论 的保护作用 。 氧 １ ， ２ｈ后 对照组 细胞搏 动功能变化明显 ， 呈散在细胞簇状搏动 ， 而实验组搏 动频率减慢 。 随着时 间的延长 ． 细胞 氯胺酮对原代培养大 鼠乳 鼠心肌细胞缺氧损伤有一定
【 关键词 】 氯胺酮 ；细胞低氧 ； 心肌 ；细胞培养ａ ａ ｎ ｔｈ ｐ ｘ ｃ ｄ ｍａ ｅ ｆｍ ｙ ｃ ｒ ｉ ｌｃ ｌ ｎ ｎ ｏ ａ ａ ａ ｓ ＷＡＮＧ Ｌ － ｉ Ｚ ｉｎ ｌ ｆ ｃｓ ｏ ｅ ａ ｎ ｇ ｉ ｓ ｙ ｏ ｉ ａ ｇ ｓ ｏ ｏ ａ ｄ ａ ｅｌ ｉ ｅ ｎ ｔ ｌｒ ｔ ｓ ｉｌ ， ＨＡ ０ Ｊａ — ｉ ，
ｍｏ ｈｅ ｔ ｒ ｅ ｇ ｏ ｓ ｎｇ ｔ ｈ ｅ ｒ ｕｐ ．Ｒｅ ｕｌｓ Ａｆｅ ｙ ｘｉ ｏ ｏ ｓ ｈｅ ｃ ｎｔｏ ｒ ｕ ｘ ｂｉｅ ｌ ｓｌ ｅ ｔｎｇ ａ ｒ ｓ ｉｅ ｓ ｔ ｔ ｒ ｈ ｐｏ ａ ｆ ｒ １ ｈ ｕｒ，ｔ ｏ ｒ ｌｇ ｏ ｐ ｅ ｈｉ ｔｄ ａ ｍｏ ｔ ｂ ａ ｉ ｒｅ ｔｗｈｌ ２ ｙ
Ｌ ＵＢ ｏｊａｇ Ｄ ｐｗｍｅｔｆＡ ｅｔｅｉｌ ｙ Ｆｒ ｓｉｌｆＳ ａ ｘ Ｍｅ ｉ ｌ ｎ ｅｓｙ Ｔ ｉ ａ ３ ０ １ Ｃ ｉａ Ｉ ａ－ｉ ． ｅ ｔｔ ｎ ｏ ｎｓ ｓ ｏ ， ｉ ｔ ｐｔ ｈ ｎｉ ｄｃ ｉ ｒｔ， ａ ｕｎ０ ０ ０ ， ｈｎ ｎ ｈ ｏｇ ｓ Ｈｏ ａ ｏ ａＵ ｖ ｉ ｙ 【 ｓ ａ ｔ Ｏｂｅｔ ｅ Ｔ ｘｌｒ ｔｅｐｏｅｔ ｅｅ ｅｔ ｏ ｅ ｍｉｅａａ ｓ ｈｐ ｘ ａ ａｅ ｕｔｒｄｍ — Ａｂｔ ｃ 】 ｒ ｊｃｉ ｏｅｐｏｅ ｈ ｒｔｃ ｖ ｆ ｃ ｆ ｔ ｎ ｇｉ ｔ ｙ ｏｉ ｄ ｍ ｇｓｉ ｃ ｌ ｅ ｙ ｖ ｉ ｆ ｓ ｋａ ｎ ｃ ｎ ｕ
大鼠原代心肌细胞提取方法
大鼠原代心肌细胞提取方法原代心肌细胞培养是体外研究心血管疾病相关机制的主要手段和基本技术基础实验中，与细胞系相比，原代心肌细胞的形态及电生理方面更接近在体细胞，因此，培养原代心肌细胞的质量直接关系实验的进程及结果。
乳鼠原代心肌细胞分离须注意以下几点：1. 鼠龄的选择：新生1-3d龄，最好半日龄。
新生大鼠心肌细胞在出生后3 d内具有部分的增殖能力，成年大鼠心肌细胞则为终末分化细胞，不再具有分裂增殖能力。
因此，大鼠出生时间越短，其心肌细胞分离后成活率越高，越容易贴壁生长。
建议选择1~3 d龄大鼠分离其心肌细胞进行原代培养。
2.消化酶的选择：胰蛋白酶和胶原酶混合使用（0.4%胶原酶:0.05%胰酶=2:1）。
常用的消化酶有2种：胰蛋白酶和胶原酶，胰蛋白酶作用较强，容易造成心肌细胞损坏，胶原酶作用较缓和，能消化细胞间质中的胶原纤维以释放细胞，对细胞损伤小。
3.消化程度的把握：组织由红转白呈半透明状态时，停止消化。
新生大鼠心肌细胞对消化酶极为敏感。
消化不足，细胞聚集成团，无法得到单层细胞，不利于观察和后续实验；消化过度可使肌原纤维出现萎缩，细胞死亡率增加或丧失贴壁能力及搏动能力；消化的适宜温度为35~37℃。
4.抑制成纤维细胞生长：加入BrdU，更换小牛血清。
