香菇多糖的提取工艺研究

香菇多糖的提取工艺研究郝俊尧(江苏省盐城市高级实验中学,江苏盐城224000)摘要:采用热水法浸提香菇多糖,按照原料处理、烘干、粉碎、称样配比、热水浸提、抽滤、离心、纯化、浓缩、醇提、定容、稀释、苯酚-硫酸法测量、吸光度测量,然后以葡萄糖作为标准品计算香菇多糖得率的工艺流程。

在控制单因素的情况下,分别探讨提取时间、提取温度、料液比及提取次数对香菇多糖提取率的影响,测得香菇多糖提取的最佳提取时间3h 、最佳提取温度85℃、最佳提取料液比1∶30、最佳提取次数3次。

通过正交试验测得在多因素影响下香菇多糖提取的最佳工艺组合为提取温度85℃、料液比1∶30、提取时间2h 、提取次数1次,提取率达5.61%。

该方法容易操作、准确、灵敏度高,是一种无污染而且花费较少的香菇多糖提取工艺。

关键词:香菇;多糖;单因素试验;正交试验;多糖得率中图分类号:S131文献标识码:A文章编号:0439-8114(2019)06-0110-04DOI:10.14088/ki.issn0439-8114.2019.06.025开放科学(资源服务)标识码(OSID ):Study on extracting technology of polysaccharides from Lentinula edodesHAO Jun-yao(Yancheng Senior Experiment Middle School,Yancheng 224000,Jiangsu,China)Abstract :This paper uses the hot water method extracting polysaccharides from Lentinula edodes .According to raw material processing,drying,crushing,sample ratio,hot water extraction,filtering,centrifugal,purification,concentration,alcohol extrac⁃tion,constant volume,dilution,phenol sulfuric acid method,measuring absorbance measurements and then using glucose as standard calculation of Lentinus edodes polysaccharide yield technology process.In the control of single factors,discusses the extraction time,temperature,solid-liquid ratio and extraction times on the extraction rate of polysaccharide of Lentinus edodes ,measured mushroom polysaccharide extraction optimum extraction time is 3h,the best extraction temperature is 85℃,the optimal leaching liquid material ratio is 1∶30,the optimal number of extraction is 3times.Then through the orthogonal tests in multiple factors of Lentinus edodes polysaccharide extraction optimum combination for:extraction temperature of 85℃,sol⁃id-liquid ratio 1∶30,extraction time 2h,extraction times 1.The extraction rate was 5.61%.The method is easy to operate,accuracy,high sensitivity,it is a pollution-free and spend less on extraction technology of lentinan.Key words :Lentinula edodes ;polysaccharide;single factor experiment;polysaccharide orthogonal test;polysaccharide yield 收稿日期:2018-06-29作者简介:郝俊尧(2001-),男,江苏盐城人,高中生,(电话)136********(电子信箱)5871982@。

.[J].,2019,58(6):110-113.香菇(Lentinus edodes (Berk.)sing)是世界第二大食用菌,为担子菌亚门担子菌纲伞菌目口蘑科香菇属真菌[1]。

香菇菌肉白色,细密,因其口味鲜美,香味浓郁,营养丰富,并有显著的药用及滋补作用,有“蘑菇皇后”之称,又因其具有抗癌和增强癌症患者抵抗力的作用,又被称作“抗癌新兵”[2]。

