淀粉酶(AMS)检测试剂盒(碘-淀粉比色法)

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实验九碘淀粉比色法测定血清淀粉酶

实验九碘淀粉比色法测定血清淀粉酶
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注意事项
酶活性在400U以下时,与底物的水解量成 线性。如测定管吸光度小于空白管吸光度一 半时,应加大血清稀释倍数或减少稀释血清 加入量,测定结果再乘以稀释倍数。
草酸盐、拘橼酸盐、EDTA-Na2及氟化钠对 AMY活性有抑制作用,肝素无抑制作用。
唾液含高浓度淀粉酶应防止带入。 淀粉产品不同,其空白吸光度可有明显差异,
实验九碘淀粉比色法测 定血清淀粉酶副本
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原理
血清(或血浆)中α-淀粉酶催化淀粉分子中 α-1,4糖苷键水解,产生葡萄糖、麦芽糖 及含有α-1,6糖苷键支链的糊精。在底物 过量的条件下,反应后加入碘液与未被水解 的淀粉结合成蓝色复合物,其蓝色的深浅与 未经酶促反应的空白管比较,从而推算出淀 粉酶的活力单位。
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计算
1、单位定义: 100ml血清(浆)中的AMS, 在37℃与底物作用15分钟,水解5mg淀粉 为1个单位。
2、公式:
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样本最佳取样浓度摸索
根据不同动物血清及组织之间的差异,最好 是在批量实验之前做个预试以确定最佳取样 浓度。 例1:取大鼠血清用生理盐水稀释成不同浓 度(2倍、4倍、8倍、16倍、32倍、64倍、 128倍、256倍),取样0.1ml进行检测
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试剂 操作步骤 计算 参考值
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试剂
1、0.4mg/ml底物缓冲Fra bibliotek:4℃冰箱保存6 个月。
2、0.1mol/L碘贮备液:4℃避光保存6个 月。
0.01mol/L碘应用液的配制: 将碘贮备液: 蒸馏水=1︰9稀释,现用现配4℃避光保存。
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操作步骤
混匀,660nm波长,1cm光径,蒸馏水调零,测各管吸光度。 *注:不同样本批量测试前需要做预实验,确定最佳取样浓度,将 (空白OD-测定OD)控制在0.05~0.150之间

