载脂蛋白E基因型分型方法研究
载脂蛋白E基因型的检测及临床意义
载脂蛋白E基因型的检测及临床意义张艳敏;辛俊;李萱【期刊名称】《心血管康复医学杂志》【年(卷),期】2002(011)002【摘要】目的:探讨载脂蛋白E(ApoE)基因型的检测方法及其临床意义.方法:用人工合成的寡聚核苷酸引物,通过多聚酶链反应(PCR)特异性体外扩增ApoE基因的特异性DNA片段.扩增产物用限制性内切酶Hhal消化,聚丙烯酰胺凝胶电泳后,进行限制性片段长度多态性(RFLP)基因分型.结果:运用PCR-RFLP方法检测了53例健康人和55例冠心病患者的ApoE基因型.两组对象基因型频率E3/2分别为9.4%和3.6%;E3/3为64.2%和60%;E4/3为26.4%和30.9%;E4/4为0和3.6%;等位基因频率E2分别为0.047和0.027;E3为0.820和0.773;E4为0.132和0.200,P 均>0.05,可能与样本小有关.结论:PCR-RFLP法检测ApoEAD基因型简便、准确,有很强的临床应用价值.【总页数】3页(P137-139)【作者】张艳敏;辛俊;李萱【作者单位】新疆自治区人民医院高血压科,乌鲁木齐市,830001;兰州军区乌鲁木齐总院老年病科;新疆医大一附院干部病房【正文语种】中文【中图分类】R446.112【相关文献】1.应用微流控电泳联合检测载脂蛋白C3基因型 [J], 俞娟;卢美红;王惠民;仲人前2.聚合酶链反应/变性高效液相色谱技术检测载脂蛋白E基因型 [J], 黄盛文;向道康;安邦权;李贵芳;罗振元3.载脂蛋白AI与载脂蛋白B100检测在肝炎后肝硬化并发门脉高压患者中的临床意义 [J], 陈树添;林章礼;吴伟聪4.冠心病患者载脂蛋白E基因型及表型的研究与临床意义 [J], 彭健;龚五星;彭澍;王骏;石理;林岫芳5.基因芯片法检测载脂蛋白E(ApoE)基因型试剂性能验证 [J], 金雅琼;张进因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
载脂蛋白E基因分型检测
载脂蛋白E基因分型检测
载脂蛋白E基因分型检测
健康管理方案
根据检测结果，您的载脂蛋白E基因型为ε3/ε3，表现型为E3。
从疾病预防、预警的角度来讲：
1、该基因类型属于常见型基因，对心脑血管疾病的发生没有明显倾向性。
2、该基因类型血脂易表现：甘油三脂（TG）、低密度脂蛋白-胆固醇（LDL-C）正常，高密
度脂蛋白（HDL）高。
用药参考（请结合临床）：
1、该类型基因对降脂药物的选择关系不大。
2、选用辛伐他汀（Simvastatin）、阿托伐他汀（Atorvastatin）、普伐他汀（Pravastatin）、
洛伐他汀（Lovastatin）、普罗布考（Probucol）、瑞舒伐他汀（Rosuvastatin）、氟伐他汀(Fluvastatin)均有效果。
请您养成良好的饮食等生活习惯：
1、低盐、低脂、低热量饮食，食用鱼油效果较好。
2、可适量饮酒。
有冠心病、高血压、糖尿病等病史者不宜饮酒。
3、维持标准体重，保持心情舒畅，坚持适宜运动时间和方式，养成良好的工作和生活习惯。
您的健康我们关注
Your Health Our Care。
基于TaqMan-TAMRA探针技术的ApoE基因快速分型方法研究
基于TaqMan-TAMRA探针技术的ApoE基因快速分型方法研究摘要】目的建立基于TaqMan-TAMRA探针技术的快速、准确的载脂蛋白E(ApoE)基因型检测方法，为临床诊断、治疗和预防ApoE基因相关疾病提供依据。
方法对1049例血液样本提取DNA后，利用TaqMan-TAMRA探针对ApoE基因进行检测和分型，并利用测序法进行验证。
结果 1049例样本中，共检出1048例，ApoE基因的6种基因型（ε3/ε3、ε2/ε3、ε3/ε4、ε2/ε4、ε2/ε2、ε4/ε4）所占比例分别为68.64%、13.54%、14.97%、1.72%、0.76%、0.38%。
TaqMan-TAMRA探针法分型结果与测序结果完全一致。
结论 TaqMan-TAMRA探针法操作简便，分型结果准确度高，是一种适用于临床的ApoE基因快速分型方法。
