支气管哮喘小鼠气道反应性无创检测方法的建立
(参考课件)OVA诱导小鼠过敏性哮喘模型的建立
（4）、相关研究表明，卵白蛋白（OVA）容易引起BABL/c小鼠产生 气道高反应性和血清中IgE超敏反应的过敏反应 [1]。并且雌性BABL/c 小鼠的炎症反应更加显著，
研究进展
1.2 致敏原的选择
选择用尘于螨制的作话过价敏格性昂支贵气；管哮喘动物模型的致敏原主要有卵 白若蛋是白病、毒真和菌真孢菌子则、制尘成螨哮、喘蟑模螂型变虽应为原临等床。中在通制过作控哮制喘病模原型体感 的染过而程控中制，哮选喘择发不生同提的供致依敏据原，基但本其都稳能定制性作较出差各，种其不致同敏的的哮机制 喘还模需型要，进但一是步几的乎研每究个；致敏原都有自己自身的缺点。 蟑螂变应原、花粉以及职业性致敏原等由于种类繁多、模型制 作很难标准化而使模型的复制变得非常复杂，因此在制作哮喘 模型的过程中很少选择； 虽然选择使用OVA作为致敏原，很难制作出重症哮喘模型，然 而，OVA具有易于获得、免疫原性强、相关试剂可选择性大等 特点，作为经典抗原，常与特定的佐剂联合使用。
OVA诱导小鼠过敏性哮喘模型的建立
1
Content (目录)
研究 进展
重要 性
病因 病机
治疗 方法
研究 总结
研究 进展
3
研究进展
近年来，随着社会工业化进程的加快，人们生活水平的 提高，过敏性哮喘患者的数量呈上升趋势，研究者们也将如 何治疗过敏性哮喘作为了一个重要的研究方向。为了研究过 敏性哮喘的病因、发病机制和探索相应的治疗方法，因此对 过敏性哮喘动物模型的建立尤为重要。本次实验的目的是建 立BABL/c小鼠过敏性哮喘模型。
支气管哮喘小鼠气道反应性无创检测方法的建立
支气管哮喘小鼠气道反应性无创检测方法的建立李斌恺赖克方洪燕华王法霞陈如冲林少建钟南山【摘要】目的目前国内对支气管哮喘(简称哮喘) 小鼠的评价多数仅立足于气道炎性指标,不能完全反映哮喘的病理生理特征。
本所率先从国外引进了小动物无创检测和有创检测肺功能仪。
无创法检测时小鼠不必麻醉,而且每次可以同时检测多只小鼠,具有较大的优越性,但能否取代有创法尚需更多的数据。
本研究旨在建立无创检测小鼠气道高反应性的检测方法,并与有创检测方法进行比较。
方法根据动物模型和气道反应性检测方法不同,动物分为: ①无创哮喘组; ②无创对照组; ③有创哮喘组; ④有创对照组。
采用卵白蛋白致敏和激发,建立BALB/ c 小鼠哮喘模型,生理盐水作为对照,分别用无创和有创的方法测定气道反应性。
哮喘动物雾化吸入0 . 2～50 g/ L 倍增浓度的乙酰甲胆碱( Mch) ,测定相应浓度下的增强呼气间歇( Pe nh) 值或气道阻力( RL ) 值等指标。
将小鼠吸入Mc h 后RL 或Penh 增加 2 倍的激发浓度以PC100 来表示。
所有动物都行支气管肺泡灌洗, 收集灌洗液, 涂片染色后分类计数。
结果无创哮喘组PC100 均≤6 . 25 g/ L ,对照组PC100 均≥12 . 5 g/ L 。
其Lo g2 ( 10 PC100 ) 值( 5 . 36 ±0 . 84) 显著低于对照组( 7 . 97 ±0 . 82)( P < 0 . 01) 。
无创哮喘组从Mc h 浓度3 . 12 g/ L 开始, 其Pe nh 值明显高于对照组。
有创哮喘组RL 值从Mc h 浓度0 . 39 g/ L开始就明显高于相应对照组( P < 0 . 05) 。
无创组与有创组的气道反应性相关系数R =0 . 96 ( P < 0 . 01) 。
无创哮喘组和有创哮喘组的嗜酸粒细胞分别为( 54 . 00 ±5 . 96) % , ( 55 . 93 ± 5 . 92) % ,显著高于各自对照组的( 0 . 38 ±0 . 52) % , ( 0 . 63 ±0 . 74) %( P < 0 . 01) 。
气道反应性测定
气道反应性及其测定气道反应性（airway responsiveness）是气管支气管对各种物理化学药物以及变应原等刺激引起气道阻力变化的反应。
在含量较低的情况下，正常人的气道对这些刺激物或变应原的刺激并不发生收缩反应或仅有微弱的反应，而某些人的气道则发生过度的收缩反应，引起气道管腔狭窄和气道阻力明显增高，这就是气道高反应性（airway hyper-responsiveness）.气道高反应性是支气管哮喘主要的病理生理特征和诊断依据。
临床上通过支气管激发试验来测定气道反应性。
