特定基因表达水平的检测
基因表达的检测技术
基因表达的检测技术
基因表达的检测技术是用来研究和识别一个细胞或组织中的基因在特定条件下是否被转录成RNA，并进一步翻译成蛋白质的过程。
以下是几种常见的基因表达检测技术。
1. RNA测序（RNA-Sequencing）：这是一种高通量的技术，用于确定细胞或组织中所有转录的RNA序列。
通过分析RNA测序数据，我们可以了解到哪些基因在特定条件下被表达，并可以比较不同条件下基因表达的变化。
2. 实时定量聚合酶链反应（Real-time quantitative polymerase chain reaction，qPCR）：qPCR是一种常用的基因表达检测方法，它能够快速、准确地测量特定基因的转录水平。
这种技术利用特定引物和荧光探针，通过PCR扩增基因的RNA或DNA，并实时监测荧光信号的累积量来定量目标基因的表达水平。
3. 原位杂交（In situ hybridization）：原位杂交是一种用来检测特定RNA序列在组织或细胞中的位置的技术。
它使用标记有特定序列的探针与目标RNA序列结合，然后通过可见或荧光标记来显示目标RNA的位置。
这种技术可以帮助研究者确定特定基因在组织中的表达模式和水平。
4. Northern印迹（Northern blotting）：这是一种传统的技术，用于检测和定
量RNA的表达水平。
它使用电泳将RNA分离，然后将其转移到膜上，并使用特定的探针与目标RNA结合，最后通过探针的放射性或非放射性标记来检测目标RNA的存在与数量。
这些技术在研究基因表达调控、细胞分化、疾病发展等领域起着重要作用。
通过这些技术，我们可以更深入地了解基因的功能和调控机制。
细胞和分子免疫学实验技术
细胞和分子免疫学实验技术细胞和分子免疫学是研究免疫系统的重要领域，它涉及到细胞和分子水平上的免疫反应和免疫调节机制。
在这个领域中，实验技术是非常重要的工具，通过这些技术可以深入了解免疫系统的功能和调控。
本文将介绍一些常用的细胞和分子免疫学实验技术。
1. 细胞培养技术细胞培养是研究细胞生物学和免疫学的基础。
通过细胞培养技术，可以获得大量特定类型的细胞，用于研究其生物学特性和免疫功能。
常用的细胞培养技术包括细胞传代、细胞培养基的配制和细胞培养条件的优化等。
2. 免疫细胞分离技术免疫细胞分离技术是将不同类型的免疫细胞从混合细胞群中分离出来，以便进行单个细胞的研究。
常用的免疫细胞分离技术包括磁珠分离法、流式细胞术和细胞排序术等。
3. 免疫组化技术免疫组化技术是通过使用特异性抗体标记目标蛋白质，以观察其在细胞或组织中的分布和表达水平。
该技术可以用于检测免疫细胞表面标记物、细胞内信号通路蛋白质和炎症标记物等。
常用的免疫组化技术包括免疫荧光染色和免疫组织化学染色等。
4. 免疫印迹技术免疫印迹技术是通过使用特异性抗体检测目标蛋白质在细胞或组织中的表达水平。
该技术可以用于检测特定蛋白质的表达变化，从而研究其在免疫反应中的功能。
常用的免疫印迹技术包括Western blot和ELISA等。
5. 免疫荧光技术免疫荧光技术是利用特异性抗体与目标蛋白质结合，并使用荧光标记的二抗进行检测。
该技术可以用于检测细胞表面标记物、蛋白质相互作用和免疫细胞的分布等。
常用的免疫荧光技术包括免疫荧光染色和流式细胞术等。
6. 免疫PCR技术免疫PCR技术是将PCR技术与免疫学相结合，用于检测特定基因的表达水平。
该技术可以用于研究免疫相关基因的表达变化和免疫调节机制。
常用的免疫PCR技术包括RT-PCR、实时荧光定量PCR等。
7. 细胞因子检测技术细胞因子是免疫反应和炎症过程中的重要调节因子。
通过检测细胞因子的表达水平，可以了解免疫反应的活性和炎症程度。
鼠源细胞系相关基因表达水平
鼠源细胞系相关基因表达水平
1. RNA测序（RNA-Seq），RNA测序是一种常用的方法，可以检测细胞中所有转录的RNA分子。
通过对鼠源细胞系样本进行RNA测序，可以获得基因表达水平的全面信息。
