克林霉素诱导实验在阳性球菌药敏实验中的应用

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克林霉素诱导实验在金黄色葡萄球菌药敏实验中的应用

克林霉素诱导实验在金黄色葡萄球菌药敏实验中的应用

克林霉素诱导实验在金黄色葡萄球菌药敏实验中的应用摘要:目的:金黄色葡萄球菌是引起医院感染的重要致病菌,特别是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(mrsa)逐年上升,使葡萄球菌对各种抗生素产生多重耐药。

本实验通过对金黄色葡萄球菌诱导型克林霉素耐药的研究,为临床使用红霉素和克林霉素提供可靠的实验依据。

方法:应用microscan walkaway-96微生物鉴定和药敏系统鉴定mrsa和mssa、k.b法进行药敏试验。

根据nccls 2004年版“增加对检测诱导克林霉素耐药的注释”对红霉素耐药克林霉素敏感菌进行d试验并对耐药情况进行分析。

[1]结果:242例金黄色葡萄球菌,mrsa占42%(101/242),mssa占58%(142/242),红霉素和克林霉素耐药率分别为78.5%(191/242)、60.7(147/242)%,对两者同时耐药(结构型mls耐药)的菌株占60.7%(147/242),克林霉素诱导耐药(d-试验阳性)菌株占所检测菌株的14.9(36/242)%,d实验阳性率为83.7%(36/43)。

结论:临床应常规检测金黄色葡萄球菌诱导型克林霉素耐药,避免盲目使用克林霉素而导致治疗失败,同时防止将大环内酯类药物耐药误认为克林霉素耐药而失去使用克林霉素治疗的机会。

关键词:金黄色葡萄球菌红霉素克林霉素耐药d-试验【中图分类号】r4【文献标识码】a【文章编号】1671-8801(2013)03-0020-01金黄色葡萄球菌是引起医院感染的重要致病菌,特别是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(mrsa)的逐年上升,使葡萄球菌对各种抗生素产生多重耐药。

大环内酯类和林可酰胺类是两类在功能上非常相近的抗生素,常被用于青霉素过敏患者葡萄球菌感染的治疗,其中克林霉素由于其组织渗透性强、价格低和可口服等特点,成为一些对青霉素过敏患者金黄色葡萄球菌感染,特别是皮肤软组织感染者的一种常规选择。

但是对大环内酯类和林可酰胺类的获得耐药性在葡萄球菌中是很普遍的。

216例金黄色葡萄球菌中红霉素对克林霉素诱导耐药检测

216例金黄色葡萄球菌中红霉素对克林霉素诱导耐药检测

216例金黄色葡萄球菌中红霉素对克林霉素诱导耐药检测【摘要】目的了解金黄色葡萄球菌(SA)对红霉素和克林霉素的耐药性,检测红霉素对克林霉素诱导耐药的发生率。

方法采用美国临床实验室标准化协会(CLSI)推荐的纸片扩散法,用红霉素和克林霉素双纸片法(D-试验)和VITEK 2 Compact AES分析红霉素对克林霉素诱导耐药表型。

结果216株SA 中有76株(MSSA22株,MRSA54株)呈红霉素耐药、克林霉素敏感,其中29株D-试验阳性(MSSA 8株,MRSA 21株),检出率分别为36.4%、38.9%。

结论临床微生物实验室应加强对SA中克林霉素诱导耐药的检测,以指导临床医生合理选用大环内酯类、林可酰胺类抗菌药物。

【关键词】金黄色葡萄球菌;红霉素;克林霉素;诱导耐药;D-试验金黄色葡萄球菌(SA)是引起医院感染和社区感染的常见致病菌之一,自1961年英国医师Jerons首次临床报告第一例耐甲氧西林SA(MRSA)感染患者以来,其耐药性逐年增加,已经成为医院感染的主要致病菌。

