氨基柱使用维护
氨基柱使用及维护常识

氨基柱的使用:
需要注意的是,氨基柱的键合官能团氨丙基要比C18,C8柱的键合官能团C18,C8要容易水解,所以首先要做好其使用寿命稍逊的心理准备,特别是当你的使用条件是反相条件下时。
反相条件下使用时,要特别注意控制PH值范围,PH值越低越有发生水解的危险,流动相中水的比例越高当然也越有发生水解的危险。所以,在使用后以及准备长时间放置该柱时,必要的清洗和将氨基柱保存于纯的有机溶剂中是很好的保养措施。
95%水/5%乙腈
THF四氢呋喃
95%乙腈/5%水
并保持95%乙腈/5%水继续冲洗,以低流速0.2-0.5mL/min过夜冲洗。
6.3
方案3:柱子使用一定时间后,柱效下降,老化,也可清洗一下柱子恢复柱性能,清洗时依次用10倍柱体积的下列溶液冲洗:
95%水/5%乙腈
THF四氢呋喃
95%乙腈/5%水
氨基柱使用及维护常识
2007年7月2日 评论 发表评论 氨基柱是同时可以用于正相条件和反相条件的这一点很多用户都已经知道;但是要注意到的是:正相溶剂和反相溶剂往往是不互溶的,对这一点的忽略可能会带给使用者一些麻烦。
对于新购买到的柱子,首先请注意打开分析测试说明书,了解柱子的保存溶剂。如果保存溶剂与你将要使用的流动相极性不同不会互溶,请先用异丙醇过渡。过渡过程中注意因异丙醇粘度较大,会导致柱压很高,适当调低流速即可。如果要使用的流动相中还含有缓冲盐类,建议在用分析流动相之前,先用不含缓冲盐的同比例流动相过渡,这样可避免缓冲盐在分析柱内的析出。
3.2
以0.5ml/min的流速用30倍柱体积的pH11.0的氢氧化钠(LUNA)水溶液冲柱子(注意pH值切不可超过11.0),立即用水(
0.5ml/min的流速,30倍柱体积)冲洗,再换成流动相。
液相色谱柱维护保养及仪器冲洗

液相色谱柱维护保养及仪器冲洗注意:每个色谱柱使用之前都要阅读一下使用说明书色谱柱维护保养是很重要的,关系到色谱柱的使用寿命和检测结果的准确性,所以任何人用过色谱柱之后,一定要对色谱柱进行保养,管理人员和使用者互相监督。
总的原则是色谱柱要轻拿轻放,避免损坏填料;另外没有使用的情况下,一定要保证两端的堵头封好。
对于具体的色谱柱,下面列出常用色谱柱维护保养的具体方法和注意事项,以便使用者参考。
对于未启用的新的色谱柱,先用甲醇或乙腈以小流速(0.2ml/min缓慢升高到0.5ml/min )不接检测器冲洗色谱柱30分钟后,将色谱柱与检测器连上,流速调为1.0 ml/min冲洗色谱柱60分钟,然后不断降低有机相的比例(如80%、50%、 10%甲醇或乙腈)各冲洗至少 30分钟。
若色谱柱暂时不用,则将色谱柱保存在高比例有机相中(如80%甲醇或乙腈,或者参考该色谱柱使用说明书中建议的溶剂中);色谱柱使用时应用与分析流动相相同比例的有机溶剂(将缓冲盐溶液换成水)冲洗色谱柱15分钟,然后再换成流动相进行样品分析。
样品分析完后,色谱柱维护与保养方法:流动相中若含酸、碱、盐类物质,则要先用10%甲醇或乙腈冲洗,1.0ml/min 的流速冲洗至少30min,再用80%甲醇或乙腈冲洗至少30min,柱子保存在80% 甲醇或乙腈里(具体问题具体分析,洗脱程序可以是梯度洗脱程序,注意如果最后色谱柱保存的是高有机相,第二天用之前一定要用高水相过渡一下,再换成流动相)。
如柱子长时间未用,则柱子保存在 100%的甲醇或乙腈里。
对于含有离子对试剂的流动相如庚烷磺酸钠和十二烷基磺酸钠等,柱子应采用梯度洗脱,一般用乙腈-水系统(水:90-10;乙腈:10-90)冲洗时间要稍长些,然后保存于90%乙腈。
需要特别强调的是,目前所有的C18柱均不能用纯水进行长时间(1小时以上)冲洗,除非有专门耐水的专用柱,否则,用纯水长时间冲洗色谱柱,会导致色谱柱的固定相流失和相塌陷,损坏色谱柱。
