山药多糖的提取及含量测定
山药及不同炮制品多糖含量分析
实验研究山药及不同炮制品多糖含量分析杨武德,李白玲,冯 靖(贵阳中医学院药学系,贵州贵阳 550002)内容提要:目的:考查山药炮制与其有效成分多糖含量的关系。
方法:紫外分光光度法。
结果:山药及不同炮制品中多糖含量按以下顺序减少;生品,蜜麸炒山药,炒山药,米炒山药,土炒山药,焦山药,炭山药,麸炒山药。
测定结果:经统计检验说明各炮制品中多糖含量均较生品有显著降低(p<0101或p<01001)。
关键词:山药;炮制;多糖;含量测定中图分类号:R28515 文献标识码:B 文章编号:1002-1108(2004)03-0061-01 山药又称薯蓣,始载于《神农本草经》,列为上品,来源于薯蓣科植物薯蓣Dioscorea opposiita Thunb的干燥根茎,具有补脾,补肺,固肾,益精的功效,主治脾虚泄泻,久痢,虚痨咳嗽,消渴,遗精带下,小便频数等症。
据临床药理研究,山药根茎含薯蓣皂甙,淀粉,胆碱多糖等[1]。
山药多糖有调节或增强免疫功能,降血糖,抗肿瘤等功效[2]。
山药为一种常用中药,其炮制方法较多,据文献记载有生品,蜜麸炒,炒黄,米炒,土炒,炒焦,炒炭,麸炒等[3]。
1 仪器、试剂和药材111 仪器 DU-70紫外分光光度计(美国贝壳曼)。
112 试剂 所用试剂均为分析纯。
113 对照品 葡萄糖(北京化工厂,AR级)。
114 药材 山药采自贵州省清镇市大水库,经本院中药鉴定研究室刘梵教授鉴定为薯蓣科植物野生(Dioscorea opposiitaThunb)的根茎。
本实验用其根茎。
115 炮制品的制备生品:将山药抢水洗后,切成厚片,60℃烘干。
炒黄:取净山药片50g置热锅内,中火炒至表面焦黄色,取出晾凉,得率8116%炒炭:取净山药片50g,用武火炒至表面焦褐色,断面焦褐色,得率7810%土炒:取黄土适量于热锅中,炒至灵活态,加入净山药片50g,均匀翻炒,得山药片由软向硬转化时取出过筛去土,摊开放凉。
中药山药中多糖成分提取、分离、含量测定及对胃肠功能的影响
中药山药中多糖成分提取、分离、含量测定及对胃肠功能的影响姓名：汪岩学号：S2010210 专业：中药学山药为薯蓣科薯蓣属植物薯蓣Dioscorea opposita Thunb.的干燥根茎。
山药生用功偏补肾生精，益肺肾之阴，麸炒则长于益脾和胃，益肾固精[1]。
临床上麸炒山药主要做为滋阴或补阳的臣药，功偏补益[2]。
补益药的药理研究主要包括免疫学研究[3]，山药多糖具免疫调节作用[4]，对对胃肠的功能具有一定的影响。
本实验研究以大黄造脾虚模型小鼠，研究山药多糖成分对胃排空率及肠推进率的影响，同时以胸腺指数和脾脏指数作为衡量模型动物体内免疫水平的基本指标，考察山药麸炒前后多糖成分补脾健胃作用及相关免疫指标的变化，为进一步阐明山药补脾健胃作用的可能机制。
1 仪器、材料与山药多糖的提取1.1仪器与试药分析天平；蒸发仪；离心机；紫外分光光度计。
大黄（注明购买地点、批号）；阿托品（注明厂家、生产批号）；生理盐水（注明生产厂家、批号）；酚红（厂家、批号）；淀粉酶（厂家、批号）；墨汁；NaOH；其它试剂为分析纯。
1.2动物有生产许可证和使用许可证的小鼠80只，其中雌雄各半，体重比较均衡。
1.3山药多糖的提取取山药药材500g，加水冷浸12h，水煎煮1.5h，两次，合并水煎液，加入2%新鲜配制的淀粉酶溶液于60℃保温5min，目的是出去淀粉。
再进行抽滤，滤液浓缩至体积为500ml，以95%乙醇醇沉至含醇量为80%，静置过夜，抽滤，滤渣依次经无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤，50℃真空干燥既得山药多糖（粗多糖）。
1.4大黄水煎液的制备取大黄饮片50℃热风干燥，然后称取500g，加入8倍量水冷浸12h后，水煎煮1.5h，两次，合并滤液，最后将滤液浓缩至浓度为1g生药材/ml，储存备用。
