微生物实验四放线菌、霉菌、酵母菌的形态观察
实验四放线菌、霉菌、酵母菌形态及大小观察
气生菌丝发育到一定阶段，其上可 气生菌丝发育到一定阶段， 分化出形成孢子的菌丝，即孢子丝， 分化出形成孢子的菌丝，即孢子丝， 又称产孢丝或繁殖菌丝。 又称产孢丝或繁殖菌丝。其形状和 排列方式因种而异， 排列方式因种而异，常被作为对放 线菌进行分类的依据。 线菌进行分类的依据。 营养菌丝发育到一定阶段， 营养菌丝发育到一定阶段，伸向空 间形成气生菌丝， 间形成气生菌丝，叠生于营养菌丝 可覆盖整个菌落表面。 上，可覆盖整个菌落表面。在光学 显微镜下观察，颜色较深， 显微镜下观察，颜色较深，直径较 ），有的产色素 粗（1-1.4 µm），有的产色素。 ），有的产色素。 营养菌丝生长于培养基内或紧贴表 吸收营养，也称基内菌丝。 面，吸收营养，也称基内菌丝。一 般无隔膜，直径0.2-0.8 µm，长度差 般无隔膜，直径 ， 别很大，有的可产生色素。 别很大，有的可产生色素。
实验四 放线菌、霉菌、酵母菌 放线菌、霉菌、 形态（及大小） 形态（及大小）观察
一、实验目的
• • 观察了解放线菌、 观察了解放线菌、霉菌及酵母菌的形态 特征 掌握用测微尺测定微生物细胞大小的方 法
二、实验原理
• （一）放线菌 • 单细胞、多核区、丝状的革兰氏阳性细菌。 单细胞、多核区、丝状的革兰氏阳性细菌。 在形态上具有分枝状菌丝， 在形态上具有分枝状菌丝，以孢子进行繁 殖。放线菌实际上是属于细菌范畴内的原 核微生物
四、实验内容及操作
• • • • （一）放线菌形态观察（插片法） 放线菌形态观察（插片法） （二）霉菌形态观察 （三）酵母菌形态观察 （四）微生物大小测定
--
融合
子囊孢子
酵母菌菌落特征
与细菌菌落类似，但一般较细菌菌落大且厚， 与细菌菌落类似，但一般较细菌菌落大且厚，表面 湿润，粘稠，易被挑起，多为乳白色，少数呈红色。 湿润，粘稠，易被挑起，多为乳白色，少数呈红色。
实验4放线菌、酵母菌、霉菌形态观察.
实验4放线菌、酵母菌、霉菌形态观察.实验四放线菌、酵母菌、霉菌形态观察（一）放线菌的形态观察1 目的观察放线菌的基本形态特征掌握培养放线菌的几种方法2 原理放线菌一般由分枝状菌丝组成，它的菌丝可分为基内菌丝(营养菌丝)、气生菌丝或有孢子丝三种。
放线菌生长到一定阶段，大部分气生菌丝分化成孢子丝，通过横割分列的方式产生成串的分生孢子。
孢子丝形态多样，有直、波曲、钩状、螺旋状、轮生等多种形态。
孢子也有球形、椭圆形、杆状和瓜子状等等。
它们的形态构造都是放线菌分类鉴定的重要依据。
放线菌的菌落早期绒状同细菌菌落月牙状相似，后期形成孢子菌落呈粉状、干燥，有各种颜色呈同心圆放射状。
3 材料3.1 菌种灰色链霉菌(Str. griseus),天蓝色链霉菌(Str. coelicolor),细黄链霉菌（Str.microflavus）。
3.2 培养基高氏1号培养基。
3.3 器皿培养皿，载玻片、盖玻片、无菌滴管、镊子、接种环、小刀(或刀片)、水浴锅，显微镜，超净工作台，恒温培养箱。
4 流程4.1插片法: 倒平板→插片→接种→培养→镜检→记录绘图4.2压印法: 倒平板→划线接种→挑取菌落→加盖玻片→镜检→记录绘图4.3埋片法: 倒琼脂→切槽→接种→培养→镜检→记录绘图5 步骤5.1插片法5.1.1倒平板将高氏1号培养基熔化后，倒10~12毫升左右于灭菌培养皿内，凝固后使用.5.1.2插片将灭菌的盖玻片以45度角插入培养皿内的培养基中，插入深约为1/2或1/3(图5-1)。
5.1.3接种与培养用接种环将菌种接种在盖玻片与琼脂相接的沿线，放置28℃培养3～7天。