早在1873年，英国人Blackleey首先进行了支气管激发试验，自1950年，这项技术有了较快发展，1975年，美国Chai H等用肺功能测定仪进行了支气管激发试验，并制定了标准，与此同时，日本Takishima T等采用气道反应性测定仪（astograph）进行了支气管激发试验。
此后这项技术在呼吸生理，变态反应以及哮喘的基础和临床研究中得到广泛的应用和发展，并进行了标准化和规范化。
第一节气道反应性增高机制及其测定原理吸入某些刺激物或变应原可通过刺激气道平滑肌细胞的受体或感受器直接引起气道平滑肌收缩，也可激活气道炎性细胞释放炎性介质和细胞因子引起气道黏膜充血水肿，气道平滑肌收缩，导致气道管腔狭窄和阻力增高，即气道反应性增高。
目前的研究表明支气管哮喘产生气道反应性增高的机制有以下几个方面：一、气道慢性炎症支气管哮喘是气道慢性炎症性疾病，各种因素作用于气道，使得气道黏膜炎性细胞增多，聚集，释放炎性介质和细胞因子，造成气道黏膜充血水肿，腺体分泌亢进，上皮细胞脱落，气道平滑肌收缩，引起气道管腔狭窄，从而出现气道反应性增高。
气道炎性反应是产生气道高反应性的主要机制。
二、气道神经受体的影响迷走神经反应性增高，释放乙酰胆碱使气道平滑肌收缩，导致气道高反应性。
哮喘患者的气道在长期炎症刺激下和长期应用β 2 –受体激动剂的情况下，使得气道内β 2 –肾上腺能受体数量和功能低下，从而导致气道反应性增高。
建立小鼠哮喘模型两种不同方法的比较
建立小鼠哮喘模型两种不同方法的比较哮喘是一种慢性呼吸系统疾病，特征为阵发性呼吸困难、喘息、咳嗽和胸闷，严重影响患者的生活质量。
为了深入研究哮喘的发病机制和寻找有效的治疗方法，科学家使用小鼠建立了哮喘模型。
目前，有多种方法可以建立小鼠哮喘模型，其中最常用的包括感染性哮喘模型和变态反应性哮喘模型。
本文将对这两种方法进行比较。
感染性哮喘模型是通过感染细菌或病毒引发哮喘样症状。
首先，科学家选择一种感染性病原体，如肺炎克雷伯菌或呼吸道合胞病毒。
然后，将这些病原体通过吸入或直接注射等方式引入小鼠的呼吸道。
之后，小鼠的免疫系统就会开始产生炎症反应，导致呼吸道狭窄和气道高反应性。
这种方法的优点是可以真实地模拟感染性哮喘的病理过程，更符合人类疾病的特点。
但是，此方法需要使用病原体，存在一定的安全风险，并且操作比较繁琐。
与感染性哮喘模型相比，变态反应性哮喘模型更常用且操作相对简单。
变态反应是导致哮喘发生的主要原因之一，患者的免疫系统对特定的抗原物质产生过敏反应，导致气道炎症和收缩。
在小鼠中建立变态反应性哮喘模型，科学家首先选择一个合适的抗原物质，如牛血清白蛋白（BSA）或植物花粉等。
然后，将抗原物质与辅助剂混合，并通过皮下或鼻腔注射的方式给小鼠。
随着时间的推移，小鼠的免疫系统会对该抗原物质产生过敏反应，导致气道炎症和收缩。
此方法的优点是操作相对简单，不需要使用病原体，安全性较高。
但是，由于变态反应的机制相对复杂，该模型无法完全模拟感染性哮喘的病理过程。
除了以上两种方法，小鼠哮喘模型还可以通过化学物质诱导方法来建立。
例如，通过酸性盐类或花粉等刺激物来诱导小鼠产生气道高反应性和炎症反应。
这种方法的优点是操作简单，结果稳定，但是不能真实地模拟人类哮喘的病理特点。
综上所述，感染性哮喘模型和变态反应性哮喘模型是目前小鼠哮喘研究中最常用的两种方法。
感染性哮喘模型能够更真实地模拟人类的哮喘病理特点，但操作繁琐且存在一定的安全风险；而变态反应性哮喘模型操作简单且安全性较高，但不能完全模拟感染性哮喘的病理过程。
支气管哮喘患者FeNO的表达及临床意义
·临床论著·支气管哮喘患者FeNO 的表达及临床意义尹利剑*（商丘市第三人民医院，河南 商丘 476000）摘要 目的：探讨不同呼出气一氧化氮（Fractional exhaled nitric oxide ，FeNO ）水平下支气管哮喘患者痰液、血液、肺功能检测等多个观察指标的表达特点，并分析在气道高反应性中的预测价值。
方法：选取2017年1月至2019年5月于我院就诊的120例疑似支气管哮喘患者作为研究对象进行前瞻性分析，根据FeNO 水平不同，将FeNO ＞49 ppb 的42例患者列为高水平组，FeNO 为26～49 ppb 的33例患者为低水平组，FeNO ≤25 ppb 的45例患者为正常组。
比较三组患者的基本临床资料、痰嗜酸性粒细胞、痰中性粒细胞、血嗜酸性粒细胞阳离子蛋白（Eosinophilic cationic protein ，ECP ）和免疫球蛋白E （Immunoglobulin E ，IgE ）以及第1s 用力呼气容积（Forced expiratory volume at 1s ，FEV1）、FEV1占预测值百分比（FEV1%Pred ）、用力肺活量（Forced vital capacity ，FVC ）以及FEV1与FVC 比值（FEV1/FVC ）等肺功能检测结果进行统计分析。