香菇中麦角甾醇含量很高,对防治佝偻病有效;香菇含有6大酶类的40多种酶,可以防治人体酶缺乏症;香菇中的脂肪所含脂肪酸,对人体降低血脂有益。

经常食用香菇具有降低胆固醇、防止血管硬化、增强人体免疫功能和防治癌症等作用[3]。

香菇中的香菇多糖是一种非特异免疫刺激剂,可直接激活人体内的T-淋巴细胞,增强抗体形成细胞的功能,具有抗病毒、抗肿瘤等多种功能,引起人们广泛关注[4]。

香菇多糖在体内能使脾脏和腹腔的免疫细胞活性增强,诱生干扰素[5]。

近年来,关于香第6期菇多糖的提取研究很多,如酶提取法、酸提取法、碱提取法和水浸提取法。

由于香菇多糖的提取应避免在强酸、强碱中进行,否则极易造成糖苷键断裂及构象的改变[6]。

热水法浸提香菇多糖相比较于酸浸提法、碱浸提法条件较温和,不会造成多糖活性变化。

而相对于酶提取法,热水浸提法又具有节省费用的优点。

在前人研究的基础上进一步改进试验方法,如将试验过程中的传统过滤改为抽滤,减少试验误差,提高多糖得率。

本研究优化了香菇多糖的提取工艺条件,对进一步工业化生产奠定基础。

1材料与方法1.1材料1.1.1试验材料新鲜香菇菌盖部分,购于盐城市亭湖区菜市场。

1.1.2仪器电子天平、抽滤机、离心机、电热恒温鼓风干燥箱、粉碎机、水浴锅、旋转蒸发器、可见分光光度计、玻璃棒、棕色瓶、容量瓶、移液管、烧杯、试管、滤纸、抽滤瓶、刻度试管。

1.1.3试剂苯酚、葡萄糖、浓硫酸、无水乙醇、蒸馏水、丙酮等,以上试剂均为分析纯。

1.2方法1.2.1标准曲线的制作吸取葡萄糖标准溶液10mL 定容至100mL,分别吸取0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL 葡萄糖稀释溶液于干燥刻度试管中,各以蒸馏水补至2.0mL,然后加入5%苯酚溶液1mL 后,迅速加入浓硫酸5mL,振荡5min,沸水浴中加热10min,冷却,以蒸馏水做相同处理作为空白对照,在490nm 处测吸光度,以葡萄糖浓度C 为横坐标,以吸光度A 为纵坐标,绘制标准曲线[7](图1)。

用最小二乘法做线性回归,得到葡萄糖浓度C (mg /mL)与吸光度A 之间的回归方程为y =13.946x +0.0423,回归系数R 2=0.9875。

1.2.2工艺流程香菇多糖的提取主要流程有烘干、粉碎、称样、浸提、抽滤、离心纯化、浓缩、醇提、定容、稀释、苯酚-硫酸法测量、测量吸光度。

葡萄糖得率=葡萄糖浓度×稀释倍数×原液体积/香菇粉末重×100%,而根据多糖和葡萄糖单糖之间的转化关系得到:香菇多糖得率=葡萄糖得率×0.9。

1.2.3单因素试验1)料液比对香菇多糖提取的影响。

称取香菇粉末3g 4份,置于250mL 锥形瓶中,分别加入蒸馏水60、90、120、150mL,混合均匀后置于85℃的水浴锅中,水浴提取2h,提取2次,测量不同料液比提取结果。

2)提取时间对香菇多糖提取的影响。

称取香菇粉末3g 4份,置于250mL 的锥形瓶中,加入蒸馏水90mL,混合均匀后,置于85℃的水浴锅中,分别水浴加热1、2、3、4h,提取2次。

3)提取温度对香菇多糖提取的影响。

称取香菇粉末3g 4份,置于250mL 的锥形瓶中,加入蒸馏水90mL,混合均匀后分别置于65、75、85、95℃的恒温水浴锅中2h。

提取2次。

4)提取次数对多糖提取的影响。

称取香菇粉末3g 4份,置于250mL 锥形瓶中,加入蒸馏水90mL,混合均匀,置于85℃水浴锅中,恒温水浴加热2h,分别提取1、2、3、4次。

1.2.4正交试验在单因素的基础上进行正交试验,对香菇多糖提取工艺进行优化。

选择料液比、提取时间、提取温度与提取次数为考察因素,进行4因素3水平正交试验[8-10],正交试验因素与水平如表1所示。

2结果与分析2.1单因素试验结果2.1.1料液比对香菇多糖提取的影响称取香菇粉末3g 4份,放于250mL 锥形瓶中,分别加入蒸馏水60、90、120、150mL,混合均匀后置于85℃的水浴锅中,水浴提取2h,提取2次,测量不同料液比提取结果如图2所示。

