茶皂素提取和纯化工艺研究

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茶皂素的分离纯化方法的初步研究

茶皂素的分离纯化方法的初步研究

茶皂素的分离纯化方法的初步研究茶皂素是一种具有抗氧化、抗菌、抗病毒和抗肿瘤等多种生物活性的天然产物,广泛存在于茶叶、蔬菜、水果等植物中。

在茶叶中,茶皂素是一种主要的次生代谢产物,对茶叶的品质和药用价值具有重要影响。

研究茶皂素的分离纯化方法对于深入了解其生物活性和开发利用具有重要意义。

目前,关于茶皂素的分离纯化方法主要包括溶剂萃取、柱色谱分离、薄层层析、高速离心、超滤等技术。

下面将对这些方法进行初步研究。

1. 溶剂萃取溶剂萃取是最常用的茶皂素提取方法之一。

主要步骤包括茶叶的粉碎、溶剂提取和溶剂回收等。

常用的溶剂有乙醇、甲醇、丙酮等。

溶剂萃取的优点是简单、操作方便,但存在溶剂残留和由于溶剂对溶剂的明显溶解度差异导致的茶皂素混合提取等问题。

2. 柱色谱分离柱色谱是茶皂素分离纯化的常用方法之一。

主要原理是利用茶皂素在固定相和流动相之间的分配系数差异进行分离。

通过改变固定相的种类和组成、流动相的流速和温度等参数,可以实现茶皂素的选择性分离。

常用的柱色谱包括硅胶柱色谱、偏极柱色谱、脱色树脂柱色谱等。

柱色谱分离的优点是分离效果好、分离度高,但存在操作复杂、耗时和成本高等问题。

3. 薄层层析薄层层析是一种简便、快速的分离方法。

主要原理是通过茶皂素在薄层板上的吸附、分配和迁移差异实现分离。

常用的薄层层析剂有硅胶、氮化铝、纸等。

通过改变薄层板的固定相种类、移动相的组成等,可以实现茶皂素的快速分离。

薄层层析的优点是操作简单、快速,但分离度较差,不适用于分离复杂样品。

4. 高速离心高速离心是一种将茶叶中的茶皂素与其他杂质通过离心力的差异进行分离的方法。

主要原理是茶皂素在离心力作用下沉降到底部,而杂质则悬浮在上层。

通过调节离心时间和离心速度,可以实现茶皂素的快速分离。

高速离心的优点是分离速度快、操作简单,但分离度较低,不适用于分离复杂样品。

5. 超滤超滤是一种利用膜的分子筛选性和泵送压力差异进行分离的方法。

主要原理是将茶胶素通过超滤膜的孔隙进行分离,茶皂素和其他分子则被滞留在膜上。

茶皂素的分离纯化方法的初步研究

茶皂素的分离纯化方法的初步研究

茶皂素的分离纯化方法的初步研究茶皂素是一种萃取自茶叶中的次生代谢产物,具有抗氧化、抗菌、抗癌等多种生物活性。

为了进一步研究和应用茶皂素,需要进行其分离纯化,以获得高纯度的茶皂素。

本文通过初步研究,探讨了茶皂素的分离纯化方法。

提取茶皂素。

茶皂素存在于茶叶的内部细胞中,需进行细胞破碎以释放茶皂素。

常用的提取方法有水提法、有机溶剂提法等。

水提法是将茶叶粉末与水进行浸泡和搅拌,然后经过过滤、浓缩等步骤,获得茶皂素提取液。

有机溶剂提法则是用有机溶剂如乙酸乙酯、正丁醇等与茶叶粉末进行浸泡,利用溶剂萃取茶皂素。

通过比较两种方法的提取效果和茶皂素含量,选择较为适宜的提取方法。

茶皂素的分离纯化。

采用分离纯化方法将茶皂素与杂质分离开来,得到相对纯净的茶皂素。

常用的分离纯化方法有凝胶过滤、固相萃取、柱层析、高效液相色谱等。

凝胶过滤是将茶皂素提取液经过凝胶进行过滤分离,根据茶皂素的摩尔质量和孔径进行分离。

固相萃取是利用固相材料吸附茶皂素和杂质的不同性质进行分离。

柱层析是将茶皂素提取液经过柱层析进行分离,根据茶皂素的亲水性和疏水性进行分离。