【关键词】载脂蛋白ETaqMan-TAMRA基因分型测序【中图分类号】R319 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2013）35-0132-02Development of a fast genotyping forApoEbased on TaqMan-TAMRAprobes【Abstract】Objective:To establish a method for fast and accurategenotyping ApoE with TaqMan-TAMRA probes and to support the clinical diagnosis、treatment and prevention.Methods:DNA was extracted from 1049 blood samples, then detected and genotyped with TaqMan TAMRA probes. The genotypes were compared with sequencing results. Results: DNA were detected in 1048 out of 1049 samples.Of which, six genotypes of ApoE gene (ε3/ε3, ε2/ε3, ε3/ε4, ε2/ε4, ε2/ε2, ε4/ε4) accounted for 68.64%, 13.54%, 14.97%, 1.72%, 0.76%, 0.38%.TaqMan-TAMRA probe genotypes were consistent with sequencing results. Conclusion:TaqMan-TAMRA is a fast and accurate method for genotyping ApoE.【Key words】 Apolipoprotein E TaqMan-TAMRA genotyping sequencing 载脂蛋白（ApoE）基因位于人的第19号染色体，编码由299个氨基酸组成的ApoE蛋白，该蛋白具有脂蛋白转运、代谢及修复细胞膜等功能[1，2]。
阿尔茨海默病患者载脂蛋白E基因多态性、血脂水平的研究
阿尔茨海默病患者载脂蛋白E基因多态性、血脂水平的研究阿尔茨海默病是一种常见的神经系统退行性疾病，主要通过病理学表现为神经原纤维缠结和淀粉样蛋白沉积。
近年来的研究表明，阿尔茨海默病的发病可能与遗传因素有关，其中载脂蛋白E（Apolipoprotein E, APOE）基因的多态性与阿尔茨海默病之间存在关联。
APOE基因编码载脂蛋白E，它是一种脂蛋白，在脂代谢中起着重要的作用。
APOE基因有三种主要等位基因，分别是ε2，ε3和ε4。
据研究发现，APOE ε4等位基因是阿尔茨海默病的一个重要遗传风险因素。
携带APOE ε4等位基因的个体患上阿尔茨海默病的风险要高于其他等位基因的个体。
为了探究APOE基因多态性与阿尔茨海默病的关系，研究人员进行了大量的研究。
其中一项研究包括对大量阿尔茨海默病患者和健康对照组的基因分型分析。
研究结果显示，APOE ε4等位基因的携带率在阿尔茨海默病组中显著高于对照组，这表明APOE ε4等位基因是阿尔茨海默病的一个重要遗传风险因素。
除了APOE基因多态性与阿尔茨海默病的关联，一些研究还发现APOE基因多态性与患者的血脂水平之间也存在一定的关系。
具体而言，携带APOE ε4等位基因的个体在血脂水平上往往表现为高胆固醇、高低密度脂蛋白胆固醇和低高密度脂蛋白胆固醇水平。
这种血脂异常可以增加心血管疾病的风险，进一步加剧了阿尔茨海默病患者的病情。
在APOE基因多态性与阿尔茨海默病患者的研究中，还有一些争论的问题。
一方面，APOE ε4等位基因的携带并不一定导致阿尔茨海默病的发病，因此还需要进一步研究其他的遗传和环境因素的影响。
另一方面，APOE基因多态性与血脂异常之间的关系也存在一定的不确定性，有些研究结果并不一致。
总的来说，APOE基因多态性与阿尔茨海默病之间存在关联，APOE ε4等位基因是阿尔茨海默病的一个重要遗传风险因素。
此外，携带APOE ε4等位基因的个体还可能表现出血脂异常，增加了心血管疾病的风险。
载脂蛋白E基因研究进展
６ ７ ２８
Ｊ ｏ ｕ ｒ ｎａ ｌ ｏ ｆ Ｃｌ ｉ ｎｉ ｃ ａ ｌ Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ａ ｌ
２ ０ １ ７年 第 ４卷 第 ３ ４期
２ ０１ ７ Ｖｌ ｏ １ ． ４ Ｎ Ｏ ． ３ ４
载 脂 蛋 白Ｅ 基 因研 究 进 展
董 静 璇 ，邱 龄 （ 山西 医科 大 学 第 二 医院 心 内科 ， 山西 太原