淀粉酶活力的测定方法

淀粉酶活力的测定方法

淀粉酶活力的测定方法淀粉酶是一类能够催化淀粉水解的酶,在生物体内和工业生产中都具有重要的作用。

准确测定淀粉酶的活力对于研究酶的性质、生物体的代谢过程以及相关工业应用都具有重要意义。

下面将介绍几种常见的淀粉酶活力测定方法。

一、碘淀粉比色法碘淀粉比色法是一种较为经典且常用的测定方法。

其原理是淀粉经淀粉酶水解后,剩余的淀粉与碘液反应生成蓝色复合物,颜色的深浅与剩余淀粉的量成正比。

通过比色法测定反应后溶液的吸光度,即可计算出淀粉酶的活力。

具体操作步骤如下:首先,准备一系列含有不同浓度淀粉溶液的试管,并向其中加入适量的淀粉酶溶液,在一定的温度和 pH 条件下反应一段时间。

然后,迅速向各试管中加入碘液,使反应终止。

最后,使用分光光度计在特定波长下测定各试管溶液的吸光度。

根据事先绘制的标准曲线,将吸光度值转换为剩余淀粉的浓度,从而计算出淀粉酶水解淀粉的量,进而得出淀粉酶的活力。

这种方法的优点是操作相对简单、成本较低,但缺点是灵敏度相对较低,对于低活力的淀粉酶测定可能不够准确。

二、DNS 法(3,5-二硝基水杨酸法)DNS 法是另一种常用的测定淀粉酶活力的方法。

其原理是淀粉在淀粉酶的作用下水解为还原糖,还原糖能与 3,5-二硝基水杨酸在碱性条件下共热,被还原成棕红色的氨基化合物。

在一定范围内,还原糖的生成量与淀粉酶的活力成正比,通过比色测定棕红色物质的吸光度,即可计算出淀粉酶的活力。

操作过程如下:将淀粉溶液与淀粉酶溶液在适宜条件下反应一定时间后,取出适量反应液,加入DNS 试剂,在沸水浴中加热一段时间,使反应充分进行。

冷却后,使用分光光度计测定溶液在特定波长下的吸光度。

与碘淀粉比色法相比,DNS 法的灵敏度较高,能够更准确地测定低活力的淀粉酶,但操作过程相对复杂一些。

三、斐林试剂法斐林试剂法也是基于淀粉水解产生还原糖的原理。

斐林试剂由硫酸铜和酒石酸钾钠的氢氧化钠溶液组成,还原糖能将斐林试剂中的二价铜离子还原为一价铜离子,生成砖红色的氧化亚铜沉淀。

淀粉酶含量测定

淀粉酶含量测定

淀粉酶(AMS)测定试剂盒说明书(碘-淀粉比色法)一、 原理:淀粉酶能水解淀粉生成葡萄糖、麦芽糖及糊精,在底物浓度已知并且过量的情况下,家人碘液与未水解的淀粉结合生成蓝色复合物,根据蓝色的深浅可推算出水解的淀粉量,从而计算出AMS 的活力。

二、 试剂组成与配制:(100T )1、0.4mg/ml 底物缓冲液:60ml ×1瓶,4℃冰箱保存6个月。

2、0.1mol/L 碘贮备液:7ml ×1瓶,4℃避光保存6个月。

0.01mol/L 碘应用液的配制:将碘贮备液:蒸馏水=1:9稀释,现用现配4℃避光保存。

三、 操作表: 测定管(u 管) 空白管(0管)底物缓冲液(ml )37℃预温5分钟0.5 0.5 待测样本(ml ) 0.1混匀,37℃水浴,准确反应7.5分钟 碘应用液(ml ) 0.5 0.5蒸馏水(ml )3.0 3.1 混匀,660nm 波长,1cm 光径,蒸馏水调零,测各管吸光度。

*注:不同样本批量测试前需要做预实验,确定最佳取样浓度,将 (空白OD-测定OD 控制在0.05~0.150之间) 四、 计算:1、 单位定义:100ml 血清(浆)中的AMS ,在37℃与底物作用30分钟,水解10mg 淀粉为1个单位。

2、公式:样本测试前稀释倍数空白管吸光度测定管吸光度空白管吸光度样本测试前稀释倍数分钟分钟空白管吸光度测定管吸光度空白管吸光度⨯⨯-=⨯⨯⨯⨯⨯-=801.01005.730105.04.0dl AMSu(此公式适用于测定血清中淀粉酶)血清淀粉酶的含量测定一、实验准备:1、实验器材:移液枪(100~1000ul、10~100ul、1000~5000ul、2~20ul)、5mlEP管、0.5mlEP管、比色皿、100ml烧杯、漩涡仪、水浴箱,分光光度计、计时器。

2、实验药品:NaCl、蒸馏水、0.4mg/ml底物缓冲液、0.1mol/L碘贮备液。

二、实验步骤:1、0.01mol/L碘应用液的配制:将碘贮备液:蒸馏水=1:9稀释,现用现配4℃避光保存。

两种方法血液淀粉酶检测结果比较

两种方法血液淀粉酶检测结果比较
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α-淀粉酶检测试剂盒(速率法)产品说明书

α-淀粉酶检测试剂盒(速率法)产品说明书

α-淀粉酶检测试剂盒(速率法)说明书[产品名称] 通用名称:α-淀粉酶检测试剂盒(速率法)英文名称:α-Amylase Aassay Kit(α-Amy)[包装规格] R:2×20ml;R:3×20ml;R:6×20ml;R:6×60ml;R:4×25ml。

[预期用途] 用于体外定量检测人血清中的α-淀粉酶的活力。

[检验原理]α-AMYGal-G2-α-CNP Gal-G2 + CNPCNP(2-氯-4-硝基苯酚)的生成在波长405nm处吸光度上升,上升的速率与α-AMY活力成正比。