高效液相色谱则是利用流动相和固定相的不同性质对茶皂素进行分离。

通过比较各种分离纯化方法的分离效果和茶皂素纯度,选择最适合的方法。

茶皂素的结晶。

当茶皂素的纯度达到一定程度后,可以采用结晶方法将茶皂素从溶液中结晶出来,以进一步提高其纯度和净度。

结晶方法包括冷结晶、溶剂结晶、浓度结晶等。

冷结晶是将茶皂素溶液放置在低温环境中,利用溶质溶解度的差异进行结晶分离。

溶剂结晶是向茶皂素溶液中加入适当的溶剂,调整溶液的浓度和温度,使茶皂素结晶出来。

浓度结晶是将茶皂素溶液进行浓缩,当浓缩度超过茶皂素的溶解度时,茶皂素会结晶出来。

通过比较各种结晶方法的结晶效果和茶皂素纯度,选择最适合的方法。

茶皂素的分离纯化方法包括提取、分离纯化和结晶三个步骤。

通过合理选择提取方法、优化分离纯化方法和适量选取结晶方法,可以获得高纯度的茶皂素。

茶皂素的分离纯化方法的初步研究

茶皂素的分离纯化方法的初步研究

茶皂素的分离纯化方法的初步研究茶皂素,即茶多酚皂素,是一种天然存在于茶叶中的多聚类黄酮类化合物。

茶皂素具有多种生理活性,如抗氧化、抗癌、抗病毒、降血脂等,因而在医药、保健食品等领域有广泛的开发和应用前景。

为了实现对茶皂素的客观研究和应用,需要进行有效的分离纯化。

目前,已有多种茶皂素的分离纯化方法,如萃取、溶剂分配、高速离心、柱层析等。

本文就对茶皂素的分离纯化方法进行初步研究,以期为茶皂素的研究提供参考。

1. 萃取法萃取法是茶皂素分离纯化的常用方法,其主要原理是利用茶皂素的极性和溶解度与萃取溶剂的差异,将茶皂素从茶叶中分离出来。

常用的萃取溶剂有水、乙醇、甲醇等。

但萃取法的效果受多种因素影响,如萃取时间、温度、茶叶研磨程度等,需根据具体情况进行优化。

2. 溶剂分配法溶剂分配法是一种基于茶皂素的极性不同于其他杂质的原理进行分离的方法。

将茶皂素和其他杂质按比例混合后,添加适量的溶剂,使两者在溶剂中的溶解度不同,然后再进行分离。

常用的溶剂有乙酸乙酯、正丁醇等。

3. 高速离心法高速离心法是利用离心力将茶皂素与其他杂质分离的方法。

将茶皂素与茶叶浸泡后,用适当的离心力离心,使茶皂素沉淀于离心管底部,然后将上层液体倒掉,最后通过洗涤和干燥等步骤得到纯化的茶皂素。

4. 柱层析法柱层析法是一种基于茶皂素的极性和分子大小差异进行分离的方法。

将样品溶解于适当的溶剂中,然后通过硅胶柱、Sephadex柱等进行分离纯化。

其中,硅胶柱适用于茶皂素的初步分离,而Sephadex柱适用于高效纯化。

总之,茶皂素的分离纯化方法各有特点,需根据具体情况选择。

此外,分离纯化过程中需注意环境卫生和操作规范,以确保实验结果准确可靠。

茶皂素的提取纯化及在洗发液中的应用研究

茶皂素的提取纯化及在洗发液中的应用研究

茶皂素的提取纯化及在洗发液中的应用研究茶皂素是从茶叶中提取出的一种天然植物提取物,具有较强的抗氧化、抗菌和清洁功效,在化妆品和洗发液等产品中广泛应用。

为了提高茶皂素的纯度和提取效果,需要进行提取、纯化和应用研究。

茶皂素的提取方法有很多种,常见的有水提法、有机溶剂提法和超临界流体提法等。

其中,水提法是最常用的一种方法,流程主要包括茶叶研磨、浸泡、过滤和浓缩等步骤。

水提法简单易行,不会引起环境污染,且提取效果较好。

有机溶剂提法则是将茶叶与有机溶剂(如醇类溶剂)进行浸提,再通过蒸馏或冷冻浓缩得到茶皂素。

