乳胶增强透射比浊法和速率散射比浊法检测C—反应蛋白相关性分析
C反应蛋白的检测与临床应用进展
C反应蛋白的检测与临床应用进展C反应蛋白( CRP) 是人体急性时相蛋白( APP) 中最主要、最敏感的标志物之一。
在临床上常作为一种检测感染过程和自身免疫疾病的工具, 如病毒与细菌的鉴别诊断、疾病治疗监测、系统性红斑狼疮( SLE) 等。
近年来, 随着研究的不断深入和 CRP 检测手段的不断改善, 特别是运用高敏感方法测出的超敏C反应蛋白( hs CRP) 可作为冠状动脉疾病( CVD)的一种独立危险因素, 也可作为心血管疾病和动脉硬化的预测指标] , CRP已逐渐引起临床的重视。
现对 CRP 的生物化学特征、检测方法及临床应用等进行综述如下。
1 CRP 的生物化学特征1.CRP的发现 CRP是1930年由Tillett和Francis发现的肺炎患者血清中一种与肺炎球菌(现称肺炎链球菌)非特异性的菌体多糖成分C多糖(CPS)发生沉淀反应的物质。
CRP的来源与分布 CRP主要由肝细胞在白细胞介素6、白细胞介素1、肿瘤坏死因子刺激下合成, 炎性反应局部巨噬细胞也可少量产生。
正常合成率 1~ 10 mg/ d, 急性炎性反应时每天合成大于1 g。
CRP不能通过胎盘, 在体内分布甚广, 除血液外, 胸腔积液、腹水、心包液、关节液中均可测出。
2 常用检测方法目前, CPR 的检测方法一般分为定性和定量两类。
常用的检测方法有免疫扩散法, 乳胶凝集试验, 放射免疫法测定( RIA) 及酶联免疫吸附试验( ELISA) 等。
2. 1 ELISA 法该检测采用双抗夹心法, 将检测缓冲液和血液样本在检测瓶中进行混合, 荧光标记缓冲液中的抗CRP抗体和血液中的CRP抗原结合形成抗原抗体复合物, 当混合样品被放到检测板的样本上并且通过毛细血管作用扩散到硝化纤维基质的测试带上, 该复合物被测试带上的抗CRP抗体所捕获, 荧光抗体的信号强度反映了被捕获的CRP数量, 经过免疫荧光分析仪的检测, 能够反映出血中CRP的浓度。
两种检测血清高敏C反应蛋白方法的性能比较
（收稿日期：２００９－０７－２１） （本文编辑：储怡星）
信息。另外，随将来业务的开展，菌种数据库还可
以扩展需要，增加相应的功能，使系统能得到更广
（上接第６９５页） 三、讨论 临床常规测定ＣＲＰ的方法标本浓度一般为３—
２００
结果显著低于实际含量或无法测出的现象。而在速率散 射免疫比浊法中，为保证准确性和精确性，仪器设计有抗 原过量检测系统。提示应将待测标本进一步稀释，重新进 行检测。以获取全部抗原的真实浓度，本研究通过５倍稀 释标本，得到了较高浓度ｈｓ・ＣＲＰ的精确值。由此看来， 速率散射免疫比浊法在低值和高值测定中优于乳胶增强 透射免疫比浊法。 临床上如将ＣＲＰ用于急慢性感染、组织损伤、恶性肿 瘤、手术损伤等观察，则完全可用普通检测方法如乳胶凝 集试验、免疫沉淀法进行检测；如用于健康人心血管疾病 发生风险的非特异性炎症预测指标，则需采用更为精确、 敏感的乳胶增强透射免疫比浊法和速率散射免疫比浊 法，特别是其含量较低时，更能做到早期发现、预防和 诊治。 ｈｓ—ＣＲＰ测定方法简便，个体日间和生理变异较少，是 心血管事件一个较好的预测指标，美国已将ｈｓ—ＣＲＰ检测 作为每年健康体检的内容之一，其检测费用低廉而效果 明显，应在临床加以推广应用。 参考文献 ［１］杨溢．免疫比浊法测定血清ｃ一反应蛋白的评价［Ｊ］．四川
［２］ ［３］
陈晓玲．速率散射比浊法与胶乳凝集法检测血清ｃ反应蛋 白的评价［Ｊ］．上海医学检验杂志．２００２，１７（２）：１４１—１４５． 陶义训．现代医学检验仪器导论［Ｍ］．上海：上海科学技术 出版杜．２００２：８５－９７．
（收稿日期：２００９－０２．１７） （本文编辑：姜敏）
万方数据
１０ ｍｇ／Ｌ范围内测定ｈｓ・ＣＲＰ浓度的相关系数分别为
慢性呼吸系统疾病患者超敏C反应蛋白水平及其意义
菌荚膜 Ｃ多糖物 质反 应 的急 性期 反应 蛋 白 。既 往在 感 ’ 染、 组织坏死 、 方面应用较多 。随着检测技术 的不 断 肿瘤 提高 ， 尤其是采用 了更加灵敏的超敏 Ｃ 反应蛋 白（ ｓ Ｒ ） 一 ｈ — Ｐ 检 Ｃ 测技 术后 ， 发现其在 慢性 炎症性疾病 中也发 挥着非常重要 的