这种方法可以提供基因的表达量、差异表达基因、可变剪接和新转录本等信息。
2. 基因芯片，基因芯片是一种高通量的技术，可以同时检测上千个基因的表达水平。
通过将鼠源细胞系样本提取的RNA杂交到基因芯片上，可以得到基因表达水平的信息。
这种方法可以用于筛选差异表达基因或进行基因表达谱的分析。
3. 实时定量PCR（qPCR），qPCR是一种常用的方法，可以精确测量特定基因的表达水平。
通过设计特异性引物，可以选择性地扩增鼠源细胞系中感兴趣的基因。
这种方法可以提供基因表达水平的定量信息，并且具有高灵敏度和高特异性。
4. 蛋白质组学，蛋白质组学是研究蛋白质组成和功能的方法。
通过质谱技术，可以分析鼠源细胞系中蛋白质的表达水平和修饰情况。
这种方法可以揭示基因表达水平与蛋白质水平之间的关系，进一步了解细胞的功能和代谢状态。
5. 免疫组化染色，免疫组化染色是一种常用的细胞和组织分析方法，可以检测特定蛋白在细胞中的表达水平。
通过使用特异性抗体，可以将目标蛋白可视化，并定量分析其表达水平。
这种方法可以用于研究鼠源细胞系中特定基因的表达情况。
综上所述，通过RNA测序、基因芯片、实时定量PCR、蛋白质组学和免疫组化染色等方法，可以全面了解鼠源细胞系中基因的表达水平。
这些方法的选择取决于研究的目的、预算和实验条件等因素。
检测基因表达的方法
检测基因表达的方法基因表达检测是一个生物学检测方法。
背景知识荧光定量PCR技术是通过荧光染料或荧光标记的特异性探针，对PCR 产物进行标记跟踪，实时监控反应过程。
随着PCR 反应的进行，反应产物不断累积，荧光信号强度也等比例增加。
每经过一个循环，收集一次荧光强度信号，这样就可以通过荧光强度变化监测产物量的变化，结合相应的软件对产物进行分析，可以得到荧光扩增曲线，计算待测样品初始模版的量。
实时荧光定量PCR技术是一次由定性技术向定量技术的飞跃，运用该项技术，可以对DNA、RNA样品进行相对定量、绝对定量和定性分析。
服务项目1．相对定量包括RNA提取、反转录和扩增，采用SYBR Green I法和TaqMan探针法两种方式，一般采用2- ΔΔ Ct 法进行计算。
每个样本重复三次，一般情况我公司提供内参基因引物。
2．绝对定量需要制备标准品并建立标准曲线，然后检测目的样本中的基因，比对标准曲线得到基因准确拷贝数。
送样要求细胞（≥106 ）、组织（≥300mg）、血液（≥1ml）、叶片（≥100mg）等样品材料，基因组DNA或总RNA（体积≥20μl，浓度≥50 ng/μl）。
提供结果引物和探针及序列，反转录胶图，原始数据（包括扩增曲线和熔解曲线）、数据分析结果及实验报告。
检测基因表达的方法有哪些主要用探针检测mRNA或用抗体检测出表达的蛋白质(转录水平上对特异mRNA的检测和翻译水平上对特异蛋白质的检测)一、外源基因转录水平的鉴定基因表达分为转录及翻译两阶段，转录是以DNA（基因）为模板生成mRNA的过程，翻译是以mRNA为模板生成蛋白质的过程，检测外源基因的表达就是检测特异mRNA及特异蛋白质的生成。
所以基因表达检测分为两个水平。
即转录水平上对特异mRNA的检测和翻译水平上对特异蛋白质的检测。
转录水平上的检测主要方法是Northern杂交，它是以DNA或RNA 为探针，检测RNA链。
和Southern杂交相同，Northern杂交包括斑点杂交和印迹杂交。
检测基因表达变化的方法
检测基因表达变化的方法基因表达变化是指基因在特定条件下转录和翻译水平的变化。
检测基因表达变化的方法有很多种，以下是几种常用的方法：1. 转录组测序（RNA-seq）转录组测序是一种基于高通量测序技术的方法，可以检测基因在不同条件下的转录水平。
该方法首先从细胞中提取总RNA，然后通过建库、测序和分析得到每个基因的转录本序列。
通过比较不同条件下的转录本序列，可以发现基因表达的变化。
RNA-seq具有高灵敏度、高分辨率和高通量等优点，适用于研究基因表达的复杂性和动态性。