5.1.4观察培养后菌丝体生长在培养基及盖玻片上，小心用镊子将盖玻片抽出，轻轻擦去生长较差的一面的菌丝体，将生长良好的菌丝体面向的载玻片，压放于载玻片上。
直接在显微镜下观察。
5.2压印法5.2.1制备放线菌平板同5.1.1。
在凝固的高氏1号培养基平板上用划线分离法得到单一的放线菌菌落。
微生物实验思考题参考标准答案及知识要点
微生物实验思考题参考答案及知识要点一．酵母菌形态观察及死活细胞鉴别1.吕氏碱性美蓝染液浓度和作用时间的不同对酵母菌死细胞数量有何影响?是分析其原因。
美蓝是一种无毒性的染料，它的氧化型呈蓝色，还原型无色。
用美蓝对酵母的活细胞进行染色时,由于细胞的新陈代谢作用,细胞内具有较强的还原能力，能使美蓝由蓝色的氧化型变成为无色的还原型。
因此,具有还原能力的酵母活细胞是无色的，而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则呈蓝色或淡蓝色,借此即可对酵母菌的死细胞和活细胞进行鉴别。
美蓝浓度高了,代谢不太活跃的活细胞也会被染色,从而使观察到的死细胞较多,活细胞较少；反之，则代谢微弱的细胞也能还原美蓝,不被染色，从而使观察到的死细胞较少，活细胞较多。
二.细菌的简单染色和革兰氏染色1.革兰氏染色中那一步是关键？为什么？你是如何操作的?革兰氏染色的关键步骤是:乙醇脱色(是脱色时间）。
如果脱色过度,革兰氏阳性菌也可被脱色而被误认为是革兰氏阴性菌；如脱色时间过短,革兰氏阴性菌也可被脱色而被误认为是革兰氏阳性菌。
脱色时间的长短还受涂片的厚薄，脱色是玻片晃动的快慢及乙醇用量的多少等因素的影响，难以严格规定（脱色是应当控制速度，脱色时间一般为20—30s)。
2. 固定的目的之一是杀死菌体，这与自然死亡的菌体有何不同?自然死亡的菌体本身已经部分自溶,结构已经改变。
固定杀死细菌时细菌结构是保持死亡时的状态的。
３. 不经复染这一步能否区分革兰氏阳性菌和阴性菌？能。
在酒精脱色后,不被酒精脱色而保留紫色者为革兰氏阳性菌（G＋),被酒精脱色为革兰氏阴性菌。
最后一步用番红染液复染，是为了让结果更清楚。
4．涂片为什么要固定,固定适应注意什么问题?a 杀死细菌并使菌体黏附与玻片上;b增加其对染料的亲和力。
固定时应注意：手持玻片,菌膜朝上,在微火过3次（手指触摸玻片反面，不烫手为宜),固定时应尽可能维持细胞原有形态,防止细胞膨胀或收缩。
三. 霉菌、放线菌的形态观察1．镜检时，如何区分基内菌丝与气生菌丝？一般气生菌丝颜色较深，直生或分枝丝状,比基内菌丝粗；而基内菌丝色浅、发亮,可看到横隔膜,继而断裂成球状或杆状小体。
细菌、酵母菌、放线菌、霉菌四大菌落形态观察
一、实验目的
1.熟悉各大类微生物群体类微生物
二、基本原理
区分和鉴别各大类微生物通常不外乎包括群体形 态和个体形态两方面的观察，而在一般条件下，特别 是在菌种筛选和菌种辨别等方面，多半首先采用观察 群体形态基本特征的方法来区分各大类微生物。这种 方法简便快速，应用非常广泛。
四、实验结果
微生物 菌落 特性
大肠 杆菌
干湿
啤酒 酵母
放线菌
曲霉
根霉
青霉
厚薄
松紧
大小 结果
微生物
菌落 特征
细菌
酵母
霉菌
放线菌
干湿 厚薄 松紧 大小
很湿或较湿 较湿
干燥
干燥或较干燥
透明或 稍透明
稍透明
不透明
不透明
松
松
小而突起或 大而平坦
大而突起
很紧 小而紧密
较紧
大而疏松或 大而致密
青霉（Penicillium Sp.）
菌丝较粗壮，形成的 菌落较疏松，呈绒毛 状、絮状或蜘蛛状， 菌落大。
曲霉（Aspergillus Sp.）
曲霉菌是一种典型的丝状 菌，菌落生长较快，结构 疏松，表面灰绿色，背面 无色或略呈褐色。菌体有 许多复杂的分枝菌丝构成。
根霉（Phizopus Sp.）