分离出来的心肌细胞会伴有较多成纤维细胞，成纤维细胞具有较强增殖能力会干预心肌细胞的贴壁和增殖，需要尽量去除成纤维细胞。
成纤维细胞较心肌细胞更容易贴壁，可以通过差速贴壁去除大部分成纤维细胞，但仍有少量成纤维细胞混杂于心肌细胞之中。
溴脱氧尿苷(bromodeoxyuridine, BrdU)可干扰细胞的有丝分裂，故常规使用BrdU抑制成纤维细胞的生长。
由于胎牛血清所含的促细胞有丝分裂的因子较多，BrdU很难完全抑制成纤维细胞的生长.改用小牛血清则可克服这种现象的出现，获得高达90％以上的心肌细胞。
5.培养液pH值：pH范围在7.2~7.4之间。
操作过程：手持大鼠乳鼠（出生24h内），75%乙醇消毒皮肤，剪开胸部皮肤，再消毒1次，更换手术器械，弯镊提取心脏，置于盛有PBS（1:50双抗）的大皿中；将心脏表面附着的大血管剪去，剪去心房，放入5ml灭菌离心管中充分剪碎成肉泥状；加3ml左右胶原酶和1.5ml 0.05%胰酶充分吹匀，37℃消化8 min，自然沉淀，弃上清，再加3ml左右胶原酶和1.5ml0.05%胰酶，充分吹匀，37℃消化10min；取上清，3000 rpm 5min，铺中皿加含有10%胎牛血清的DMEM培养基（记1），剩余沉淀中加入3ml左右胶原酶和1.5ml0.5%胰酶，充分吹匀，37℃消化10min；重复4的步骤4-5次，直至组织块消化完毕，记（2-5）放培养箱2到3小时待成纤维细胞贴壁后轻轻吹打培养基，所有的中皿上清移入离心管离心3000 rpm 5min，弃上清，加含有10%小牛血清的DMEM培养基以及Brdu（10mM）（1:80），铺中皿培养。
新生大鼠心肌细胞培养技术
【 ｅ Ｏｄ】 Ｃ ｌ ｕｕｅ ｅ ｎ ｕｓ Ｍｙｃ ｄ ｌ Ｒ ｔ Ｋｙ ｌ Ｗ Ｓ ｅ ｔ ｈｉ ｅ； ｌｌ ｒ ｔ ｑ ｃ ｃ ｏ ｒｉ； ａ ａ ａ ｓ
原 代培 养心 肌 细胞作 为 一种 主要 的研 究模 型 ， 被广泛 地 应 用 于心 血 管 疾 病 的研 究 中。我 们 经 过 长期 摸索 总结 出一 套 简便 、 有效 的大 鼠心肌 细胞 的
【 要】 目的 探讨新生大鼠心肌细胞的分离、 摘 培养方法。方法 取 １ 龄新生大 鼠的心室肌细胞 ， ～３ ｄ
用胶原酶 １分离心肌 细胞 ， 离心收集心肌细胞 ， 差速贴 壁法 纯化后 培养于 ＤＭＥ 培养基 。显微镜 下鉴定 心肌细 Ｍ
胞的纯度和形态结构 ， 锥虫蓝染色检查心肌细胞成 活率 。结果 出现 同簇 细胞 的同步跳动 。结论
【ｂｔ ｃ】 Ｏ ｊ ｔｅ ｏ ｎ ｓ ａ ｐｒｔａｄｃｌｒ ｍ ｏａ ｉ ｌｏ ｎ ｎｔｒｓ Ｍｅ ｏｓ Ａ ｓａｔ ｂ ｃｖ Ｔ ｄ ｎｅ ｙｗ ｙ ｏ ｅａ ｅ ｎ ｔ ｅ ｙ ｒ ａｃ ｓ ｆ ｅ ａ ｔ ｒ ｅｉ ｉ ｆ ａ ａ ｔ ｓ ａ ｕ ｕ ｃ ｄ ｄ ｏ ｅ ａ ． ｔ ｄ ｌ ｈ
取一窝 １ ～３ｄ龄新 生大 鼠， 不用 麻醉和处 死 ， 用手 固
定住 四肢 ，５ ７ ％的酒精消毒皮肤 ， 无菌 眼科剪 在剑 突上一肋 处 人剪 （ 注意避免剪破消化 道预 防污 染） 。开 口 ０ ５ｃ ， ． ｒ 心 ｎ 脏 自然 跳 出 ， 心 尖 部 组 织 剪 下 迅 速 置 于 预 冷 的 不 含 将