Ｈｉ ｈ・ｅ ｓｔｖ ｔ ｒ ａ ｔｖ ｒ ｔ ｉ ｎ ｔ ｅ ｐ ｔｅ ｓ ｇ ｓ ｎ ｉｉ ｉｙ Ｃ— ｅ ｃ ｉ ｅ ｐ ｏ ｅ ｎ ｉ ｈ ａ ｉｎｔ
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Ｃ 反 应蛋 白 （ — ａｔｅｐｏ ｉ Ｃ Ｐ） 一 种 能 与 肺 炎 球 一 Ｃｒ ｃｖ ｒｔｎ Ｒ 是 ｅ ｉ ｅ
表 １ 各 组 ｈ－ Ｐ检 测 结 果 【 ±ｓ ｓＣＲ ｉ ）
（ ｈ ｉｔ ｅｐｅ Ｓ ｏ ｉ ｌＨ ￣ ，ｎｕ ３ ０ ｌＣ ｉａ Ｔ ｅ ｒ ｏｌ’ Ｈ ｓ ｔ ， ｑ ｉＡ ｈ ｉ ０ ６ ，ｈｎ ） Ｆ ｓＰ ｐａ ｅ ２
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两种检测方法测定C反应蛋白的对比分析
两种检测方法测定C反应蛋白的对比分析发表时间：2015-07-06T11:26:19.993Z 来源：《医药前沿》2015年第5期供稿作者：刘雍吴玉双蔡怀英[导读] 金标法虽然有准确性较好、快速方便、用血量少等优点，但受标本和操作的影响因素非常大。
刘雍吴玉双蔡怀英（贵州省六盘水市水城县人民医院检验科贵州六盘水 553006）【摘要】目的：乳胶增强散射免疫比浊法和胶体金法检测C反应蛋白(CRP)的结果比较分析。
方法：分别采用雅培C8000型全自动生化分析仪与南京基蛋生物科技FiA8000免疫定量分析仪在5个浓度阶段检测水平的C反应蛋白标本结果。
结果：CRP浓度为3.0～80.0mg/L,对2种方法检测干扰10%,在可接受范围内。
乳糜微粒≤3000mg/dl时免疫定量分析仪不受影响(干扰10%)。
相关分析的结果显示两种方法5个浓度阶段检测结果的相关性良好(r=0.98,P=0.01)。
结论：乳胶增强散射免疫比浊法和胶体金法在线性范围内的精密度、抗干扰性、线性范围符合要求。
虽然系统间测定结果存在一定偏倚,但也符合临床检测要求。
【关键词】 C反应蛋白；乳胶增强散射免疫比浊法；比对试验【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2015）05-0144-02Two kinds of detection method was developed for the determination of CRP Liu Yong, Wu Yushuang, Cai Huaiying. Shuicheng county People's Hospital of Liupanshui, in Guizhou province, Liupanshui 553006, China【Abstract】Objective Latex enhanced scattering immune turbidimetric method and colloidal gold method detection of c-reactive protein (CRP) as a result of the comparative analysis. Methods With abbott C8000 type full automatic biochemical analyzer with nanjing egg biotechnology FiA8000 immune quantitative analyzer in five concentration phase detection levels of c-reactive protein specimen results. Results CRP concentration is 3.0 ~ 80.0 mg/L, the interference of two methods is 10%, within the acceptable range. Chyle particles 3000 mg/dl or less quantitative analyzer is not affected when immune interference (10%). Correlation analysis results