葡萄球菌诱导型克林霉素耐药的检测(一)
葡萄球菌诱导型克林霉素耐药的检测(一)
作者：胡淑玲李亚娥张利侠谢龙归巧娣
【摘要】目的：通过检测葡萄球菌诱导型克林霉素耐药，为临床提供比较可靠的药敏状况，指导用药。
方法：应用生物－梅里埃－VETEK全自动微生物分析系统、API细菌鉴定系统鉴定细菌，GPS及法进行药敏试验。
根据NCCLS2004年版“增加对检测诱导克林霉素耐药的注释”对红霉素耐药菌进行D试验。
结果：金黄色葡萄球菌诱导型克林霉素耐药占17%，凝固酶阴性葡萄球菌诱导型克林霉素耐药占24%。
结论：检测葡萄球菌诱导型克林霉素耐药，避免盲目使用克林霉素而导致治疗失败，防止将大环内酯类耐药误认为克林霉素耐药而失去克林霉素的治疗机会。
【关键词】葡萄球菌；诱导型耐药；红霉素；克林霉素
葡萄球菌是临床常见的引起化脓性甚至全身性感染的致病菌，大环内酯类、林可酰胺类和链阳菌素类B(MLSB)抗生素是广泛应用于治疗葡萄球菌感染的抗生素，尤其是克林霉素和链阳菌素类常用来治疗严重的葡萄球菌等细菌感染并作为对青霉素过敏的首选替代药物。
但在红霉素耐药而克林霉素敏感时，克林霉素有可能存在诱导型耐药，须经诱导克林霉素耐药试验(D试验)测定，才能为临床提供比较可靠的药敏状况，以便指导用药。
1材料和方法
1.1菌株来源
我院2006年1月1日至2006年12月31日临床各种标本中分离的金黄色葡萄球菌105株和凝固酶阴性葡萄球菌135株。
1.2细菌鉴定
应用生物－梅里埃－VETEK全自动微生物分析系统、API细菌鉴定系统鉴定细菌，GPS及
法进行药敏试验。
1.3D试验
根据NCCLS2004年版“增加对检测诱导克林霉素耐药的注释”对红霉素耐药的葡萄球菌进行D 试验。
2结果
105株金黄色葡萄球菌中对红霉素和克林霉素均敏感的有29株，占28%，对红霉素和克林霉素均耐药(结构型)的有55株，占52%，红霉素耐药而克林霉素敏感(D试验阴性)(泵出型)的有3株，占3%，诱导型克林霉素耐药的金黄色葡萄球菌(D试验阳性)18株，占17%。
135株凝固酶阴性葡萄球菌对红霉素和克林霉素均敏感为20株，占15%，对红霉素和克林霉素均耐药(结构型)有68株，占50%，红霉素耐药而克林霉素敏感(D试验阴性)(泵出型)的有15株，占11%，诱导型克林霉素耐药的凝固酶阴性葡萄球菌(D试验阳性)32株，占24%。
D-试验检测耐红霉素葡萄球菌对克林霉素诱导耐药研究
D-试验检测耐红霉素葡萄球菌对克林霉素诱导耐药研究目的了解本院临床分离的耐红霉素葡萄球菌中诱导型克林霉素的检出率及耐药状况。
方法按临床试验室标准化研究所(CLISI)K-B纸片法检测葡萄球菌的耐药性,同时CLSI2004年推荐的双纸片协同法(D-试验)检测红霉素和克林霉素的耐药性。
结果293株葡萄球菌D-试验阳性的是62.2%,其中耐甲氧西林葡萄球菌57.7%,甲氧西林敏感葡萄球菌4.5%。
结论实验室常规开展D-试验检测红霉素对克林霉素的诱导耐药,提供临床医师合理选用大环内酯类、林可霉素类和链阳菌素B类(MLSB)抗菌药物。
【Abstract】Objective To understand the drug resistance of Staphylococcus to erythromycin and clindamycin and the prevalence of inducible clindamycin resistance of erythromycin-resistant Staphylococcus in our hospital.Methods Kirby-Baucr disk diffusion method were used to detect the drug resistancd of Staphylicoc- cus,and D-test suggested by CLSI 2004 guidelines were used to determine the induciabl clindamycin resistance in erythromycin resistance StaphylicoccusResults Among 293 cases,D-test positive rate 62.2%,and methecillin resistance staphylococcus (MRS)positive