HPLC法测定三七中三七素的含量
三七素提取工艺及检测方法的优化
热带作物学报2019, 40(11): 2255 2260Chinese Journal of Tropical Crops三七素提取工艺及检测方法的优化段绍凤1,2,3，陈庚1,2,3，闫静1,2,3，覃忠明3，张广辉1,2，梁艳丽1,2,3*1. 云南农业大学西南中药材种质创新与利用国家地方联合工程研究中心，云南昆明650201；2. 云南农业大学云南省药用植物生物学重点实验室，云南昆明650201；3. 云南农业大学农学与生物技术学院，云南昆明650201摘要本研究以三七（Panax notoginseng）植株及其产品和近缘种为研究对象，采用L9(34)正交试验对三七素的提取工艺进行了优化，然后利用HPLC法检测三七素含量，并对各样品中的三七素含量进行了比较分析。
结果表明：优化后的三七素提取条件为超纯水、料液比1∶20（g/mL），提取1次（10 min）；三七素在三七花蕾中的含量最高，其次是根状茎和主根，但是三七茎叶中也有较高含量的三七素，说明三七花蕾和茎叶均可作为三七素的提取原料；在三七产品中三七花的三七素含量最高，达到3.33%，其次是剪口（根状茎）、筋条（侧根）和须根；但三七素的含量与三七个头大小（头数）并无明显的相关性；在三七近缘种姜状三七（P. zingiberensis）和野三七（P. vienamensis var. fuscidiscus）主根、珠子参（P. japonicus var. major）根状茎中的三七素含量显著低于三七主根三七素含量，也显著低于三七其他部位的三七素含量，说明三七是最佳的三七素来源植物。
三七素的含量主要受到物种和部位的影响，与产品规格无关。
本文所建立的三七素提取方法和HPLC检测方法，能够快速简便、稳定可靠测定样品中三七素含量；并可为三七素相关标准的建立奠定基础，为三七的综合利用开发提供依据。
关键词三七；三七素；HPLC；超声提取中图分类号R284 文献标识码 AOptimization of Extraction Process and Detection Method of Dencichine DUAN Shaofeng1,2,3, CHEN Geng1,2,3, Y AN Jing1,2,3, QIN Zhongming3, ZHANG Guanghui1,2, LIANG Yanli1,2,3* 1. National & Local Joint Engineering Research Center on Germplasms Utilization & Innovation of Chinese Medicinal Materials in Southwest, Yunnan Agricultural University, Kunming, Yunnan 650201, China; 2. Yunnan Provincial Key Laboratory of Medicinal Plant Biology, Yunnan Agricultural University, Kunming, Yunnan 650201, China; 3. College of Agriculture and Biotechnology, Yunnan Agricultural University, Kunming, Yunnan 650201, ChinaAbstract The extraction process of dencichine in Panax notoginseng was optimized by the L9(34) orthogonal test, and the content of dencichine was determined by HPLC. The optimized extraction condition for dencichine was extracted once with ultrapure water at solid-to-liquid ratio of 