show that the two methods of five phase concentration detection results of good correlation (r = 0.98, P0.01). Conclusions Latex enhanced scattering immune turbidimetric method and the precision of the colloidal gold method in linear range, anti-interference, linear range meets the requirements. Although the system have a certain bias between the determination results, but also meet the requirements of clinical testing.【Key words】C-reactive protein; Latex enhanced scattering Immune turbidimetry; The comparison testC反应蛋白(CRP)是一种炎症急性识相反应物，它是由肝细胞合成的一种急性反应蛋白，是内源性免疫反应蛋白五聚环蛋白家族成员[1]。
C反应蛋白在指导抗生素使用中的意义
C反应蛋白在指导抗生素使用中的意义C–反应蛋白是是人类重要的炎症急性期反应蛋白，是临床上最常用的炎症急性时相反应指标，作为预测细菌感染和指导抗生素使用具有重要意义。
一、抗生素的使用1. 抗生素的使用现状自青霉素被发现以来，人类就进人使用抗生素时代。
应用抗生素已成为治疗细菌感染首选药物，使多数细菌感染得到有效地抑制。
人们曾乐观地认为征服感染性疾病将成为可能，由于没有有效的鉴别细菌性感染和病毒性感染的方法，在使用抗生素的过程中出现抗生素不合理使用和滥用，细菌耐药同步出现和升高，且日渐突出，成为世界医疗中存在的大问题[1]。
世界卫生组织（WHO）通过对世界各地不同地区的监测指出,各国都存在一定程度的抗生素不合理应用，我国尤为严重。
医院术后应用抗生素和抗菌药物的处方数都明显高于欧美发达国家，抗生素率使用不当率高80%[2]。
抗生素应用混乱和滥用后果最明显的就是强耐药菌株的出现导致细菌耐药性快速增长、药源性疾病日渐增多,到最后出现“超级细菌”,导致无药可治。
因此，严格掌握抗生素的治疗指征及疗程显得非常重要。
2.抗生素使用管理2011年卫生部颁布的《抗菌药物临床应用管理办法》（以下简称《办法》）被称为“史上最严限止抗生素使用令”，其以安全性、有效性、细菌耐药情况和价格因素4个方面为基本原则,将抗菌药物分为非限制使用、限制使用与特殊使用三级管理。
其中明确规定了不同等级医生的开药权限。
严重违规使用抗菌药物的医生将被吊销执业证书。
根据《办法》规定，医生必须根据患者的症状、体征以及血常规、尿常规等实验结果，初步判定是细菌性感染的才能够使用抗菌性药物，而缺乏细菌感染的证据以及病毒性感染的病人就不能够使用抗菌性药物。
二、C反应蛋白在细菌性感染判断中的应用感染性疾病最常用的实验室依据是血常规，但WBC受很多因素影响，年龄、环境、生理状况、治疗干预等都可以使WBC发生改变，从而影响医生的正确判断[3]。
C 反应蛋白（C-reactive protein，CRP）是人类重要的急性期反应蛋白，循环中的 CRP 半衰期为19h。
PA54四通道特定蛋白分析仪
专科等 ）； 实验室、研究机构
PA54产品特点
采用最先进光电技术，运用定时散射比浊法原理，通过强大的计算系统 和多曲线多维定标，使检测灵敏度高，检测范围宽，准确度及重复性 好，
操作极简单，检测效率高：
1四个通道独立工作，互不干扰，可以同时测试同一个项目或多
当然也有一部分医院已经开始使用半自动当然也有一部分医院已经开始使用半自动或全自动特定蛋白分析仪一些门诊量较大的医或全自动特定蛋白分析仪一些门诊量较大的医院选择了全自动特定蛋白分析仪全自动特定蛋院选择了全自动特定蛋白分析仪全自动特定蛋白分析仪具有检测速度快所需人力少的特点白分析仪具有检测速度快所需人力少的特点对于门诊量较大的医院自然节省不少人力但是对于门诊量较大的医院自然节省不少人力但是基层医院的门诊量不大样本较少倘若盲目地基层医院的门诊量不大样本较少倘若盲目地选择全自动仪器必然造成浪费投入成本很高选择全自动仪器必然造成浪费投入成本很高使用成本也很高因此对于这样的医院理应选择使用成本也很高因此对于这样的医院理应选择半自动仪器