[主要组成成份]由试剂R组成。

试剂R:2-氯-4-硝基苯-α-半乳糖-麦芽糖苷(Gal-G2-α-CNP)、三羟甲基氨基甲烷(Tris)缓冲液。

[储存条件及有效期] 试剂盒在2℃~8℃、无腐蚀性气体条件下避光储存,有效期为12个月,开瓶后2℃~8℃条件下保质期30天。

备注:生产日期及失效日期见外盒或瓶标签。

[适用仪器]日立7170、奥林巴斯AU640、贝克曼LX-20全自动生化分析仪。

[样本要求]使用新鲜的非溶血血清。

[检验方法](1)单试剂无需配制,直接使用。

(2)试验条件:样本(S):5 µl 试剂 (R) :250 µl 温度:37 ℃测定类型:速率法主波长:405 nm 副波长:660nm 反应方向:上升方法:先将样本与R1混合,37 ℃测定2分钟至4分钟之△A/min 。

0 2 4 10 (反应时间:10min)37℃样本:5 µlR:250 µl(3)校准程序:每天进行试剂空白测试。

(4)质量控制程序:选用适当的质控品进行质量控制。

各实验室建立各自的质控频率和可接受范围值。

当测定结果超出可接受范围时,有必要采取相应措施。

(5)计算△A / min × Vt × 1000 △A/ min × 0.255 × 1000α-AMY(U/L)= ————————————— = ———————————————— Lp ×ε× Vs 1.0 × 13.4 × 0.005= △A / min × 3806Vt:反应总体积 0.255 mlVs:样品体积 0.005 mlε:摩尔吸光系数13.41000:将 U/ml 转换成了U/LLp:比色光径(1.0 cm)[参考区间] 血清:< 220 U/L (建议各实验室建立自己的正常参考范围。

淀粉酶(AMS)的标准操作程序

淀粉酶(AMS)的标准操作程序

淀粉酶(AMS)的标准操作程序【目的】指导血及尿液淀粉酶(AMS)试验操作。

【该SOP文件变动程序】本标准操作程序的变动,可由任一使用本SOP的工作人员提出,请专业组长及科主任签字后生效。

【原理】血清或尿液中的а-淀粉酶催化淀粉分子的а-1,4葡萄糖苷键水解,产生葡萄糖,麦芽糖及а-1,6糖苷键支链的糊精。

在底物充分(已知浓度)的条件下,反应加入的碘液与未被水解的淀粉结合生成蓝色复合物,其颜色的深浅与未经酶促反应的空白比较其吸光度,从而推算出淀粉酶的活力单位。

【试剂】1.0.4g/L缓冲淀粉溶液上海捷门生物技术合作公司生产2.0.2mol/L碘贮存液上海捷门生物技术合作公司生产临用时配置碘应用液:100ul碘贮存液加1ml蒸馏水稀释。

【操作步骤】1.稀释尿液:50ul尿液加入到1ml生理盐水2.按下表操作:加入物(ul)测定管1 测定管2 空白管血清 10 -- --稀释的尿液 -- 50 --预温的缓冲淀粉溶液 500 500 500混匀,置37℃水浴7.5分钟(准确)将上述管混匀,用660nm波长,10mm光径比色杯,蒸馏水调零,读取各吸光度。

【计算】单位定义:100 ml血清中的淀粉酶在37℃条件下,15分钟水解5mg淀粉未1个单位。

计算公式:血:空白管——测定管×800空白管尿:空白管——测定管×3360空白管【参考区间】血清:40—200淀粉酶单位尿液:100—1200淀粉酶单位【临床意义】淀粉酶主要由胰腺和唾液腺分泌。