超临界流体提法是将茶叶与超临界流体(如二氧化碳)进行接触和提取,提取效果较好,但设备和操作要求较高。

提取后的茶皂素需要进行纯化。

常用的纯化方法有结晶法、直接冷冻脱水法和吸附剂法等。

结晶法通过调节物料的溶解度、温度和浓度等条件,使茶皂素溶解和结晶,从而得到纯化的产物。

直接冷冻脱水法通过将茶皂素溶液冷冻并脱水,使茶皂素和其他杂质分离。

吸附剂法是通过将茶皂素溶液通过吸附剂柱,去除杂质,再通过洗脱得到纯化的产物。

茶皂素在洗发液中的应用主要体现在其清洁和抗菌功效上。

茶皂素可有效去除头皮上的污垢和油脂,保持头皮清洁,并具有一定的去屑效果。

茶皂素还具有抗菌作用,可以有效抑制头皮上的细菌和真菌生长,减少头皮屑和痒症。

此外,茶皂素还具有抗氧化作用,可以保护头皮和头发免受自由基和其他有害物质的损伤,保持头发的健康。

在洗发液中添加茶皂素需要考虑其稳定性和溶解度。

茶皂素在水中的溶解度较低,因此常需要使用一些增溶剂或乳化剂来增加其溶解度。

同时,茶皂素易受光照和温度的影响,容易分解和氧化,因此需要进行适当的添加剂保护和包装。

此外,茶皂素的添加量也需要根据产品的需求和使用效果进行调整。

综上所述,茶皂素的提取、纯化和应用研究是一项具有重要意义的工作。

通过选择适当的提取方法和纯化方法,可以得到高纯度的茶皂素产品。

同时,在洗发液等化妆品产品中的应用研究,有助于发挥茶皂素的抗氧化、抗菌和清洁功效,提高产品的质量和效果。

油茶籽粕中茶皂素提取纯化工艺的研究

油茶籽粕中茶皂素提取纯化工艺的研究

油茶籽粕中茶皂素提取纯化工艺的研究我国油茶籽资源丰富,对茶皂素进行开发、应用前景广阔,经济效益显著。

本论文以油茶籽粕为原料,对茶皂素测定方法、提取工艺、纯化工艺及脱色工艺进行了研究,并对所得产品结构进行了初步鉴定。

优化了生产工艺,降低了生产成本,提高了茶皂素的得率,产品颜色浅、纯度高,工艺简单可靠易于工业化。

主要研究内容及结果如下:1.香草醛-浓硫酸比色法测定茶皂素含量的研究。

确定最佳条件为:测定波长550nm,显色剂为1.0mL8%(w/v)香草醛无水乙醇溶液和8.0mL77%(v/v)浓硫酸水溶液,60℃水浴25min,相对标准偏差为1.29%,平均加标回收率为99.28%。

本法相对简便、重复性较好且灵敏度高,适于工业定量分析茶皂素。

2.茶皂素提取工艺的研究。

比较三种提取剂的效果,确定以含水甲醇为提取剂。

考察甲醇浓度、浸提液固比、时间、pH和温度对茶皂素浸提得率的影响。

选用L16(45)正交表,得出最佳提取条件为:甲醇浓度70%、液固比7(mL/g)、浸提时间2h、pH10.5、温度55℃,在此条件下得率为14.45%。

3.茶皂素纯化工艺的研究。

结合絮凝法和化学沉淀法,形成了一套新的纯化方法——絮凝-沉淀法。

以壳聚糖为絮凝剂,通过一系列单因素实验和L9(34)正交实验,得出50.0mL 茶皂素水溶液(2.0g/100mL)最佳絮凝条件为:絮凝剂加入量5.0mL、助剂加入量5.0mL、絮凝时间4h,杂质去除率达34.33%,茶皂素损失率为5.64%。

絮凝后,比较几种常用沉淀剂的效果,确定以CaO为沉淀剂、NH4HCO3为转化剂,通过一系列单因素实验,得出沉淀转化法的最佳工艺为:在絮凝后茶皂素水溶液中,加入1.4倍茶皂素量的CaO,搅拌2h后静置2h,过滤后,用少量水将滤饼移入烧杯中,加入NH4HCO3,用量为CaO的2.0倍,恒温在60℃下搅拌1h,沉淀转化率为74.15%,过滤后将滤液浓缩得粉状茶皂素,纯度为82.75%。

