克伦特罗酶联免疫定量检测试剂盒I
克伦特罗说明书一步法
盐酸克伦特罗酶联免疫检测试剂盒使用说明书一、概要克伦特罗（clenbμterol，CLE）是一种 －肾上腺受体激动剂，此类药品在临床上用于治疗支气管哮喘、慢性支气管炎和肺气肿等疾病。
因为该药可以提高瘦肉率，减少脂肪沉积和促进动物生长，被一些畜牧养殖企业作为养殖促进剂非法使用。
人食用了饲喂克伦特罗作为添加剂的动物所产生的畜产品后，残留的克伦特罗可导致人体肌肉震颤、心悸、神经过敏、头痛、目眩、恶心、呕吐、发烧、战栗等症状，对消费者的健康造成极大危害。
我国农业部第235号文件规定不得检出。
本试剂盒是应用ELISA技术研发的药物残留检测产品,与仪器分析技术比较，能经济、快速地检测出尿样、肌肉、肝脏及饲料等中的克伦特罗。
二、测定原理本试剂盒是利用竞争ELISA方法，在酶标板微孔上预包被抗克伦特罗抗体。
检测时，加入标准品或样品溶液及克伦特罗酶结合物，他们竞争性地与克伦特罗抗体结合，形成抗原抗体复合物；用TMB底物显色；加入反应终止液后在450nm波长酶标仪下进行检测，样品中的克伦特罗浓度与吸收光强度成反比。
三、试剂盒组成酶标板1块(包被抗克伦特罗抗体)标准液6瓶（1ml/瓶）：0、0.1ppb、0.3ppb、0.9ppb、2.7ppb、8.1ppb。
酶结合物…………………………7ml显色剂A …………………………7ml显色剂B …………………………7ml终止液…………………………7ml10×浓缩洗涤液…………………50ml说明书……………………………1份四、需要但试剂盒中不提供的器材和试剂（1）设备……微孔板酶标仪(450nm)……振荡器……离心机……微量移液器：20μl～200μl,100μl~1000μl……容量瓶：100ml，500ml，1000ml（2）试剂……三氯乙酸……氢氧化钠……叔丁基甲醚色谱级……浓HCl……氯仿……磷酸……Tris……乙酸乙酯……乙腈五、样本前处理步骤样本处理前须知处理任何样本时，都须注意：（1）实验中必须使用一次性吸头，在吸取不同的试剂时要更换吸头。
克伦特罗ELISA快速检测方法
克伦特罗ELISA快速检测方法克伦特罗属于-兴奋剂类药物，可以提高脂肪型动物的瘦肉率和加速动物生长。
8.3 当板间差异性大时，可能原因是板与板之间孵育时间相差太大，板与板之间洗涤不一致，移液枪使用不当，温度不同等。
克伦特罗属于-兴奋剂类药物，可以提高脂肪型动物的瘦肉率和加速动物生长。
目前由于多起克伦特罗中毒事件且出现了死亡案例，因此被禁止使用。
克伦特罗ELISA快速检测试剂盒与经典色谱法相比，具有操作过程简单、样品处理快捷，可同时分析多个样品，分析时间短、成本低、灵敏度高且对环境污染小等优点。
1 原理ELISA方法的基本原理是酶分子与抗体或抗体分子共价结合，此种结合不会改变抗体的免疫学特性，也不影响酶的生物学活性。
此种酶标记抗体可与吸附在固相载体上的抗原或抗体发生特异性结合。
2 试样的准备2.1 对于尿样可直接用于检测，或者样品比较浑浊时，可适当离心。
当尿样冷冻时，应将尿样回温再测。
2.2 饲料样品要按照说明书的处理步骤进行。
当然，为保证样品充分被提取，可适当延长涡旋时间、离心时间及离心转数。
3 试剂的准备3.1 不同批次的试剂盒不能混用，因为抗体和微孔板具有盒与批次的特异性。
3.2 按试剂盒说明书的要求准备实验中需用的试剂。
ELISA中用的蒸馏水或去离子水，包括用于洗涤的应为新鲜的和高质量的。
自配的缓冲液应用pH计测量较正。
3.3 从冰箱中取出的实验用试剂应待温度与室温平衡后使用。
试剂盒中本次实验不需用的部分应及时放回冰箱保存。
3.4 检测过程中应尽量保持室温20~25℃，避免在通风口操作，温度过低、过热或蒸发都会影响检测数据的准确性。
同样不应再阳光直射下实验，防止过热或蒸发带来影响。
4 加样4.1 在ELISA中一般有4次加样步聚，即加标本或样品、酶结合物、底物、终止液。
