比色法测定Fenton反应产生的羟自由基
比色法测定Fenton反应产生的羟自由基及其应用
比色法测定Fenton反应产生的羟自由基及其应用3徐向荣 王文华 李华斌(中国科学院生态环境研究中心,国家重点环境水化学实验室,北京100085)摘要 Fenton反应产生的羟自由基与二甲亚砜反应,生成甲基亚磺酸,再与坚牢蓝BB盐反应生成偶氮砜,比色法测定其含量可间接测定OH・的生成量.通过对测定条件的研究,得到最佳实验方案.抗氧化剂药物硫脲和抗坏血酸与羟自由基清除率具有明显的量效关系.测定了核桃、黑芝麻等几种天然食物的水提取物清除羟自由基的功能.此法可用于羟自由基清除剂的筛选.关键词 羟自由基,Fenton反应,比色法,甲基亚磺酸学科分类号 Q503 在生命活动的氧化代谢过程中不断产生各种自由基,其中羟自由基OH・是体内最活泼的活性氧,可介导许多病理变化,如引发不饱和脂肪酸发生脂质过氧化反应,并损伤膜结构及功能,因此羟自由基的检测对于自由基的生物作用研究具有重要意义.羟自由基的测定方法有电子顺磁共振法[1]、高效液相色谱法[2]和化学发光法等[3].这些方法大多需要较昂贵的仪器,操作也较复杂,一般实验室难以应用.近年来国外文献报道了用二甲亚砜作为水相中OH・产生的分子探针,定量测定OH・的产率[4～6].该法的测定原理为:Fe2++H2O2Fe3++OH-+OH・CH3SOCH3+OH・CH3SOOH+CH3・CH3SOOH+Ar N N+Ar NN SOOCH3+H+ 本文根据该原理,用比色法测定了Fenton反应中产生的OH・,通过对测定条件的研究,得到最佳的实验方案,并成功地用于羟自由基清除剂的筛选.实验结果表明,抗氧化剂药物硫脲和抗坏血酸与羟自由基清除率具有明显的量效关系.核桃、黑芝麻的水提取物具有很强的清除羟自由基的功能. 1 材料与方法111 仪器和试剂UV2120202紫外可见分光光度计(日本Shi2 madzu公司),硫酸亚铁、过氧化氢、正丁醇、甲苯、吡啶、二甲亚砜、坚牢蓝BB、硫酸.所用试剂均为分析纯。
罗丹明B显色检测Fenton反应产生的羟自由基
化缓慢 ,可见本方法稳定性较好 。 2. 3 工作曲线 当保持其它条件不变 ,改变 RB 的浓度 ,测得它 与体系吸光度的关系。实验表明 RB 的浓度在 0～ 40 μ molΠ L 范围内与吸光度呈良好的线性关系。 工作曲线的线性回归方程为 A = 0. 2329 cRB
2 ( 105 molΠ L ) + 0. 0182 , 线性相关系数 R = 019988 。
(pH 2152) ,用二次蒸馏水稀释到 10 mL 并摇匀 , 放
molΠ L) :称
取 0. 0239 g 罗丹明 B ( 四乙基罗丹明 ) 用水定容 2+ - 3 250 mL容 量 瓶 ; Fe 溶 液 ( 5 ×10 molΠ L) : 称取
013421 g FeSO4 ・ 7H2 O , 加 0. 6 mL0. 5 molΠ L 的稀 H2 SO4 溶解 , 用水定容 250 mL 容量瓶 ; 苯甲酸溶液
LIU Jie and SONG Gong2wu ( The Analysis and Test
Center , Hubei University , Wuhan 430062 ) , Fenxi Shiyanshi ,2004 ,23 ( 10) :55～57 Abstract :A new method was proposed for the determi2 nation of hydroxyl radical produced by Fenton reaction. After being oxidized by hydroxyl radical , Rhodamine B showed a color change. The ΔA 550 was dependent on the dosage of Rhodamine B , Fe
NR光度法测定Fenton试剂所生成的羟基自由基
福建分析测试 Fujian Analysis &Testing 2006,15(3)收稿日期:2006-2-22作者简介:朱琳娜(1981～),女,在读硕士研究生,主要研究方向为水污染控制理论与技术。
E -mail:lina .a manda@NR 光度法测定Fent on 试剂所生成的羟基自由基朱琳娜 何争光 吴超(1、郑州大学环境与水利学院,郑州 450002;2、河南神火集团,永城 476613)摘 要:要提高Fent on 试剂在废水处理中的效率,关键就是要提高羟自由基的生成率和利用率。
本文提出了检测Fent on 试剂反应产生羟自由基的新方法,羟自由基氧化中性红使其褪色,用分光光度法测定其△A 值的变化,可间接测定羟自由基的产生量。
并考查了FeS O 4投加量、H 2O 2投加量、酸度、反应时间等影响羟自由基生成量的主要因素,为Fent on 试剂在废水处理中的应用提供了参数依据。
另外,该法稳定性好,操作简单,测定快速。
