骨髓淋巴细胞分离液试剂盒使用说明
淋巴细胞亚群检测试剂盒
02
产品用途与原理
检测目的与适用范围
检测淋巴细胞亚群
试剂盒可用于检测人体内淋巴细胞亚群的分布和比例，适用于免疫学、血液学等领域的研 究和应用。
评估免疫状态
通过对淋巴细胞亚群的检测，可以了解机体的免疫状态、免疫功能缺陷或免疫应答异常等 情况，为疾病诊断、预后评估等提供参考。
监测免疫治疗
在免疫治疗过程中，定期监测淋巴细胞亚群的变化有助于评估治疗效果、调整治疗方案以 及预测不良反应等。
生物医药研究领域应用
淋巴细胞亚群功能和分子机制研究 药物免疫学研究和评价
免疫应答和免疫调节研究 疫苗免疫效果评估和优化
其他应用场景与案例分享
健康体检和筛查 生物安全评估和检测
流行病学调查和监测 法医鉴定和亲子鉴定等司法鉴定领域
06
产品常见问题与解决方案
试剂配制问题与解决方案
01
02
总结词：试剂配制问题 通常涉及试剂配制过程 中出现的误差，如试剂 浓度不准确、试剂污染 、试剂失效等。
03
产品性能指标
灵敏度与特异性
灵敏度
试剂盒应能够检测到最低限度的淋巴细胞亚群，确保对微小变化做出准确反 应。
特异性
试剂盒应能够准确区分不同的淋巴细胞亚群，避免混淆和误判。
重复性与稳定性
重复性
使用相同样本和试剂盒多次检测时，应得到一致的检测结果。
稳定性
试剂盒在长时间储存和使用过程中应保持稳定，确保检测结果的可靠性。
可以对细胞进行定量和定性分析。03数据分析通过对检测数据的分析，可以获得淋巴细胞亚群的分布和比例等信息
，进而对机体的免疫状态进行评估。
样本要求与处理
样本类型
通常采用外周血或骨髓液等作为样本，要求采集新鲜、无污 染的样本。
大鼠骨髓淋巴细胞分离液使用方法
大鼠骨髓淋巴细胞分离液使用方法
大鼠骨髓淋巴细胞分离液的使用方法如下：
1. 悬浮细胞：将需要进行分离的细胞悬浮在分离液中。
2. 离心：将悬浮液在2000rpm的转速下离心5分钟，收集沉淀的细胞。
3. 清洗：使用清洗液清洗离心后的细胞沉淀，以去除杂质和多余的分离液。
4. 再次离心：将清洗后的细胞在相同条件下再次离心，以进一步纯化细胞。
5. 培养：将纯化后的细胞接种到培养基中进行培养，以进行后续的实验或研究。
需要注意的是，大鼠骨髓淋巴细胞分离液需要在无菌条件下操作，且启封后应置常温保存。
如果需要在4℃保存，应避免出现白色结晶，以免影响分离效果。
此外，该试剂盒易感染细菌，因此在使用过程中需要特别注意无菌操作。
以上是大鼠骨髓淋巴细胞分离液的使用方法，仅供参考，如需获取更多详细信息，建议查阅相关网站。
淋巴细胞分离液说明书
Lonza Walkersville, Inc.biotechserv@Tech Service: 800-521-0390Document # INST-17-829-1 06/07Walkersville, MD 21793-0127 USA© 2007 Lonza Walkersville, Inc.Lymphocyte Separation MediumInstruction For Use17-829EIntroductionLymphocyte Separation Medium (LSM) is a mixture of Ficoll® and sodium diatrizoate (Hypaque) with density adjusted to 1.077 g/ml. This sterile filtered product is intended for laboratory/manufacturing use, and is not for in vitro diagnostic use. It is commonly used to isolate lymphocytes from human blood. One protocol to accomplish this is presented here.Protocol1. Anticoagulated blood (citrated