保健食品安全性毒理学评价试验的四个阶段和内容
保健食品在安全性和功能性以及毒理学技术审评和功能试验
保健食品试验项目选择原则
以普通食品（含药食两用品种、营养 强化剂）为原料，但服用量大于常量 的，进行急性毒性试验、三项致突变 试验和30天喂养试验，必要时作传统 致畸试验。
保健食品试验项目选择原则
以普通食品（含药食两用品种、营养强化剂） 为原料，使用新工艺生产的，应进行第一、 二阶段毒性试验。根据试验结果确定是否进 行下一步的毒性试验。
保健食品的特征
特征：特定保健功能、调节机体功能、 不治疗疾病、食品
营养素补充剂：补充维生素、矿物质
保健食品原料的安全性管理
普通食品可作为生产保健食品的原辅料。 申请注册的保健食品中涉及食品添加剂的
，应符合《食品添加剂使用卫生标准》的 规定，即所用品种为列入《食品添加剂使 用卫生标准》（GB2760）、《食品营养强 化剂使用卫生标准》（GB14880）或卫生部 公告名单中的食品添加剂新品种。
毒理学主要概念
半数致死剂量（LD50）：试验中，引起一 半动物死亡的剂量，用来表述受试物的毒 性大小。急性分级的依据。
末观察到有害作用剂量（NOAEL）：动物实 验中，敏感指标和敏感方法观察到的剂量， 是制定标准（安全限值）的依据。
毒理学主要概念
剂量－量反应关系：表示化学物质的剂 量与个体中发生的量反应强度之间的 关系。
首次使用的新资源除对产品进行毒性试验外， 还应对食品新资源进行毒性试验。
保健食品试验项目选择原则
产品配方中加入某一已批准用于食品的物质， 按本程序有关条款的规定设置试验剂量时， 如该物质的剂量达到已知的毒作用剂量，则 应去除该物质或降低该物质剂量（如降至最 大未观察到有害作用剂量，NOAEL），再就该 保健食品中其它成分的毒性作用及该物质与 其它成分的联合毒性作用作出评价。
食品安全性毒理学评价
（2）致突变试验
① 目的：对受试物是否具有致癌作用的可能性进 行筛选。
② 试验项目：包括体外试验与整体试验。体外试 验中Ames试验为必做项目。在整体试验中，可在 微核试验和骨髓细胞染色体畸变分析试验中任选 一项；在显性致死试验和睾丸生殖细胞染色体畸 变分析试验中任选一项。
③ 结果判定：
如三项试验均为阳性，则表示受试物很可能具有
体外试验中Ames试验为必做项目。
订预防措施和卫生标准提供理论依据。 大于或等于3，则可进入以下的试验。
为慎重起见，凡LD50在1O倍左右时，应进行重复试验，或用另一种方法进行验证。 用两种性别大鼠和／或小鼠。
2、有关的法律法规 《食品安全性毒理学评价程序》 《农药安全性毒理学评价程序》 《新药（西药）毒理学研究指导原则》 《化妆品安全性评价程序和方法》 《食品功能毒理学评价程序和检验方法》 《食品毒理学实验室操作规范》
LD50,联合Leabharlann 性毒性。 第二阶段：遗传毒性试验、传统致畸试验、
短期喂养试验。遗传毒性试验的组合必须考 虑原核细胞和真核细胞、生殖细胞与体细胞 、体内与体外试验相结合的原则。
①细菌致突变试验：鼠伤寒沙门氏菌/哺乳动物微粒 体酶试验为首选试验，必要时可另选和加选其它 试验。
②小鼠骨髓微核率测定或骨髓细胞染色体畸变分析 。
（3）凡属已知的化学物质，世界卫生组织对其已公 布每人每日允许摄入量（ADI）的，同时申请单 位又有资料证明我国产品的质量规格与国外产品 一致，则可先进行第一、第二阶段试验。如果产 品质量或试验结果与国外资料一致，一般不要求 进行进一步的毒性试验，否则应进行第三阶段试 验。
（4）农药、食品添加剂、食品新资源和新资源食品 、辐照食品、食品工具及设备用清洗消毒剂的安 全性毒理学评价试验的选择。
我国食品安全性毒理学评价的试验方法
