实验革兰氏染色法
革兰氏染色法实验报告共5篇
革兰氏染色法实验报告篇一革兰氏染色法是一种常用的细菌染色方法，可用于鉴定细菌的类型和形态。
以下是一份革兰氏染色法的实验报告范例，包含实验目的、实验原理、实验步骤、实验结果和结论等部分。
实验目的： 1.了解革兰氏染色法的原理和步骤； 2.掌握细菌的革兰氏染色方法； 3.观察细菌在革兰氏染色中的反应，并进行鉴定。
实验原理：革兰氏染色法是根据细菌细胞壁的特性而设计的一种染色方法。
细菌细胞在染色过程中会根据细胞壁的结构不同，分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
革兰氏阳性菌具有较厚的细胞壁，含有较多的革兰氏染色阳性物质（如染色时用的紫檀碱），因此在染色后会呈现紫色。
革兰氏阴性菌细胞壁较薄，不含有革兰氏染色阳性物质，染色时使用的碘酒（革兰氏碘化酒）能使它产生复合革兰氏染色阳性物质（碘靛紫），再用酒精脱色，再用洋红着色，使其产生颜色变化，最终呈现红色。
实验步骤： 1.准备好菌液：选取需检测的菌株，用无菌盘收集少量菌落，用少量生理盐水悬浮，制备菌液。
2.片玻璃片：在清洁无菌玻璃片上滴上一滴菌液。
3.烘干：将玻璃片架起，自然风干。
4.固定：将玻璃片的细菌涂片在火焰上迅速烘烤，使其牢固地附着在玻璃片上。
5.染色：将烘烤后的玻璃片放入紫檀液中，染色1分钟。
6.脱色：用酒精脱色10-30秒。
7.洗净：用自来水清洗片上的超染色剂。
8.再染：将片浸入碘靛紫溶液中，染色1-2分钟。
9.脱色：用酒精脱色10-30秒。
10.洗净：用自来水清洗片上的超染色剂。
11.观察：利用显微镜观察和比较细菌的形态和染色情况。
12.记录：记录细菌的形态、颜色等观察结果。
实验结果：通过观察细菌的形态和颜色，我们可以得出以下结论：•革兰氏阳性菌在染色后呈现紫色；•革兰氏阴性菌在染色后呈现红色。
结论：革兰氏染色法是一种常用的细菌染色方法，通过染色反应可以初步鉴定细菌的类型。
本次实验中，我们成功地使用革兰氏染色法对细菌进行了染色和鉴定，观察到了不同细菌的染色结果，并且将细菌分为革兰氏阳性和革兰氏阴性两类。
革兰氏染色法步骤及注意事项
1. 准备细菌涂片：将待染菌株取一小滴放在玻璃片上，用铅笔头部画成细 线，形成细菌涂片。
2. 固定：将细菌涂片在火焰上反面向上加热，使细菌附着在玻璃片上。 3. 染色： a. 涂上紫晶液：将细菌涂片浸入紫晶液中，静置 1 分钟。 b. 冲
1. 操作环境应保持干净，并采取无菌操作，以避免外界细菌污染。 2. 手套、眼镜和实验室外套是必需的个人防护装备。
3. 严格遵守安全操作规程，如避免将染料接触到皮肤或进入口鼻。
4. 使用优质的试剂和试验器材，以确保结果的准确性。
5. 注意控制染Βιβλιοθήκη 时间和冲洗时间，过长或过短都可能影响染色效果。
6. 在观察细菌涂片时，使用适当的显微镜镜头和光源，以获得清晰的图 像。
