免疫印迹法和ELISA检测过敏原结果比较
四种HIV抗体检测方法的对比分析
四种HIV抗体检测方法的对比分析高平【摘要】目的:采用化学发光法(CLIA)、乳胶层析法、酶联免疫法(ELISA)和免疫印迹法(WB)进行HIV抗体检测,探讨不同方法学的敏感性和特异性.方法:采用化学发光法对2016年12月—2017年10月门诊和住院患者19090例血清标本进行检测,筛查阳性标本根据《全国艾滋病检测技术规范(2015年修订版)》要求,再用ELISA法和乳胶层析法进行复检,如均有反应或一个有反应一个无反应,则送疾病预防控制中心(CDC)进行抗体WB试验.结果:化学发光法检测出的150例阳性标本中,乳胶层析法检出阳性96例,阴性54例;ELISA检出阳性99例,阴性51例;WB试验检出阳性105例,阴性45例;前三种方法与WB试验符合率分别为70％、91％和94％.结论:初筛方法均具有假阳性和假阴性,HIV抗体先筛查,后WB试验有利于提高HIV抗体检测结果的准确性.化学发光法检测人血清HIV具有较高的灵敏度,自动化程度高,能够及时为临床送检标本进行HIV筛选;乳胶层析法符合率较高,操作简单,检测时间快,可用于急诊等快速检测;ELISA法灵敏度和特异性均较高,可作为HIV批量筛查.【期刊名称】《临床医药实践》【年(卷),期】2019(028)005【总页数】4页(P369-371,375)【关键词】HIV抗体;化学发光法;乳胶层析法;酶联免疫法;免疫印迹法【作者】高平【作者单位】内江市第一人民医院,四川内江 641000【正文语种】中文【中图分类】R446艾滋病(AIDS)是由于感染人类免疫缺陷病毒(HIV)引起的人类免疫功能受损的疾病，可通过性接触、血液及血制品和母婴垂直传播[1]。
近年来，在国际范围内传播和发病率呈上升趋势，在我国感染人数也在逐年增多。
由于艾滋病患者感染HIV后破坏人体内CD4+T淋巴细胞，使人体免疫力降低甚至丧失，最终患者机体在缺乏免疫保护下走向死亡。
因此，艾滋病的防治正成为全世界各个国家和民族所面临的严峻卫生问题和社会难题。
不同免疫检验在抗HIV检测中的结果比较
不同免疫检验在抗HIV检测中的结果比较摘要】目的：探讨不同免疫检验在抗HIV检测中的结果及应用价值。
方法：于本院2016年5月—2018年5月接收的HIV患者中选取67例作为研究对象，所选67例患者均行HIV核酸定量检测法、金免疫层析试验法、ELISA检测法进行检测。
观察HIV核酸定量检测法、金免疫层析试验法、ELISA检测法检测血清标本的结果，分析其诊断符合率情况，并观察三种检测方法诊断准确性、灵敏性、特异性情况。
结果：经临床检验证实，所选67例患者中具有HIV抗体阳性患者49例，具有HIV抗体阴性患者18例。
ELISA检测法诊断符合率、准确性、灵敏性、特异性较HIV核酸定量检测法、金免疫层析试验法高，P＜0.05，差异具有统计学意义。
结论：抗HIV检测中可应用ELISA检测法进行检测，临床应用价值更高，可有效提高检测符合率，并且具有较高准确性、灵敏性、特异性，值得推广。
【关键词】免疫检验；抗HIV；HIV核酸定量检测法；金免疫层析试验法；ELISA检测法【中图分类号】R512.91 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2019）18-0223-02HIV是一种人类获得性免疫缺陷病毒，属慢性感染病毒范畴。
HIV病毒在血液、唾液、精液中均能存在，其传播途径广泛且传播速度极快，常通过性传播、血液传播、母婴传播等方式进行传播，具有较高传染率[1]。
HIV感染后若未及时诊断和治疗，极易发展为艾滋病，艾滋病会对人体免疫功能造成严重损伤，从而使人体极易感染其他各种疾病。
对于HIV感染，早诊断可有效确定患者是否携带HIV病毒，从而为临床治疗提供理想的指导意义，对于改善患者预后来说意义重大。
基于此，本研究主要探讨不同免疫检验在抗HIV检测中的结果及应用价值。