大肠杆菌（Escherichia coli）
啤酒酵母 （Saccharomyces cereuisiae）
大多数酵母菌的 菌落特征与细菌 相似，但比细菌 菌落大而厚，菌 落表面光滑、湿 润、粘稠，容易 挑起，菌落质地 均匀，正反面和 边缘、中央部位 的颜色均一，菌 落多为乳白色。
放线菌5406 （Streptomyces microflavus）
实验三 酵母菌、霉菌、放线菌的形态观察
实验三酵母菌、霉菌、放线菌的形态观察一目的要求1.观察酵母菌的个体形态及出芽生殖方式，学习区分酵母菌死活细胞的实验方法。
2.掌握酵母菌的菌落特征及其与细菌菌落的区别。
3．学会识别霉菌的菌落特征，掌握霉菌的乳酸石炭酸制片法。
4．学习观察霉菌个体形态及各种无性孢子的方法。
5．学会观察放线菌的菌落特征，个体形态及其繁殖方式。
二实验原理1．酵母菌是不运动的单细胞真核微生物，多数是圆形或椭圆形，其大小通常比常见细菌大几倍甚至十几倍。
用美蓝对酵母菌的活细胞进行染色时，由于细胞的新陈代谢作用，细胞内具有较强的还原能力，能使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型，因此，具有还原能力的酵母活细胞是无色的、而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则呈蓝色或淡蓝色，借此即可对酵母菌的死细胞和活细胞进行鉴别。
2.霉菌形态比细菌、放线菌复杂，个体比较大，具有分支的菌丝体和分化的繁殖器官。
霉菌菌丝体(尤其是繁殖菌丝)及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。
因此，在观察时要注意菌丝直径大小，菌丝体有无隔膜，营养菌丝有无假根，无性繁殖形成的孢子是那一种？孢子是怎样着生的？3.放线菌是指能形成分枝丝状体或菌丝体的一类革兰氏阳性细菌。
常见放线菌大多能形成菌丝体，紧贴培养基表面或深入培养基内生长的叫基内菌丝，基内菌丝生长到一定阶段还能向空气中生长出气生菌丝，并进一步分化产生孢子丝及孢子。
孢子的表面光滑或粗糙、圆或椭圆，孢子有各种颜色，这些形态特点都是鉴定放线菌的重要依据。
三实验材料1．菌种（1）啤酒酵母、面包酵母、裂殖酵母、热带假丝酵母;（2）毛霉、黑根霉、青霉、黑曲霉;（3）白色链霉菌、红色链霉菌2. 0.1%的美蓝染色液，乳酸石炭酸溶液、乳酸石炭酸棉蓝溶液, 芽孢染色液、无菌水、盖玻片、载玻片，接种钩，接种铲。
四内容与步骤1．酵母菌(1)菌落特征和菌苔特征的观察。
观察菌落表面干燥或湿润、隆起形状、边缘整齐度、大小、颜色等，并用接种环挑菌，注意与培养基结合是否紧密。
4实验四放线菌、酵母和霉菌形态的观察
一、实验目的要求
• 1.学习掌握观察放线菌、霉菌和酵母菌形 态的基本方法。
• 2.加深理解放线菌、霉菌和酵母菌的形态 特征。
二、实验原理
放线菌、霉菌和酵母菌分类地位
原核类：细菌、古生菌、放线菌、蓝细菌、支原体 、立克次氏体、衣原体等。 真核类：真菌（酵母菌、霉菌、蕈菌）、原生动物 、 显微藻类。 非细胞类：病毒、亚病毒（类病毒、朊病毒等）
• 注意：染色水洗时水流要缓，以免破坏孢子丝形态。
放线菌 10092436俞佩枫拍摄
放线菌
四、实验步骤
• 2. 酵母菌形态观察及死活细胞鉴别： • 美蓝浸片的观察: （1）滴一小滴0.05％吕氏碱性美蓝染色液于载玻片
中央，按无菌操作取少量酵母菌与其混合均匀。 • 用镊子取一块盖玻片，将盖玻片一边与菌体接触，
取少量已经产孢子的霉菌菌丝； （3）放在载玻片上的染液中，用解剖针小心
将菌丝分开； （4）盖上盖玻片，置于10X低倍镜下观察，
必要时换40X高倍镜.(不用油镜!)