or heparinized)should be used.Note: Always treat human and other primatesource material as potentially infectious and take safety precautions.2. Dilute blood 1:1 with calcium-magnesium-freePBS and layer 9 ml onto 6 ml LSM. Use a clearplastic centrifuge tube with a cap. For largevolumes use a similar ratio of diluted blood toLSM.3. Centrifuge at 400xg for 15 minutes.4. Remove plasma-PBS without disturbing theinterface.5. Collect the interface with a cannula and dilute to20 ml in serum-free medium, such as RPMI1640.6. Centrifuge at 70xg for 10 minutes.7. Discard supernatant fluid and resuspend pelletin 2-3 ml serum-free medium.8. Count nucleated cells on a hemocytometer orelectronic counting device.9. Lymphocytes will be concentrated at theinterface, along with some platelets andmonocytes. Granulocytes will be found mostly in the Lymphocyte Separation Medium anderythrocytes will pellet at the bottom of the tube.References1. Boyum, A. 1968. Isolation of mononuclear cellsand granulocytes from human blood. Isolation of mononuclear cells by one centrifugation, and ofgranulocytes by combining centrifugation andsedimentation at 1 g. Scand. J. Clin. Lab. Invest.Suppl. 97:77-89.2. Boyum, A. 1976. Isolation of lymphocytes,granulocytes and macrophages. Scand. J. Clin.Lab. Invest. Suppl. 5:9-15.3. Boyum, A. 1977. Separation of lymphocytes,lymphocyte subgroups and monocytes: areview. Lymphology. 10-2:71-6.4. Boyum, A. 1984. Separation of lymphocytes,granulocytes and monocytes from human blood using iodinated density gradient media. Methods Enzymol. 108:88-102.5. Boyum, A. et al. 2002. Separation of HumanLymphocytes from Citrated Blood by DensityGradient (NycoPrep) Centrifugation: MonocyteDepletion Depending upon Activation ofMembrane Potassium Channels. Scand. J.Immunol. 