从图2中可以看出,从1∶20到1∶30多糖得率随料液比增大而增大,这可能是因为香菇中的多糖分散存在于有纤维组成的细胞骨架里,溶剂对多糖的提取必须使多糖扩散到骨架内部使其溶解,其次料液比大于1∶30时,多糖得率随料液比增大而减小,表1正交试验因素与水平水平123料液比(B)1∶201∶301∶40提取时间(A)//h 123提取温度(C)//℃657585提取次数(D)1230.000.010.020.030.040.05葡萄糖溶液//mg/mL0.80.70.60.50.40.30.20.10.0图1葡萄糖标准曲线y =13.946x +0.0423R 2=0.9875郝俊尧:香菇多糖的提取工艺研究111湖北农业科学2019年其原因可能是多余的提取剂会破坏香菇细胞,细胞膜损坏,造成细胞液或其他细胞成分流出,使得测量结果降低,同时加水过多,会使提取液中的多糖浓度降低。

香菇多糖提取的最佳料液比为1∶30。

2.1.2提取时间对香菇多糖提取的影响称取香菇粉末3g 4份,放于250mL 锥形瓶中,加入蒸馏水90mL,混合均匀后,置于85℃的水浴锅中,分别水浴加热1、2、3、4h,提取2次。

从图3中可以看出,在3h 前多糖得率随提取时间的增大而增加,但提取时间大于3h 后,随着时间的增加得率反而下降。

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香菇多糖的提取工艺

香菇多糖的提取工艺
5、复合酶解,酸与热水相结合浸提法 向香菇处理物中加 适量纤维素 酶和果胶酶,目的是为了酶解细胞表面结构及细胞间连接物, 使其部分糖类 物质的溶出。加 20倍体积的水在 40 ℃水浴恒温下浸泡 80min。后再迅速 升温煮沸 60min,用 4层纱布过滤后收集滤液, 再调节 pH分别为 4. 5、5.0、 5.5 ,进行酸浸提, 然后再用 4层纱布过滤后收集滤液。合并两次滤液。浓 缩。
复合酶解、 酸处理结合热水浸提法提取香菇多糖的改进工艺 原料 → 复合酶解→酶解液→ 水浸提→ 酸浸提→ 浸提物→ 真空浓缩→ 浓缩 液→ 酒精沉淀→ 沉淀物→ sevage法脱蛋白→ 水相→ 丙酮洗涤→ 多 糖粗制品
操作要点
1、原料预处理 选取质量合格的干香菇若干,经植物高速磨碎机 磨成粉末, 称取相应香菇粉末 , 加入适量酒精使香菇粉末成糊状。
香菇多糖(1entinan,LNT) 香菇多糖是从优质香菇子 实体中提取的有效活性成分,是香菇的主要有效成分, 是一种宿主免疫增强剂(host defense potentiator, HDP),临床与药理研究表明,香菇多糖具有抗病毒、抗 肿瘤、调节免疫功能和刺激干扰素形成等作用。
香菇多糖是从优质香菇子实体中提取的有效活性成 分,香菇多糖中的活性成分是具有分支的β— (1—3)— D—葡聚糖,主链由β—(1—3)连接的葡萄糖基组成,沿 ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ链随机分布着由β—(1—6)连接的葡萄糖基,呈梳状 结构。
8 、 sevage法脱蛋白 将上述沉淀溶于适量的蒸馏水中,分别加 入 20 %体积的氯仿和 7 %体积的异戊醇生成絮状凝聚物, 用高速离 心机在 5000r pm离心 15min得沉淀。重复上述操作, 直至无凝聚物 生成。
9、丙酮洗涤脱水 将酒精沉淀物用丙酮洗涤脱水两次, 倒入放 有干燥滤纸的培养皿中 (滤纸重0.98g) ,然后将培养皿放在 50℃ 的 烘干箱中进行干燥 3h ,得到香菇多糖粗制品。