2. 定量反转录聚合酶链反应（qRT-PCR）qRT-PCR是一种基于PCR技术的方法，可以检测特定基因的表达水平。
该方法首先从细胞中提取总RNA，然后通过反转录得到cDNA，再通过PCR扩增得到目的片段。
通过比较不同条件下的目的片段拷贝数，可以发现基因表达的变化。
qRT-PCR具有高灵敏度、高特异性和可重复性好等优点，适用于验证RNA-seq等高通量测序方法的结果。
3. 微阵列分析微阵列分析是一种基于芯片技术的方法，可以同时检测多个基因的表达水平。
该方法将已知序列的探针集成在芯片上，然后将待测的cDNA或RNA与探针进行杂交。
通过检测杂交信号的强度，可以发现基因表达的变化。
微阵列分析具有高通量、高效率和高灵敏度等优点，适用于大规模的基因表达谱研究。
4. 原位杂交原位杂交是一种将探针与组织切片上的目标基因进行杂交的方法，可以检测目标基因在组织中的表达位置和表达水平。
该方法将探针与组织切片上的目标基因进行杂交，然后通过荧光或免疫组化等方法显色标记杂交信号。
通过观察杂交信号的数量和分布，可以发现基因表达的变化。
原位杂交具有高特异性、高灵敏度和定位准确等优点，适用于研究基因表达的组织特异性。
5. 免疫组织化学免疫组织化学是一种利用抗体与目标蛋白进行特异性结合的方法，可以检测目标蛋白在组织中的表达位置和表达水平。
该方法将抗体与目标蛋白进行特异性结合，然后通过显色标记抗体结合的位置。
基因表达水平检测方法
基因表达水平检测方法基因表达水平检测方法是解决生物学中一系列实验问题的重要手段之一。
从基因转录到翻译，功能蛋白的表达需要多个步骤的参与，因此需要详细检测各个节点的表达水平才能全面理解生物系统的工作原理。
本文将介绍10种不同的基因表达水平检测方法，并详细讨论其优缺点及应用范围。
1. 实时荧光定量PCR（qPCR）实时荧光定量PCR（qPCR）是测量DNA片段数量的常用方法之一，可用于定量分析RNA 和DNA的含量及检测异质核糖体。
该方法利用荧光标记的探针结合特定反应体系，通过放大和检测PCR产物的荧光信号来定量目标序列的数量。
相较于传统定量PCR方法，qPCR具有高灵敏度、高特异性和高重现性等优点，可以为基因表达量的精确定量提供可靠的实验数据。
2. RNA测序（RNA-seq）RNA测序（RNA-seq）是一种全转录组测序技术，可以检测不同组织、细胞或条件下mRNA 的表达水平。
该技术通过将RNA逐个转录成cDNA，然后对cDNA进行二代测序，并通过比对与基因组或转录组的比对，确定基因在不同组织或条件下的表达情况，并可以鉴定新的基因或异构体。
RNA-seq可以检测出非编码RNA、剪接异构体等多种信息，成为研究基因抑制、基因启动等事件的有力工具。
3. 微阵列技术微阵列技术是一种古老的基因表达测量方法，可用于同步检测数千个基因。
该技术利用特殊制备的阵列，识别和定量检测小分子或生物大分子（如基因或蛋白质）相互作用的过程。
与RNA-seq相比，微阵列技术成本相对较低，但检测范围较小，并且需要预先设计探针和矩阵。
微阵列技术也可以检测mRNA的异构体、SNP等信息，对于高通量、大规模分析有一定的优势。
4. 蛋白质质谱分析蛋白质质谱分析技术（protein mass spectrometry）可用于评估蛋白质在组织、细胞或条件下的表达量和修饰情况。
该方法将蛋白质分离和检测结合到一起，先通过酶解纯化和分离蛋白质产物，然后利用质谱技术进行检测。
基因检测的方法
基因检测的方法
基因检测是一种通过检测个体基因组中的特定DNA序列来获取有关个体遗传信息的技术。
它可以帮助人们了解自己的遗传特征，预测遗传疾病的风险，指导个性化治疗等。
目前，基因检测方法主要包括PCR、基因芯片和测序技术。
首先，PCR（聚合酶链式反应）是一种常用的基因检测方法。
它通过不断重复DNA的变性、连接和扩增过程，从微量DNA样本中扩增出特定的基因片段，以便进一步进行检测和分析。
PCR技术具有高灵敏度、高特异性和高效率的优点，广泛应用于基因诊断、疾病筛查和法医学等领域。