患流行性腮腺炎,急性胰腺炎时血和尿的AMS显著增高。

急性胰腺炎发病的8—12小时时AMS开始升高,12—14小时达到高峰,2—5天下降至正常。

如超过500单位,既有诊断意义。

达350单位应怀疑此病。

急性阑尾炎,肠梗阻,胰腺癌,胆石症,溃疡病穿孔以及吗啡注射后等均使AMS升高,但常低于500单位。

血清及尿AMS同时降低,见于肝病疾病。

淀粉酶分子量约50000,可通过肾小球滤出。

南京建成生物工程研究所价目表

南京建成生物工程研究所价目表

南京建成生物工程研究所价目表南京建成生物工程研究所价目表二○○四年七月一、抗氧化检测试剂及科研试剂:(注:**为新试剂盒)序号产品名称规格单位检测方法售价厂家A001 超氧化物歧化酶(SOD)测试盒100T 盒羟胺法240.00 建成50T 盒羟胺法130.00 建成A003 丙二醛(MDA)测试盒100T 盒TBA法150.00 建成50T 盒TBA法90.00 建成A002 黄嘌呤氧化酶(XOD)测试盒50T 盒比色法130.00 建成A015 总抗氧化能力(T-AOC)测试盒50T 盒比色法120.00 建成25T 盒比色法70.00 建成A018 羟自由基测试盒50T 盒比色法150.00 建成A052 超氧阴离子自由基(O )测试盒50T 盒比色法130.00 建成A044 髓过氧化物酶(MPO)测试盒50T 盒比色法160.00 建成A007 过氧化氢酶(CAT)测试盒紫外分光光度法100T 盒紫外比色法100.00 建成可见光分光光度法100T 盒钼酸铵法100.00 建成A064 过氧化氢(H2O2)测试盒50T 盒比色法50.00 建成A004 谷胱甘肽—S转移酶(GSH—ST)测试盒80T 盒比色法200.00 建成A005 谷胱甘肽—过氧化物酶(GSH—PX)测试盒50T 盒比色法200.00 建成A062 谷胱甘肽-还原酶(GR)测试盒50T 盒比色法200.00 建成A006 还原型谷胱甘肽(GSH)测试盒50T 盒比色法180.00 建成A061 氧化型谷胱甘肽(GSSG) 测试盒50T 盒比色法180.00 建成A063 巯基(-SH)测试盒50T 盒比色法180.00 建成A034 单胺氧化酶(MAO)测试盒50T 盒紫外比色法150.00 建成A012一氧化氮(NO)测试盒(硝酸还原酶法) 50T 盒比色法300.00 建成25T 盒比色法180.00 建成A013 一氧化氮(NO)测试盒(化学法测NO2—)100T 盒比色法150.00 建成A014 -1 一氧化氮合成酶(NOS)测试盒[(T-NOS、iNOS、cNOS)三型同时出结果] 50T 盒比色法480.00 建成25T 盒比色法260.00 建成A014-2 一氧化氮合成酶(NOS)测试盒[总NOS(T-NOS)] 50T 盒比色法350.00 建成25T 盒比色法200.00 建成A019-1 乳酸(LD)测试盒(测全血)50T 盒紫外比色法240.00 建成50T 盒可见光比色法240.00 建成A019-2 乳酸(LD)测试盒(测血清、组织)50T 盒比色法200.00 建成A020 乳酸脱氢酶(LDH)测试盒100T 盒比色法240.00 建成50T 盒比色法130.00 建成A016-1 A TP酶测试盒(组织及细胞膜需高速离心)(可测Na+K+、Ca2+Mg2+ ATPase) 100T 盒比色法240.00 建成50T 盒比色法150.00 建成A016-2 A TP酶测试盒(组织及细胞膜不需高速离心)(可测Na+K+、Ca2+Mg2+ ATPase) 100T 盒比色法300.00 建成50T 盒比色法180.00 建成A057 Cu-A TP酶(Cu-A TPase)测试盒100T 盒比色法300.00 建成50T 盒比色法180.00 建成序号产品名称规格单位检测方法售价厂家A069 氢-钾A TP酶(H+-A TPase)测试盒100T 盒比色法300.00 建成50T 盒比色法180.00 建成A070-1 超微量A TP酶测试盒(可测Na+K+、Ca2+Mg2+ A TPase、总ATPase)200T 盒比色法390.00 建成100T 盒比色法230.00 建成A070-2 超微量A TP酶测试盒(可测总A TPase)100T 盒比色法300.00 建成50T 盒比色法180.00 建成A021 苹果酸脱氢酶测试盒50T 盒紫外比色法面议建成A022 琥珀酸脱氢酶测试盒50T 盒比色法240.00 建成A032 肌酸激酶(CK)测试盒50T 盒比色法180.00 建成A023 胆碱酯酶(CHE)测试盒50T 盒比色法70.00 建成A024 乙酰胆碱酯酶(T-CHE)测试盒50T 盒比色法150.00 建成A025 丁酰胆碱酯酶测试盒50T 盒比色法150.00 建成A027 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PD)测试盒50T 盒比色法100.00 建成A031 b-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG)测试盒50T 盒比色法260.00 建成A053 β-葡萄糖醛酸苷酶测试盒50T 