2精制山药多糖的分离将山药粗粉50 g ，置索氏提取器中，经石油醚( 60～90℃) 回流提取，弃提取液，药渣挥干石油醚，再用80％乙醇回流提取，以除尽单糖，低聚糖及醇溶性杂质，药渣挥干溶剂后，加500 ml水于90℃，提取，合并提取液。
怀山药主要成分测定1
第二章：怀山药主要成分测定2.1蛋白质含量测定：凯氏定氮法试样处理:称取0.2g ～2. 00 g固体试样或2. 00 g ～5. 00 g半固体试样或吸取10.00 mL～25. 00 mL液体试样(约相当氮30 mg～40 mg)，移人干燥的100 mL或500 mL定氮瓶中，加人研碎的0.5g硫酸铜,10 g硫酸钾及20 mL浓硫酸，稍摇匀后于瓶口放一小漏斗，将瓶以45°角斜支于有小孔的石棉网上。
小心加热，待内容物全部炭化，泡沫完全停止后，加强火力，并保持瓶内液体微沸，至液体呈蓝绿色澄清透明后，再继续加热30分钟。
取下放冷，小心加20mL蒸馏水。
放冷后，移人100 mL容量瓶中，并用少量水洗定氮瓶，洗液并人容量瓶中，再加水至刻度，混匀备用。
同时做试剂空白试验。
测定：装好定氮装置，于水蒸气发生瓶内装水至三分之二处，加人数粒玻璃珠，加甲基红指示液数滴及数毫升硫酸，以保持水呈酸性，用调压器控制，加热煮沸水蒸气发生瓶内的水。
向接收瓶内加人10 mL硼酸溶液（20g/L）及1滴~2滴混合指示液，并使冷凝管的下端插人液面下，准确吸取10 mL试样处理液由小漏斗流人反应室，并以10 mL 水洗涤小烧杯使流人反应室内，棒状玻塞塞紧将10 mL氢氧化钠溶液(400 g/L)倒人小玻杯，提起玻塞使其缓缓流人反应室，立即将玻塞盖紧，并加水于小玻杯以防漏气。
夹紧螺旋夹，开始蒸馏。
蒸馏5 min。
移动接收瓶，液面离开冷凝管下端，再蒸馏1 min。
然后用少量水冲洗冷凝管下端外部。
取下接收瓶。
以硫酸或盐酸标准滴定溶液(0. O5mol/L)滴定至灰色或蓝紫色为终点。
同时准确吸取10 mL 试剂空白消化液按上述操作。
2.2山药多糖的含量测定：多糖含量的测定方法采用苯酚-硫酸法苯酚一硫酸法是利用多糖在浓硫酸水合产生高温的作用下，迅速发生水解反应释放出单糖，并迅速脱水生成糠醛衍生物，然后与苯酚缩合生成490nm处有最大吸收峰的有色化合物来进行测定的。
有机山药中多糖及其他成分的含量测定
第40卷第7期2017年7月新疆医科大学学报Journal of Xinjiang Medical UniversityV〇1.40 No.7July.2017有机山药中多糖及其他成分的含量测定王莹1，蒋洁2,郝宇薇2,刘婧怡2,兰卫2,安冬青2(新疆医科大学1附属中医医院，乌鲁木齐830002; 2中医学院，乌鲁木齐830011)摘要：3的测定有机山药中多糖、脂肪、浸出物含量及折干率。
方法以硫酸_蒽酮为显色剂，采用分光光度法测定有机山药中多糖的含量；采用索氏抽提法，测定有机山药中脂肪的含量；采用重量法测定机山药中浸出物含量及折干率。
结果多糖在203.8〜662.4 pg/m L浓度范围内线性良好（r =0.9993)，精密度、稳定性、重现性的R SD均<5.00%，加样回收率为100.7%，有机山药中多糖含量为28.32%，脂肪含量为1.30%，折干率为12.80%，水浸出物为23.62%，醇浸出物为9.67%。
结洽多糖测定方法简单易行，稳定可靠；有机山药的脂肪和浸出物含量符合国家药典规定，为建立有机山药的质量标准提供依据。