MRSA往往又同时对B-内酰胺酶类抑制剂复合抗生素及碳青酶烯类耐药。

因此,临床常使用大环内酯类(红霉素)、林可酰胺类(克林霉素)、B类链阳霉素抗生素治疗MRSA 引起的感染。

克林霉素由于其组织渗透性强等特点常用于皮肤和软组织感染的治疗,也是青霉素和头孢菌素过敏的常规替代药品,随着这些药物使用增多,其耐药性也增加。

且红霉素具有诱导克林霉素耐药的作用,使得克林霉素治疗无效。

通过VITEK 2 Compact高级专家系统(AES)进行检测,了解福建省莆田学院附属医院可诱导克林霉素耐药的发生率。

1 资料与方法1. 1 菌株来源2013年3月~2013年3月从本院临床科室送检的标本中分离SA共216株,其中痰液142株、分泌物和脓液61株、尿液6株、血液3株,其他4株。

1. 2 鉴定及药敏试验细菌鉴定采用法国生物梅里埃公司VITEK-2 Compact 全自动分析系统进行鉴定到种,药敏卡选用AST-GP67测定,该卡采用2个孔位检测红霉素诱导克林霉素耐药;1个孔位是0.5 μg/ml克林霉素,另一个孔位是(0.25 μg/ml克林霉素+0.5 μg/ml红霉素)。

实验室葡萄球菌检测中克林霉素诱导耐药性的分析和对策

实验室葡萄球菌检测中克林霉素诱导耐药性的分析和对策

实验室葡萄球菌检测中克林霉素诱导耐药性的分析和对策兰海丽;卢兰芬;冯雪琴;吴秀娟【期刊名称】《国际检验医学杂志》【年(卷),期】2008(029)010【摘要】目的了解葡萄球菌对红霉索和克林霉素的耐药性及其以红霉素诱导克林霉素耐药的发生率.方法用K-B法检测葡萄球菌对红霉素及克林霉素的耐药性,依据NCCLS 2004年发布M100-S14的D-试验方法,测定红霉素对克林霉素的诱导耐药表型.结果耐甲氧西林会黄色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)对红霉素及克林霉素同时耐药者分别占91.66%和68.42%.其中D-试验阳性的金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌分别占70.00%(7110)和58.10%(32/55),有60.00%的对红霉素耐药和克林霉素敏感的葡萄球菌为诱导型克林霉素耐药菌.结论各级临床微生物室应开展D-试验,检测葡萄球菌中红霉素对克林霉素的诱导耐药性,指导临床医生更合理地使用抗生素.【总页数】3页(P888-889,891)【作者】兰海丽;卢兰芬;冯雪琴;吴秀娟【作者单位】528403,广东省中山市人民医院检验科;528403,广东省中山市人民医院检验科;528403,广东省中山市人民医院检验科;528403,广东省中山市人民医院检验科【正文语种】中文【中图分类】R378.11;R969.4【相关文献】1.葡萄球菌属红霉素诱导克林霉素的耐药性检测 [J], 曹二龙2.葡萄球菌对红霉素和克林霉素的诱导耐药性检测分析 [J], 温玉兰3.葡萄球菌属红霉素对克林霉素诱导耐药性检测 [J], 夏辉4.葡萄球菌中红霉素对克林霉素诱导型耐药的检测及耐药性分析 [J], 李玉珍5.江苏地区奶牛源葡萄球菌耐药性分析与红霉素诱导的克林霉素耐药检测 [J], 王强;黄攀;王倩倩;陈培华;马莉;房丹;金文杰;秦爱建因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