1∶20 (g/mL) for 10 min. Flower bud had the highest dencichine content, followed by rhizome, main roots and leaves. The content of dencichine in flower buds was 3.33%. There was no significant correlation between the content of dencichine and the rhizom size. The content of dencichine in the rhizome of P. zingiberensis and P. vienamensis var. fuscidiscus was significantly lower than that of the main root of P. notogin-seng. It was also significantly lower than that of other parts of P. notoginseng, indicating that P. notoginseng was the best source of dencichine. The content of dencichine was mainly affected by species and parts, and had nothing to do with product specifications. The extraction method and HPLC detection method established in this paper could quickly and easily determine the content of dencichine.It can lay a foundation for the establishment of related standards of den-cichine and provide a basis for the comprehensive utilization and development of P. notoginseng.Keywords Panax notoginseng; dencichine; HPLC; supersonic extractionDOI 10.3969/j.issn.1000-2561.2019.11.021收稿日期 2019-02-19；修回日期 2019-05-14基金项目 国家自然科学基金项目（No. 8176140700）。
高效液相色谱法测定三七片中三七皂苷R1和人参皂苷Rg1的含量
俞 坚1, 刘 杭 1, 王京霞2
( 1. 杭州市第六人民医院, 浙江 杭 州 310014; 2. 浙江省中医院, 浙江 杭州 310006)
摘 要: 目 的: 用 R P - H PLC 法测 定 三七 片 中三 七 皂 苷 R1 和 人 参皂 苷 R g1 的 含量。 方 法: 以 ZORBAX
2. 3 对照品溶液的制备 精 密称取 80 干燥至恒 重的三 七皂苷 R 1 2. 55mg、人参皂苷 R g1 13. 1mg 对照品, 置 50mL 量瓶中, 加甲醇溶解并稀释至 刻度, 使成每毫升含有三七皂 苷 R 1 0. 051mg、人参 皂 苷 R g1 0. 262m g 的 混 合对 照 品溶 液。
V o.l 26 N o. 2 Feb. 2 0 0 8
表 1 系统适 应性试验结果
1. 32% , 人参皂苷 R g1 R SD = 0. 93% 。 ( n = 5)。
被测组分 保留时间 ( m in) 理论塔板数 相邻两峰分离度
三七皂苷 R1
4. 068
5861. 7
人参皂苷 R g1
5. 237
关键词: 三 七片; 三七皂苷 R 1; 人参皂苷 Rg1; R P- HPLC; 含量测定
中图分类号: R284. 1