黑曲霉 10092436俞佩枫拍摄
四、实验步骤
3. 霉菌的形态观察 注意： • 用镊子取菌和用解剖针分散菌丝时要细心，
尽量减少菌丝断裂及形态被破坏，盖盖玻 片时避免气泡产生。
• 1. 放线菌孢子丝形态观察(插片法) （1） 融化高氏1号培养基，冷却至50度倒平板，平
板要厚一些，以利于插片。接种、插片、培养。 （2）染色：用镊子小心取出盖玻片，并将其背面附
着的菌丝体擦干净，用0.05%美蓝染色约1min后 水洗。然后将盖玻片无菌丝体的面放在载玻片上。 （3）1．放线菌：是一类主要呈菌丝状生长和孢子繁 殖的陆生性较强的革兰氏阳性细菌，广泛分布 于含水量低、有机质丰富的微碱性土壤中。
微生物学实验10 放线菌、酵母菌和霉菌的形态观察
南京大学生物技术系实验报告题目放线菌、酵母菌和霉菌的形态观察【一、实验目的】1、通过菌落及细胞形态的观察和比较，掌握区分细菌、放线菌、酵母菌和霉菌的要点。
2、掌握观察放线菌孢子的方法。
3、掌握观察霉菌孢子及根霉假根的方法。
4、了解酵母菌子囊孢子形成的方法。
【二、实验原理】1、三类微生物菌落形态特征：霉菌形态比细菌、酵母菌复杂，个体比较大，具有分枝的菌丝体和分化的繁殖器官。
霉菌营养体的基本形态单位是菌丝，包括有隔菌丝和无隔菌丝。
营养菌丝分布在营养基质的内部，气生菌丝伸展到空气中。
营养菌丝体除基本结构以外，有的霉菌还有一些特化形态，例如假根、匍匐菌丝、吸器等。
霉菌的繁殖体不仅包括无性繁殖体，例如分生孢子，孢子囊等，包裹其内或附着其上的有各类无性孢子；还包括有性繁殖结构，例如子囊果，其内形成有性孢子。
在观察时要注意细胞的大小，菌丝构造和繁殖方式。
放线菌一般由分枝状菌丝组成，它的菌丝可分为基内菌丝(营养菌丝)、气生菌丝或有孢子丝三种。
放线菌生长到一定阶段，大部分气生菌丝分化成孢子丝，通过横割分列的方式产生成串的分生孢子。
孢子丝形态多样，有直、波曲、钩状、螺旋状、轮生等多种形态。
孢子也有球形、椭圆形、杆状和瓜子状等等。
它们的形态构造都是放线菌分类鉴定的重要依据。
酵母菌是单细胞的真核微生物，细胞核和细胞质有明且分化，个体比细菌大得多。
酵母菌的形态通常有球状、卵园状、椭圆状、柱状或香肠状等多种。
酵母菌的无性繁殖有芽殖、裂殖和产生掷孢子；酵母菌的有性繁殖形成子囊和子囊孢子。
酵母菌母细胞在一系列的芽殖后，如果长大的子细胞与母细胞并不分离，就会形成藕节状的假菌丝。
2、三点接种法与霉菌菌落形态的观察霉菌的菌落形态是分类鉴定的重要依据。
为便于观察，通常用接种针挑取极少量霉菌孢子点接于平板中央，使其形成单个菌落；或在平板上接三点，即在等边三角形的三个顶点上接种，经培养后同一菌种可形成三个重复的单菌落。
后一方法称为三点接种法。
04 实验四 放线菌、酵母和霉菌形态的观察
04 实验四放线菌、酵母和霉菌形态的观察实验目的：1. 了解微生物的形态特征。
2. 熟悉显微镜的使用方法，学习普通染色技术。