洗：用蒸馏水或脱离水轻轻冲洗玻璃片，以去除多余的紫晶液。 c. 酒 精洗涤：滴加酒精洗涤玻璃片，使其被酒精覆盖，持续洗涤 15-30 秒。 d. 再次冲洗：用蒸馏水轻轻冲洗玻璃片，以去除酒精。 e. 涂上碘液： 滴加碘液覆盖细菌涂片，静置 1 分钟。 f. 冲洗：用蒸馏水轻轻冲洗玻璃 片，以去除多余的碘液。 g. 酒精洗涤：滴加酒精洗涤玻璃片，使其被 酒精覆盖，持续洗涤 15-30 秒。 h. 再次冲洗：用蒸馏水轻轻冲洗玻璃 片，以去除酒精。 i. 涂上脱色剂：滴加脱色剂覆盖细菌涂片，持续涂覆 15-30 秒。 j. 冲洗：用蒸馏水轻轻冲洗玻璃片，以去除脱色剂。 4. 染色：将细菌涂片滴上红色染料（如苏丹三染料）覆盖细菌，静置 1 分 钟。 5. 冲洗：用蒸馏水轻轻冲洗玻璃片，以去除多余的染料。 6. 干燥：将细菌涂片放在通风处晾干，或用吹风机低温吹干。 7. 观察：将干燥的细菌涂片放在显微镜下观察，细菌将呈现出紫色或蓝色 的革兰氏阳性颜色，而其他微生物将呈现出红色的革兰氏阴性颜色。 注意事项：
实验三 革兰氏染色法
三、实验器材及试剂
• 枯草芽孢杆菌、大肠杆菌 18～24h 培养 物 • 革兰染色液一套（草酸铵结晶紫染液、卢 戈碘液、95%乙醇、番红染液） • 酒精灯，玻片，接种环，吸水纸，香柏油， 二甲苯，显微镜。
五、注意事项
5、染色时注意看清染料名称，按序进行、滴加染料 以能覆盖涂片为度不宜过多，要掌握好染色时间， 尤其是酒精脱色时间，不宜过长或过短。染色中除 脱色时摇动玻片外均要端平玻片或将其静放台面上。 染色过程中，不可使染液干枯。
6、水洗切勿先倒去染料，而是用较小水流冲洗在玻 片一端，用水流将它们缓缓带走，避免直接冲洗菌 膜处，要切忌将未经火焰固定的标本染色水洗。
④复染：加番红染液1～2滴于标本面上，染1min， 水洗后吸干。
四、实验步骤
5、镜检 用毛边纸或滤纸轻轻吸干(珍贵标本应自然干燥)，
待标本充分干燥后加油，用油镜观察并判断细菌的 染色结果。
6、实验后处理 用二甲苯擦油镜镜头后用擦镜纸擦干，整理、
清洁显微镜，把显微镜放回原处，把标本片放入消 毒缸中消毒5min后清洗。
四、实验步骤
2、干燥 将涂片放空气中自然干燥，或在离火焰较远处
烘干，切勿高温烘烤，因温度太高会破坏菌体形态。
3、固定 手持载玻片一端，将涂片在火焰外焰上连续通
过 3 个来回，每个来回约1s， 就可固定标本，直 到手背试触涂片反面热而不烫为宜。
四、实验步骤
4、染色
①初染：滴加结晶紫染液1～2滴于标本面上，染色 1min，轻轻水洗，甩干； ②媒染：滴加卢戈碘液1～2滴于标本面上，染色 1min，轻轻水洗，甩干； ③脱色：滴加95％酒精1～2滴于标本面上， 频频倾 动玻片， 直到不再溶下染料为止， 约30s， 视标本 片材料厚薄而增减时间，然后水洗，甩干；
革兰氏染色法实验报告
革兰氏染色法实验报告实验目的，通过革兰氏染色法对细菌进行染色，观察细菌的形态特征，以及对细菌的分类和鉴定提供帮助。
实验材料和方法，取得所需的细菌培养物，革兰染色试剂，无菌玻璃片等实验器材。
首先在无菌工作台上取一滴细菌培养物涂抹在无菌玻璃片上，然后用火焰消毒的镊子取一根无菌玻璃棒，在细菌培养物上进行搅拌，使其均匀分布。
接着倒入革兰染色试剂，静置片刻后用水冲洗，再用吸水纸轻轻吸干，最后在显微镜下观察。
实验结果，经过革兰氏染色法染色后，我们观察到细菌在显微镜下呈现出两种不同的颜色，其中某些细菌呈紫色，而另一些细菌呈粉红色。
紫色细菌为革兰氏阳性菌，粉红色细菌为革兰氏阴性菌。
革兰氏阳性菌的细胞壁含有较多的壁多糖和较少的脂质，所以在染色后能够保留革兰氏染色试剂的紫色颜色；而革兰氏阴性菌的细胞壁则含有较多的脂质和较少的壁多糖，因此在染色后会失去紫色而呈现粉红色。