盒比色法200.00 建成A055** 红细胞NADH高铁血红蛋白还原酶测试盒50T 盒比色法260.00 建成A059 碱性磷酸酶(AKP)测试盒50T 盒比色法100.00 建成A060 酸性磷酸酶(ACP)测试盒50T 盒比色法130.00 建成A049 前列腺酸性磷酸酶(PACP)测试盒50T 盒比色法180.00 建成A058 抗酒石酸酸性磷酸酶(StrACP)测试盒50T 盒比色法180.00 建成A068 钙调神经磷酸酶(CaN)测试盒25T 盒比色法200.00 建成A072 全血2,3-二磷酸甘油酸(2,3-DPG)测试盒50T 盒比色法面议建成A047 谷氨酰胺合成酶(GS)测试盒50T 盒比色法300.00 建成A048 腺苷脱氨酶(ADA)测试盒50T 盒比色法130.00 建成A073** 谷氨酰胺测试盒50T 盒比色法200.00 建成A074** 谷氨酸测试盒50T 盒比色法260.00 建成A075** 谷氨酰胺、谷氨酸(两种均可测)50T 盒比色法480.00 建成A076** 丙酮酸激酶(PK)测试盒50T 盒比色法面议建成A077** 己糖激酶(HK)测试盒50T 盒比色法面议建成A036 唾液酸(SA)测试盒(带SA标准) 50T 盒比色法200.00 建成A017-1 细胞凋亡测试盒(TdT酶、稀释液、POD)10片盒TUNEL法1450.00 建成A017-2 细胞凋亡测试盒(TdT介导的原位末端切口平移双标记法)(全套)10片盒TUNEL法1850.00 建成A008 维生素E(VE)测试盒50T 盒比色法130.00 建成A009 维生素C(VC)测试盒50T 盒比色法150.00 建成A010 维生素B1(V B1)测试盒50T 盒比色法面议建成A011 维生素B2(V B2)测试盒50T 盒比色法面议建成A026 总氨基酸(T—AA)测试盒80T 盒比色法100.00 建成A030-1 羟脯氨酸测试前处理试剂消化液50T 瓶比色法100.00 建成调PH试剂50T 瓶比色法70.00 建成A030-2 羟脯氨酸(Hyp)测试盒(可测血清、培养液、尿液、心肌、皮肤、软骨、肝脏等等)50T 盒比色法180.00 建成A041 5’-核苷酸酶(5’-NT)测试盒50T 盒比色法150.00 建成A035 D—木糖测试盒50T 盒比色法100.00 建成A056 糖化血红蛋白(GHb)测试盒15T 盒比色法55.00 建成A037 糖化血清蛋白(GSP)测试盒(果糖胺法)(带标准)50T 盒比色法150.00 建成25T 盒比色法80.00 建成A043 肝/肌糖元测试盒50T 盒比色法160.00 建成A038 脂蛋白(a)[LP(a)]测试盒96T 盒ELISA法380.00 建成A054 脂肪酶测试盒50T 盒比色法200.00 建成A067 总脂酶【脂蛋白脂酶(LPL)/肝脂酶(HL)】测试盒100T 盒比色法300.00 建成50T 盒比色法160.00 建成A042 游离脂肪酸(NEFA)测试盒50T 盒比色法160.00 建成A033 脂褐质测试盒50T 盒荧光比色法100.00 建成A039 血清铁测试盒50T 盒比色法100.00 建成A040 总铁结合力(TIBC)测试盒50T 盒比色法180.00 建成A029 铜兰蛋白(CP)测试盒50T 盒比色法150.00 建成A071 微量游离血红蛋白测试盒50T 盒比色法80.00 建成A028 白蛋白测试盒(溴甲酚绿法)100T 盒比色法30.00 建成A045-1 总蛋白定量测试盒(双缩脲法)100T 盒比色法30.00 建成A045-2 总蛋白定量测试盒(考马斯亮兰法)100T 盒比色法30.00 建成A046 蛋白标准品(总蛋白、白蛋白) 1ml 支7.00 建成A050-1 溶菌酶(LZM)测试盒(带标准)30T 盒试管比浊法60.00 建成A050-2 溶菌酶(LZM)测试盒(带标准)30T 盒平板法60.00 建成A050-3 溶菌酶标准品2mg 支6.00 建成A050-4 微球菌粉30mg 支40.00 建成A065 解脲(溶脲)支原体快速培养基(UU培养基)每人份支培养基10.00 建成A066 人型支原体快速培养基每人份支培养基10.00 建成A051-1 肝素溶液10ml 支20.00 建成A051-2 肝素抗凝管10ml 支2.00 建成二、不孕症系列酶免疫试剂:序号产品名称规格单位检测方法售价厂家B001 抗心磷脂抗体测试盒(ACL)IgG类48T 盒ELISA 160.00 建成抗心磷脂抗体测试盒(ACL)IgA类48T 盒ELISA 160.00 建成抗心磷脂抗体测试盒(ACL)IgM类48T 盒ELISA 160.00 建成B002 抗精子抗体测试盒(AsAb)IgG类48T 盒ELISA 160.00 建成抗精子抗体测试盒(AsAb)IgA类48T 盒ELISA 160.00 建成抗精子抗体测试盒(AsAb)IgM类48T 盒ELISA 160.00 建成B003 抗子宫内膜抗体测试盒(EmAb)IgG类48T 盒ELISA 260.00 建成抗子宫内膜抗体测试盒(EmAb)IgA类48T 盒ELISA 260.00 建成抗子宫内膜抗体测试盒(EmAb)IgM类48T 