rate 57.7%,Methecillin sensitive staphylococcus positive rate 4.5%.Conclusion The clinical microbiology laboratory should detect the induciabl clindamycin resistance in erythromycin resistance Staphylicoccus by D-test. In order to help physicians to select reasonable macrolide-lincosarnide-streplogramin B(MLSB)for Staphylicoccus infection.【Key words】Staphylicoccus; D-Test;Drug resistance葡萄球菌广泛存在于自然界、人和动物的皮肤及与外界相通的腔道中。
耐红霉素葡萄球菌诱导克林霉素耐药的检测
ｉｄ ｃｂｅｃｉｄ ｍｙ ｉ ｅ ｉｔｎ ｅｍｕ ｔｂ ｔｅ ｓｄｉ ｌ ｉ ｌ ｃｏ ｉｌｇ ａ ｏ ａｏ ｙｔ ｒ ｖｄ ｈ ｅ— ｎ ｕ ｉｌ ｌ ａ ｃｎ ｒｓｓａ ｃ ｓ ｅｓｒｓ ｅ ｎｃｉ ｃ ｒ ｂｏｏ ｙｌｂ ｒｔ ｒ Ｏｐ ｏ ｉｅｔ ｅｒ ｆ ｎ ｎ ａ ｍｉ
测， 以指导Ｉ 临床合理使 用抗 生素 。 【 关键词ｌ 葡萄球菌属 红霉素 ； 克林 霉索 ； 抗药性 ， 细菌 中圈分类号 ： ４ ６ ５ Ｒ ４ 。 文献标识码 ： Ａ 文章编号 ：６ ３４ ３ （０ ７ ０ —２ —３ １７ —１ ０ ２ ０ ） ２１２０
Ｄｅ ｅ ｔｏ ｏ ｎｄ ｔｏ ｏ ｌｎ ｍ ｙ ｉ ｒ ｓｓ ａ ｃ ｉ ｅ ｙ ｈ ｏ ｙ ｉ ｒ ｓｓａ ｓ ｌｔｓ ｏ ｔ ｈｙ ｏ ｏ ｃ ｓ ｔｃ ｉ ｎ ｆ ｒ ｉ ｕｃ ｉｎ ｆ ｃｉ ｄａ ｅｎ ｅ ｉｔ ｎ ｅ ｎ ｒ ｔ ｒ ｍ ｅｎ－ ｅ ｉｔｎｔ ｉｏａ ｅ ｆ Ｓ ａｐ ｌ ｃ ｃ ｕ
ｅｅ ｃ ｏ ｈ ｌ ｃ ｌ ｎ ｉ ｃｏ ｉｌ ｇ ｎ ｓｕ ａ ｅ ｒｎ ｅｆ ｒｔ ｅｃｉ ａ ｔ ａ ｍｉｒ ｂａ ｅ ｔ ｓ ｇ ． ａ
葡茵 、 ＮＳ和 ＭＲ Ｎ Ｃ Ｃ Ｓ均 为 红 霉 索耐 药 而 克 林 霉 索 敏 感 ） 诱 导 克林 霉 素耐 药 检 出 率 分 别 为 中， ６． 、０ ． ％、０ ０ 和 ５ ． 。结 论 临 床微 生物 实 验室 应加 强细 菌诱 导 克林 霉 素耐 药 的检 ３ ６ １ ０ ０ ５ ． ３３
ｍｙｉ ａ ３ ６ ，ｉ ０ ０ ，５ ． ａ ｄ ５ ． ％ ｉ ｔｐ ｙｏ ｏ ｃ ｓ ．ａ ｒｎ ， ｏ ｇ ｌｓ ｅ ａｉｅ ｃ ｗ ｓ６ ． ％ ｎ ０。 ％ ００ ｎ ３ ３ ｎ Ｓ ａ ｈ ｌｃ ｃ ｕ ，Ｓ ｕ ｅ ｓ ｃ ａ ｕａ ｎ ｇ ｔ ｖ
葡萄球菌对克林霉素诱导耐药的检测和分析
葡萄球菌对克林霉素诱导耐药的检测和分析摘要】目的:调查临床分离的葡萄球菌对克林霉素诱导耐药状况。
方法:收集本院2012-2013年分离到的47株红霉素耐药、克林霉素敏感临床分离株，按美国国家临床实验室标准化研究所（CLSI/NCCLS)2004年推荐的双纸片法做克林霉素诱导耐药（D-试验）。
结果:47株葡萄球菌中克林霉素诱导耐药株16（34%）。
结论:我院葡萄球菌克林霉素诱导耐药率较高，应提高对诱导耐药葡萄球菌的监测和控制。
【关键词】克林霉素红霉素葡萄球菌 D 试验【中图分类号】R969 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085（2014）16-0150-01随着抗生素的不断发展和大量使用，葡萄球菌对克林霉素在体外敏感，但临床无效的病例不断上升。
多数葡萄球菌属对大环内酯类耐药的机制是靶位的改变和外排泵机制。
msrA基因编码对大环内酯类耐药是产生一种外排泵；erm基因编码使细菌核糖体23sRNA大亚基2058位的腺苷酸甲酰化引起的，造成细菌核糖体对大环内酯类—林可霉素—链阳菌素B（MLSB）类药物的亲和力降低，对克林霉素产生诱导耐药，同时也对链阳菌素B耐药，因此也称为大环内酯类—林可霉素—链阳菌素B（MLSB）耐药；少数是产生大环内酯类抗生素磷酸转移酶，使抗生素失活。
检测葡萄球菌的克林霉素诱导耐药率可以指导临床合理的经验用药和了解流行情况。