ｗｅｅ ｕ ｉ ｙ ｃ ｒｎ ｕｌ ． ｏ ｃｕ ｉ Ｔ ｉ ｉ ａ ｆ ｔ ｅｗ ｙ ｔ ｕ ｙｍｙ ｃｒ ｉ ｅ ｓ ｒ ｊｍｐｎ ｓｎ ｈｏ ｏ ｓ Ｃ ｎ ｌ ｏ ｇ ｙ ｓｎ ｈｓ ｓｎ ｅｆ ｉ ａ ｓ ｄ ｏａｄａ ｃｌ ． ｃ ｅ ｖ ｏ ｔ ｌ ｌ
实验动物(大鼠、小鼠、兔)原代心肌细胞
实验动物（大鼠、小鼠、兔）原代心肌细胞产品编号：RAT/MIC/RAB-iCell-c001产品规格：>5×105细胞数产品价格：3930/3910/4350包装规格：1ml冻存细胞悬液或T-25培养瓶细胞详述：心肌的工作细胞包括心房肌和心室肌。
心肌细胞为短柱状，一般只有一个细胞核，心肌细胞之间有闰盘结构。
该处细胞膜凹凸相嵌，并特殊分化形成桥粒，彼此紧密连接，但心肌细胞之间并无原生质的连续。
心肌细胞的细胞核多位于细胞中部，形状似椭圆或似长方形，其长轴与肌原纤维的方向一致。
肌原纤维绕核而行，核的两端富有肌浆，其中含有丰富的糖原颗粒和线粒体，以适应心肌持续性节律收缩活动的需要。
细胞特性:1)组织来源于实验动物的正常心脏组织。
2)细胞鉴定：肌球蛋白重链(MHC)免疫荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5)细胞生长方式：长柱状细胞，不规则细胞，贴壁培养。
产品的运输和保存：视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
推荐培养基：我们推荐使用iCell原代心肌细胞培养体系（产品编号：PriMed-iCELL-022）作为体外培养原代心肌细胞的培养基。
产品使用：1)本产品仅能用于科研2)本产品未通过直接用于活体动物和人的审核3)本产品未通过用于活体诊断的审核。
原代细胞分离培养鉴定2(SD 大鼠心肌细胞、心肌成纤维细胞)
原代细胞分离培养鉴定（SD 大鼠心肌细胞、心肌成纤维细胞）目录 3 原代分离——SD 大鼠心肌细胞的分离4 原代分离——SD 大鼠心肌成纤维细胞的分离SD 大鼠心肌细胞、心肌成纤维的分离目的与意义（心肌细胞）心肌细胞体外培养可以为心肌细胞生理、药理及心血管相关研究提供有效、稳定的实验模型，在医学领域有着广泛的应用前景。
体外培养的心肌细胞可保存其形态结构和功能上的某些特点，同时去除了体内外各种限制因素的影响 , 具有精确和重复性好等优点, 可广泛用于心肌结构、病理生理、电生理、药理及毒理、受体及作用机制、心室肌细胞损伤模型及药物保护等的研究。
其次，大鼠动物模型广泛用于心血管系统疾病的基础研究。
目的与意义（心肌成纤维细胞）心脏由心肌细胞和非心肌细胞组成。
非心肌细胞占细胞总数的 70%，其中 90%以上的非心肌细胞由心肌成纤维细胞组成。
近年来，人们逐渐了解到非心肌细胞不仅对心肌细胞具有结构上的支持、保护作用，而且还具有自分泌和旁分泌功能，影响心肌细胞的结构和生理功能，与风湿性心脏病、心肌炎、心肌肥厚、慢性心肌缺血、心肌梗死、炎症等病理状态均密切相关，因此 ,对心肌成纤维细胞的生理学研究成为现代心血管领域研究的一个重点。