结果：经Spearman 相关性分析显示，血IgE 、ECP 水平与FeNO 水平呈正相关（r=0.615/0.629，P>0.01），FEV1%pred 、FEV1/FVC 与FeNO 水平呈负相关（r=-0.494/0.789，P>0.01）。
其中血IgE 、ECP 、FEV1%pred 、FEV1/FVC 对于预测支气管哮喘有一定的价值，而联合上述指标对于预测支气管哮喘的准确性最佳（AUC=0.920，P>0.01）。
结论：不同FeNO 水平支气管哮喘患者在临床表现中具有显著差异，在血IgE 、ECP 和肺功能FEV1%pred 、FEV1/FVC 指标检测的基础上增加FeNO 可大大增加预测支气管哮喘的准确性。
支气管哮喘小气道功能障碍的检测方法及临床应用进展2023
支气管哮喘小气道功能障碍的检测方法及临床应用进展2023摘要支气管哮喘(简称哮喘)是常见的慢性气道炎症性疾病。
小气道功能障碍(SAD)可存在于不同表型、不同临床分期和不同病情严重程度的哮喘患者，并影响药物疗效和患者预后。
目前哮喘合并SAD的判定标准未能达成共识，炎症机制尚不明确。
本文对哮喘合并SAD的评估方法、发生状况、发病机制、临床特征和治疗方面的研究进展进行综述，以提高临床医生对本病的认识。
支气管哮喘(简称哮喘)是常见的慢性气道炎症性疾病。
小气道功能障碍(SAD)可存在于不同表型、不同临床分期和不同病情严重程度的哮喘患者，并影响药物疗效和患者预后。
目前哮喘合并SAD的判定标准未能达成共识，炎症机制尚不明确。
本文对哮喘合并SAD的评估方法、发生状况、发病机制、临床特征和治疗方面的研究进展进行综述，以提高临床医生对本病的认识。
一、SAD的评估方法小气道通常是指内径小于2mm的气道,包括传导区和腺泡区。
由于小气道异常不易被评估和治疗，故被称作〃沉默区〃。
目前尚缺乏判定SAD的金标准，临床常用的小气道功能评估方法如下。
1 .通气肺功能测定[5]:SAD的特点是气道过早闭塞，用力肺活量的降低是反映气体滞留的指标。
用力呼气流量（FEF）[包括最大呼气中期流量（FEF25~751用力呼出50%和75%肺活量时的呼气流量（FEF50和FEF75）]下降提示小气道阻塞。
《成人肺功能诊断规范中国专家共识》推荐将FEF25~75∖FEF50和FEF75至少两项下降至正常预计值的80%以下作为SAD的判定标;宙6I S近期国内一项大样本流行病学研究将SAD定义为FEF25~75%预计值、FEF50%预计值和FEF75%预计值三项中两项及以上小于65%[4]0该法应用广泛，但局限性在于FEF25~75可受肺容量影响，老年人和儿童肺容量受用力不足的影响较大，导致该指标可重复性受限[7]o2 .脉冲振荡法（impu1seosci11ometryJOS）通气肺功能测定中，患者用力呼气后可导致气道张力改变而IOS法是一种在平静呼吸时进行的测试,无需特殊配合且无创、操作简单，能反映整个呼吸系统的小气道功能。
三种哮喘小鼠动物模型的对比研究
•论著.三种哮喘小鼠动物模型的对比研究黄超文赵强钟莲娣钟雪莺仝金斋黄炎明【摘要】目的探讨三种哮喘小鼠造模方式在病理改变、灌洗液中细胞组分、气道反应性、气道炎症指标等方面的差异。
方法分别采用屋尘蠕提取物（HDM）、卵清蛋白（OVA）和甲苯二异氧酸酯（TDI）构建小鼠哮喘模型,检测小鼠肺病理改变、肺泡灌洗液（BALF）中炎症细胞和上皮细胞数量、气道高反应性、炎症因子表达情况。
结果HDM、OVA所诱导的哮喘小鼠BALF中细胞组分主要以嗜酸性粒细胞为主。
三组哮喘小鼠在接受不同浓度的乙酰甲胆碱雾化后气道阻力明显增高，与浓度呈正相关，而HDM和OVA诱导的哮喘小鼠气道阻力较TDI组更高。
三组小鼠的血清IgE和BALF中嗜酸性粒细胞炎症指标IL-4、IL-5JL-13明显增高，TDI组所诱导的IgE和BALF IL-4JL-5JL-13均分别低于HDM组和OVA组。
结论不同造模方式建立的哮喘小鼠动物模型在气道反应性、气道炎症和病理特点各有不同，HDM哮喘小鼠和OVA哮喘小鼠具有典型的嗜酸性粒细胞哮喘表现，而TDI哮喘小鼠表现为混合细胞性哮喘动物模型。
【关键词】哮喘；动物模型；屋尘螭提取物；卵清蛋白；甲苯二异氤酸酯［中图分类号］R562.2［文献标识码］A DOI:10.3969/j.issn.1002-1256.2019.11.001支气管哮喘是一种由多种炎症细胞和炎症组参与的慢性气道变应性炎症,并以气道黏液高分泌、气道高反应性和气道重塑为主要特征⑴。