其次，基因芯片技术是一种高通量的基因检测方法。
它利用微阵列芯片上固定的数千至数百万个核酸探针，可以同时检测大量基因的表达水平、基因型和单核苷酸多态性等信息。
基因芯片技术在癌症早期诊断、药物疗效预测和个体化治疗方面有着重要的应用价值。
最后，测序技术是一种逐个确定DNA序列的方法，可以全面地分析个体基因组的信息。
随着高通量测序技术的发展，基因检测成本不断降低，检测速度和准确性也得到了显著提高。
测序技术在罕见遗传病的诊断、个体基因组的比较分析和新基因的发现等方面具有重要意义。
综上所述，基因检测是一种重要的遗传学技术，可以为个体健康管理和疾病预防提供重要信息。
随着技术的不断进步和成本的不断下降，基因检测将在医学、生物学和生命科学研究中发挥越来越重要的作用。
希望本文所介绍的基因检测方法对您有所帮助，谢谢阅读！。
基因表达的检测的几种方法
基因表达检测的最终技术目标是能确定所关注的任何组织、细胞的RNA的绝对表达量。
可以先从样本中抽提RNA，再标记RNA，然后将这些标记物作探针与芯片杂交，就可得出原始样本中不同RNA的量。
然而用于杂交的某个特定基因的RNA的量与在一个相应杂交反应中的信号强度之间的关系十分复杂，它取决于多种因素，包括标记方法、杂交条件、目的基因的特征和序列。
所以芯片的方法最好用于检验两个或多个样本中的某种RNA的相对表达量。
样本之间某个基因表达的差异性〔包括表达的时间、空间特性及受干扰时的改变〕是基因表达最重要的，而了解RNA 的绝对表达丰度只为进一步的应用或多或少地起一些作用。
基因表达的检测有几种方法。
经典的方法〔仍然重要〕是根据在细胞或生物体中所观察到的生物化学或表型的变化来决定某一特定基因是否表达。
随着大分子别离技术的进步使得特异的基因产物或蛋白分子的识别和别离成为可能。
随着重组DNA技术的运用，现在有可能检测．分析任何基因的转录产物。
目前有好几种方法广泛应用于于研究特定RNA分子。
这些方法包括原位杂交．NORTHERN凝胶分析．打点或印迹打点．S－1核酸酶分析和RNA酶保护研究。
这里描述RT-PCR从RNA水平上检查基因表达的应用。
8 f3 f- |2 L) K) b7 ]- ~- |RT-PCR检测基因表达的问题讨论关于RT-PCR技术方法的描述参见PCR技术应用进展，在此主要讨论它在应用中的问题。
理论上1μL细胞质总RNA对稀有mRNA扩增是足够了〔每个细胞有1个或几个拷贝〕。
1μL差不多相当于50－100，000个典型哺乳动物细胞的细胞质中所含RNA的数量，靶分子的数量通常大于50，000，因此扩增是很容易的。
该方法所能检测的最低靶分子的数量可能与通常的DNAPCR相同；例如它能检测出单个RNA分子。
当已知量的转录RNA〔用T7RNA聚合酶体外合成〕经一系列稀释，实验结果说明通过PCR的方法可检测出10个分子或低于10个分子，这是反映其灵敏度的一个实例。
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特定基因表达水平的检测（试剂制备、操作步骤和注意事项）2010-01-10 23:19:59 来源：易生物实验浏览次数：192 网友评论0 条
Northern杂交也采用琼脂糖凝胶电泳，将分子量大小不同的RNA 分离开来，随后将其原位转移至固相支持物（如尼龙膜、硝酸纤维膜等）上，再用放射性（或非放射性）标记的DNA 或RNA 探针，依据其同源性进行杂交，最后进行放射自显影（或化学显影），以目标RNA 所在位置表示其分子量的大小，而其显影强度则可提示目标RNA 在所测样品中的相对含量（即目标RNA 的丰度）。
关键词：基因表达
RNA -gel blot analysis 或Northern Blot
继分析DNA 的Southern杂交方法出现后，1977年Alwine等人提出一种与此相类似的、用于分析细胞总RNA 或含poly A尾的RNA 样品中特定mRNA 分子大小和丰度的分子杂交技术，这就是与Southern相对应而定名的Northern杂交技术。