56-1:76-84.6. Koistinen, P. 1987. Human peripheral blood andbone marrow cell separation using densitygradient centrifugation on Lymphoprep andPercoll in haematological diseases. Scand. J.Clin. Lab. Invest. 47-7:709-14.7. Rola-Pleszczynski, M. and W.H. Churchill. 1978.Purification of human monocytes by continuous gradient sedimentation in ficoll. J. Immunol.Methods. 20:255-62.Product Use StatementTHESE PRODUCTS ARE FOR RESEARCH USE ONLY. Not approved for human or veterinary use, for application to humans or animals, or for use in clinical or in vitro procedures.INST-17-829-1 06/07Ficoll is a trademark of GE Healthcare. All other trademarksherein are marks of Lonza Group or its subsidiaries.1。
人淋巴细胞分离液说明书(3篇)
第1篇一、产品概述本产品为一种生物医学试剂，主要用于从人血液中分离纯化淋巴细胞。
淋巴细胞是人体免疫系统的重要组成部分，广泛用于免疫学研究和临床诊断。
本产品采用特殊的分离技术，能够高效、快速地从人外周血中分离出高纯度的淋巴细胞，为后续的免疫学研究提供高质量的实验材料。
二、产品规格| 产品规格 | 批号 | 有效期 || :-------: | :---: | :----: || 100ml/瓶 | ABC123 | 2025年12月 |三、产品特性1. 高效分离：本产品采用独特的分离介质，能够高效地将淋巴细胞与其他血细胞分离，分离效率高，纯度好。
2. 操作简便：本产品使用方法简单，无需特殊设备，适合实验室常规操作。
3. 稳定性好：本产品在规定的储存条件下，稳定性良好，保质期内质量稳定。
4. 无污染：本产品在生产过程中严格遵循无菌操作规程，产品无细菌、病毒等生物污染。
四、产品用途1. 免疫学研究：用于分离淋巴细胞，进行细胞因子检测、细胞培养、细胞因子基因表达等研究。
2. 临床诊断：用于检测血液中的淋巴细胞，辅助诊断某些疾病，如自身免疫性疾病、肿瘤等。
3. 药物研发：用于药物筛选、药效评价等。
五、使用方法1. 准备工作：- 将分离液室温下平衡至室温。
- 准备无菌试管、移液器、吸头等实验器材。
- 准备适量抗凝剂（如EDTA-K2）。
2. 操作步骤：- 将抗凝全血加入分离管中，轻轻混匀。
- 将分离液加入另一支无菌试管中，加入量约为全血量的2倍。
- 将全血和分离液轻轻混合，避免产生气泡。
- 将混合后的样品垂直静置1-2小时，直至形成清晰的三层界面。
- 小心吸取淋巴细胞层，避免混入其他细胞层。
- 将淋巴细胞转移至新的无菌试管中，加入适量磷酸盐缓冲盐水（PBS）洗涤，重复洗涤2-3次，以去除残留的分离液和杂质。
- 最后，将洗涤后的淋巴细胞悬浮于适量的PBS中，即可进行后续实验。
六、注意事项1. 操作过程中应严格遵守无菌操作规程，防止污染。
MD PACIFIC 淋巴细胞分离液说明书
MD PACIFIC 淋巴细胞分离液说明书主要用途：淋巴细胞分离试剂是一种旨在通过葡聚糖和泛影酸钠混合液，达到特定比重，然后离心分层以获得纯化完整的单核细胞/淋巴细胞的权威而经典的技术方法。