与耐药机制有关药敏试验的规范化

与耐药机制有关药敏试验的规范化

与耐药机制有关药敏试验的规范化与耐药机制有关的药敏试验的规范化操作。

前言,细菌耐药已成为一个全球性的问题,已对人类健康构成严重的威胁。

耐药细菌感染导致病人住院时间延长、费用增加、死亡率增高,同时也给临床医生抗感染治疗带来困难。

因此,检测细菌耐药机制是当今细菌学的一个重要课题,也是正确指导临床医生合理使用抗生素的重要依据。

在细菌耐药机制检测方面,包括分子生物学等许多实验方法被广泛运用。

但这些方法的技术要求普遍较高,大多数被用于基础研究。

真正应用到临床微生物实验室的试验方法,要求操作简便、重复性好,结果准确、可靠,试验成本不能太高。

我国卫生部于1998年规定:我国药敏试验暂按CLSI历年颁布的所有微生物药敏试验文件作为部颁标准,此决定至今未改变。

本节所讲内容,主要是CLSI(M100-S22)文件推荐的临床微生物实验室常规检测方法。

也是我们从事临床微生物检验技术人员必须掌握的内容。

包括两个内容,第一个就是革兰阳性球菌耐药机制的实验室检测项目。

第二个内容是革兰氏阴性发酵细菌以及其他细菌的耐药机制。

首先介绍青霉素酶的检测。

检测青霉素酶的方法有碘量法、酸量法和显色头孢菌素法等,临床应用较多的是显色头孢菌素法。

其原理是将受菌株与头孢硝噻吩作用一段时间后,如受试菌株产生青霉素酶,则可水解头孢硝噻吩的β- 内酰胺环,产生由黄色向红色转变的颜色反应,即为青霉素酶试验阳性。

头孢硝噻吩法是目前检测嗜血杆菌属、淋病奈瑟菌、卡他莫拉菌和葡萄球菌属产生β- 内酰胺酶的最好方法,具有快速、灵敏和简便的特点,但价格相对较昂贵。

方法,检测时用1滴无菌水将Nitrocefin纸片湿润,将受试菌直接涂抹于湿润后的Nitrocefin纸片上,即可观察颜色的反应,产生红色者为产酶阳性。

质控菌株,阴性株为金黄色葡萄球菌ATCC25923;阳性株为金黄色葡萄球菌ATCC29213。

注意事项,目前实验室多采用BD公司生产的非头孢硝噻吩显色头孢菌素纸片,这个纸片进行β- 内酰胺酶测试,效果稍好于头孢硝噻吩,可降低金黄色葡萄球菌阳性结果的反应时间。

D-试验应用于葡萄球菌对克林霉素诱导耐药的研究

D-试验应用于葡萄球菌对克林霉素诱导耐药的研究

D-试验应用于葡萄球菌对克林霉素诱导耐药的研究摘要目的:了解葡萄球菌对克林霉素的耐药性。

方法:用D-试验检测红霉素耐药而克林霉素敏感的葡萄球菌是否产生克林霉素诱导型耐药。

采用NCCLS 推荐的纸片扩散法。

结果:红霉素耐药但克林霉素敏感的金黄色葡萄球菌71株中产生克林霉素诱导型耐药33株(46.5%);对红霉素耐药而克林霉素敏感的凝固酶阴性的葡萄球菌100株,产克林霉素诱导型耐药42株(42%)。

結论:开展D-试验检测葡萄球菌中红霉素对克林霉素诱导耐药可帮助临床医生正确选用大环内酯类、林可酰胺类和链阳霉素B类。

关键词葡萄球菌克林霉素D-试验红霉素诱导型耐药克林霉素抗菌性强,抗菌谱广,但由于大环内酯类抗生素与克林霉素的广泛应用,引起对葡萄球菌的耐药形明显上升。

对甲氧西林耐药葡萄球菌可同时对β-内酰胺类、酶抑制剂复合抗生素及碳青霉烯类耐药,因此临床医生在治疗甲氧西林耐药葡萄球菌引起的感染时考虑使用大环内酯类抗生素,这也是治疗部分对青霉素和头孢菌素过敏患者的抗生素选择。

但通过实验发现红霉素具有诱导克林霉素的耐药作用[1]。

我们临床分离的对红霉素耐药的葡萄球菌,采用D-试验进行检测克林霉素诱导型耐药的情况。

资料与方法菌株:从2004~2007年临床分离的葡萄球菌,其中金黄色萄萄球菌71株,凝固酶阴性葡萄球菌100株,标准菌株,金黄色葡萄球菌ATCC 25923作为纸片法药敏试验的质控菌。