Ｅ ２ ／ ４ 、Ｅ ３ ／ ４ ６ 种基因型 ，这６ 种 基因型可 以通过血浆Ｖ Ｌ Ｄ Ｌ 蛋 大脑脂质运输 中起着至关重要 的作用 ，有助于神经元的维护 白等电点聚焦区别。不同的基因型在 ｌ １ ２ 位和１ ５ ８ 位编码 的氨 和 修 复 ，且 死 亡 风 险 随着 年 龄 的增 加 而 增 加 。而 据 此 展 开 的 Ｄ ＿ ｏ Ｅ 等位基因与认知功能的研究表 明大量与长寿有关 的研究 基酸不同，Ａｐ ｏ Ｅ ３ 在１ １ ２ 位是半胱氨酸 ，１ ５ ８ 位精氨酸，Ａｐ ｏ Ｅ ２ Ａ ４ 等位基 因携带者在不 同的年龄阶段认知功能有不 同 均为精氨酸 ，Ａ ｐ ｏ Ｅ ４ 均为半胱氨酸 】 。亚型的氨基酸差异影响 表明 ，￡ 的 表 现 ：年轻的￡ ４ 等 位 基 因携 带 者 在 记 忆 和 其 他 认 知 领 域 了载 脂 蛋 白Ｅ的 结 构 以及 在 疾 病 中 的 作 用 。个 体 间 血脂 水 平 比其 他 人 做 的更 出色 ，到 了 中年 ￡ ４ 等 位 基 因携 带 者 和 非携 带 的差 异 ，有 诸 多 原 因 ，其 ￣Ａ ｐ ｏ Ｅ 等 位 基 因 编 码 的Ａ ｐ ｏ Ｅ 异 构
４ 等 位 基 因 体 与 脂 蛋 白受 体 的亲 和 性 及 其 在 体 内的 代 谢 速 度 不 同 可 能 是 者 在 神 经 系 统 的识 别 有 轻 微 的差 异 ，更 年 长 时 ，￡ 其 中 的一 个 重 要 的原 因『 ４ ］ ，这 也 是 Ａ ｐ ｏ Ｅ 与 动 脉 粥 样 硬 化 的 发 携带者为 了保持认知能力 ，更充分的使用了右额 叶脑 区，最 生 、发展密切关系 的重要基础 。高达７ ５ ％的血浆载脂蛋 白Ｅ 是 后 ，一旦ＡＤ疾病 负担足够 累积 ，认知功能就会 减退 。但 是 由肝 实 质 细 胞 合 成 ，其 他 组 织 器 官 如 大 脑 、脾 、 脂 肪 细 胞 、
《ApoE基因分型检测》
ApoE基因多态性与冠心病：
① ApoE4与高总胆固醇TC 、高低密度脂蛋白胆固醇LDL - C 和高载脂蛋白B ApoB 水平 密切相关&易患动脉硬化、冠心病等&
一个有意思的论坛——在大洋彼岸的美国
我们不禁要问：
① ApoE是什么？ApoE-ε4 等位基因又是什么？
② 携带ApoE-ε4等位基因;真的会使我们有更高的患 病风险吗？
③ 如果有;会增加哪些疾病的患病风险;有科学依据 吗？
④ 如果有;应该可以对相关疾病的用药及饮食做出 指导呢？
⑤ 将ApoE基因分型检测应用在体检市场;能给受检 者带来有价值的好处吗？
载脂蛋白E亚型 ApoE2 ApoE3 ApoE4
突变型Mutant Type 野生型Wild Type 突变型Mutant Type
ApoE 的蛋白结构：
① ApoE是一种由299个氨基残基组成的糖蛋白;其分子量约为34KDa& ② ApoE的三种等位基因编码了三种蛋白质;这三种 ApoE蛋白在第112及158位氨基酸上存在差异;主要是
相关科学研究： ① 阿尔茨海默病Alzheimer’s disease;AD是常见的神经退行性疾病;主要病理特征包括β 淀粉样蛋白β-amyloid;Aβ组成的老年斑和过度磷酸化蛋白组成的神经元纤维缠结 neurof ibri l lar ytangles;NFT& ② 世界阿尔茨海默病2015年报告显示：目前世界范围内估计全球共有约4 600万痴呆患 者;到2050年将达1亿3 150万&有研究2表明ApoE4除了脂质代谢和正常脑功能的维持 以外;还与AD的发生发展密切相关& ③ ApoE4会加重Aβ沉积;产生具有神经毒性的片段;刺激tau蛋白磷酸化以及损害线粒体 功能&总之;ApoE4几乎参与了AD的所有病理改变过程;但其具体机制还有待进一步 探讨;有必要继续深入开展多学科、多层次综合研究&
中国人载脂蛋白E基因分型
中国人载脂蛋白E基因分型
范纯武;唐凤强;赵锐;吴桂宏
【期刊名称】《中国老年学杂志》
【年(卷),期】2004(024)002
【摘要】载脂蛋白E(APOE)存在于多种脂蛋白颗粒中[1]已证实，在Alzheimer病(AD)的病理学变化如老年斑(SP)、神经原纤维结(NFT)、脑血管淀粉样变性中也都有APOE[1]，并且APOE基因型也与AD的发生、发展相关。
为此，本文采用PCR法，对北京地区健康成人进行APOE基因分型，旨在调查该地区人群APOE 基因分型的特点，为AD的防治研究提供资料。
【总页数】1页(P178-178)
【作者】范纯武;唐凤强;赵锐;吴桂宏
【作者单位】电力总医院,北京,100073;电力总医院,北京,100073;电力总医院,北京,100073;电力总医院,北京,100073
【正文语种】中文
【中图分类】Q753
【相关文献】
1.载脂蛋白E基因分型在痴呆诊断中的意义探讨 [J], 王清峰
2.载脂蛋白E基因分型与HCV感染的相关性分析 [J], 王威;马清峰;姚雯;闵晓春
3.脑微出血影像学分类与血浆血管内皮生长因子水平及载脂蛋白E基因分型的关系研究 [J], 白家赫; 于永鹏; 刘丽君; 郑亚利; 李鑫; 谭兰
4.Cog-12量表联合载脂蛋白E基因分型检测对老年人群轻度认知功能障碍的评估
价值 [J], 卢海龙; 周晓兵