关键词：有机山药；多糖；浸出物；测定中图分类号：R914 文献标识码：A文章编号=1009-5551(2017)07-0957-03doi：10.3 96 9/j.issn.1009-5 5 51.2017.07.025Determination of polysaccharide and other components in organic yamWANG Ying1，JIANG Jie2，HAO Yuwei2，LIU Jingyi2，LAN Wei2，AN Dongqing2i1 Subsidiary Chinese M edicin e Hosp ital o f X in j ia n g M ed ica l University , Urumqi830002, C h in a；2 X in j ia n g M ed ica l University Institute o f TCM Urumqi830011, China) Abstract：Objective To determinate polysaccharide, fat, extract content, drying rate in organic yam. Methods Anthrone sulfuric acid was used as chromogenic agent and the spectrophotometric was used to determinate the content of polysaccharide in organic yam；and soxhlet extraction method was used to determinate the content of fat in organic yam extract; gravimetric method was used to determinate the extract content and drying rate of machine in yam. Results Polysaccharide has good linearity in 203.8^662.4 g/mL concentration range (r =0.999 3), precision, stability and reproducibility of the RSD was less than 5.00%, the recovery rate was 100.7 % , organic yam polysaccharide content was 28.32 % , fat content was 1.30 % , the drying rate was 12.80%, the water extract was 23.62%. The alcohol extract was 9.67%. Conclusion The method is simple, stable and reliable, and the content of fat and extract of organic Chinese yam accords with the requirements of the national pharmacopoeia.Keywords：organic yam；polysaccharide；extract；determination山药为薯葡科（Df〇5corm L.)植物薯葡(_D z'〇5corm士）的干燥根■，又称薯葡、山薯 蓣、怀山药、白山药，含有黄酮、多糖、薯蓣皂苷等成 分。
超声波提取山药多糖的研究_李金忠
超声波提取山药多糖的研究李金忠1,马海乐2,吴沿友1(1.江苏大学机械工程学院,江苏镇江 212013;2.江苏大学生物与环境工程学院,江苏镇江 212013) 摘 要:在单因素试验的基础上采用正交试验得出了超声波提取山药多糖的最佳试验条件,即超声功率1000W、超声时间50min、提取温度60℃、料液比12.5g/L。
该工艺与传统的水提取法相比,得率提高两倍多,提取时间也缩短为50min。