实验结论，通过本次实验，我们成功地利用革兰氏染色法对细菌进行了染色，并观察到了革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的不同染色结果。
这为我们对细菌的分类和鉴定提供了重要的参考依据。
同时，本次实验也巩固了我们对革兰氏染色法的理论知识，并提高了我们的实验操作技能。
实验注意事项，在进行革兰氏染色法实验时，需要严格遵守无菌操作规范，以免细菌培养物受到外界的污染。
同时，在染色试剂的使用过程中，需要注意避免接触皮肤和呼吸道，以免引起不良反应。
总结，本次实验通过革兰氏染色法的操作，成功地观察到了细菌的染色结果，并对细菌的分类和鉴定提供了重要的参考依据。
在以后的实验中，我们将继续加强对细菌分类鉴定方法的学习和实践，提高我们的实验技能水平。
革兰氏染色法实验报告内容
革兰氏染色法实验报告内容实验目的本实验的目的是学习和掌握革兰氏染色法的原理和操作方法，了解革兰氏阴性和阳性菌的特点，并通过染色观察和区分不同类型的细菌。
实验原理革兰氏染色法是一种常用的细菌染色方法，它是根据细菌细胞壁的结构差异，通过染色反应将细菌分为革兰氏阴性和阳性两类。
革兰氏氏阴性菌是指细胞壁较厚，染色后呈现粉红色的菌群，如大肠杆菌等。
而革兰氏阳性菌细胞壁较薄，染色后呈现紫色的菌群，如金黄色葡萄球菌等。
革兰氏染色法主要分为以下几个步骤：1. 取少量液体培养基，通过接种线将细菌接种于培养基上。
2. 将已接种的培养基涂布在玻璃片上，形成薄膜。
3. 用火焰消毒的钳子夹住已冷却的玻璃片，将细菌薄膜向上，放置在炉子上加热1-2分钟，使细菌固定在玻璃片上。
4. 取革兰染色剂，倒入上述玻璃片上，静置1分钟。
5. 用水冲洗玻璃片，直到水清。
6. 涂上碘试剂，静置1分钟。
7. 用酒精洗去碘试剂，直到水清。
8. 加入对应革兰氏颜色染色剂，静置30秒。
9. 用水冲洗玻璃片，直到水清。
10. 将玻璃片倒立在滤纸上晾干。
11. 使用显微镜观察染色后的细菌。
实验步骤1. 准备工作：- 消毒实验室台面和显微镜镜头，确保实验环境无菌。
- 准备好所需实验器材和试剂。
2. 在实验室台面上铺上无菌纸，将待染色的细菌培养基涂布在玻璃片上。
3. 将已接种的培养基涂布在玻璃片上，形成薄膜。
4. 用巴氏钳夹住已冷却的玻璃片，将细菌薄膜向上，放置在炉子上加热1-2分钟，使细菌固定在玻璃片上。
5. 取革兰染色剂，倒入上述玻璃片上，静置1分钟。
6. 用水冲洗玻璃片，直到水清。
7. 涂上碘试剂，静置1分钟。
8. 用酒精洗去碘试剂，直到水清。
9. 加入对应革兰氏颜色染色剂，静置30秒。
10. 用水冲洗玻璃片，直到水清。
11. 将玻璃片倒立在无菌纸上晾干。
12. 使用显微镜观察染色后的细菌。
实验结果通过观察染色后的细菌样本，我们可以得出以下结论：- 粉色细菌样本为革兰氏阴性菌。
革兰氏染色法实验报告
革兰氏染色法实验报告实验目的，通过革兰氏染色法对细菌进行染色，观察细菌的形态特征，以及判断细菌的结构类型。
实验材料与方法：材料，大肠杆菌培养液、革兰氏染色试剂（紫晶染液、碘液、酒精、碳酸钠）、玻璃片、显微镜、移液管、灭菌架等。
方法：1. 取一块玻璃片，在玻璃片上滴上一滴大肠杆菌培养液。
2. 用火杀菌的移液管，取少许紫晶染液滴在大肠杆菌液上，静置1分钟。