茶皂素的分离纯化方法的初步研究

茶皂素的分离纯化方法的初步研究

茶皂素的分离纯化方法的初步研究【摘要】茶皂素是茶叶中一种重要的生物活性成分,具有多种药用价值。

本文旨在探讨茶皂素的分离纯化方法,以期为其进一步研究及应用提供参考。

首先介绍了萃取茶叶中的茶皂素的方法,然后详细讨论了初步分离纯化方法,包括柱层析技术、色谱技术和质谱技术的应用。

通过这些方法的探讨,我们取得了一些初步的研究成果,为未来的研究工作提供了基础。

我们希望通过这些研究,深入了解茶皂素的性质和功能,为其在医药和保健品领域的应用开拓新的可能性。

这项研究具有重要的理论和实践意义,对促进茶叶产业的发展和拓展茶叶的应用领域都具有积极的推动作用。

【关键词】茶皂素、分离、纯化、萃取、柱层析、色谱技术、质谱技术、研究成果、展望、意义1. 引言1.1 研究背景茶皂素是茶叶中一种重要的生物活性成分,具有抗氧化、抗炎和抗菌等多种生物活性。

随着人们对健康的关注日益增强,茶皂素在保健食品和药物领域的应用受到广泛关注。

茶叶中的茶皂素存在于复杂的混合物中,其提取和分离纯化具有一定的难度。

寻求快速、高效的分离纯化方法成为当前研究的重点之一。

过去,常用的茶皂素提取方法主要包括溶剂萃取和超声波提取等,但存在提取效率低、操作繁琐等问题。

开发一种简便、高效的茶皂素提取方法至关重要。

为了对茶皂素进行有效的分离纯化,柱层析、色谱和质谱等分析技术也被广泛应用。

这些技术的综合应用能够提高茶皂素的分离效率,帮助研究人员更好地解析其结构和活性。

在这样的背景下,对茶皂素的分离纯化方法进行初步研究具有积极的意义。

本研究旨在探索更高效、更简便的茶皂素分离纯化方法,为进一步揭示茶皂素的生物活性和应用提供有力支持。

1.2 研究目的研究目的是为了探究茶皂素的分离纯化方法,以提高茶叶中茶皂素的纯度和提取效率。

茶皂素作为茶叶中一种重要的生物活性成分,具有多种生物活性,包括抗氧化、抗菌、抗炎等作用,对人体健康具有重要的保护作用。

茶叶中的其他杂质和成分会影响茶皂素的提取和纯化,因此寻找一种高效、简便的分离纯化方法对茶皂素研究具有重要意义。

茶皂素的分离纯化方法的初步研究

茶皂素的分离纯化方法的初步研究

茶皂素的分离纯化方法的初步研究茶皂素是一种天然的生物活性物质,具有抗氧化、抗菌和抗炎的作用。

它被广泛应用于医药、保健品和化妆品等领域,因此对茶皂素的提取纯化方法进行研究具有重要意义。

本文将对茶皂素的分离纯化方法进行初步研究,以期能够为茶皂素的产业化生产提供参考。

茶叶中的茶皂素主要存在于茶叶的表面和内部的表皮细胞中,因此要想提取茶皂素,首先需要将茶叶中的茶皂素与其他组分进行有效分离。

目前,常用的茶叶提取方法包括水提取、有机溶剂提取和超临界流体提取。

本文将采用有机溶剂提取的方法进行茶叶中茶皂素的提取。

有机溶剂提取是通过有机溶剂与茶叶中的茶皂素进行物理或化学作用,使茶皂素从茶叶中转移到有机溶剂中,从而实现茶皂素的提取。

在选择有机溶剂的时候,需要考虑其对环境的影响和提取效果。

一般来说,乙醇是一种常用的有机溶剂,它既具有较高的提取效果,又对环境影响较小,因此本文将选择乙醇作为有机溶剂进行茶叶的提取。

在实验中,首先将茶叶粉末与乙醇进行浸泡,使茶叶中的茶皂素充分溶解到乙醇中。

然后通过离心等手段,将茶叶渣和乙醇进行分离,得到含有茶皂素的乙醇提取液。

接下来,通过蒸发乙醇,得到茶皂素的粗提取物。

得到茶皂素的粗提取物后,接下来就需要对其进行纯化。