氨基柱的使用和保养

氨基柱的使用和保养氨基柱是同时可以用于正相和反相条件的一种色谱柱。
但正相溶剂和反相溶剂是不互溶的,这一点不能忽略。
对于新购柱子,首先请注意打开分析测试说明书,了解柱子的保存溶剂。
如果保存溶剂与你将要使用的流动相极性不同不会互溶,请先用异丙醇过渡。
过渡过程中注意因异丙醇粘度较大,会导致柱压很高,适当调低流速。
如果流动相中还有缓冲盐类,先用不含缓冲盐的同比例流动相过渡,避免缓冲盐的析出。
柱效检测:我用于判断一个用户是否有经验的指标之一,是用户是否习惯配制一些柱效检测标准溶液。
说到柱效检测,我可以向大家提供一个方法,而且很通用,你也可以用同样的标准溶液和流动相来检测硅胶柱和氰基柱。
流动相:10%乙酸乙酯+90%正己烷流速1.0标准溶液:乙苯(或甲苯)+苯甲酸甲酯检测波长254nm这个方法特别适用于新购柱子(新购柱子往往保存在正相溶剂中)时即进行检测,如有问题,可及时与供应商沟通。
也适合柱子在准备放置相当长一段时间之前,进行充分清洗后进行检测作为记录留档。
在平常的使用过程中,如果分析物是固定重复的,我们当然可以从对分析物的分离分析情况来作出判断;但如果分析物和分析条件不同时,定期检测柱效可以避免柱效下降导致分离不佳再分析查找原因这样浪费人力物力的过程。
特别要注意的是,当氨基柱(或氰基柱)在反相条件中使用时,如用该条件检测,请注意流动相的换相过渡问题。
氨基柱的使用:氨基柱的键合官能团氨丙基要比C18,C8柱的键合官能团C18,C8容易水解,所以首先要做好其使用寿命稍逊的心理准备,特别是当你的使用条件是反相条件下时。
反相条件使用时,要特别注意控制PH值范围,PH值越低越有发生水解的危险,流动相中水的比例越高当然也越有发生水解的危险。
所以,在使用后以及准备长时间放置时,必要的清洗和将氨基柱保存于纯的有机溶剂中是必需的。
当使用氨基柱进行酸性物质如果汁中糖份的分析时,酸性物质的存在意味着质子的存在,可能会使略带负电荷的氨基官能团质子化,使用一段时间后对于某类的分析物保留性质有所改变或表现为柱效下降。
常用液相色谱柱的规范化使用与保养标准操作规程完整

常用液相色谱柱的规范化使用与保养标准操作规程完整.目的:规范液相色谱柱的使用与管理;液相色谱柱标准化老化与再生;剖析液相色谱柱常见问题与解决办法。
延长色谱柱使用寿命,降低色谱柱使用成本。
提高分析人员液相色谱柱使用与维护水平。
范围:适用于使用高效液相色谱仪的仪器分析操作人员及相关管理人员。
责任:设备员、液相操作人员、质控主管、质量管理部经理、质量受权人。
内容:1.定义1.1 液相色谱柱:指用于液相色谱分离的柱形固定相,由柱管、压帽/卡套、筛板(滤片)、填料、接头等组合而成,可用于液相色谱分析与制备。
1.2 色谱柱再生:指色谱柱在非正常情况下,针对异常现象及原因采取的一系列修复补救措施,以提高色谱柱柱效和延长其使用寿命的处理过程。
1.3 运载溶剂:指色谱柱生产厂商在柱出厂测试合格后饱和于色谱柱内的合适溶剂,以利于运输保存,多与保存溶剂相同。
1.4 保存条件:指色谱柱生产厂商根据不同柱类型及其色谱柱填料的制备、键合、装填、高压定型、净化干燥等工艺条件的不同要求而特别制定的色谱柱保存前净化饱和的处理程序与储存条件,包括净化程序、净化溶剂和保存溶剂、保存条件。
1.5 保存溶剂:用于保存色谱柱并指定了溶剂组成与比例的溶液。
1.6 反相色谱柱:以键合非极性基团的载体为填充剂填充而成的色谱柱。
常见的载体有硅胶、聚合物复合硅胶和聚合物等。
常用的填充剂有十八烷基硅烷键合硅胶、辛基硅烷键合硅胶和苯基键合硅胶等。
1.7正相色谱柱:用硅胶填充剂,或键合极性基团的硅胶填充而成的色谱柱,常见的填充剂有硅胶、氨基键合硅胶和氰基键合硅胶等。