加样时应将所加物加在板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可溅出，不可产生气泡，当有气泡时可用干净的枪头小心刺破。
4.2 加标准及样品时一般用微量加样器，按规定的量加入板孔中，每次加标本应更换吸嘴，以免发生交叉污染。
胶体金法与酶联免疫法相结合快速检测克伦特罗
胶体金法与酶联免疫法相结合快速检测克伦特罗苏存举,陈福生3,高志贤3①,苗颂②,刘楠①,冯屹(华中农业大学食品科技学院,武汉430070) 摘要:目的研究胶体金免疫层析法(GIC A)与酶联免疫吸附法(E LIS A)相结合,以建立对饲养、屠宰、流通各环节的畜尿克伦特罗(Clenbutero1,C L)定性和定量检测的方法。
方法用柠檬酸三钠还原氯金酸,制备20nm粒径的胶体金,胶体金标记单抗后喷涂到玻璃纤维膜上,特异性抗原(C L2BS A)以线状包被在硝酸纤维素膜上,制成快速检测试纸条。
用E LIS A进行定量。
结果对G C2MS不确定的36份阴性样品和24份阳性样品用GIC A方法检测,其阴性符合率为97%,阳性符合率为96%。
同样样品用E LIS A方法检测,其符合率为100%。
最低检测限为5.0ng/m L;用GIC A法只需在试纸条上滴加4～5滴样液5～10min就可出结果;在2个月的随机抽查中,试纸条的检测结果没有变化。
结论本方法准确性高、稳定性好,操作过程简单,适合于作现场大规模、高通量检测。
因此本方法具有广泛的应用及推广价值。
关键词: 胶体金; 克伦特罗; 酶联免疫吸附法 中图分类号:R155.5 文献标识码:A 文章编号:1001-5248(2008)03-0176-04 克伦特罗(Clenbutero1,C L)俗称“瘦肉精”,是β2肾2上腺受体激动剂。
在家畜养殖中加入C L可以提高瘦肉率或者加速动物的生长。
C L作为药物使用时可以治疗哮喘等疾病,但是如果用作家畜生长调节剂,其剂量通常是治疗疾病剂量的5～10倍,这样就可能残留于食品中而引起人体的不良反应,主要包括心跳过快和四肢肌肉颤动等中枢神经中毒后的失控症状,甚至导致死亡〔1〕。
目前已有多种方法用于对C L的残留分析,主要包括酶联免疫检测法(E LIS A)、高效液相色谱法(HP LC)、气相色谱2质谱联用法(G C2MS)、液相色谱2质谱联用法(LC2MS)等,主要是依靠特殊仪器进行分析,不能适应市场监督需要快速、简便、价廉的要求。
克伦特罗的CLIA 分析试剂盒的研制
克伦特罗的CLIA 分析试剂盒的研制沈浩龙;张长弓;陈巧钦;江良振;庄晓勇;黄江山;郭书林;黄印尧【摘要】A highly active antibody was produced by making manmade antigen of Clenbuterol . We established a direct competition method to detect Clenbuterol that used HRP as markers and luminol as chemiluminescent substrates ,with which many parameters were optimized ,including coating buffer ,coating condition ,blocking condition ,incubating time , and enzyme consumption . Based on this method we developed a chemiluminescent detecting kit ,whose linear range was 0.1-8.1 ng · mL -1 ,the linear correlation coefficient wasr=0.996 ,the IC50 was 0.607 ng mL -1 ,the detection limit was under 0.1 ng · mL -1 ,the within-run assay coefficient of variation was 6.76% -8.31% ,the between-run assay coefficient of variation was 7.4% ,the coefficient of recovery was between (90 ± 15)% ,and there was no cross reaction with other β-agonists .