文献标识码: A 文章编号: 1673- 7717( 2008) 02- 0421- 02
Determ ination o f No tog insenoside R1 and G insenoside Rg1 in Sanq i T ab le ts by RP - H PLC
中
效以三七皂苷 R1计, 理 论塔 板数不 应低 于 5000。结 果被 华
测组分可 在 6m in内出完, 二元等度洗脱全程为 0 ~ 15m in。
不同干燥条件的三七中三七素含量的测定
不同干燥条件的三七中三七素含量的测定SONG Jianping;LOU Jie;ZHANG Zhixin;LIANG Jiao【摘要】三七素是三七中的特殊氨基酸,能明显缩短凝血时间.将三七采用几种常用的方法进行干燥加工,利用HPLC对三七素的含量进行分析.结果表明三七素的含量未随干燥温度的升高呈线性变化,40℃和冷冻干燥三七中的三七素含量最低,50℃烘干处理的三七中三七素含量最高.【期刊名称】《文山学院学报》【年(卷),期】2019(032)003【总页数】4页(P6-8,12)【关键词】三七;三七素;含量【作者】SONG Jianping;LOU Jie;ZHANG Zhixin;LIANG Jiao【作者单位】【正文语种】中文【中图分类】R284三七[Panax notoginseng（Burk.）F.H.Chen]为五加科人参属多年生草本植物，是我国传统珍贵中药材，为云南省文山州道地药材。
三七饮片具有“散瘀止血，消肿定痛、益气活血的功效。
用于跌扑肿痛、内外出血、气虚血瘀、脉络瘀阻、胸痹心痛、中风偏瘫，气虚体弱；软组织挫伤、出血性疾病、高血压、冠心病、脑卒中、高脂血症、糖尿病血管病变、免疫功能低下见上述证候者”[1]。
传统中医认为三七有生、熟用药之分及“生打熟补”，生三七用于止血祛瘀、消肿止痛，熟三七主要用于补血、补气。
有学者研究认为，三七的生熟之分主要是炮制过程中三七中的各种化学成分含量、结构、比例均发生改变而引起[2]。
三七素是三七中存在的一种特殊的水溶性氨基酸，其化学名为β-草酰-L-α，β-二氨基丙酸，1981年日本学者首次从三七中发现将其命名为三七素。
药理研究证明，三七素能明显缩短凝血时间、凝血酶原时间和凝血酶时间，提高血小板数和黏附率，增强血小板的功能，起到止血的作用[3]。
三七的干燥方法传统上采用自然晾晒，近年来随着产量增加采用快速烤房干燥的三七量已占绝大多数。
对三七中皂苷在不同干燥条件下的变化研究较多，但对三七素的影响尚未见报道。
HPLC法测定三七水煎液中三七皂苷R1、人参皂苷Rg-和Re的含量
的 质 量控 制 标 准 。
关 键 词 ： 七 水 煎 液 ； 七 皂 苷 Ｒ ； 参 皂 苷 Ｒ ｌ 人 参 皂 苷 三 三 ｌ人 ｇ；
Ｒｅ； ＰＩＣ Ｈ
中 图分 类号 ： ９ ７ ２ Ｒ ２ ． 文献标识码 ： Ａ 文 章 编 号 ： ０ ４２ ０ （ ０ ８ ０ — ０ ６０ １ ０ — ４ ７ ２ ０ ） ２０ ７ —２
于 ２３ｎ 检 测三 七皂苷 Ｒ 、 ０ ｍ １人参 皂苷 Ｒ １ 人 参 皂苷 Ｒ 的 含 ｇ和 ｅ 量 。结果 三 七皂苷 Ｒ 在 ０１４ ．４ （ 一０９９ ）人 参皂 ｌ ．４￣２６ ｇ ｒ ．９ ， ５ 苷 Ｒ 在 ０ １～１ （ ．Ｏ ２ ｒ＝０９９７ ， 参 皂 苷 Ｒ 在 ０ １～ １４ ．９ ）人 ｅ ．５ ．
Ｅ ］ 谭生建 ， ８ 闵庆 旺 ， 培让 ， ． 效 液 相 色 谱 法 测定 益 气 聪 陈 等 高 明丸 中葛 根 素 含量 ［］药 物分 析 杂 志 ，９７ １ （） １． Ｊ． １９ ，７ １ ：７
ｆ 稿 日期 ： ０ ７０ —６ 收 ２ ０ —８ ０ ）
色谱 纯 （ ｉｈ ｒＳ ｉｎｉｃ ； 为去 离 子 重蒸 水 ； 余 Ｆｓ ｅ ｃ ｔ ｉ） 水 ｅ ｆ 其
参 皂苷 Ｒ 批 号 １ ０ ０ —Ｏ ３ ２ 和人参 皂 苷 Ｒ （ ｇ（ １７ ３２ Ｏ ２ ） ｅ 批 号 １ ０ ４ —０ ４ ４ 对 照 品 （ 国药 品生 物 制 品 检 定 １ ７ ５２ ０ １ ） 中 所 ） 三 七药 材 （ ； 市售 ， 自陕西 ， 购 云南文 山产 ） 乙腈 为 ；