1.8氨基柱(-NH2):可以同时用于正相条件和反相条件,但多用于正相色谱条件。
使用时需注意,正相反相交替使用时必需用异丙醇过度,保证柱保存溶剂与流动相互溶。
[氨基柱出厂保存溶剂多用正相溶剂,例如:正己烷-乙腈(99:1)]。
2.液相色谱柱的使用及保养.2.1普通C8及C8反相色谱柱的老化处理与使用保养程序新购色谱柱出厂前均采用适合的运载溶剂饱和,密封,由于运输过程周期较长,柱床容易干涸,所以新柱使用前需重新饱和与老化。
氨基柱清洗与使用

氨基柱的使用注意事项:
首先氨基柱的使用寿命肯定会比我们最常使用的C18、C8等色谱柱使用寿命短,这是氨基柱本身容易发生柱流失引起的,是色谱柱生产厂家普遍存在的问题,和哪个品牌没有关系。
使用时的注意事项如下:
新柱启用:由于氨基柱是保存在95%正己烷—5%异丙醇中的,做糖分析用乙腈+水流动相,所以首先要:不接色谱柱(即用两通代替色谱柱),用异丙醇冲洗仪器系统,0.5ml/min,冲洗0.5h左右
-----接上新的色谱柱,进口端先接上,流速由0.1ml/min升到0.3ml/min左右,出口端待有液体流出再接到检测器上,过渡4h----换成乙腈+水流动相,特别注意如果水中含有盐,先用乙腈+不含盐的水相过渡,而后再换成流动相。
使用后的冲洗:用完之后用分析时的乙腈+水同样比例冲洗40min左右----换成100%乙腈冲洗30min,并保存。
氨基柱清洗:
建议先用含0.5-1.0%NH3的50-50乙腈-水溶液冲洗该柱, 30倍柱体积---再用50%水-50乙腈冲洗10倍柱体积----纯乙腈冲洗30倍柱体积---纯异丙醇冲洗30倍柱体积(流速降到0.3ml/min左右)----纯乙腈冲洗5min---72:28乙腈:水平衡------分析
现在做糖的分析我们推荐的是更耐用的氨基柱:InertSustain NH2 ,这款氨基柱相对于传统氨基柱,寿命会更长,具体如下。
氨基柱的使用和保养

氨基柱的使用和保养氨基柱是一种用于离子交换的色谱柱,常用于生物化学、分子生物学等领域中。
它可以用于样品的富集、分离和纯化,常见的氨基柱有强阳离子交换柱和强阴离子交换柱。
1.样品预处理:氨基柱在使用之前需要进行打膜处理,将柱子封堵活性位点,并参与到离子交换反应中。
常见的打膜方法有傅肯封堵法、交联封堵法等。
2.样品加载:将样品溶液通过柱子,样品中的目标离子与氨基柱上的功能基团发生交换反应,将目标离子吸附在柱子上,而非目标离子会从柱子中洗脱。
3.清洗:清洗是为了去除非目标离子和杂质,保证样品的纯度和分离效果。
主要可以用不同的缓冲溶液进行清洗,也可以使用溶剂进行洗脱。
4.洗脱:洗脱是将吸附在柱子上的目标离子洗脱下来,常用的方法有梯度洗脱、浓度洗脱等。
洗脱时需要控制洗脱缓冲液的pH值和离子浓度,来调节目标离子与功能基团间的亲和力。
5.再生:在使用后,柱子可能会受到杂质的积累或堵塞,需要进行再生。
可以用酸性、碱性溶液或盐溶液进行洗脱,去除污染物和杂质。
氨基柱的保养:1.注意保存:柱子需要保存在干燥、避光的地方,避免受潮和受热。
2.清洗:每次使用后,都要对柱子进行适当的清洗,去除残留的溶液和杂质。
可以用纯水或其他清洗溶液进行清洗,注意不要使用过于强酸或强碱溶液,避免损坏柱子。
3.洗脱剂的pH值:在洗脱时,要注意洗脱缓冲液的pH值,过高或过低的pH值都可能影响柱子的稳定性和分离效果。
推荐使用pH范围在2-10之间的缓冲液。
4.洗脱剂浓度:洗脱剂的浓度也会影响柱子的使用寿命和分离效果,过高的浓度可能会损坏功能基团,过低的浓度则可能无法有效洗脱样品。
根据具体实验需要,选择合适的洗脱浓度。
5.避免堵塞:在使用氨基柱时,样品中的杂质和残留物可能会堵塞柱子,影响分离和洗脱效果。
因此需要注意样品的净化和前处理,以减少污染物对柱子的影响。