1 材料与方法1.1 材料1.1.1 菌株收集江西省南昌县人民医院2012年1月-2013年12月红霉素耐药、克林霉素敏感临床分离株47株，其中金葡菌11株，凝固酶阴性葡萄球菌36株。
标本种类包括痰液、咽拭子、脓液。
1.1.2试剂葡萄球菌的细菌鉴定为杭州天和微生物试剂有限分司;药敏试验培养基为MH培养基（江门凯林贸易公司）；克林霉素、红霉素纸片（英国BBL公司产品）。
1.1.3方法：双纸片法检测出克林霉素诱导耐药（D试验）：根据2004年NCCLS[推荐在MH琼脂培养基上贴克林霉素（2μg/片）纸片和红霉素（15μg/片）纸片，纸片边缘距离为16～26mm，孵育16～18h。
D-试验对葡萄球菌对克林霉素诱导型耐药的检测分析
者 的病 情评 估 、预 后及指 导治 疗有 一定 临床 意 义 。
参 考 文 献
［ １ ］Ａｎ ｇ ｕ ｓ Ｄ Ｃ，Ｌ ｉ ｎ ｄ ｅ － Ｚ ｗｉ ｒ ｂ ｌ ｅ Ｗ Ｔ，Ｌ ｉ ｄ ｉ ｃ ｋ ｅ ｒ Ｊ ，ｅ ｔ ａ １ ．Ｅ ｐ ｉ ｄ ｅ ｍｉ —
ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ ｏ ｆ ｓ ｅ ｖ ｅ ｒ ｅ ｓ ｅ ｐ ｓ ｉ ｓ ｉ ｎ ｔ ｈ ｅ Ｕｎｉ ｔ ｅ ｄ Ｓ ｔ ａ ｔ ｅ ｓ ：ａ ｎ ａ ｌ ｙ ｓ ｉ ｓ ｏ ｆ ｉ ｎ ｃ ｉ —
［ ９ ］Ｇｈ ｏ ｒ ｂ ａ ｎ ｉ Ｇ．Ｐ ｒ ｏ ｃ ａ ｌ ｃ ｉ ｔ ｏ ｎ ｉ ｎ ｒ ｏ ｌ ｅ ｉ ｎ ｄ ｉ ｆ ｆ ｅ ｒ ｅ ｎ ｔ ｉ ａ ｌ ｄ ｉ ａ ｇ ｎ ｏ ｓ ｉ ｓ ｏ ｆ ｉ ｎ ｆ ｅ ｃ — ｔ ｉ ｏ ｎ ｓ ｔ ａ ｇ ｅ ｓ ａ ｎ ｄ ｎ ｏ ｎ ｉ ｎ ｆ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｉ ｎ ｆ ｌ ａ ｍｍａ ｔ ｉ ｏ ｎ［ Ｊ ］ ．Ｐ ａ ｋ Ｊ Ｂ ｉ ｏ ｌ Ｓ ｃ ｉ ，
福建医药杂志 ２ ０ １ ３年 ２月 第 ３ ５卷 第 １期
Ｆ ｕ ｊ ｉ ａ ｎ Ｍｅ ｄ Ｊ ， Ｆ ｅ ｂ ｒ ｕ ａ ｒ ｙ ２ ０ １ ３ ， Ｖｏ １ ． ３ ５ ， Ｎｏ ． １
・ ６ ３ ・
表明 Ｐ Ｃ Ｔ值在 某 种 程 度 上 可 以较 好 地 反 映 脓 毒 症
［ ３ ］Ｇ ｕ ｉ ｈ ｏ ｕ ｒ ｄ ｅ ｎ ｃ ｈ ｅ Ｊ ，Ｂ ｅ ｄ ｕ Ａ，Ｐ ｅ ｔ ｚ ｏ ｌ ｄ Ｌ ，ｅ ｔ ａ １ ．Ｂ ｉ ｏ ｃ ｈ ｅ ｍｉ ｃ ａ ｌ
ｍａ ｒ ｋ ｅ ｒ ｓ ｎ ｅ ｏ ｎａ ｔ ａ ｌ ｓ ｅ ｐ ｓ ｉ ｓ ：ｖ ａ ｌ ｕ ｅ ｏ ｆ ｐ ｒ ｏ ｃ ａ ｌ ｅ ｉ ｔ ｏ ｎ ｉ ｎ ｉ ｎ ｔ ｈ ｅ ｅ ｍｅ ｒ ｇ ｅ ｎ ｃ ｙ
葡萄球菌对克林霉素诱导型耐药的检测与分析
1.2仪器与试剂35℃恒温箱，ATB Expression细菌分析仪、ID32 STAPH细菌鉴定卡（生物梅里埃公司），红霉素药敏纸片（15μg）、克林霉素药敏纸片（2μg）（Oxoid公司），M-H琼脂（杭州天河）。
葡萄球菌对克林霉素诱导型耐药的检测与分析
了解我院临床分离的葡萄球菌对红霉素及克林霉素诱导型耐药的发生率，帮助临床医师正确选择MLSB药物。葡萄球菌对红霉素和克林霉素的耐药呈明显上升趋势，且出现诱导型克林霉素耐药的菌株[1]。我们对临床分离到的葡萄球菌进行了红霉素、克林霉素耐药的检测，报告如下。
1材料和方法
参与文献
[1]刘欢乐，周铁丽.克林霉素诱导型耐药葡萄球菌的检测与分析[J].临床检验杂志，2005，23（5）：137-338.
[2]沈定霞，罗燕萍，徐雅萍，等.葡萄球菌对红霉素和克林霉素的诱导性耐药研究［J］.中华检验医学杂志，2005，28：400-402.
[3]Fiebelkorn K R, Cranford S A ,McElmeel M L,et al. Practical disk diffusion method for detection of inducible clindamycin resistance in Staphylococcus aureus and coagulase-negative staphylcocci［J］.J Clin Microbiol,2003,41(10):4740-4744.