5、小旋风NycoCard Reader
全国总代：上海奥普公司 检测原理：金标法（层析法）
小旋风
金标法（固相免疫双抗体夹心法），检测范围窄， 准确性低，重复性差（达5％）
当然也有一部分医院已经开始使用半自动 或全自动特定蛋白分析仪，一些门诊量较大的医 院选择了全自动特定蛋白分析仪，全自动特定蛋 白分析仪具有检测速度快，所需人力少的特点， 对于门诊量较大的医院自然节省不少人力，但是 基层医院的门诊量不大、样本较少，倘若盲目地 选择全自动仪器，必然造成浪费，投入成本很高， 使用成本也很高，因此对于这样的医院理应选择 半自动仪器。我公司仪器属于POCT（床边诊断） 快速检测仪器，特别适合医院门诊检验科、急诊 科等。
C反应蛋白(CRP)测定试剂盒(乳胶增强免疫散射比浊法)产品技术要求mairui
1性能指标
1.1外观
a）试剂应为乳白色悬浊液，无异物和凝集物；
b）试剂盒应组分齐全，内外包装均应完整，标签清晰；
c）液体试剂无渗漏。
1.2净含量
试剂的净含量应不少于单瓶规格对应的单瓶净含量体积。
1.3检出限
不高于0.50mg/L。
1.4准确度
准确度应符合如下要求：
企业参考品测试：对具有溯源性的企业参考品进行检查，其测量结果的相对偏差
应不超过±10.0%。
1.5线性
试剂盒在（0.20～320.00）mg/L范围内：
a) 线性相关系数r应不小于0.990；
b）(0.20～10.00）mg/L范围内，线性绝对偏差应不大于±1.00mg/L；(10.00～100.00）mg/L范围内，线性相对偏差应不大于±15.0%；(100.00～320.00）mg/L 范围内，线性相对偏差应不大于±20.0%。
1.6重复性
选择2个不同浓度水平的样本，各重复测试10次，检测结果CV≤10%。
1.7批间差
用3 个CRP 批号试剂盒分别选择 2 个不同浓度水平的样本，则 3 个CRP 批号试剂盒之间的批间相对极差不大于 15%。
两种C反应蛋白检测方法在早期炎症诊断中的应用比较
Ｃ反应蛋白（ＣＲＰ）是由肝脏合成的一种急性时 相反应蛋白，为炎症反应生物标记物。在正常人血 清中其含量极微，但在感染、高脂血症、动脉硬化、急 性心梗、肿瘤等疾病早期就已经明显升高［１２］，因此， 快速、准确的检测 ＣＲＰ值，可为临床对感染的早期 预测和疗 效 观 察 提 供 更 加 有 效 的 依 据［３］。 本 实 验 将通过乳胶免疫比浊法和速率散射法两种 Ｃ反应 蛋白检测方法在早期炎症诊断中的比较分析，探讨 其临床应用价值。
３８８
泰 山 医 学 院 学 报
ＪＯＵＲＮＡＬＯＦＴＡＩＳＨＡＮＭＥＤＩＣＡＬＣＯＬＬＥＧＥ Ｖｏ蛋白检测方法在早期炎症诊断中的应用比较
李 真 吕海光 王环宇 李和楼 刘庆华
山东第一医科大学第二附属医院检验科，山东 泰安 ２７１０００
摘要：目的 比较两种 Ｃ反应蛋白检测方法在早期炎症诊断中的应用价值。方法 对 １７４例患者分别采用全血 乳胶免疫比浊法和血清速率散射法进行 Ｃ反应蛋白检测，并对检测结果采用 χ２检验和线性相关回归分析。结果 将 测试的 １７４例标本结果分为三组，分别为低值段（０～１０ｍｇ／Ｌ）、中值段（１１～９０ｍｇ／Ｌ）、高值段（＞９０ｍｇ／Ｌ）；低值段 （０～１０ｍｇ／Ｌ）乳胶免疫比浊法阳性率为 ５０６７％，速率散射法阳性率为 １３１６％，两种检测方法比较差异有统计学意 义；中值段（１１～９０ｍｇ／Ｌ）两种检测方法比较差异无统计学意义，且两组数值的相关系数 ｒ＝０９９０７，高度相关；高值 段（＞９０ｍｇ／Ｌ）对两种方法的结果进行相关性分析，ｒ＝０９３０５。结论 两种 Ｃ反应蛋白检测方法具有较好的相关性 和准确性，但全血乳胶免疫比浊法在炎症早期反应更加灵敏，在高值段线性更好，能为临床提供更加快速准确的检测 结果。
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乳胶增强透射比浊法和速率散射比浊法检测C—反应蛋白相关性分
