HPLC测定玄参中哈巴俄苷和肉桂酸
中药玄参中哈巴俄苷和肉桂酸的高效液相色谱法测定
中药玄参中哈巴俄苷和肉桂酸的高效液相色谱法测定王长琴【期刊名称】《北方药学》【年(卷),期】2016(013)012【摘要】目的:确定使用高效液相色谱法(HPLC)检测中药玄参中含有的哈巴俄苷以及肉桂酸的实际实验步骤,从而确定哈巴俄苷以及肉桂酸在中药玄参中的实际含量.方法:使用规格250mm×4.6mm产于Ultrasphere公司的ODS分析柱(5μm),使用1%醋酸水溶液以及乙腈作为提取需要的流动相,对提取物进行20min的线性梯度洗脱,从20:80的比例到50:50的比例,控制液体的流动速度在1mL·min-1,所有提取过程在室温下进行,使用278nm波长进行检测.结果:哈巴俄苷浓度与峰面积呈现良好线性关系的浓度范围为1.25~105.0μg·mL-1;肉桂酸浓度与峰面积呈现良好线性关系的浓度范围为0.80~50.00μg·mL-1.哈巴俄苷溶液以及肉桂酸溶液在4d 内可以保持浓度不变.30:70的甲醇-水溶液30min超声提取哈巴俄苷和肉桂酸效果最佳.玄参商品饮片中哈巴俄苷的含量位于0.080%~0.243%,肉桂酸的含量位于0.020%~0.052%.玄参完整药材中哈巴俄苷的含量位于0.043%~0.216%,肉桂酸的含量位于0.026%~0.067%.哈巴俄苷与肉桂酸的5次平均回收率分别为99.85%和99.80%,RSD分别为0.63%和0.62%.结论:使用高效液相色谱法检测玄参中哈巴俄苷和肉桂酸的含量准确、可靠、快速、简便,玄参中哈巴俄苷含量应该高于0.04%.【总页数】2页(P3-4)【作者】王长琴【作者单位】南京中医药大学连云港附属医院连云港 222004【正文语种】中文【中图分类】R284【相关文献】1.高效液相色谱法测定玄参百贝散中哈巴俄苷含量2.HPLC测定玄参中哈巴俄苷和肉桂酸3.HPLC法测定不同产地微波真空干燥玄参中哈巴苷和哈巴俄苷的含量4.中药玄参中哈巴俄苷和肉桂酸的高效液相色谱法测定5.中药玄参中哈巴俄苷和肉桂酸的高效液相色谱法测定(英文)因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
黔产玄参的“发汗”方法研究
黔产玄参的“发汗”方法研究作者：邓莹刘杰魏学军夏朵马江蚕来源：《中国民族民间医药·上半月》2022年第07期【摘要】目的：优选黔产玄参的最佳“发汗”方法。
方法：采用不同“发汗”加工方法制备待测样品，利用高效液相色谱法（HPLC）测定哈巴苷、哈巴俄苷、肉桂酸含量，综合评分法优选最佳“发汗”方法。
结果：6种发汗方法玄参样品中哈巴苷含量在0.98%～1.21%之间，哈巴俄苷含量在0.93%～1.73%之间，肉桂酸含量在0.73%～0.97%之间，三种成分综合评分均以烘至半干后“发汗”制品较晒至半干后“发汗”制品高。
综合评分最高的发汗制品为“蒸后发汗”烘干品，具体“发汗”方法为将洗净后的新鲜玄参于笼屉内隔水蒸30min（按“圆气”后计）后，60℃烘至半干，于阴凉通风处堆放3d，60℃烘30min后再堆放，反复发汗3次。
结论：建议黔产玄参“发汗”过程中干燥时采用烘干法，发汗样品的处理采用“蒸后发汗”法。
【关键词】玄参;“发汗”方法;指标成分;综合评分法【中图分类号】R284.1 【文献标志码】 A【文章编号】1007-8517（2022）13-0031-05 Study on the Suitable “Sweating” Method of Scrophularia Ningp oensis In GuizhouDENG Ying LIU Jie WEI Xuejun* XIA Duo MA JiangcanQiannan Medical College for Nationalities，Duyun 558000，ChinaAbstract：Objective To optimize the best “sweating” method of Scrophularia ningpoensisin Guizhou.Methods Use different “sweat ”processing methods to prepare samples to be tested and the content of harpagoside，harpagoside and cinnamic acid were determinged by high performance liquid chromatography （HPLC），andthe best “sweating” method was optimized by the com prehensive scoring method.Results