3. 用移液管滴上碘液，静置1分钟。
4. 用移液管滴上酒精，以使玻璃片上的颜色变浅，然后用水冲洗。
5. 用移液管滴上碳酸钠，静置1分钟，然后用水冲洗。
6. 用吸水纸吸干水分，放在灭菌架上晾干。
7. 取一块盖玻片，将其放在玻璃片上，用手指轻轻按压，使两者紧密结合。
实验结果与分析：观察革兰氏染色后的大肠杆菌，发现其为革兰氏阴性菌，因为在显微镜下观察到的细菌呈现红色。
革兰氏阴性菌的特点是细胞壁含有脂多糖，不易被革兰染色的染料染色，因此在染色后呈现红色。
实验结论：通过本次实验，我们成功地利用革兰氏染色法对大肠杆菌进行了染色，并观察到了细菌的形态特征。
同时，根据染色结果，我们判断出大肠杆菌为革兰氏阴性菌。
革兰氏染色法是一种简单而有效的细菌染色方法，通过本次实验的实践操作，我们对革兰氏染色法有了更深入的理解，为今后的实验操作提供了宝贵的经验。
实验注意事项：1. 实验操作过程中要注意使用消毒的器具，避免细菌污染。
2. 在染色过程中，要严格按照步骤进行操作，避免染色失败。
3. 在观察细菌形态特征时，要调节显微镜，以获得清晰的观察效果。
总结：本次实验通过革兰氏染色法对大肠杆菌进行了染色，成功观察到了细菌的形态特征，并判断出了细菌的结构类型。
革兰氏染色法是一种常用的细菌染色方法，通过本次实验的实践操作，我们对其有了更深入的理解，为今后的实验操作提供了宝贵的经验。
希望通过本次实验，能够增进对细菌染色方法的理解，为今后的学习和研究工作打下良好的基础。
革兰氏染色实验报告
革兰氏染色实验报告一、实验目的1、学习并掌握革兰氏染色法的原理和操作步骤。
2、了解革兰氏染色法在细菌分类鉴定中的重要意义。
3、通过实验观察，区分革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的形态特征。
二、实验原理革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法，它可以将细菌分为革兰氏阳性菌（G+）和革兰氏阴性菌（G）两大类。
该染色法的原理主要基于两类细菌细胞壁结构和化学组成的差异。
革兰氏阳性菌的细胞壁较厚，肽聚糖含量高，交联度大，脂质含量少。
当用乙醇脱色时，细胞壁肽聚糖层脱水而使孔隙缩小，细胞壁通透性降低，故保留结晶紫碘复合物在细胞内，细胞仍呈紫色。
革兰氏阴性菌的细胞壁薄，肽聚糖含量低，交联度小，脂质含量高。
乙醇脱色时，脂质被溶解，细胞壁通透性增加，结晶紫碘复合物容易被洗脱出来，细胞被脱色，再经复染后呈红色。
三、实验材料1、菌种：大肠杆菌（Escherichia coli）、金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）。
2、试剂：结晶紫染液、碘液、95%乙醇、番红染液。
3、器材：显微镜、载玻片、盖玻片、接种环、酒精灯、镊子、吸水纸等。
四、实验步骤1、涂片取干净的载玻片，在中央滴一小滴无菌水。
分别用接种环挑取少量大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的新鲜培养物，与水滴充分混匀，涂成均匀的薄膜。
自然干燥或用吹风机吹干。
2、固定将涂片通过酒精灯火焰 3 次，以固定细菌。
3、染色初染：滴加结晶紫染液覆盖涂片，染色 1-2 分钟，水洗。