关键词:超声波提取法;山药多糖;正交试验中图分类号:TS245.9 文献标识码:A 文章编号:1007-7561(2005)05-14-02Study on the ultrasonic extraction of polysaccharides from chinese yamLI Jin-zhong1,MA Hai-le2,WU Yan-you1(1.The College of Mechanical Engineering,Jiangsu University,Zhengjiang 212013;2.The College of Biological and Environmental Engineenig,Jiangsu University,Zhengjiang 212013)A bstract:Utilizing orthogonal test of the ultrasonic extraction of polysaccharides from Chinese ya m,based on the result of single factor influence.An optimum extracting condition put forward as follows:ultrasonic power 1000W,extracting time50minutes,extracting temperature60℃,material-water ratio12.5g/pared with conventional method,the polysaccharides r ecovery by ultrasonic extraction was about two times higher and the extracting time shortened within50minutes as well.Key words:ultrasonic extraction;chinese yam polysaccharides 山药为薯蓣科多年生草质藤本植物薯蓣(D. batatas Decne.)的块根,是我国传统的药食同源植物。
怀山药中多糖的提取与纯化
4.1提取条件对多糖率的影响
超声波功率对多糖含量的影响
由图1可知，使用超声波进行辅助提取与未使用相比，多糖含量有显著的提高；随着超声波功率的增加，多糖含量呈上升趋势。
超声波功率在150~200 W范围内，多糖含量较为稳定，当超声波功率达到250 W(超声波仪器最大允许工作功率)时，多糖含量有显著提高
由图2可知，在3O～5O℃的温度范围内，随着水提温度的升高，山药多糖含量逐渐增大。
在50～70℃温度范围内，随着水提温度的升高，山药多糖含量下降，这是因为山药中含有大量的淀粉，即其储能物质，而非通常所称的活性多糖。
温度过高，一方面使得淀粉在溶液中溶解度增加，另一方面使得淀粉糊化，影响后续的操作，给之后的分离等工艺带来困难。
由图3可知，在2O～60 min内，随着提取时间的延长，山药中多糖含量随之升高，60 min 末接近最大值，可见反应时间越长，提取越充分。
在8O～140 min，山药多糖含量趋于平缓。
因此，考虑实验指标的可观察性，选择水提时间30，60，90 min作为正交实验的三个水平。
由图4可知，开始时随着料液比的增加，山药多糖含量增长缓慢，料液比为1：1O时含量达到最高。
当料液比大于16，含量开始降低。
因此，选择1：10，1：12，1：16作为正交试验的三个水平。
山药多糖的提取分离及活性初步研究的开题报告
山药多糖的提取分离及活性初步研究的开题报告题目：山药多糖的提取分离及活性初步研究1. 研究背景山药是一种常见的蔬菜，富含多种营养成分。
其中山药多糖是一种重要的生物活性成分，具有较强的免疫调节、抗肿瘤、抗氧化等生物活性，因此备受关注。
本研究旨在提取分离山药多糖，并对其生物活性进行初步研究，为山药多糖的开发利用提供科学依据。
2. 研究内容（1）提取山药多糖的最佳工艺条件的研究：采用不同浓度、不同比例的溶剂，对山药多糖的提取工艺进行优化，得到最佳工艺条件。
（2）山药多糖的分离纯化：采用氨基硅胶柱层析、凝胶过滤层析、超滤等方法进行山药多糖的分离纯化。
（3）山药多糖的物化性质研究：包括分子量、糖含量等的测定。