心脏 大鼠的心脏位于胸腔内，两侧隔心包与左、右肺紧邻，背侧有气管、支气管和食管。
腹侧借较宽的胸心包韧带和胸骨相连，腹前方与胸腺相贴，后面靠近膈。
C腹侧面B A心肌细胞根据组织学特点、电生理特性分为两类：工作细胞：普通心肌细胞：如心房肌细胞、心室肌细胞，无自律性，主要执行收缩功能；自律细胞：特殊分化的心肌细胞，组成心脏特殊传导系统，如窦房结细胞，收缩功能基本丧失；DESD Rat心脏HE染色F7心肌成纤维细胞 1、 心肌成纤维细胞(cardiac fibroblasts ，CFS)遍布于心肌组织，包绕心肌细胞并连接心肌细 胞间质。
CFS 参与细胞外基质的合成和沉积，与心脏发育、结构、细胞信号系统、物质代 谢等密切相关；它还可与心肌细胞、其它CFS 甚至内皮细胞之间相互接触，影响电机械功 能、细胞因子分泌和血管生成。
心肌细胞或肝细胞原代培养的方法
心肌细胞或肝细胞原代培养的方法下载提示：该文档是本店铺精心编制而成的，希望大家下载后，能够帮助大家解决实际问题。
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新生大鼠心肌细胞原代培养方法
（ ． ０ ９ Ｍ ｓ ｒ ｄ ｇｅ ａ ｄｄ ｔ ｏ Ｔａ ｊ ｎｖ ｒ ｔ ｏ Ｔ ａ ｉｏ ａ Ｃ ｉｅｅＭｅ ｉ ｎ ，ｉｎｉ ３ ０ ９ ： ． １ ２ ０ ａ ｔ — ｅｒｅＣ ｎ ｉａ ｆ ｉ ｉ Ｕ ｉｅｓ ｙ ｆ ｒｄｔ ｎ ｌ ｈ ｓ ｄ ｉｅ Ｔ ａ ｊ ０ １ ３ ２ ｅ ｅ ｎｎ ｉ ｉ ｎ ｃ ｎ
原 代 心 肌 细 胞 培 养 技 术 被 广 泛 应 用 于 心 血 管 疾病 的研 究 之 中 ， 有 操 作 简 便 、 济 、 重 复 性 等 具 经 可
拘 。由天 津市 山川 红 实 验 动 物科 技 有 限 公 司 提供 ， 动物合 格证 号 ：０ ４ ３ 。 ０ ０ ０ ６
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Ｔａ ｉ ｉｅｓｔ ｆ ｒｄｔ ｎ ｌＣ ｉｅｅ Ｍｅ ｉｉｅ Ｔ ａ ｉ ０ １ ３） ｉｎｉ Ｕｎｖ ｒｉ ｏ ａ ｉｏ ａ ｈｎ ｓ ｄｃｎ ， ｉｎｉ ３ ０ ９ ｎ ｙ Ｔ ｉ ｎ
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二、 实验 方法
１ 实 验动 物 ： ｄ内的 Ｗｉ ａ 新 生 大 鼠 ， 雄 不 ． ３ ｓｒ ｔ 雌
基 金 项 目 ： 家 自然 基 金 资助 项 目（ ｏ ８０ ２ ６ ） 国 Ｎ ． １７ ９ ５
作者单位 ：． １ 天津 中医药大学 ２０ ０ ９级硕士研究 生 ， 天津 ３０ ９ ； ． ０ １３ ２ 天 津 中医药大学 ， 天津 ３ ０ ９ ０ １３ 通讯作者 ： 张滕 ， ｍａ ：ａ．ｈｎｔｎ １３ ６ ．ｏ］ Ｅ ｉ ａａ ｚａｇ ｇ２ ＠１ ３ ｃｎ ｌ ｅ
心肌肥大实验实训报告
一、实验目的1. 了解心肌肥大的概念及其在心血管疾病中的重要性。