盒ELISA 260.00 建成B004 抗卵巢抗体测试盒(AoAb)IgG类48T 盒ELISA 260.00 建成抗卵巢抗体测试盒(AoAb)IgA类48T 盒ELISA 260.00 建成抗卵巢抗体测试盒(AoAb)IgM类48T 盒ELISA 260.00 建成三、常用试剂:序号产品名称规格单位检测方法售价厂家C001 钾(K)测试盒(带标准)30T 盒比色法(上机)45.00 建成30T 盒比浊法(手工)35.00 建成C002 钠(Na)测试盒(带标准)30T 盒比色法(上机)45.00 建成30T 盒比浊法(手工)35.00 建成C003 氯(Cl)测试盒(带标准)30T 盒比色法(上机)45.00 建成30T 盒比色法(手工)28.00 建成C004 钙(Ca)测试盒(带标准)30T 盒比色法(上机)40.00 建成30T 盒比色法(手工)30.00 建成C006 磷(Pi)测试盒(带标准)100T 套孔雀绿显色39.00 建成A059 碱性磷酸酶(AKP)测试盒50T 盒比色法100.00 建成A060 酸性磷酸酶(ACP)测试盒50T 盒比色法130.00 建成C009 谷丙转氨酶(SGPT)测试盒100T 盒比色法30.00 建成C010 谷草转氨酶(SGOT)测试盒100T 盒比色法30.00 建成C018 总胆红素、直接胆红素测试盒80T 套咖啡因比色法65.00 建成80T 套一步法65.00 建成C017 Υ—谷氨酰转移酶(Υ—GT)测试盒100T 套比色法88.00 建成C020 尿胆红素测试盒50T 套哈里森氏法25.00 建成C033 尿胆原测试盒50T 套25.00 建成C013 尿素氮(BUN)测试盒100T 套脲酶比色法36.00 建成100T 套二乙酰-肟比色法27.00 建成C016 淀粉酶(AMS)测试盒100T 套淀粉一碘比色法39.00 建成C012 尿酸测试盒50T 套比色法40.00 建成C011-1 肌酐(Cr)测试盒(苦味酸法)100T 套比色法(除蛋白)60.00 建成C011-2 肌酐(Cr)测试盒(苦味酸法)100T 套比色法(不除蛋白)40.00 建成C021 血红蛋白稀释液(测试液)5ml 支HICN比色法4.50 建成C022 血红蛋白标准品5ml×4支套比色法12.00 建成C023 血红蛋白校正液250ml 瓶比色法35.00 建成100ml 瓶比色法14.00 建成C024 血小板稀释液(计数液)100ml 瓶8.00 建成C025 白细胞稀释液(计数液)100ml 瓶8.00 建成C037 红细胞稀释液(计数液)100ml 瓶8.00 建成C026 血细胞仪清洗液250ml 瓶25.00 建成C028 CO2结合力测试盒2ml×3×10 套滴定法40.00 建成C034 脑脊液蛋白测试盒50T 盒磺基水杨酸法50.00 建成C038 血沉测试液100ml 瓶10.00 建成C039 嗜酸粒细胞直接计数液40ml×1 瓶50.00 建成C040 网织红细胞计数液8 ml×2 套试管法30.00 建成10 ml×1 瓶玻片法20.00 建成C035-1 尿蛋白定性测试盒100T 盒磺基水杨酸法30.00 建成C035-2 尿蛋白定量测试盒100T 盒CBB法30.00 建成C041 尿糖试剂100ml 瓶班氏法40.00 建成C027 尿粪隐血测试盒100T 套联苯胺法15.00 建成100T 套邻联甲苯胺法15.00 建成A051-1 肝素溶液10ml 支20.00 建成A051-2 肝素抗凝管10ml 支2.00 建成四、染液类序号产品名称规格单位检测方法售价厂家D001 碱性磷酸酶染液50片套染色50.00 建成D002 酸性磷酸酶染液50片套染色50.00 建成D003-1 酸性酯酶染液5.0ml×4 盒染色50.00 建成D003-2 中性酯酶染液5.0ml×4 盒染色50.00 建成D003-3 碱性酯酶染液5.0ml×4 盒染色50.00 建成D003-4 双重酯酶染液5.0ml´4 盒染色60.00 建成D009 快速血细胞染液50ml×2 套染色40.00 建成D004 糖元染液10ml×4 盒染色40.00 建成D005 苏木素染液50ml×1 瓶染色40.00 建成D019 伊红染液100ml×1 套染色50.00 建成D006 H-E染液套染色55.00 建成D007 瑞氏染液50ml×2 套染色40.00 建成D010 瑞氏一姬姆萨复合染液50ml×2 套染色40.00 建成D011 姬姆萨染液套染色30.00 建成D015 巴氏染液(脱落细胞染色)套染色50.00 建成D017 快速H-E组织细胞及脱落细胞染液10ml×4 染色20.00 建成D008 革兰氏染液50ml×4 套染色50.00 建成D012 抗酸染液50ml×2 套染色40.00 建成D013 溴酚兰溶液1.0ml 支染色10.00 建成D014 溴乙淀溶液1.0ml 支染色20.00 建成D016 细胞活性鉴别染液20ml 瓶伊文斯蓝法20.00 建成D018 血管通透性测试染液20ml 瓶美蓝法20.00 建成D020** 过氧化物酶染液5ml 套染色20.00 建成五、各种浓度及PH值的缓冲液:(注: 以下缓冲液PH值、摩尔浓度按客户要求配制。