我国食品安全性毒理学评价的试验方法
我国食品安全性毒理学评价的试验方法主要包括以下几个
方面：
1. 急性毒性试验：用于评估食品对动物的急性毒性。
常用
的试验动物包括小鼠、大鼠和小鼠。
常见的急性毒性试验
方法有LD50试验和固定剂量试验。
2. 亚慢性毒性试验：用于评估长期暴露于食品中的低剂量
毒性效应。
常用的试验动物包括大鼠和狗。
试验期一般为
90天，观察动物的生长发育、血液生化指标、内脏器官病
理学变化等。
3. 慢性毒性试验：用于评估长期暴露于食品中的慢性毒性
效应。
常用的试验动物包括大鼠和狗。
试验期一般为2年，观察动物的生长发育、血液生化指标、内脏器官病理学变
化等。
4. 灵敏性试验：用于评估食品对特定人群的敏感性，如孕妇、婴儿等。
常用的试验动物包括小鼠和大鼠。
5. 遗传毒性试验：用于评估食品对遗传物质的影响。
常用
的试验方法包括细菌突变试验、小鼠骨髓细胞染色体畸变
试验等。
6. 致癌性试验：用于评估食品对动物的致癌作用。
常用的
试验动物包括大鼠和小鼠。
试验期一般为2年，观察动物
是否出现肿瘤等。
在进行食品安全性毒理学评价时，需要严格按照相关的国
家标准和规定进行，确保试验方法的科学性和可靠性。
同时，还需要充分考虑试验动物的选择、试验剂量的确定、
试验期的安排等因素，以保证评价结果的准确性和可靠性。
药理学毒理学试验食品评价
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风险分析框架
风险评估
基于Байду номын сангаас学
风险管理
基于政策
风险交流
关于风险的信息和意见的互动交流
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风险分析（Risk Analysis）
有三部分组成 风险评估（Risk Assessment）：核心和基础 风险管理（Risk Management） 风险信息交流（Risk Communication）
➢ 最小致死量（minimal lethal dose，MLD，LD01， LDmin）：
指外源化学物使受试动物群体中仅引起个别发生死亡的剂量
➢ 半数致死量（median lethal dose，LD50）：又称致死中量，
指外源化学物能引起一群动物50%死亡的剂量或浓度
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效应（effect）：指一定剂量外源化学物与机体接触后所 引起的生物学改变
在细胞分裂的后期仍留在子细胞的胞质内，成为一个或几个规则的 次核
常用啮齿类动物骨髓多染红细胞(PCE)微核试验。PCE是红细胞 成熟的一个阶段，此时有的红细胞的主核已排出，微核容易辩 认
观察的遗传学终点：染色体完整性改变和染色体分离改变
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微核照片
结果：
1、微核率：计数1000个嗜多染红细胞，观察含有微核的嗜多染红细胞数
NOEL≥300倍：进行安全性评价
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第三阶段 代谢试验
目的：
➢ 了解受试物在体内的吸收、分布和排泄的速度及蓄积性
➢ 了解有无毒性代谢产物形成
➢ 寻找可能的靶器官
➢ 为选择慢性毒性试验的动物种系提供依据
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第四阶段 慢性毒性试验（包括致癌试验）
保健食品安全性毒理学评价试验的四个阶段和内容