2. 掌握心肌肥大的实验研究方法，包括心肌细胞的培养、心肌肥大模型的建立以及相关指标的分析。
3. 学习使用显微镜观察心肌细胞的形态学变化，了解心肌肥大时的心肌细胞超微结构改变。
4. 通过实验，加深对心肌肥大机制的理解，为心血管疾病的治疗提供理论依据。
二、实验材料与仪器1. 实验材料：新生大鼠心肌细胞、异丙肾上腺素（ISO）、去氧肾上腺素（PE）、心肌营养素-1（CT-1）抗体、吡格列酮等。
2. 仪器设备：倒置显微镜、荧光显微镜、细胞培养箱、PCR仪、Western blot系统、电镜等。
三、实验方法1. 心肌细胞培养：采用体外原代培养新生大鼠心肌细胞，经免疫细胞化学鉴定后，用于后续实验。
2. 心肌肥大模型建立：将培养的新生大鼠心肌细胞分为高糖高胰岛素组、吡格列酮干预组和对照组，分别给予高糖高胰岛素和吡格列酮处理。
3. 心肌细胞CT-1表达检测：通过免疫细胞化学方法检测心肌细胞中CT-1的表达，观察其在心肌肥大中的作用。
4. 心肌细胞STAT-3与Beclin-1表达检测：采用定量PCR和Western blot技术检测心肌细胞中STAT-3和Beclin-1的表达水平，探讨其在心肌肥厚发生、发展中的作用。
5. 心肌细胞超微结构观察：利用电镜观察心肌细胞的超微结构，了解心肌肥大时的心肌细胞形态学变化。
四、实验结果1. 高糖高胰岛素组心肌细胞CT-1表达显著升高，提示CT-1可能在心肌肥大中发挥重要作用。
2. 吡格列酮干预组心肌细胞CT-1表达显著降低，提示吡格列酮可能通过抑制CT-1的表达来发挥治疗作用。
3. 高糖高胰岛素组心肌细胞STAT-3和Beclin-1表达水平显著升高，提示STAT-3和Beclin-1可能参与心肌肥厚的发生、发展。
4. 电镜观察结果显示，高糖高胰岛素组心肌细胞线粒体数量减少、体积增大、形态异常，提示心肌细胞能量代谢异常。
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实验二大鼠CM的体外分离、培养及鉴定
1、材料与方法
1.1 材料
1.1.1实验动物新生3天清洁级Wistar大鼠乳鼠（中国医学科学院放射医学研究所实验动物中心，动物许可证号：scxk2005-0001）。
1.1.2主要仪器与试剂 5％CO
2恒温培养箱（model TC2323 CO
2
incubator）；倒
置相差显微镜（XD-101 98010）；PH计（mettler toledo320-s）；立式自动电热压力蒸汽灭菌器（LDZX-40BI），上海申安医疗器械厂；SW-CJ-2FD型单人双面净化工作台；微量移液枪（法国Gilson）；血球记数板（上海市沪江医疗器材经营部）；HH-6数显恒温水浴锅；离心机（LDZ5-2）；75cm2培养瓶、50ml离心管（美国corning公司）；无菌手术器械；磁力搅拌器；电子天平板（BS1101S 德国）；一次性滤器（22μm, GILSON）；DMEM/F12培养基 (美国GIBCO)；特级胎牛血清（FBS， Hyclone）；青、链霉素（Hyclone）；D-Hank’s液（NaCl、KCl、Na2HPO4、KH2PO4、NaOH、NaHCO3，苯酚红,南京化学试剂厂）；心肌肌钙蛋白T(Santa cruz) ;FITC连接的兔抗山羊IgG(Santa cruz);Ⅱ型胶原酶、胰蛋白酶(Sigma)；Triton-X-100(AMRESCO);BrdU(solarbio)。