这一技术自出现以来，已得到广泛应用，成为分析mRNA 最为常用的经典方法。
与Southern杂交相似，Northern杂交也采用琼脂糖凝胶电泳，将分子量大小不同的RNA 分离开来，随后将其原位转移至固相支持物（如尼龙膜、硝酸纤维膜等）上，再用放射性（或非放射性）标记的DNA 或RNA 探针，依据其同源性进行杂交，最后进行放射自显影（或化学显影），以目标RNA 所在位置表示其分子量的大小，而其显影强度则可提示目标RN A 在所测样品中的相对含量（即目标RNA 的丰度）。
但与Southern杂交不同的是，总R NA 不需要进行酶切，即是以各个RNA 分子的形式存在，可直接应用于电泳；此外，由于碱性溶液可使RNA 水解，因此不进行碱变性，而是采用甲醛等进行变性电泳。
虽然North ern也可检测目标mRNA 分子的大小，但更多的是用于检测目的基因在组织细胞中有无表达及表达的水平如何。
一、试剂准备（易生物试剂购销平台/yp/product-list-43.html）
1、0.5M EDTA: EDTA16.61g加ddH2O至80ml, 调pH至8.0, 定容至100ml。
2、50mM NaAc: NaAc 3.4g 加ddH2O至500ml, 加DEPC 0.5ml, 振荡, 37℃过夜，高压灭菌。
3、5×甲醛凝胶电泳缓冲液: MOPS[3-(N-玛琳代)丙磺酸] 10.3g加50mM NaAc 400ml, 用2N NaOH调pH至7.0, 再加入0.5M EDTA 10ml, 加DEPC H2O至500ml。
无菌抽滤，室温避光保存。
4、20×SSC: NaCl 175.3g、柠檬酸三钠88.2g，加ddH2O至800ml，用2N NaOH调pH 至7.0，再用ddH2O定容至1000ml。
DEPC处理、高压灭菌。
5、6×SSC: 20×SSC 300ml加ddH2O至1000ml。
DEPC处理,高压灭菌。
6、50×Denhardt : 聚蔗糖0.5g、聚乙烯吡咯烷酮0.5g、牛血清白蛋白(BSA)0.5g加dd H2 O至50ml,无菌抽滤、分装。
7、1M Na2HPO4: Na2HPO4•12H2O 35.81g, 加dd H2O至100ml。
8、1M NaH2PO4: NaH2PO4•2H2O 15.6g, 加dd H2O至100ml。
9、0.1M 磷酸钠缓冲液(pH 6.6): Na2HPO435.2ml加NaH2PO464.8ml 。
10、STE缓冲液: 1M Tris-HCl(pH 8.0) 2.5ml,0.5M EDTA, 0.5ml,5M NaCl 5ml，加dd H2O至250ml。
11、预杂交液: 20×SSC 5ml,甲酰胺10ml,50×Denhardt 4ml,1M磷酸钠缓冲液0.2ml（pH 6.6）,10%SDS1ml, 总体积20ml。
临用前加入变性鲑鱼精DNA（10mg/ml）,使终浓度为4μl/ml。
12、DEPC H2O: 1000mldd H2O中加入DEPC 1ml，充分振荡，37℃过夜，高压灭菌。
二、操作步骤
1、总RNA 提取：见相关内容。
2、变性胶的制备：取琼脂糖0.2g，加入DEPC H2O 12.4ml，加热熔化，于保温状态下加入5×甲醛凝胶电泳缓冲液4.0ml、37%甲醛3.6ml，混匀、制胶。
待胶凝固后，置1×甲醛凝胶电泳缓冲液中预电泳5min。
3、样品制备：取总RNA 4.5μl(约20-30μg) ，加入5×甲醛凝胶电泳缓冲液4.0μl、37%甲醛3.6μl、甲酰胺10μl，65℃温育15min、冰浴5min。
加入EB（1μg/μl）1μl、上样缓冲液2μl。
4、电泳：上样，50V电泳（电泳时间约2hr左右）。
电泳结束后将胶块置紫外灯下，观察RNA 的完整性，记录18S、28S条带的位置（离加样孔的距离）。
特定基因表达水平的检测（试剂制备、操作步骤和注意事项）2010-01-10 23:19:59 来源：易生物实验浏览次数：193 网友评论0 条