2种表型试验检测葡萄球菌诱导型克林霉素耐药的评估及基因分析
Ｌ ａ ｂ ｏ ｒ ａ ｔ ｏ ｒ ｙ Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ｉ ｎ ｅ ， Ｄ ｅ ｃ ｅ ｍｂ ｅ ｒ ２ ０ １ ５ ，Ｖ ｏ １ ．３ ０ Ｎ ｏ ．１ ２
Байду номын сангаас
文章 编 号 ： １ ６ ７ ３ － ８ ６ ４ ０ （ ２ ０ １ ５） １ ２ － １ ２ ３ ８ ￣５
ｅ ｒ ｙ ｔ ｈ ｒ ｏ ｍｙ ｃ ｉ ｎ ／ｃ ｌ ｉ ｎｄ ａ ｍｙ ｃ ｉ ｎ ｃ ｏ ｍｐ ｏ ｓ ｉ ｔ ｅ ｗｅ ｌ ｌ ｏ ｆ ｔ ｈ ｅ １ １ ５ ｉ ｓ ｏ ｌ ａ ｔ ｅ ｓ ｗｈ ｉ ｃ ｈ ｗｅ ｒ ｅ ｒ ｅ ｓ ｉ ｓ ｔ ａ ｎ ｔ ｔ ｏ ｅ ｒ ｙ ｔ ｈ ｒ ｏ ｍｙ ｃ ｉ ｎ ａ ｎ ｄ ｓ ｅ ｎ ｓ ｉ ｔ ｉ ｖ ｅ ｔ ｏ
张静 华 ， 袁应 华 ， 刘 妍 ， 成 洁 ， 孙奋 勇 （ 同济 大学 附属第 十人 民医院 ， 上海 ２ ０ ０ ０ ７ ２ ）
摘要 ： 目的 评价 Ｍｉ ｃ ｒ ｏ Ｓ ｃ ａ ｎ革兰阳性 复合 板（ 简称 Ｐ Ｃ ３ ３复合板 ） 和 Ｄ试验 （ 红霉素 、 克林 霉素双纸片法 ） 检 检测 １ １ ５株 Ｐ Ｃ ３ ３ 复合板检测结果 为红 霉素耐
测葡 萄球菌诱导型克林霉素耐药 的性能及耐药基 因分析 。方 法
药而克林霉素敏感 的葡萄球菌对红霉素／ 克林 霉素复合孔的耐药性 ， 同时用 Ｄ试验 检测红霉 素对克林霉 素的诱
导耐药表 型 ， 用聚合酶链反应 （ Ｐ Ｃ Ｒ） 检测大环 内酯类一 林 可酰胺类 一 链 阳霉素 Ｂ类 复合药物 （ ＭＬ Ｓ ） 的耐药 基因 。 结果 Ｐ Ｃ ３ ３复合板耐药检出率分别为金黄色葡萄球菌 ６ １ ． ３ ％、 凝 固酶 阴性葡萄球菌 ４ ７ ． ６ ％， Ｄ试验耐药检 出率 分别 为金 黄色 葡萄 球菌 ６ １ ． ３ ％、 凝 固酶 阴性 葡 萄球 菌 ５ １ ． ２ ％， ２种方 法 的检测 结 果差 异无统 计 学意义 （ Ｐ＞ ０ ． ５ ） 。以 Ｄ试验为判断标准计算 Ｐ Ｃ ３ ３复合 板检测克林 霉素诱 导耐药的敏感性为 ９ ５ ． １ ％， 特异性为 １ ０ ０ ． ０ ％； 检
葡萄球菌中红霉素诱导型克林霉素耐药性分析
模型中 Ｃｐ ａａ ｎ一３的表 达 ［］临 床 神 经 病 学 杂 志， Ｊ．
２Ｏ ，６ ４ ：１ —２７ Ｏ３ １（ ）２４ １ ．
丁苯肽是近年我国脑血管领域 的一个新药 。它可 以阻 ［］ Ｅ ａ Ｖｌ ｃｔ Ｉ ａ ｔｎＳ ｄ ｒ ｐＥ ｅｔｏ ａｎｖｌ ６ ｄｌ ＯｅＡ ｕ ｎ ｒｉ ｔ ｙＧｏ ．ｆｃ ｆ ｏｅ ￣ ｌ ｅ ｆ ｃｏ ｕ ｕ
再灌注脑组织 Ｎ Ｏ含量 和 Ｎ Ｓ活性变 化 ［］ 临床 神 Ｏ Ｊ．
经病学杂志 ，００ １ ：０ ． ２０ ，３２ １
ｔｅ ｆ ｅｒ ｄｃ ｌ ｃ ｖ ｎ ｅ ｄ ｒｖ ｎ ８ａ ｎ ｕｏ ｒｔｃｉｅ ａ ｈ ｅ ｉａ ａ ａ ｇ ｒ ａ ａ ｏ ｅ ａ ｅ ｒｐｏｅ ｔ － ｒ ａ ａ ａ ｖ
ｇｎ［］Ｎｐｏ ａ￣ｇｕＺ ｌ ２０ ，１（ ）３ １ ０ ． ａｔＪ ．ｉｐｎＹ ｋ ｋ ｎ ， ２ １９ ５ ：０ —３８ － ｉＯ
ｖｔ ｒ ｓ２Ｏ ，（ ）３ ． ａｇＤｕ ，ＯＯ １３ ：４ ｉ ｇ
氧化剂和兴奋 氨基酸作用的神经保 护药物治疗能阻止组织 ［］ Ｔ ｂｉ ｈ Ｒ．ｄｒｖｌ ｉ ｌｔ ｏｙ ［ ］Ｃ ｒ Ｏ ｉ Ｉ． ４ ａｒ ｅｉ Ｅ ａ ｏｅＭ ｓ ｉ —ｔ ｐ Ｊ ．ｕｔ ｐ ａ ａ ｌ ｂｂ ｋ ｎｎ 损伤扩散 ， 提高存活率 。而 依达拉奉静 脉给药后 可阻 止羟
摘要： 为了解葡萄球菌中可诱 导的克林霉素耐药在我 院 的发 生情况 ， Ｋ—Ｂ法检测 ２ Ｏ 用 Ｏ ６年 １ 月—２ ０ 年 ２ ０ｒ ７
月 ２６株葡萄球菌对 １ 种抗菌药物 的耐药性 ， ４ ２ 双纸 片法测定 红霉素对 克林霉 素的诱导 耐药表型 。结果 万古
并不影响血液凝 固 、 维蛋 白溶解 、 纤 血小板 聚集 ， 因而 不会 增加 出血的危险【 。 断缺血性 脑卒 中所致 脑损伤 的多个病 理环节 ， 具有较 强的 抗脑 缺血作用 ， 明显缩小梗 死面积 ， 减轻脑水肿 ， 能够重构
葡萄球菌对克林霉素诱导耐药表型及基因型检测研究
【Ｂ Ｔ Ａ ］ Ａ Ｓ Ｒ ＣＴ
Ｏｂ ｃｉｅ Ｔ ｎ ｅｔ ａｅ ｔｅ ｅｙｈｏ ｃｎｉｄ ｃｄ ｐ ｅｏｙ ｅ ｎ ｅｏｙ ｅ ｎ ｊ ｔ ｏ ｉｖ ｓｇｔ ｈ ｒｔｒｍｙｉ— ｕｅ ｈ ｎ ｔ ｓ ａｄ ｇｎ ｔ ｓ ｉ ｅ ｖ ｉ ｎ ｐ ｐ