5.Cog-12量表联合载脂蛋白E基因分型检测对老年人群轻度认知功能障碍的评估价值 [J], 卢海龙; 周晓兵
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APOE基因分型检测
APOE如何影响AD的发病
Aβ途径
非Aβ途径
1.促进Aβ的生成 2.促进Aβ的聚集 3.抑制Aβ清除
促进Tau磷酸化
Aβ途径
1. E4等位基因能够促进Aβ的产生，而E2
等位基因则通过抑制APP的内吞作用，
而抑制Aβ的产生。
2. E4等位基因促进Aβ聚集并抑制Aβ清
除。
1.Ye S, Huang Y, Mullendorff K, et al. Apolipoprotein (apo) E4 enhances amyloid β peptidls: apoE structure as a potential therapeutic target. Proc. Natl.Acad. Sci. USA. 2005; 102:18700–5.
APOE的SNPs
Apoe既然在编码区存在13个SNPs位点， 那E2、E3、E4的其他位点的碱基是一 样的还是存在SNPs呢？
Minihane A M, Jofremonseny L, Olanomartin E, et al. ApoE genotype, cardiovascular risk and responsiveness to dietary fat manipulation.[J]. Proceedings of the Nutrition Society, 2007, 66(2):183-97.
二、临床检测意义
近年来研究发现，ApoE基因多态性与冠心病(coronary heart disease,CHD)、高脂血症、高血压（文献阅读发现，在老年人中apoe基因分 型与高血压的相关性很难明确）、动脉粥样硬化、脑梗塞、Alzheimer病(AD) 等疾病有着密切的关系，因此进行APOE的基因分型检测对疾病的预防和治疗 具有重要意义。
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载脂蛋白E 基因型分型方法研究钱士匀 覃 西 王丹妹(海南医学院附属医院检验科) 海口 570102 摘要 目的:为调查海南省老年性痴呆患者载脂蛋白E (Apo E )基因频率,建立一种简便、快速、准确的人载脂蛋白E 基因型检测方法。
方法:应用碘化钠法提取模板DNA ,聚合酶链反应(PCR )特异性扩增Apo E 基因含112位和158位氨基酸的基因序列,扩增产物用限制内切酶Hha I 酶切,聚丙烯酰胺凝胶电泳后,观察酶切位点的限制性片段长度多态性(RFIP)图谱。
结果:碘化钠法提取模板DNA 与经典法无差异;运用PCR -RFIP 法检测30名健康人Apo E 基因型,实验成功。
结论:该方法简单、快速、准确,适合于一般实验室开展Apo E 基因型调查。
关键词 载脂蛋白E 类;聚合酶链反应;限制性片段长度多态性;基因型分类号 Q 783.1METHODOLOGY FOR APOLIPOPROTEIN E GENOTYPINGQian Shiyun,Qin Xi,Wang Danmei(T he Centr al La bo rat or y,Affiliated Ho spital o f Hainan M edical co llege ) Haikou 570102 ABSTRAC T Objectiv e :T o establish a simple ,im mediate and accurate m ethod fo r apolipoprotein E (Apo E )g enoty ping in patients w ith Alzheim er 's dem entia in Hainan Pro vince .M ethod :The tem-plate DNA w as collected with the NaI method.Apo E gene sequences containing amino acid positions 112and 158w ere amplified for electr ophor esis on poly acrylam ide gels by polym erase chain r eaction (PCR ).The patter ns of restriction fragm ent leng th poly morphism o f Apo E gene w ere distinguished .Results:T he NaI m ethod show ed no difference