关键词:光度法;中性红(NR );羟自由基;Fent on 试剂;废水处理中图分类号:O657.32 文献标识码:A 文章编号:1009-8143(2006)03-0010-03Photom etr i c D eterm i n a ti on of Hydroxyl Free Rad i ca l Produced i n Fen ton ’s Reagen t Reacti on System by Toluylene Red D ecoloura ti onZhu L i n na He Zhengguang W u Chao(1.School of Envir on ment and W ater Conservancy,Zhengzhou University,Zhengzhou,450002,China;2.Shenhuo Gr oup,Henan,Yongcheng,476613,China )Abstract:The key t o enhance the efficiency of Fent on’s reagent in waste water treat m ent is t o enhance the p r oductivity and utilizati on rati o of hydr oxyl radicals in the syste m.I n this paper,for the deter m inati on of the hydr oxyl free radical p r oduced by Fent on reacti on,a ne w phot ometric method based on its oxidati on reacti on with t oluylene red is put f or ward .The col or intensity of t oluylene red will be changed after the oxidati on reacti on,the change of △A is measured phot ometrically,and the a mount of the hydr oxyl free radical can be deter m ined indirectly .The leading fact ors influencing the p r oductivity of the hydr oxyl free radical in the system such as the a mounts of FeS O 4and H 2O 2,reacti on ti m e and reacti on temperature were tested .The useful para meters for Fent on’s reagent in waste water treat m ent were offered .I n additi on,the stability of thismethod is good,its operati on is convenient,and its deter m inati on is fast .Key words:phot ometry;t oluylene red;hydr oxyl free radical;Fent on’s reagent;waste water treat m ent Fent on 试剂在废水处理中的应用主要是利用H 2O 2在Fe 2+的催化作用下所生成的具有强氧化性的・OH 的作用,通过其强氧化性对废水进行预处理以提高废水可生化性,利于其后续处理。
分光光度法测定fenton反应产生的羟基自由基
分光光度法测定fenton反应产生的羟基自由基
实验目的：通过分光光度法测定Fenton反应产生的羟基自由基的浓度。
实验原理：Fenton反应是一种产生羟基自由基的化学反应，其化学方程式为Fe2++H2O2→Fe3++OH-+•OH。
羟基自由基是一种高反应性的自由基，可以与某些有机分子发生反应，因此具有一定的毒性和活性。
分光光度法是一种测定物质浓度的方法，通过吸收光谱来测定物质的浓度。
实验步骤：
1.将一定量的FeSO4和H2O2混合在一起，形成Fenton试剂。
2.取一定量的Fenton试剂加入不同浓度的羟基自由基标准溶液中，形成反应液。
3.使用分光光度计测定反应液的吸光度，并绘制标准曲线。
4.取Fenton试剂加入产生羟基自由基的样品中，形成反应液。
5.使用分光光度计测定反应液的吸光度，并通过标准曲线计算样品中羟基自由基的浓度。
实验结果：通过分光光度法测定，得到不同浓度的羟基自由基标准曲线，计算出样品中羟基自由基的浓度为X mol/L。
实验结论：分光光度法可以用于测定Fenton反应产生的羟基自由基的浓度，为进一步研究羟基自由基在生物体内的作用提供了方法和依据。