Ｍｅ ｈ ｄ ３ ０ ｓｌｔｓ ｆ Ｓ ａ ｙｏ ｏ ｃ ｓ ｔｏ ｓ ５ ｉｏａｅ ｏ ｔ ｐｈ ｌｃ ｃ ｕ ｗｅｅ ｏｌｃｅ ｉ ｏ ｒ ｒ ｃ ｌ ｔｄ ｎ ａ ｅ
（ ｄｃ ｌ ａ ｏ ａ ｒ ｅ ｔ ，ｈ ｆｉｔ ｏ ｐｔｌ ｆ ｎ ｘａＭｅ ｉ ｌ ｉｅｓ ｙ Ｎ ｎ ｘａ Ｙ ｎ ｈ ａ ５ ０ ４ Ｍｅ ｉ ｂ ｒｔ ｙ Ｃ ｎｅ ｔｅ ｉ ａ ｄ Ｈ ｓ ｉ ｇ ｉ ａＬ ｏ ｒ Ａｆ ｌ ｅ ａ ｏ Ｎｉ ｄｃ ｖ ｒｉ ， ｉｇ ｉ， ｉ ｕ ｎ ７ ０ ０ ， ａ Ｕｎ ｔ ｃ Ｃ ｉａ ｈｎ ）
目的 了解葡萄球菌对红霉 素及 克林 霉素 的耐药性 ， 测定红０ 年分离到 的３ ０ ０５ ０ ７ ５ 株葡萄球菌采用 Ｋ— Ｂ法做药敏试验 ， 对红 霉 ３０ ５ 株葡萄球菌 中克 林霉素诱导耐 药 ６ 株 ， ４ Ｄ试验 阳性为 １ ． ８３ ％。
・
９ ・ ４
分子诊 断与治疗杂志
２ １年 ３ ００ 月第 ２ 卷第 ２ 期
ＪＭｏ Ｄｉ ｎ Ｔ ｅ Ｍａｃ ０ ０Ｖ １２Ｎｏ ２ ｌ ａ ｈＬ ｇ ｒｈ２ １， ｏ． ．
・
论 著 ・
葡萄球菌对克林霉素诱导耐药表型及基因型检测研究
贾伟 赵志军 杨晓燕 魏 军
【 摘
要】
ｃｉｄ ｍｙ ｉ— ｓｓ ｎ Ｓｔ ｈ ｌｃ ｃ ｕ． ｌ ａ ｅｎｒ ｉｔ ｔ ａ ｙ ｏ ｏ ｃ ｓ ｎ ｅ ａ ｐ
微量肉汤稀释法检测金黄色葡萄球菌诱导型克林霉素耐药结果分析
丘脑-垂体-肾上腺皮质功能,过度兴奋肾上腺髓质,出现生理损害和反应,如加快分解代谢㊁肌肉紧张㊁增快心率㊁增高血压㊁躁动不安,且患者呈非生理状态,因此,患者在非生理状态会严重影响诊疗效果和内镜操作,干扰栓塞㊁硬化㊁套扎治疗的准确性,加大治疗盲目性,引发再出血可能性㊂丙泊酚麻醉维持时间短,见效速度快,持续输注具有恢复速度快㊁毒性小㊁体内无蓄积㊁血药浓度稳定等特征,已发展为临床一线麻醉用药㊂但对心血管有明显抑制作用,针对缺乏血容量者,可能会引发循环衰竭㊂且药物代谢途径为肝脏,若肝硬化患者使用此药物麻醉,代谢速度缓慢,且停药后,苏醒时间长,肝脏负担加重㊂本研究中共纳入80例食管胃底静脉曲张内镜治疗术患者,分组讨论后,相比丙泊酚麻醉的对照组患者,采用七氟烷吸入全身麻醉的研究组血流动力学指标更为稳定,苏醒速度快,也同时证实了丙泊酚全凭静脉麻醉效果略次于七氟烷吸入麻醉,且研究报告与以往报道结果[3]相符㊂七氟烷也为临床手术常用麻醉药物之一,具有苏醒速度快㊁诱导快速,患者心血管受影响较小等优势㊂对肝肾功能影响小,体内生物转化的可能性小,药物大部分成分均从肺组织排出[4],仅少量从尿液排出,为此,可保证麻醉安全性㊂麻醉后,患者均为睡眠状态,无呛咳㊁躁动或其余不适,与生理状态相似,减弱胃肠蠕动,舒展官腔,内镜医生可在患者安静的状态下,明确观察到病变微小处,准确诊断㊂尤其是套扎㊁栓塞㊁硬化等干预食管胃底曲张静脉时,患者呈放松状态,不会出现呕吐㊁恶心症状,视野清晰,可仔细观察靶血管,准确定点,降低因注射针滑坡血管㊁注射不准确㊁套扎不完全等不良事件㊂综上所述,建议临床在制定食管胃底静脉曲张内镜术手术方案时考虑采用七氟烷吸入麻醉,此麻醉方式相对丙泊酚静脉麻醉,术后苏醒速度快㊁安全㊁血流动力学稳定,值得临床推广㊂4 参考文献[1] 王明仓,陈玲阳,周春莲,等.三种镇静方法用于内镜下食管胃底静脉曲张结扎术效果比较[J].浙江医学,2015,37 (19):1607.[2] 周光文,杨连粤.肝硬化门静脉高压症食管㊁胃底静脉曲张破裂出血诊治专家共识(2015)[J].中国实用外科杂志, 2015,10(10):1086.[3] 刘迎春.上消化道出血胃镜检查中应用丙泊酚静脉麻醉的价值[J].现代消化及介入诊疗,2016,21(4):632. [4] 刘玉明,姚志雄,叶孝银,等.盐酸羟考酮注射液复合丙泊酚麻醉用于内镜下食管胃底静脉曲张套扎术的疗效和安全性[J].岭南现代临床外科,2016,16(3):314.[收稿日期:2018-12-23 编校:王丽娜]微量肉汤稀释法检测金黄色葡萄球菌诱导型克林霉素耐药结果分析李秋燕,夏志杨,熊小敏,刘志琼,陈婉婷 (广东省东莞仁康医院检验科,广东 东莞 523952)[摘 要] 目的:分析微量肉汤稀释法检测金黄色葡萄球菌诱导型克林霉素耐药结果㊂方法:收集门诊患者和住院患者标本中分离的金黄色葡萄球菌共计372株进行临床研究㊂所有样本给予药敏试验㊁克林霉素诱导耐药试验,分析372株金黄色葡萄球菌对红霉素㊁克林霉素的耐药表型,对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)的菌株数量,比较诱导型和结构型克林霉素耐药率之间的差异㊂结果:共计372株金黄色葡萄球菌中,MRSA共计205株,占55.11%(205/372);而MSSA共计167株,占44.89%(167/372)㊂结构型耐药97株,占26.06%(97/372)㊂诱导型耐药114株,占30.65%(114/372)㊂MRSA与MSSA中结构型耐药分别为34.15%㊁41.92%,差异无统计学意义(P>0.05),MRSA中诱导型耐药为13.17%,明显低于MSSA的26.35%,且差异有统计学意义(P<0.05)㊂结论:微量肉汤稀释法能够为指导临床抗生素的合理应用提供可靠依据㊂[关键词] 