The contents of harpagoside， harpagoside and cinnamic acid in the samples of six sweating methods are 0.98%-1.21%，0.93%-1.73% and 0.73%-0.97%. The comprehensive scores of the three components are that the amount of “sweating” products after drying to semi dry is higher than that after drying to semi dry.The sweating products with the highest comprehensive score are “sweating after steaming”. The specific “sweating”method is to steam the net fresh Scrophularia ningpoensis in the cage for 30 minutes （calculated according to the “round gas”）， bake it at 60℃to semi dry， stack it in a cool and ventilated place for 3 days， bake it at 60℃ for 30 minutes， and then stack it again to prevent recurrent sweating for 3 times.Conclusion It is suggested that the drying method should be used in the“sweating” process of Scrophularia ningpoensisin Guizhou，and the “sweating after steaming” method should be used for the treatment of sweating samples.Key words：Scrophularia Ningpoensis;“Sweat” Method;Index Components;Comprehensive Scoring Method玄參为玄参科植物玄参Scrophularia ningpoensis Hemsl.的干燥根，具有清热凉血、滋阴降火、解毒散结的功能，临床常用于治疗热病热入营血、温毒发斑、热病伤阴、舌绛烦渴、津伤便秘、骨蒸劳嗽、目赤、咽痛、白喉、瘰疬与痈肿疮毒等症候，主产浙江、贵州、四川与河北等省区[1]。
HPLC_UV波长转换法测定玄参药材及饮片中哈巴苷与哈巴俄苷的含量
［关键词］ 玄参； 哈巴苷； 哈巴俄苷； 高效液相色谱法
玄 参 来 源 于 玄 参 科 植 物 浙 玄 参 Scrophularia ningpoensis Hemsl 的干燥根，为常用中药，具有凉血 滋阴、泻火解毒的功效。玄参主要含环烯醚萜类、苯 丙素苷类成分［1］，其中哈巴苷（ harpagide） 和哈巴俄 苷（ harpagoside） 为 2 个主要环烯醚萜苷成分，本课 题组以往研究发现皮下注射哈巴俄苷能使阴虚小鼠 抑制的免疫功能恢复； 哈巴苷、哈巴俄苷均能促进阴 虚小鼠体外脾淋巴细胞增殖； 认为哈巴俄苷为玄参 特征性有效成分［2］。2005 年版《中国药典》［3］以哈 巴俄苷的含量作为玄参药材的质量控制标准。本课
分别取玄参药材及饮片 粉 末 （ 过 40 目 筛） 约 0. 5 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入 50% 甲 醇 50 mL，密塞，称定质量，浸泡 1 h 后，超 声 处 理 （ 500 W，40 kHz） 45 min（ 水温保持 20 ～ 30 ℃ ） ，放 冷，再称定质量，用 50% 甲醇补足减失的质量，摇 匀，0. 45 μm 微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。 2. 4 标准曲线绘制
中药玄参中哈巴俄苷和肉桂酸的高效液相色谱法测定
玄参中4种主要活性成分的HPLC定量分析