目前,茶皂素的纯化方法主要包括硅胶柱层析法、凝胶层析法和高效液相色谱法。

本文将采用硅胶柱层析法对茶皂素的粗提取物进行纯化。

硅胶柱层析法是一种通过硅胶对混合物进行分离的方法,其原理是通过混合物中各成分与硅胶的亲和性差异来实现分离。

在进行硅胶柱层析时,首先将硅胶填充到玻璃柱中,并采用合适的流动相来实现混合物中各成分的分离。

通过不同成分对硅胶的亲和性差异,从而实现对目标物质的纯化。

通过上述实验方法,我们将得到纯化后的茶皂素样品。

接下来,可以通过质谱、红外光谱等手段对其进行分析,确认其纯度和结构。

通过对茶皂素的分离纯化方法的初步研究,我们可以为茶皂素的产业化生产提供参考,为其在医药、保健品和化妆品等领域的应用打下基础。

茶皂素的分离纯化方法的初步研究

茶皂素的分离纯化方法的初步研究

茶皂素的分离纯化方法的初步研究茶皂素是从茶叶中分离出来的一种具有抗氧化和抗肿瘤活性的化合物,具有广泛的研究价值。

本文主要介绍了茶皂素的分离纯化方法的初步研究。

茶皂素的分离纯化方法有很多种,常见的包括溶剂萃取、薄层色谱、柱层析、高效液相色谱、气相色谱等。

本次研究中选择了柱层析法作为初步的分离纯化方法。

选择适合的柱层析填料。

在本次研究中,选择了聚苯乙烯高分子树脂作为填料。

这种填料具有很高的亲和力和吸附能力,对茶皂素有良好的吸附效果。

然后,制备茶叶提取物。

将新鲜的茶叶经过粉碎后加入适量的溶剂,如乙醇或甲醇,进行浸泡提取。

提取物中包含了茶皂素以及其他的化合物。

接下来,进样进行柱层析。

将提取物溶解于适量的溶剂中,然后利用注射器将样品注入柱层析柱中。

通过柱层析,不同的化合物在填料中有不同的相互作用力,因此会在填料中以不同的速度迁移。

通过调整柱层析的条件,如填料的粒径、填料的长度、样品溶剂的组成等,可以使得茶皂素与其他化合物分离出来。

收集茶皂素的纯化产物。

经过柱层析后,茶皂素会逐渐从柱子上迁移到柱底。

根据不同的组分在柱子中的保留时间进行分离,可以将茶皂素集中到某一小管中,完成分离纯化的过程。

收集的纯化产物可以进行进一步的结构鉴定和活性测试。

除了柱层析法,我们还可以使用其他分离方法进行初步的分离纯化。

茶皂素可以通过溶剂萃取和薄层色谱等方法进行初步的分离,然后再进行进一步的纯化。

茶皂素的分离纯化方法研究需要选择合适的柱层析填料,制备茶叶提取物,进行柱层析分离,并收集纯化产物。

这是茶皂素初步分离纯化的一种研究方法,需要进一步优化和改进。

希望本次研究可以为茶皂素的分离纯化提供一定的参考。

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Ke y wor :t a s po i ds e a n n;e ta to x r cin;pu i c to rf ai n i
油茶 , 茶科 山茶 , 属木本 油料植 物果实 。油茶 是贵州省林 业 发展的特色优势资源 , 从贵州省林 业厅 了解到 , 预计到 2 2 0 0年 , 贵州全省油茶种植 面积将从 目前 的 10万 亩发展 到 40万亩 , 0 0 平 均亩产茶油 3 g以上 , 0k 全省实 现年产 茶油 1 吨和年总 产值 2万 10亿元 以上 …。茶皂素 , 0 又称茶皂苷 、 茶皂甙 , 由各类 油茶籽 是 榨油后的茶饼 中提取出来的含有 结构糖与结构 酸的五环三 萜类 化合 物 J茶 皂素 作为 一种优 良的非离 子表 面活性 剂 , , 具有 发