总结起来,氨基柱的使用和保养非常重要,它直接影响样品的分离效果和纯度。
正确的使用和保养方法可以延长柱子的使用寿命,提高实验的可靠性和稳定性。
氨基柱使用注意事项

氨基柱使用注意事项氨基柱是一种被广泛使用于分析化学实验中的试剂,它为实验室提供了大量的氨基和其他相关物质,是高纯度的碱性氨基溶解器,通过化学反应能够快速提取有效成分。
为了防止试剂中的有毒物质对人体造成危害,使用氨基柱时需要特别注意以下几点:一、注意操作安全使用氨基柱时,首先要注意安全操作。
氨基柱是一种强碱性物质,如果不慎接触到皮肤,会对皮肤造成严重的刺激,因此,在操作氨基柱时应穿戴安全手套,并且要注意眼睛和皮肤的安全。
二、合理使用,控制用量在实验室中,氨基柱的用途非常广泛,如果不合理使用可能会对实验结果产生负面影响,因此,在使用氨基柱时要控制用量,以免影响实验结果。
三、正确存放氨基柱是一种高碱性化学试剂,具有一定的毒性,如果放置不当可能会对人体造成危害。
因此,在存放氨基柱时,必须避免阳光直射,并将其存放在干燥、通风、阴凉处,避免高温和潮湿环境。
四、正确处理废弃物氨基柱是一种有毒物质,一旦实验完成,必须对剩余的氨基柱予以正确处理,以避免其对人体造成危害。
另外,废弃氨基柱应分类处理,绝不能随意排放,也不能将其倒入下水道中。
总之,使用氨基柱,操作者必须特别注意以上几点,以防止氨基柱中的毒性物质对人体造成危害,保证实验室安全。
首先,应做好安全防护措施,在操作氨基柱时必须穿戴安全手套,并且要避免将氨基柱直接接触到皮肤。
其次,要合理使用氨基柱,以免影响实验结果,并且要控制用量,以免浪费试剂。
此外,在存放氨基柱时一定要避免阳光直射,将其放置在干燥、通风、阴凉处,以避免潮湿和高温环境。
最后,应将废弃氨基柱分类处理,绝不能随意排放,也不能倒入下水道中。
总之,在使用氨基柱时一定要遵循上述规定,以保证实验室的安全,并且有效的提高实验效率。
只有遵循使用规范,才能让氨基柱工作在最佳状态,达到预期的效果。
氨基柱的使用和保养

氨基柱的使用和保养氨基柱是同时可以用于正相和反相条件的一种色谱柱。
但正相溶剂和反相溶剂是不互溶的,这一点不能忽略。
对于新购柱子,首先请注意打开分析测试说明书,了解柱子的保存溶剂。
如果保存溶剂与你将要使用的流动相极性不同不会互溶,请先用异丙醇过渡。
过渡过程中注意因异丙醇粘度较大,会导致柱压很高,适当调低流速。
如果流动相中还有缓冲盐类,先用不含缓冲盐的同比例流动相过渡,避免缓冲盐的析出。
柱效检测:我用于判断一个用户是否有经验的指标之一,是用户是否习惯配制一些柱效检测标准溶液。
说到柱效检测,我可以向大家提供一个方法,而且很通用,你也可以用同样的标准溶液和流动相来检测硅胶柱和氰基柱。
流动相:10%乙酸乙酯+90%正己烷流速1.0标准溶液:乙苯(或甲苯)+苯甲酸甲酯检测波长254nm这个方法特别适用于新购柱子(新购柱子往往保存在正相溶剂中)时即进行检测,如有问题,可及时与供应商沟通。
也适合柱子在准备放置相当长一段时间之前,进行充分清洗后进行检测作为记录留档。
在平常的使用过程中,如果分析物是固定重复的,我们当然可以从对分析物的分离分析情况来作出判断;但如果分析物和分析条件不同时,定期检测柱效可以避免柱效下降导致分离不佳再分析查找原因这样浪费人力物力的过程。
特别要注意的是,当氨基柱(或氰基柱)在反相条件中使用时,如用该条件检测,请注意流动相的换相过渡问题。
氨基柱的使用:氨基柱的键合官能团氨丙基要比C18,C8柱的键合官能团C18,C8容易水解,所以首先要做好其使用寿命稍逊的心理准备,特别是当你的使用条件是反相条件下时。
反相条件使用时,要特别注意控制PH值范围,PH值越低越有发生水解的危险,流动相中水的比例越高当然也越有发生水解的危险。