（4）山药多糖的生物活性研究：主要包括免疫调节、抗氧化、抗肿瘤等方面的活性测试，探究山药多糖的生物学功能。
3. 研究意义山药多糖作为一种生物活性成分，具有广泛的开发利用价值。
本研究可以进一步探究山药多糖的生物学功能，为其在保健食品、药品等领域的应用提供科学依据。
4. 研究方法（1）植物材料的购买和加工：从市场上购买山药，并进行加工处理。
（2）山药多糖的提取：采用不同的提取条件，包括溶剂体系、提取时间、提取温度等条件的优化，提取山药多糖。
（3）山药多糖的分离纯化：采用氨基硅胶柱层析、凝胶过滤层析、超滤等方法进行山药多糖的分离纯化。
（4）山药多糖的物化性质研究：包括分子量、糖含量等的测定。
（5）山药多糖的生物活性研究：主要包括免疫调节、抗氧化、抗肿瘤等方面的活性测试。
5. 预期结果本研究预期能够提取纯化山药多糖，并进行初步的物化和生物活性研究，进一步探究山药多糖的功能，为其在保健食品、药品等领域的应用提供科学依据。
怀山药多糖的结构鉴定及活性评价
怀山药多糖的结构鉴定及活性评价怀山药多糖的结构鉴定及活性评价摘要：怀山药（Dioscorea opposita Thunb）是一种中药材，具有广泛的药用价值。
其中的多糖是其主要有效成分之一，具有多种生物活性。
本研究旨在对怀山药多糖进行结构鉴定，并评价其活性。
一、引言怀山药是一种广泛分布于中国南方和东南亚地区的薯蓣科植物。
其根茎含有丰富的多糖，是一种重要的中药材。
怀山药多糖具有多种生物活性，包括抗炎、抗氧化、免疫调节等。
因此，对怀山药多糖进行结构鉴定和活性评价具有重要的科学价值和应用前景。
二、材料与方法1. 实验材料：采集新鲜怀山药根茎，制备怀山药多糖提取物。
2. 结构鉴定：采用红外光谱（IR）、核磁共振（NMR）等技术对怀山药多糖的化学结构进行鉴定。
3. 活性评价：通过体外活性实验评价怀山药多糖的抗氧化、抗炎、免疫调节等活性。
三、结果与讨论1. 结构鉴定结果：通过红外光谱和核磁共振等技术，得到怀山药多糖的化学结构。
结果表明怀山药多糖是一种具有复杂多糖链结构的高分子物质，包含苷链和葡萄糖等单糖成分。
2. 活性评价结果：体外活性实验结果表明，怀山药多糖具有较强的抗氧化活性，可清除自由基，减轻细胞氧化损伤。
此外，怀山药多糖还具有一定的抗炎作用，可抑制炎症反应，减轻炎症病变。
同时，怀山药多糖对免疫系统具有一定的调节作用，可增强机体免疫功能，提高机体抵抗力。
四、结论本研究对怀山药多糖进行了结构鉴定和活性评价。
结果表明怀山药多糖具有复杂多糖链结构，并具有较强的抗氧化、抗炎和免疫调节活性。
这些发现为怀山药多糖的进一步研究与开发提供了重要的参考依据。
进一步研究怀山药多糖的机理和药效，有助于挖掘怀山药多糖的临床应用价值，并为新药研究和开发提供理论依据。
综上所述，本研究通过对怀山药多糖的结构鉴定和活性评价，发现其具有复杂多糖链结构并表现出抗氧化、抗炎和免疫调节等活性。
这些结果为怀山药多糖的进一步研究和开发提供了重要的参考依据。
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山药多糖的提取及含量测定摘要：山药又称薯蓣、土薯、山薯蓣、怀山药、淮山、白山药，是《中华本草》收载的草药，药用来源为薯蓣科植物山药干燥根茎。
冬季茎叶枯萎后采挖，切去根头，洗净，除去外皮及须根，用硫黄熏后干燥，也有选择肥大顺直的干燥山药，置清水中，浸至无干心，闷透，用硫黄熏后，切齐两端，用木板搓成圆柱状，晒干，打光，称“光山药”。
有滋养强壮，助消化，敛虚汗，止泻之功效，主治脾虚腹泻、肺虚咳嗽、糖尿病消渴、小便短频、遗精、妇女带下及消化不良的慢性肠炎。
山药在食品业和加工业上大有发展前途。
关键词：山药提取含量测定1 概述山药的名称很多，例如淮山、淮山药、大薯、脚板苕、佛掌薯、扇子薯等，为一年生或多年生缠绕性藤本植物。
山药为薯蓣科，是植物薯蓣的地下肉质块茎，既是一味重要中药，又是一种常见蔬菜。
目前其营养价值和药用价值已逐步被人们重视和认可。