t n a d p r c t n t c n l ge f e a o i t r s n e e i t d c d a d c nr se u d e p o u t n p a t e i n u f ai h oo iso a s p n n a e e t r n r u e n o ta td t g i et r d c i r c i . o i i o e t p w o o h o c
可得到粉末状 茶皂 素 。热 水水 提法 是 最早 开发 提取 茶 皂 素方 法, 该方法工艺简单 、 成本低 、 投资少 、 见效快 。但长 时间热水 浸泡使得茶皂素水解 变质 , 大量 杂质溶 解 , 会使 淀粉 糊化 、 还 蛋 白质胶体化 , 造成 杂质分离 困难 , 因此 , 提取 的茶 皂素 收率 和纯 度低 、 颜色深 、 水溶 性 杂质 多质 量差 , 品多 为浆 料 , 化 较 困 产 纯 难, 同时在工业生产 中生产水处理量大 ,常规分离 困难 , 品纯 产 度低 , 能耗大 , 渣处理困难 , 因此从 目前来 看 , 然没有 实现水提 依 法生产茶皂素产 品的工业 化。该法 生产茶皂 素 只能用 作农 药 、 沥青乳化剂 , 不能应用 于化 妆 品、 增溶 剂 、 胶粘 剂 、 发泡 剂 、 产 生 试剂等方面。
帮助农 民增收致富 , 具有 巨大 的社会效益和经济效益。 在茶皂素 的制备工 艺 中, 提取 和纯化 工艺是 其制 备工 艺核 心 , 是近年来该项工艺 的研究热点 , 也 本文通过 查阅大量 国 内外 相关资料 , 介绍 了 目前茶皂素 的提取 和纯化工艺 , 并进行 了一定 对 比, 以对 生产 实践进行指导 。
文献标 识码 : A
文章编 号 :01 97 (020 0 1 — 3 10 — 67 21)4— 04 0
Th s a c n he Ex r c in a e Re e r h o t ta to nd Purfc to c n l g fTe a o i 。 i a i n Te h o o y o a S p n n i
泡、 增溶 、 润湿 、 乳化 、 分散 、 去污 、 涤等用途 , 洗 它还具 有杀菌 、 杀 虫、 炎、 痛、 消 镇 消肿 等生 理 活性 , 在化 工 、 医药、 药 、 械 、 农 机 建 筑、 化妆 品等领域有广泛 的用途 , 经济价值 较高 。因此从 废弃 的茶籽饼 中提取茶皂素具有广阔 的前景 。不仅 充分利用 贵州丰 富的油茶资源 , 长其产 业链 , 延 而且 能带动 贵州 山区经 济发展 ,
( 州大学化 学与化 工 学院 ,贵 g 贵 阳 502 ) 贵 . J 1 505
摘 要 : 以贵州省优势资源油茶利用后产生的油茶籽和废弃茶籽饼为主要原料, 从中提取表面活性剂茶皂素, 介绍了目 前茶皂
素的提取 和纯化工 艺 , 并进行了一定对比 , 以对生产实践进行 指导 。
关键 词 : 茶皂素; 提取; 纯化 中 图分类 号 :Q4 . T 659
第4 0卷第 4期
21 0 2年 2月
广



V 14 . o . 0 No 4
Fe u r 2 2 br ay. 01
Gu n z o h mia n u t a g h u C e c lI d s y r
茶 皂 素 提 取 和 纯化 工艺研 究 水
张 龙 ,刘 彤
1 2 醇提 法 .
醇提法与水提法基本 相似 , 由于杂质 成分 在醇类 溶 剂 中微 量溶解 , 醇类 溶剂 沸点 低 , 因而工 艺 相对 简单 , 品纯 度较 高 。 产 醇类溶剂主要是 甲醇 、 乙醇 、 丁醇这 3种工 业上 容易 得到 的醇 。
a v n a e u e o r e n Gu z o r v n e,t e s ra e a t e a e to e a n n wa xr ce o t e d a tg o sr s u c s i ih u P o i c h u fc c i g n fta s po i s e ta td f m h m.Th x r c v r e e ta -
ZHANG ,L U I
( c ol f h m sya dC e cl n ier g uzo n esy G i o uy n 50 5 hn ) S h o o C e ir n hmi gnei ,G i uU i ri , u h uG i g 0 2 ,C ia t aE n h v t z a 5 Abta t C m lase s n ase ae stem i w m t a hc ee u k df m o a e i ta w s s c : a el d dt dck sa a r a i s i w r n e o icm la h t a r i e a e e h na r lw h j r l l
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