%通过制备克伦特罗（Clenbuterol ，CL）人工抗原获得高活性抗体，用辣根过氧化物酶（HRP）标记CL抗原，以鲁米诺（luminol）为发光底物，建立直接竞争法检测分析盐酸克伦特罗，并对包被液、包被条件、封闭蛋白、孵育时间、酶用量等参数进行优化，成功研制出化学发光法检测 CL 试剂盒。
酶联免疫吸附法测定盐酸克伦特罗常见误差分析及解决对策
（ ）ｎ （ １ ａ 样 试剂 ） 不完 全 。操作 不稳定 ， 一些 样 品 （ 剂） 留在微 孔 的边缘 上 ， 试 会 比如 在 加抗 体 溶液 或 酶标 记物 不完全使 最 终测 得 结果 （ 酸 克伦 特 罗含 盐 量） 高 ； 偏 加入标 准或处理 好的样 品、 或基 质／ 色试 发 剂 不完全使 最终 结 果偏 低 。在 加样 时 ， 的枪 头会 有 留有一滴 液体 ， 造成 每个 微 孔 中加 入 液 体体 积 的 不
收 稿 日期 ： ０ ７０ — ９ ２ ０ —８ １ 第 一 作者 简 介 ： 范 锋 （９ ８） 男 ， 苏 无 锡 人 ， 科 ， 医 师 ， １７ 一， 江 本 兽
全 即被加入 停止 液终止反应 ， 使得 最终 结果不 正确 ，
难 以形成标 准 曲线 图 ； 度 过高 会 加快 抗 体 抗 原 反 温
从 事 水 畜 产 品检 测 工作 。
维普资讯
畜 牧 兽 医杂 志
第 ２ ７卷
第 １ 期
２ ９
应 ， 造成后 加样 微孔 里还 未来得 及加完 试剂 ， 面 可 前 已加好 试剂 的微 孔 已经 发 生 了 反应 ， 别 是一 些 反 特
１ 德 国拜 发 试 剂 盒 的检 测标 准要 求
ｌ １ 检测对 象 ＿ 可 以检 测尿 、 肉及 牛 眼等组织样 品 。 肌 １ ２ 检测环 境 要求 ． １ ２ １ 室 温 ２ ～２ ℃ ， ．。 Ｏ ４ 使用 之 后立 即将 所 有试 剂 放 回 ２ ℃。 ～８
后在测 定时都 可导致测 量结 果偏低 。 （） ４对于一些浓度超出最高检 出限 ８ １ ／ ． ｇ Ｌ的样
品， 稀释的倍数过大 ， 虽然能在检测范 围内可 以检测出 其浓度 ， 但是增加了误差 ， 测出的结果准确底偏低 。
酶联免疫吸附法(ELISA)检测猪肉中盐酸克伦特罗
酶联免疫吸附法（ELISA）检测猪肉中盐酸克伦特罗作者：薛金英来源：《中国动物保健》2014年第10期盐酸克伦特罗（俗称瘦肉精）为一种人工合成的β-肾上腺素兴奋剂，具有扩张支气管的作用，常用来防治哮喘、肺气肿等肺部疾病。
当其应用量达到治疗量的5～10倍时，其有能量重分配作用，可使肌肉合成增加，脂肪沉积减少，因此俗称为“瘦肉精”。
在畜牧业生产中一些非法使用者将其作为一种和生长促进剂添加到动物饲料中，用以改善胴体的品质，同时也造成食品中盐酸克伦特罗（瘦肉精）的残留。
当人们食用盐酸克伦特罗残留的产品后会出现一系列的中毒症状。
动物源性食品药物残留问题逐渐引起人们的重视。
本法用于定量、定性检测猪肉中盐酸克伦特罗的残留。
1试验原理采用间接竞争ELISA法，在微孔板上包被抗盐酸克伦特罗检测抗原，样品中的盐酸克伦特罗将和酶标板上的盐酸克伦特罗检测抗原竞争结合盐酸克伦特罗抗体，盐酸克伦特罗检测抗原结合的盐酸克伦特罗抗体再与同时加入的酶标二抗结合，洗涤后，用TMB底物系统显色，微孔板吸光值与样品中盐酸克伦特罗含量成负相关，与标准曲线比较再乘以浓度比值即可得出盐酸克伦特罗在样品的实际含量。