敬请批阅。
试卷题目：使用分光光度法测定Fenton反应产生的羟基自由基的浓度，实验步骤有哪些？并简要说明实验原理和结论。
Fenton法中羟基自由基的测定技术进展
级 氧化 技 术 ， 于 湿 式 氧 化 ， 有 广 阔 的前 景 。 属 具
Ｆｎ ｎ法可 有 效 处理 酚类 、 胺 类 、 烃 类 、 药 ｅｔ ｏ 芳 芳 农
Ｏ 使苹 果 酸及 其 他 有 机物 最 终 氧化 为 Ｃ ２ Ｈ， Ｏ 和
ＨＯ ， 。在反 应体 系 内 ・ Ｈ首 先 与 有 机 污 染物 Ｒ Ｏ Ｈ
着 重 介 绍 了测 定羟 基 自 由基 的方 法 及 其 发 展 趋 势 。
关键 词
Ｆｎｏ ｅｔ ｎ法
羟基 自由 基
测 定 技术
废 水 处 理
Ｆ ｎ ｎ 是 目前 废水处 理研 究 较 多 的一 种高 ｅｔ 法 ｏ
二价铁 离（ ｅ 和 Ｈ Ｏ 间 的链 式反 应 催化 生 成 Ｆ２ ）
（ Ｐ ） １４ Ｅ Ｒ 是 ９ ５年 发展 起 来 的 ， 主要 研 究对 象 为 其 具 有未成 对 电子 的 自由基和过 渡金属 离子及 其化 合 物 。 自旋 捕 捉技 术为化 学反应 中 自由基 中间体 和 生命 过 程 中 的短 寿 命 自由基 的 Ｅ Ｒ检测 技 术 Ｓ
开辟 了新 的途径 【 。此方 法是 利用捕 捉剂 与短寿 ８ Ｊ
（ ． 连 市 环 境科 学 设 计 研 究 院 ， 连 １６２ ； ． 阳 师范 大学 实 验 中心 ， 阳 １０ ３） １大 大 １０３ ２ 沈 沈 １０４
摘
要
Ｆｎｏ ｅｔ ｎ法是 一 种 高 级 氧化 技 术 ， 要 介 绍 了 羟 基 自由 基 （Ｏ 的 形 成 及 反应 机 理 ， 简 ・ Ｈ） 并
核酸 断裂 、 白质 和 多糖 分解 ， 伤 膜 结 构 及 功 蛋 损
能 ］ 因此 ， 。 在环 境科学 、 生命科 学 等领 域 ， 已对 ・
羟自由基清除能力检测
羟自由基清除能力检测
羟自由基清除能力（Hydroxy free radical scavenging activity）是一种衡量物质抗氧化能力的重要指标。
目前有关羟自由基的分析测试方法主要有高效液相色谱法、化学发光法、荧光分析法、分光光度法等。
其中测定羟自由基清除能力最常用的是通过分光光度法测定样本抑制显色物邻二氮菲的吸光度的下降，从而反映样品清除羟自由基的能力。
测定原理为：
H2O2/Fe2+通过Fenton反应产生羟自由基，将邻二氮菲-Fe2+水溶液中Fe2+氧化为Fe3+ ，导致536nm吸光度下降，样品对536nm吸光度下降速率的抑制程度，反映了样品清除羟自由基的能力。
迪信泰检测平台采用生化法，可高效、精准的检测羟自由基清除能力。
此外，我们还提供其他氧化应激类检测服务，以满足您的不同需求。
生化法测定羟自由基清除能力样本要求：
1. 请确保样本量大于0.2g或者0.2mL。
周期：2~3周
项目结束后迪信泰检测平台将会提供详细中英文双语技术报告，报告包括：
1. 实验步骤（中英文）
2. 相关参数（中英文）
3. 图片
4. 原始数据
5. 羟自由基清除能力信息。
羟自由基清除率检测试剂盒(Fenton比色法)
羟自由基清除率检测试剂盒(Fenton 比色法)简介：在生命活动的代谢过程中不断产生各种自由基，其中羟自由基·OH 是体内最活跃的活性氧，可介导许多生理变化。
羟自由基作用于体内蛋白质、核酸、脂类等生物分子，造成细胞结构和功能受损Leagene 羟自由基清除率检测试剂盒(Fenton 比色法)又称羟自由基清除能力检测试剂盒或羟自由基检测试剂盒，其检测原理H 2O 2/Fe 2+ 通过Fenton 反应产生羟自由基，将Fe 2+氧化为Fe 3+，求得标准曲线，通过分析捕获产生的羟自由基可计算出自由基清除率或清除能力。
该试剂盒主要用于测定植物组织、血清、血浆等样本中的羟自由基清除率或羟自由基清除能力。
该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
组成：自备材料：1、 蒸馏水2、 实验材料：植物组织(芹菜、绿豆、玉米等叶片)、血液、组织样本等3、 研钵或匀浆器4、 离心管或试管5、 离心机6、 比色杯7、 分光光度计操作步骤(仅供参考)：1、 准备样品：①植物样品：取正常或逆境下的新鲜植物组织，清洗干净，擦干，切碎，迅速称取，按 OH编号 名称TO1133 50T Storage试剂(A): OH Lysis buffer 250ml RT 试剂(B): OH Assay buffer 25ml RT 避光 试剂(C): H 2O 2基液 1ml RT 试剂(D): OH 显色液 50ml 4℃ 避光 试剂(E): Fenton 基液 25ml RT 避光 试剂(F): OH 萃取液 100mlRT 使用说明书1份Lysis buffer的比例，加入OH Lysis buffer后匀浆或研磨，室温静置4h，3000g离心，上清液即为羟自由基粗提液，4℃保存备用。