香菇多糖提取工艺的研究进展

香菇多糖提取工艺的研究进展

香菇多糖提取工艺的研究进展香菇多糖提取工艺的研究进展香菇Lentinusedodes 为担子菌纲伞形科真菌,是世界上第二大食用菌。

香菇多糖是香菇中最重要的一种生物活性物质,具有抑制肿瘤、调节免疫、抗病毒和抗氧化等多方面的药理活性,且毒副作用小。

香菇多糖的提取常用水提醇沉法、酸碱提取法,但存在提取工艺复杂、溶剂使用量大、时间长等缺点,而且容易造成多糖降解,生物活性降低。

本文主要对近年来香菇多糖提取工艺优化研究方面的进展进行阐述。

1.超声波提取超声波提取法是利用超声波特殊的物理性质,加速介质质点运动、空化作用、振动匀化等以增大物质分子运动频率和速度,增加溶剂穿透力,从而使药效物质加速融人溶剂提高有效成分的得率。

王恒等用超声波辅助法从香菇中提取香菇多糖,通过实验优化确定出香菇多糖最佳提取工艺为超声功率200W ,料液比35:1,超声时间40min ,香菇多糖提取率为6.72 %。

王俊颖等采用超声法浸提香菇多糖通过正交试验设计确定的最佳工艺为料水比1 : 25,超声温度60° C超声时间30min , 超声功率300W ,多糖得率为8.72 %。

李宏睿等采用正交试验设计,对香菇多糖的提取条件进行优化,并与单纯的热水浸提进行比较。

结果表明,在料水比l:25 ,超声时间35min ,超声功率105W ,热水浸提温度90 %,浸提时间20min 的条件下,提取效果最好,多糖提取率为13.75 %,比单纯热水浸提法提高6.22%。

2.微波提取微波辅助提取技术主要是通过调节微波加热的参数,有效地加热物料中的目标成分,对目标成分进行选择性提取。

刘小丽等研究微波辅助法提取香菇多糖采用单因素试验对固液比、微波辐射功率、辐射时间、乙醇用量以及杂蛋白的去除条件分别进行了考察。

试验结果表明最佳提取工艺条件为固液比1:20mL ,微波辐射功率为280W ,辐射时间5min,乙醇与多糖提取液体积比为4:1,香菇多糖提取率可达到9.46 %。