玄参中4种主要活性成分的HPLC定量分析刘承伟;毕志明;祝艳斐;李萍【期刊名称】《中国医疗前沿》【年(卷),期】2007(000)021【摘要】目的建立应用HPLC-UV同时测定玄参中4种主要活性成分--哈巴俄苷、肉桂酸、安格洛苷C和acteoside含量的方法.方法采用Hypersil BDS-C18色谱柱(4.0 mm ×250 mm,5 μm),流动相为乙腈和1%醋酸水溶液,梯度洗脱,流速1 mL·min-1,检测波长278 nm,柱温25℃.结果哈巴俄苷、肉桂酸、安格洛苷C和acteoside线性范围分别为15.12～302.4 mg·L-1,7.72～154.4 mg·L-1,24.84～496.8 mg·L-1,6.64～132.8 mg·L-1;平均回收率(n=5)分别为101.59%(RSD=2.40%),96.75%(1.32%),100.11%(3.95%),99.89%(2.08%).结论本方法简单、快速、准确可靠,可作为玄参药材的质量控制方法.【总页数】3页(P1614-1616)【作者】刘承伟;毕志明;祝艳斐;李萍【作者单位】中国药科大学现代中药教育部重点实验室、生药学教研室,南京,210038;中国药科大学现代中药教育部重点实验室、生药学教研室,南京,210038;中国药科大学现代中药教育部重点实验室、生药学教研室,南京,210038;中国药科大学现代中药教育部重点实验室、生药学教研室,南京,210038【正文语种】中文【中图分类】R284.1【相关文献】1.HPLC法测定苦玄参中苦玄参苷IA的含量 [J], 陈勇;甄汉深;刘婧;李耀华;叶乐2.RP-HPLC法同时测定小儿肺热咳喘颗粒中两种主要活性成分的含量 [J], 郝乘仪;张慧锋;杨明慧;3.RP-HPLC法同时测定小儿肺热咳喘颗粒中两种主要活性成分的含量 [J], 郝乘仪;张慧锋;杨明慧4.HPLC-UV双波长法同时测定玄参中5种主要成分的含量 [J], 龚友兰;向大雄;邓长凤;阳苗5.复方丹参制剂中活性成分的HPLC同时定量分析 [J], 邢俊波;方白玉因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
HPLC法测定复方玄参止咳胶囊中哈巴俄苷
HPLC 法测定复方玄参止咳胶囊中哈巴俄苷刘 霞,冯玛莉,李培毅,贾力莉,牛艳艳,武玉鹏 (山西省中医药研究院,山西太原 030012)摘 要:目的 建立复方玄参止咳胶囊中哈巴俄苷的测定方法。
方法 采用高效液相色谱法,Irregular C 18(250mm ×416mm ,10μm );乙腈2110%醋酸(26∶74)为流动相;检测波长为278nm ;柱温为室温。
结果 哈巴俄苷在01061～11076μg 线性关系良好,r =019999,平均加样回收率为9916%,RSD 为2106%。
结论 该方法简便、快速、准确,为复方中测定哈巴俄苷提供了可靠的方法。
关键词:复方玄参止咳胶囊;哈巴俄苷;高效液相色谱中图分类号:R286102 文献标识码:A 文章编号:025322670(2009)0120069202 复方玄参止咳胶囊由玄参、知母、麦冬等10余味中药组成,具有解热润肺、化痰止嗽的功效,主治外感风热引起的咳嗽痰盛,口干舌燥,腹满便秘等症。
本品以玄参为君药,其中哈巴俄苷为玄参的有效成分。
哈巴俄苷具有抗慢性炎症、降压、镇痛、解痉、抗乙肝病毒以及免疫促进作用,且与滋阴功效密切相关[1]。
《中国药典》2005年版玄参药材中哈巴俄苷的测定采用梯度洗脱的HPL C 法测定,该方法用于复方玄参止咳胶囊中哈巴俄苷的测定时,稳定性差,哈巴俄苷色谱峰分离度、拖尾因子均达不到规定要求。
因此本实验采用H PL C 法对复方玄参止咳胶囊中的哈巴俄苷进行了测定,采用固定比例的流动相稳定性好,并经过大孔吸附树脂法进行供试品的纯化处理,方法操作简便、结果准确,可用于复方玄参止咳胶囊的质量控制,同时也为复方中测定哈巴俄苷提供了一定的参考。
1 仪器与试剂高效液相色谱仪:L C —6A 泵、SPD —6AV 紫外检测器、SIL —6A 自动进样器,日本岛津;EC2000色谱数据处理工作站,大连依利特科学仪器有限公司;B P211D 、B P310P 电子天平,德国赛多利斯。
HPLC法测定不同产地玄参的肉桂酸含量
酸含量均无显著性差异 。
玄参色谱图中可以
看出 ,保留时间在 1. 500、1. 850、3. 600m in 左右均有色谱
峰 ,这说明还有其它 3种成分 。
分析这 4种不同产地的玄参色谱图 ,发现主要色谱峰
中 华
的整体图谱基本一致 ,且肉桂酸的含量无显著性差异 。这
(图 2) 。
产地 样品平均质量 ( g) 峰面积平均值 肉桂酸平均含量 (% )
白川县 宝庆县 浙江省 广东省
0. 5002 0. 5021 0. 5014 0. 5025
2. 21892 2. 01774 2. 05796 1. 88627
0. 00674 0. 00602 0. 00582 0. 00564
工作站 , UV - 1600 (北京瑞利公司 ) 。
供试品溶液的制备 : 精密称取 35 份玄参药材粉末各