②血浆、血清和尿液样品：血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的测定，4℃保存，用于羟自由基(·OH)的检测。
fenton法测定羟自由基
fenton法测定羟自由基英文回答：Fenton Reaction for Determining Hydroxyl Radicals.The Fenton reaction is a chemical reaction that generates hydroxyl radicals, which are highly reactive species that can damage DNA, proteins, and lipids. The reaction is commonly used in laboratory settings to study the effects of oxidative stress on biological systems.The Fenton reaction is a two-step process. In the first step, iron(II) ions react with hydrogen peroxide to form hydroxyl radicals and iron(III) ions. In the second step, iron(III) ions react with another molecule of hydrogen peroxide to regenerate iron(II) ions and produce a second molecule of hydroxyl radicals.The rate of the Fenton reaction is influenced by several factors, including the concentration of iron(II)ions, hydrogen peroxide, and pH. The reaction is most efficient at pH values between 3 and 5.The Fenton reaction can be used to determine the concentration of hydroxyl radicals in a solution. This is done by adding a known amount of hydrogen peroxide to a solution containing iron(II) ions. The reaction is then allowed to proceed for a known period of time, and the concentration of hydroxyl radicals is determined using a spectrophotometer.The Fenton reaction is a powerful tool for studying the effects of oxidative stress on biological systems. The reaction can be used to generate hydroxyl radicals in a controlled manner, and the concentration of hydroxyl radicals can be determined using a spectrophotometer.中文回答：芬顿法测定羟自由基。
OH.的清除能力(邻二氮菲一Fe2+比色法)
OH的清除能力（邻二氮菲一Fe2+比色法）一、测定原理邻二氮菲—Fe2+是常用的氧化-还原指示剂，其颜色变化可敏锐地反映溶液氧化还原状态改变。
H2O2/Fe2+体系通过Fenton反应产生·OH（H2O2 + Fe2 + =·OH+OH- + Fe3 +），邻二氮菲-Fe2+水溶液可被经自由基氧化为邻二氮菲-Fe3+，从而使邻二氮菲-Fe2+在510nrn处的最大吸收峰消失（或降低）。
二、测定方法1.试剂配制（1）7.5mM邻二氮菲溶液：取邻二氮菲（orthophenanthroline，1,10-phenanthroline monohydrate，C12H8N2·H2O，FW198.22）1.487g，溶于10.00mL 无水乙醇中，使用时用重蒸馏水稀释100至100mL。
（2）0.05M pH7.4 PBS。
（3）7.5mM硫酸亚铁溶液。
（4）0.1% H2O2。
取3支10mL比色管, 分别依次加入1mL 7.5mM邻二氮菲溶液、2mL pH = 7.4 PBS 缓冲溶液、1mL7.5mM硫酸亚铁溶液，在2、3号比色管中各加入1mL 0.1% H2O2 , 然后在3号比色管中加入1mL提取液，用重蒸馏化水定容至刻度，在37 ℃的水浴中反应1h ，在510 nm波长测吸光度值，计算羟自由基的清除率。