可以被用于动物（大鼠、小鼠等）单核细胞/淋巴细胞的分离、鉴定、染色、标记、培养、DNA萃取、线粒体分离、细胞因子测定和细胞流式仪分析等研究。
产品严格无菌，即到即用，操作简易，分离出色，性能稳定，细胞活性保证。
技术背景：全血溶液含有血清、各种蛋白因子、无核血红细胞、血小板、多核白细胞和单核白细胞等。
为了获得纯化完整的单核白细胞/淋巴细胞，采用Boyum（1968）的离心技术，可以方便快速地从全血和骨髓中分离。
产品内容：淋巴细胞分离液（200）毫升产品说明书1份产品特点：-密度变化率依照Ficoll400泛影酸和氢氧化钠。
-最佳分离溶液的密度为参照具体产品的标签-生理学参数-在低粘度时高密度-无菌-即用型-溶液产品规格检测标准：热源检测结果：＜0.5EU∕ml无菌检测结果：已检测应用人外周血中分离出淋巴细胞的最佳试剂。
这种分离液同样可被用作从其它途径分离人的淋巴细胞，包括骨髓血细胞、脐带血细胞及组织匀浆。
实验步骤实验开始前，室温预热淋巴细胞分离液。
然后进行下列操作。
（注：上述方法适用于从外周血中分离淋巴细胞。
如从骨髓、脐带及组织匀浆中分离，需要先去除红细胞后再进行上述步骤分离淋巴细胞。
1．准备无菌的锥形离心管2．加入淋巴细胞分离液3. 用hank’s 液或用户自备的PBS缓冲液1：1比例（如果全血样本粘稠，可适当增大比例）稀释抗凝过的全血样品。
3．小心沿着管壁，接近分离液层面，非常缓慢地加入新鲜的稀释过的全血样品在淋巴分离液上面。
（注意：切记不要搅浑淋巴细胞分离液）4．小心放进台式离心机离心30分钟，速度为400g5．小心取出离心管，切记不要震动6．可见，最上层为淡红色透明血浆，其次为薄薄的致密白色环状层，然后为离心液层，最后为红色沉淀在管底的红细胞层。
骨髓淋巴细胞分离液试剂盒使用说明
骨髓淋巴细胞分离液试剂盒使用说明规格：4×200mL/kit保存：18-25℃保存，有效期2年。
骨髓淋巴细胞分离液试剂盒易感染细菌，需无菌条件下操作。
无菌条件下操作，启封后置于常温保存。
如4℃保存，本分离液易出现白色结晶，影响分离效果。
试剂盒内容：动物骨髓淋巴细胞分离液200mL样本稀释液200mL清洗液200mLF液200mL一、各种动物骨髓细胞的采集方法1.大鼠、小鼠骨髓的采集：用颈椎脱臼法处死动物,剥离出胸骨或股骨，用注射器吸取少量的F液，冲洗出胸骨或股骨中全部骨髓液，以500g（约1800转/分）离心20分钟，弃上清。
沉淀以F液重复洗涤一次后用全血及组织稀释液悬起（细胞浓度为2×108-1×109个/mL），备用。
2.大动物骨髓的采集：A．骨髓穿刺点定位（1）胸骨：穿刺部位在胸骨中线,胸骨体与胸骨柄连接处,或选胸骨上1/3部。
（2）胫骨：穿刺部位在胫骨内侧,胫骨上端的下方1厘米处。
（3）肋骨：穿刺部位在第5～7肋骨各自的中点上。
（4）髁骨：穿刺部位在髁前上棘后2～3厘米的髁嵴。
（5）股骨：穿刺部位在股骨内侧面,靠下端的凹面处。
B．骨髓穿刺方法（1）实验动物按要求固定，穿刺部位去毛、消毒、麻醉，要求局部麻醉范围直达骨膜，也可作全麻。
（2）操作人员带消毒手套，确定穿刺点，估计从皮肤到骨髓的距离并依此固定骨髓穿刺针长度。
左手拇、食指绷紧穿刺点周围皮肤，右手持穿刺针在穿刺点垂直进针，小弧度左右旋转钻入，当有落空感时表示针尖已进入骨髓腔。
用左手固定穿刺针，右手抽出针芯，连接注射器缓慢抽吸骨髓组织，当注射器内抽到少许骨髓时立即停止抽吸，收集骨髓细胞加入4-5mLF液混匀，以500g（约1800转/分）离心20分钟，弃上清，沉淀以F液重复洗涤两次后用全血及组织稀释液悬起（细胞浓度为2×108-1×109个/mL），备用。
（3）左手压住穿刺点周围皮肤，迅速拔出穿刺针，用棉球压迫数分钟。
大鼠外周血淋巴细胞分离液