试剂 :乙 腈 为 色 谱 纯 (山 东 禹 王 实 业 有 限 公 司 ) , 经 0. 45cm尼龙膜过滤 、超声 。水为超纯水 ,经 0. 45cm 水系膜
0. 5g,于具塞三角瓶中精密加入甲醇 - 水 (30 ∶70) 50mL ,称 重 ,浸泡 1h 后超声提取 30m in,放冷 ,补足失重 ,摇匀 、过
图 1 紫外波长扫描图 10μL ,测定峰面 积 的 积 分 值 , 以 标 准 液 中 肉 桂 酸 的 含 量 (μg)为横坐标 ,以峰面积为纵坐标进行回归 ,得到肉桂酸 的回归方程为 : y = 309. 6x + 0. 1355, r = 0. 9999。肉桂酸在 峰面积处于 1. 08468 ～62. 0274范围内呈良好的线性关系
西等省 。为常用中药 ,具有凉血滋阴 、泻火解毒之功效 ,用 2 方法和结果
高效液相色谱—紫外双波长法同时测定玄参配方颗粒中3种主要成分的含量
高效液相色谱—紫外双波长法同时测定玄参配方颗粒中3种主要成分的含量目的建立高效液相色谱-紫外双波长法同时测定玄参配方颗粒中3种主要成分哈巴苷、哈巴俄苷和肉桂酸含量的方法。
方法采用Ultimate AQ-C18色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），流动相为1%冰醋酸水溶液和乙腈，梯度洗脱，流速1.0 mL/min，检测波长前13 min为210 nm，13 min后为278 nm，柱温30 ℃。
结果哈巴苷、哈巴俄苷、肉桂酸的线性范围分别为0.066 54～0.665 4 μg（r=1.000 0）、0.024 23～0.242 3 μg （r=0.999 9）、0.100 28～1.002 8 μg（r=0.999 9），平均加样回收率（n=6）分别为99.80%±1.22%、100.31%±1.30%、100.22%±1.24%。
结论本法简单、灵敏度高、重复性好、准确可靠，可为玄参配方颗粒的质量控制以及标准研究提供参考依据。
标签：玄参配方颗粒；哈巴苷；哈巴俄苷；肉桂酸；高效液相色谱-紫外双波长法中药玄参为玄参科植物玄参Scrophularia ningpoensis Hemsl.的干燥根，始载于《神农本草经》，列为中品，为“浙八味”中药之一。
玄参配方颗粒是在中医药理论指导下，采用现代生产工艺，以水作为提取溶媒，对单味玄参药材饮片进行煎煮、过滤、浓列检测器G1315D；ChemStation for LC 3D systems色谱工作站；Ultimate AQ-C18色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；Sartorius BP210S电子分析天平（德国）；KQ-500DE型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）。
哈巴俄苷对照品（批号111730-201106，含量以96.0%计，中国食品药品检定研究院），哈巴苷对照品（批号111729-201204，含量以94.5%计，中国食品药品检定研究院），肉桂酸对照品（批号110786-200503，中国药品生物制品检定所）。
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HPLC测定玄参中哈巴俄苷和肉桂酸
龙澜;帅超群
【摘要】建立一种检测玄参中哈巴俄苷和肉桂酸的方法.采用乙腈-1%醋酸为流动相,检测波长278nm,流速1.0mL/min,柱温30℃.以30%甲醇为玄参的提取溶剂.哈巴俄添加回收率96.53%～98.74%,RSD为1.03%(n=5).肉桂酸的添加回收率97.24%～101.18%,RSD为1.49%(n=5).该方法操作简便、准确、快速、重复性好、灵敏度高,能准确检测玄参申哈巴俄苷和肉桂酸的含量.
【期刊名称】《湖北民族学院学报（自然科学版）》
【年(卷),期】2011(029)004
【总页数】3页(P471-472,480)
【关键词】玄参;哈巴俄苷;肉桂酸;HPLC
【作者】龙澜;帅超群
【作者单位】湖北省农业科学创新中心鄂西综合实验站,湖北,恩施,445000;恩施清江生物工程有限公司,湖北,恩施,445000
【正文语种】中文
【中图分类】R927.2
玄参属玄参科植物玄参(Scrophularia ningpoensis Hemsl)[1]的根据《神农本草经》记载,玄参具有滋阴、降火、生津、凉血、解毒等功效.用于目赤、痈肿疮毒、热病伤阴、舌绛烦渴等症.现代医学研究表明，玄参还具有抗炎[2]、抗菌[3-4]、保
肝用抗氧活性[5]、降压[6]、免疫促进[7]和镇痛[8]等作用.采用反相高效液相色谱法, 比较了不同产地玄参中哈巴俄苷和肉桂酸的含量, 现将结果介绍如下.