重复三次。
·OH清除率( %) =（A样品—A损）/（A未损—A损）×100式中：A样品—缓冲液+ FeSO4+邻二氮菲+样品+ H2O2A未损—缓冲液+ FeSO4+邻二氮菲A损—缓冲液+ FeSO4+邻二氮菲+ H2O2Hydroxyl free radical scavenging activities：The scavenging activities of hydroxyl free radical were assayed by a modified Fenton reaction protocol (Caillet et al., 2007). The assay system consisted of 1.4 mL of 0.02 mM crystal purple solution, 1.0 mL of 5 mM Fe2+ solution, 1.0 mL of tris–HCl (pH 5.5), 1 mL of 2.5 mM H2O2 and distilled water. The final volume was 10 mL. The different concentrations of the test compounds were incubated at 37 _C for 1 h. The scavenging activities of hydroxyl free radical of positive including the samples and the control were evaluated by the following formula:AA (%) =[(A2- A1)/(A0 - A1)]*100%where AA is the scavenging activities of hydroxyl free radical, A2 is the absorbance of sample with fenton reagents at 580 nm, A0 is the absorbance of sample without fenton reagents at 580 nm, and A1 is the absorbance of sample with fenton reagents and 0.5 mL of 0.2 M KF.Caillet, S., Yu, H., Lessard, S., Lamoureux, G., Ajdukovic, D., & Lacroix, M. (2007). Fenton reaction applied for screening natural antioxidants. Food Chemistry, 100, 542–552.。
羟基自由基检测方法的研究进展
羟基自由基检测方法的研究进展刘建伟 杨长河(南昌大学建筑工程学院,南昌330031)摘 要:羟基自由基氧化是高级氧化技术重要的机理之一,也是研究的难点之一。
本文归纳总结了测定羟基自由基的几种方法,并探讨了各种方法存在的问题,提出了新的检测方法所应具备的特点。
关键词:水处理 高级氧化技术 羟基自由基1 前言随着经济的快速发展,环境污染问题越来越严峻,传统水处理方法难以有效处理成分日益复杂的污水,水处理新技术的研究与应用成为环保领域的重要研究课题。
以臭氧氧化、光催化氧化、电化学氧化、超声技术、湿式氧化等为代表的高级氧化工艺(Advanced Oxi2dati on Pr ocess,AOP)处理污染物技术的形成,为我们提供了处理水体中污染物的新思路。
高级氧化工艺具有反应速度快、处理完全、无公害、适用范围广等优点。
这一概念由Glaze等[1]于1987年提出,被定义为能够产生羟基自由基(・OH)的氧化过程。
目前水处理中能产生・OH的高级氧化技术主要有臭氧氧化、Fent均相催化氧化、湿式氧化、光催化氧化、电催化氧化、光电催化氧化、超声空化氧化[2]、高压脉冲放电等离子体技术[3,4]等。
随着对其反应机理研究的深入,逐渐认识到反应过程中・OH的行为的重要性。
・OH具有一个未成对电子,使其具有极强的氧化能力(2.80V),仅次于氟(2.87V),并能引发诱导产生链反应,主要通过电子转移、亲电加成、脱氢反应等途径无选择性地与各种有机化合物直接作用并最终将其降解为C O2、H2O等无害物质。
由此,准确的・OH的检测特别是在线检测已被认为是此项研究的重要方面,也是目前各种高级氧化反应机理研究的难点之一。
由于自由基是化学反应的中间体,大部分自由基寿命极短。
在水相反应体系中的・OH的寿命仅大约10-9s[5],直接对其进行检测受到仪器操作方面的限制很大,而且其存在依赖于特定的反应环境,因而关于自由基的行为方面,推测和间接证明的为多,直接测量的为少。