2试验方法（稀释倍数为4倍）称取1.0 g（±0.05 g）均质样品于50 mL聚苯乙烯离心管中，加入1 mL 0.1 M盐酸，再加入2 mL提取工作液，充分振荡混匀5 min，4 000 rpm（20～25℃）离心10 min。
取1 mL上清液加入约25 μL 1 M 氢氧化钠调节pH至6.5～7.5之间，充分振荡混匀，取50 μL用于分析。
如果上层中存在白色脂肪层，取样时应避开。
试剂准备：将10×浓缩洗涤液和蒸馏水（或去离子水）按1∶9充分混匀，即为1×洗涤液。
编号：将盐酸克伦特罗标准溶液和待测样品对应微孔按序编号，建议每个标准溶液和待测样品均做重复孔。
加样：加入标准溶液或样品50 μL，然后每孔分别加入盐酸克伦特罗酶标二抗50 μL和盐酸克伦特罗抗体溶液50 μL。
农业部公告2005年第558号——准予克仑特罗等14种酶联免疫检测试剂盒备案
农业部公告2005年第558号——准予克仑特罗等14种酶联
免疫检测试剂盒备案
【法规类别】兽医兽药
【发文字号】农业部公告2005年第558号
【发布部门】农业部
【发布日期】2005.10.21
【实施日期】2005.10.21
【时效性】现行有效
【效力级别】部门规范性文件
农业部公告
（2005年第558号）
根据我部《关于加强兽药残留检测试剂（盒）管理的通知》（农办医[2005]3号）要求，为加强兽药残留检测试剂管理，保证兽药残留检测质量可靠和动物性食品安全，我部组织残留专家委员会对中国兽医药品监察所等单位申请备案的克仑特罗等14种酶联免疫检测试剂盒进行了审查。
经审查，该14种酶联免疫检测试剂盒符合有关规定，准予备案，允许生产和用于全国兽药残留监控计划的检测。
现将该14种酶联免疫检测试剂盒（附件1）及其质量标准与使用说明书予以公布（附件2）。
特此公告
中华人民共和国农业部
二〇〇五年十月二十一日
附件1
备案酶联免疫检测试剂盒名单。
克伦特罗检测试剂盒使用说明书 Kit CatalogNo BC-3003
克伦特罗检测试剂盒使用说明书Kit Catalog No.BC-3003一、概要:克伦特罗(Clenbuterol)，俗称瘦肉精，是一种β2兴奋剂。
能提高动物体内的瘦肉的比例，并加速动物生长，而被广泛添加于动物饲料中，然而其会残留在动物体内，人类食用后会产生严重的副作用，轻则导致心跳及心率不正常，重则可引发心脏病。
目前，许多国家政府已明令禁止其使用于动物饲料中。
本公司研发生产的克伦特罗检测试剂盒的检测结果准确、稳定，可检测存在于动物的尿液、血清、血浆、组织(肌肉、心脏、肝脏等)、及动物饲料樣本中的克伦特罗。
样品前处理方式简单、方便，适用于各级政府食品安全检测机构、各类屠宰企业、肉类食品加工及饲料生产企业等。
二、检测原理:本试剂盒利用竞争酶联免疫方法，预先在微孔中包被羊抗兔抗体，实验时先后加入克伦特罗标准品，或待测样本，克伦特罗酶标抗原和兔抗克伦特罗抗体。
经过室温温育，反应液中的兔抗克伦特罗抗体与微孔板上的羊抗兔抗体结合，待测样品中的克伦特罗与克伦特罗酶标抗原竞争微孔板上的兔抗克伦特罗抗体。
洗涤后，没有与抗体结合的待测样品中的克伦特罗或酶标抗原被洗去，再加入反应底物，结合的酶标抗原的酶将底物转化为蓝色产物，加入终止液后颜色由蓝色变为黄色。
反应完成后，样品中克伦特罗含量越多，反应呈色就越浅；反之，样品中克伦特罗含量越少，则呈色越深。
利用标准曲线可计算出样品中克伦特罗含量。
三、试剂盒提供试剂:1.羊抗兔抗体包被的微孔板:96孔。
2.克伦特罗参考标准品:0，0.05，0.25，1.00，2.50，5.00ppb (ng/ml);1.5ml/瓶，一套共6瓶。
3.克伦特罗酶标抗原试剂(1X):7ml/瓶。
4.兔抗克伦特罗抗体:7ml/瓶。
5.样品稀释液：100ml/瓶。
6.显色剂/底物：11ml/瓶。
7.反应终止液：11ml/瓶。
8.洗涤液(20X)：50ml/瓶，使用前稀释20倍。