3. 学习鉴别放线菌、酵母和霉菌的形态特征。
实验材料：1. 盐酸裂解液、甲醛定型液、碘酒、甲基橙、溴酚蓝等。
2. 放线菌、酵母和霉菌的培养物。
实验步骤：1. 取一小块培养物放在玻片上，滴上一滴生理盐水并用小棒子将其研磨均匀。
2. 放线菌培养物制片：将研磨好的放线菌制成薄片，滴上盐酸裂解液使其变成透明，定型液使其固定，并在空气中晾干。
然后，在火上加热定邦，再用碘酒染色，过后清水洗净，醋酸洗净并晾干或用吹风机吹干。
3. 酵母培养物制片：将研磨好的酵母制成薄片，滴上碘酒染色剂染色，过后清水洗净，醋酸洗净，晾干或用吹风机吹干。
4. 霉菌培养物制片：将研磨好的霉菌制成薄片，滴上甲基橙染色剂染色，过后清水洗净，醋酸洗净，晾干或用吹风机吹干。
5. 用显微镜观察制片。
实验结果：放线菌：放线菌为革兰阳性菌，细胞形状呈弯曲的短小棍形，光学显微镜下看到的细胞较长，一般在1-20微米之间，可以分枝，分枝形成的菌丝从外形上呈现出类似于蜘蛛网的形状。
勃林美细胞内有许多成熟的孢子，呈现为典型的链状。
常常在不规则的小菌落或黏液内生长。
酵母菌：酵母细胞直径一般在2-5微米之间，为单细胞生物，在将染好色的玻片放在光学显微镜下很容易看到直径3微米以上的球形，卵圆形等细胞结构，表面光滑。
细胞质软，柔软而透明。
霉菌：霉菌属真菌，具有多种形态，种类繁多，细胞直径1-5微米，长1-10微米，细胞呈现不规则形状，通常形成的是在菌丝基础上聚合并且扩展而成的菌落。
通过本次实验观察和比较放线菌、酵母和霉菌的形态特征，可以得出以下结论：1. 放线菌为分枝杆菌，细胞型态呈弯曲状，外观类似于蜘蛛网。
2. 酵母为单细胞生物，呈圆球形或卵圆形，表面光滑、整齐。
3. 霉菌属于真菌，细胞形态呈现不规则形状。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
根霉显微形态
毛霉与根霉的比较
①两者皆有假根，但根霉属有匍匐枝，毛霉属无。 ②根霉属有囊托，毛霉属无。③两者皆具囊轴④ 毛霉属孢子囊梗单株从菌丝上发生，分枝或不分 枝，根霉无分支。
二、实验原理
酵母
酵母菌是单细胞真核微生物。 酵母菌是单细胞真核微生物。 酵母菌细胞的形态通常有球形、 酵母菌细胞的形态通常有球形、 卵圆形、腊肠形、椭圆形、 卵圆形、腊肠形、椭圆形、柠檬 形或藕节形等。 形或藕节形等。比细菌的单细胞 个体要大得多，一般为1~5微米 个体要大得多，一般为1~5微米 ′5~30微米 酵母菌无鞭毛， ′5~30微米。酵母菌无鞭毛，不 微米。 能游动。 能游动。 酵母菌具有典型的真核细胞 结构,有细胞壁、细胞膜、细胞核、 结构,有细胞壁、细胞膜、细胞核、 细胞质、液泡、线粒体等， 细胞质、液泡、线粒体等，有的 还具有微体。 还具有微体gillus)是发酵工业和食品加工业的重要菌种， 曲霉 已被利用的近60种。2，000多年前，我国就用于制酱，也 是酿酒、制醋曲的主要菌种。现代工业利用曲霉生产各种 酶制剂(淀粉酶、蛋白酶、果胶酶等)、有机酸(柠檬酸、葡 萄糖酸、五倍子酸等)，农业上用作糖化饲料菌种。例如黑 曲霉、米曲霉等。