1.资料与方法1.1 一般资料于本院2016年5月—2018年5月接收的HIV患者中选取67例作为研究对象，其中，男36例，女31例，年龄21～44岁，平均（32.5±11.5）岁。
线性免疫印迹法和酶联免疫吸附法检测抗核抗体的比较分析研究
线性免疫印迹法和酶联免疫吸附法检测抗核抗体的比较分析研究目的：比较分析使用免疫印迹法检测抗核抗体谱（LIA-ANAs）和酶联免疫吸附法（ELISA）检测患者血清中抗核抗体水平的特点，以评价两种方法用于辅助诊断自身免疫性疾病（AID）的临床价值。
方法：同时使用免疫印迹法和酶联免疫吸附法检测血清抗核抗体的病例3014例，记录每个病例的检测结果及患者的临床诊断。
比较两种方法检测抗核抗体的结果，分析其一致性。
3014例中选取AID患者123例，健康对照组80例，比较两种方法检测的敏感度和特异度。
结果：LIA法与ELISA法检测抗核抗体结果总一致率为92.20%，经Kappa检验，两者具有较好的一致性（Kappa=0.69）。
LIA法和ELISA法检测抗核抗体的敏感度分别为82.1%和78.9%，特异性分别为92.5%和90.0%。
两种方法检测自生免疫性疾病患者的ANA敏感度和特异度，差异无统计学意义（P>0.05）。
结论：两种方法都具有较高的敏感度和特异度，均可应用于临床检测。
两种方法相结合即ELISA法作为初筛试验、LIA法作为确诊试验联合应用更具临床意义。
[Abstract] Objective：To compare LIA and ELISA of detecting antinuclear antibody level in serum in patients，evaluate clinical value for the diagnosis of the two methods in autoimmune diseases（AID）.Method：At the same time，the use of line immunoassay and enzyme-linked immunosorbent assay for detection of antinuclear antibodies were 3014 cases，clinical diagnosis and detection results recorded for eachcase and patients. Comparison of two methods for thedetection of anti nuclear antibodies，analysis of itsconsistency. In 123 AID patients of 3014 cases were selected，80 healthy controls were detected between the two methods，the sensitivity and specificity.Result：Detection of LIA method and ELISA method of anti nuclear antibodies results the total consistent rate was 92.20%，the Kappa test，two of them have good agreement （Kappa=0.69）. Detection of LIA method and ELISA method，the sensitivity of anti nuclear antibody were 82.1% and 78.9%，specificity of 92.5% and 90.0%. Two methods for detection of spontaneousimmune disease sensitivity and specificity