试剂:红霉素纸片(15μg)和克林霉素(2μg)是Oxoid公司商品,API STAPH 细菌鉴定卡为梅里埃公司产品。

药敏试验及判定:采用NCCLS规程,菌液浓度为0.5麦氏单位,MH琼脂,纸片间隔15mm。

凝固酶阴性葡萄球菌纸片间隔20mm。

35℃孵育16~18小时,使用红霉素14~22mm,克林霉素15~20mm的判定标准。

如对红霉素耐药而邻近一侧的克林霉素的抑菌环出现“截平”形如D,则判定为D-试验阳性,抑菌环形状无改变,则判定为D-试验阴性。

克林霉素诱导型耐药葡萄球菌的检测与分析

克林霉素诱导型耐药葡萄球菌的检测与分析

克林霉素诱导型耐药葡萄球菌的检测与分析
刘欢乐;周铁丽
【期刊名称】《临床检验杂志》
【年(卷),期】2005(23)5
【摘要】目的了解本地区葡萄球菌诱导型克林霉素的耐药率.方法用K-B琼脂扩散法检测葡萄球菌对红霉素和克林霉素的耐药性,用D-试验检测克林霉素诱导型耐药.结果61株耐红霉素的金黄色葡萄球菌对克林霉素耐药40株,敏感21株,其中克林霉素诱导型耐药8株;106株耐红霉素的凝固酶阴性的葡萄球菌(CNS)对克林霉素耐药62株,敏感44株,其中克林霉素诱导型耐药27株.结论对克林霉素敏感的菌株,应加做D-试验以免造成错误判断导致临床治疗失败.
【总页数】2页(P337-338)
【作者】刘欢乐;周铁丽
【作者单位】温州医学院附属第一医院检验科,浙江,温州,325000;温州医学院附属第一医院检验科,浙江,温州,325000
【正文语种】中文
【中图分类】R446.5
【相关文献】
1.葡萄球菌诱导型克林霉素耐药的检测与分析 [J], 张丽菊;韩玉珍
2.凝固酶阴性葡萄球菌诱导型克林霉素耐药的检测与分析 [J], 董春富;林建平;朱以军
3.诱导型克林霉素耐药葡萄球菌的检测与分析 [J], 刘东梅;吴亚;许萌
4.262株葡萄球菌诱导型克林霉素耐药的检测与分析 [J], 林燕;李世云;刘鸿明
5.葡萄球菌属克林霉素诱导型耐药的检测与分析 [J], 张晓凤;常月琴;章震花
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克林霉素

克林霉素

这确实一个很好的问题,我是这样理解的:MLSB诱导型耐药的诱导物质不仅限于红霉素,已有的病例证明在不存在红霉素使用的情况下,仍有部份克林霉素体外试验敏感而冶疗失败的情况,在治疗进程中凡是能诱导erm基因持续表达的诱因均可导致治疗失败,而D试验只不过是检测这一耐药表型而已,所以在CLSI中提到"D试验阳性,克林霉素修正为耐药,可能对于某些病例仍然有效!"这样的解释.不知我理解是否正确?给出下面的资料,大家来进一步理解这一问题!!!葡萄球菌诱导的克林霉素耐药性Susan M et al背景大环内酯类、林可胺类和链阳性菌素是三类在功能而非结构上非常相近的抗生素。

目前常用的三种大环内酯类抗生素是红霉素、克拉霉素(甲基红霉素)和阿齐霉素;林可胺类包括克林霉素和林可霉素; 链阳性菌素(喹奴普丁/达福普丁)由A和B两部分组成,起协同抗菌作用。