摘要 ： 目的 建 立三 七 水 煎液 中三 七 皂苷 类 成 分 的 含量 测 定 方 法 。方 法 采 用高 效液 相 色谱 法 ， 乙腈一 （０： Ｏ 为 流动 相 ， 以 水 ２ ８）
反相离子对色谱法测定三七中三七素含量
反相离子对色谱法测定三七中三七素含量建立反相离子对色谱法测定三七中三七素含量。
通过超声提取样品中的三七素，并采用四丁基氢氧化铵离子对试剂与反相高效液相色谱法结合直接测定三七素含量。
确定超声提取优化条件为物液比为1∶20，连续超声提取2次，每次15min，3500r·min-1，离心15min。
三七不同生长年限、产地、部位、以及同属植株中三七素含量均有差异：一年生三七茎叶三七素含量最高；红河州样品三七素含量高于文山州；真空冷冻干燥方式优于其他加工方式；三七高于其他同属植株。
该检测方法操作简便，分离度好，稳定性好，适用于三七素含量直接测定，为三七中三七素的质量标准控制提供参考。
标签：三七；三七素；高效液相色谱法；离子对试剂；含量测定三七素（dencichine）是三七中止血活性的主要成分，它是一种特殊的非蛋白质氨基酸，相对分子质量小，极性大，水溶性好[12]。
三七素最早被发现于山黧豆中，同时人参、西洋参种属植物中也存在[34]。
美国FDA在收载的三七药材中，已将三七素作为重要质量控制指标进行定性检测。
但是目前国内现行药品标准，如《中国药典》2010年版、《云南省饮片标准》2005年版对三七的质量标准控制主要集中在皂苷[78]，缺乏三七素定性和定量的评价。
因此，采用适当的分析测试方法，对三七中三七素的含量进行系统地分析测定，有利于三七药材的质量控制，有利于三七资源更好地开发和利用。
本文通过超声提取工艺最佳优化条件进行三七素提取，采用反相离子对色谱法系统、全面考察了三七不同生长年限、产地、部位、同属植株以及加工方式三七素含量的影响，为三七中三七素的质量标准控制提供参考。
1材料LC20A高效液相色谱仪（日本岛津公司）；FLB200型万能高速粉碎机（上海菲力博食品机械有限公司）；优普系列超纯水器UPTI20T（成都超纯科技有限公司）；CP114电子天平（上海奥豪斯仪器有限公司）；TD25WS台式低速离心机（湖南湘仪实验室仪器开发有限公司）。
三七粉检验报告
三七粉检验报告1. 引言三七粉作为一种常见的中药材，被广泛用于医药行业。
为了确保三七粉的质量和安全性，本文对三七粉进行了全面的检验和分析。
本报告旨在提供关于三七粉的详细检验结果，以及对三七粉质量的评估。
2. 检验方法实验使用了以下检验方法来评估三七粉的质量：2.1 外观检验对三七粉的外观进行了检查和描述，包括颜色、形状、有无异物等。
2.2 水分含量检验使用干燥烘箱法测定样品的水分含量，以判断样品的干燥程度和储存稳定性。
2.3 药品标识的检验对三七粉的相关药品标识进行了检验，包括产品名称、成分、制造商等信息。
2.4 含量测定使用高效液相色谱法(HPLC)测定三七粉中有效成分的含量，以评估其药效。
2.5 重金属含量检验使用原子吸收光谱法(AAS)检测三七粉中重金属元素的含量，以评估其安全性。
3. 检验结果及分析3.1 外观检验结果经过外观检验发现，三七粉呈灰白色细粉状，无明显异味，并没有发现任何异物。
3.2 水分含量检验结果对三七粉的水分含量进行了测定，结果显示水分含量为7.8%，符合国家标准要求。
3.3 药品标识的检验结果经过对三七粉药品标识的检验发现，产品名称标明为纯正三七粉，制造商信息齐全，说明书中也详细列出了成分和用法用量。
3.4 含量测定结果通过HPLC测定，发现三七粉中三七总皂苷含量为3.2%，达到国家药典规定的标准。
3.5 重金属含量检验结果对三七粉中重金属元素进行了检测，结果显示镉、铅、汞、砷的含量均在国家标准允许范围内，符合安全要求。
4. 结论通过对三七粉的全面检验和分析，得出以下结论：•三七粉外观无异物，干燥程度良好，符合标准要求；•三七粉水分含量符合标准要求，适合长期储存；•三七粉药品标识完整，产品名称、成分、制造商信息清晰明确；•三七粉中三七总皂苷含量达到国家药典规定的标准；•三七粉中重金属元素含量符合国家标准，安全可靠。