媒染：滴加碘液覆盖涂片，染色 1-2 分钟，水洗。
脱色：用 95%乙醇脱色，约 20-30 秒，直至流出的乙醇无紫色，立即水洗。
复染：滴加番红染液，染色 2-3 分钟，水洗。
4、干燥用吸水纸吸干或自然干燥。
5、镜检用显微镜油镜观察涂片，记录细菌的染色结果和形态特征。
五、实验结果在显微镜下观察，金黄色葡萄球菌被染成紫色，为革兰氏阳性菌；大肠杆菌被染成红色，为革兰氏阴性菌。
金黄色葡萄球菌呈球形，排列呈葡萄串状，细胞个体较大。
细菌的革兰氏染色法实验报告
细菌的革兰氏染色法实验报告摘要：革兰氏染色法是一种常用的细菌分类和鉴定方法。
通过本实验，我们成功地利用革兰氏染色法对不同类型的细菌进行了染色，并观察到了细菌在显微镜下的形态特征。
实验结果表明，革兰氏染色法能够有效地将细菌分为革兰氏阳性和革兰氏阴性两类，为细菌的鉴定提供了重要的依据。
引言：细菌是一类微生物，广泛存在于我们周围的环境中。
了解细菌的分类和鉴定对于研究细菌的生理特性、病原性以及药物敏感性具有重要意义。
革兰氏染色法是一种常用的细菌分类和鉴定方法，通过染色后细菌在显微镜下的形态特征，可以将其分为革兰氏阳性和革兰氏阴性两类。
材料与方法：1. 细菌培养物：本实验选择了两种细菌培养物，分别是革兰氏阳性菌A和革兰氏阴性菌B。
2. 革兰氏染色试剂：结晶紫、碘液、酒精、脱色剂、苏木精。
3. 显微镜：用于观察染色后的细菌样品。
实验步骤：1. 取两株细菌培养物，分别进行涂片制备。
2. 将制备好的涂片用结晶紫染色液浸泡5分钟，然后用蒸馏水冲洗。
3. 加入碘液浸泡1分钟，然后用蒸馏水冲洗。
4. 用酒精滴加在涂片上，使其脱色，然后用蒸馏水冲洗。
5. 加入脱色剂浸泡30秒至1分钟，然后用蒸馏水冲洗。
6. 将涂片用苏木精染色液浸泡1分钟，然后用蒸馏水冲洗。
7. 涂片晾干后，放入显微镜下观察。
结果与讨论：经过革兰氏染色法染色后，我们观察到了明显的差异。
革兰氏阳性菌A呈紫色，而革兰氏阴性菌B呈红色。
根据革兰氏染色法的原理，我们可以解释这种差异。
革兰氏染色法中，结晶紫染色液首先染色细菌细胞的细胞壁。
革兰氏阳性菌的细胞壁含有较多的胞外多糖和胞外蛋白质，能够吸附结晶紫，形成紫色。
而革兰氏阴性菌的细胞壁较薄，胞外多糖和胞外蛋白质含量较少，无法吸附结晶紫，因此在后续的染色步骤中无法保留紫色，最终呈现红色。
革兰氏染色法的原理是通过染色后细菌在显微镜下的形态特征来进行分类和鉴定。
革兰氏阳性菌的细胞壁较厚，呈紫色，在显微镜下观察到细胞形态较大、圆润。
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细菌呈现第一次染色的 效果紫色，革兰氏阳性 菌（紫阳G+）
呈现第二次染色的效果 红色；称革兰氏阴性菌 （红阴G -）
G+ 菌: 金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、 甲型和乙型链球菌、枯草杆菌 G- 菌: 大肠杆菌、变形杆菌、绿脓杆菌、 卡他双球菌、淋球菌等
四、注意事项：
1、选用培养18～24小时菌龄的细菌为宜，若细菌太老， 由于菌体死亡或自溶常使革兰氏阳性菌转呈阴性反应。 2、加热固定时要使用载玻片夹子，以免烫伤。不要将 载玻片在火焰上烧烤时间过长，以免载玻片破裂。 3、革兰氏染色成败的关键是脱色时间，如脱色过度， 革兰氏阳性菌也可被脱色而被误认为革兰氏阴性菌；如 脱色时间过短，革兰氏阴性菌也会被误认为是革兰氏阳 性菌。因此必须 严格把握脱色时间。 4、使用染料时注意避免沾到衣物上，乙醇脱色时勿靠 近火焰。