香菇多糖提取方法探讨

香菇多糖提取方法探讨

香菇多糖提取方法探讨
1 引言
香菇多糖作为功能性酒类的一种,具有独特的作用,如抗氧化、抗癌、抗衰老等,是发展分子营养学的重要方向。

因此,研究香菇多糖的提取方法十分必要。

在保证活性物质的完整性和活性的前提下,从自然资源中高效提取,进一步完善多糖技术,是当前香菇多糖研究发展的重要研究课题。

2 香菇多糖的提取方法
1.有机溶剂抽提法:这种方法通常采用有机溶剂,使植物细胞外部的多糖受到溶解,从而将香菇多糖从菇落液中提取出来。

这种溶剂抽提法虽然可以提取大量多糖,但容易对抗氧化剂和其他生物活性物质产生不良影响。

2.超声波提取法:利用超声波作用于总淀粉中,可以迅速将其分解,从而达到香菇多糖的极高提取率。

超声波提取可以保持多糖中活性物质的完整性,在节约能源和保护环境的前提下提取多糖,具有重要的科研价值。

3.发酵法:发酵主要是利用酶的水解作用,将香菇总淀粉分解成多糖,从而实现多糖的提取。

发酵法可以从香菇中获取大量多糖,但节点操作需要特殊的技术,且存在一定的安全风险,需要特别注意。

3 结论
以上是香菇多糖提取方法的简单介绍,每种方法都具有自身优势和局限性。

提取前要考虑植物体结构、多糖特性及其枯萎情况,选择合适的提取方式,以保持多糖的活性和完美性,实现高效率的提取。

香菇多糖的提取制备

香菇多糖的提取制备

三、操作要点 1.预处理:取干香菇,捣碎。 2.提取:将捣碎的干香菇置于不锈钢反应锅中,在搅拌 的条件下加6—7倍量水混匀,加热至90℃,搅拌保温60 min, 降温至40℃时转移到40℃水浴保温;并加入适量蛋白水解酶 液,pH值为自然(Ph6.4),搅拌反应60 min,然后迅速升温 到90-100℃,灭活1min降温后纱布过滤,收集滤液。 3.浓缩:将以上滤液置于解压浓缩罐中,然后解压浓缩 至l/5体积时,停止浓缩。 4.沉淀:将浓缩液置于搪瓷缸中.在搅拌的条件下,加1 倍量乙醇,然后静置过夜。过滤得沉淀物,滤液再加3倍量 乙醇,得沉淀物。
5.二次沉淀:将沉淀物置于搪瓷缸中,加约70倍量 的水,搅拌均匀,在猛烈搅拌下,滴加0.2mol/l几氢氧 化十六烷基三甲基胺水溶液,逐步调PH至12.8时产生 大量沉淀,离心,沉淀用乙醇洗涤,收集沉淀。 6.除蛋白:沉淀用氯仿、正丁醇洗涤去蛋白,水层 加3倍量乙醇沉淀,收集沉淀。 7.洗涤:沉淀依次用甲醇、乙醚洗涤,收集沉淀。 8.干燥:将沉淀置真空干燥器干燥,即为香菇多糖。
香菇多糖的提取制备
一、实验目的 掌握水溶醇沉法分离多糖类化合物的原理和 方法。
二、实验原理 在组织中,多糖多与蛋白质以共价相结合,所以在 生化产品制备工艺中,往往第一步多用酶降解蛋白质 部分或用碱使多糖—蛋白质间的键裂开,以促进多糖 在提取时的溶解。碱性提取可避免多糖中硫酸基团水 解而破坏。现多采用碱性提取的同时用蛋白质水解酶 处理组织。提取液中存在的蛋白质可用普通蛋白质沉 淀剂使之沉淀,也可用其他方法使变性沉淀,如适当 调pH和加热等。
四、思考题 1.有蛋白之前,加入酶液的目的是什么?

香菇多糖提取工艺和含量测定方法研究

香菇多糖提取工艺和含量测定方法研究

香菇多糖提取工艺和含量测定方法研究报告1. 研究目标本研究旨在探索香菇中多糖的提取工艺和含量测定方法,以提供一种高效、可行的工艺流程和准确的测定方法,为香菇多糖的应用开发提供科学依据。