保健食品安全性毒理学评价试验的四个阶段和内容
毒理试验的四个阶段和内容
1 第一阶段：急性毒性试验
经口急性毒性：LD50 ，联合急性毒性，一次最大耐
受量试验。
2 第二阶段：遗传毒性试验，30天喂养试验，传统致
畸试验
遗传毒性试验的组合应该考虑原核细胞与真核细胞、体内试验与体外试验相结合的原则。
从Ames试验或V79/HGPRT基因突变试验、骨髓细胞微核试验或哺乳动物骨髓细胞染色体畸变试验、4.1.2.3或4.1.2.4试验中分
别各选一项。
2.1 基因突变试验：鼠伤寒沙门氏菌/哺乳动物微粒体酶试验（Ames试验）为首选，其次考虑选用V79/HGPRT
基因突变试验，必要时可另选其它试验。
2.2 骨髓细胞微核试验或哺乳动物骨髓细胞染色体
畸变试验。
2.3 TK基因突变试验。
2.4 小鼠精子畸形分析或睾丸染色体畸变分析。
2.5 其它备选遗传毒性试验：显性致死试验、果蝇伴。
保健食品毒理与功能检验要求
《保健食品注册管理办法》
2、功能学检验： ①动物检验：检验机构按SFDA颁布的或企
业提供的保健食品功能学评价程序和检验方 法，对送检的样品进行保健功能的动物试验
②人体试食试验：检验机构按SFDA颁布的 或企业提供的保健食品按人体试食评价程序 和检验方法，对送检的样品进行人体试食试 验（包括安全性指标观察）。
《保健食品检验与评价技术规范》
一、对检验样品的要求 二、安全性毒理学评价程序和检验方法 三、功能学评价程序和检验方法
对送检样品的要求
对送检样品的一般要求： 1、样品必须是符合既定的配方、生产
工艺及质量标准的规格化定型产品。 （至少是经中试的定型产品） 2、送检单位应提供受试样品的配方， 及样品的物理、化学性质（包括化学结 构、纯度、稳定性等）及相关的资料。
主要内容
一、毒理、功能试验依据的法规和标准 二、毒理学安全性评价方法和检验要求 三、功能评价方法和检验要求 四、检验过程常见问题 五、保健食品评审动向
相关管理法规和标准
国务院: 《中华人民共和国食品卫生法》 (1995) 卫生部：《保健食品管理办法》（1996） 卫生部：《新资源食品卫生管理办法》（1990） 卫生部：《保健食品检验与评价技术规范》(2003） 卫生部：《食品安全性毒理学评价程序和方法》
对送检样品的要求
一、毒理学检验送检样品要求： 1、送检样品批号：应为三批卫生学检验样品中的
任一批样品，同时毒理、功能、人体试验的批号 要一致。 2、送检样品数量： 30天喂养样品数量＝ (推荐剂量÷60) ×200×动物总重×饲养天数 90天喂养样品数量＝ (推荐剂量÷60) ×600× 动物总重×饲养天数 不足2kg按2kg送样。需要增加或减少毒理学试验 项目时，适当增加或减少样品量。
保健食品安全性与功能评价
毒理学评价： 食品安全风险评估的方法
研究方法： 通过动物试验和对人群的观察，阐明待 评物质的毒性及潜在的危害。 安全性评价： 确定待评物质能否进入市场。 阐明安全使用的条件，以达到最大限度 的减小其危害作用、保护健康的目的。 制定法规和标准的重要根据和基础。
毒理学评价： 食品安全风险评估的方法
食品安全风险评估内容 评价结果的应用
参照新资源食品评价的方法
（2）、个别国家或国内局部地区有食用 历史
原则上做急性经口毒性试验、三项致突 变试验、90天经口毒性试验、致畸试验 和繁殖毒性试验；
文献资料及成分分析，未发现有毒性作 用和有较大数量人群长期食用历史而未 发现有害作用的，繁殖毒性试验先不做
参照新资源食品评价的方法
（3）、已在多个国家批准广泛使用的： 做急性经口毒性试验、三项致突变试验、
参照新资源食品评价的方法