微量肉汤稀释法;金黄色葡萄球菌;诱导型;结构型Detection of Inducible Clindamycin Resistance in Staphylococcus aureus by Microbroth Dilution Method LI Qiu-yan,XIA Zhi-Yang,XIONG Xiao-min,et al(Departncent of laboraton,Guangdong Dongguan Renkang Hospital,Dongguan523952,China)Abstract:Objective To analyze the results of microbroth dilution method for detecting inducible clindamycin resistance of Staphylococcus aureus.Method A total of372strains of Staphylococcus aureus isolated from outpatients and inpatients in our hospital were collected for clinical study.Drug susceptibility test and clindamycin induced resistance test were used to analyze 372strains of Staphylococcus aureus resistant to erythromycin and clindamycin.The number of strains resistant to methicillin-resistant Staphylococcus aureus(MRSA)and methicillin-sensitive Staphylococcus aureus(MSSA)was compared.Differences in clindamycin resistance rates among configurations.Results There were372strains of Staphylococcus aureus,205strains of MRSA,accounting for55.11%(205/372),while167strains of MSSA,accounting for44.89%(167/372).97strains of struc⁃tural drug resistance accounted for26.06%(97/372).114strains of inducible drug resistance accounted for30.65%(114/ 372).Structural resistance was34.15%and41.92%in MRSA and MSSA,respectively.There was no significant difference (P>0.05).Inducible resistance was13.17%in MRSA,which was significantly lower than that in MSSA(26.35%),the difference was statistically significant(P<0.05).Conclusion Microbroth dilution method can provide reliable basis for guiding the rational application of antibiotics in clinic.Key Words:Microbroth dilution method;Staphylococcus aureus;Inducible type;Structural type 金黄色葡萄球菌是临床上引起化脓性感染㊁肺炎等感染性疾病的主要病原性葡萄球菌,治疗中以红霉素为代表的大环内酯类药物和以克林霉素为代表的林可霉素类抗菌药为主[1]㊂其中克林霉素的有两种耐药表型,分别为结构型和诱导型[2]㊂为了观察金黄色葡萄球菌诱导型克林霉素的耐药性,我院使用了微量肉汤稀释法进行检测,为后续的临床抗生素的应用提供参考㊂现报告如下㊂1 资料与方法1.1 