综上所述，本次三七粉的检验结果显示其质量良好，符合相关标准要求。
三七皂苷含量标准
三七皂苷含量标准三七，又称田七、人参三七，是五加科人参属植物，具有丰富的药用价值。
三七皂苷是三七的主要活性成分，具有抗炎、镇痛、抗氧化、抗肿瘤等多种生物活性。
因此，三七皂苷含量的测定对于评价三七质量具有重要意义。
本文主要对三七皂苷含量的测定方法及其标准进行研究。
一、三七皂苷含量的测定方法1. 液相色谱法（HPLC）液相色谱法是目前最常用的三七皂苷含量测定方法。
该方法具有灵敏度高、分离效果好、重复性好等优点。
常用的检测器有紫外检测器（UV）和蒸发光散射检测器（ELSD）。
根据三七皂苷的化学性质，可以选择适当的色谱柱和流动相进行分离和检测。
2. 薄层色谱法（TLC）薄层色谱法是一种常用的定性分析方法，也可以用于三七皂苷含量的初步测定。
该方法操作简单，但灵敏度和分离效果相对较低。
常用的显色剂有碘化铋钾、香草醛-硫酸等。
3. 毛细管电泳法（HPCE）毛细管电泳法是一种新型的分离分析方法，具有分离效果好、操作简单、运行成本低等优点。
该方法可以用于三七皂苷组分的分离和含量测定，但目前仍处于研究阶段。
二、三七皂苷含量标准三七皂苷含量标准是评价三七质量的重要依据。
目前，国内外尚无统一的三七皂苷含量标准。
不同国家和地区根据当地的气候、土壤、生长条件等因素，制定了相应的质量标准。
例如，中国药典规定三七中人参皂苷Rb1、Rg1和Re的含量分别不低于0.8%、0.5%和0.3%。
三、三七皂苷含量标准的影响因素1. 品种差异：不同品种的三七，其皂苷含量存在显著差异。
例如，云南三七的皂苷含量通常高于云南三七。
因此，在制定三七皂苷含量标准时，需要考虑到品种的差异。
2. 生长环境：生长环境对三七皂苷含量也有显著影响。
例如，土壤肥力、光照时间、降水量等因素都会影响三七的生长和皂苷含量。
因此，在制定三七皂苷含量标准时，需要考虑到生长环境的差异。
3. 采收时间：三七的生长周期较长，不同时间段采收的三七，其皂苷含量存在显著差异。
一般来说，种植后2-3年的三七，其皂苷含量高。
HPLC法测定三七总皂苷提取废液中三七素的含量
２ １ 色谱条件 ．
Ｄｋ １ 谱柱 （ ｔ １０ ． ｉ Ｃ８ ｍａ 色 ５ｐ ５ ×４ ６ｍｍ） 乙 ｍ， ，
腈 一水 （ ０：７ ） 流 速 １ ｍＬ ｍｉ， 温 ２ ℃， 测 波 长 ３ ０， ／ ｎ柱 ５ 检
１ 仪 器与试药 高效 液 相 色 谱 仪 （ 安 Ｓ ｍ ｔ ； 孔 滤 膜 （ 径 ： 戴 ｕ ｍｉ 微 ） 孔
Ｏ ２ ｍ） 分析天平（ ．５ ； 上海天平仪器厂） 三七 总皂苷提取废液 ； 浓缩物 由云南植物 药业有 限公 司提 供 ； 三七素 对照 品为 自制 （ Ｌ ＨＰ Ｃ自身对照法检测 纯度 ＞９ ． ）含 量测定 用试 剂为 ８Ｏ ； 色谱 纯 ， 其它试剂均为分析纯 。 ２ 方 法与结果
三七 总皂苷提取废液为三七总皂苷提 取水洗多糖工 序过
程 中产生的废液 ， 水洗多糖 是三七 提取工艺 中的必 须工序 ， 该
工序产生的水 洗多 糖废液 量多 ， 而且 富含 营养 物质 （ ＯＤ值 Ｃ
高） 直接排放会给 环境造成 很大 污染 ， ， 如何将 该废 液加 以利
释至刻度 ， 取一定体积 的溶液稀释至一定浓度 即可 。
图 １ 对照品色谱 图
一
文 章 编 号 ：０ ７ ２ ４ （０ ０ ０ －０ ６ － ０ １０ － ３９ ２ １ ） ２ ０ １ ２
三七素（ ｅｃ ｈｎ ） 又名 田七氨酸ｌ ， ｄ ｎｉ ｉｅ ， ｃ ＿ 是五加科 人参属 １ ］ 名贵 中药材三七中的主要止血活性成分 。三七素首次于 １８ ９１ 年 由小 营 卓 夫 提 取 分 离 并 命 名 为 ｄ ｎｉ ｉｅ 其 化 学 名 为 ｅｃ ｈｎ ， ｃ ｐ 一草酰基一Ｉ ，一二氨基 丙酸 ， ｐ 一ａ 鲁岐 等嘲 又相继对 其做
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表 3. 不同采收期三七中三七素的含量 (n=3)