使用的原、辅料不是可用于保健食品和食 品的，如何做安全性评价：
例如名单以外的动物、植物、微生物， 加工过程中使用的微生物新品种， 动物、植物、微生物中分离的食品物料， 采用新工艺导致原有成分或结构改变的食
保健食品的毒理学评价与功能评价
2020/8/4 8
《
保
一、保健食品功能性评价的基本要求
健
（一）对受试样品、实验动物、受试样品 剂量及时间等的基本要求
食 1.对受试样品的要求
品 2.对实验动物的要求
》
3.对受试样品剂量及时间的要求
（
（二）对人体试食试验的基本要求
第
1.对受试样品和试验的一般要求
二
2.对受试者的要求
版
3.对试验实施者的要求
）
2020/8/4 9
《 二、主要保健功能的评价
保 （一）增强免疫力的功能评价
健
1.胸腺/体重比值、脾脏/体重比值
食
通过测定实验组与对照组的胸腺/体重比 值和脾脏/体重比值是否有差异，可了解受试
品
样品是否具有调节免疫力的作用。
》
（
2.细胞免疫功能测定 主要通过小鼠脾淋巴细胞转化实验和迟发
第
型变态反应这两个试验来评价受试样品是否具
《 保 健 食 品 》
（
第
二
版
）
第十五章 保健食品的毒理学 评价与功能评价
【知识目标】
保健食品评价一般包括（1）保健食品的安全性毒理学试验；（2）功 能学试验（包括动物试验和/或人体试食试验）；（3）功效成分检测； （4）卫生学试验；（5）稳定性试验等五个方面。本章重点介绍保健食品 的安全性毒理学评价与功能评价。安全性毒理学评价与功能评价是保健食 品研发的重要环节，是保证保健食品安全有效必须遵循的原则。通过本章 学习，学生了解保健食品的安全性毒理学评价与功能评价的总体要求，熟 悉保健食品安全性毒理学评价与功能评价所需执行的法规与标准，理解各 类毒理学评价与功能评价的原理，掌握毒性试验的原则与功能性评价的基 本要求，掌握毒性试验与功能性评价的方法。
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内容
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保健食品安全性毒理学评价试验的四个阶段和内容发布日期：2013-04-03 浏览次数:1605 字号：[]
毒理试验的四个阶段和内容
1第一阶段：急性毒性试验
经口急性毒性：LD50，联合急性毒性，一次最大耐受量试
验。
2第二阶段：遗传毒性试验，30天喂养试验，传统致畸试验
2.1基因突变试验：鼠伤寒沙门氏菌/哺乳动物微粒体酶试验
（Ames试验）为首选，其次考虑选用V79/HGPRT基因突变试验，
必要时可另选其它试验。
2.2骨髓细胞微核试验或哺乳动物骨髓细胞染色体畸变试
验。
2.3TK基因突变试验。
2.4小鼠精子畸形分析或睾丸染色体畸变分析。
2.5其它备选遗传毒性试验：显性致死试验、果蝇伴性隐性
致死试验，非程序性DNA合成试验。
2.630天喂养试验。
2.7传统致畸试验。
3第三阶段：亚慢性毒性试验----90天喂养试验、繁殖试
验、代谢试验
4第四阶段：慢性毒性试验（包括致癌试验）
1、药物的毒性试验分为两类，其一特殊毒性试验，包含致癌、致残、致突变，号称三致试验；作此试验的单位必须是国家指定并认可的；一般单位即使做了也不被国家认可！通常一类创新药必须做的。
无论一个药
物的药效如何好，只要含有三致试验的特殊毒性（动物若干代繁殖后，查看），该药物将不会允许上市的。
2、其二，一般毒性试验，通常用老鼠或兔子去做，主要是测定半数致死量；若某个药物的半数致死量是有效使用剂量的2倍以上，通常认为是临床使用安全的，若半数致死量比有效剂量略大一点，那就谁也不敢使用了，万一略微超一点量就会导致患者死亡！。