山药始载于《神农本草经》，列为上品，谓其“味甘、温，补虚赢、除寒热邪气、补中益气力、长肌肉、久服耳目聪明。
”不仅如此，历代古书对山药的平补作用均有记载。
现代的研究表明，山药不仅具有多种营养成分，而且具有很高的药用价值，是卫生部公布的药食兼用植物之一。
1.1 结构山药中具有较多的粘液质，粘液质是多糖与蛋白质的复合体经分析其内蛋白质占47.6%，多糖占52.4%不同山药中含量有所不同山药中多糖含量0.06%-1.09%分为酸性多糖和中性多糖，主要成分是甘露聚糖，半乳糖，木糖，葡萄糖和阿拉伯糖等。
1.2 山药多糖的药理作用1.2.1 降血糖作用山药是中医治疗消渴症的主要药物，山药多糖的降糖作用是近年来山药多糖研究的热点。
山药提取物对禁食大鼠和兔有降血糖作用，能控制四氧嘧啶引起的高血糖。
山药多糖可降低四氧嘧啶诱发的糖尿病大鼠血糖，大剂量山药多糖降糖更明显，降糖百分率随剂量增大而增加。
山药多糖治疗糖尿病的具体机制目前还不是很清楚，目前认为，山药多糖可以改善胰岛细胞功能，促进胰岛素的释放而使血糖降低，研究发现山药多糖可以使血清C肽水平增高，而C 肽是胰岛素原α链β链之间的连接肽，1分子胰岛素原裂解为1分子胰岛素及1 分子C肽，然后二者以等克分子分泌进入门静脉，由于C肽几乎不被肝脏摄取，C肽血液含量能准确反映胰岛功能水平高低，因此C肽值增高说明山药多糖可以增加胰岛素的分泌，改善受损的胰岛β细胞功能。
1.2.2 免疫调节作用山药多糖既具有非特异性免疫功能，又具有提高特异性细胞免疫和体液免疫功能，因此对全面改善机体的免疫功能具有重要的意义。
非特异性免疫是机体免疫系统的重要组成部分，单核巨噬细胞的吞噬能力是衡量机体非特异性免疫功能的标志之一。
许多研究都表明，山药多糖对吞噬细胞的吞噬作用具有明显的促进作用。
怀山药多糖可明显提高环磷酰胺所致免疫抑制小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬百分率和吞噬指数。
低、中、高剂量（50、150、250 mg·kg-1·d-1）的山药多糖均可显著提高巨噬细胞的吞噬指数，高剂量组吞噬指数是对照组的3.9倍，表明山药多糖对巨噬细胞的吞噬功能具有极强的促进作用。
山药多糖对小鼠非特异性免疫具有明显的促进作用。
山药多糖还可以促进机体特异性免疫，山药多糖对细胞免疫和体液免疫均有明显促进作用，应用山药多糖可以极显著地提高T淋巴细胞的增殖能力。
1.2.3 抗氧化、抗衰老作用研究发现山药多糖具有抗衰老作用，能显著降低促机体衰老酶的活性。
目前，对自由基与衰老间的关系研究常以机体老化的代谢产物——血浆LPO和组织脂褐素（LF）的含量为衰老的指标。
代谢过程中所产生的自由基能作用于生物膜磷脂中的多不饱和脂肪酸，产生脂质过氧化物，如丙二醛（MDA），进而与磷脂酰乙醇胺和蛋白质交联成大分子复合物——脂褐素（老年色素），这是机体老化的一种标志，影响细胞代谢和功能形态改变，促进衰老和心脑血管硬化。
山药多糖能降低小鼠LPO和脂褐质含量，这可能与清除体内自由基有关。
1.2.4 抗肿瘤作用山药多糖具有刺激和调节人类免疫功能的作用，常作为增强免疫力的保健药品使用，山药多糖还能增强白细胞的吞噬作用。
体外实验表明，山药多糖可作为抗癌的扶正药，这与它具有很强的免疫调节功能有关。
低剂量山药多糖（50 mg/kg）对肺癌具有显著的抑制作用，而对黑色素瘤没有明显作用，而中剂量和高剂量山药多糖对黑色素瘤和肺癌均有显著的抑制效果，且中等剂量最佳。
在随后应用荷瘤小鼠对山药多糖抗肿瘤机制的研究中发现，山药多糖在体内能显著提高荷瘤小鼠的T淋巴细胞增殖能力和NK细胞活性，同时还能明显提高小鼠脾脏细胞产生IL-2的能力和腹腔巨噬细胞产生TNF-α的能力。
而山药多糖在体外无抑瘤活性，只在体内具有强烈的抑瘤活性。
1.2.5 其他作用山药多糖还具有抗突变作用，山药多糖对三种致突变物的致突变性均有显著抑制作用，而其抗突变作用的剂量-效应关系为对数曲线关系，即随着连续等量的递增每一平皿中受试物的剂量，所引起的抗突变作用逐渐增大。