as com pared w ith the classical metho d for collecting tem plate DNA.T hus,Apo E g enoty ping by PCRRfip w as carried o ut w ith success in 30healthy indi-viduals .Conclusion :T he metho d is considered to be sim ple ,imm ediate ,and accur ate fo r Apo E g eno-ty ping in ordinary labo rato ries .Key words Apo lipoprotein E;PCR;restriction fragm ent length po lymo rphism ;genotype 载脂蛋白E (Apo E )是一种富含精氨酸的碱性蛋白质,Apo E 在脂类代谢中起着重要的作用,Uterman [1]等1975年首先报道了Apo E 存在的3种异构体,即E 2,E 3,E 4,3种异构体分别由3个共显性等位基因E 2、E 3、E4所决定,3种常见的等位基因可产生6种不同的基因型:E 2/2、E 3/2、E 4/3、E3/3、E 4/3及E 4/4。
近年来研究发现Apo E 等位基因与冠心病、动脉粥样硬化、迟发性家族性Alzheimer 病及脂质代谢紊乱密切相关,Apo E 多态性的研究目前是医学热门研究项目,Apo E 表型和基因型的研究方法众多[2～4],本文采用聚合酶链反应限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术,测定Apo E 基因型,为调查分析人群Apo E 基因型及等位基因频率分布提供一种快速、简便、准确的检测手段。
1 材料与方法1.1 对象健康成人30例,经体检,无心血管及脂代谢有106海南医学院学报 1999,5(3):97～101Journal of H ainan M edical Colleg e5卷关疾病,男性21名,女性9名,年龄42～61岁,平均年龄49.6岁。
1.2 试剂TaqDNA 聚合酶,dNTPs,DNA 片段长度标准物,Hha Ⅰ酶均由湖北维科公司提供的MBI 产品,其余试剂均为分析纯。
其引物序列为:P 1:5’-AACAACT GACCCCGGT GGCG -3’;P 2:5’-AT GGCGCTGAGGCCGCGCTC-3’;特异性扩增Apo E 基因第4外显子区含编码112位与158位氨基酸的基因序列,产物片段为292bp 。
1.3 模板DNA 提取取全血100L l 加无菌双蒸水100L l 混匀,加6mol/L NaI 200L l 涡旋震荡30s,加等体积氯仿/异戊醇(24∶1),涡旋震荡30s,离心后取上清加0.6体积异丙醇混匀,室温静置15min ,离心后沉淀以37%异丙醇洗1次,晾干后溶于TE (T ris 1mol/L,EDT A 0.1M ol/L,pH 7.6)液中,提取的DNA 经紫外分光光度计定量后,置-20℃保存备用。
1.4 PCR 扩增0.5m l 扩增管内加入扩增缓冲液;dNTPs,引物P 1、P 2及模板DNA 。
置热循环仪(PE 480型,Perkin-Elmer cetus)中的95℃预变性12m in 后,再加入T aqDNA 聚合酶2U 。
然后按下列程序循环35次,即94℃变性1m in ,65℃退火1m in ,72℃延伸1.5min ,最后于72℃再延伸10min 。
取产物10L l 经2%琼脂糖凝胶电泳,溴化乙啶(EB)染色,以DNA Markers 为标准参考物,紫外灯下观察扩增结果,无非特异性条带出现。
1.5 PCR 产物的限制性酶切吸取扩增物于另1试管,加入Hha I 酶1L l (10U /L l ),充分混匀,置扩增仪内,37℃4h ,反应终止后,酶切产物经10%聚丙烯酰胺凝胶电泳,EB 染色35min,以DN A M arkers 为标准参考物,紫外灯下观察结果。
2 结 果Apo E DNA 经PCR 扩增后,其产物经2.0%琼脂糖凝胶电泳,在紫外灯下观察292bp 处有一明显的条带,与标准DNA M ar kers 比较,无非特异性区带出现。
扩增产物经限制性酶切后,于10%聚丙烯酰胺凝胶电泳显示出Apo E 基因型的片段,见图1。
7为PCR 产物(292bp ),M 为M ar kers ,1-6分别为基因型图1 A po E 基因扩增产物HhaI 酶切后图谱 Apo E 基因型判定参照Richar d [5]方法,E 2/E 2为91、83、38bp 3条区带;E 3/E 3为91、48、38bp 3条区带;E 4/E 4为72、48、38bp;E 2/E 3为91、83、48、38bp 4条区带;E 2/E 4为91、83、72、48、38bp 5条区带;E 3/E 4为91、72、48、38bp 4条区带,30份血样中仅检出1例E 2/E 2基因型,共检出6种基因型。