所以,在使用后以及准备长时间放置时,必要的清洗和将氨基柱保存于纯的有机溶剂中是必需的。
当使用氨基柱进行酸性物质如果汁中糖份的分析时,酸性物质的存在意味着质子的存在,可能会使略带负电荷的氨基官能团质子化,使用一段时间后对于某类的分析物保留性质有所改变或表现为柱效下降。
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氨基柱使用及维护常识
氨基柱是同时可以用于正相条件和反相条件的这一点很多用户都已经知道;但是要注意到的是:正相溶剂和反相溶剂往往是不互溶的,对这一点的忽略可能会带给使用者一些麻烦。
对于新购买到的柱子,首先请注意打开分析测试说明书,了解柱子的保存溶剂。
如果保存溶剂与你将要使用的流动相极性不同不会互溶,请先用异丙醇过渡。
过渡过程中注意因异丙醇粘度较大,会导致柱压很高,适当调低流速即可。
如果要使用的流动相中还含有缓冲盐类,建议在用分析流动相之前,先用不含缓冲盐的同比例流动相过渡,这样可避免缓冲盐在分析柱内的析出。
柱效检测:
我用于判断一个用户是否有经验的指标之一,是用户是否习惯配制一些柱效检测标准溶液。
说到柱效检测,我可以向大家提供一个方法,而且很通用,你也可以用同样的标准溶液和流动相来检测硅胶柱和氰基柱。
流动相:
10%乙酸乙酯+90%正己烷流速1.0
标准溶液:
乙苯(如乙苯找不动就用甲苯代替呗)+苯甲酸甲酯
检测波长254nm
这个方法特别适用于新购柱子(新购柱子往往保存在正相溶剂中)时即进行检测,如有问题,可及时与供应商沟通。
也适合在柱子在准备放置相当长一段时间之前进行充分清洗后进行检测作为记录留档。
在平常的使用过程中,如果分析物是固定重复的,我们当然可以从对分析物的分离分析情况来作出判断;但如果分析物和分析条件不同时,定期检测柱效可以避免柱效下降导致分离不佳再分析查找原因这样浪费人力物力的过程。
不过特别要注意的是,当氨基柱(或氰基柱)在反相条件中使用时,如用该条件检测,请注意流动相的换相过渡问题。
氨基柱的使用:
需要注意的是,氨基柱的键合官能团氨丙基要比C18,C8柱的键合官能团C18,C8要容易水解,所以首先要做好其使用寿命稍逊的心理准备,特别是当你的使用条件是反相条件下时。
反相条件下使用时,要特别注意控制PH值范围,PH值越低越有发生水解的危险,流动相中水的比例越高当然也越有发生水解的危险。
所以,在使用后以及准备长时间放置该柱时,必要的清洗和将氨基柱保存于纯的有机溶剂中是很好的保养措施。
有一种情况是,当使用氨基柱进行酸性物质如果汁的分析时(分析其中的糖份),酸性物质的存在意味着质子的存在,可能会使略带负电荷的氨基官能团质子化,导致使用一段时间后对于某些类的分析物保留性质有所改变或表现在柱效下降。
这时,Kromasil专家所给的建议是:用5-10倍的柱体积的含0.5- 1.0%NH3的50-50乙腈-水溶液冲洗该柱(冲洗后当然要再用不含碱的流动相洗去多余氨),之后再进行分析这类酸性分析物时建议在流动相中略微添加少许氨如0.1%。
氨基柱的清洗
简单说起来,正相条件下使用的氨基柱你就参照硅胶柱的清洗方法;反相条件下使用的氨基柱你
就参照C18的清洗方法。
平时在正相条件下使用:
首先用50倍柱体积的异丙醇清洗,因异丙醇粘度较大可适当放低流速;之后,用50倍的甲醇清洗;之后,用异丙醇过渡回到平常使用的正相流动相,即可。
平时在反相条件下使用:
缓冲盐应及时冲洗,以及不能直接用纯甲醇冲洗缓冲盐等,属常识就不作特别交待了。
用50倍纯甲醇冲洗;之后,用异丙醇过渡后,用二氯甲烷冲洗色谱柱;之后,再用异丙醇过渡回来到甲醇条件下。
这些清洗方法,主要是针对当样品中有杂质逐步吸附累积到填料上时的处理方法,色谱柱表现行为为诸如柱压增高柱效降低等
LUNA氨基柱的使用方法
1.