上述三类抗生素通常被称为MLS。

MLS类抗生素主要通过与细菌核糖体结合来抑制细菌蛋白合成,从而达到抗菌作用。

革兰阴性细菌对MLS类抗生素具有天然耐药性。

MLS类抗生素主要被广泛用于治疗葡萄球菌感染。

皮肤和软组织的葡萄球菌感染常常选用克林霉素,对青霉素过敏的病人也会将其作为一种选择。

对大环内酯类和林可胺类的获得耐药性在葡萄球菌中是很普遍的。

对大多数大环内酯类的耐药性是由两种不同的机制造成的。

msrA基因编码的活性成份的流出导致了对大环内酯类和B型链阳性菌素(不包括林可胺类)的耐药性。

MS显型:红霉素=R 克林霉素=S由erm基因编码的核糖体靶位的改变引发了对大环内酯类、林可胺类和B型链阳性菌素的耐药性(MLSb耐药性)。

erm基因能编码产生甲基化酶,减少药物和rRNA靶位的结合。

这种耐药性可以因结构改变导致,也可因诱导产生。

如果erm基因持续表达,将出现对红霉素、克林霉素和其它MLS类抗生素的耐药性。

MLSb结构显型:红霉素=R 克林霉素=R在一些情况下,erm基因需要一种诱导物质来表达对克林霉素的耐药性。

103例葡萄球菌中诱导型克林霉素耐药的检测和分析

103例葡萄球菌中诱导型克林霉素耐药的检测和分析

维普资讯
杨艳秋
13 0 铡葡萄豫菌中
细菌对 l 和l环大环 内酯类 和链 阳菌素 B 4 5 的耐药 , 但对林可酰胺敏感( s M 型耐药 )②抗生素作用靶位 ;
改变 , 即产 生 一种 由em基 因编码 的 R A甲基 化 酶 , l N 这 种 酶能对 细 菌核 糖 体 5s 基2 SR A进 行特 定 0亚 3rN 核 苷 酸 残 基 甲基 化 , 而导 致 对 大 环 内酯 类 、 可 从 林 酰胺 、 阳菌 素 B 链 的耐 药 ( s ML 型耐 药 oML 型 耐药 S 可 分 为 诱 导 型 ( S 和 组 成 型 (ML )i S 耐 i ) ML c S: ML 型 药 是 指 红霉 素 作 为诱 导剂 可通 过 衰减 机 制诱 导 el r n 基 因的表 达 而产 生 耐药 , 表 型为 对红 霉 素 耐药对 其 克 林 霉 素 敏感 ,ML 型 耐药 是 指 el基 因上 游 的启 c S r n
变 , 判 为D 试 验 阴性 。 则 一
院及门诊患者 中各临床标本分离出的葡萄球菌13 0
株 , 中金黄色 葡萄球 菌3 株 (3 , 固酶 阴性 葡 其 4 3%)凝 萄 球 菌6 株 (7 ) 9 6% 。质 控 菌株 为 金 黄色 葡 萄球 菌 A C 2 92 昆 明 医学 院第 一 附属 医院 惠赠 )所 有 T C52( , 菌株 均经 生物 梅里 埃公 司生 产 的葡萄 菌S A因子血 P 清 凝 聚和A I T P P A H鉴定 卡鉴定 。 S 1 试剂 . 2 葡萄 球菌 S A因子 和A I T P P P A H细菌 鉴 S 定 卡 为生 物梅 里 埃 公 司产 品 ; MH琼 脂 为 杭 州 天 和 微 生 物试 剂 有 限公 司产 品 ; 药敏 纸 片红 霉素 (5z/ 11 . g 片 )克 林霉 素 (g 片 ) 、 2 / 为北 京 天坛药 物 生物技 术有
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【摘要】目的探讨阳性球菌中红霉素诱导克林霉素耐药性的发生情况,合理指导临床用药。

方法 MIC法检测某院579株阳性球菌对克林霉素和红霉素的耐药情况;双纸片法检测可诱导克林霉素耐药。

结果金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性球菌及β溶血链球菌对红霉素和克林霉素同时耐药率分别占76.5%、50.8%、48.0%。

在红霉素耐药而克林霉素敏感的菌株中,D 实验阳性分别占65.0%、41.0%、34.0%。

在红霉素敏感株中未见克林霉素诱导性耐药。

结论临床微生物实验室应加强可诱导克林霉素耐药性的检测,指导临床有效合理的使用抗生素。

【关键词】革兰阳性球菌;红霉素;克林霉素;D实验The amplication of clisdamycin induction test in clinical microbiology susceptiability laboratories 【Abstract】Objective To investigate the resistance of erthromycin and clidamycin in Gram-positive coccus and help to reasonably use clindamycin. Methods Use of MIC to detect 578 isolates randomly collected from January to September in our hospital, double antimicrobial agents detect the clidamycin induce test.Results Co-resistance to erythromycin and clindamycin accounted for 76.5%,50.8%,48.0% in Staphylococcus aureus,coagulase-negative coccus and beta-hemolylic streptococcus.Among the 129 eryRcliS isolates,the rate of inducible resistance to clindamycin (D-test positive) was 65.0%,41.0%,34.0% respectivelly.For all the eryScliS isolates,clisdamycin induce test are negative.Conclusion The detection of inducible clindamycin resistance must be stressed in clinical microbiology laboratory to provide good support for rational antibiotic therapy.【Key words】Gram-positive coccus;erythromycin;clindamycin;D-test 大环内酯类抗生素作用于细菌核糖体50S大亚基,抑制细菌蛋白质合成,从而导致细菌死亡。