of ANA，no significant difference （P>0.05）.Conclusion：Both the two methods have high sensitivity and specificity and can be applied to clinical testing. Combining two methods that ELISA as a screening test and LIA as a confirmatory test has more clinical significance for AID diagnosis[Key words] Antinuclear antibody；Line immunoassay；Enzyme linked immunosorbent抗核抗体（antinuclear antibody，ANA）又称抗核酸抗原抗体，是一组机体针对自身真核细胞的各种成分包括脱氧核糖核蛋白（DNP）、DNA、可提取的核抗原（ENA）和RNA等为靶抗原产生的自身抗体的总称，主要存在与血清中，也可存在于胸水、关节腔液和尿液中[1]。
无偿献血者ELISA法筛查HIV反应性标本与免疫印迹法检测结果
1287临床医药文献杂志Journal of Clinical Medical Literature2015 年 3 月 A 第 2 卷第 7 期Mar.A 2015 V ol. 2 No. 7无偿献血者ELISA 法筛查HIV 反应性标本与免疫印迹法检测结果李英辉，杨 巍，王 涛，杜艳丽，孙微超，刘彦哲（哈尔滨红十字中心血站，黑龙江 哈尔滨 150000）【摘要】目的 对哈尔滨市无偿献血者中HIV 抗体反应性的标本进行抗体蛋白印迹确认实验与酶联免疫法对比实验，通过实验结果分析探讨其应用特点。
方法 将本血液中心检验科2010年1月～2014年6月间ELISA 法检测HIV 结果呈反应性的911份标本重新进行抗体蛋白印迹确认与酶联免疫法对比实验。
结果 2010年1月～2014年6月来哈尔滨无偿献血者HIV 抗体ELISA 法与免疫印迹法的阳性符合率为18.2%，抗体不确定占41.7%。
S/CO 值大于0小于或等于1与确证试验阳性符合率为0%抗体不确定为29.4%，S/CO 值＞1≤2阳性符合率为0%抗体不确定53.8%，S/CO 值＞2≤3阳性符合率为62.9%抗体不确定为33.7%。
结论 随着ELISA 法S/CO 值的增高，与确证试验的阳性符合率也升高。
考虑到血液的安全筛查试验的灵敏度相对要高特异性低一些，存在一定假阳性结果，所以HIV 抗体结果报告必须以WB 结果为准。
【关键词】无偿献血者；HIV 抗体；蛋白印迹；酶联免疫【中图分类号】R446 【文献标识码】B 【文章编号】ISSN.2095-8242.2015.07.1287.02艾滋病即获得性免疫缺陷综合症，是由艾滋病毒感染所引起的，艾滋病毒又称为人类免疫缺乏病毒简称HIV ，HIV 主要破坏人体免疫系统的CD4+的T 淋巴细胞，致使人体对周围环境中的病原微生物丧失抵抗能力，进而机体免疫监视功能下降，从而使人增加受感染和得一些恶性疾病的机会，可并发严重的感染和肿瘤，最终导致感染者死亡[1]。
免疫印迹法和ELISA检测过敏原结果比较
有 关 。 本 文结 果 显 示 ＳＭＡ 对 复 方 新 诺 明 全 部 敏 感 ，与 张 璞 玉 等 报 道 的 敏 感 率 ９５．８％ 相 近 ，而 与 文 献 ［２，５，６］报 道 的 ６ｏ．７ ～７５．０ 稍 有 差 异 ，这 可 能 与 本 院 临 床 较 少 使 用 该 药 有 关 。
（２４）：３３９８ ３３９９．
Ｅ３］ 张璞玉 ，张少燕 ，李静 ，等．嗜麦芽假单胞 菌医院 内感染 特 点 及 耐 药 分 析 ［Ｊ］．青 岛 大 学 医 学 院 学 报 ，２００９，４５（６）：
５７３—５７６．