2. 方法2.1 香菇多糖提取工艺研究2.1.1 提取试剂选择根据文献综述和前期实验结果,筛选出适合香菇多糖提取的试剂。

常用的试剂有热水、酶解液、强酸、强碱等,选择合适试剂对香菇进行水解提取。

2.1.2 提取工艺优化基于单因素实验和正交实验设计原理,优化香菇多糖提取的工艺参数,包括提取温度、提取时间、料液比等因素。

通过测定提取液中多糖的含量,确定最佳的提取工艺条件。

2.2 香菇多糖含量测定方法研究2.2.1 选择合适试剂反应根据香菇多糖的特性,选用适合的试剂进行反应。

常用的试剂有硫酸、酚硫酸、费林试剂等,可以选择适合的试剂。

2.2.2 建立标准曲线选取不同浓度的香菇多糖标准品,按照测定方法进行测定,记录各标准样品的吸光度或色素生成情况。

根据实验数据,建立标准曲线。

2.2.3 样品预处理将香菇样品经过适当的处理,如研磨、溶解等,使样品中的多糖保持在可测量范围内。

2.2.4 多糖含量测定根据建立的标准曲线和样品的吸光度值,计算出香菇中多糖的含量,并进行统计分析。

3. 发现3.1 香菇多糖提取工艺发现经过实验研究,发现采用热水提取是一种较为有效的香菇多糖提取工艺。

最佳提取条件为提取温度80℃,提取时间2小时,料液比1:10。

3.2 香菇多糖含量测定方法发现在已有的试剂中,硫酸试剂反应较为敏感,可以用于香菇多糖的含量测定。

建立的标准曲线表明,香菇多糖的浓度与吸光度呈现良好的线性关系。

4. 结论本研究通过对香菇多糖的提取工艺和含量测定方法进行深入研究,得出以下结论:1.香菇多糖的热水提取工艺在提取温度80℃,提取时间2小时,料液比1:10的条件下,可获得较高的提取产率。

2.硫酸试剂是一种适用于香菇多糖含量测定的试剂,建立的标准曲线可用于准确测定香菇多糖的含量。

微波辅助提取香菇多糖的工艺研究

微波辅助提取香菇多糖的工艺研究

微波辅助提取香菇多糖的工艺研究
香菇多糖是一种有重要生物活性的多糖类物质,具有抗肿瘤、抗炎、
免疫调节和抗衰老等功效。

随着多糖研究的不断发展,对香菇多糖的提取
方法也做出了相应的改进。

微波辅助技术是其中一种较新的多糖提取工艺。

它可以有效提高香菇多糖的提取效率,并且可以减少提取过程中的能量消
耗和多糖发生氧化变质的风险。

微波辅助技术的具体工艺步骤如下:首先,将香菇磨碎成颗粒状;其次,以恒定温度将磨碎的香菇放入微波辅助提取仪中;然后,调整微波参数,使其达到有效提取香菇多糖的最佳工作条件;最后,进行提取反应,
收集提取液,即可获得香菇多糖。

总之,微波辅助技术不仅能提高香菇多糖的提取效率,而且还可以有
效减少能量消耗,能有效防止多糖发生氧化变质,因此,提取香菇多糖的
工艺中应积极引用微波辅助技术。

3 王博 香菇多糖的提取

香菇多糖的提取一,实验目的:掌握热水侵泡法分离多糖类化合物的原理和方法。

二,实验原理:多糖溶于热水,不溶于60%以上乙醇,所以用热水提取,乙醇沉淀除去部分醇溶性杂质;因为热水也可以将蛋白类物质提取出来,所以用乙醇除去提取液中的蛋白.三,实验材料与设备:香菇,葡萄糖,乙醇,苯酚,浓硫酸,紫外可见分光光度计,恒温浴槽。

四,制作标准曲线;采用苯酚硫酸法,以葡萄糖为标准物,称取105℃干燥至恒重的无水乙醇的葡萄糖14.8mg,置100ml容量瓶中,加水溶解并稀释至刻度,分别取:0.0ml ,0.4ml ,0.6ml ,0.8ml ,1.0ml ,1.2ml ,1.4ml ,1.6ml ,1.8ml ,加水补充至2.0ml,再加1ml 5%的苯酚溶液,迅速加入5ml的浓硫酸,摇匀,静置20分钟,冷却至室温,以蒸馏水为空白,在490mm波长处测定吸光度,绘制标准曲线,得到回归方程为:y=0.006x +0.032,R=0.9991,线性范围是:0~266.4ug.标准曲线的绘制:假如葡萄糖0 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4 1.6 1.8 溶液的量mlA490 0.005 0.016 0.020 0.019 0.029 0.031 0.041 0.044 0.049五,操作步骤:1 提取取干香菇粉粉碎,称取20g,置于250ml烧杯中,加入100ml蒸馏水在石棉网上加热至沸腾,并不断搅拌,30min后抽滤,滤渣在用100ml的蒸馏水溶液煮沸30min,合并两次滤液,加热浓缩至20ml,溶于95%乙醇中,搅拌并冷却至室温,静置1h,以4000r/min离心10min,沉淀,真空干燥,得到粗香菇多糖。