氨基柱既可以正相使用,也可以反相使用,但是要注意到的是:正相溶剂和反相溶剂往往是不互溶的,正常情况新氨基柱保存在正相环境中,例如LUNA
氨基柱保存在正己烷-乙腈(99:1)中。
2. 正相使用
2.1
新柱子可直接用流动相。
推荐先用正己烷-乙腈(99:1)以0.5ml/min的流速冲10倍柱体积,再根据流动相选用极性相近的氯仿或二氯甲烷以相同的流速冲10倍柱体积,最后换成流动相。
2.1
正相使用时,不宜分析含醛基、羰基的化合物,不可用于还原糖的分析;流动相要彻底脱气,并不得含有羰基化合物和过氧化物(质量不好的乙醚、四氢呋喃含有少量)。
2.3 任何时候更换流动相时都要确保新流动相与柱子原保存液可互溶。
3 反相使用
3.1
先用正己烷-乙腈(99:1)以0.5ml/min的流速冲10倍柱体积,再依次以相同的流速相同的用量用氯仿、异丙醇、甲醇、甲醇-水(50:50)冲柱子。
3.2
以0.5ml/min的流速用30倍柱体积的pH11.0的氢氧化钠(LUNA)水溶液冲柱子(注意pH值切不可超过11.0),立即用水(
0.5ml/min的流速,30倍柱体积)冲洗,再换成流动相。
3.3 配制流动相时,应各组分分别量取,比例较小的组分要精密量取,需调pH值时要精密到0.1。
3.4
反相条件下使用时,要特别注意控制pH值范围,pH值越低越有发生水解的危险,流动相中水
的比例越高当然也越有发生水解的危险。
最理想的pH范围在pH
3.0-7.0
3.5
如果要使用的流动相中还含有缓冲盐类,建议在用分析流动相之前,先用不含缓冲盐的同比例流动相过渡,这样可避免缓冲盐在分析柱内的析出。
3.6
有一种情况是,当使用氨基柱进行酸性物质的分析时,酸性物质的存在意味着质子的存在,可能会使略带负电荷的氨基官能团质子化,导致使用一段时间后对于某些类的分析物保留性质有所改变或表现在柱效下降。
建议:用5-10倍的柱体积的含0.5-1.0%NH3的乙腈-水(50:50)溶液冲洗该柱(冲洗后当然要再用不含碱的流动相洗去多余氨),之后再进行分析这类酸性分析物时建议在流动相中略微添加少许氨如0.1%。
4
色谱柱的冲洗:简单说起来,正相条件下使用的氨基柱就参照硅胶柱的清洗方法;反相条件下使用的氨基柱就参照C18的清洗方法。
5 色谱柱的保存
5.1 正相使用时,将柱子冲洗干净后,用正己烷-乙腈(99:1)保存。
5.2
反相使用时,如短期不用,可用甲醇或乙腈保存;长期不用时需将甲醇依次用异丙醇、氯仿置换,最后用正己烷保存。
6 色谱柱的再生
6.1 方案1:依次用甲醇、异丙醇、氯仿、正己烷、氯仿、异丙醇、甲醇冲柱子(各以
0.5ml/min的流速,20倍柱体积),再换流动相。
这些清洗方法,主要是针对当样品中有杂质逐步吸附累积到填料上时的处理方法,色谱柱表现行为为诸如柱压增高柱效降低等。
6.2
方案2:NH2柱用于反相条件时,NH2键会水解,尤其是在该柱子pH范围以外,在极端酸性和碱性条件下柱寿命会下降很快,如果在这个条件下使用需要清洗一下,需要用10倍柱体积溶液冲洗,如下:
95%水/5%乙腈
THF四氢呋喃
95%乙腈/5%水
并保持95%乙腈/5%水继续冲洗,以低流速0.2-0.5mL/min过夜冲洗。
6.3
方案3:柱子使用一定时间后,柱效下降,老化,也可清洗一下柱子恢复柱性能,清洗时依次用10倍柱体积的下列溶液冲洗:
95%水/5%乙腈
THF四氢呋喃
95%乙腈/5%水
再走流动相即可。