Brown Norway、Wistar大鼠、Sprague Dawly大鼠为常见的大鼠哮喘动物模型，而BALB/c小鼠、C57BIV6小鼠则是常见的哮喘小鼠动物模型⑷。
目前造模方式常采用屋尘蟻提取物（HDM）、卵清蛋白（OVA）、甲苯二异氤酸酯（TDI）、灭活的呼吸道合胞病毒（RSV）等刺激诱导哮喘动物模型⑶。
本研究拟建立HDM、OVA、TDI分别诱导的三种哮喘小鼠动物模型，对比其在气道反应性、气道炎症和病理方面的差异，评价各模型的优劣。
一种小鼠咳嗽模型的建立和检测方法[发明专利]
![一种小鼠咳嗽模型的建立和检测方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/1a9a9dfca0c7aa00b52acfc789eb172dec639948.png)
(10)申请公布号 CN 101897627 A(43)申请公布日 2010.12.01C N 101897627 A*CN101897627A*(21)申请号 201010214192.8(22)申请日 2010.06.30A61D 7/00(2006.01)A61B 5/00(2006.01)(71)申请人广州医学院第一附属医院地址510120 广东省广州市越秀区沿江西路151号申请人美国Buxco 电子有限公司广州呼吸疾病研究所呼吸疾病国家重点实验室(72)发明人陈莉延 约瑟夫·马克·罗麦斯克赖克方 钟南山 蒋波(74)专利代理机构广州市华学知识产权代理有限公司 44245代理人陈燕娴(54)发明名称一种小鼠咳嗽模型的建立和检测方法(57)摘要本发明公开了一种小鼠咳嗽模型的建立和检测方法，包括以下操作步骤：(1)提供雌性Balb/c 小鼠，小鼠的年龄为10周龄，小鼠体重为22～25g ，动物级别为SPF 级；(2)提供Buxco 无创检测系统，该Buxco 无创密闭体描舱连接有声音监听设备和信号转化器，将上述小鼠置于体描舱内自由活动；(3)使用辣椒素激发液雾化激发小鼠咳嗽，实时监听小鼠咳嗽声音，通过声音分析软件记录声波，并通过Finepointe 软件将舱内气流变化转化为呼吸波形进行记录并自动实时分析。
本方法同时监测小鼠咳嗽声音和呼吸波形，可大大降低工作强度，节省工作时间，提高工作效率，有利于小鼠咳嗽模型的推广和应用。
(51)Int.Cl.(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请权利要求书 1 页 说明书 4 页 附图 2 页权 利 要 求 书CN 101897627 A1/1页1.一种小鼠咳嗽模型的建立和检测方法，其特征在于包括以下操作步骤：(1)提供雌性Balb/c小鼠，小鼠的年龄为6～15周龄，小鼠体重为22～25g，动物级别为SPF级；(2)提供Buxco无创检测系统，该Buxco无创密闭体描舱连接有声音监听设备和信号转化器，将上述小鼠置于体描舱内自由活动；(3)使用辣椒素激发液雾化激发小鼠咳嗽，实时监听小鼠咳嗽声音，通过声音分析软件记录声波，并通过Finepointe软件将舱内气流变化转化为呼吸波形进行记录并自动实时分析。
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・论著・支气管哮喘小鼠气道反应性无创检测方法的建立李斌恺 赖克方 洪燕华 王法霞 陈如冲 林少建 钟南山 【摘要】 目的 目前国内对支气管哮喘(简称哮喘)小鼠的评价多数仅立足于气道炎性指标,不能完全反映哮喘的病理生理特征。
本所率先从国外引进了小动物无创检测和有创检测肺功能仪。
无创法检测时小鼠不必麻醉,而且每次可以同时检测多只小鼠,具有较大的优越性,但能否取代有创法尚需更多的数据。
本研究旨在建立无创检测小鼠气道高反应性的检测方法,并与有创检测方法进行比较。
方法 根据动物模型和气道反应性检测方法不同,动物分为:①无创哮喘组;②无创对照组;③有创哮喘组;④有创对照组。
采用卵白蛋白致敏和激发,建立BALB/c小鼠哮喘模型,生理盐水作为对照,分别用无创和有创的方法测定气道反应性。
哮喘动物雾化吸入0.2～50g/L倍增浓度的乙酰甲胆碱(Mch),测定相应浓度下的增强呼气间歇(Penh)值或气道阻力(R L)值等指标。
将小鼠吸入Mch后R L或Penh增加2倍的激发浓度以PC100来表示。
所有动物都行支气管肺泡灌洗,收集灌洗液,涂片染色后分类计数。
结果 无创哮喘组PC100均≤6.25g/L,对照组PC100均≥12.5g/L。