Ｅ４］ 李 艳 ，刘 长庭 ，王 德 龙 ，等．嗜 麦 芽 寡 养 单 胞 菌 所 致 医 院感 染 及 危 险 因 素 分 析 ［Ｊ］．中 华 医 院 感 染 学 杂 志 ２００７，１７
【关 键 词 】 变应 原 ； 过 敏 反 应 ； 免 疫球 蛋 白 Ｅ； 免 疫 印迹 法 ； 酶联 免 疫 吸 附 测 定 ＩＩＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７２—９４５５．２０１１．０２．０３８ 文 献 标 志 码 ：Ａ 文章 编 号 ：１６７２—９４５５（２０１１）０２—０１９５一Ｏ２
本 组 药 敏 结 果 显 示 ，ＳＭＡ 对 广 谱 青 霉 素 类 、碳 青 霉 烯 类 、 头 孢 类 等 抗 菌 药 均 有 较 高 耐 药 率 ，除 替 卡 西 林 ／棒 酸 耐 药 率 低 于 ５Ｏ％外 ，其 他 ８种 药物 耐药 率 在 ６４．１ ～ １００．０％ 。该 菌 对 ｐ一内酰 胺 类 抗 菌 药 的 高 度 耐 药 性 是 由 于 该 菌 可 产 生 两 种 ｐ一内 酰 胺 酶 ：Ｌ１金属 酶 和 Ｌ２丝 氨 酸 Ｊ｝内 酰 胺 酶 。ｕ 既 是 青 霉 素 酶 ，又是 碳 青 霉 烯 酶 ，可 水 解 青 霉 素 类 、头 孢 菌 素 类 、碳 青 霉 烯 类 抗 菌 药及 内酰 胺 酶 抑 制 剂 ；Ｌ２为 头 孢 菌 素 酶 ，主要 水 解 头 孢 菌 素 类 、单 环 头 孢 菌 素 类 抗 菌 药 【６］，０内酰 胺 酶 抑 制 剂 可 抑 制 其 活 性 。 另外 ，ｕ 和 Ｌ２均 为 染 色 体 酶 ，存 在 于 菌体 内 ，均 可 被 诱 导 。有 文献 报 道 ６３ 的 ＳＭＡ 可 产 生诱 导 型 Ｄ一内酰 胺 酶 ， 而 亚胺 培 南 是 一 种很 强 的 ８一内 酰 胺 酶 诱 导 剂 ，因此 ，随 着 亚 胺 培 南 在 Ｊ临床 上 的 广泛 应 用 ，该 菌 对 青 霉 素 类 、头 孢 菌 素 类 抗 菌 药 的 耐 药性 也 明显 升 高 ，其 对 妥 布 霉 素 、阿米 卡星 、庆 大 霉 素 等 氨 基糖 苷 类 药 物 耐 药 率 高 达 ９３．６ ～ １００．０ ，与 文 献 ［３］报 道 相似 。对 氨 基 糖 苷 类 药 物 耐 药 主 要 是 由于 修 饰 酶 的作 用 ，能 将 氨基 糖 苷 类 抗 菌 药 物 游 离 氨 基 乙酰 化 ，并将 其 游 离 羟 基 磷 酸 化 、核 苷 化 ，由此 导 致 抗 菌 药 物 失 去 活 性 。 氨 基 糖 苷 类 药 物 结 构 相 似 ，故 常 出现 明显 的 交 叉 耐 药 现 象 ，因 此 临 床 上 对 该 菌 引 起 的感 染 不 宜 使 用 这 类 药 物 。该 菌 对 氟 喹 诺 酮 类 中 的 环 丙 沙 星 耐 药 率 也 高 达 ５９．０ ，这 与 临 床 上 使 用 率 较 高 有 关 。此 外 ， 该 菌 对 喹诺 酮 类 耐 药 除 了外 排 泵 和 膜 屏 障外 ，还 与 靶 位 旋 转 酶 Ⅱ基 因 （ｇｙｒＡ、ｇｙｒＢ）和 拓 扑 异构 酶 Ⅳ基 因 （ｐａｒＣ、ｐａｒＤ）的 突 变
免疫印迹法与皮肤点刺法在过敏性皮肤疾病过敏原检测中的应用价值分析
免疫印迹法与皮肤点刺法在过敏性皮肤疾病过敏原检测中的应用价值分析过敏性皮肤疾病是一种常见的皮肤疾病，其病因复杂，而过敏原检测是治疗和管理这类疾病的重要手段之一、目前常用的过敏原检测方法包括免疫印迹法和皮肤点刺法。
本文将分析这两种方法在过敏性皮肤疾病过敏原检测中的应用价值。
免疫印迹法是通过检测患者体液中针对过敏原的特异性抗体来诊断过敏性皮肤疾病的一种方法。
该方法可以在患者处于过敏反应期间或非过敏反应期间进行检测，具有较高的敏感性和特异性。
通过免疫印迹法可以准确快速地确定患者对不同过敏原的过敏反应，为后续治疗提供指导。
此外，免疫印迹法还可以帮助医生了解患者的过敏病史，有助于制定个性化的治疗方案。