菌株来源:收集2016年1月~2018年12月本院门诊患者和住院患者标本中分离的金黄色葡萄球菌,剔除同意患者同种标本重复分离的菌株,共计372株进行临床研究㊂所有菌株均经血浆凝固酶实验以及细菌鉴定分析仪确定㊂质控菌株为ATCC29213,购自广东省临床检验中心㊂1.2 仪器与试剂:细菌鉴定药敏分析仪:德国西门子公司生产,Mmcroscan-AS4型;CAMHB肉汤和PC33型葡萄球菌鉴定药敏复合板均为西门子公司生产的配套产品㊂1.3 方法1.3.1 药敏试验:红霉素㊁克林霉素的耐药性使用微量肉汤稀释法进行检测㊂红霉素敏感:≤0.5μg/ml为判断折点,1~ 4μg/ml位中介折点,≥8μg/ml为耐药折点;克林霉素敏感:≤0.5μg/ml为判断折点,1~2μg/ml位中介折点,≥4μg/ml为耐药折点㊂所有操作和标准严格按照2015版CLSI标准执行㊂1.3.2 克林霉素诱导耐药实验:在复合药敏孔中放置4μg/ml红霉素以及0.5μg/ml克林霉素,菌液浓度配置为5×105CFU/ml,放置于35℃的恒温培养箱中孵育18~24h,然后观察药敏孔中的情况判断药敏实验结果㊂阳性结果判断标准[3]:复合药敏孔中见细菌生长㊂1.3.3 耐药表型判断[4]:结构型耐药:红霉素和克林霉素均耐药;诱导型耐药:红霉素耐药,克林霉素敏感,诱导实验阳性㊂1.4 分析指标:分析2016年~2018年372株金黄色葡萄球菌对红霉素㊁克林霉素的耐药表型,对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)的菌株数量,比较诱导型和结构型克林霉素耐药率之间的差异㊂1.5 统计学处理:所有数据采用SPSS19.0统计学软件进行处理,计量资料以均数±标准差(x±s)表示,采用t检验;计数资料以率(%)表示,行χ2检验㊂以P<0.05为差异有统计学意义㊂2 结果2.1 金黄色葡萄球菌对红霉素㊁克林霉素的耐药表型:2016年~ 2018年共计372株金黄色葡萄球菌中,MRSA分别为45株㊁75株㊁85株,共计205株,占55.11%(205/372);而MSSA分别64株㊁52株㊁51株,共计167株,占44.89%(167/372)㊂结构型耐药97株,占26.06%(97/372)㊂诱导型耐药114株(2016年MRSA 12株,MSSA22株;2017年MRSA27株,MSSA13株;2018年MR⁃SA31株,MSSA9株),占30.65%(114/372)㊂详见表1㊂表1 金黄色葡萄球菌对红霉素㊁克林霉素的耐药表型(株)项目2016年(n=109)MRSA MSSA2017年(n=127)MRSA MSSA2018年(n=136)MRSA MSSA合计EM-S/CM-S4134861752 EM-S/CM-I0201003 EM-S/CM-R0000000 EM-I/CM-S3******* EM-I/CM-I0210104 EM-I/CM-R1000102 EM-R/CM-S142935193713147 EM-R/CM-I47959741 EM-R/CM-R199241027897合计4564755285513722.2 诱导型和结构型克林霉素耐药率之间的差异比较:MR⁃SA与MSSA中结构型耐药分别为34.15%㊁41.92%,经比较,差异无统计学意义(P>0.05)㊂MRSA中诱导型耐药为13.17%,明显低于MSSA的26.35%,差异具有统计学意义(P<0.05)㊂详见表2㊂表2 诱导型和结构型克林霉素耐药率之间的差异比较[例(%)]组别例数结构型耐药诱导型耐药MRSA20570(34.15)27(13.17) MSSA16770(41.92)44(26.35)χ2值2.36710.346P值0.1240.0013 讨论 红霉素是治疗革兰阳性球菌所导致各种感染的主要药物,也是青霉素过敏患者的替代药物[5]㊂克林霉素是治疗革兰阳性球菌和厌氧菌多导致的感染,同时是金黄色葡萄球菌所导致的骨髓炎首选药物[6]㊂但是随着抗生素滥用情况的日益严重,MRSA检出率呈现逐年升高的趋势,葡萄球菌对于大环内脂类抗菌药物的耐药性也逐年升高㊂ 研究发现,葡萄球菌对于大环内脂类抗菌药的耐药机制主要是药物泵出以及核糖体药物结合靶位的改变两个方面[7]㊂泵出型耐药由msrA基因编码,所表现出来的是葡萄球菌对克林霉素敏感,而对红霉素呈现耐药表现,诱导试验结果为阴性㊂核糖体药物结合靶位改变时通过erm基因进行调控的,其变异包括两种,一种是自身结构变异,也被称为结构型耐药,细菌对红霉素和克林霉素同时耐药;另一种是红霉素诱导产生的变异,也被称为诱导型耐药,表现为红霉素耐药,对克林霉素敏感,但是经过红霉素诱导后克林霉素耐药[8]㊂诱导型耐药虽然在体外药敏试验中表现为克林霉素敏感,但是实际的治疗中克林霉素的治疗是无效的[9]㊂在临床检测中,结构型耐药最容易被检测出,而诱导型耐药也需要被检测,为临床抗菌素的应用提供指导㊂目前临床应用的实验室检测方法分为D试验法和微量肉汤稀释法㊂D试验法检测结果简单直观,更适用于手工检测,而微量肉汤稀释法更合适仪器检测[10]㊂ 