其Log2(10PC100)值(5.36±0.84)显著低于对照组(7.97±0.82)(P<0.01)。
无创哮喘组从Mch浓度3.12g/L开始,其Penh值明显高于对照组。
有创哮喘组R L值从Mch浓度0.39g/L开始就明显高于相应对照组(P<0.05)。
无创组与有创组的气道反应性相关系数R=0.96(P<0.01)。
无创哮喘组和有创哮喘组的嗜酸粒细胞分别为(54.00±5.96)%,(55.93±5.92)%,显著高于各自对照组的(0.38±0.52)%,(0.63±0.74)%(P<0.01)。
结论 本研究表明以Penh为主要测定指标的无创方法,可以成功检测哮喘小鼠气道高反应性。
【关键词】 小鼠;气道反应性;支气管哮喘;增强呼气间歇;无创检测Establishment of non2invasive method for measuring airway re sponsiveness of asthmatic mouse model L IB in2kai,LA I Ke2f ang,HO N G Yan2hua,W A N G Fa2x ia,CH EN R u2chong,L I N S hao2j ian,Z HON GN an2shan.Guangz hou I nstitute of Res pi ratory Diseases,the Fi rst A f f iliated Hos pital of Guangz houMedical College,Guangz hou510120,ChinaCorres ponding author:LA I Ke2f ang【Abstract】 Objective Most of the evaluation on asthmatic mouse model only based on the airwayinflammation,not f ully reflecting its pathophysiology.Noninvasive method of measuring bronchial hyperresponsiveness can detect several conscious mice in one time,but whether it can replace the invasivetechnique needs more data to be identified.This study aims to establish a non2invasive detection of mouseairway hyperresponsiveness,comparing with the invasive method.Methods According to different ways ofdetection,mice were divided into four group s:non2invasive asthma group,non2invasive control group,invasiveasthma group and invasive control group.Mouse was sensitized and challenged with ovalbumin(OVA)forasthmatic model.The mice were challenged with increasing concentrations of methacholine aerosol f rom0.2250g/L,and the airway resistance was measured.Enhance pause(Penh)or airway resistance(R L)was takenfor each group.The dose of methacholine causing100%increase of respiratory resistance was defined asPC100.The PC100values were converted into Log2(10PC100)for statistical analysis.Bronchoalveolar lavagecytology was performed to evaluate the airway inflammation.Re sults The PC100of non2invasive asthmagroup was≤6.25g/L,and the noninvasive