四、其它试剂和仪器:1.试剂∙盐酸(5mM,10mM )∙氢氧化钠溶液(2.0M )2.仪器∙均质机(Ultra-turrax)∙微孔板酶标仪∙振荡器∙离心机∙氮气吹干仪或旋转蒸发器∙超声波破碎仪∙20µl,50µl,100µl,200µl,及1ml 移液器五、待测样品处理方法:1.尿液将样品在室温(18-25ºC)以4,000转离心10分钟后取上清液或者过滤后取滤液100克伦特罗检测试剂盒使用说明书Kit Catalog No.BC-3003μl,加入样品稀释液400μl （5倍稀释），用于下一步检测。
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克伦特罗酶联免疫定量检测试剂盒（I）
使用说明书
概述：
克伦特罗(Clenbuterol)属于一类β-兴奋剂，具有改进脂肪型动物体内肉与脂肪的比例的作用，亦可促进动物生长。
但同时，此药物还会使非横纹肌松弛，人体摄入后可引起心跳、心率不正常等副反应，甚至可导致心脏病。
因此在我国，克伦特罗在畜牧业上的使用是被严格禁止的。
本试剂盒利用竞争酶联免疫法对生物样品中的克伦特罗进行定量分析。
适用于动物尿液、血清、内脏等物质中克伦特罗的快速检测。
由于ELISA法的高通量与简便快速，适合大量样本的定量筛查，自样本加入至结果读出，不超过60分钟，检测灵敏度为0.1ppb。
一、简要原理
试剂盒所提供的微孔板上包被有抗体，然后将校准品或样本中的克伦特罗与酶标记的克伦特罗加入微孔中后，两者可竞争结合克伦特罗抗体，洗去未结合的酶标记克伦特罗。
加入底物后，在酶作用下，底物溶液会显蓝色，加入终止剂后，溶液由蓝转为金黄色。
在450nm波长光下测吸光度，吸光度高低与校准品或样品中克伦特罗的含量呈反比，根据校准品的读数作出校准曲线，并利用校准曲线计算出样品中克伦特罗的含量。
二、试剂盒组成
1.酶标反应板： 96孔易折板，抗体已包被
2.克伦特罗校准品： 1ml/瓶×6瓶浓度：0ppb、0.1ppb、0.3ppb、0.9ppb、2.7ppb、8.1ppb
3.11×酶标记克伦特罗浓缩液： 1.2ml/瓶×1瓶(稀释11倍使用)
4.底物液： 11ml/瓶×1瓶
5.酶标稀释液： 20ml/瓶×1瓶
6.50×浓缩洗涤液： 20ml/瓶×1瓶(稀释50倍使用)
7.终止剂： 11ml/瓶×1瓶
8.其他：说明书×1份自封袋×1个
2-8℃贮存，有效期一年
三、实验需要但试剂盒不提供的试剂和仪器
1.试剂
――――――10mM盐酸溶液
――――――氯化钠
――――――50mM PH7.0 PBS (配制:9g NaCl；4.65g Na2HPO4·12H2O；0.56g NaH2PO4·2H2O 溶解于1000ml蒸馏水中)
――――――异丙醇
――――――乙酸乙酯
2 .仪器
――――――微孔板酶标仪
――――――涡旋振荡器或超声波粉碎仪
――――――离心机
――――――20μl、200μl、1ml移液器
――――――氮吹仪或旋转蒸发仪
四、待测样品处理方法
1.尿液
新鲜尿液可直接测定，如尿液混浊，则离心取上清进行检测。
(如尿液中克伦特罗含量超出试剂盒线性范围,可用蒸馏水或50mM PH7.0的PBS对尿液进行适当稀释后再行检测)
2.肉样及内脏组织
1).称取肌肉或内脏样本10g，用20ml 10mM盐酸溶液匀浆，置于离心管中，充分振荡混匀5min或超声混匀5min,
再静置10分钟。
之后10000rpm离心10min或4500rpm离心20min(离心温度保持在10℃左右)。
收集澄清的上清液(注意勿吸取脂肪层)，可直接用于检测。
(相当于0.5g样品/ml)
2).若要获得更高的检测灵敏度，可在离心后收集所有上清，加入氯化钠固体至0.32g/ml，可能会有沉淀或乳化现
象产生，请勿离心!将2ml上清转移至玻璃离心管中，加入4ml异丙醇+乙酸乙酯(2+3)，充分振荡混匀5分钟,静置15分钟。
提取完毕，3000r/min离心10min，将2ml上层有机相转移至玻璃试管中，用氮吹仪60℃吹干有机相，然后加入一定量的蒸馏水或 50mM PH7.0的PBS溶液将残留物溶解，待检(若复溶体积为0.5ml,则相当于1g样品/ml)