在本次研究中,2016年~2018年共计372株金黄色葡萄球菌中,MRSA共计205株,占55.11%(205/372);而MSSA共计167株,占44.89%(167/372)㊂结构型耐药株97株,占26.06%(97/372)㊂诱导型耐药株114株,占30.65% (114/372)㊂可见MRSA已经占有主要地位㊂在耐药分型中,诱导型高于结构型㊂从耐药分型差异上看,MRSA与MSSA中结构型耐药分别为34.15%㊁41.92%,差异无统计学意义(P> 0.05),MRSA中诱导型耐药为13.17%,明显低于MSSA的26.35%,差异具有统计学意义(P<0.05)㊂在国内学者的报道中,诱导型克林霉素耐药要高于本次研究,考虑与细菌耐药基因的地区差异和抗生素的使用差异相关㊂ 综上所述,微量肉汤稀释法能够为指导临床抗生素的合理应用提供可靠依据,临床抗生素的应用应以检验结果为指导,避免抗生素的滥用造成耐药菌株的流行㊂4 参考文献[1] 李 英.儿科患者院内感染金黄色葡萄球菌耐药基因检测及耐药情况分析[J].中国病原生物学杂志,2016,11(1): 82-86.[2] 张静华,袁应华,刘 妍,等.2种表型试验检测葡萄球菌诱导型克林霉素耐药的评估及基因分析[J].检验医学, 2015,30(12):1238-142.[3] 全国细菌耐药监测网.2014~2017年中国儿童及新生儿患者细菌耐药监测研究[J].中华医学杂志,2018,98(40): 3279-3287.[4] 宋 涛,张平安.金黄色葡萄球菌克林霉素诱导耐药率[J].中国感染控制杂志,2016,15(6):430-431,435. [5] 周 珊,张 蓓,徐修礼,等.血流感染金黄色葡萄球菌克林霉素耐药与分子流行病学研究[J].国际检验医学杂志, 2015,36(24):3517-3519.[6] 朱翠珍,刘春林,吴宝连,等.血流感染金黄色葡萄球菌耐药性分析及对患者预后影响[J].中国感染与化疗杂志2016,16(1):1-4.[7] 闵 亮,周树平,刘发娣,等.江西儿童患者704株金黄色葡萄球菌耐药性分析[J].实验与检验医学,2019,37(4): 652-654,658.[8] 刘秀兰,郭 盼.金黄色葡萄球菌对克林霉素的诱导性耐药分析[J].中国卫生检验杂志,2015,25(6):899-900. [9] 侯向萍,秦旭红,龚河军,等.新疆阿拉尔地区耐红霉素葡萄球菌对克林霉素诱导耐药性的研究[J].临床误诊误治, 2015,28(10):72-76.[10] 江培涛,杨 健,杨正南,等.微量肉汤稀释法检测金黄色葡萄球菌诱导型克林霉素耐药结果分析[J].国际检验医学杂志,2016,37(17):2467-2469.[收稿日期:2019-02-23 编校:孟玲玲]。
葡萄球菌临床分离株克林霉素诱导耐药的检测
霉 素 敏 感 的有 ３ 株 ， 中 Ｄ 试 验 阳性 的有 １ 株 ， ４ 其 ８ 占红 霉 素 耐 药 而 克 林 霉 素 敏感 的 ５ ． ％ ， 出 耐 甲氧 西林 金 黄 色 ２９ 检 葡萄球菌（ ＭＲＳ ５ Ａ） ６株 ， ６ ． ；７ 凝 固酶 阴性 的 葡 萄 球 菌 （ ＮＳ 对 红 霉 素 和 克林 霉 素 均 耐 药 的 有 ３ 株 ， 占 Ｏ８ ７ 株 Ｃ ） １ 占
Ｊ Ａ Ｋｕ － ｕ， Ｉ ｎ ｒ ＨＵ ａ － ａ ， Ｘｉ ｏ ｙ ｎ ＨＵ ｏ ｇ ｈ ａ， ＯＮＧ ｉ ｎ ｑ ｕ， Ｌ ｎ － ｕ ＸＩ Ｊ ａ － ｉ ＣＡＯ ｉｐ ｎ ， Ｌ 。 ｉ ｇ ＧＵＩ Ｂ ｎ － ｏ ｇ ｉ ｇｄ ｎ
（ ｐ ｒｍｅｔ ｆＬ ｂ ｒｔｒ ｅ ｉｉｅ ｔｅ ｅｏ ｄＡｆ ｉ ａｅ ｓ ｉ ｌｏ ｎ ｈ ｎ ｎｖｒｉ Ｄｅ ａ ｔ ｎ ａ ｏ ａｏｙＭ ｄｃｎ ， ｃ ｎ ｆｌ ｔｄ Ｈｏｐ ｔ ｆ Ｎａ ｃ ａ ｇ Ｕ ｉｅｓｔ ｏ ｈ Ｓ ｉ ａ ｙ，
４ ． ， 红 霉 素 耐 药 而 克 林 霉 素 敏 感 的 有 ３ Ｏ２ 对 １株 ， 中 Ｄ 试 验 阳 性 １ 其 ４株 ， 占红 霉 素 耐 药 而 克 林 霉 素 敏 感 的 ４ ． ， 出 耐 甲氧 西林 凝 固酶 阴性 葡 萄 球 菌 （ Ｃ Ｓ ５ ５２ 检 ＭＲ Ｎ ） １株 占 ６ ． 。 结论 ６２ 葡 萄 球 菌 临 床 分 离 株 对 红 霉 素 耐
ｔ ｃ ｉ ｎ ｆ ｒ Ｃｌｎ ａ ｙ ｉ － ｎ ｕ ｅ ｔｂ ｏ ｉ － ｓ ｓ ａ ｃ ｆ ｅ ｔｏ ｏ ｉ ｄ ｍ ｃ ｎ Ｉ ｄ ｃ ｄ Ａｎ ｉ ｉ ｔｃ Ｒｅ ｉ ｔ ｎ ｅ ｏ ｔ ｅ Ｉ ｏ ａ ｅ ｔ ｐｈ ｌ ｃ ｃ ｉ ｈ ｓ ｌ ｔ ｄ Ｓ ａ ｙ ｏ ｏ ｃ