靶位点的改变是葡萄球菌对大环内酯类、林可霉素类、链阳菌素B等抗生素获得性耐药的主要机制,并对MLSB(大环内酯类、林可霉素类、链阳菌素B等抗生素)抗生素表现为交叉耐药[1,2]。

MLSB耐药分为固有耐药和诱导耐药。

若诱导耐药则常规药敏实验表现为红霉素耐药而克林霉素敏感,用双纸片法进行D实验时可见克林霉素抑菌圈靠近红霉素一侧出现弯曲的“D”形状,尽管在缺乏诱导剂时细菌表现对克林霉素的敏感,但临床用克林霉素治疗无效。

其耐药机制可归结为由msrA基因编码的泵出机制,核糖体可诱导变异,核糖体结构变异[3]。

本实验通过双纸片法检测可诱导克林霉素耐药的发生情况,提示可诱导克林霉素耐药实验的必要性,现将实验结果报告如下。

1 材料 1.1 细菌来源收集某院2005年1~9月分离的阳性球菌579株(其中金黄色葡萄球菌272株,凝固酶阴性球菌132株,β溶血链球菌175株)。

[!--empirenews.page--] 1.2 抗菌药物纸片红霉素、克林霉素购于杭州天和微生物试剂有限公司。

Mic法所用微生物生化、药敏卡购于湖南天地人生物试剂有限公司。

1.3 培养基Mueller-Hinton(M-H)琼脂培养基购于上海博塞科技发展有限公司。

1.4 质控菌株金黄色葡萄球菌ATCC25932、金黄色葡萄球菌ATCCBAA——977(阳性对照),金黄色葡萄球菌ATCCBAA-976(阴性对照)。

2 方法 2.1 利用MIC测定法规[4]采用获卫生部批准的湖南天地人公司生产的生化药敏实验卡进行。

2.2 双纸片扩散法[5,6]据2004年NCCLS推荐在MH琼脂平板上,分别贴红霉素(15μg/片)和克林霉素(2μg/片)纸片。

两种纸片距离分别选用15mm、26mm,35℃培养16~18h。

用常规法取2纸片边缘距离,若靠近红霉素纸片处克林霉素纸片抑菌圈缩小或呈“D”形状,则显示为诱导型耐药。

2.3 统计学方法利用SAS8.2软件对实验结果进行χ2检验。

3 结果见表1。

对克林霉素未进行“D”实验耐药率与“D”实验后合计耐药率进行χ2检验,P<0.05,差异有显著性。

表1 红霉素、克林霉素药敏结果及D试验统计分布(略)注:ESCLS 红霉素、克林霉素均敏感;ERCLR 红霉素、克林霉素均耐药;ERCLS 红霉素耐药、克林霉素敏感纸片间距分别为15mm和26mm时诱导克林霉素耐药的发生情况分布见表2。

表2 两纸片间距诱导克林霉素耐
药的发生情况分布(略)在15mm和26mm时,阳性检出率经χ2检验,P>0.05,D实验结果差异无显著性。

4 讨论本实验结果显示金黄色葡萄球菌可诱导克林霉素耐药的发生率为65%,较凝固酶阴性球菌(41%)和β溶血链球菌(34%)高,由579株阳性球菌对克林霉素耐药性的分布情况可知,红霉素敏感株中未出现克林霉素诱导耐药,而红霉素耐药株中,克林霉素耐药株也较多,且固有耐药株占大部分,诱导耐药株也有相当比例。

总体耐药性与固有耐药性之间的差异有显著性意义,故有进行“D”实验的必要性。

纸片扩散法测定时,抑菌圈结果于两纸片间距在15mm时较26mm略明显;但差异无显著性;D实验被用于临床实验室检测红霉素对克林霉素的诱导耐药性,简单易行。

能很好的避免不恰当的使用克林霉素导致治疗的失败。

目前微量稀释法和机器法药敏尚不能检出此种诱导耐药,如不做实验,则不能正确报告。

所以临床微生物实验室应加强克林霉素诱导耐药性的检测,以保证克林霉素耐药性检出的准确性,指导临床医生合理使用抗生素。

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