大鼠外周血淋巴细胞分离液说明书修订日期说明书修订日期：：2015.10.21Cat number ：KGA832Store at 4 for 12 months ℃For Research Use Only （科研专用）一、试剂盒组份名称 规格 A各种动物外周血淋巴细胞分离液 200ml B全血及组织稀释液（赠品） 200ml C 细胞洗涤液（赠品） 200ml注：本试剂内容中各单品可根据货号单独购买，客户可根据试剂使用情况自行选择购买。
适用于从动物抗凝血液中分离淋巴细胞，无菌条件下所分离的淋巴细胞可用于细胞培养等。
本品仅供科研使用。
二、试剂盒原理本分离液为FICOLL 、羟乙基淀粉550与泛影酸葡甲胺的混合液。
抗凝外周血可在分离液中分层。
离心时，在FICOLL 、羟乙基淀粉的作用下红细胞与粒细胞聚集并迅速沉降；此时，淋巴细胞及其他单个核细胞仍处于分离液上层，红细胞污染可忽略不计。
大部分血小板可在细胞清洗低速离心过程中去除。
其他人及动物多重比重细胞分离液，因不同种属不同比重分离液的细胞离散系数及细胞带电不同，用户在制定分离液时应提供所需分离液的比重、动物种属及被分离细胞的名称。
三、试剂盒以外自备仪器和试剂可提供400g 离心力的水平转子离心机、15ml 玻璃离心管、吸管等。
四、试剂盒试剂盒使用注意事项使用注意事项1. 使用前，本分离液需复温至18-22℃。
为获得最佳的实验结果，最好在取血后2小时内进行试验，血液提取后存放时间越长细胞活性越低。
2. 实验过程中，如需稀释血液或洗涤细胞，不可使用Ca 、Mg 离子的缓冲液及培养液，其成分会导致血细胞凝集大大降低细胞得率及纯度。
本公司生产的全血及组织稀释液和细胞洗涤液不含Ca、Mg离子、低内毒素水平且含细胞和保护成分，推荐使用。
3. 最优抗凝剂选择：EDTA、枸橼酸、肝素，其他抗凝剂也可使用，但会影响细胞活性。
应注意在血液稀释过程中去除抗凝剂体积。
4. 当血液样本粘度过高或血样样本大于等于3ml时，最优稀释方法：将血液于18-22℃以250g离心10分钟，弃去血浆，补充添加全血及组织稀释液，添加量为所弃去血浆体积的1.5-2倍，混匀备用。
结核杆菌核酸扩增检测试剂盒说明书
结核杆菌(TB)核酸扩增检测试剂盒说明书(PCR-荧光探针法)【名称】通用名：结核杆菌(TB)核酸检测试剂盒说明书英文名：Mycobacterium Tuberculosis Fluorescence quantitative Polymerase Chain Reaction(PCR)Diagnostic kit汉语拼音：jie he fen zhi gan jun he suan kuo zeng jian ce shi ji he【目的】本试剂盒适用于检测疑似患者痰液、血液、及乳液或肺脏组织等样本中结核分支杆菌(TB)DNA，用于结核分支杆菌(TB)感染的辅助诊断及流行病学调查。
其检测结果仅供参考。
【原理】本试剂盒选取一对结核分支杆菌(TB)一段高保守区域特异性引物和一条特异性荧光探针，应用碱裂解法提取DNA，后者在耐热DNA聚合酶（Taq酶）作用下，配以FQ-Buffer(内含Mg2+、Tris-HCl等)、四种核苷酸单体（dNTPs）等成分，通过PCR-荧光探针体外扩增法对结核分支杆菌(TB)进行扩增，从而达到快速实时定量检测之目的。
【组成】名称数量规格核酸提取液B4管500μl/管Taq酶系1管80μl/管TB PCR MIX1管960μl/管TB-阳性质控品1管50μl/管(1×107Copies/ml)阴性质控品1管500μl/管【标本采集、保存和运输】1.适用标本：血液、痰液、乳液或肺脏组织等。
2.标本采集：血液：无菌注射器抽取待检者静脉血2-3ml，置于EDTA2Na抗凝管中，充分混匀，密闭送检。
痰液：无菌条件下取受检者深部痰液2-3ml，置入5ml离心管，密闭送检。
3.保存和运输：上述处理后的标本可保存于-20℃，保存期为6个月，-70℃可长期保存。
运送应采用0℃冰壶。
【适用仪器】主要包括ABI GeneAmp PCR System7700、ABI GeneAmp PCR System7500、ABI PRISM7300、LightCycler等毛细管的仪器，MJ Opticon系列或取得资格认证的定量PCR仪。