淀粉酶测定的临床常用方法

淀粉酶测定的临床常用方法

淀粉酶测定的临床常用方法
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淀粉酶测定临床常用方法简要流程:
血清淀粉酶测定:①样本采集:抽取患者静脉血;②酶促反应:采用碘-淀粉比色法、对-硝基苯麦芽七糖苷法或2-氯-4-硝基苯麦芽三糖苷法等,使样本中淀粉酶与特定底物反应;③光谱测定:记录反应产物引起的吸光度变化,如405nm吸光度上升;④计算活性:根据吸光度变化率,计算淀粉酶活力单位;
⑤结果判断:对比参考范围,评估胰腺功能状态。

尿淀粉酶测定:①样本收集:留取24小时尿样;②处理尿样:保证尿液新鲜,防止细菌分解尿淀粉酶;③检测反应:选用适宜试剂进行比色或速率法测定;④读取数值:记录反应产物的吸光度或颜色强度变化;⑤分析结果:参照正常范围,辅助诊断胰腺疾病。

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淀粉酶(AMS)检测试剂盒(碘-淀粉比色法)
简介:
淀粉酶(Amylase ,AMS)又称1,4-α-D-葡聚糖水解酶,是水解淀粉和糖原的酶类总称。

淀粉酶测定方法主要分为天然淀粉底物方法和确定底物方法,前者的方法有碘-淀粉法,后者有以麦戊糖底物的方法,以4-NP-G 为底物的方法。

Leagene 淀粉酶(AMS)检测试剂盒(碘-淀粉比色法)其检测原理是血清或血浆等样本中α-淀粉酶催化淀粉分子中的α-1,4糖苷键水解,产生葡萄糖、麦芽糖以及糊精等,碘液与未被水解的淀粉结合,生成蓝色复合物,其蓝色深浅与未经酶促反应的空白管比较,可计算出淀粉酶的活力单位。