1 仪器与试药
Waters高效液相2996；Waters 2996 PD二级管阵列检测器；KQ-250D型超声波清洗器；哈巴俄苷、肉桂酸对照品(成都普思生物科技有限公司，批号：
Ps08060501，Ps08092502)，色谱乙腈，去离子水，甲醇、乙酸乙酯，丙酮等试剂均为分析纯，玄参样品采自湖北巴东、湖南龙山、重庆南山、贵州道真、陕西镇平.
表1 流动相梯度洗脱比例Tab.1 The proportion of gradient in the mobile phase时间/min乙腈/%1%醋酸/%0-2020→5080→50
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱:依利特C18色谱柱(4.6×200 mm，5 μm)，流动相:乙腈，1%醋酸溶液，
按表1进行梯度洗脱.
流速:1.0 mL·min-1；检测波长:278 nm；柱温:25℃，理论板数按哈巴俄苷峰计算不得低于5 000.
图1 哈巴俄苷、肉桂酸对照品图2 玄参样品 Fig.1 The reference substance
of Arpagoside and cinnamic Acide Fig.2 The sample of Figwort root and Cinnamic Acid
2.2 对照品溶液的制备
取哈巴俄苷，肉桂酸对照品适量，用30%甲醇分别配置成含哈巴俄苷300 μg/mL，肉桂酸500 μg/mL的对照品溶液.
2.3 供试品的制备
精确称取玄参药材(粉碎过4号筛) 0.5 g，置具塞锥形瓶中，精密称定，分别精密
加入30%甲醇50 mL、超声波提取50 min，过滤，定容于50 mL容量瓶中，摇匀，作为供试品.
2.4 线性关系的考察
取对照品溶液,按照2.1的色谱条件, 分别进样2、5、10、20、40 μL，以峰面积(A)对浓度(C)回归分析，得哈巴俄苷标准曲线回归方程： A=15.83x+27.58,相关系数r=0.999 91；肉桂酸标准曲线回归方程： A=36.32x+8.97,相关系数
r=0.999 95；结果表明,哈巴俄苷和肉桂酸在此条件下呈良好的线性关系.
表2 添加回收率实验Tab.2 The adding recoveries of the expriment成分称样量/g加入量/mg回收率/%平均回收率
/%RSD/%0．55090．596．530．50870．598．74哈巴俄苷0．51790．598．6798．381．030．52580．599．580．53740．598．390．54870．797．350．53460．798．04肉桂酸0．52730．7101．1898．641．490．52080．797．240．50430．799．41 2.5 精密度试验
按照2.1的色谱条件连续进同一供试品溶液5次，测定哈巴俄苷峰面积的RSD为
1.93%，肉桂酸面积的RSD为1.67%.
2.6 稳定性试验
取同一供试品溶液，按每2 h测定一次，供试品中哈巴俄苷峰面积的RSD为1.21%(n=7) ，肉桂酸峰面积的RSD为1.34%(n=7)，表明供试品溶液在12 h内稳定.
2.7 重复性试验
取玄参药材5份，按照2.3的方法平行制备5份供试品，依法测定，计算哈巴俄苷保留时间和峰面积的RSD分别为0.45%，1.32%；肉桂酸保留时间和峰面积的RSD分别为0.39%，1.48%，表明该方法的重复性较好.
2.8 回收率试验
取已知含量的玄参样品约0.5 g，精密称取5份，分别加入等量的对照品，按照
2.3的方法进行处理，计算回收率，结果见表2.
2.9 样品的测定
按2.3项下方法操作制得的样品溶液,进样20 μL,在278 nm处检测,玄参样品图2
的HPLC色谱图.结果5 种不同产地玄参中哈巴俄苷、肉桂酸的含量如下表3.
3 讨论
1)在对玄参提取溶剂的考察过程中，比较30%甲醇、50%甲醇、70%甲醇、甲醇、丙酮、乙酸乙酯得提取效果，实验发现30%甲醇的提取效果是最好的；并对超声
波提取时间进行考察，结果采用超声提取50min为最佳方法.
2)通过对哈巴俄苷、肉桂酸的三维扫描，在278 nm处，哈巴俄苷、肉桂酸的吸
收较高，且能与杂质少.
3)本实验所建立的测定玄参中哈巴俄苷、肉桂酸含量的方法，准确度高，操作简便、准确、快速、重复性好、灵敏度高，能准确检测玄参中哈巴俄苷、肉桂酸的含量. 参考文献:
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