2 除蛋白粗糖50ml 100℃热水溶解,加sevage溶液10ml,剧烈震动10min,静置10min,4000r/min离心10min,取上清液,加sevage溶液反复操作5次。

3 纯化粗糖置于烧杯中,加蒸馏水50ml溶解,加入等体积的0.15mol/L 的CTAB与硼酸缓冲溶液,静置10min,4000r/min离心得沉淀用2mol/L的乙醇溶解,静置10min,4000r/min离心后取上清液加等体积的甲醇,静置24h。

香菇多糖的提取工艺研究

香菇多糖的提取工艺研究郝俊尧【摘要】采用热水法浸提香菇多糖,按照原料处理、烘干、粉碎、称样配比、热水浸提、抽滤、离心、纯化、浓缩、醇提、定容、稀释、苯酚-硫酸法测量、吸光度测量,然后以葡萄糖作为标准品计算香菇多糖得率的工艺流程.在控制单因素的情况下,分别探讨提取时间、提取温度、料液比及提取次数对香菇多糖提取率的影响,测得香菇多糖提取的最佳提取时间3 h、最佳提取温度85℃、最佳提取料液比1:30、最佳提取次数3次.通过正交试验测得在多因素影响下香菇多糖提取的最佳工艺组合为提取温度85℃、料液比1:30、提取时间2 h、提取次数1次,提取率达5.61%.该方法容易操作、准确、灵敏度高,是一种无污染而且花费较少的香菇多糖提取工艺.【期刊名称】《湖北农业科学》【年(卷),期】2019(058)006【总页数】4页(P110-113)【关键词】香菇;多糖;单因素试验;正交试验;多糖得率【作者】郝俊尧【作者单位】江苏省盐城市高级实验中学,江苏盐城 224000【正文语种】中文【中图分类】S131香菇(Lentinus edodes (Berk.)sing)是世界第二大食用菌,为担子菌亚门担子菌纲伞菌目口蘑科香菇属真菌[1]。

香菇菌肉白色,细密,因其口味鲜美,香味浓郁,营养丰富,并有显著的药用及滋补作用,有“蘑菇皇后”之称,又因其具有抗癌和增强癌症患者抵抗力的作用,又被称作“抗癌新兵”[2]。