Northern杂交也采用琼脂糖凝胶电泳，将分子量大小不同的RNA 分离开来，随后将其原位转移至固相支持物（如尼龙膜、硝酸纤维膜等）上，再用放射性（或非放射性）标记的DNA 或RNA 探针，依据其同源性进行杂交，最后进行放射自显影（或化学显影），以目标RNA 所在位置表示其分子量的大小，而其显影强度则可提示目标RNA 在所测样品中的相对含量（即目标RNA 的丰度）。
关键词：基因表达
5、将RNA 从变性胶转移到硝酸纤维素膜或尼龙膜：
（1）用长和宽均大于凝胶的一块有机玻璃板作为平台，将其放入大的干烤皿上，上面放一张Whatman 3MM滤纸，倒入20×SSC使液面略低于平台表面，当平台上方的3MM滤纸湿透后，用玻棒赶出所有气泡。
（2）将凝胶翻转后置于平台上湿润的3MM滤纸中央，3MM滤纸和凝胶之间不能滞留气泡。
（3）用Parafilm膜围绕凝胶四周，以此作为屏障，阻止液体自液池直接流至胶上方的纸巾。
（4）在凝胶上方放置预先已浸湿的尼龙膜，排除膜与凝胶之间的气泡。
（5）将二张已湿润的、与凝胶大小相同的3MM滤纸置于膜的上方，排除滤纸与滤膜之间的气泡。
（6）将一叠（5-8cm厚）略小于3MM滤纸的纸巾置于3MM滤纸的上方，并在纸巾上方放一块玻璃，然后用一个重约500克的重物压在玻璃板上。
其目的是建立液体自液池经凝胶向膜上行流路，以洗脱凝胶中的RNA 并使其聚集在膜上。
6、使上述RNA 转移持续进行15hr左右。
在转膜过程中，当纸巾浸湿后，应更换新的纸巾。
7、转移结束后，揭去凝胶上方的纸巾和3MM滤纸。
将膜在6×SSC中浸泡5min，以去除膜上残留的凝胶。
8、将凝胶置紫外灯下，观察胶块上有无残留的RNA 。
9、膜置80℃，真空干烤1-2hr。
烤干后的膜用塑料袋密封，4℃保存备用。
10、探针标记(Prime-a-Gene Labeling System, Promega公司)：
（1）取模板DNA 25ng于0.5ml离心管中，95-100℃变性5min，冰浴5min。
（2）dNTPmix的制备: 取dGTP 1μl、dATP 1μl、dTTP 1μl混匀。
（3）将下列反应成份混合，加入上述微量离心管中：
dNTPmix 2.0μl
BSA(10mg/ml ) 2.0μl
5×buffer 10.0μl
Klenow 酶(5u/μl) 1.0μl
α-32P-dCTP 5.0μl
加入适量dd H2O使反应总体积达50μl，轻轻混匀。
室温下反应1hr。
11、预杂交：将膜的反面紧贴杂交瓶，加入预杂交液5ml，42℃预杂交3hr。
12、杂交：将变性的探针（95-100℃变性5min，冰浴5min）加入到预杂交液中，42℃杂交16hr。
13、洗膜：
（1）倾去杂交液。
（2）2×SSC/0.1%SDS室温洗15min。
（3）0.2×SSC/0.1%SDS，55℃洗15min×2次。
14、压片：将膜用dd H2O漂洗片刻，用滤纸吸去膜上水份。
用薄型塑料纸将膜包好，置于暗盒中，在暗室中压上X光片。
暗盒置-70℃放射自显影3～7天左右。
三、注意事项
1、操作时必须仔细、小心，严格按同位素操作规程进行，以防止同位素污染。
2、必要时，可采用Sephades G-50柱层析法纯化标记的探针（见本节附录），以去除标记反应中未结合的（游离的）核苷酸。
3、膜的重复使用：结合了待测RNA 的膜与探针杂交后，可经碱或热变性方法将探针洗脱，膜可反复使用与其它探针杂交。
方法如下：杂交的膜（注意：杂交过的膜在保存过程中不能干燥，否则探针将会与膜形成不可逆的结合）置100℃0.5% SDS中煮沸3min，自然冷却至室温后，将膜放入双蒸水中漂洗2-3遍。
取出膜，用滤纸吸去膜表面的水份。
将膜直接进行另一种探针的杂交或用保鲜膜包好，室温下真空保存。
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