对其抗突变机制的研究表明，山药多糖的抗突变作用主要是通过抑制突变物对菌株的致突变作用而实现的，但也不排除去突变作用。
山药作为传统补益中药，对机体具有广泛的作用，既是慢性病患者的食疗佳肴，也是老少皆宜的功能食品，其活性成分山药多糖是其发挥作用的主要成分。
然而关于山药多糖的作用研究还需进一步深入，阐明其药理作用及机制，研究、探索中药的更大功用，让其更好地为人类健康造福。
2 提取方法2.1 水提法水提法是最简单,最常用的提取方法,但其特点是耗时长,提取效率不高.因水浸提受料液比,提取温度和提取时间的影响,研究者通过正交试验筛选出最佳的水提条件.如顾林等人在做山药多糖的分离纯化和组成研究就通过正交试验得出,山药多糖最佳水提条件为:料液比1:25,100摄氏度下下浸提2.5h。
2.2 超声提取法超声提取法是利用超声波对细胞壁的破碎作用，促进胞内多糖的溶出,达到提高提取得率,缩短提取时间的目的。
而影响超声波破壁的作用的因素主要有:超声功率,超声提取时间,料液温度,料液比等。
李金忠等人网在单因素试验的基础上采用正交试验确定了超声提取山药多糖的最佳试验条件:超声功率1000W,超声提取时间50rain,提取温度100℃,料液比1:100.曾凡梅等人闻采用超声波协同纤维素酶破碎细胞壁提取山药多糖,通过正交试验确定的最佳提取工艺为:固液比1:15,酶量2%, pH值为4.72下,提取温度为5O,提取时间100min,功率为450W. 2.3 微波辅助提取微波辅助提取法是近年来新兴的提取方法,具有绿色无害,提取率高,选择性高,省时有效低能耗等优点。
许本波等人用微波辅助提取山药多糖,确立最佳提取条件为:微波功率464W,料液比1:20,浸提温度60℃,醇沉比4:1,山药多糖得率为10.52%。
充分体现了微波提取法的优势。
姬泓巍等人嗍对超声波和微波辅助提取山药多糖进行对比研究,发现微波提取山药多糖的得率高于超声波辅助提取。
3 山药多糖的纯化3.1 化学试剂除杂往往提取的山药粗多糖中还有许多杂质如蛋白质,脂类,色素等。
常用的脱蛋白的方法有:Sevage法,氟氯乙烷法,氯乙酸法,酶法和等电点沉淀法。
实验证明,Sevage法比较温和,而氯乙酸法反应剧烈。
3.2 色谱除杂以往除去粗多糖杂质的方法常采用化学试剂的方法,在除去杂质的同时也会带走多糖.采用色谱层析的方法除杂能最大限度的减少多糖的损失,而且除杂效果远高于化学试剂法.已经有许多学者在纯化山药多糖时采用色谱技术,如顾林,王刚在山药多糖的纯化采用了DEAE柱层析和Sephadex法。
4 测定方法4.1 紫外一可见分光光度法紫外一可见分光光度法是目前测定多糖含量最常用的方法,常用的显色剂有苯酚,蒽酮一硫酸和3,5一二硝基水杨酸(DNS)。
前两者主要利用多糖在强酸性条件下脱水生成糠醛或其衍生物,然后与酚类或者胺类反应缩合,生成有特定吸收波长的有色物质进行测定;DNS法则是利用了多糖的还原性。
目前最常用的为苯酚硫酸法,曾儿梅采用此法测定山药中多糖的质量分数为24.8mg/g。
4.2 高效液相色谱法日前,鲜有见运用高效液相色谱法测定山药多糖的报道，大部分报道都是以高效液相色谱来进行的实验。
千刚在建立山药中多糖的含量测定时,选用c58IOOA色谱柱(150mm×4.60mm),以乙腈一磷酸盐缓冲液(70:30)为流动相,以葡萄糖为对照品,在波长210nm下检测,结果在0.5～1.5g/L内呈良好线性关系(R=0.9996),测得山药中总多糖的质量分数为16.42%,RSD为0.09%,结果良好,方法快速,准确,重复性好。
5 结论通过以上文献综述，不难发现：山药多糖为近年来研究热点,由于其特殊的药理保健作用必将会引起更广泛的关注,确立一种既简单又合适的分离提纯和含量测定方法将显得很必要。
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