No 采收期 1 三月 2 四月 3 五月 4 六月 5 七月 6 八月 7 九月 8 十月 9 十一月
含量(%) 0.567 0.573 0.440 0.601 0.599 0.760 0.664 0.738 0.681
表 4. 不同规格三七中三七素的含量 (n=3)
6 文山乐诗冲 0.382 28
7 文山乐诗冲 0.390 29
8 文山乐诗冲 0.430 30
9
蒙自名就
0.523 31
10 蒙自名就
0.465 32
产地 马关大栗树 马关马白 马关马白 砚山阿猛 砚山阿猛 砚山者腊 砚山者腊 砚山干河 砚山江那 砚山郊址
含量(%) 0.599 0.448 0.479 0.498 0.489 0.589 0.571 0.567 0.525 0.481
21 马关八寨
0.328 43
22 马关大栗树 0.325 44
砚山盘龙 砚山盘龙 砚山盘龙 广南马街 广南马街 文山坝心 文山坝心 文山马塘 广西靖西 广西靖西 广西靖西 广东南雄
0.480 0.433 0.494 0.503 0.393 0.333 0.526 0.417 0.453 0.398 0.425 0.457
HPLC 法测定三七中三七素的含量
董婷霞 1 赵奎君 2 崔秀明 3 詹华强 1
1 香港科技大学生物技术研究所 香港九龙 2 北京军医学院 北京 100071 3 云南省 文山州三七研究所 云南文山 663000
三七为五加科植物三七 Panax notoginseng (Burk.) F. H. Chen 的干燥根 是著名的 云南 白药 的主要组成药物 具有较好的散淤止血 消肿止痛的功效 用于咳血 吐血 衄血 便 血 外伤出血等 其止血的有效成分为三七素 是一种特殊的氨基酸 1 因此 三七素是中药 三七质量评价的重要指标之一 有关三七素的含量测定仅见高效薄层扫描法 1 因易受实验条 件影响 误差较大 为更准确控制三七的质量 我们建立了三七素的 HPLC 含量测定方法 方 法简便 快速 稳定 可靠 同时 我们用该方法对不同产地 不同采收期 不同规格的三七 和三七的不同部位中三七素的含量进行了测定 以为三七的生产和质量评价提供科学的依据 1 仪器 试剂 样品 1 1 仪器 WatersTM600E 高效液相色谱仪 WatersTM2487UV 检测器 WatersTMMillennium32 色 谱工作站, BRNASON5200 超声仪 1 2 试剂 乙腈 HPLC 级, 甲醇 分析级 购自 sigma 公司 美国 , 标准品三七素
2
根茎
3
側根
4 纤状根
5
花
6 茎和叶
含量(%)
0.523 0.881 0.409 0.886 0.856 0.371
3.讨论 3 1 三七素是三七中能准确表达三七生物活性的重要有效成分之一 有关三七活性成分的含 量测定方法的研究 以往多集中在皂苷类成分上 而对三七素含量测定的研究却极少[1] 这很 不利于全面准确地评价三七的内在质量 本文中所建立的 HPLC 分析方法能快速 准确地测定 三七中三七素的含量 3 2 我们测定了产于云南 广西 广东的 44 件三七样品中的三七素含量 全国 90%的三七分 布在云南省文山州 其中又主要分布于文山 砚山和马关 3 县 因此 我们重点分析了文山 19 个样品 马关 6 个样品 砚山 10 个样品 结果表明 产地对三七素含量有一定的影响 其变 化幅度在 0.311%~ 0.615% 之间 但变化规律不明显 3 3 在不同采收期的三七中 三七素的含量以 8,9,10 三个月的含量较高 这和三七传统的采 收期是一致的 3 4 在不同规格的三七中 160 头和 200 头三七素的含量最高 其他规格含量变化不明显 说 明三七素的含量与三七传统的商品规格并不成正相关 3 5 对三七不同部位中三七素的含量测定表明 根茎 纤状根和花的含量均高于块根 说明 这些部位均有较高的开发利用价值 [参考文献] 1 郑虎占 董泽宏 佘靖. 中药现代研究与应用. 第一卷. 北京 学苑出版社 1997. 202~206.