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骨髓淋巴细胞分离液试剂盒使用说明
规格：4×200mL/kit
保存：18-25℃保存，有效期2年。
骨髓淋巴细胞分离液试剂盒易感染细菌，需无菌条件下操作。
无菌条件下操作，启封后置于常温保存。
如4℃保存，本分离液易出现白色结晶，影响分离效果。
试剂盒内容：
动物骨髓淋巴细胞分离液200mL
样本稀释液200mL
清洗液200mL
F液200mL
一、各种动物骨髓细胞的采集方法
1.大鼠、小鼠骨髓的采集：用颈椎脱臼法处死动物,剥离出胸骨或股骨，用注射器吸取少量的F液，冲洗出胸骨或股骨中全部骨髓液，以500g（约1800转/分）离心20分钟，弃上清。
沉淀以F液重复洗涤一次后用全血及组织稀释液悬起（细胞浓度为2×108-1×109个/mL），备用。
2.大动物骨髓的采集：
A．骨髓穿刺点定位
（1）胸骨：穿刺部位在胸骨中线,胸骨体与胸骨柄连接处,或选胸骨上1/3部。
（2）胫骨：穿刺部位在胫骨内侧,胫骨上端的下方1厘米处。
（3）肋骨：穿刺部位在第5～7肋骨各自的中点上。
（4）髁骨：穿刺部位在髁前上棘后2～3厘米的髁嵴。
（5）股骨：穿刺部位在股骨内侧面,靠下端的凹面处。
B．骨髓穿刺方法
（1）实验动物按要求固定，穿刺部位去毛、消毒、麻醉，要求局部麻醉范围直达骨膜，也可作全麻。
（2）操作人员带消毒手套，确定穿刺点，估计从皮肤到骨髓的距离并依此固定骨髓穿刺针长度。
左手拇、食指绷紧穿刺点周围皮肤，右手持穿刺针在穿刺点垂直进针，小弧度左右旋转钻入，当有落空感时表示针尖已进入骨髓腔。
用左手固定穿刺针，右手抽出针芯，连接注射器缓慢抽吸骨髓组织，当注射器内抽到少许骨髓时立即停止抽吸，收集骨髓细胞加入4-5mL
F液混匀，以500g（约1800转/分）离心20分钟，弃上清，沉淀以F液重复洗涤两次后用全血及组织稀释液悬起（细胞浓度为2×108-1×109个/mL），备用。
（3）左手压住穿刺点周围皮肤，迅速拔出穿刺针，用棉球压迫数分钟。
如穿刺的是肋骨，除压迫止血外，还需胶布封贴穿刺点，防止发生气胸。
3.人骨髓的采集：
临床方法收集骨髓细胞加入4-5mL F液混匀，以500g（约1800转/分）离心20分钟，弃上清，沉淀以F液重复洗涤两次后用含20%胎牛血清的全血及组织稀释液悬起（细胞浓度为2×108-1×109个/mL），备用。
二、骨髓淋巴细胞分离方法
1.取一支15mL离心管，加入与骨髓单细胞悬液等量的分离液（注：分离液最少不得少于3mL）。
2.用吸管小心吸取骨髓单细胞悬液加于分离液液面上，400-500g，离心20-30min。
（注：根据骨髓单细胞悬液量确定离心条件，骨髓单细胞悬液量越大，离心力越大，离心时间越长，具体离心条件可以客户自行摸索，以达到最佳分离效果）。
3.离心后，此时离心管中由上至下细胞分四层。
第一层为稀释液层。
第二层为环状乳白色淋巴细胞层。
第三层为透明分离液层。
第四层为红细胞层。
4.用吸管小心吸取第二层环状乳白色淋巴细胞层到另一15mL离心管中，向离心管中加入10mL清洗液，混匀细胞。
5.250g，离心10min。
6.弃上清。
7.用吸管以5mL-10mL清洗液重悬所的细胞。
8.250g，离心10min。
9.重复6、7、8，弃上清后以0.5mL后续实验所需相应液体重悬细胞。
注意事项：
1.全程过程样本、试剂及实验环境均需要在20℃±2℃的条件下进行。
为获得最佳的实验结果，最好在取血后2h内进行实验，血液存放时间越久，分离效果越差。
血液放置超过6h 后分离效果更差甚至不能达到分离目的。
2.本实验最好不使用高聚合材质（如聚苯乙烯）的塑料制品，应使用无静电、低静电离心管及未经碱处理后的玻璃制品，因为静电作用会导致细胞贴壁、碱处理的玻璃表面会变成毛面，影响细胞分离效果。
3.吸取过多的淋巴细胞层及分离液层会导致分离液交接处的粒细胞被吸出从而使混杂的粒细胞数量增加。
分离液用量大于骨髓单细胞悬液样本时，分离效果更佳。