1.2方法
于无菌操作下开胸取出心脏，仔细去除心脏相连大血管和心房组织（留心尖部），于4℃的D-Hank’S液中漂洗3～4次，以去除残存血液，眼科剪将心尖部组织剪成1 mm3碎块后，加入4 ml的0.0625%胰蛋白酶液，于37℃恒温水浴箱中消化3 min，然后弃上清。
于剩余沉淀中加入混合消化液5 ml（0.0625％胰蛋白酶+0.1％Ⅱ型胶原酶），置37℃水浴消化8～10 min，其间振荡2～3次，静置后将上清液移入离心管中，加含10％胎牛血清预冷的DMEM/F12培养液终止消化。
随后用上述方法反复消化7～8次至组织块基本消化完毕。
收集各次上清液并终止消化后，200目的尼龙网筛过滤去除残留组织块，以1000 r/min速度离心8 min，将所得的细胞与培养液混悬后，采用差速贴壁分离法去除心肌成纤维细胞每次2 h，将未贴壁的心肌细胞悬液吸出，调整细胞密度接种于培养板中。
培养前3 d加入0.1 mmol/LBrdU抑制成纤维细胞生长。
48 h首次换液，以后根据情况2～3 d换液。
1.3 CM的鉴定
弃除培养基，PBs平衡盐缓冲液漂洗3次，以．20℃预冷的4%多聚甲醛固定30min，PBs平衡盐缓冲液漂洗3次后 ,O．5％triton x-100穿孔15min。
lO％正常兔血清 (以PBS平衡盐缓冲液稀释)封闭30min后，分别加入抗肌钙蛋白抗体T(cTn T) (分别以PBS平衡盐缓冲液1：100稀释)4℃过夜，再兔抗羊FITC-IgG 室温孵育2小时，每个步骤间均以PBs平衡盐缓冲液漂洗3次，每10min，甘油封片，荧光显微镜激发照相。
2．结果
2.1 心肌细胞的形态
在倒置相差显微镜下观察，刚分离的心肌细胞呈圆形，培养2 h后成纤维细胞基本完全贴壁，而少数心肌细胞8 h左右开始贴壁，少数贴壁的单个心肌细胞出现了自发性搏动，搏动的频率、节律各不同。
24 h后搏动的心肌细胞百分率大约为50％，搏动频率较分散，约30～50次/min。
至48 h视野下细胞呈梭形，板形，三角形或扁平不规则形，折光度较高，细胞中隐约可见细胞核，搏动的心肌细胞百分率大于90％，搏动频率多集中在50～80次/min，72 h后细胞充分铺展，贴壁牢固，少数局部呈均一搏动频率，可达80～100次/min（附图7-8）。
2.2 CM的鉴定
在免疫荧光染色时一抗选用羊抗大鼠心肌特异性肌钙蛋白T的单克隆抗体，二抗选用FITC标记的山羊抗小鼠IgG，心肌细胞中胞浆呈绿色荧光则显示心肌肌钙蛋白T在胞浆中的表达（附图9）。
3 小结
本研究通过用改良的新生小鼠心肌细胞培养方法，心肌细胞存活率高，心肌细胞和非心肌细胞分离较彻底，细胞贴壁快、搏动早、纯度高，且操作简便，重复性好，是一种较为理想的心肌细胞原代培养方法，可以满足心血管疾病发生、发展机理及心血管药物和心脏组织工程学的研究及多种生理生化实验的要求.。