放线菌
放线菌的形态比细菌复杂些， 放线菌的形态比细菌复杂些， 但仍属于单细胞。 但仍属于单细胞。在显微镜 下，放线菌呈分枝丝状
根据菌丝形态 和功能的不同， 和功能的不同， 放线菌菌丝可分 为基内菌丝、气 基内菌丝、 生菌丝和孢子丝 三种。 三种。
革兰染色
二、实验原理
霉菌 霉菌是形成分枝菌丝的真菌的 霉菌是形成分枝菌丝的真菌的 统称。不是分类学的名词 统称。不是分类学的名词 霉菌是丝状真菌的俗称，意即 霉菌是丝状真菌的俗称，意即 “发霉的真菌”， 发霉的真菌”
五、实验结果
酵母 放大倍数 —×—
六、思考题
1. 比较毛霉和根霉、青霉和曲霉的形态异 比较毛霉和根霉、 同
七、下一个实验
实验五 微生物数量的测定
曲霉
红曲霉 黑曲霉 米曲霉
曲霉
曲霉的显微的显微结构
曲霉和青霉的异同
两者同属于曲霉科的 两者同属于曲霉科的，主要鉴别特征就是 曲霉科的，主要鉴别特征就是 孢子。曲霉成的是放射状的孢子 青梅成的 是扫把状的孢子 。 他们都属于半知菌，基本结构特征相同即 菌丝有隔，分生孢子，无有性世代等等。 显微镜下最容易观察到的是青霉扫帚状排 列的分生孢子小梗和曲霉膨大的分生孢子 头（顶囊），另曲霉的分生孢子梗直立于 菌丝独特厚壁的足细胞上。
啤酒酵母的菌落
红酵母的菌落
各种酵母菌的菌落
酵母菌和霉菌的培养对比
电镜下的酵母
三、实验器材
1、菌种：根霉、青霉、曲霉、放线菌、酵 母等标本片 2、显微镜、蒸馏水、插镜纸、香泊油、二 甲苯
四、实验方法和步骤
1. 寻找放线菌、霉菌、酵母菌的标本片，注意 寻找放线菌、霉菌、酵母菌的标本片，注意 各类型标本片的菌株名称。 各类型标本片的菌株名称。 2. 在显微镜下寻找观察各标本的最适合倍数， 从低倍镜、高倍镜再到油镜。 3. 在最适合倍数下画出所观察标本的形态 4. 实验完毕，注意镜头的清洗，特别是油镜 实验完毕，注意镜头的清洗，特别是油镜
实验四 放线菌、霉菌、 放线菌、霉菌、 酵母菌的形态观察
林标声
实验四 放线菌、霉菌、酵母菌的形态观察 放线菌、霉菌、 一、实验目的
1、学习掌握观察放线菌、霉菌标本片形态特征。 2、学习掌握观察酵母菌标本片形态特征。
二、实验原理---放线菌 实验原理---放线菌
放线菌 因菌落呈放线状而的得名
二、实验原理
毛霉
毛霉又叫黑霉、长毛霉。 菌丝无隔、多核、分枝状，在基物内外能 菌丝无隔、多核、分枝状，在基物内外能 广泛蔓延，有假根，无匍匐菌丝。 广泛蔓延，有假根，无匍匐菌丝。
毛霉
毛霉显微结构
根霉
根霉(Rhizopus)属于毛霉目 属于毛霉目 根霉 根霉在自然界分布很广，用途广泛，其淀粉酶活性很强， 是酿造工业中常用糖化菌。我国最早利用根霉糖化淀粉 （即阿明诺法）生产酒精。