control group’s≥12.5g/L.Its Log2(10PC100)value wassignificantly less than that of control group,(5.36±0.84)vs(7.97±0.82)(P<0.01).The Penh value ofnon2invasive asthma group began significantly increasing when the concentration of Mch was3.12g/L.The 基金项目:“863”计划(2006AA02Z4Z5)作者单位:510120广州医学院第一附属医院广州呼吸疾病研究所通信作者:赖克方R L value of invasive asthma group was increasing at the beginning of0.39g/L(P<0.05).The coefficientrate of two groups was0.96(P<0.01).The EOS(%)of non2invasive asthma group or invasive asthmagroup was54.00±5.96,55.93±5.92respectively,significantly larger than that of control group(0.38±0.52,0.63±0.74,P<0.01).Conclusions This study shows that single2chambered barometric whole2body plethysmography as a non2invasive lung f unction test can successf ully detect airway responsiveness inasthmatic mouse model.【K ey words】 Mice;Airway hyperresponsiveness;Bronchial asthma;Enhance pause;Noninvasivemethod 从最早的电刺激离体气管平滑肌收缩能力测定,到现在的无创单腔整体体积描计,国外在对动物气道反应性的测定技术上经过了漫长的发展历程。
而目前国内在对支气管哮喘(简称哮喘)小鼠的评价上多数仅仅立足于气道炎性指标,在气道反应性的检测方面近几年才起步,而且是用有创的方法。
我所率先从国外引进了动物无创检测的肺功能仪。
气管插管后再测定动物气道阻力的有创法是评价动物气道反应性的经典方法。
无创法则不需气管插管等繁琐的步骤,在动物处于自然状态下就可以直接测定其气道反应性,而且每次可以同时检测多只小鼠,具有较大的优越性,但能否取代有创法尚需更多的数据。
因此,我们有必要探讨其与有创法的相关性,判定其是否能够有效检测动物的气道反应性,以期建立哮喘小鼠气道反应性的无创检测方法。
材料与方法一、仪器与试剂仪器:本实验采用美国Buxco公司小鼠无创肺功能仪和有创肺功能仪,是目前国际上通用的小鼠肺功能检测仪器,主要包括体描箱,压力传感器(流量传感器),信号放大器和雾化器等。
其工作原理是,将乙酰甲胆碱(met hacholine,Mch)或生理盐水(NS)等通过雾化器雾化入体描箱内,箱内小鼠吸入雾化气体后呼吸运动的改变引起箱内压力、流量产出相应的变化,连接于体描箱的压力传感器(流量传感器)将采集到的信号传至信号处理系统,并在信号放大器作用下转化为呼吸动力学各指标值。
两套肺功能仪中,无创肺功能仪具有6个体描箱(也有配置更多的),相应的传感器可以将各个箱内压力、流量的变化同步传至信号处理系统处理,因此可以同步为多只小鼠进行肺功能检测。
主要试剂:鸡卵白蛋白(OVA)(Ⅴ级,美国Sigma公司),氢氧化铝凝胶(美国Sigma公司),Mch(美国Sigma公司)。
二、实验动物及分组实验动物:SPF级BALB/c雌鼠,5～6周龄,体质量18～20g,购自广州中医药大学实验动物中心,并在该中心饲养。
饲料为去OVA(不含鸡蛋)的特殊食物。
饲养环境符合SPF实验动物级环境设施标准。
分组:根据动物模型和气道反应性检测方法不同,分为:①无创哮喘组;②无创对照组;③有创哮喘组;④有创对照组。
其中,无创哮喘组、有创哮喘组每组10只小鼠;无创对照组、有创对照组每组8只小鼠。
三、哮喘模型的建立方法实验第0天、第7天和第14天行腹腔注射致敏:模型组每次给予20μg OV A+150μl Al(O H)3+50μl NS (100mg/L)混悬液;对照组给予200μl NS。