该试剂盒通过分光光度计检测吸光度值,可用于检测细胞或组织的裂解液或匀浆液、血浆、血清、尿液等样品中内源性的淀粉酶活性。

如果采用酶标仪检测,则检测的样本数较多,100T 的比色法检测试剂盒可以检测。

该试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。

组成:
自备材料:
1、 比色杯或96孔板
2、 生理盐水
3、 蒸馏水
4、 分光光度计或酶标仪
操作步骤(仅供参考):
1、 KI 工作液:取出KI Solution 恢复至室温,KI Solution :蒸馏水混匀,即为KI 工作液。

4℃避光可保存一个月。

2、 准备样品:
① 细胞或组织样品:取恰当细胞或组织裂解液,如果有必要需进行适当匀浆,低速离
心取上清,冻存,用于AMS 的检测。

② 血浆、血清和尿液样品:血浆、血清按照常规方法制备,用生理盐水稀释后,可以
直接用于本试剂盒的测定,尿液通常也可以直接用于测定,-80℃冻存,但为了消
编号 名称
TE0203 100T TE0203 200T Storage
试剂(A): AMS Assay buffer 50ml 100ml 4℃ 试剂(B): KI Solution 5ml
10ml 4℃ 避光
使用说明书
1份
除样品本身颜色的干扰,需设置加了血浆或血清但不加底物的对照。

③高活性样品:如果样品中含有较高活性的AMS,可以使用生理盐水或PBS等进行
稀释,也可以采用ALP Assay buffer稀释。

④样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度,以便于后续计算
单位蛋白重量组织或细胞内的AMS含量。

3、AMS检测:按照下表设置空白管、测定管、待测样本,溶液应按照顺序依次加入,并
注意避免产生气泡。

如果样品中的淀粉酶活性过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。

样品的检测最好能设置平行孔。

如果使用分光光度计,反应体系设置如下:
测定管空白管AMS Assay buffer 0.5ml 0.5ml
37℃孵育。

待测样本0.1ml —
混匀,置于37℃水浴,准确孵育。

KI工作液0.5ml 0.5ml
蒸馏水 3.0ml 3.1ml
如果使用酶标仪,反应体系设置如下:
测定管空白管AMS Assay buffer 37.5μl 37.5μl
37℃孵育5min。

待测样本3μl —
混匀,置于37℃水浴,准确孵育。

KI工作液37.5μl 37.5μl
蒸馏水225μl 228μl
4、轻轻混匀,分光光度计或酶标仪检测吸光度,分光光度计比色杯光径,蒸馏水调零,读
取各管吸光度值(即A测定和A空白)。

一般应数小时内检测完毕。

计算结果:
淀粉酶活性单位的定义:在37℃15min水解5mg淀粉酶定义为一个酶活力单位。

根据酶活性定义,计算出样品中的AMS活性。

液体样本AMS活力(U/dl)=(A空白-A测定)/A空白×80×稀释倍数
组织AMS活力(U/mg)=(A空白-A测定)/A空白×80/{取样量(0.1ml)×待测样本蛋白浓度mg/ml}
式中:
A空白=空白对照的吸光度值
A测定=待测样本的吸光度值
参考区间(37℃,健康人):
血清淀粉酶活性:80~180U/dl
尿液淀粉酶活性:100~1200U/dl
注意事项:
1、本试剂盒亦可用酶标仪进行检测,但检测的样本数相应增多。

2、待测样品中不能含有AMS抑制剂,同时需避免反复冻融。

3、酶活性在400U以下时,与底物的水解量呈线性关系。

如待测管吸光度比空白管吸光
度小1倍时,应加大样本稀释倍数或减少加入待测样本的量,重新测定,测定结果应乘以稀释倍数。

4、本试剂盒亦适用于其他样品的AMS测定,尿液检测应先作20倍稀释后测定。

5、AMS Assay buffer如果出现浑浊或絮状物,应弃用。

6、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期:6个月有效。

相关:
编号名称
DC0032 Masson三色染色液
DM0007 瑞氏-姬姆萨复合染色液
PW0053 Western抗体洗脱液(碱性)
TC1243 甘油三脂(TG)检测试剂盒(单试剂GPO-PAP比色法)。

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