香菇中麦角甾醇含量很高,对防治佝偻病有效;香菇含有6大酶类的40多种酶,可以防治人体酶缺乏症;香菇中的脂肪所含脂肪酸,对人体降低血脂有益。

经常食用香菇具有降低胆固醇、防止血管硬化、增强人体免疫功能和防治癌症等作用[3]。

香菇中的香菇多糖是一种非特异免疫刺激剂,可直接激活人体内的T-淋巴细胞,增强抗体形成细胞的功能,具有抗病毒、抗肿瘤等多种功能,引起人们广泛关注[4]。

香菇多糖在体内能使脾脏和腹腔的免疫细胞活性增强,诱生干扰素[5]。

香菇多糖的提取实验报告

香菇多糖的提取实验报告一、实验目的本实验旨在探索从香菇中提取多糖的有效方法,并对提取得到的香菇多糖进行初步的定性和定量分析。

二、实验原理香菇多糖是一种水溶性的大分子化合物,其在热水中具有一定的溶解性。

通过热水浸提的方法,可以使香菇中的多糖溶解到水中,然后经过离心、过滤等操作去除杂质,再通过醇沉的方法使多糖沉淀出来,最后经过干燥得到香菇多糖的粗品。

三、实验材料与仪器1、实验材料新鲜香菇(市售)、无水乙醇(分析纯)、丙酮(分析纯)、石油醚(分析纯)、葡萄糖标准品、浓硫酸(分析纯)、苯酚(分析纯)等。

2、实验仪器电子天平、恒温水浴锅、离心机、旋转蒸发仪、真空干燥箱、分光光度计、容量瓶、移液管、具塞刻度试管等。

四、实验步骤1、原料预处理将新鲜香菇洗净,去除杂质和根部,切成小块,置于通风处晾干。

然后用石油醚回流脱脂2 次,每次2 小时,以去除香菇中的脂类物质。

脱脂后的香菇用丙酮回流脱色 2 次,每次 2 小时,以去除香菇中的色素。

2、热水浸提将预处理后的香菇放入圆底烧瓶中,按料液比 1:20 加入蒸馏水,在90℃的恒温水浴锅中浸提 3 小时。

期间每隔 30 分钟搅拌一次,以提高提取效率。

3、离心分离浸提结束后,将提取液冷却至室温,然后在 4000 r/min 的转速下离心 15 分钟,取上清液。

4、过滤将上清液用滤纸过滤,去除其中的不溶性杂质。

5、醇沉向过滤后的上清液中缓慢加入 3 倍体积的无水乙醇,边加边搅拌,使多糖沉淀出来。

然后将溶液置于 4℃冰箱中静置过夜。

6、离心收集将醇沉后的溶液在 4000 r/min 的转速下离心 15 分钟,收集沉淀。

7、洗涤用无水乙醇和丙酮依次洗涤沉淀,以去除其中的杂质。

8、干燥将洗涤后的沉淀置于真空干燥箱中,在 60℃下干燥至恒重,得到香菇多糖的粗品。

9、多糖的定性分析(1)苯酚硫酸法:取适量的香菇多糖粗品,用蒸馏水溶解,制成一定浓度的溶液。

然后取 1 mL 溶液,加入 1 mL 5%的苯酚溶液和 5mL 浓硫酸,摇匀后在沸水浴中加热 15 分钟,冷却至室温后,在 490 nm 处测定吸光度。

香菇多糖提取实验汇报

超声波法提取香菇多糖研究背景:香菇多糖的性质:香菇多糖以β~1,3葡聚糖为主,含有少量的木糖和甘露糖,具有抗病毒、抗肿瘤、调节免疫功能和刺激干扰素形成等功能用途:抗肿瘤药。

为化、放疗辅助药。

主要用于胃癌、肺癌、乳腺癌。

生产技术状况:因为香菇多糖的用途广泛,提取比较方便,越来越多的人投身于这方面的研究,是的提取技术方面的大幅度提升。

状况良好。

操作过程:方案设计:香菇多糖的提取香菇预先烘干→称取干香菇15克→粉碎→圆底烧瓶→200ml热水70℃→超声波发生器(水预热在60℃左右)→提取45min(中间停顿2次,每次5min)→过滤→滤渣→等滤液体积热水70℃→提取30min(中间超声波停2次,每次5min)→过滤→合并滤液→抽滤→滤液→量体积标识贮藏备用香菇多糖的测定:1.首先去掉香菇多糖溶液中的的蛋白质:采用氯化钙法:将溶液PH 调节至8---9,加热到85℃,加入氯化钙使浓度达5% (w/v),搅拌,冷却至室温,过滤,得脱蛋白多糖液。

2.制作标准曲线:准确吸取1mg/ ml 葡萄糖标准溶液1.0 、2.0 、3.0 、4.0 、5.0ml 置于50ml 容量瓶定容,准确吸取该系列溶液各2ml ,然后加入6%苯酚1.0ml 及浓硫酸5.0ml,摇匀冷却,室温放置20分钟以后于490nm测光密度,以2.0ml水按同样显色操作为空白,横坐标为多糖微克数,纵坐标为光密度值,得标准曲线。

3. 样品的测定:取去完蛋白的样液2ml,然后加入6%苯酚1.0ml及浓硫酸5.0ml,摇匀冷却,室温放置20分钟以后于490nm测光密度。

将吸光度控制在0.2-0.8人员分工:我们分成两组来完成实验,因为有两组待测夜要进行测定。

然后标准溶液是由第一大组完成。

由于操作比较简单,我们就一起完成。

1人对溶液进行去蛋白,2人制作待测液,1人对待测液进行测定,并记录数据。

实验现象:配置待测液时,加入浓硫酸后溶液变成橙黄色。

从而可来额定吸光度。

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