析
目的乳胶透射免疫比浊法和速率散射免疫比浊法检测C-反应蛋白结果的相关性分析；方法随机收集239例住院患者，采用两种检测方法测定C-反应蛋白浓度，并比较其检测结果相关性；结果当C-反应蛋白浓度>20mg/L（r=0.944）时乳胶透射免疫比浊法和速率散射免疫比浊法相关性较C-反应蛋白浓度20mg/L）86例进行统计分析。
1.4统计方法计量资料用x±s表示，采用SPSS19.0对数据进行统计分析。
2结果
两种方法对不同浓度的CRP检测比较，由表1可见，在低、中值时，全血CRP与血浆CRP相关性不如高值相关性好，相关系数分别为r=0.786、0.822、0.944。
具有统计学意义，见表1。
表1可得：不同的方法检测CRP结果有一定的差异，需要早日完善其检测的标准化，当CRP低浓度表达时采用速率散射免疫比浊法检测更为敏感和准确，可认为两种检测方法测定CRP结果有差异。
3讨论
CRP是由肝脏细胞合成和分泌的非特异性炎症反应因子。
IL-6、IL-1、TNF-a 等能够调节其生成。
CRP的高低与急性冠脉综合征病情的严重程度存在一定的相关性，可作为监测病情、预测冠心病严重性的常规指标之一，对观察疗效、判断预后也具有重要意义[4]，同时，血浆CRP水平与青年脑梗死患者病情的发展、预后也密切相关，是青年脑梗死的危险因素，检测其含量可判断患者脑梗死的严重程度及预后[5]。
乳胶增强透射免疫比浊法基本原理是将抗体吸附于乳胶颗粒上，当抗原抗体结合时，乳胶随之发生凝集反应，形成不同大小的乳胶颗粒，从而阻断光线的透射，通过透射光线的减弱程度判断乳胶凝集的程度。
其具有快速、准确和简便的特点[6]。
速率散射免疫比浊法是以一定波长的光沿水平轴照射，当碰到免疫复合物后将可导致光线的散射，抗原抗体复合物的形成速率与光的散射强度成正比，还能动态测定抗原抗体结合反应效率。
在本研究中发现，当CRP浓度小于20mg/l时，乳胶增强透射免疫比浊法和速率散射免疫比浊法检测C-反应蛋白相关性低，P＜0.05，具有统计学意义，两种方法检测CRP结果具有显著差异。
当CRP浓度大于20mg/l时，二者检测方法相关系数为0.944，说明这两种检测方法的检测效率有所提高。
根据以往的文献报道及本实验室经验，我们认为当CRP低浓度表达时，乳胶增强透射免疫比
浊法由于抗原抗体结合较少，乳胶凝集物形成较小，对光线的阻断能力较弱，而速率散射免疫比浊法可以通过检测抗原抗体结合速率，而不依赖于凝集物的大小来评估CRP的浓度，这也与本实验中随着CRP浓度的升高，两种检测方法的相关系数增大相吻合，所以我们认为低浓度的CRP表达，速率散射免疫比浊法较乳胶增强透射免疫比浊法更敏感和准确。
目前，临床应用的测定CRP方法较多，但不同检测方法之间，不同测定仪之间存在着差异，这不利于临床对该指标的有效应用。
此外，实验室诊断某个体是否处于健康状态，其判断依据是指标的临界值。
然而，不同的检测体系中参考值的范围不一致，这也会给临床诊断造成困难。
因此，CRP测定方法标准化问题有待于医学工作者进一步的研究和探讨。
美国CAP室间质评也将引入hs-CRP 作为一个独立的分析调查项目，美国CDC目前正在进行hs-CRP免疫测定的标准化工作，WHO已有CRP免疫测定的国际参考标准85/506，IFCC/ BCR/ CAP 已有次级标准-血浆蛋白CRM 470（CRP是其中14种项目之一，美国Dade Behring 公司生产），这些都为国内外开展hs-CRP测定的标准化工作提供了条件。
参考文献：
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[3]陈晓玲，兰庆平.散射比浊法与乳胶凝集法检测血浆C-反应蛋白的评价[J].上海医学检验杂志，2002，17（3）：141-145.
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[5]朱海生，王振贤，段香芬，等.超敏C-反应蛋白与青年脑梗死患者关系的探讨[J].西部医学，2012，24（2）：87-89.
[6]袁斌，许荣.两种定标方法检测C-反应蛋白及快速C-反应蛋白检测结果的对比和评价[J].检验医学，2005，20（4）：382-384.编辑/申磊。