与免疫印迹法相比，皮肤点刺法是一种更为直接的过敏原检测方法。
该方法通过在患者皮肤上进行点刺，观察是否出现过敏反应来确定患者对其中一种过敏原的敏感性。
皮肤点刺法具有操作简便、费用低廉的优势，可以在基层医疗机构和家庭中进行。
此外，皮肤点刺法还可以帮助医生确定患者暴露于过敏原后是否会出现过敏反应，是一种实用的过敏原检测方法。
综合分析两种方法在过敏性皮肤疾病过敏原检测中的应用价值，可以得出以下结论。
免疫印迹法具有较高的准确性和专业性，可以在实验室条件下进行全面的过敏原检测，适用于需要全面了解患者过敏病史和过敏原敏感性的情况。
而皮肤点刺法具有简便、快速的特点，适用于一般过敏性皮肤疾病的初步检测和筛查。
在实际应用中，可以根据患者的具体情况和医疗资源情况选择合适的过敏原检测方法。
总的来说，免疫印迹法和皮肤点刺法在过敏性皮肤疾病过敏原检测中都有其独特的应用价值，医生可以根据患者的具体情况选择合适的检测方法。
在未来的研究中，可以进一步探讨两种方法的优劣势，为临床实践提供更多的参考依据。
自身抗体的检测方法
自身抗体的检测方法引言：自身抗体的检测是一种关键的实验技术，广泛应用于医学研究、临床诊断和药物开发等领域。
本文将介绍几种常见的自身抗体检测方法，包括免疫荧光法、酶联免疫吸附试验（ELISA）和免疫印迹法（Western blot）。
一、免疫荧光法免疫荧光法是一种基于荧光标记的自身抗体检测方法。
首先，将待测样品涂在载玻片上，然后加入特异性荧光标记的抗人免疫球蛋白G（IgG）抗体。
通过荧光显微镜观察，如果样品中存在自身抗体，荧光信号将在细胞或组织中显示出来。
这种方法对于检测自身抗体具有高度特异性和灵敏度，可以用于早期疾病的诊断和监测治疗效果。
二、酶联免疫吸附试验（ELISA）酶联免疫吸附试验是一种常用的自身抗体检测方法。
该方法基于酶标记的二抗与自身抗体的特异性结合。
首先，在固相载体上吸附抗原，然后加入待测样品。
如果样品中存在特异性的自身抗体，它们将与固相载体上的抗原结合。
随后，加入酶标记的二抗，该二抗能够与自身抗体结合。
通过加入底物，酶催化底物发生显色反应，可通过光密度测定来定量分析自身抗体的含量。
ELISA方法操作简单，结果可靠，被广泛应用于自身抗体的检测和定量。
三、免疫印迹法（Western blot）免疫印迹法是一种用于检测自身抗体的高灵敏度分析方法。
该方法通过将待测蛋白样品经电泳分离后转移到膜上，并与特异性的一抗和二抗反应，来检测目标蛋白的存在。
首先，将蛋白样品经SDS-PAGE电泳分离，然后将蛋白转移到膜上。
随后，将膜与特异性的一抗反应，一抗与目标蛋白结合。
最后，加入酶标记的二抗，二抗与一抗结合形成复合物，并通过酶催化底物发生显色反应，从而显示目标蛋白的存在。
免疫印迹法具有高度特异性和灵敏度，可用于检测自身抗体的存在以及研究蛋白的表达和修饰等。
四、其他自身抗体检测方法除了上述常见的自身抗体检测方法外，还有许多其他方法可供选择。
例如，荧光素酶免疫吸附试验（LIA）、放射免疫沉淀法（RIA）和流式细胞术等。
检验科常见免疫血清学检测方法与解读
检验科常见免疫血清学检测方法与解读【检验科常见免疫血清学检测方法与解读】免疫血清学检测是一种通过检测血液中的抗体和抗原来诊断疾病的方法，广泛应用于临床实践中。
本文将针对检验科常见的免疫血清学检测方法进行介绍，并解读其结果。
一、酶联免疫吸附试验（ELISA）酶联免疫吸附试验（Enzyme-linked Immunosorbent Assay，ELISA）是目前应用最为广泛的免疫血清学检测方法之一。
ELISA通过将待检测的抗体或抗原与酶标记的二抗结合，通过酶的催化作用得到显色反应来分析样本中的抗体或抗原含量。
在进行ELISA检测时，首先需要将样本与特异性抗体或抗原进行反应，随后进行多个洗涤步骤来去除非特异性结合的物质。
然后，加入酶标记的二抗与待测样本中的特异性抗原或抗体进行结合。