3.动物饲料
称取5.0g研碎的饲料样品，加入10ml 5mM HCL，置于离心管中充分振荡混匀5min或超声混匀5min，再静置10分钟。
之后10000rpm离心10min或4500rpm离心20min(离心温度保持在10℃左右)，转移出上清液，可直接用于检测。
若要获得更高的检测灵敏度，可按“肉样及内脏组织”处理方法2).中所述进行处理。
(如完全按前述处理,则复溶体积为0.5ml时，相当于1g样品/ml)
五、试剂准备
1.实验前准备
将试剂盒取出，室温(20-25℃)放置30分钟，使试剂盒回温。
2.酶标记克伦特罗工作液准备
由于稀释后的酶标记克伦特罗工作液稳定性较差，所以请从试剂盒中取出所需量的酶标记克伦特罗浓缩液，用酶标稀释液以1:11的比例稀释浓缩酶标记液(例如80μl浓缩液+800μl样品稀释液)。
3.洗涤液配制
取出所需量的浓缩洗涤液，加入49倍体积的蒸馏水，即成洗涤工作液(例如10ml浓缩液+490ml蒸馏水)
六、操作步骤
1.从锡箔袋中取出所需的微孔板条，将暂时不用的微孔板条放回带有干燥剂的锡箔袋中，并用试剂盒附带的自封
袋封存。
2.在一个微孔中加入150μl蒸馏水作为空白对照。
3.其余各微孔中加入50μl克伦特罗校准液或已完成前处理的待测样品。
注意：加入校准液顺序为按照浓度从低到高加入，以避免校准液浓度出现偏差。
4.每孔(除空白对照孔以外)加入100μl酶标记克伦特罗工作液(配制方法见五-2)
注意：在试剂加入过程中，请避免移液器滴头接触已加入的校准液或待测样品，防止孔间交叉污染；避免在加样过程中产生气泡。
5.振荡混匀反应液，于20-25℃环境下放置30分钟(建议使用25℃恒温箱)。
6.取出微孔板，倾空液体，每孔加入400μl洗涤液，轻轻振荡，静置片刻，倾去洗涤液，重复4次。
最后在吸水
纸上将微孔板拍干。
7.每孔加入100μl的底物液，20-25℃避光环境下放置20分钟(建议使用25℃恒温箱)。
8.取出微孔板，每孔加入100μl反应终止液，充分混匀(微孔中切忌存在气泡)，用酶标仪在450nm下读数，扣
除空白，并绘制校准曲线。
七、结果判定
1.样本中的克伦特罗含量可以通过在半对数坐标纸木上手工绘制校准曲线来进行定量计算；或者应用合适的计算
绘图软件绘制出校准曲线，得出公式，并计算样品中的克伦特罗浓度。
2.先将除空白孔外的所有测定孔扣除空白对照的吸光度。
然后将扣除空白后的校准品孔吸光度值 (B) 除以扣除空
白后的阴性对照孔吸光度值 (B0) ，再乘以100%，即：
B
为纵坐标（y）
×100%
B0
以所对应的校准品浓度为横坐标（x），绘制出校准曲线。
3.用上述方法，同样地得出对于样本测定孔的y值，代入校准曲线，即可计算出相应样本的克伦特罗浓度值。
以
下为校准曲线的一个示意图：
八、试剂盒相关方法学数据
1.试剂盒灵敏度
本试剂盒灵敏度为0.1ppb
2.试剂盒半抑制率
本试剂盒半抑制率约在0.7～1.0ppb左右
3.试剂盒的重复性
对不同浓度的校准品进行8次重复测定，获得每个浓度所对应的OD450值，计算变异系数，结果如下：
4.试剂盒线性范围
本试剂盒在0.2ppb～4ppb区间呈线性相关。
5.添加回收实验的回收率
以猪尿为例，回收率在80～120%之间。
6.交叉反应
结构类似物交叉反应率
沙丁胺醇 3.5%
特普他林 1.2%
异丙基肾上腺素<0.1%
九、实验中注意事项
1.在试验前将所有试剂预热至室温。
2.试剂加入各微孔的时间差越小越好，如果检测样本较多，建议使用多孔移液器。
3.操作过程中手尽量少接触酶标板底部，并且在读数前用软纸轻轻擦去底部可能附着的水珠或指痕。
4.在加入反应终止液后1小时内读数。
5.本实验可采用单孔或平行双孔定量测定，但双孔定量更准。
6.反应终止液为强酸物质，避免接触皮肤或衣物。
7.不要使用过期试剂，不要将不同批号试剂混用，否则会造成灵敏度降低。