11 蒙自老寨
0.512 33
12 文山老回龙 0.557 34
13 文山平坝
0.449 35
14 文山平坝
0.405 36
15 文山平坝
0.407 37
16 文山新街
0.311 38
17 文山新街
0.615 39
18 文山小街
0.390 40
19 文山小街
0.373 41
20 马关浪桥
0.385 42
dencichine 由云南白药研究所高崇昆研究员惠赠 1 3 样品 不同采收期: 三年生三七 3 月至 11 月采收, 每月采收一次 不同产地 在三七采收 期分别于云南文山 砚山 马关 广西靖西 广东华雄采收 不同规格 于云南文山同一地块 采收 所有样品均采收 30 株 清洗干燥后分别取根 根茎等药用部位粉碎过 80 目筛备用 实 验样品均经过崔秀明研究员鉴定 2 实验部分 2 1 色谱条件 分析柱 WatersTM Carbolydrate Caryridge Column C18 (5.9 150nm) 流动相 95%缓冲液 A (0.001% 醋酸)- 5% 缓冲液 B (46% 乙腈 10% 甲醇 46%水) 流速 1.0ml/min; 检测波长 213 nm;柱温 室温 2 2 稳定性考察 精密称取三七素对照品 1.0 mg, 用水溶解定容于 1 mL 容量瓶中 在 1 d 内重 复进样 5 次 按上述色谱条件进行测定 结果峰面积积分值的平均值为 34250670 其 RSD 为 0.95% 结果表明三七素在 24 小时内稳定性良好 2 3 线性关系考察 精密称取三七素对照品 1 mg 加水定容于 1 ml 容量瓶中 精密吸取 10.0, 30.0, 50.0, 70.0, 90.0 µL 进样 按上述色谱条件测定峰面积积分值 以三七素量为纵坐标 峰面 积积分值为横坐标 绘制标准曲线 计算回归方程 Y = 2.8 10- 7 X + 0.0072, r = 0.9996 实验 表明三七素在 10.0 ~ 90.0 µg 具有良好的线性关系
No 规格 1 20 头 2 30 头 3 40 头 4 60 头 5 80 头 6 120 头 7 160 头 8 200 头
含量 (%) 0.647 0.611 0.627 0.603 0.540 0.492 0.702 1.175
表 5. 不同部位三七中三七素的含量(n=3)
No 部位
1
块根
样品中量 /mg 0 4925 0 4951 0 4934 0 4960 0 4929
加入量 /mg 0 2250 0 2250 0 2250 0 2250 0 2250
表 1. 三七素加样回收率试验结果
测得量
回收率
平均值
/mg
/%
/%
0 2189 97 3
0 2196 97 6
0 2279 101 3
98 22
0 2207 98 1
0 2178 96 8
RSD /%
1.82
表 2.不同产地三七中三七素的含量 n=3
No
产地
含量(%) No
ห้องสมุดไป่ตู้
1 文山追栗街 0.478 23
2 文山莲花塘 0.490 24
3 文山莲花塘 0.434 25
4 文山乐诗冲 0.537 26
5 文山乐诗冲 0.541 27
2 4 精密度实验 精密吸取上述对照品溶液 重复进样 5 次 测定 三七素峰面积积分值的平 均值为 34221870 其 RSD 为 0.85% 2 5 重复性实验 取相同的样品 5 份 精密称定 按供试品溶液制备方法制备样品溶液 按上 述色谱条件测定 平均含量为 0.49 %,其 RSD 为 1.75% 2 6 回收率试验 采用加样回收法 取已知含量的样品分别添加三七素对照品 按样品制备方 法制备供试液 按上述色谱条件进行测定 计算回收率 结果见表 1 2 7 供试品溶液的制备与测定 取各样品粉末约 5g 精密称定 置具塞三角瓶中 精密加水 25ml 称定重量 超声提取 60 min,放冷 再称定重量 加水补足减失的重量 摇匀 以 4000 rpm 离心 5min,收取上清液 用 0.2 µm 滤膜过滤 取续滤液加水适量 调整三七素浓度至线 性范围内 进样 20µL, 测定峰面积积分值 用外标法根据峰面积积分值计算三七素的含量 结 果见表 2,3,4 5