最后，加入底物，通过酶的催化作用使底物发生显色反应。
二、免疫荧光分析（IFA）免疫荧光分析（ImmunoFluorescence Assay，IFA）是一种通过使用荧光标记的抗体或抗原来检测目标物质的方法。
根据检测物质的不同，可以分为直接免疫荧光分析和间接免疫荧光分析。
直接免疫荧光分析是将荧光标记的抗体直接与待检测样本中的抗原发生特异性结合，然后使用荧光显微镜观察是否有荧光信号产生。
而间接免疫荧光分析则是先使用未标记的特异性抗体与待测样本中的抗原结合，随后再加入荧光标记的二抗与第一抗体发生结合，从而观察是否有荧光信号产生。
三、免疫印迹分析（Western Blot）免疫印迹分析（Western Blot）是一种用于检测抗体和抗原之间的特异性结合的方法。
在进行免疫印迹分析时，首先将待检测样本中的蛋白质经过电泳分离，然后转移到膜上。
随后，将荧光标记的抗体与待测样本中的抗原进行特异性结合，通过荧光显影或其他检测方法观察是否有特异性的蛋白带出现，从而判断抗体和抗原的结合情况。
四、血凝试验（Coagulation Test）血凝试验是一种通过检测血液中凝血因子的活性来评估凝血功能的方法。
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免疫印迹法和ELISA检测过敏原结果比较引言
过敏是一种常见的免疫反应，它可能导致症状包括呼吸困难、皮疹、肠胃不适等。
过敏源可以是多种物质，包括花粉、某些食物、家居灰尘等。
为了确定过敏源并制定合适的治疗方案，需要进行过敏原检测。
目前，传统的免疫印迹法和ELISA检测法是常用的过敏原检测方法。
本文将对这两种方法进行比较，以帮助评估选择最合适的过敏原检测方法。
免疫印迹法
1.定义
免疫印迹法，也称为Western Blotting，是一种应用于蛋白质检测的技术。
它基于电泳分离蛋白质并转移至固体支撑表面的原理，通过特异性抗体与靶蛋白结合的方法来检测特定蛋白质。
2.操作
具体操作步骤如下：
•经过SDS-PAGE电泳分离的蛋白质样品被转移到硝酸纤维素或聚氨酯膜上；
•用抗原特异性的一抗与蛋白质结合；
•加入二抗结合于一抗上的酶发生化学反应，使被检测目的蛋白质按特定颜色成像。
3.优缺点
优点：
•特异性高；
•可以同时检测多个蛋白质。
缺点：
•操作较为繁琐；
•对试样量要求高；
•分离光谱和电泳前的特定色谱处理效应对结果有影响。
ELISA
1.定义
ELISA（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay），也称为酶标记免疫吸附测定法，是一种用于检测蛋白质或其他分子的方法。
ELISA利用抗体与特异性抗原结合的原理，利用酶标记抗体与抗原结合的结果来进行分析。
2.操作
具体操作步骤如下：
•选择特定抗体，将其吸附到微孔板上；
•加入一定量的被检样本，使其结合到抗体上；
•加入酶标记抗体并使其与抗原结合；
•加入显色底物，记录吸光度测量结果，根据标准曲线计算出样本中某种特定抗原的存在量。
3.优缺点
优点：
•高度敏感度；
•操作较为简便。
缺点：
•不能检测多个蛋白质；
•可能出现假阴性和假阳性反应。
比较
1.灵敏度和特异性
对比两项检测法，ELISA检测法的灵敏度、特异性均明显高于免疫印迹法。
ELISA检测法可以检测出更少量的目标物质并消除假阳性的干扰。
2.操作难度
ELISA操作相对简单，需要的设备和试剂比较少，只需液相操作即可。
免疫印迹法的操作较为复杂，涉及到电泳、转膜、孵育、染色等多个操作步骤。
3.多点检测
免疫印迹法可以同时检测多个蛋白质，而ELISA法不能同时检测多个蛋白质。
结论
免疫印迹法和ELISA都是常用的过敏原检测方法，两种方法各有优缺点。
根据实际需求选择合适的过敏原检测方法非常重要。
如果需要高灵敏度和高特异性，应选择ELISA检测法；如果需要同时检测多个蛋白质，则应选择免疫印迹法。