3 讨 论Apo E 结构基因位点存在多态性,其多态性的分子基础是112位点上半胱氨酸T GC (Cys)和158位点上的精氨酸CGC (Arg )互换,其DNA 序列分别为T GC 和CGC ,本试验用特异性的引物进行扩增,包含上述2位点DNA 序列,扩增产物为292度bp,产物进一步用Hha I 酶切,因Hha I 酶可特异性识别GCGC 序列,故可识别A rg 位点DNA 序列,而不能识别Cys 位点DNA 序列,由于扩增产物GCGC -GT GC 2位点的差异,酶切后可产生不同的限制性片段长度多态性E 2、E 3、E 4,并由此产生6种不同的基因型,早期Apo E 基因型分析方法有超速离心法、IEF 法、I-GBlot 法、IEF-PAGE 法等,但由于上述方法均存在有操作复杂、费时费力且成本过高或结果不稳定等问题,较难在普通实验室开展,本文参照国内外文献[6～8]在普通实验室内运用PCR-RFLP 方法,特异性扩增Apo E 结构基因第4外显子区域含编码112位点和158位点,氨基酸的基因序列,扩增产物用HhaI 酶切,酶切产物经聚丙烯酰胺凝胶电泳后,即可观察不同107 3期钱士匀等.载脂蛋白E 基因型分型方法研究基因酶谱,30例血样检出图谱与文献报道相符。
该方法检测Apo E 基因型的重要环节之一,是模板DNA 的制备,通常实验室均选择经典法提取模板DNA ,但经典法操作复杂且饱和酚的制备与保存均较困难,给实验室工作带来一定难度,本文所使用的碘化钠法试剂易得,操作简单无需特殊设备,与经典法比较,模板提取时间大大缩短,且与经典法一致,易于在普通实验室使用。
本方法的建立对研究人群Apo E 基因及基因型在脂类代谢中的作用及与各类疾病的关系提供了一个简便、快速、准确的基因型分析方法。
参考文献1 U terma n G .,K inder mann L .A polipopr oteitn Epheno -ty pes and hyperlipidemia.Hum G enet,1984,65:2322 M enzel HJ .A polipopr otein E po ly mor phism and co ro -nar y a rter ial disease.A rter io scler osis,1983,3:3103 Blair , F.A po lipo pro tein Eg enoty ping using t he Po ly -mer ase cha in r eactio n and allele-specific o ligo nucleo tidprimer .J .L ipid Res ,1991,32:1834 W ersg raber ,K ,H.Human heter og enity.Cy steine in-ter echang es in the amino acid sequence of apo E iso -fom s.J.L ipid Res,1981,256:90775 Richar d P.,T homas G.,de Zulueta M P.,et al.Co m-mo n and r are g enoty pes o f human apolipopr otein E de-t ermined by specific r estr ictio n pr ofiles of poly merase chain r eactio n -am -plified DN A .Clin Cham ,1994,40:246 鄢盛恺,周新.聚合酶链反应限制性片段长度多态性检测载脂蛋白E 基因型.中华医学检验杂志,1997,1:287 顾桂玲,王群.载脂蛋白E 基因型分型方法.中华医学检验杂志,1998,4:2208 Lpparev V N.,Cantas M A.,M o nken CE.,et al.A nefficient and simple metho d of DN A ex tr actio n fro m who le bolld and cell line to identif y infectio ns agents .J Vivr ol M etho ds,1990,34:105(1999-06-01收稿)会阴侧切形成血肿1例罗 鸣(海南省妇幼保健院) 海口 570102 关键词 会阴切开术;血肿;病例报告 患者,32岁,因“孕1产。