三、实验原理：
1、无菌操作技术：
高温对微生物具有致死效应，因为在微生物的转接 过程中，一般在火焰旁进行，并用火焰直接灼烧接种环， 以达到灭菌的目的，但一定要保证其冷却后方可进行转 接，以免烫死微生物。
2、细菌制片：
涂片法：
涂抹——细胞个体在载玻片上均匀分布，避免菌体堆 积而无法观察个体形态。 加热——固定使细胞质凝固，使细胞固定在载玻片上， 这种加热处理还可以杀死大多数细菌而且不破坏细胞 形态。
染色 (1) 初染:滴加结晶紫染液数滴 于涂片上1 分钟,水洗; (2) 媒染:滴加碘液媒染1 分钟,水洗; (3) 脱色:滴加95 %酒精,轻轻不断摇动 玻片,使染液尽可能脱去,持续20~30s, 水洗; (4) 复染:滴加稀释石炭酸复红染液数 滴于涂片上复染1 分钟,水洗。吸水纸 吸干,油镜观察。
3、革兰氏染色：
革兰氏染色是丹麦医生Hans Christian Gram于1884年发明的 一种鉴别不同类型细菌的染色方法。
细菌对革兰氏染色的不同反应是由于它们细胞壁的结构和组 分的差异所决定的。
初染——所有细菌都被染成结晶紫的蓝紫色。 碘——媒染剂，与结晶紫结合成结晶紫—碘的复合物，增强染
料在菌体中的滞留能力。
实验四 革兰氏染色法
一 目的要求： 1、学习并掌握革兰氏染色法。 2、了解革兰氏染色法的原理。 3、巩固显微镜操作技术及无菌操作技术。
二、实验器材： 1.菌种： 大肠杆菌16h牛肉膏蛋白胨琼脂斜面培养物、金黄色葡萄球菌 16h牛肉膏蛋白胨琼脂斜面培养物。 2.溶液或试剂： 革兰氏染液，草酸铵结晶紫染液，lugol碘液，95%乙醇，番红 复染液等。 3.仪器或其他用品： 酒精灯、载玻片、显微镜、双层瓶、擦镜纸、接种环、试管架， 镊子，载玻片夹子，滤纸、滴管和无菌生理盐水等。
干燥：涂片最好在室温下使其自然干燥， 有时为了使之干得更快些，可将标本面向 上，手持载玻片一端的两侧，小心地在酒 精灯上高处微微加热，使水分蒸发，但切 勿紧靠火焰或加热时间过长，以防标本烤 枯而变形。
固定：固定常常利用高温，手持载玻片 的一端，标本向上，在酒精灯火焰外层 尽快的来回通过2~3次，共约2~3秒钟， 并不时以载玻片背面加热触及皮肤，不 觉过烫为宜（不超过60℃）,放置待冷后， 进行染色。
四、
镜检
干燥
革兰氏染色法
涂片
干燥
固定
初染
1min
复染
水洗
镜检
水洗
水洗
0.5min
脱色
水洗
1min
媒染
涂片：取干净的载玻片于实验台上， 在载玻片的中央滴一滴无菌蒸馏水， 将接种环在火焰上烧红，待冷却后从 斜面挑取少量菌种(金黄色葡萄球菌 或大肠杆菌)与玻片上的水滴混匀后， 在载玻片上涂布成一均匀的薄层，涂 布面不宜过大。
脱色剂——革兰氏阳性菌细胞壁肽聚糖含量高，壁厚且类脂质
含量低，乙醇处理可以使肽聚糖所具有的网状结构收缩使碘— 结晶紫复合物滞留在细胞壁，菌体持原有的蓝紫色；革兰氏阴 性菌细胞壁肽聚糖含量低，交联度低，壁薄且类脂质含量高， 乙醇处理时，脂质溶解，细胞壁通透性增大，使结晶紫—碘的 复合物比较容易被洗脱出来，菌体变为无色，用复染剂复染后， 细胞被染上复染剂的红色。